Name: Zautomatyzowany przeciwprądowy system odśrodkowy do przetwarzania komórek na małą skalę (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-12T12:00:00.000+00:00
Duration: 4 min 49 s
Description: Poznaj zautomatyzowany system przeciwprądowej odśrodkowej wymiany buforu do małoskalowej produkcji komórek. Metoda zapewnia wysoką wydajność odzysku i bezpieczeństwo procesu.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca jest wspierana przez Program Wsparcia Infrastruktury Operacyjnej Rządu Wiktorii oraz Bon Technologiczny Rządu Wiktorii dostarczony przez Departament Rozwoju Gospodarczego, Miejsc Pracy, Transportu i Zasobów. RL jest laureatem stypendium National Health and Medical Research Council Career Development Fellowship. AL jest laureatem australijskiej nagrody podyplomowej.

1. Przygotowanie odczynników i komórek do wymiany
<ol>
	<li>Przygotować (patrz tabela materiałów) w okapie z przepływem laminarnym klasy 2. Za pomocą zestawu strzykawka i igła usuń 50 ml roztworu soli fizjologicznej z worka z solą fizjologiczną o pojemności 500 ml. Zastąp to 50 ml 20% albuminy surowicy ludzkiej (HSA), aby uzyskać 2% HSA w soli fizjologicznej, która posłuży jako bufor do płukania.</li>
	<li>Usunąć komórki z naczyń hodowlanych i przeprowadzić zliczanie komórek w celu określenia początkowej ilości komórek i żywotności przez wykluczenie błękitu trypanowego. Załaduj ogniwa do worka transferowego. 
	UWAGA: W tym protokole komórki Jurkat hodowano w RPMI, a MSCs hodowano w DMEM:F12. Obie pożywki uzupełniono 10% płodową surowicą bydlęcą (FBS) i 1% roztworem antybiotykowo-przeciwgrzybiczym. Komórki hodowano w temperaturze 37 °C z 5% CO2 . W przypadku MSCs lub komórek przylegających należy dodać enzym trawiący (np. trypsynę) do naczyń hodowlanych w celu odłączenia komórek i schudnąć pożywką hodowlaną po odłączeniu komórek. W tym protokole użyto worka transferowego, ponieważ komórki zostały namnażone w naczyniach hodowlanych. Jeśli jednak komórki są hodowane w worku do hodowli komórkowych, można go bezpośrednio podłączyć do zestawu jednorazowego użytku za pomocą sterylnego spawania rurowego. W tym protokole do każdej serii użyto 3 x 107 komórek Jurkata lub 1 x 107 MSC, w których komórki zawieszono w 40 ml pożywki hodowlanej.
	<ol>
		<li>Załaduj komórki do worka transferowego (patrz Tabela materiałów) za pomocą zespołu strzykawki i igły, jeśli dostępna jest sterylna spawarka rurowa, która podłączy worek transferowy do jednorazowego zestawu do przetwarzania.</li>
		<li>Alternatywnie, użyj pary autoklawowanych nożyczek, aby przeciąć rurkę łączącą tak, aby pozostało około 10 cm przymocowanej do worka transferowego i dodać żeńskie złącze Luer na końcu rurki. Użyj strzykawki do zassania komórek i pożywki, a następnie podłącz strzykawkę do złącza Luer i załaduj komórki do worka transferowego.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Podłącz worek zawierający komórki, worek buforowy do mycia zawierający 500 ml buforu do płukania przygotowanego w kroku 1.1, worek na odpady i strzykawkę do zbierania do zestawu jednorazowego użytku (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1B). 
	UWAGA: Pozycja łączenia każdej torby zależy od ustawień w programie. W tym protokole połączyliśmy worek na odpady w pozycji A, bufor do mycia w pozycji B, worek na komórki w pozycjach D i F oraz strzykawkę do zbierania w pozycji H (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1C).</li>
</ol>
2. Program do automatycznego protokołu wymiany
<ol>
	<li>Otwórz graficzny interfejs użytkownika (GUI) urządzenia i naciśnij przycisk "START" na laptopie, komputerze lub tablecie. Następnie "Otwórz" istniejący protokół lub naciśnij "Nowy", aby utworzyć nowy.</li>
	<li>Użyj przycisków "Do przodu" i "Do tyłu", aby przejść przez każdy krok, wybrać zawory do otwarcia/zamknięcia, prędkość odśrodkową, prędkość pompy, kierunek pompy i wyzwalacze działania. Ustawienia dla każdego kroku podsumowano w tabeli 1. Następnie zapisz protokół.</li>
</ol>
3. Konfiguracja maszyny
<ol>
	<li>Umieść jednorazowy zestaw do przetwarzania na maszynie i odpowiednio zawieś połączone worki. Naciśnij czerwony przycisk "Stop/Reset", aby zresetować wszystkie zawory do domyślnej pozycji zamkniętej. 
	UWAGA: Maszyna przeprowadzi test, gdy drzwi są zamknięte, aby upewnić się, że zestaw został prawidłowo umieszczony i że wszystkie zawory działają prawidłowo.</li>
	<li>Podłącz GUI do urządzenia przetwarzającego i naciśnij przycisk "Połącz". Następnie pobierz zapisany program. Gdy zaświeci się zielony przycisk "Play", oznacza to, że protokół jest gotowy do uruchomienia.</li>
	<li>Otwórz ręczne zaciski rurki worka transferowego. 
	UWAGA: Jeśli operator zapomni otworzyć zaciski, urządzenie zatrzyma się i pojawi się ostrzeżenie czujnika ciśnienia. Naciśnij przycisk "Stop", aby zresetować urządzenie i otwórz zaciski, aby rozpocząć ponownie.</li>
</ol>
4. Automatyczna wymiana
<ol>
	<li>Naciśnij "Start", aby zainicjować program wymiany. 
