Pobieranie krwi przez nakłucie żyły podobojczykowej u myszy

Pobieranie krwi przez nakłucie żyły podobojczykowej u myszy. Pobieranie próbek krwi od myszy jest niezbędne w większości laboratoriów badawczych. Konwencjonalnym podejściem do pobierania krwi u myszy jest obcinanie ogona, gdy potrzebna jest próbka o wielkości mniejszej niż 100 mikrolitrów.

Jeśli jednak wymagane jest więcej niż 100 mikrolitrów krwi w nieterminalnym punkcie czasowym, najczęściej rozważanymi technikami są krwawienie zaoczodołowe, podżuchwowe lub podmyślne pobieranie krwi. W niektórych miejscach jako metody alternatywne przyjęto nacięcie żyły szyjnej lub cewnikowanie. Niemniej jednak powyższe metody są szkodliwe dla myszy.

Na podstawie naszych formalnych badań przedstawiamy tutaj nową, ekonomiczną i delikatną strategię pobierania krwi z żyły podobojczykowej u myszy. Przedstawiono i omówiono bezpieczeństwo i wykonalność oraz uzyskaną objętość krwi za pomocą tej techniki. Po znieczuleniu ogólnym połóż mysz w pozycji leżącej.

Oczyść przestrzeń podobojczykową 75% etanolem. Potwierdź obojczyk i dół nadmostkowy przed nakłuciem. Zidentyfikuj miejsce nakłucia w środku obojczyka.

Przesuń igły w górę i w górę w kierunku dołu nadmostkowego, tuż za obojczykiem. Po przesunięciu się o trzy do czterech milimetrów do przodu, utrzymuj podciśnienie w strzykawce i powoli cofnij igłę. Krew będzie spływać do strzykawki w trakcie odstawiania.

Po pobraniu krwi delikatnie uciskaj miejsce nakłucia przez jedną do dwóch minut, aby zatrzymać krwawienie. Przygotuj wymagane materiały, w tym 75% etanol, taśmę klejącą, środek do depilacji, tubki, strzykawkę o pojemności 1,0 mililitra połączoną z igłą, wagę elektroniczną, heparynę i sól fizjologiczną. Po zadowalającym znieczuleniu ogólnym umieść mysz na stole operacyjnym w pozycji leżącej, w odległości od dwóch do czterech centymetrów od krawędzi stołu, aby ułatwić nakłucie żyły.

Unieruchom kończyny w wygodnej pozycji, jak pokazano na rysunku 2. W całym zabiegu nie była potrzebna intubacja ani wentylacja mechaniczna. Nałóż środek do depilacji wokół przestrzeni podobojczykowej za pomocą bawełnianego wacika.

Trzy minuty później umyj środek do depilacji wilgotnym wacikiem, aby usunąć sierść i wszelkie widoczne zabrudzenia. Wysterylizuj przestrzeń podobojczykową 75% etanolem, a następnie osusz czystą gazą. Zidentyfikuj położenie kości obojczyka i dołu nadmostkowego jednym palcem.

Zlokalizuj miejsce nakłucia, blisko środka kości obojczyka i zaczep się o nie. Przyłóż lewy palec wskazujący bokiem do miejsca nakłucia, aby unieruchomić skórę i tkankę podskórną. Przesuń igłę w górę w ułożeniu czaszki w kierunku dołu nadmostkowego.

Gdy igła wejdzie w tkankę podskórną, palec serdeczny prawej ręki musi przesunąć się do tyłu, aby wytworzyć podciśnienie. Przesunąć strzykawkę do przodu o trzy do czterech milimetrów, ale przerwać, jeśli nie ma odpływu krwi do strzykawki. Następnie powoli odciągnij strzykawkę i utrzymuj w niej podciśnienie.

W większości przypadków krew dostanie się do strzykawki w trakcie cofania się. Gdy krew dostanie się do strzykawki, należy ją zamocować i utrzymywać podciśnienie, aż do uzyskania wymaganej objętości krwi zebranej w strzykawce. Po pobraniu krwi wyjmij igłę do nakłucia i lekko dociśnij miejsce nakłucia wacikiem przez jedną do dwóch minut, aby zatrzymać krwawienie, a następnie wyślij myszy z powrotem do klatek.

Przenieś próbkę krwi do naszej probówki z heparyną. Powtórzyliśmy tę procedurę na 10 myszach Quimi. Dziewięć zabiegów zakończyło się sukcesem po prawej stronie.

Jeden przypadek nie powiódł się w ciągu trzech prób po prawej stronie, a pobranie krwi powiodło się po lewej stronie. Przebieg czasowy wahał się od 35 do 126 sekund. Objętość pobierania krwi ustalono na około 200 mikrolitrów.

Pobranie krwi zakończyło się sukcesem po jednej lub czterech próbach. Pobieranie próbek krwi powiodło się za pierwszym razem u dwóch myszy i przy czterech próbach u jednej myszy, przy dwóch do trzech próbach u innych myszy. Wszystkie dane przedstawiono w tabeli 1.

Wszystkie zwierzęta przeżyły i wyzdrowiały w ciągu 30 minut po pobraniu krwi. Nie stwierdzono istotnej różnicy między płciami dla wszystkich obserwowanych parametrów. Podsumowując, nakłucie żyły podobojczykowej jest bezpieczną i skuteczną metodą pobierania krwi u myszy.

Oprócz przecięcia żyły ogonowej i pobrania krwi ze splotu zaoczodołowego, metoda ta jest wykonalna i odpowiednia do badań obserwacyjnych w kilku punktach czasowych u myszy.