Name: Podejście DIPLOMA do standaryzowanej oceny patologii próbek z dystalnej pankreatektomii (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-02-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 38 s
Description: Poznaj standaryzowaną metodę oceny makroskopowej próbek z dystalnej pankreatektomii w raku gruczołu trzustkowego. Protokół obejmuje orientację preparatu, barwienie brzegów, pobieranie węzłów chłonnych i selekcję bloków.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Chcielibyśmy podziękować Joanie Ribeiro za sfilmowanie okazu.

Protokół był zgodny z etycznymi wytycznymi Southampton University Hospital NHS Foundation Trust. Uzyskano świadomą zgodę na wykorzystanie tkanki do celów dydaktycznych i badawczych.
UWAGA: Odpowiednie kroki są podsumowane w Tabeli 2, a odpowiednie materiały w Tabeli materiałów.
1. Orientacja próbki
UWAGA: Aby pomóc histopatologowi w dokładnej orientacji próbki, upewnij się, że chirurg operujący zakłada szwy orientacyjne, aby zaznaczyć tylną płaszczyznę rozwarstwienia, brzegi naczynia śledziony i margines przecięcia trzustki.
<ol>
	<li>Po otrzymaniu utrwalić próbkę w formalinie, w temperaturze pokojowej, przez 24−48 h. 
	UWAGA: Utrwalenie może spowodować zniekształcenie próbki, co utrudnia dokładną orientację, ponieważ przednia powierzchnia otrzewnej i brzeg zaotrzewnowy (tylne rozwarstwienie) mogą mieć podobny wygląd. Ponadto niektóre ośrodki pobierają świeże próbki guza do celów badawczych. W takiej sytuacji należy zachować ostrożność w celu zminimalizowania zniekształceń poprzez nafarbowanie, przed utrwaleniem, jednego lub więcej marginesów, jeżeli mają one być nacięte, gdy próbka jest świeża.</li>
	<li>Tylną płaszczyznę rozwarstwienia należy zidentyfikować na podstawie szwu orientacyjnego (umieszczonego przez chirurga operującego) lub na podstawie obecności śledziony, która jest boczna, oraz naczyń śledziony na granicy tylno-górnej, szwu oznaczającego tylny brzeg rozwarstwienia i zszywek oznaczających (przyśrodkowy) brzeg przecięcia. Zidentyfikuj również inne marginesy/powierzchnie. Na koniec zidentyfikuj śledzionę. 
	UWAGA: W tym okazie można zidentyfikować powierzchnię przednią, margines przecięcia, brzeg tylny, granicę górną, granicę dolną i dodatkowy klin żołądkowy.</li>
	<li>Upewnij się, że tłuszcz okołotrzustkowy pozostaje nienaruszony i przyczepiony do próbki.</li>
</ol>
2. Pomiary
<ol>
	<li>Zmierz wszystkie wymiary w milimetrach.</li>
	<li>Zmierz trzustkę od przyśrodkowej do bocznej (95 mm dla tego próbki), czaszkowej do ogonowej (30 mm) i od przedniej do tylnej (20 mm).</li>
	<li>Zmierz śledzionę również od czaszki do ogona (110 mm dla tego preparatu), od przodu do tyłu (60 mm) i przyśrodkowo do boku (20 mm). Ponadto, jeśli to możliwe, zważ śledzionę (patrz uwaga poniżej). 
	UWAGA: Jeśli guz znajduje się w bliskim sąsiedztwie wnęki śledziony, śledziony nie należy oddzielać od trzustki, a ważenie śledziony powinno odbywać się en bloc z trzustką.</li>
	<li>Zmierz wszelkie potencjalne dodatkowe narządy, w tym nadnercza. 
	UWAGA: W tym protokole ściana żołądka została wycięta i zmierzona. Żołądek klinowy ma wymiary 35 mm x 10 mm x 5 mm.</li>
</ol>
3. Tuszowanie
<ol>
	<li>Po zmierzeniu trzustki i śledziony w trzech wymiarach, narysuj tylny brzeg rozwarstwienia, margines przecięcia, przednią powierzchnię otrzewnową i dodatkowe brzegi narządów różnymi kolorami. Jeśli brzegi naczynia śledziony wydają się być mocno zajęte, należy je narysować tuszem, aby zidentyfikować prawdziwy margines z sekcjami "en face".</li>
	<li>Chociaż, nie jest to wymagane do oceny marginesu, tuszem górną i dolną granicę trzustki w celu poprawy orientacji próbki i mikroskopowego grupowania węzłów chłonnych w odpowiednich stacjach anatomicznych w pojedynczych przekrojach poprzecznych na szkiełkach barwionych hematoksyną i eozyną.</li>
	<li>Ponadto każdy dodatkowy margines (np. brzeg ściany żołądka) należy namalować tuszem innym kolorem. 
	UWAGA: Próbka jest tuszowana w następujący sposób: przednia powierzchnia otrzewnowa jest tuszowana na żółto, brzeg ściany żołądka jest tuszowany na niebiesko, margines przecięcia jest tuszowany na czerwono, górna granica trzustki jest tuszowana na zielono w celu identyfikacji stacji 11 węzłów chłonnych, dolna granica jest tuszowana na pomarańczowo w celu identyfikacji stacji 18 węzłów, a tylny brzeg rozwarstwienia jest pokryty czarnym tuszem.</li>
</ol>
4. Sekcja
<ol>
	<li>Po zmierzeniu i nafarbowaniu próbki użyj ostrza, aby odciąć bloki z przecięcia i brzegów naczynia śledziony. Usuń ostrzem zszywki, aby uzyskać "en face" odcinek marginesu przecięcia. Przytnij blisko linii zszywki, aby zachować jak największą odległość od prawdziwego marginesu. 
	UWAGA: Linia zszywek na marginesie przecięcia musi zostać usunięta, ponieważ metalowe zszywki nie mogą być przecinane przez ostrza mikrotomu.</li>
	<li>Wyciąć ostrzem pojedynczy odcinek "en face" o długości 3−5 mm brzegu przecięcia tętnicy śledziony i żyły. Alternatywnie pokrój kromki chleba o szerokości 3−5 mm marginesu przecięcia prostopadłego do zszytego brzegu. 
	UWAGA: Tętnica śledzionowa i żyła znajdują się w bliskiej odległości od brzegu przecięcia i są zwykle oznaczone klipsami. Można to wykorzystać do podania dokładnych odległości guza do brzegu.</li>
	<li>Usuń wszelkie dodatkowe marginesy za pomocą blade. 