	UWAGA: Aby ręcznie zmienić zautomatyzowany proces, naciśnij przycisk "Dalej", aby przejść do następnego kroku przed osiągnięciem "Wyzwalacza" lub naciśnij "Pauza", aby wstrzymać proces. Spowoduje to recyrkulację ogniw przez zestaw, pozostawiając otwarte tylko zawory J i K (<silna klasa = "xfig" > Rysunek 1C).</li>
	<li>Pod koniec kroku 6 automatyzacji (Tabela 1) proces zostanie wstrzymany, gdy powietrze w opróżnionym worku uruchomi czujnik pęcherzyków. Naciśnij "Dalej", aby przenieść proces do następnego kroku, jeśli worek jest rzeczywiście pusty, lub naciśnij "Pauza", aby wznowić przetwarzanie, jeśli czujnik został wyzwolony przez pęcherzyk w linii.</li>
</ol>
5. Zbieranie i pobieranie próbek komórek
<ol>
	<li>Po zakończeniu zautomatyzowanego procesu zamknij wszystkie rurki clamps. Otwórz drzwi i wyjmij zestaw jednorazowego użytku z urządzenia. Odłączyć strzykawkę, aby pobrać komórki do kolejnych procesów. Pobrać próbkę pobranych komórek w celu sprawdzenia liczby komórek i żywotności (patrz krok 6.2).</li>
</ol>
6. Walidacja procesu
<ol>
	<li>Przeprowadzanie eksperymentów kontrolnych przy użyciu protokołu ręcznej wymiany.
	<ol>
		<li>Odwirować zawiesinę komórek w ilości 200 x g przez 5 minut. Odrzucić supernatant i ponownie zawiesić komórki za pomocą 30 ml buforu do przemywania komórek. Ponownie odwirować zawiesinę komórkową przy sile 200 x g przez 5 minut. Odrzucić supernatant i ponownie zawiesić komórki za pomocą 10 ml buforu do przemywania komórek.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przeprowadź liczenie komórek za pomocą testu wykluczania błękitu trypanowego, aby ocenić żywotność komórek za pomocą automatycznego licznika komórek.</li>
	<li>Wykonaj test MTS, aby określić ilościowo proliferację komórek w 2, 24 i 48 godz. 
	UWAGA: Test MTS przeprowadzono na 96-dołkowej płytce do hodowli tkankowej zgodnie z instrukcjami producenta. Po procesie wymiany buforowej posiano 100 μl podwielokrotności pożywki do hodowli komórkowej (zawierającej 10 000 komórek Jurkat lub 1 500) na studzienkę. W każdym punkcie czasowym do każdego dołka dodawano 20 μl odczynników MTS i inkubowano przez 2 godziny w temperaturze 37 °C. Absorbancję oceniono przy długości fali 490 nm za pomocą czytnika płytek.</li>
	<li>Wykonaj testy funkcjonalne, aby porównać wpływ procesu zautomatyzowanego i procesu ręcznego na komórki Jurkata i funkcję MSC.
	<ol>
		<li>Hodowla komórek Jurkata na 96-dołkowej płytce o gęstości 1 x 106 komórek/ml stymulowanych 50 ng/ml 12-mirystynianu forbolu 13-octanu (PMA) i 1 μg/ml jonomycyny (koktajl stymulacji komórek) w pożywce DMEM:F12 zawierającej 10% płodowej surowicy bydlęcej (FBS) przez 24 godziny. Inkubować komórki w temperaturze 37 °C z 5% CO2 .</li>
		<li>Zmierzyć produkcję interleukiny-2 z supernatantu hodowli za pomocą testu ELISA na bazie kulek (patrz tabela materiałów) zgodnie z instrukcjami producenta.</li>
		<li>Hodowla MSCs na 12-dołkowej płytce o gęstości 10 000 komórek/cm2 w 1 ml pożywki DMEM:F12 zawierającej 10% FBS uzupełnionej interferonem-γ 50 jednostek/ml przez 48 godzin. Zebrać supernatant do testu stężenia kinureniny, aby zmierzyć aktywność enzymu 2,3-dioksygenazy indoloaminy (IDO) MSC, jak wcześniej opisano21.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Lopes, A. G., Sinclair, A., Frohlich, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cost+Analysis+of+Cell+Therapy+Manufacture%3A+Autologous+Cell+Therapies%2C+Part+1%5BTitle%5D)+AND+%22BioProcess+International%22%5BJournal%5D)">Cost Analysis of Cell Therapy Manufacture: Autologous Cell Therapies, Part 1.</a> BioProcess International. 16 (3), (2018).</li>
<li>Hampson, B., Ceccarelli, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Factories+of+the+future%3A+Can+Patient-Specific+Cell+Therapies+Get+There+from+Here%3F%5BTitle%5D)+AND+%22BioProcess+International%22%5BJournal%5D)">Factories of the future: Can Patient-Specific Cell Therapies Get There from Here?</a> BioProcess International. 14 (4), (2016).</li>
<li>Preti, R., Daus, A., Hampson, B., Sumen, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mapping+success+for+commercial+cell+therapy+manufacturing%5BTitle%5D)+AND+%22BioProcess+International%22%5BJournal%5D)">Mapping success for commercial cell therapy manufacturing.</a> BioProcess International. 13 (9), 33-38 (2015).</li>
<li>Heathman, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+translation+of+cell-based+therapies%3A+clinical+landscape+and+manufacturing+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">The translation of cell-based therapies: clinical landscape and manufacturing challenges.</a> Regenerative Medicine. 10 (1), 49-64 (2015).</li>
<li>Lipsitz, Y. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+roadmap+for+cost-of-goods+planning+to+guide+economic+production+of+cell+therapy+products%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">A roadmap for cost-of-goods planning to guide economic production of cell therapy products.</a> Cytotherapy. 19 (12), 1383-1391 (2017).</li>
