Name: Pomiar karotenoidów w peryfovea za pomocą reflektometru pigmentu plamki żółtej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-01-29T14:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 35 s
Description: Poznaj protokół pomiaru gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej i karotenoidów w peryfovea za pomocą modyfikowanej reflektometrii. Ta metoda poprawia precyzję badań nad zdrowiem siatkówki.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy WesternU College of Optometry i programowi Master of Science in Medical Sciences w WesternU za ich pomoc i wsparcie. Dziękujemy również ZeaVision za hojne wsparcie i finansowanie.

Wszyscy badani byli rekrutowani w jednym miejscu, Zachodnim Uniwersytecie Nauk o Zdrowiu. Badanie zostało zatwierdzone przez instytucjonalną komisję rewizyjną na Zachodnim Uniwersytecie Nauk o Zdrowiu w Pomonie w Kalifornii w USA i przeprowadzone zgodnie z założeniami Deklaracji Helsińskiej. Przed przystąpieniem do badania wszyscy uczestnicy otrzymali szczegółowe wyjaśnienie dotyczące badania i podpisali formularz świadomej zgody przed przeprowadzeniem jakiejkolwiek standardowej oceny okulistycznej.
1. Rekrutacja uczestników
<ol>
	<li>Uwzględnij uczestników, którzy ukończyli 18 lat i mają ostrość wzroku 20/40 lub lepszą.</li>
	<li>Uwzględnij uczestników z klinicznie nieistotnymi schorzeniami, takimi jak zaćma, izolowane druzy, tylne odwarstwienie ciała szklistego, druzy rodzinne na obrzeżach i obwodowe choroby siatkówki, takie jak zwyrodnienie sieci lub defekty nabłonka barwnikowego siatkówki. Upewnij się, że uczestnicy mają normalną lornetkę i że nie mają tłumienia32.</li>
	<li>W tym celu należy przeprowadzić test tłumienia32. Jest to kluczowy krok, ponieważ przy braku normalnej lornetki uczestnicy nie będą w stanie jednocześnie rozpoznać celu fiksacji i pomiaru źródła światła, a tym samym potwierdzą odpowiednie miejsce pomiaru w obszarach dołka środkowego i przydołkowego.</li>
	<li>Wyklucz wszystkich uczestników w wieku poniżej 18 lat, z ostrością wzroku gorszą niż 20/40, z uszkodzeniem siatkówki w okolicy plamki żółtej (centralna część siatkówki), jaskrą, retinopatią cukrzycową, krwotokiem, ciężką zaćmą lub zmętnieniami ciała szklistego uniemożliwiającymi obrazowanie okulistyczne lub pomiary MPR.</li>
	<li>Wyklucz uczestników, którzy nie są w stanie wykonać pomiarów za pomocą heterochromatycznej fotometrii migotania lub reflektometrii, tych, dla których urządzenia nie są w stanie dostarczyć wartości MPOD lub tych, którzy mają tłumienie wzroku.</li>
</ol>
2. Tworzenie systemu torów peryferyjnych (Rysunek 3)
<ol>
	<li>Uzyskaj przesuwną szynę z aluminiową szyną o długości około 1 m (3,5 stopy), która zawiera puste wgłębienie z miejscem na przesuwną szynę, taką jak listwa uszczelniająca drzwi.</li>
	<li>Zamontuj tor w odległości 6.1 m (20 stóp) od osoby siedzącej przy MPR w celu wykonania pomiarów reflektometrycznych. Upewnij się, że tor znajduje się 1.5 m nad ziemią, aby znajdował się na tej samej wysokości co oko uczestnika podczas pomiaru reflektometrycznego.</li>
	<li>Zamontuj trzy zdalnie sterowane lampy LED o wymiarach 1 cm x 1 cm na prowadnicy przesuwnej tak, aby środki świateł były oddalone od siebie o 10,7 cm. 
	UWAGA: 10.7 cm oznacza każdy stopień i zostało określone, ponieważ każde światło LED znajduje się w odległości 6.1 m od uczestnika. Odległość 6,1 m (~ 20 stóp) to minimalna odległość do uzyskania prawdziwej nieskończoności optycznej, ale jeśli system torów zostanie utworzony w dalszej odległości, odległość między każdym światłem LED zmieni się i nowa odległość będzie musiała zostać obliczona trygonometrycznie. (Patrz Tabela 1). Jeśli wykorzystuje się mniej niż 6 m, wskazane jest rozszerzenie źrenic, aby zminimalizować akomodację oka.</li>
</ol>
3. Pomiary za pomocą heterochromatycznego fotometru migotania
UWAGA: Ten krok służy do zbierania dodatkowych danych i nie jest niezbędny do pomiarów peryferyjnych za pomocą reflektometru.