	UWAGA: Na załączonym filmie linia zszywek z resekcji klina żołądka jest usuwana.</li>
	<li>Za pomocą długiego noża pokrój próbkę od przyśrodkowej do bocznej (od brzegu przecięcia do śledziony) w odstępach 3-5 mm i ponumeruj plasterki (na przykład 1-15, z 15 plasterkami). Nie usuwaj tłuszczu z tylnej części trzustki.</li>
	<li>Z poprzecznymi odcinkami próbki ułożonymi od przyśrodkowego do bocznego, zapisz liczbę guzów, w tym ich lokalizację (ciało i/lub ogon), wygląd (y) i maksymalny rozmiar guza (y). 
	UWAGA: W przeciwieństwie do guzów głowy trzustki, w których znaczenie zajęcia nazwanego naczynia jest odzwierciedlone w stopniu zaawansowania TNM, z zajęciem tętnicy krezkowej górnej i/lub osi celiakii odpowiadającym chorobie pT4, kliniczne znaczenie inwazji tętnicy śledziony pozostaje przedmiotem badań11. Dla celów przyszłych badań zaleca się zapisanie zajęcia tętnicy śledziony i żyły w opisie makroskopowym i potwierdzenie tego pod mikroskopem. Tętnica śledzionowa leży na górnej granicy trzustki, podczas gdy żyła biegnie wzdłuż tylnej granicy trzustki.</li>
</ol>
5. Ocena guza
<ol>
	<li>Oceń guz i jego zajęcie brzegów i/lub naczyń (śledzionowych). 
	UWAGA: Tutaj guz jest obecny w plasterkach 9−14. Powierzchnia cięcia guza jest blada i jednorodna.</li>
	<li>Zmierz makroskopowy rozmiar guza w trzech wymiarach (czaszkowy do ogonowego, przyśrodkowy do bocznego i od przodu do tylnego). 
	UWAGA: Tutaj guz mierzy 30 mm od płaszczyzny czaszkowej do ogonowej, 25 mm od przodu do tyłu i 13 mm przyśrodkowo do bocznej. Pomiar opiera się na grubości plastra. Najczęściej maksymalny rozmiar guza znajduje się w płaszczyźnie przyśrodkowej do bocznej. Pomiar ten ocenia się poprzez zsumowanie grubości plastra każdego szkiełka zawierającego guz. Odległości do brzegów mogą być trudne do oceny makroskopowej, ponieważ gruczolakorak przewodowy trzustki ma silnie rozproszony wzrost8,12. Na tej podstawie, podczas gdy oszacowanie odległości do brzegów można zapisać w opisie makroskopowym, ważne jest potwierdzenie tych wyników pod mikroskopem w oparciu o odpowiednie pobranie próbki guza.</li>
	<li>Pokrój śledzionę prostopadłym przekrojem w odstępach 3−5 mm, zaczynając od jej zewnętrznej wypukłości i kieruj się do wewnątrz w kierunku wnęki śledziony. W przypadkach, gdy guz znajduje się w bliskiej odległości od śledziony, należy zachować śledzionę w stanie nienaruszonym wraz z próbką i wykonać odcinek w ciągłości między guzem a śledzioną.</li>
</ol>
6. Pobieranie próbek tkanek
<ol>
	<li>Podobnie jak w przypadku próbek pankreatoduodenektomii, zracjonalizuj wybór bloków, aby wykazać typ guza, wielkość, duże naczynie i inne zajęcie narządów, stopień zaawansowania węzłowego, stan marginesu i regresję guza w przypadkach, gdy zastosowano terapię neoadjuwantową. Zrób zbliżenia plastrów próbki. 
	UWAGA: Wybór bloku obejmuje margines przecięcia, marginesy (śledziony) resekcji naczyniowej, brzegi ściany żołądka, bloki guza wykazujące maksymalny rozmiar i odległość od marginesów, tło trzustki, reprezentatywny przekrój śledziony i węzły chłonne.</li>
	<li>Pobrać próbki tkanek z guza en bloc z tłuszczem okołotrzustkowym z górnej i dolnej granicy, która zawiera węzły chłonne ze stacji 11 i 18. Wypreparuj poszczególne węzły chłonne z tłuszczu okołotrzustkowego w częściach próbki, które są daleko od miejsca guza. 
	UWAGA: Szczególnie należy pobrać dodatkowe próbki z tego, co makroskopowo wydaje się być obwodem guza i sąsiednimi tkankami, które wydają się wolne od guza. To właśnie w tych ostatnich najczęściej stwierdza się obecność mikroskopijnie inwazyjnego guza. To samo uzasadnienie dla dokładnego przyjmowania bloków ma zastosowanie do oceny marginesów. W przeciwieństwie do raków jelita grubego, które zazwyczaj mają lepiej opisany przód guza, gruczolakorak przewodowy trzustki ma naciekający, nieciągły wzór wzrostu. Interfejs guza z prawidłową trzustką jest często przesłonięty obecnością przewlekłego zapalenia trzustki, co dodatkowo obciąża pobieranie próbek z marginesu3. Zdecydowanie zaleca się, aby nie usuwać tylnej części tłuszczu okołotrzustkowego, ponieważ utrudni to ocenę tylnego brzegu.</li>
	<li>W przypadku guzów o średnicy 20 mm lub mniejszej należy pobrać próbkę z całego guza, aby umożliwić dokładne określenie stopnia zaawansowania pT. W przypadku większych guzów należy pobrać wystarczającą ilość tkanki. Podczas pobierania próbek guza należy uwzględnić tłuszcz okołotrzustkowy, węzły chłonne oraz związek z marginesami i sąsiednimi strukturami. 
	UWAGA: W załączonym filmie podkreślono związek między guzem a ścianą żołądka. Regionalne węzły chłonne dystalnej części trzustki to stacja 11 wzdłuż górnej granicy trzustki, stacja 18 wzdłuż dolnej granicy i stacja 10 w obrębie śledziony hilar fat13. W przypadku guzów zlokalizowanych w trzonie trzustki chirurg dodatkowo wytnie stacje węzłów chłonnych 8a i 9, które są umieszczane w osobnych doniczkach.</li>
	<li>Pobrać prostopadłe odcinki śledziony w odstępach 3−5 mm, a następnie pobrać próbki węzłów chłonnych wnęki śledziony (stacja 10). 
	UWAGA: Nie ma zaleceń dotyczących tego, czy należy usunąć śledzionę z próbki, czy nie. W przypadku, gdy guz znajduje się w końcówce trzustki, nie usuwaj śledziony i nie rozciągaj strzałkowego cięcia w śledzionie.</li>
	<li>Weź bloki z dodatkowych narządów.</li>
</ol>