<li>Lopes, A. G., Sinclair, A., Frohlich, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cost+Analysis+of+Cell+Therapy+Manufacture%3A+Autologous+Cell+Therapies%2C+Part+2%5BTitle%5D)+AND+%22BioProcess+International%22%5BJournal%5D)">Cost Analysis of Cell Therapy Manufacture: Autologous Cell Therapies, Part 2.</a> BioProcess International. 16 (4), 12-19 (2018).</li>
<li>Hanley, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+manufacturing+of+therapeutic+mesenchymal+stromal+cells+with+the+use+of+the+Quantum+Cell+Expansion+System%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Efficient manufacturing of therapeutic mesenchymal stromal cells with the use of the Quantum Cell Expansion System.</a> Cytotherapy. 16 (8), 1048-1058 (2014).</li>
<li>Leong, W., Nakervis, B., Beltzer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automation%3A+what+will+the+cell+therapy+laboratory+of+the+future+look+like%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Gene+Therapy+Insights%22%5BJournal%5D)">Automation: what will the cell therapy laboratory of the future look like?</a> Cell Gene Therapy Insights. 4 (9), 679-694 (2018).</li>
<li>Galipeau, J., Sensebe, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+Stromal+Cells%3A+Clinical+Challenges+and+Therapeutic+Opportunities%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal Stromal Cells: Clinical Challenges and Therapeutic Opportunities.</a> Cell Stem Cell. 22 (6), 824-833 (2018).</li>
<li>Salmikangas, P., Kinsella, N., Chamberlain, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chimeric+Antigen+Receptor+T-Cells+%28CAR+T-Cells%29+for+Cancer+Immunotherapy+-+Moving+Target+for+Industry%3F%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutical+Research%22%5BJournal%5D)">Chimeric Antigen Receptor T-Cells (CAR T-Cells) for Cancer Immunotherapy - Moving Target for Industry?</a> Pharmaceutical Research. 35 (8), 152(2018).</li>
<li>James, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+short-term+gain+can+lead+to+long-term+pain%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Gene+Therapy+Insights%22%5BJournal%5D)">How short-term gain can lead to long-term pain.</a> Cell Gene Therapy Insights. 3 (4), 271-284 (2017).</li>
<li>Rafiq, Q. A., Thomas, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+evolving+role+of+automation+in+process+development%2C+manufacture+of+cell%2C+gene-based+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Gene+Therapy+Insights%22%5BJournal%5D)">The evolving role of automation in process development, manufacture of cell, gene-based therapies.</a> Cell Gene Therapy Insights. 2 (4), 473-479 (2016).</li>
<li>Rafiq, Q. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emerging+Automated+Approaches+for+Cell+and+Gene+Therapy+Manufacture%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Gene+Therapy+Insights%22%5BJournal%5D)">Emerging Automated Approaches for Cell and Gene Therapy Manufacture.</a> Cell Gene Therapy Insights. 4 (9), 911-914 (2018).</li>
<li>Contreras, T. J., Jemionek, J. F., French, J. E., Shields, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+Granulocyte+Isolation+by+Continuous+Flow+Centrifugation+Leukapheresis+and+Counterflow+Centrifugation+Elutriation+%28CFCL%2FCCE%29%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Human Granulocyte Isolation by Continuous Flow Centrifugation Leukapheresis and Counterflow Centrifugation Elutriation (CFCL/CCE).</a> Transfusion. 19 (6), 695-703 (1979).</li>
<li>Berger, T. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficient+elutriation+of+monocytes+within+a+closed+system+%28Elutra%E2%84%A2%29+for+clinical-scale+generation+of+dendritic+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunological+Methods%22%5BJournal%5D)">Efficient elutriation of monocytes within a closed system (Elutra™) for clinical-scale generation of dendritic cells.</a> Journal of Immunological Methods. 298 (1), 61-72 (2005).</li>
<li>Chen, Y., Hoecker, P., Zeng, J., Dettke, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Combination+of+Cobe+AutoPBSC+and+Gambro+Elutra+as+a+platform+for+monocyte+enrichment+in+dendritic+cell+%28DC%29+therapy%3A+Clinical+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Apheresis%22%5BJournal%5D)">Combination of Cobe AutoPBSC and Gambro Elutra as a platform for monocyte enrichment in dendritic cell (DC) therapy: Clinical study.</a> Journal of Clinical Apheresis. 23 (5), 157-162 (2008).</li>
<li>Whitford, W. G. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWhitford%2C+WG+%22Continuous+Processing+in+Pharmaceutical+Manufacturing%22">Continuous Processing in Pharmaceutical Manufacturing</a>. Subramanian, G. , (2014).</li>
<li>Scinogy. SMALL BATCH CELL SEPARATION, WASH & CONCENTRATION. , https://www.scinogy.com/projects (2019).</li>