<ol>
	<li>Wlej sztuczne łzy do obu oczu, poproś uczestnika, aby zamrugał kilka razy i załataj oko, które nie jest badane.</li>
	<li>Wyjaśnij uczestnikowi procedurę.</li>
	<li>Poinstruuj uczestnika, aby patrzył na centralny cel fiksacji heterochromatycznego fotometru migotania widocznego przez okular i naciskał kliker za każdym razem, gdy zaobserwuje migotanie celu. Upewnij się, że cel fiksacji migocze łącznie pięć razy, aby określić próg początkowy.</li>
	<li>Wyświetl wyniki początkowego progu i przypomnij uczestnikowi, aby kliknął przycisk za każdym razem, gdy centralny cel fiksacji migocze, gdy test trwa od 45 s do 1 minuty.</li>
	<li>Na monitorze kontrolnym pojawi się wykres i wartość MPOD wraz z indeksem niezawodności. Upewnij się, że w indeksie niezawodności jest wyświetlany komunikat "akceptowalny". Powtórzyć badanie, jeśli wyniki wskazują na "granicę" lub "niedopuszczalność", aż do uzyskania "akceptowalnego" wskaźnika wiarygodności.</li>
	<li>Kliknij następną zieloną strzałkę, która pojawi się na monitorze kontrolnym, gdy uczestnik zakończy test, aby zapisać wyniki.</li>
</ol>
4. Centralna procedura pomiarowa z użyciem reflektometru
UWAGA: Kolejne kroki doprowadzą do pomiaru poszczególnych karotenoidów. Odbywa się to za pomocą reflektometru. Pomiary centralne nie muszą być wykonywane w celu pomiaru obwodowego za pomocą reflektometru. Jednak pomiary centralne są ważne dla użytku klinicznego.
<ol>
	<li>Wprowadź informacje o uczestniku do oprogramowania reflektometru.</li>
	<li>Kliknij kartę Uruchom test wzroku.</li>
	<li>Kalibracja bieli 
	UWAGA: Jest to kluczowy krok w kalibracji spektrometru w urządzeniu reflektometrycznym do próbki białej o pełnym spektrum. Odbywa się to raz dziennie, gdy urządzenie jest włączane przez technika. Uczestnik nie jest potrzebny do tego kroku.
	<ol>
		<li>Kliknij biały przycisk obok opcji Kalibruj.</li>
		<li>Włóż białą rurkę kalibracyjną do reflektometru po wyświetleniu na ekranie komunikatu instruującego użytkownika, aby włożył "białą rurkę kalibracyjną".</li>
		<li>Kliknij OK po włożeniu białej rurki kalibracyjnej, aby rozpocząć białą kalibrację. Upewnij się, że przycisk obok opcji Kalibruj został włączony po wyświetleniu na ekranie komunikatu Biała kalibracja powiodła się.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Kalibracja czerni
	<ol>
		<li>Wlej kroplę sztucznych łez do oczu uczestnika i poproś go, aby położył brodę na podbródku.</li>
		<li>Poinstruuj uczestnika, aby zbliżył oko do muszli ocznej. Za pomocą joysticka delikatnie ustaw system tak, aby muszla oczna dociskała się do oczodołu uczestnika i blokowała dopływ światła w pomieszczeniu do systemu.</li>
		<li>Kliknij przycisk , aby wybrać opcję Kalibruj i wyrównać system do źrenicy uczestnika. Prawidłowe wyrównanie uzyskuje się, gdy źrenica jest wyśrodkowana w okręgu wyświetlanym na monitorze dotykowym.</li>
		<li>Poinstruuj uczestnika, aby wyregulował obrotowe pokrętło z przodu systemu, aby uzyskać wyraźny cel.</li>
		<li>Kliknij przycisk OK, gdy uczestnik prawidłowo dostosuje system do swojego wzroku. System automatycznie przeprowadzi czarną sekwencję kalibracji. Po pomyślnym zakończeniu kalibracji czerni przyciski Lewe Oko i Prawe Oko zostaną włączone, a na ekranie pojawi się komunikat Kalibracja czerni powiodła się.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rozpoczęcie pomiaru
	<ol>
		<li>Kliknij przycisk Lewe oko lub Prawe oko na ekranie, w zależności od tego, które oko jest mierzone.</li>
		<li>Upewnij się, że system wyświetla komunikat Wyrównaj system do oka obiektu. Upewnij się, że system jest dopasowany do źrenicy uczestnika. Użyj joysticka, aby dokonać precyzyjnych regulacji.</li>
		<li>Kliknij przycisk OK na ekranie, aby rozpocząć pomiar MPOD. Czas pomiaru wynosi 30 s. Do uzyskania parametrów/wyników potrzebne jest minimum 10 sekund. U góry ekranu pojawi się minutnik pokazujący, ile czasu pozostało do pomiaru. Poproś uczestnika, aby spojrzał na lampkę fiksacyjną i zachęć go, aby mrugał tylko wtedy, gdy jest to konieczne.</li>
		<li>Użyj joysticka podczas pomiaru, aby upewnić się, że system pozostaje w jednej linii ze źrenicą uczestnika.</li>
		<li>Upewnij się, że po zakończeniu pomiaru system wyświetla komunikat Pomiar powiódł się.</li>
		<li>Kliknij przycisk OK, aby zakończyć.</li>
		<li>Powtórz kroki 4.4–4.6.6, aby w razie potrzeby przetestować drugie oko. Cały proces trwa około 2-3 min. 
		UWAGA: Aby powtórzyć pomiar na tym samym oku, odczekaj co najmniej 30 sekund, a następnie powtórz kroki 4.6–4.6.6.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. Technika pomiaru obwodów za pomocą reflektometru (<silna klasa="xfig">Rysunek 3)
UWAGA: Niebadane oko skupi się na celu, co pozwoli na umieszczenie bodźca w różnych miejscach od dołka testowanego oka. Metodologia ta wymaga normalnej lornetki, aby umożliwić prawidłowe ustawienie oka, w którym mierzona jest gęstość optyczna pigmentu plamki żółtej.