<ol><li>Ilic, M., Ilic, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of pancreatic cancer.</a> World Journal of Gastroenterology. 22 (44), 9694-9705 (2016).</li>
<li>Strobel, O., Neoptolemos, J., Jäger, D., Büchler, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimizing+the+outcomes+of+pancreatic+cancer+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Clinical+Oncology%22%5BJournal%5D)">Optimizing the outcomes of pancreatic cancer surgery.</a> Nature Reviews Clinical Oncology. 16 (1), 11-26 (2019).</li>
<li>Verbeke, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resection+margins+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Der+Pathologe%22%5BJournal%5D)">Resection margins in pancreatic cancer.</a> Der Pathologe. 34, 241-247 (2013).</li>
<li>van Roessel, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((International+Validation+of+the+Eighth+Edition+of+the+American+Joint+Committee+on+Cancer+%28AJCC%29+TNM+Staging+System+in+Patients+With+Resected+Pancreatic+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Surgery%22%5BJournal%5D)">International Validation of the Eighth Edition of the American Joint Committee on Cancer (AJCC) TNM Staging System in Patients With Resected Pancreatic Cancer.</a> JAMA Surgery. 153 (12), e183617(2018).</li>
<li>Cong, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+size+classification+of+the+8th+edition+of+TNM+staging+system+is+superior+to+that+of+the+7th+edition+in+predicting+the+survival+outcome+of+pancreatic+cancer+patients+after+radical+resection+and+adjuvant+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Tumor size classification of the 8th edition of TNM staging system is superior to that of the 7th edition in predicting the survival outcome of pancreatic cancer patients after radical resection and adjuvant chemotherapy.</a> Scientific Reports. 8 (1), 1-9 (2018).</li>
<li>Verbeke, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Operative+Specimen+Handling+and+Evaluation+of+Resection+Margins%5BTitle%5D)+AND+%22Pancreatic+Cancer%22%5BJournal%5D)">Operative Specimen Handling and Evaluation of Resection Margins.</a> Pancreatic Cancer. , 67-87 (2017).</li>
<li>Barreto, S., Shukla, P., Shrikhande, S. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumors+of+the+Pancreatic+Body+and+Tail%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Oncology%22%5BJournal%5D)">Tumors of the Pancreatic Body and Tail.</a> World Journal of Oncology. 1 (2), 52-65 (2010).</li>
<li>Campbell, F., Cairns, A., Duthie, F., Feakins, R. Dataset for the histopathological reporting of carcinomas of the pancreas, ampulla of Vater and common bile duct from the Royal College of Pathologists. , https://www.rcpath.org/uploads/assets/34910231-c106-4629-a2de9e9ae6f87ac1/g091-pancreasdataset-mar17.pdf (2017).</li>
<li>Strasberg, S. M., Drebin, J. A., Linehan, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radical+antegrade+modular+pancreatosplenectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Radical antegrade modular pancreatosplenectomy.</a> Surgery. 133 (5), 521-527 (2003).</li>
<li>Abu Hilal, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Laparoscopic+radical+%27no-touch%27+left+pancreatosplenectomy+for+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%3A+technique+and+results%5BTitle%5D)+AND+%22Surgical+Endoscopy%22%5BJournal%5D)">Laparoscopic radical 'no-touch' left pancreatosplenectomy for pancreatic ductal adenocarcinoma: technique and results.</a> Surgical Endoscopy. 30 (9), 3830-3838 (2016).</li>
<li>Kanda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasion+of+the+splenic+artery+is+a+crucial+prognostic+factor+in+carcinoma+of+the+body+and+tail+of+the+pancreas%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Invasion of the splenic artery is a crucial prognostic factor in carcinoma of the body and tail of the pancreas.</a> Annals of Surgery. 251 (3), 483-487 (2010).</li>
<li>Verbeke, C. S., Knapp, J., Gladhaug, I. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumour+growth+is+more+dispersed+in+pancreatic+head+cancers+than+in+rectal+cancer%3A+Implications+for+resection+margin+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Histopathology%22%5BJournal%5D)">Tumour growth is more dispersed in pancreatic head cancers than in rectal cancer: Implications for resection margin assessment.</a> Histopathology. 59 (6), 1111-1121 (2011).</li>
<li>Tol, J. A. M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definition+of+a+standard+lymphadenectomy+in+surgery+for+pancreatic+ductal+adenocarcinoma%3A+A+consensus+statement+by+the+International+Study+Group+on+Pancreatic+Surgery+%28ISGPS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%22%5BJournal%5D)">Definition of a standard lymphadenectomy in surgery for pancreatic ductal adenocarcinoma: A consensus statement by the International Study Group on Pancreatic Surgery (ISGPS).</a> Surgery. 156 (3), 591-600 (2014).</li>
<li>Demir, I. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((R0+Versus+R1+Resection+Matters+after+Pancreaticoduodenectomy%2C+and+Less+after+Distal+or+Total+Pancreatectomy+for+Pancreatic+Cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">R0 Versus R1 Resection Matters after Pancreaticoduodenectomy, and Less after Distal or Total Pancreatectomy for Pancreatic Cancer.</a> Annals of Surgery. 268 (6), 1058-1068 (2018).</li>
<li>Verbeke, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resection+margins+and+R1+rates+in+pancreatic+cancer+-+Are+we+there+yet%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Histopathology%22%5BJournal%5D)">Resection margins and R1 rates in pancreatic cancer - Are we there yet?</a> Histopathology. 52 (7), 787-796 (2008).</li>
<li>Verbeke, C. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Redefining+the+R1+resection+in+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Redefining the R1 resection in pancreatic cancer.</a> British Journal of Surgery. 93 (10), 1232-1237 (2006).</li>
<li>Malleo, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Number+of+examined+lymph+nodes+and+nodal+status+assessment+in+pancreaticoduodenectomy+for+pancreatic+adenocarcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Number of examined lymph nodes and nodal status assessment in pancreaticoduodenectomy for pancreatic adenocarcinoma.</a> Annals of Surgery. , Published Ahead-of-Print (2018).</li>
<li>Zhou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stapler+vs+suture+closure+of+pancreatic+remnant+after+distal+pancreatectomy%3A+A+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Stapler vs suture closure of pancreatic remnant after distal pancreatectomy: A meta-analysis.</a> American Journal of Surgery. 200 (4), 529-536 (2010).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Właściwa ocena histopatologiczna wyciętego wycinka jest niezbędna do stratyfikacji rokowania chorobowego i ukierunkowania dalszych strategii leczenia. Brakuje znormalizowanych protokołów oceny próbek powstałych w wyniku dystalnej pankreatektomii w kierunku PDAC. Potencjalnie stwarza to znaczną zmienność między zgłaszanymi wynikami histopatologicznymi14. Różnice w definicjach i praktyce między ośrodkami ograniczają porównywalność badań15. Ponadto wskaźniki resekcji R1 (guza ...