<li>Yu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeting+Jurkat+T+Lymphocyte+Leukemia+Cells+by+an+Engineered+Interferon-Alpha+Hybrid+Molecule%5BTitle%5D)+AND+%22Cellular+Physiology+and+Biochemistry%22%5BJournal%5D)">Targeting Jurkat T Lymphocyte Leukemia Cells by an Engineered Interferon-Alpha Hybrid Molecule.</a> Cellular Physiology and Biochemistry. 42 (2), 519-529 (2017).</li>
<li>Moharram, S. A., Shah, K., Kazi, J. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((T+cell+Acute+Lymphoblastic+Leukemia+Cells+Display+Activation+of+Different+Survival+Pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cancer%22%5BJournal%5D)">T cell Acute Lymphoblastic Leukemia Cells Display Activation of Different Survival Pathways.</a> Journal of Cancer. 8 (19), 4124(2017).</li>
<li>Ling, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesenchymal+stem+cells+use+IDO+to+regulate+immunity+in+tumor+microenvironment%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Mesenchymal stem cells use IDO to regulate immunity in tumor microenvironment.</a> Cancer Research. 74 (5), 1576-1587 (2014).</li>
<li>Tanzeglock, T., Soos, M., Stephanopoulos, G., Morbidelli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+mammalian+cell+death+by+simple+shear+and+extensional+flows%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Induction of mammalian cell death by simple shear and extensional flows.</a> Biotechnology and Bioengineering. 104 (2), 360-370 (2009).</li>
<li>Aguado, B. A., Mulyasasmita, W., Su, J., Lampe, K. J., Heilshorn, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+viability+of+stem+cells+during+syringe+needle+flow+through+the+design+of+hydrogel+cell+carriers%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+engineering.+Part+A%22%5BJournal%5D)">Improving viability of stem cells during syringe needle flow through the design of hydrogel cell carriers.</a> Tissue engineering. Part A. 18 (7-8), 806-815 (2012).</li>
<li>Zhu, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydroxyethyl+starch+as+a+substitute+for+dextran+40+for+thawing+peripheral+blood+progenitor+cell+products%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Hydroxyethyl starch as a substitute for dextran 40 for thawing peripheral blood progenitor cell products.</a> Cytotherapy. 17 (12), 1813-1819 (2015).</li>
<li>Schwandt, S., Korschgen, L., Peters, S., Kogler, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cord+blood+collection+and+processing+with+hydroxyethyl+starch+or+non-hydroxyethyl+starch%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Cord blood collection and processing with hydroxyethyl starch or non-hydroxyethyl starch.</a> Cytotherapy. 18 (5), 642-652 (2016).</li>
<li>Stroncek, D. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Counter-flow+elutriation+of+clinical+peripheral+blood+mononuclear+cell+concentrates+for+the+production+of+dendritic+and+T+cell+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Counter-flow elutriation of clinical peripheral blood mononuclear cell concentrates for the production of dendritic and T cell therapies.</a> Journal of Translational Medicine. 12, 241(2014).</li>
<li>Mfarrej, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pre-clinical+assessment+of+the+Lovo+device+for+dimethyl+sulfoxide+removal+and+cell+concentration+in+thawed+hematopoietic+progenitor+cell+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22Cytotherapy%22%5BJournal%5D)">Pre-clinical assessment of the Lovo device for dimethyl sulfoxide removal and cell concentration in thawed hematopoietic progenitor cell grafts.</a> Cytotherapy. 19 (12), 1501-1508 (2017).</li>
<li>Abonnenc, M., Pesse, B., Tissot, J. D., Barelli, S., Lion, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automatic+washing+of+thawed+haematopoietic+progenitor+cell+grafts%3A+a+preclinical+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Vox+Sanguinis%22%5BJournal%5D)">Automatic washing of thawed haematopoietic progenitor cell grafts: a preclinical evaluation.</a> Vox Sanguinis. 112 (4), 367-378 (2017).</li>
<li>Panes, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expanded+allogeneic+adipose-derived+mesenchymal+stem+cells+%28Cx601%29+for+complex+perianal+fistulas+in+Crohn%27s+disease%3A+a+phase+3+randomised%2C+double-blind+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Expanded allogeneic adipose-derived mesenchymal stem cells (Cx601) for complex perianal fistulas in Crohn's disease: a phase 3 randomised, double-blind controlled trial.</a> Lancet. 388 (10051), 1281-1290 (2016).</li>
<li>Lim, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First-In-Human+Administration+of+Allogeneic+Amnion+Cells+in+Premature+Infants+With+Bronchopulmonary+Dysplasia%3A+A+Safety+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cells+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">First-In-Human Administration of Allogeneic Amnion Cells in Premature Infants With Bronchopulmonary Dysplasia: A Safety Study.</a> Stem Cells Translational Medicine. 7 (9), 628-635 (2018).</li>
</ol>

