30 listopada 2018
Tutaj opisujemy budowę i wykorzystanie tunelu aerodynamicznego do testów behawioralnych z owadami za pośrednictwem zapachu. Konstrukcja tunelu aerodynamicznego ułatwia uwalnianie źródeł zapachów na kilka sposobów, z bodźcami wizualnymi lub bez. Eksperymenty w tunelu aerodynamicznym są ważnymi metodami identyfikacji behawioralnie aktywnych lotnych substancji chemicznych.
Metoda ta może odpowiedzieć na kluczowe pytania z zakresu ekologii chemicznej, takie jak identyfikacja składników aktywnych behawioralnie. Główną zaletą tej techniki jest to, że możemy uwalniać zapachy na wiele różnych sposobów i możemy monitorować cały repertuar behawioralny owada. Przygotuj szklane rurki z gazy za pomocą gumki.
Oddziel 10 owadów do przygotowanych szklanych probówek, a pozostały koniec przykryj plastikowymi zatrzaskami. Pozwól owadom zaaklimatyzować się do temperatury, warunków oświetleniowych i wilgotności w pomieszczeniu tunelu aerodynamicznego przez co najmniej dwie godziny. Tutaj demonstrowany jest protokół opryskiwacza w celu przygotowania źródeł zapachów.
Napełnij gazoszczelną strzykawkę o pojemności jednego mililitra syntetyczną mieszanką zapachów i włóż strzykawkę do pompy strzykawkowej. Podłączyć końcówkę strzykawki do rurki fluorowanego etylenu i propylenu za pomocą adapterów rurek. Teraz uruchom pompę strzykawkową, a następnie szerokopasmowy generator ultradźwiękowy.
Uwolnienie aerozolu z rozpylacza można potwierdzić za pomocą światła punktu A znajdującego się poniżej punktu uwolnienia. Umieść szklaną rurkę z owadami na uchwycie 180 centymetrów pod wiatr od źródła wizualnego zapachu i 30 centymetrów od ziemi. Zakończony koniec powinien być skierowany pod wiatr.
Aby uruchomić protokół, otwórz nasadkę i uruchom stoper. Obserwuj schemat lotu i zwróć szczególną uwagę na charakterystykę lotu i orientację pod wiatr. Pokazany tutaj jest zorientowany lot bez lądowania.
Lot zorientowany z lądowaniem jest pokazany tutaj, na naturalnym źródle zapachu, które jest zawarte jako kontrola. Można tu zobaczyć zbliżenie na start, a także zbliżenie na lądowanie na naturalnym źródle zapachu. Oceń osiągi lotu zgodnie z predefiniowanymi kategoriami zachowań, takimi jak start, zorientowany lot na krótkim dystansie, zorientowany lot na dłuższy dystans i lądowanie.
Zbierz owady lądujące na ścianach tunelu aerodynamicznego, poza pióropuszem zapachu, i umieść je z powrotem na uchwycie. Do wszystkich czynności związanych z czyszczeniem należy używać osobnej strzykawki przeznaczonej do czystego etanolu. Uruchom opryskiwacz z 96% etanolem na co najmniej 10 minut między zabiegami, aby wyczyścić wnętrze rurek i dyszy.
Po użyciu wyczyść strzykawki i końcówkę dyszy 96% etanolem. Po zakończeniu umyj wszystkie metalowe i szklane okucia etanolem i wodą i pozostaw do wyschnięcia. Podgrzej wszystkie metalowe i szklane okucia do 300 stopni Celsjusza przez sześć godzin, aby usunąć wszelkie zanieczyszczenia.
Pokazano tutaj wizualnie sterowane reakcje zapachowe much muchowych. Badano szczegóły zachowania podczas lotu z bodźcami wizualnymi i bez nich. Stwierdzono znaczący wpływ wskazówek wizualnych na reakcję lądowania, ale nie na inne kroki behawioralne.
Przedstawiono tutaj porównanie reakcji grochowej na lądowanie roślin grochu i odpowiadających im lotnych kolekcji. Podobne lądowania odnotowano w kierunku obu typów wskazówek. Syntetyczna mieszanka substancji lotnych z kwiatów grochu skutkowała nieco niższymi lądowaniami w porównaniu z naturalnymi lotnymi kwiatami.
Pokazano wpływ lotnych teł roślinnych na reakcję owocowej jabłoni na mieszanki syntetyczne. Dozowniki zapachów ze złożoną mieszanką i prostą mieszanką dawały podobne przyciąganie pod wiatr, z czystym tłem. Jednak po osadzeniu na lotnym tle jabłek preferowały złożoną mieszankę.
Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać, że wzór lotu nie jest jednolity. Różni się znacznie w zależności od rzędów owadów. Muchy plujki są silnymi lotnikami i mają szersze ruchy rzutowe w porównaniu do ciem.
Tunel aerodynamiczny umożliwia wiele metod uwalniania zapachów do tunelu aerodynamicznego, w zależności od danego pytania. Możemy uwalniać się z dozowników zapachów, z autentycznych źródeł, mieszanek syntetycznych i kolekcji headspace. Ponadto określony zapach może zostać uwolniony na wierzchu zapachu tła, możemy używać różnych bodźców wizualnych i możemy wykonać testy biologiczne dwóch wyborów.
Eksperymenty w tunelu aerodynamicznym są ważnymi narzędziami w identyfikacji behawioralnie aktywnych związków i chemikaliów, zarówno w badaniach stosowanych, jak i w badaniach podstawowych. Dobrym przykładem jest to, że chcesz opracować narzędzia do zwalczania szkodników.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejszy artykuł opisuje konstrukcję i zastosowanie tunelu aerodynamicznego do testów behawioralnych owadów opartych na bodźcach zapachowych. Projekt umożliwia uwalnianie źródeł zapachu różnymi metodami, co ułatwia przeprowadzanie istotnych eksperymentów w dziedzinie ekologii chemicznej.
Analizy behawioralne oparte na tunelu aerodynamicznym z wykorzystaniem bodźców zapachowych zapewniają kontrolowaną, ilościową platformę do badania zachowań owadów sterowanych węchem, co bezpośrednio przekłada się na wczesną walidację celów w badaniach i rozwoju nad zwalczaniem szkodników. Podejście to umożliwia precyzyjny pomiar reakcji behawioralnych na potencjalne substancje lotne, zwiększając wiarygodność przewidywań w identyfikacji atraktantów lub repelentów. Metoda ta łączy odkrycia laboratoryjne z zastosowaniem translacyjnym, ułatwiając wdrażanie nowych narzędzi ekologii chemicznej z uwzględnieniem analizy ryzyka.
Niniejszy test w tunelu aerodynamicznym plasuje się w kontinuum od etapu odkrycia do badań przedklinicznych, umożliwiając wczesne testowanie hipotez, identyfikację związków wiodących oraz walidację translacyjną związków modyfikujących zachowanie owadów.