Precyzyjne wdrożenie testów minimalnej dawki rumienia (MED) w celu oceny indywidualnej zmienności odpowiedzi zapalnej u ludzi

Badanie minimalnej dawki rumienia lub badanie MED to technika o długiej historii w dermatologicznej i klinicznej fototerapii. Służy przede wszystkim do określenia najmniejszej ilości promieniowania wymaganej do wytworzenia rumienia lub widocznego zaczerwienienia na powierzchni skóry. W tym konkretnym badaniu opracowaliśmy kilka nowych technik i procedur, które pozwalają na dostosowanie testów MED do nieco innego celu, którym jest precyzyjne określenie ilościowe zmienności aktywacji stanu zapalnego u ludzi.

Główną zaletą precyzyjnego dozowania i pomiaru w testach MED jest powtarzalność wyników, co z kolei otwiera nowe możliwości systematycznego badania innych czynników, które mogą być związane ze stanem zapalnym. Procedurę zademonstrują dwie doktorantki z mojego laboratorium, Holly Sullivan-Toole i Corinne Carlton. Rozpocznij od odprowadzenia uczestnika do sali testowej.

Wyjaśnij uczestnikowi procedurę testowania MED i potwierdź zrozumienie. Umieść mankiet pierwszy na niedominującym przedramieniu. Usuń tylko ochronny podkład z papieru woskowanego z bocznych, a nie środkowych części mankietu.

Po umieszczeniu mankietu pierwszego w miejscu zamierzonej ekspozycji, umieść punkty orientacyjne za pomocą trwałego markera, aby upewnić się, że mankiet drugi będzie znajdował się dokładnie w tym samym miejscu. Następnie zaznacz skórę w czterech punktach na zewnątrz fałd każdej z bocznych klapek pierwszego mankietu, w prawym górnym rogu, w lewym górnym rogu, w prawym dolnym rogu i w lewym dolnym rogu. Upewnij się, że ślady są wystarczająco ciemne, aby utrzymywały się przez 24 godziny, aby można je było użyć do umieszczenia mankietu trzy dokładnie w tym samym miejscu podczas wizyty kontrolnej.

Następnie użyj skalibrowanego spektrofotometru, aby zarejestrować odczyty w każdej z sześciu otwartych przysłon po kolei. Upewnij się, że spektrofotometr jest umieszczony pośrodku otworów mankietu, unikając w miarę możliwości pieprzyków, blizn lub innych skaz. Na koniec trwale zapisz wszystkie wartości SCI.

Aby zapewnić spójne odczyty w tym samym punkcie kalibracji, należy utrzymywać spektrofotometr w pozycji włączonej przez cały czas trwania procedury MED i nie wyłączać, dopóki odczyty po ekspozycji nie zostaną zakończone. Po zdjęciu mankietu pierwszego, umieść mankiet drugi w tym samym miejscu, korzystając ze znaków orientacyjnych narysowanych na skórze mankietu pierwszego. Załóż niezbędny sprzęt ochronny, w tym okulary odporne na promieniowanie UV, rękawy i rękawice, i upewnij się, że uczestnik robi to samo.

Przed uruchomieniem lampy należy ułożyć ramię uczestnika tak, aby promienie UV z lampy były prostopadłe do kąta mankietu drugiego na ramieniu uczestnika. Na krótko włącz lampę, aby wyregulować odległość do mankietu dwa, aż czujnik radiometru wskaże 270 mikrowatów na centymetr kwadratowy. Następnie umieść czujnik radiometru przodem do lampy UV, równolegle do powierzchni skóry i jak najbliżej miejsca mankietu drugiego.

Następnie zdejmij pierwszą osłonę przysłony przed aktywacją źródła UV. Usuń każde okienko w plastrze do testowania dawkowania zgodnie z wyświetlanym tutaj harmonogramem, który ilustruje oddzielne schematy dawkowania w zależności od typu skóry Fitzpatricka uczestnika. Aktywuj jednocześnie źródło UV i stoper i zdejmij każdą osłonę przysłony na mankiecie dwa zgodnie z prawidłowym schematem dawkowania, który jest oparty na typie skóry Fitzpatricka.

Następnie wyłącz lampę dokładnie o godzinie określonej w schemacie dawkowania. Nie wyłączaj stopera, ponieważ dodatkowa seria odczytów spektrofotometru powinna zostać zebrana dokładnie siedem minut po wyłączeniu lampy, jak opisano poniżej. Na koniec, po upływie dokładnie siedmiu minut od wyłączenia lampy, zapisz końcowe odczyty spektrofotometru z każdej apertury w mankiecie drugim.

Rozpocznij od kalibracji spektrofotometru w ramach przygotowań do wizyty kontrolnej, która odbędzie się 24 godziny później. Przygotuj mankiet trzeci, usuwając wszystkie osłony otworu i pozostawiając biały podkład z papieru woskowanego w środkowej części plastra. Zakładając mankiet numer trzy na ramieniu uczestnika, usuń biały podkład z papieru woskowanego z dwóch bocznych klapek plastra.

Użyj punktów orientacyjnych na przedramieniu uczestnika, aby umieścić mankiet numer trzy w tym samym miejscu, co poprzednie dwie naszywki. Na koniec wykonaj odczyt w każdej z sześciu otwartych przysłon po kolei. Wyniki te pokazują dokładną reakcję skóry na testy MED.

Poniżej znajdują się pełne dane dla pojedynczego reprezentatywnego podmiotu, z podziałem na okres oceny. Przed ekspozycją, siedem minut po ekspozycji i 24 godziny obserwacji. Każda przysłona, od drugiej do szóstej, otrzymuje o 25% więcej energii niż poprzednia.

Ponadto pokazano wszystkie 72 osoby, co wskazuje na różnice, które mogą wystąpić w różnych FST. Być może najważniejsze aspekty precyzyjnych testów MED dotyczą przestrzegania właściwego schematu dawkowania dla zidentyfikowanego typu skóry Fitzpatricka, a także konsekwentnego utrzymywania prawidłowej odległości między powierzchnią skóry a źródłem światła UV. Częścią naszej motywacji do opracowania tych technik jest ułatwienie przyszłych badań sprawdzających, w jaki sposób reakcje zapalne mogą odnosić się do dowolnej liczby potencjalnie interesujących zmiennych, takich jak czynniki psychologiczne, farmakologiczne lub związane ze zdrowiem.