SW, IF i DJ są dyrektorem operacyjnym, dyrektorem technicznym i dyrektorem generalnym firmy Scinogy Pty. Ltd. Dostęp do urządzenia CFC został również zapewniony przez firmę Scinogy.

Opisany protokół automatycznej wymiany jest prosty i przyjazny dla użytkownika. Niemniej jednak w tym protokole jest kilka kluczowych kroków, które są krytyczne i wymagają szczególnej uwagi. Z naszego doświadczenia wynika, że podczas przetwarzania większych komórek, takich jak MSC (średnia średnica 10–15 μm), każda seria powinna obejmować co najmniej 1 x 107 komórek, aby osiągnąć optymalny odzysk komórek (ryc. 4B). Przetwarzanie mniejszych komórek, takich jak komó...

Krajobraz współczesnej medycyny szybko się zmienił dzięki niedawnym osiągnięciom w terapiach genowych i komórkowych (GCT). Jako jedna z najszybciej rozwijających się dziedzin badań translacyjnych, sektor GCT stoi również przed wyjątkowymi i bezprecedensowymi wyzwaniami. Oprócz solidnych wyników klinicznych, wydajne i opłacalne procesy produkcyjne są niezbędne dla komercyjnego sukcesu GCT, który jest szczególnie trudny do osiągnięcia w produkcji na małą skalę1. Koszt czasu, pracy i zapewnienia jakości jest zwiększony, gdy każda partia komórek produkuje tylko kilka dawek dla jednego pacjenta, a nie setki lub tysiące. W przeciwieństwie do allogenicznych terapii komórkowych, w których procesy produkcyjne są bardziej zbliżone do produkcji przeciwciał i rekombinowanych białek, autologiczne terapie komórkowe są zwykle wytwarzane jako operacje na małą skalę1. Jako stosunkowo nowe zjawisko w produkcji biofarmaceutycznej2, opcje przetwarzania komórek na małą skalę są obecnie dość ograniczone.
Wymiana jest niezbędna do produkcji komórek. Jest to jeden z dalszych procesów, w którym komórki są usuwane z pożywki hodowlanej i zagęszczane w celu kriokonserwacji lub infuzji. Obecnie w produkcji ogniw na małą skalę często stosuje się procesy podobne do tych w badaniach akademickich i opiera się na specjalistycznych pomieszczeniach czystych w celu utrzymania sterylności3. W procesach ręcznych często wykorzystuje się wirówki stołowe do granulowania i ponownego zawieszania komórek w celu zmniejszenia objętości i wymiany. Te otwarte procesy są kosztowne (tj. robocizna i utrzymanie pomieszczeń czystych) i mają ograniczoną zdolność produkcyjną, która nie jest idealna dla produkcji komercyjnej2,3.
Implementacja automatyzacji została zaproponowana jako rozwiązanie poprawiające wydajność produkcji i osiągające produkcję na skalę komercyjną2. Sterylności nie można osiągnąć w produktach komórkowych za pomocą tradycyjnych metod stosowanych w produktach biologicznych, takich jak napromienianie promieniowaniem gamma lub filtracja końcowa. Zamiast tego wdrażany jest zautomatyzowany system zamknięty, aby zmniejszyć ryzyko zanieczyszczenia i operatorów polegających na pomieszczeniach czystych w celu utrzymania sterylności4. Automatyzacja procesów rozwiązuje również kwestię skalowalności poprzez równoległe działanie wielu systemów (scale-out) lub zwiększenie mocy obliczeniowej pojedynczego urządzenia (scale-up), co z kolei minimalizuje zmienność między operatorami. Co więcej, analiza modelowania kosztów terapii autologicznych sugeruje, że automatyzacja może obniżyć koszty produkcji5,6. Jednak w badaniu klinicznym z wykorzystaniem autologicznych komórek macierzystych, w którym wykorzystano zautomatyzowaną platformę produkcyjną, nie stwierdzono żadnych korzyści kosztowych7, co sugeruje, że korzyści kosztowe wynikające z automatyzacji mogą zależeć od indywidualnego procesu produkcyjnego.
Istnieją różne strategie, w których automatyzacja może być wprowadzona do istniejącego procesu produkcyjnego. Można to osiągnąć poprzez wdrożenie w pełni zintegrowanej platformy lub modułowego łańcucha przetwarzania. Na rynku dostępnych jest kilka w pełni zintegrowanych platform do produkcji ogniw autologicznych, takich jak CliniMACS Prodigy (Miltenyi Biotec), Cocoon (Octane Biotech) i Quantum (Terumo BCT). Te zintegrowane platformy, które są często opisywane jako "GMP-in-a-box", mają niskie wymagania dotyczące infrastruktury i są łatwe w obsłudze. Zdolność produkcyjna w pełni zintegrowanej instalacji może być jednak ograniczona przez inkubator podłączony do systemu. Na przykład zdolność hodowli Prodigy jest ograniczona do 400 ml komory8, a kartridż Quantum ma ograniczoną powierzchnię ustawioną na 2,1 m2 (odpowiednik 120 kolb T175)7, co może być niewystarczające dla pacjentów wymagających większych dawek komórek9,10. Dodatkowo, Prodigy i Quantum mają wspólny atrybut, który ogranicza ich użycie: jednostka operacyjna jest zajmowana przez pojedynczą partię komórek przez cały okres ekspansji komórki, ograniczając w ten sposób liczbę partii, które mogą być wyprodukowane przez każdą jednostkę11. Modułowe podejście do automatyzacji polega na stworzeniu łańcucha produkcyjnego z wieloma modułowymi jednostkami, który symuluje komercyjny proces produkcyjny12,13. To podejście, które oddziela urządzenie do hodowli od urządzenia do mycia komórek, może w ten sposób zmaksymalizować wydajność produkcji. Idealnym urządzeniem przetwarzającym byłoby takie, które można dostosować i skalować do potrzeb produkcyjnych12.
Technologia wirowania przeciwprądowego (CFC), której początki sięgają lat siedemdziesiątych, ma długą historię w przetwarzaniu komórek14. Osiąga koncentrację i separację komórek poprzez zrównoważenie siły odśrodkowej z siłą przeciwprądową. Zazwyczaj zawiesina komórek wchodzi z wąskiego końca komory komórkowej przy stałym natężeniu przepływu, gdy jest poddawana działaniu siły odśrodkowej (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1A). Przepływ płynu jest wywierany w kierunku przeciwnym do siły odśrodkowej. Nazywa się to siłą przeciwprądową, która tworzy gradient w komorze komórki. Siła przeciwprądowa zmniejsza się następnie w miarę rozszerzania się komory ogniwa od końcówki komory ogniwa w kształcie stożka. Komórki o większej gęstości i większej średnicy mają większą szybkość sedymentacji, a tym samym osiągają równowagę sił w kierunku końca komory komórkowej w kształcie stożka. Mniejsze cząstki mogą osiągnąć równowagę w kierunku podstawy komory lub być zbyt małe, aby zatrzymać je w komorze i zostaną zmyte. Technologia CFC jest znana głównie ze swojego zastosowania w przetwarzaniu produktów aferezy krwi, takich jak izolowanie monocytów do terapii komórkami dendrytycznymi15,16. Jeśli chodzi o wymianę, technologia CFC została zastosowana tylko w produkcji na dużą skalę17 i nie została jeszcze wykorzystana do produkcji na mniejszą skalę autologicznych terapii komórkowych.
Aby zaspokoić zapotrzebowanie na odpowiednie urządzenie do produkcji ogniw na małą skalę, niedawno opracowano zautomatyzowane urządzenie CFC (Zobacz Tabelę Materiałów)18. Zautomatyzowane urządzenie do przetwarzania komórek wykorzystuje technologię wirowania przeciwprądowego do usuwania resztek komórek i ułatwiania wymiany. Urządzenie wykonuje wymianę buforu za pomocą jednorazowego zestawu, który można sterylnie podłączyć do worka do przenoszenia komórek, co pozwala na przetwarzanie komórek w sterylnym, zamkniętym systemie. W tym miejscu badamy zastosowanie przeciwprądowego urządzenia odśrodkowego do przeprowadzania wymiany w hodowlach komórek ssaków w zautomatyzowanych protokołach. W tym badaniu przetestowaliśmy protokół wymiany przy użyciu komórek Jurkat i mezenchymalnych komórek zrębowych (MSC) do modelowania odpowiednio nieprzyległych i adherentnych typów komórek. Komórki Jurkata to unieśmiertelnione limfocyty T, często używane do badania ostrej białaczki z komórek T19,20. MSCs to dorosłe komórki macierzyste, które zostały przebadane w badaniach klinicznych na ludziach pod kątem szerokiego zakresu chorób9.