<ol>
	<li>Wprowadź informacje o uczestniku do oprogramowania reflektometrycznego.</li>
	<li>Kliknij kartę Uruchom test wzroku.</li>
	<li>Kalibracja toru peryferyjnego
	<ol>
		<li>Po wykonaniu kalibracji bieli i czerni naciśnij przycisk Lewe oko lub Prawe oko na ekranie, w zależności od tego, które oko ma być mierzone.</li>
		<li>System wyświetli komunikat Dopasuj system do oka badanego. Upewnij się, że system jest dopasowany do źrenicy uczestnika. Użyj joysticka, aby dokonać precyzyjnych regulacji.</li>
		<li>Włącz światło LED na systemie torów, który znajduje się najdalej na prawo od uczestnika. W tym czasie uczestnik powinien być w stanie zobaczyć zarówno światło z wnętrza reflektometru prawym okiem, jak i czerwone światło LED lewym okiem.</li>
		<li>Poinstruuj uczestnika, aby poinstruował wyszkolonego obserwatora, aby dostosował tor obwodowy, aż będzie mógł nałożyć oba bodźce najlepiej jak potrafi. 
		UWAGA: Mogą występować różnice między uczestnikami co do tego, jak daleko znajduje się ich nałożony "punkt kalibracji" z powodu różnic anatomicznych.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Rozpoczęcie pomiaru
	<ol>
		<li>Wyłącz diodę LED i włącz następną diodę LED (po lewej stronie), aby przeprowadzić następny pomiar mimośrodu o 1 stopień. Wyjaśnij uczestnikowi, że musi patrzeć na nowe czerwone światło LED przez cały czas trwania pomiaru.</li>
		<li>Kliknij przycisk OK na ekranie, aby rozpocząć pomiar MPOD. Czas pomiaru wynosi 30 s. U góry ekranu pojawi się minutnik pokazujący, ile czasu pozostało do pomiaru. Poproś uczestnika, aby spojrzał na odpowiednią czerwoną diodę LED i zachęć go, aby mrugał tylko wtedy, gdy jest to konieczne.</li>
		<li>Użyj joysticka podczas pomiaru, aby upewnić się, że system pozostaje w jednej linii ze źrenicą uczestnika.</li>
		<li>Upewnij się, że po zakończeniu pomiaru system wyświetla komunikat Pomiar powiódł się.</li>
		<li>Kliknij przycisk OK, aby zakończyć.</li>
		<li>Powtórz kroki 5.3.1–5.4.5, aby ponownie wykonać pomiar. 
		UWAGA: Cały proces trwa około 2-3 minut. Dla każdego stopnia zalecane są dwa pomiary, aby umożliwić porównanie. Aby powtórzyć pomiary przy innym mimośośrodzie siatkówki, zmień stopień separacji w kroku 4.8.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
6. Analiza (<silna klasa="xfig">Rysunek 4)
<ol>
	<li>Utwórz kopię pliku do analizy. 
	UWAGA: Analizowany plik został wygenerowany w krokach 4.6.6 i 5.4.5. Ten krok nie jest konieczny, ale pozwala na przeprowadzenie różnych analiz bez zmiany oryginalnych danych.</li>
	<li>Otwórz oprogramowanie reflektometryczne na pulpicie.</li>
	<li>Kliknij Importuj po lewej stronie aplikacji i wybierz skopiowany plik, który chcesz otworzyć.</li>
	<li>Kliknij przycisk Edytuj na karcie Rekord tematu. Otworzy się nowe okno. Pomoże to uzyskać dane z żądanego przedziału czasowego.</li>
	<li>Przesuń dolną prowadnicę w górę od 0 do 10, aby wyeliminować pierwsze 10 s pomiaru. 
	UWAGA: Suwak powinien wskazywać 10–30. Te suwaki mogą poruszać się w górę lub w dół, aby wybrać żądany przedział czasu do analizy. (patrz <silna klasa="xfig">Rysunek 4).</li>
	<li>Kliknij przycisk Zakończ po lewej stronie tego okna. Pojawi się okno ostrzegawcze. Wybierz przycisk OK, aby potwierdzić cięcia interwałów.</li>
	<li>Kliknij Launch Analyzer w lewym dolnym rogu programu (patrz Spis materiałów). Otworzy się nowe okno.</li>
	<li>Kliknij opcję Najlepiej pasuj u dołu strony. Spowoduje to wypełnienie pierwszego zestawu danych, w tym L-OD i Z-OD.</li>
	<li>Zapisz dane.</li>
	<li>Kliknij przycisk Resetuj, aby wybrać inną opcję analizy.</li>
	<li>Wybierz pozycję Pigment plamki żółtej w opcjach Model receptora.</li>
	<li>Kliknij opcję Najlepsze dopasowanie, aby wypełnić drugi zestaw danych, w tym MPOD.</li>
	<li>Kliknij przycisk Zapisz rozwiązanie, aby zapisać ten interwał.</li>
</ol>

<ol><li>Handelman, G. J., Dratz, E. A., Reay, C. C., van Kuijk, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carotenoids+in+the+human+macula+and+whole+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Carotenoids in the human macula and whole retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 29 (6), 850-855 (1988).</li>
<li>Milani, A., Basirnejad, M., Shahbazi, S., Bolhassani, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Carotenoids%3A+biochemistry%2C+pharmacology+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Carotenoids: biochemistry, pharmacology and treatment.</a> British Journal of Pharmacology. 174 (11), 1290-1324 (2017).</li>
<li>Bhosale, P., Zhao, D. Y., Bernstein, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC+measurement+of+ocular+carotenoid+levels+in+human+donor+eyes+in+the+lutein+supplementation+era%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">HPLC measurement of ocular carotenoid levels in human donor eyes in the lutein supplementation era.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 48 (2), 543-549 (2007).</li>
<li>Zimmer, J. P., Hammond, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Possible+influence+of+lutein+and+zeaxanthin+on+the+developing+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Possible influence of lutein and zeaxanthin on the developing retina.</a> Clinical Ophthalmology. 1 (1), 25-35 (2007).</li>
<li>Friedman, D. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+Age-Related+Macular+Degeneration+in+the+United+States%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Prevalence of Age-Related Macular Degeneration in the United States.</a> Archives of Ophthalmology. 122 (4), 564-572 (2004).</li>
<li>Ambati, J., Fowler, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of age-related macular degeneration.</a> Neuron. 75 (1), 26-39 (2012).</li>
