Badanie odwrotnej przebudowy lewej komory przez odpasowanie aorty u gryzoni

Odpaskowywanie aorty jest użytecznym modelem eksperymentalnym do badania odwrotnej przebudowy mięśnia sercowego u gryzoni oraz do uzyskania nowych informacji na temat mechanizmów regresji kardiomiocytów i odzyskiwania funkcjonalnego ISO. Metal ten ułatwia ewolucję modelowania wstecznego krytyki in VIVO oraz pobieranie próbek biologicznych do badań in vitro i molekularnych w różnych punktach czasowych progresji choroby. Technika ta naśladuje postęp przebudowy mięśnia sercowego i odwrotnej przebudowy oraz umożliwia zbadanie mechanizmów niepełnej regeneracji mięśnia sercowego.

Protokół ten zapewnia wgląd w mechanizmy i całkowitą i niekompletną odwrotną przebudowę mięśnia sercowego w przewlekłych patologiach związanych z przeciążeniem ciśnienia, takich jak pretensja oka lub zwężenie zastawki aortalnej. Podłącz rurkę ustno-tchawiczą do respiratora, aby zainicjować wentylację mechaniczną i wyreguluj respirator na częstotliwość 160 oddechów na minutę i objętość oddechową 10 mililitrów na kilogram. Przed rozpoczęciem zabiegu opaski należy potwierdzić brak reakcji na odruch bólowy u sześcio- do sześciotygodniowej myszy C57 black six, ogolić się i nałożyć krem do depilacji od linii szyi do połowy klatki piersiowej myszy i nałożyć maść na oczy zwierzęcia.

Umieść sondę doodbytniczą i pulsoksymetr do monitorowania temperatury, natlenienia krwi i tętna. Umieść mysz w prawym bocznym odleżynie na poduszce grzewczej i przyklej kończyny do systemu retrakcji stabilizatora magnetycznego, aby utrzymać zwierzę we właściwej pozycji podczas zabiegu. Następnie należy zdezynfekować klatkę piersiową kolejnymi peelingami z 70% alkoholem i roztworem jodowidonu, a następnie otworzyć skórę, mięśnie i żebra w celu wykonania opaski do aorty.

Pod koniec zabiegu nanieść roztwór jodu powidonu na miejsce szwu skórnego i podawać analgezję dwa razy dziennie przez dwa do trzech dni, a następnie wstrzyknąć sterylną sól fizjologiczną dootrzewnową Lea, aby zapobiec odwodnieniu w przypadku znacznego krwawienia podczas operacji i umieścić zwierzę w inkubatorze z monitorowaniem do pełnego wyzdrowienia. Siedem tygodni po operacji prążkowania delikatnie wypreparuj tkanki, zrosty i zwłóknienie wokół aorty u połowy zwierząt z opaską, aż zwężenie stanie się widoczne. Ostrożnie wypreparuj aortę i oddziel szew od naczynia, a następnie użyj nożyczek, aby przeciąć szew.

Należy pamiętać, że przedłużona okluzja wody w kolorze indygo siekiery podczas wiązania lub demoniczna może prowadzić do obrzęku płuc, nadmiernej aktywacji szlaków zapalnych. Zamknij ścianę klatki piersiowej prostymi, przerywanymi lub ciągłymi sześcioma starymi szwami polipropylenowymi, używając minimalnej możliwej liczby szwów i zamknij skórę szewiem z jedwabiu polipropylenowego sześć O w ciągłym wzorze szwów, a następnie wykonaj pielęgnację pooperacyjną, jak pokazano. Co dwa do trzech tygodni po operacji usuwaj sierść od linii szyi do połowy klatki piersiowej, jak pokazano, i umieść zwierzę na poduszce grzewczej w pozycji leżącej, umieść elektrody EKG na odsłoniętej skórze i potwierdź obecność dobrego zapisu EKG i częstość akcji serca między 300 a 350 uderzeń na minutę.

Monitoruj temperaturę i nałóż żel echo na okolicę klatki piersiowej. Umieść myszy w pozycji leżącej grzbietowej lekko odwróconej w prawo i uruchom echokardiograf przy użyciu odpowiednich ustawień. Następnie umieść sondę ultradźwiękową nad klatką piersiową i oceń gradient ciśnienia w aorcie.

Rejestruj dwuwymiarowe obrazy aorty z przewodnikiem pokazujące obecność lub brak zwężenia aorty wstępującej, aby anatomicznie zobrazować skuteczność pasma i odprążkowania. Aby ocenić przerost, umieść sondę na krótkiej osi lewej komory na poziomie mięśni brodawkowatych i naciśnij przycisk śledzenia trybu, aby uwidocznić przednią ścianę lewej komory, średnicę lewej komory i tylną ścianę lewej komory w diacetylu i skurczu. Następnie oceń funkcję skurczową i oblicz frakcję wyrzutową i skrócenie ułamkowe zgodnie ze standardowymi protokołami.

Aby ocenić funkcję rozkurczową, należy określić szczyt dopplera po fali wczesnej i prędkości przepływu mitralnego liścia za pomocą nietypowego widoku czterokomorowego tuż nad płatkami mitralnymi i zarejestrować boczne pierścieniowe pierścieniowe mięśnia sercowego, wczesne rozkurczowe i szczytowe prędkości skurczowe za pomocą obrazowania dopplerowskiego po tkance i widoku czterech komór wierzchołkowych. Powodzenie zwężenia aorty można zweryfikować poprzez zwiększenie ciśnienia w lewej komorze i ciśnienie skurczowe. I przez Dopplerowskie prędkości przepływu aorty większe niż 2,5 metra na sekundę.

W porównaniu ze zwierzętami operowanymi pozorowanymi, przerost lewej komory wywołany zgięciem objawia się zwiększeniem masy lewej komory i upośledzoną funkcją rozkurczową, o czym świadczy wyższe ciśnienie napełniania i końcowe ciśnienie rozkurczowe lewej komory. Histologicznie siedmiotygodniowe pasmo aorty indukuje znaczny przerost i zwłóknienie kardiomiocytów. W moim przypadku poddane odbandowi, ponieważ skuteczne usunięcie zwężenia zastawki aortalnej można zweryfikować za pomocą prędkości echo Dopplera.

Ogólne odbandażowanie sprzyja znacznemu zmniejszeniu obciążenia następczego i przerostu lewej komory ocenianemu na podstawie masy lewej komory. Ponadto obserwuje się również normalizację funkcji rozkurczowej. Kiedy grasz ostrożnie, unikasz długotrwałej zmowy etycznej w celu zagwarantowania, że natlenienie krwi pozostaje powyżej 90%Ten minimalny model pozwala nam badać przebudowę mojego serca i odwrotną przebudowę w różnych punktach czasowych postępu choroby, a nawet obudzić najbardziej rozregulowane ścieżki w każdym punkcie czasowym.

Procedura ta pozwala ocenić potencjał terapeutyczny obiecujących leków, a także zbadać wpływ kilku chorób współistniejących na odwrotne uformowanie mięśnia sercowego i rekonwalescencję.