Gruczolakorak przewodowy trzustki (PDAC) wiąże się z bardzo złym rokowaniem1. Chirurgia, w połączeniu z terapią (neo)adjuwantową, pozostaje jedynym leczeniem leczniczym2. Po operacji odpowiednia ocena histopatologiczna wyciętego wycinka jest niezbędna do stratyfikacji prognostycznej, a ponadto może ukierunkować dalsze strategie leczenia3. Co więcej, niedawna, 8. edycja systemu oceny stopnia zaawansowania nowotworów trzustki przez Amerykański Wspólny Komitet ds. Raka / Unię Międzynarodowej Kontroli Raka (AJCC / UICC) wprowadziła znaczące zmiany w stadium guza (pT), które jest głównie oparte na wielkości guza4,5. Podczas gdy maksymalny rozmiar guza jest oceniany makroskopowo, wymagane jest odpowiednie pobranie próbki w celu potwierdzenia tych ustaleń, zwłaszcza że przewlekłe zapalenie trzustki może naśladować wygląd guza gołym okiem.
Ponieważ większość gruczolakoraków przewodowych trzustki (do 80%) występuje w głowie trzustki, większość literatury opiera się na ocenie próbek pancreatoduodenektomii6,7. W Wielkiej Brytanii Royal College of Pathologists (RCPath) opublikował zestawy danych, które zawierają oparte na dowodach wytyczne dotyczące obchodzenia się z próbkami, ich sekcji i zgłaszania raka trzustki, ze szczególnym uwzględnieniem bardziej powszechnych próbek pancreatoduodenektomii8. Niemniej jednak nadal brakuje międzynarodowego konsensusu co do ubruttowienia próbek, a praktyka jest nadal bardzo rozbieżna między centrami6. Analogiczny proces standaryzacji oceny patologicznej próbki pochodzącej z dystalnej (tj. lewej) pankreatektomii cieszy się obecnie rosnącym zainteresowaniem klinicznym.
Dystalna Pankreatektomia, Minimalnie Inwazyjna lub Otwarta, dla nowotworów złośliwych (DIPLOMA, ISRCTN44897265) jest międzynarodowym wieloośrodkowym, randomizowanym, kontrolowanym badaniem porównującym otwarte i minimalnie inwazyjne podejście chirurgiczne do leczenia PDAC trzonu i ogona. Protokół patomorfologiczny DIPLOMA został opracowany jako sposób standaryzacji oceny patologii i raportowania dla tego badania. Protokół opisuje ocenę próbek z dystalnej pankreatektomii, w tym orientację próbki, tuszowanie, pobieranie próbek z węzłów chłonnych, ocenę zajęcia naczynia śledziony (i innych narządów, jeśli są obecne) oraz wybór bloków.
Opisana metoda została opracowana podczas czterech spotkań grupy badawczej DIPLOMA (kwiecień 2015 Manchester, grudzień 2016 Amsterdam, maj 2017 Moguncja i kwiecień 2018 Amsterdam) z wysoce doświadczonymi 20-40 chirurgami i patologami trzustki z 10 krajów Europy. Dyskutowano m.in. na temat znaczenia różnych marginesów, płaszczyzny przecięcia, a zwłaszcza płaszczyzny rozwarstwienia między tylną częścią ciała a ogonem.
Charakterystyka pacjenta
79-letnia kobieta przypadkowo odkryła 34-milimetrowy guz w trzonie trzustki, który był podejrzany o złośliwość. Tomografia komputerowa nie wykazała radiologicznych dowodów na zajęcie głównych struktur naczyniowych przez guz ani na obecność (odległych) przerzutów. Stwierdzono tylko sąsiednią powiększenie węzłów chłonnych o małych rozmiarach. Pacjentka została omówiona na posiedzeniu zespołu wielodyscyplinarnego, na którym zdecydowano, że kwalifikuje się do operacji. W ramach badania DIPLOMA wykonano otwartą radykalną pankreatektomię dystalną, splenektomię i klinową resekcję żołądka.
Makroskopowa ocena próbek dystalnej pankreatektomii i nomenklatura marginesów
Odpowiednie marginesy, które powinny być oceniane w próbce dystalnej pankreatektomii, obejmują margines przecięcia, brzeg tętnicy śledziony i żyły, tylny margines rozwarstwienia oraz dodatkowe marginesy w przypadku resekcji wielownętrznych, jak pokazano w Tabeli 1.
Margines przecięcia to powierzchnia, na której trzon trzustki był oddzielony od szyi. Głównie w laparoskopowych, ale także w coraz większej liczbie otwartych próbek chirurgicznych, brzeg ten jest liniową linią zszywek. Tętnica śledzionowa i brzegi żył znajdują się w bliskiej odległości od zszytego brzegu przecięcia i są oznaczone klipsami naczyniowymi lub małymi zszywkami. Tylny brzeg to płaszczyzna rozwarstwienia między tylną częścią ciała i ogonem trzustki a płaszczyzną czołową powięzi nerkowej, w obrębie zaotrzewnowej. Pomiędzy przednią i tylną powięzią nerkową znajduje się przestrzeń okołonerczna, w której leżą nerki i nadnercza w luźnym włóknistym przedziale tkanki łącznej. Tylny margines rozwarstwienia różni się w zależności od dokładnie wykonanego zabiegu chirurgicznego. Może to obejmować przednią powięź nerkową, z nadnerczem lub bez niego oraz tylną powięź nerkową9,10. Podczas gdy przednia, otrzewnowa, otrzewnowana powierzchnia nie jest uważana za margines chirurgiczny, naruszenie tej powierzchni guza wiąże się ze zwiększonym ryzykiem nawrotu miejscowego3.