<li>Bernstein, P. S., Delori, F. C., Richer, S., van Kuijk, F. J., Wenzel, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+value+of+measurement+of+macular+carotenoid+pigment+optical+densities+and+distributions+in+age-related+macular+degeneration+and+other+retinal+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">The value of measurement of macular carotenoid pigment optical densities and distributions in age-related macular degeneration and other retinal disorders.</a> Vision Research. 50 (7), 716-728 (2010).</li>
<li>Bone, R. A., Landrump, J. T., Hime, G. W., Cains, A., Zamor, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereochemistry+of+the+Human+Macular+Carotenoids%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Stereochemistry of the Human Macular Carotenoids.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 34 (6), 2033-2040 (1993).</li>
<li>Leung, I. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment%3A+New+clinical+methods+of+detection+and+the+role+of+carotenoids+in+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Optometry+-+Journal+of+the+American+Optometric+Association%22%5BJournal%5D)">Macular pigment: New clinical methods of detection and the role of carotenoids in age-related macular degeneration.</a> Optometry - Journal of the American Optometric Association. 79 (5), 266-272 (2008).</li>
<li>Bone, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+of+Lutein+and+Zeaxanthin+Stereoisomers+in+the+Human+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Distribution of Lutein and Zeaxanthin Stereoisomers in the Human Retina.</a> Experimental Eye Research. 64 (2), 211-218 (1997).</li>
<li>de Kinkelder, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+optical+density+measurements%3A+evaluation+of+a+device+using+heterochromatic+flicker+photometry%5BTitle%5D)+AND+%22Eye%22%5BJournal%5D)">Macular pigment optical density measurements: evaluation of a device using heterochromatic flicker photometry.</a> Eye. 25 (1), 105-112 (2011).</li>
<li>Snodderly, D. M., Auran, J. D., Delori, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+macular+pigment.+II.+Spatial+distribution+in+primate+retinas%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The macular pigment. II. Spatial distribution in primate retinas.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 25 (6), 674-685 (1984).</li>
<li>Snodderly, D. M., Brown, P. K., Delori, F. C., Auran, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+macular+pigment.+I.+Absorbance+spectra%2C+localization%2C+and+discrimination+from+other+yellow+pigments+in+primate+retinas%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The macular pigment. I. Absorbance spectra, localization, and discrimination from other yellow pigments in primate retinas.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 25 (6), 660-673 (1984).</li>
<li>Bone, R. A., Landrum, J. T., Fernandez, L., Tarsis, S. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+Macular+Pigment+by+HPLC%3A+Retinal+Distribution+and+Age+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Analysis of the Macular Pigment by HPLC: Retinal Distribution and Age Study.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 29 (6), 843-849 (1988).</li>
<li>Chous, A. P., Richer, S. P., Gerson, J. D., Kowluru, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Diabetes+Visual+Function+Supplement+Study%5BTitle%5D)+AND+%22British+Journal+of+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">The Diabetes Visual Function Supplement Study.</a> British Journal of Ophthalmology. 100 (2), 227-234 (2016).</li>
<li>Vishwanathan, R., Schalch, W., Johnson, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+carotenoids+in+the+retina+and+occipital+cortex+are+related+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Nutritional+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Macular pigment carotenoids in the retina and occipital cortex are related in humans.</a> Nutritional Neuroscience. 19 (3), 95-101 (2016).</li>
<li>Barnett, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+optical+density+is+positively+associated+with+academic+performance+among+preadolescent+children%5BTitle%5D)+AND+%22Nutritional+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Macular pigment optical density is positively associated with academic performance among preadolescent children.</a> Nutritional Neuroscience. 21 (9), 632-640 (2018).</li>
<li>Saint, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Macular+Carotenoids+are+Associated+with+Cognitive+Function+in+Preadolescent+Children%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">The Macular Carotenoids are Associated with Cognitive Function in Preadolescent Children.</a> Nutrients. 10 (2), 193(2018).</li>
<li>Johnson, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relationship+between+Serum+and+Brain+Carotenoids%2C+%CE%B1-Tocopherol%2C+and+Retinol+Concentrations+and+Cognitive+Performance+in+the+Oldest+Old+from+the+Georgia+Centenarian+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Aging+Research%22%5BJournal%5D)">Relationship between Serum and Brain Carotenoids, α-Tocopherol, and Retinol Concentrations and Cognitive Performance in the Oldest Old from the Georgia Centenarian Study.</a> Journal of Aging Research. 2013, 951786(2013).</li>
<li>Hammond, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Lutein%2FZeaxanthin+Supplementation+on+the+Cognitive+Function+of+Community+Dwelling+Older+Adults%3A+A+Randomized%2C+Double-Masked%2C+Placebo-Controlled+Trial+Front%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Effects of Lutein/Zeaxanthin Supplementation on the Cognitive Function of Community Dwelling Older Adults: A Randomized, Double-Masked, Placebo-Controlled Trial Front.</a> Aging Neuroscience. 3 (9), 254(2017).</li>
