-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Immunology and Infection
Natywna elektroforeza w żelu poliakrylamidowym Analiza immunoblot endogennej dimeryzacji IRF5
Natywna elektroforeza w żelu poliakrylamidowym Analiza immunoblot endogennej dimeryzacji IRF5
JoVE Journal
Immunology and Infection
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Immunology and Infection
Native Polyacrylamide Gel Electrophoresis Immunoblot Analysis of Endogenous IRF5 Dimerization

Natywna elektroforeza w żelu poliakrylamidowym Analiza immunoblot endogennej dimeryzacji IRF5

Full Text
10,834 Views
08:57 min
October 6, 2019

DOI: 10.3791/60393-v

Meijun Wang1, King Hoo Lim1, Kwan Ting Chow1

1Department of Biomedical Sciences,City University of Hong Kong

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This article describes a native Western blot method for analyzing endogenous interferon regulatory factor 5 (IRF5) dimerization in the CAL-1 plasmacytoid dendritic cell line. The protocol is adaptable for use in other cell lines, facilitating the study of IRF5 biology in various cellular contexts.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Cell Biology
  • Immunology

Background

  • IRF5 plays a crucial role in immune response.
  • Understanding IRF5 dimerization is important for elucidating its function.
  • Native PAGE can be technically challenging but is essential for obtaining reliable results.
  • Commercial reagents can help standardize the experimental process.

Purpose of Study

  • To provide a reliable protocol for assessing IRF5 activation.
  • To enhance understanding of IRF5 biology in different cellular contexts.
  • To minimize variability in experimental results.

Methods Used

  • Native Western blotting technique.
  • Use of commercial running buffers and gel systems.
  • Attention to detail in protocol execution.
  • Stepwise approach to ensure reproducibility.

Main Results

  • Successful analysis of IRF5 dimerization in CAL-1 cells.
  • Protocol yields clear and interpretable results.
  • Demonstrated applicability to other cell lines.
  • Highlighted the importance of technical precision.

Conclusions

  • The modified native PAGE protocol is effective for studying IRF5.
  • Attention to detail is critical for obtaining good results.
  • This method can be adapted for broader applications in cell biology.

Frequently Asked Questions

What is IRF5?
IRF5 is an interferon regulatory factor involved in immune responses.
Why is native PAGE used?
Native PAGE allows for the analysis of protein complexes without denaturing them.
Can this protocol be used for other cell lines?
Yes, the protocol can be adapted for various cell lines.
What are the key challenges in this method?
Obtaining clear and reproducible results can be technically challenging.
What reagents are needed?
Commercial running buffers and gel systems are recommended.
How does attention to detail affect results?
Paying attention to subtle details is essential for achieving reliable outcomes.

Opisano natywną metodę Western blot do analizy dimeryzacji endogennego czynnika regulacyjnego interferonu 5 w linii komórek dendrytycznych plazmocytoidu CAL-1. Protokół ten można również zastosować do innych linii komórkowych.

Protokół ten wykorzystuje szeroko stosowaną technikę wraz z odczynnikami i narzędziami, które można pozyskać komercyjnie, aby ocenić endogenną aktywację IRF5 podczas wczesnych zdarzeń stymulacji. Można go łatwo zastosować do badania biologii IRF5 w innym kontekście komórkowym. Chociaż natywna strona jest powszechnie stosowaną techniką, uzyskanie jasnych, solidnych, możliwych do zinterpretowania i powtarzalnych wyników może być technicznie trudne.

Korzystanie z komercyjnego bufora biegowego i systemu żelowego pomaga zminimalizować zmienność. A zwracanie uwagi na szczegóły jest niezbędne, a doświadczenie jest kluczem do sukcesu w uzyskiwaniu dobrych wyników. Ten zmodyfikowany natywny protokół PAGE składa się z wielu kroków z subtelnymi szczegółami, które są kluczem do sukcesu.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Natywna elektroforeza w żelu poliakrylamidowym dimeryzacja IRF5 endogenna aktywacja IRF5 protokół stymulacji hodowla komórek CAL-1 bufor do lizy PBS leczenie R848 przygotowanie zawiesiny komórek zliczanie hemocytometru procedury wirowania

Related Videos

Detekcja biomolekularna z wykorzystaniem interferometrycznego czujnika obrazowania odbicia (IRIS)

11:04

Detekcja biomolekularna z wykorzystaniem interferometrycznego czujnika obrazowania odbicia (IRIS)

Related Videos

15.2K Views

Monitorowanie aktywacji receptorów rozpoznawania wzorców przeciwwirusowych RIG-I i PKR przez ograniczone trawienie proteazy i natywne PAGE

12:43

Monitorowanie aktywacji receptorów rozpoznawania wzorców przeciwwirusowych RIG-I i PKR przez ograniczone trawienie proteazy i natywne PAGE

Related Videos

12.7K Views

Identyfikacja partnerów interakcji białkowych w komórkach ssaków za pomocą proteomiki ilościowej SILAC-immunoprecypitacji

12:53

Identyfikacja partnerów interakcji białkowych w komórkach ssaków za pomocą proteomiki ilościowej SILAC-immunoprecypitacji

Related Videos

32.1K Views

Test przesunięcia ruchliwości elektroforetycznej (EMSA) do badania interakcji RNA-białko: przykład IRE/IRP

12:44

Test przesunięcia ruchliwości elektroforetycznej (EMSA) do badania interakcji RNA-białko: przykład IRE/IRP

Related Videos

55K Views

Metoda wysokiej rozdzielczości do monitorowania aktywacji IRF3 zależnej od fosforylacji

11:44

Metoda wysokiej rozdzielczości do monitorowania aktywacji IRF3 zależnej od fosforylacji

Related Videos

12.6K Views

Genetyczne i biochemiczne podejścia do oceny oligomeryzacji białek in vivo i in vitro: studium przypadku receptora ryanodyny

12:43

Genetyczne i biochemiczne podejścia do oceny oligomeryzacji białek in vivo i in vitro: studium przypadku receptora ryanodyny

Related Videos

12.2K Views

Zoptymalizowany protokół do oznaczania przesunięcia ruchliwości elektroforetycznej przy użyciu oligonukleotydów znakowanych barwnikiem fluorescencyjnym w podczerwieni

09:58

Zoptymalizowany protokół do oznaczania przesunięcia ruchliwości elektroforetycznej przy użyciu oligonukleotydów znakowanych barwnikiem fluorescencyjnym w podczerwieni

Related Videos

17K Views

Rozszerzenie naczyń krwionośnych izolowanych naczyń krwionośnych i izolacja macierzy zewnątrzkomórkowej myszy o napiętej skórze

08:09

Rozszerzenie naczyń krwionośnych izolowanych naczyń krwionośnych i izolacja macierzy zewnątrzkomórkowej myszy o napiętej skórze

Related Videos

8.7K Views

Badanie interakcji białko-białko w badaniach nad autofagią

14:08

Badanie interakcji białko-białko w badaniach nad autofagią

Related Videos

9.6K Views

Montaż i oczyszczanie prototypowych pienistych intasomów wirusowych

10:20

Montaż i oczyszczanie prototypowych pienistych intasomów wirusowych

Related Videos

6K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code