<table><tbody><tr><td>20 ml strzykawki Luer lock</td><td>BD</td><td>302830</td><td></td></tr><tr><td>20% albumina surowicy ludzkiej (HSA)</td><td>CSL Behring</td><td>AUST R 46283</td><td></td></tr><tr><td>4-(dimetyloamino)benzaldehyd</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>156477-25g</td><td></td></tr><tr><td>500ml IV worek soli</td><td>fizjologicznej Fresenius Kabi</td><td>K690521</td><td></td></tr><tr><td>Antybiotykowo-Przeciwgrzybiczy</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>15240112</td><td></td></tr><tr><td>Automatyczny licznik komórek (Countess)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Szkiełka komory do liczenia komórek</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>C10228</td><td></td></tr><tr><td>Koktajl stymulacji komórek (500x)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>00-4970-93</td><td></td></tr><tr><td>Worki do przenoszenia komórek</td><td>Terumo</td><td>T1BBT060CBB</td><td></td></tr><tr><td>CellTiter AQueous One Solution Test proliferacji komórek (MTS)</td><td>Wirówka Promega</td><td>G3582</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Eppendorf</td><td>5810R</td><td></td></tr><tr><td>DMEM: Nośnik F12</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11320082</td><td></td></tr><tr><td>Czytnik płytek EnVision</td><td>Perkin Elmer</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Surowica bydlęca płodu (FBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>10099141</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw interleukiny ludzkiej 2 (IL2)</td><td>Perkin Elmer</td><td>Al221C</td><td></td></tr><tr><td>Złączki Luer (żeńskie)</td><td>CPC</td><td>LF41</td><td></td></tr><tr><td>PC laptop lub tablet PC</td><td>ASUS</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Czytnik płyt (SpectraMax i3)</td><td>Urządzenie molekularne</td><td>Nie dotyczy</td><td></td></tr><tr><td>Rekombinowany ludzki IFN-&gamma;</td><td>PeproTech</td><td>300-02</td><td></td></tr><tr><td>Wirówka przeciwprądowa Rotea urządzenie do przetwarzania komórek</td><td>Scinogy</td><td>N/A Jednorazowy</td><td></td></tr><tr><td>zestaw do przetwarzania Rotea</td><td>Media Scinogy</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>RPMI</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>11875119</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki chirurgiczne</td><td>ProSciTech</td><td>420SS</td><td></td></tr><tr><td>Kwas trichlorooctowy</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T6399-250g</td><td></td></tr><tr><td>Trypanowa niebieska plama</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>T10282</td><td></td></tr><tr><td>Enzym trawienia trypsyny (TrypLE Express Enzyme)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>12604013</td><td></td></tr></tbody></table>

zautomatyzowany przeciwprądowy system odśrodkowy do przetwarzania komórek na małą skalę

Automated Counterflow Centrifugal System for Small-Scale Cell Processing

Udana komercjalizacja terapii opartych na genach i komórkach wymaga procesów produkcyjnych, które są opłacalne i skalowalne. Wymiana buforu i koncentracja produktu są niezbędnymi elementami większości procesów produkcyjnych. Jednak na wczesnych etapach rozwoju produktu kroki te są często wykonywane ręcznie. Ręczne wirowanie ślepego zaułka w celu wymiany jest pracochłonne, kosztowne i nieskalowalne. Zamknięty zautomatyzowany system może skutecznie wyeliminować ten pracochłonny krok, ale wdrożenie może być wyzwaniem. W tym miejscu opisujemy nowo opracowane urządzenie do przetwarzania komórek, które nadaje się do przetwarzania komórek na małą i średnią skalę i ma na celu wypełnienie luki między przetwarzaniem ręcznym a automatyzacją na dużą skalę. Protokół ten można łatwo zastosować do różnych typów komórek i procesów, modyfikując natężenie przepływu i prędkość wirowania. Nasz protokół wykazał wysoki odzysk komórek przy krótszym czasie przetwarzania w porównaniu z procesem ręcznym. Komórki odzyskane w zautomatyzowanym procesie również utrzymały tempo proliferacji. Urządzenie może być stosowane jako komponent modułowy w zamkniętym procesie produkcyjnym, aby dostosować się do takich etapów, jak wymiana buforu, formułowanie komórek i kriokonserwacja.