<li>Renzi-Hammond, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+a+Lutein+and+Zeaxanthin+Intervention+on+Cognitive+Function%3A+A+Randomized%2C+Double-Masked%2C+Placebo-Controlled+Trial+of+Younger+Healthy+Adults%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Effects of a Lutein and Zeaxanthin Intervention on Cognitive Function: A Randomized, Double-Masked, Placebo-Controlled Trial of Younger Healthy Adults.</a> Nutrients. 9 (11), 1246(2017).</li>
<li>Wooten, B. R., Hammond, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spectral+Absorbance+and+Spatial+Distribution+of+Macular+Pigment+Using+Heterochromatic+Flicker+Photometry%5BTitle%5D)+AND+%22Optometry+and+Vision+Science%22%5BJournal%5D)">Spectral Absorbance and Spatial Distribution of Macular Pigment Using Heterochromatic Flicker Photometry.</a> Optometry and Vision Science. 82 (5), 378-386 (2005).</li>
<li>Putnam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+imaging+of+macular+pigment+optical+density+and+spatial+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Optometry%22%5BJournal%5D)">Clinical imaging of macular pigment optical density and spatial distribution.</a> Clinical and Experimental Optometry. 100 (4), 333-340 (2017).</li>
<li>Davey, P. G., Alvarez, S. D., Lee, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+optical+density%3A+repeatability%2C+intereye+correlation%2C+and+effect+of+ocular+dominance%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Macular pigment optical density: repeatability, intereye correlation, and effect of ocular dominance.</a> Clinical Ophthalmology. 10, 1671-1678 (2016).</li>
<li>Davey, P. G., Ngo, A., Cross, J., Gierhart, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+reflectometry%3A+development+and+evaluation+of+a+novel+clinical+device+for+rapid+objective+assessment+of+the+macular+carotenoids%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+SPIE+10858%2C+Ophthalmic+Technologies+XXIX%22%5BJournal%5D)">Macular pigment reflectometry: development and evaluation of a novel clinical device for rapid objective assessment of the macular carotenoids.</a> Proceedings of SPIE 10858, Ophthalmic Technologies XXIX. 1085828, (2019).</li>
<li>Rapp, L. M., Maple, S. S., Choi, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lutein+and+Zeaxanthin+Concentrations+in+Rod+Outer+Segment+Membranes+from+Perifoveal+and+Peripheral+Human+Retina%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Lutein and Zeaxanthin Concentrations in Rod Outer Segment Membranes from Perifoveal and Peripheral Human Retina.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 41 (5), 1200-1209 (2000).</li>
<li>van de Kraats, J., Berendschot, T. T., Valen, S., van Norren, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fast+assessment+of+the+central+macular+pigment+density+with+natural+pupil+using+the+macular+pigment+reflectometer%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Optics%22%5BJournal%5D)">Fast assessment of the central macular pigment density with natural pupil using the macular pigment reflectometer.</a> Journal of Biomedical Optics. 11 (6), 064031(2006).</li>
<li>Sommerburg, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lutein+and+zeaxanthin+are+associated+with+photoreceptors+in+the+human+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Lutein and zeaxanthin are associated with photoreceptors in the human retina.</a> Current Eye Research. 19 (6), 491-495 (1999).</li>
<li>van de Kraats, J., Kanis, M. J., Genders, S. W., van Norren, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lutein+and+zeaxanthin+measured+separately+in+the+living+human+retina+with+fundus+reflectometry%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+%26+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Lutein and zeaxanthin measured separately in the living human retina with fundus reflectometry.</a> Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (12), 5568-5573 (2008).</li>
<li>van der Veen, R. L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+desktop+instrument+for+measuring+macular+pigment+optical+density+based+on+a+novel+technique+for+setting+flicker+thresholds%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmic+and+Physiological+Optics%22%5BJournal%5D)">A new desktop instrument for measuring macular pigment optical density based on a novel technique for setting flicker thresholds.</a> Ophthalmic and Physiological Optics. 29 (2), 127-137 (2009).</li>
<li>Howells, O., Eperjesi, F., Bartlett, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+macular+pigment+optical+density+in+vivo%3A+a+review+of+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Measuring macular pigment optical density in vivo: a review of techniques.</a> Graefe's Archive for Clinical Experimental Ophthalmology. 249 (3), 315-347 (2011).</li>
<li>Howells, O., Eperjesi, F., Bartlett, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+the+repeatability+of+heterochromatic+flicker+photometry+for+measurement+of+macular+pigment+optical+density%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Improving the repeatability of heterochromatic flicker photometry for measurement of macular pigment optical density.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 251 (3), 871-880 (2013).</li>
</ol>

Dr Pinakin Davey jest konsultantem ZeaVision, a dr Dennis Gierhart jest pracownikiem, dyrektorem naukowym ZeaVision, producenta urządzenia MPR. Inni autorzy nie zgłaszają żadnych konfliktów.