<table><tbody><tr><td>Formalin</td><td>Genta</td><td>BFNC50</td><td></td></tr><tr><td>Rękawice</td><td>Healthline</td><td>FTG182, FTG183, FTG184 (w zależności od rozmiaru)</td><td></td></tr><tr><td>Rękojeści ostrzy</td><td>Swann Morton</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ostrza</td><td>Swann Morton</td><td>FSF440</td><td></td></tr><tr><td>Wagi</td><td>Ohaus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Długie noże</td><td>Linijka Cellpath</td><td>KMY811</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Solmedia</td><td>RUL003</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki</td><td>Weiss</td><td>FGP8939</td><td></td></tr></tbody></table>

podejście diploma do standaryzowanej oceny patologii próbek z dystalnej pankreatektomii

DIPLOMA Approach for Standardized Pathology Assessment of Distal Pancreatectomy Specimens

Gruczolakorak przewodowy trzustki (PDAC) jest jednym z najbardziej śmiertelnych nowotworów złośliwych. Mniejszość (20%) PDAC znajduje się w trzustce i ogonie. Dokładna ocena patologiczna wycinka trzustki jest niezbędna do dostarczenia informacji prognostycznych i może ukierunkować dalsze strategie leczenia. Niedawna,ósma edycja systemu oceny stopnia zaawansowania guzów trzustki Amerykańskiego Wspólnego Komitetu ds. Raka / Unii Międzynarodowej Kontroli Raka (AJCC / UICC) wprowadziła znaczące zmiany w stadium guza (pT), które opiera się głównie na wielkości guza. Ta zmiana podkreśla znaczenie starannego doboru bloków. Ze względu na większą częstość występowania nowotworów w głowie trzustki podejmowane są wysiłki na rzecz standaryzacji oceny próbek z pankreatoduodenektomii. Brakuje jednak konsensusu co do makroskopowej oceny dystalnych (tj. lewych) próbek pankreatektomii. Podejście DIPLOMA obejmuje standaryzowany pomiar trzustki i innych wyciętych narządów, tuszowanie odpowiednich marginesów chirurgicznych i powierzchni anatomicznych bez usuwania pokrywających warstw tłuszczu, pomiar wielkości guza (dla stadium T) wraz z oceną zajęcia naczynia śledziony (i innych narządów, jeśli są obecne). Oceniane są wszystkie istotne marginesy i wybierane są odpowiednie bloki, aby potwierdzić te parametry pod mikroskopem. Obecny protokół opisuje ustandaryzowane podejście do makroskopowej oceny próbek z dystalnej pankreatektomii. Podejście to zostało opracowane podczas kilku spotkań z patologami i chirurgami w fazie przygotowań do międzynarodowego badania wieloośrodkowego (DIPLOMA, ISRCTN44897265), które koncentruje się na radykalności dystalnej pankreatektomii w gruczolakoraku przewodowym trzustki. To ustandaryzowane podejście może odegrać zasadniczą rolę w projektowaniu badań i ujednolici raportowanie wyników dystalnej pankreatektomii. Opisana technika jest stosowana w badaniu DIPLOMA w leczeniu gruczolakoraka przewodowego trzustki, ale może być również przydatna w innych wskazaniach.