W niniejszym protokole wykorzystano komórki Jurkat oraz MSC jako reprezentatywne przykłady w celu zademonstrowania zautomatyzowanego procesu wymiany buforu. W trakcie procesu komórki Jurkat i MSC poddano tym samym etapom obróbki, przy czym różniono się one siłą odśrodkową oraz prędkością pompy kontrolującą szybkość przepływu (Tabela 1). Rycina 2 przedstawia reprezentatywne obrazy zarejestrowane przez kamerę, ukazujące wygląd zfluidyzowanego złoża komórek podczas procesu wymi...

Automatyzacja jest kluczem do skalowania i zarządzania kosztami w produkcji ogniw. Niniejszy manuskrypt opisuje zastosowanie przeciwprądowego urządzenia do odśrodkowego przetwarzania komórek do automatyzacji etapów wymiany i koncentracji komórek w bioprzetwarzaniu na małą skalę.

Zautomatyzowany przeciwprądowy system odśrodkowy do przetwarzania komórek na małą skalę

Successful commercialization of gene and cell-based therapies requires manufacturing processes that are cost-effective and scalable. Buffer exchange and ...

Protokół ten zapewnia rozwiązanie do zamkniętej, zautomatyzowanej wymiany i koncentracji w produkcji ogniw na małą skalę. Co ważne, wymiana buforowa jest w stanie przeprowadzić się przy wysokim odzysku i dostarczeniu bardzo małej objętości skoncentrowanego produktu. Nowi użytkownicy mogą mieć trudności z wykonaniem wszystkich kroków automatyzacji.Ćwiczenie programowania tych kroków i wykonywanie testów na nośniku to dobre sposoby na zapoznanie się z urządzeniem. Przed rozpoczęciem wymiany buforowej, w głowicy z przepływem laminarnym klasy drugiej, użyj zespołu strzykawki i igły, aby usunąć 50 mililitrów roztworu soli fizjologicznej z 500-mililitrowego worka soli fizjologicznej. Zastąp tę objętość 50 mililitrami 20% albuminy surowicy ludzkiej i zbierz interesujące komórki z ich naczyń hodowlanych.Po zliczeniu użyj strzykawki, aby załadować komórki do worka transferowego i użyj zamka Luer, aby podłączyć worek transferowy do jednorazowego zestawu do przetwarzania. Następnie podłącz wcześniej przygotowany worek buforu do płukania do jednorazowego zestawu do przetwarzania. Aby skonfigurować automatyczną wymianę, otwórz graficzny interfejs użytkownika urządzenia i kliknij przycisk Start.Kliknij przycisk Nowy, aby utworzyć nowy protokół, a następnie kliknij przycisk Sterowanie, aby wybrać zawory, które mają być otwierane i zamykane, prędkość odśrodkową i pompy, kierunek pompy oraz wyzwalacze działania. Po ustawieniu wszystkich parametrów kliknij przycisk Zapisz. Zawieś połączone odpowiednie worki na urządzeniu i umieść jednorazowy zestaw do obróbki na maszynie.Następnie kliknij przycisk połączenia i pobierz zapisany program. Gdy zaświeci się przycisk odtwarzania, protokół jest gotowy do uruchomienia. Aby przeprowadzić automatyczną wymianę bufora, otwórz ręczne zaciski rurki worka transferowego i kliknij start, aby zainicjować program wymiany bufora.Pod koniec szóstego kroku automatyzacji proces zostanie wstrzymany z powodu wyzwolenia czujnika pęcherzyków przez powietrze w pustej już torbie. Jeśli worek jest rzeczywiście pusty, naciśnij dalej, aby przenieść proces do następnego kroku. Po zakończeniu zautomatyzowanego procesu zamknij wszystkie rurki clamps i otwórz drzwi urządzenia.Następnie wyjmij zestaw jednorazowego użytku z urządzenia i odłącz strzykawkę, aby umożliwić pobranie komórek do późniejszej analizy. Zazwyczaj fluidalne złoże komórkowe wygląda tak, jak pokazano na tym obrazie, z komórkami gromadzącymi się w środku i z przodu stożka, niewielką przestrzenią na końcu komory, w której komórki się nie gromadzą, oraz widocznym otworem we wlocie ładowania komórek. Fluidalne złoże komórkowe może zostać ściśnięte podczas wprowadzania nowego buforu o innej lepkości lub gęstości.Do selekcji żywych komórek można zastosować wysokie natężenie przepływu, ponieważ martwe komórki są mniejsze i lżejsze i można je wypchnąć z komory poprzez zwiększenie natężenia przepływu. Zautomatyzowany proces przetwarzania wymiany bufora jest krótszy niż proces ręcznej wymiany bufora. W tej analizie wskaźniki odzysku między procesami ręcznymi i automatycznymi były podobne dla obu typów badanych komórek, a żaden z tych procesów nie miał wpływu na ich żywotność.Odzyskane komórki wykazywały podobne tempo proliferacji, zdolności do wytwarzania cytokin i aktywności ideo, niezależnie od rodzaju przetwarzania. Ważne jest, aby pamiętać, że protokół ten służy jedynie jako wytyczna, dlatego użytkownicy muszą zaprogramować natężenie przepływu i prędkość wirowania zgodnie z typem komórki i buforem. Wymiana buforu jest pośrednim etapem w produkcji komórek, który może następować po ekspansji hodowli komórkowej lub kriokonserwacji i formułowaniu.Celem jest wypracowanie sposobów na zamknięcie całego procesu. Wirowanie przeciwprądowe to bardzo wszechstronna platforma. Przyszłe badania będą dotyczyły zastosowań w selekcji komórek, takich jak usuwanie martwych komórek i izolacja komórek jednojądrowych z produktu chorizy.

automated-counterflow-centrifugal-system-for-small-scale-cell

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Opracowaliśmy zautomatyzowaną platformę do hodowli komórek i przesłuchań do eksperymentów stymulacji komórek na mikroskalę.  Platforma oferuje prostą, wszechstronną i precyzyjną kontrolę w hodowli i stymulacji małych populacji komórek oraz odzyskiwaniu lizatów do analiz molekularnych.  Platforma doskonale nadaje się do badań, w których wykorzystuje się cenne komórki i/lub odczynniki.