Nasze badanie ilustruje technikę i metodologię wykonywania pomiarów MPOD in vivo w różnych obszarach dołka i dołka za pomocą reflektometru. Opracowaliśmy i skalibrowaliśmy system torów obwodowych, aby uzyskać pomiary pod kątem 1 stopnia i 2 stopni od centralnego mocowania. Wyniki naszych badań pokazują, że MPOD, L-OD i Z-OD mogą być mierzone w różnych regionach dołka i dołka za pomocą tego protokołu w nieskończoności optycznej. Protokół można dostosować do krótszych dystansów, gdy w klinice nie są dostępne długie pomieszczenia. W takim przypadku jednak konieczne będzie rozszerzenie źrenic w celu kontrolowania aktywnej akomodacji (patrz Tabela 1).
Podczas wykonywania tego eksperymentu istnieją dwa krytyczne kroki: 1) kalibracja 0 stopni i 2) kalibracja czerni. W przypadku korzystania z systemu torów obwodowych do pomiaru MPOD i jego składników poza środkiem, zewnętrzne mocowanie do kalibracji 0 stopni lub pomiaru dołka ma ogromne znaczenie. Jeśli uczestnik, którego oko jest mierzone, nie rozumie tej procedury lub nie może wykonać niezbędnych kroków, pomiary będą zagrożone i błędne. Kalibracja czerni jest również krytyczna, ponieważ pozwala MPR na ustalenie podstawowego pomiaru spektrometru, gdy nie ma światła, które urządzenie następnie porównuje ze wszystkimi wartościami uzyskanymi od obiektu. Dlatego kalibracja na czarno jest koniecznością dla każdego uczestnika.
Wyniki naszych badań wskazują, że centralne poziomy MPOD są zgodne z danymi z wcześniej opublikowanych badań eksperymentalnych i histologicznych 7,10,14. Ponadto stwierdziliśmy, że poziomy MPOD spadają wraz ze wzrostem mimośrodu siatkówki, przy czym wartości MPOD są większe w dołku centralnym w porównaniu z obszarem przydołkowym. Poziomy luteiny i zeaksantyny różnią się również w różnych lokalizacjach siatkówki, przy czym proporcje luteiny i zeaksantyny zmieniają się w funkcji ekscentryczności. Znaleźliśmy centralne proporcje L-OD i Z-OD 1:2,6, które zmieniły się na 2,08:1 przy 2 stopniach od centralnego fiksacji. Jest to zgodne z doniesieniami z poprzednich badań10,29. Stwierdziliśmy, że poziomy luteiny i zeaksantyny wykazywały znaczną zmienność międzyosobniczą. Wcześniejsze eksperymenty laboratoryjne in vivo oceniały tylko trzy osoby, a informacje na ten temat są ograniczone29. Jeśli znacząca międzyosobnicza zmienność poziomów karotenoidów jest prawidłowa, potwierdzałoby to potrzebę uzyskania podstawowych pomiarów karotenoidów i dostosowania poszczególnych suplementów. Potrzebne będą dalsze badania, aby potwierdzić to odkrycie wysokiej zmienności międzyosobniczej poziomów luteiny i zeaksantyny u zdrowych osób. Wcześniejsze publikacje i prace z tym urządzeniem MPR pokazują, że powtarzalne pomiary dla MPOD można uzyskać zarówno w warunkach nierozszerzonych, jak i rozszerzonych źrenic, chociaż powtarzalność pomiarów L-OD i Z-OD uległa poprawie, gdy źrenice były rozszerzone25. W niniejszym badaniu wykonaliśmy wszystkie pomiary MPR przy rozszerzonych źrenicach. Biorąc pod uwagę, że poziomy karotenoidów są niższe na obrzeżach dołka i okolicy przydołkowej, może być konieczne rozszerzenie źrenicy w celu uzyskania stałej siły sygnału i wiarygodnych pomiarów obwodowych.
Próbowaliśmy różnych metod, aż w końcu opracowaliśmy i przetestowaliśmy nasz system torów. Okazało się, że jest to najskuteczniejszy sposób na osiągnięcie wiarygodnych wyników. System został przetestowany, badając trzech uczestników wiele razy, aby sprawdzić, czy podobne wyniki można osiągnąć przy każdej próbie. Obejmowało to mierzenie uczestników przy trzech różnych okazjach w okresie dwóch miesięcy. Inne wypróbowane metody obejmowały modyfikację okularu reflektometrycznego poprzez stworzenie osłony z wstępnie wyciętymi szczelinami pod kątem 0, 1 i 2 stopni od środka. Technika ta okazała się nieskuteczna, ponieważ szczeliny znajdowały się zbyt blisko siebie, aby osoba badana mogła je odpowiednio rozróżnić.
W tym badaniu istnieje kilka ograniczeń. Badanie wymaga, aby badani mieli normalną lornetkę. Gwarantuje to, że badany będzie w stanie skupić się na celu, podczas gdy drugie oko jest mierzone. Badani, którzy nie spełniają tego kryterium, nie będą w stanie zastosować się do instrukcji, nie będą prawidłowo fiksować się podczas angażowania bodźca i nie będą mogli być skutecznie zmierzeni za pomocą tej techniki. System torowy był niezawodny, ale jego ograniczenia mogą zostać wyeliminowane w przyszłych badaniach. Protokół można ulepszyć, posiadając wbudowane czerwone lampy fiksacyjne LED z częścią systemu optometrycznego Badal jako część reflektometru. Pozwoliłoby to uczestnikowi na skupienie się na pożądanym mimośrodzie przy pomiarze oka z odpowiednią akomodacją soczewki.