Ocena mikroskopowa wykazała umiarkowanie zróżnicowanego gruczolakoraka przewodowego trzustki o wymiarach 28 x 25 x 30 mm, jak pokazano w Tabeli 3. Stwierdzono inwazję okołonerwową i limfatyczną bez zajęcia tętnicy śledziony lub żyły. W sumie znaleziono 17 węzłów chłonnych, z których 3 były zajęte (1 granica górna, 2 granica dolna). Odległe węzły chłonne (stacja 8 i tętnica wątrobowa) nie wykazywały objawów złośliwości z przerzutami. Wszystkie brzegi resekcji były wolne od...

Obecne badanie podkreśla ustandaryzowane podejście do makroskopowej oceny próbek dystalnej pankreatektomii pod kątem gruczolakoraka przewodowego trzustki, ze szczególnym naciskiem na pomiar wymiarów trzustki i innych narządów, tuszowanie marginesów, pomiar wielkości guza i bliskości marginesów, pobieranie próbek z węzłów chłonnych i wybór bloków.

Podejście DIPLOMA do standaryzowanej oceny patologii próbek z dystalnej pankreatektomii

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is one of the most lethal malignant cancers. A minority (20%) of PDACs are found in the pancreatic body and tail. ...

Standaryzowana ocena patologiczna próbek z dystalnej pankreatektomii, film instruktażowy wykonany w badaniu DIPLOMA. Gruczolakorak przewodowy trzustki wiąże się ze złym rokowaniem. Mniejszość tych guzów znajduje się w trzustce i ogonie.Dokładna ocena patologiczna próbek trzustki jest niezbędna do dostarczenia informacji prognostycznych, które mogą kierować strategiami leczenia. Poniższy protokół koncentruje się na ocenie próbek po pankreatektomii lewej, w tym orientacji próbki, tuszowaniu, pobieraniu próbek z węzłów chłonnych i selekcji bloków. 79-letnia kobieta zgłosiła się z przypadkowym odkryciem 34-milimetrowego guza w obrębie trzustki z przylegającą limfadenopatią podejrzaną o złośliwość w tomografii komputerowej.Nie zaobserwowano odległych przerzutów. Wykonano radykalną lewą pankreatektomię, splenektomię i klinową resekcję żołądka. Tomografia komputerowa pokazuje guz w obrębie trzustki.Po zabiegu próbka jest utrwalana w formalinie na 24 do 48 godzin. Ocena makroskopowa próbek z lewej strony pankreatektomii obejmuje orientację próbki, pomiar trzustki, śledziony i górnych narządów, tuszowanie brzegów i powierzchni otrzewnowych, preparację próbki oraz ocenę lokalizacji, wielkości, wyglądu i przybliżonej odległości od brzegów oraz pobieranie próbek tkanek. Jeśli chodzi o orientację próbki, utrwalenie formaliny może powodować zniekształcenia, co utrudnia odróżnienie przedniej powierzchni otrzewnowej od zaotrzewnowego lub tylnego brzegu rozwarstwienia.Z tych powodów zaleca się, aby chirurg operujący założył szwy w celu zaznaczenia tylnego brzegu, tak jak ma to miejsce w tym przypadku. Jest to przednia powierzchnia otrzewnowa, a to jest zszyty brzeg przecięcia, w którym leżą brzegi naczynia śledziony. Jest to tylny brzeg rozwarstwienia, który jest oznaczony szwem.Jest to górna granica trzustki, w której znajduje się tętnica śledzionowa i żyła, a to jest dolna granica trzustki. Jest to dodatkowo zszyty brzeg ściany żołądka i jest to śledziona. Wymiary próbki.Trzustka mierzy 95 milimetrów od przyśrodkowej do bocznej, 30 milimetrów czaszkowej do ogonowej i 20 milimetrów od przodu do tyłu. Śledziona ma 110 milimetrów czaszki do ogona, 60 milimetrów od przodu do tyłu i 20 milimetrów przyśrodkowo do bocznej. Klin żołądka ma wymiary 35 na 10 na pięć milimetrów.Próbka jest tuszowana w następujący sposób. Przednia powierzchnia otrzewnowa jest pokryta tuszem na żółto. Brzeg ściany żołądka jest pomalowany tuszem na niebiesko.Margines przecięcia jest pomalowany farbą na czerwono. Górna granica trzustki jest wytatuowana na zielono w celu identyfikacji węzłów chłonnych stacji 11. Dolna granica jest pomalowana tuszem na pomarańczowo w celu identyfikacji węzłów stacji 18, a tylny brzeg rozwarstwienia jest tuszowany na czarno.Przed preparacją próbki pobiera się margines przecięcia i margines resekcji naczyniowej. Linia zszywek na marginesie przecięcia musi zostać usunięta, ponieważ metalowe zszywki nie mogą być przecinane przez ostrze mikrotomu. Zaleca się cięcie blisko linii zszywek, aby zachować jak największą odległość od prawdziwego marginesu.Po usunięciu linii zszywki, margines przecięcia można ocenić za pomocą pojedynczego przekroju en face lub alternatywnie kromki chleba można ustawić prostopadle do oryginalnej linii zszywki, aby zmierzyć dokładną odległość guza do brzegu. Tętnica śledzionowa i żyła znajdują się w bliskiej odległości od brzegu przecięcia i są zwykle oznaczone klipsami. Pobiera się wycinek en face zarówno w tętnicy, jak i żyle.Wszelkie