Wszechstronna, zautomatyzowana platforma do eksperymentów ze stymulacją komórek w mikroskali

Ten protokół opisuje architekturę systemu do wykonywania automatycznych separacji cząstek o małej objętości (0,15–1,5 ml) za pomocą urządzenia mikroprzepływowego i omawia metody optymalizacji wydajności i działania urządzenia akustycznego.

Platforma mikroprzepływowa do precyzyjnego przetwarzania próbek o małej objętości i jej wykorzystanie do wymiarowania oddzielnych cząstek biologicznych za pomocą mikrourządzenia akustycznego

Tutaj prezentujemy protokół izolacji i hodowli pojedynczych komórek za pomocą platformy mikroprzepływowej, który wykorzystuje nową koncepcję projektowania mikrostudzienek, aby umożliwić wysokowydajną izolację pojedynczych komórek i długoterminową hodowlę klonalną.

Platforma mikroprzepływowa do wysokowydajnej izolacji i hodowli pojedynczych komórek

Ten protokół opisuje wykorzystanie strategii wymiany opartej na inercyjnej mikroprzepływowości do oczyszczania komórek inżynierii mikro/nanocząsteczkowej z efektywnym usuwaniem niezwiązanych cząstek.

Mikroprzepływowa wymiana buforowa w celu inżynierii komórek mikro/nanocząsteczkowych bez zakłóceń

Ten protokół opisuje użycie elutriacji odśrodkowej do rozdzielania komórek pierwotnej ostrej białaczki limfoblastycznej na różne fazy cyklu komórkowego.

Przygotowanie pierwotnych komórek ostrej białaczki limfoblastycznej w różnych fazach cyklu komórkowego przez elutriację odśrodkową

Ten artykuł przedstawia metodę budowy i obsługi taniego, wielokanałowego systemu hodowli komórek perfuzyjnych do pomiaru dynamiki wydzielania i szybkości wchłaniania substancji rozpuszczonych w procesach komórkowych. System może również wystawiać komórki na działanie dynamicznych profili bodźców.

Wielostrumieniowy bioreaktor perfuzyjny zintegrowany z frakcjonowaniem wylotowym w celu dynamicznej hodowli komórek

Ten protokół zapewnia szybką i dostosowaną do wielkości metodę izolacji małych pęcherzyków zewnątrzkomórkowych poprzez optymalizację wielkości dyszy rozpylającej powietrze, ciśnienia płynu w osłonie, ciśnienia przepływu próbki, napięcia, wzmocnienia i parametrów progu wyzwalania.

Optymalizacja parametrów sortowania metodą cytometrii przepływowej w celu wysokoprzepustowej izolacji i oczyszczania małych pęcherzyków zewnątrzkomórkowych

Tutaj prezentujemy protokół pobierania przylegających komórek z wielowarstwowych kolb w zamknięty półautomatyczny sposób za pomocą systemu wirowania przeciwprądowego. Protokół ten może być stosowany do zbierania zarówno komórek przylegających, jak i zawiesinowych z innych platform do rozbudowy komórek z niewielkimi modyfikacjami istniejących etapów.

Przetwarzanie ludzkich mezenchymalnych komórek macierzystych do zastosowań klinicznych przy użyciu zamkniętego, półautomatycznego przepływu pracy

Pęcherzyki zewnątrzkomórkowe są niezwykle obiecujące dla zastosowań biomedycznych, ale obecne metody izolacji są czasochłonne i niepraktyczne do użytku klinicznego. W niniejszej pracy prezentujemy urządzenie mikroprzepływowe, które umożliwia bezpośrednią izolację pęcherzyków zewnątrzkomórkowych z dużych objętości płynów biologicznych w sposób ciągły przy minimalnych krokach.

Jednoetapowa izolacja pęcherzyków zewnątrzkomórkowych z próbek o dużej objętości za pomocą rozwidlonego urządzenia mikroprzepływowego A4F

Ten protokół opisuje opłacalną metodę przyspieszenia ekstrakcji DNA plazmidowego. Wykorzystując niestandardowe, drukowane 3D stojaki kompatybilne ze standardowymi wirującymi stojakami do płytek, naukowcy mogą przetwarzać jednocześnie do 48 kolumn wirujących z kołkami lub do 116 kolumn wirujących bez kołków, co znacznie skraca czas obsługi w porównaniu z ręcznymi metodami mikrowirówkowych.

Ekstrakcja DNA metodą kolumnową o średniej przepustowości z wykorzystaniem racków 24-dołkowych

Poznaj zautomatyzowany system przeciwprądowej odśrodkowej wymiany buforu do małoskalowej produkcji komórek. Metoda zapewnia wysoką wydajność odzysku i bezpieczeństwo procesu.

Zautomatyzowany przeciwprądowy system odśrodkowy do przetwarzania komórek na małą skalę

Przeglądaj więcej filmów