W chwili obecnej nie ma alternatywnych technik pomiaru in vivo L-OD i Z-OD. Istnieją jednak alternatywne urządzenia, które mierzą MPOD. Jednym z takich urządzeń jest heterochromatyczny fotometr migotania wykorzystany w tym badaniu. Heterochromatyczny fotometr migotania wykorzystuje psychofizyczną metodę testowania i nie może określić indywidualnych wartości luteiny i zeaksantyny. Centralne pomiary MPOD uzyskane za pomocą heterochromatycznego fotometru migotania były średnio o 0,11 niższe niż te uzyskane przez urządzenie MPR z odchyleniem standardowym wynoszącym 0,16. Pomiar MPOD uzyskany przy użyciu obu technik wykazywał doskonałą korelację, o czym informowano wcześniej25.
Chociaż obecne badanie ma niewielką liczebność próby, jego celem było udowodnienie koncepcji, że obwodowe pomiary gęstości optycznej zeaksantyny i luteiny można uzyskać za pomocą urządzenia reflektometrycznego. Zgodnie z naszą wiedzą, inne badania in vivo miały znacznie mniejsze rozmiary prób niż próba wykorzystana w tym badaniu. Dlatego jesteśmy przekonani, że nasze wyniki pokazują, że gęstość karotenoidów in vivo można zmierzyć na dołku środkowym, obrzeżach dołka i okolicy przydołkowej za pomocą reflektometru. Nasze badanie rzuca więcej światła na to, w jaki sposób poziomy zeaksantyny i luteiny są rozprowadzane w centralnych i obwodowych obszarach plamki żółtej w ludzkiej siatkówce. Ponieważ znaleźliśmy niezwykłą zmienność wartości wśród uczestników naszego badania, potrzebne są większe badania zarówno in vivo, jak i in vitro, aby lepiej zrozumieć dystrybucję, poziomy i proporcje luteiny i zeaksantyny w populacji ogólnej.

Zwyrodnienie plamki żółtej związane z wiekiem (AMD) jest główną przyczyną ślepoty i odpowiada za 8,7% ślepoty na całym świecie1. Czynniki ryzyka związane z AMD obejmują rosnący wiek, płeć żeńską, palenie tytoniu, jasny kolor tęczówki, brak równowagi lipidowej, długotrwałą ekspozycję na światło słoneczne i promieniowanie ultrafioletowe, ogólnoustrojowo niższy poziom przeciwutleniaczy, niższą gęstość optyczną pigmentu plamki żółtej (MPOD), genetykę i rasę2. Spośród nich modyfikowalnymi czynnikami ryzyka są rzucenie palenia, doustna suplementacja przeciwutleniaczy i karotenoidów. Karotenoidy są naturalnymi pigmentami występującymi w roślinach i mikroorganizmach i są skutecznymi przeciwutleniaczami3. Są wytwarzane przez organizmy fotosyntetyzujące; Ludzie pozyskują karotenoidy ze swojej diety3,4. Pigmenty plamki żółtej składają się z trzech karotenoidów: luteiny, zeaksantyny i mezo-zeaksantyny4. Ksantofile luteina i zeaksantyna 5 znajdują się w siatkówce, a konkretnie w plamce żółtej, i nadają dołkowi żółty kolor6. Wyższe stężenia ksantofilów obserwuje się w aksonach fotoreceptorów i wewnętrznych warstwach splotowatych siatkówki5,7. Przyjmowanie karotenoidów, takich jak luteina i zeaksantyna, zwiększa poziom pigmentu plamki żółtej. Luteina i zeaksantyna są otrzymywane z diety lub z suplementacją składników odżywczych, podczas gdy mezo-zeaksantyna jest po prostu produktem ubocznym metabolizmu luteiny3,7,8. Stężenia luteiny i zeaksantyny różnią się w różnych obszarach siatkówki. Centralnie, w dołku centralnym, stężenie zeaksantyny jest większe niż luteiny, w stosunku 2,3:19,10. Stężenie karotenoidów zmniejsza się 100-krotnie na mm na obrzeżach dołka, gdzie luteina jest bardziej rozpowszechniona niż zeaksantyna, w stosunku 2,4:19,10.
Obecność ksantofili w siatkówce chroni obwody siatkówki, szczególnie w dołku centralnym i plamce żółtej, i jest krytyczna dla widzenia centralnego. Ksantofile chronią siatkówkę za pomocą dwóch możliwych mechanizmów: 1) filtrowania światła niebieskiego i 2) zmniejszania stresu oksydacyjnego5,11,12,13. Niebieskie światło rozprasza się najbardziej w siatkówce, a wyższe poziomy pigmentu plamki żółtej centralnie pochłaniają rozproszone światło, poprawiając w ten sposób widzenie. Dodatkowo niebieska część widma widzialnego składa się z wysokoenergetycznych, krótkich fal, które mogą powodować wytwarzanie nadmiernych ilości reaktywnych form tlenu w siatkówce. Dlatego uważa się, że karotenoidy zmniejszają obciążenie oksydacyjne plamki żółtej, działając jako przeciwutleniacze w wewnętrznej siatkówce i kompleksie nabłonkowym barwnika siatkówki fotoreceptora poprzez tłumienie tych wolnych rodników5,12,13,14.