dodatkowe marginesy resekcji mogą być teraz usunięte. W tym przypadku usunęliśmy linię zszywek z resekcji klina żołądkowego. Na koniec można rozpocząć sekcję próbki.Trzustka jest cięta od przyśrodkowej do bocznej w odstępach od trzech do pięciu milimetrów w kierunku wnęki śledziony. Zdecydowanie zaleca się, aby nie usuwać tłuszczu z tylnej części trzustki. Plastry układa się od środkowej do bocznej w 15 plasterkach.A teraz ocena guza. Tutaj pokazujemy, że guz jest obecny w plasterkach od 9 do 14. Powierzchnia cięcia guza jest blada i jednorodna.Guz mierzy 30 milimetrów do płaszczyzny czaszkowo-ogonowej, 25 milimetrów od przodu do tyłu i 30 milimetrów przyśrodkowo do bocznej. Trzeci pomiar opiera się na grubości plastra. Makroskopowa ocena wielkości guza może być trudna ze względu na obecność zwłóknienia i przewlekłego zapalenia trzustki, które mogą makroskopowo naśladować guz.Z tego powodu duża ilość próbek guza, wsparta szczegółowym opisem blokowym ze zdjęciami wycinków próbki, może być wykorzystana do uzyskania dokładniejszego opisu wielkości i zasięgu guza, które można następnie skorelować mikroskopowo. W wycinkach próbki można zobaczyć tętnicę śledzionową biegnącą wzdłuż górnej granicy trzustki. Żyła śledzionowa, choć trudniejsza do uwidocznienia na tym obrazie, biegnie wzdłuż tylnej granicy trzustki, w połowie przekroju.Chociaż guz jest widoczny w bliskim sąsiedztwie żyły śledziony, mikroskopowo nie był zaangażowany. Podczas pobierania próbek guza, wycinki próbki są geometrycznie dzielone, aby objąć otaczającą okolicę tłuszczu i węzłów chłonnych wokół trzustki, co pokazuje związek guza z sąsiednimi strukturami i marginesami. Ponadto w tym przypadku pobiera się skrawki wykazujące dokładny związek między guzem a ścianą żołądka.Gruczolakorak przewodowy trzustki ma naciekowy wzorzec wzrostu, w którym interfejs między guzem a normalną trzustką może być zasłonięty przez zwłóknienie i przewlekłe zapalenie trzustki. W związku z tym to samo uzasadnienie dla dokładnego przyjmowania bloków ma zastosowanie do oceny marż. Śledziona jest teraz krojona w chleb w kierunku czaszkowo-ogonowym w odstępach od trzech do pięciu milimetrów.W przypadkach, gdy guz znajduje się w bliskiej odległości od śledziony, zaleca się utrzymanie śledziony w stanie nienaruszonym wraz z próbką i pobranie odcinków w ciągłości między guzem a śledzioną. Zakładając, że nie ma nieprawidłowości ogniskowych, pobiera się reprezentatywny wycinek śledziony. Wreszcie mamy wybór bloków, który obejmuje margines przecięcia, margines resekcji naczyniowej, margines ściany żołądka, bloki guza wykazujące maksymalny rozmiar i odległość do marginesów, tło trzustki i reprezentatywny wycinek śledziony oraz węzły chłonne.Mikroskopowe wyniki dotyczyły 30-milimetrowego, umiarkowanie zróżnicowanego gruczolakoraka przewodowego, z rozszerzeniem do mięśni właściwych ściany żołądka. Stwierdzono inwazję naczyń limfatycznych bez zajęcia tętnicy śledziony lub żyły śledziony oraz inwazję okołonerwową. Trzy z 17 węzłów chłonnych były zajęte, jeden górny i dwa dolne.Stopień zaawansowania wynosił pT2, N1 według TNM8, a wszystkie marginesy były wyraźne o co najmniej jeden milimetr. Do zalet opisanej metodyki należy zastosowanie szwów orientacyjnych do zaznaczenia tylnego brzegu rozwarstwienia. Ta metoda orientacji jest częścią ustandaryzowanego protokołu badania DIPLOMA.Po drugie, zdecydowanie zalecamy unikanie usuwania tylnej części tłuszczu okołotrzustkowego, ponieważ może to zagrozić dokładnej ocenie marginesu. Oprócz tuszowania marginesów, użycie różnych kolorów do zaznaczenia górnej i dolnej granicy trzustki pozwala nam zidentyfikować stacje 11 i 18 węzłów chłonnych.

diploma-approach-for-standardized-pathology-assessment-distal

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

W niniejszym filmie przedstawiono procedurę sekcji służącą do przetwarzania ludzkiej trzustki w celu uzyskania wielu formatów przechowywania. Orientacja anatomiczna jest zachowana we wszystkich obszarach trzustki, aby umożliwić określenie regionalnego składu i gęstości wysepek.

Protokół pobierania trzustki ludzkiej

W niniejszym filmie zaprezentowano procedury charakterystyki ludzkich wysepek trzustkowych z wykorzystaniem barwienia hematoksyliną i eozyną (H&amp;E) oraz immunohistochemii (IHC). Przekroje trzustki z obszarów głowy, trzonu i ogona poddaje się barwieniu H&amp;E oraz IHC w celu określenia składu endokrynnego wysepek (insulina, glukagon i polipeptyd trzustkowy), replikacji komórek (Ki67) oraz nacieków zapalnych (H&amp;E, CD3). Obszar haczykowaty jest lokalizowany za pomocą IHC w kierunku...

Protokoły barwienia dla ludzkich wysepek trzustkowych

Mikrodysekcja laserowa to technika, która pozwala na odzyskanie wybranych komórek z niewielkich ilości miąższu. W tym miejscu opisujemy protokół pozyskiwania ludzkich wysp trzustkowych z próbek chirurgicznych do wykorzystania w badaniach transkryptomicznych. Nasz protokół poprawia wewnętrzną autofluorescencję ludzkich komórek beta, ułatwiając w ten sposób ich pobieranie.

Ulepszony protokół mikrodysekcji laserowej ludzkich wysp trzustkowych z próbek chirurgicznych

Tutaj prezentujemy protokół do obrazowania sekcji ludzkiej trzustki w trzech wymiarach (3D) przy użyciu zoptymalizowanych metod pasywnego oczyszczania. Niniejszy manuskrypt demonstruje te procedury pasywnego oczyszczania optycznego, a następnie wielokrotnego barwienia immunofluorescencyjnego w celu zidentyfikowania kluczowych elementów autonomicznych i czuciowych sieci neuronowych unerwiających ludzkie wyspy trzustkowe.

Obrazowanie 3D w wysokiej rozdzielczości sieci neurowyspiowej ludzkiej trzustki

Pierwotna izolacja komórek groniastych, ekspresja białka lub modulacja aktywności, hodowla i dalsze zastosowania są bardzo przydatne w badaniach ex vivo metaplazji acinar-przewodowej (ADM), wczesnego zdarzenia w rozwoju raka trzustki.

Naśladowanie i manipulowanie metaplazją pęcherzowo-przewodową trzustki w trójwymiarowej hodowli komórkowej

Prezentujemy nasze operacyjne podejście do wspomaganej robotem dystalnej pankreatektomii, splenektomii i resekcji osi celiakii (DP-CAR), pokazując, że procedura jest bezpieczna i wykonalna przy odpowiednim planowaniu, selekcji pacjentów i doświadczeniu chirurga.

Dystalna pankreatektomia wspomagana przez robota z resekcją osi celiakii (DP-CAR) w przypadku raka trzustki: planowanie i technika chirurgiczna

Procedury izolacji bezdotykowej mogą zapobiec rozprzestrzenianiu się komórek rakowych z guza pierwotnego. Jednak techniki te nie są obecnie powszechnie akceptowane w laparoskopowej pankreatoduodenektomii (LPD). Przedstawiamy izolację bezdotykową in-situ LPD z częściową resekcją i rekonstrukcją żyły krezkowej górnej (SMV) w przypadku raka trzustki po terapii neoadjuwantowej.

Laparoskopowa pankreatoduodenektomia z powodu raka trzustki przy użyciu techniki bezdotykowej izolacji in-situ

Komórki metaplastyczne trzustki są prekursorami komórek nowotworowych, które powodują powstawanie guzów trzustki. Jednak wyizolowanie nienaruszonych żywotnych komórek trzustki jest trudne. W tym miejscu przedstawiamy skuteczną metodę dysocjacji tkanek trzustkowych. Komórki można następnie wykorzystać do sekwencjonowania RNA pojedynczej komórki (scRNA-seq) lub do dwu- lub trójwymiarowej kohodowli.

Wypreparowanie tkanki trzustki w celu wyizolowania żywotnych pojedynczych komórek

Dootrzewnowe podawanie leków jest bezpiecznym i skutecznym nieinwazyjnym sposobem na wywołanie uszkodzenia trzustki. W badaniu tym porównano pięć różnych protokołów wstrzyknięć dootrzewnowych na myszach w celu wywołania różnego stopnia uszkodzenia trzustki i ustanowiono model ciężkiego uszkodzenia trzustki w celu zbadania zmian patologicznych i strategii leczenia ciężkiego ostrego zapalenia trzustki (SAP).

Przygotowanie mysiego modelu ciężkiego ostrego zapalenia trzustki za pomocą kombinacji ceruleiny i lipopolisacharydu we wstrzyknięciu dootrzewnowym

Protokół ten prezentuje robotyczną, zachowującą dwunastnicę całkowitą resekcję głowy trzustki (R-DPPHRt) dla wewnątrzprzewodowe nowotwory brodawkowe śluzowe (IPMN). Film demonstruje tę technikę u pacjenta z głównym przewódem IPMN, podkreślając jej wykonalność jako minimalnie inwazyjnej alternatywy dla pankreatikoduodenektomii.

Robotyczna resekcja całkowitej głowy trzustki zachowująca dwunastnicę dla wewnątrzwywodowe nowotwory brodawkowe

W artykule przedstawiono laparoskopową centralną pankreatektomię z anastomozą przewódków trzustkowych od końca do końca jako ważną metodę chirurgiczną w przypadku łagodnych i niskozagradowych nowotworów środkowego segmentu trzustki.

Leczenie łagodnego guza trzustki w środkowym segmencie za pomocą laparoskopowej centralnej pankreatektomii z rekonstrukcją przewódu trzustkowego end-to-end

Poznaj standaryzowaną metodę oceny makroskopowej próbek z dystalnej pankreatektomii w raku gruczołu trzustkowego. Protokół obejmuje orientację preparatu, barwienie brzegów, pobieranie węzłów chłonnych i selekcję bloków.

Podejście DIPLOMA do standaryzowanej oceny patologii próbek z dystalnej pankreatektomii

Przeglądaj więcej filmów