Pomiar karotenoidów w siatkówce ma większe implikacje dla zdrowia ogólnoustrojowego. Niedawne badanie wykazało, że terapia karotenoidami poprawia funkcję siatkówki u diabetyków bez żadnych zmian w poziomie glukozy we krwi15. Poziomy gęstości karotenoidów w siatkówce są również silnie skorelowane z poziomami w brain16. Poziomy karotenoidów mogą być kluczowe w latach rozwojowych17,18, a poziomy w mózgu spadają wraz z wiekiem19. Poziomy MPOD są związane z neuroprotekcją i wydajnością neuronalną zarówno u dzieci, jak i osób starszych20,21. W związku z tym istnieje potrzeba klinicznego pomiaru MPOD i jego charakterystyki. Będzie to odgrywać rolę w diagnozowaniu, zarządzaniu i leczeniu różnych schorzeń oczu i układowych7,15,16,17,18,19,20,21.
Obecnie dostępne na rynku technologie pomiaru MPOD to heterochromatyczne fotometry migotania (HFP), które są oparte na testach psychofizycznych. Mierzą one obszar o średnicy 1 stopnia na dołku środkowym, co odpowiada średnicy koła o średnicy ~0,30 mm22. Chociaż wykazano, że tego typu urządzenia są niezawodne, są one ograniczone przez swój subiektywny charakter, są czasochłonne w użyciu i nie są w stanie rozróżnić poszczególnych ilości ksantofili, które tworzą MPOD13,22,23,24. Reflektometr pigmentowy plamki żółtej (patrz Tabela materiałów), określany również jako reflektometr (patrz <silna klasa="xfig">Rysunek 1), rozwiązuje te ograniczenia, obiektywnie mierząc MPOD i jego poszczególne składniki luteiny i zeaksantyny (ksantofile)25. Reflektometr wykorzystuje filtrowane i skolimowane kwarcowe źródło halogenu z filtrem UV/IR do wysyłania kontrolowanej wiązki światła do siatkówki (patrz schemat <silna klasa = "xfig" >Rysunek 2), a filtry wewnętrzne pochłaniają większość wytwarzanego promieniowania. W związku z tym ryzyko narażenia uczestnika na promieniowanie jest niewielkie lub żadne. Różne chromofory i struktury w ludzkim oku oraz odpowiadające im wzorce absorpcji i odbicia są dobrze opisane w literaturze26,27,28. Analiza światła odbitego przetworzonego przez wewnętrzny spektrometr pozwala na ilościową izolację i pomiar gęstości optycznych luteiny i zeaksantyny (L-OD, Z-OD) wraz z ogólnym MPZT. Trzeci karotenoid siatkówki mezo-zeaksantyna jest spektralnie nie do odróżnienia od zeaksantyny, a zatem Z-OD reprezentuje kombinację obu karotenoidów29. Wcześniejsze prace wykazały, że reflektometria jest niezawodna podczas pomiaru centralnego L-OD, Z-OD i MPOD25,29.
Celem obecnego badania jest stworzenie techniki, która może być wykorzystana do oszacowania in vivo poziomów zeaksantyny i luteiny w regionach siatkówki dołka i dołka u ludzi. Dodatkowym celem jest porównanie wyników z poprzednio opublikowanymi wynikami laboratoryjnymi i histologicznymi14,29. Podejście opracowane i opisane w tym manuskrypcie oraz jego zastosowanie wraz z reflektometrią do pomiaru MPOD perydołowego jest nowatorskie. Technika ta może być stosowana z dowolnym istniejącym urządzeniem reflektometrycznym bez większych modyfikacji do pomiaru poziomów poszczególnych karotenoidów w siatkówkach, takich jak L-OD i Z-OD, w różnych lokalizacjach dołka i dołka.
Badanie przedstawione w tym manuskrypcie obejmuje ośmiu uczestników w wieku od 22 do 29 lat. Nasze metody obejmują najpierw przeprowadzenie rutynowego badania okulistycznego, aby upewnić się, że uczestnicy badania spełniają kryteria włączenia. Po uzyskaniu świadomej zgody każdy uczestnik badania został poddany następującym czterem testom: 1) w celu uzyskania centralnego pomiaru MPOD wykorzystano dostępny na rynku heterochromatyczny fotometr migotania; 2) do wykonania dwóch pomiarów centralnych wykorzystano reflektometr; 3) przy użyciu tego samego reflektometru w połączeniu z obwodowym układem torowym, pomiary poziomów karotenoidów przy mimośrodzie 1 stopnia, tj. okręgu o średnicy 0,30 mm, wyśrodkowano w odległości 0,30 mm od dołka centralnego; 4) Używając tego samego zestawu, zmierzono również poziomy karotenoidów przy mimośrodzie 2 stopni, okręgu o średnicy 0,30 mm umieszczonego na krawędzi dołka środkowego (obszar przydołkowy).
Pomiary MPR zostały wykonane po rozszerzeniu źrenicy każdego uczestnika za pomocą 1% kropli okulistycznych tropikamidu. Wiadomo, że rozszerzenie źrenic nie jest potrzebne do uzyskania wartości MPOD za pomocą reflektometrii, ale może poprawić powtarzalność pomiarów L-OD i Z-OD25,29. Wynika to prawdopodobnie z faktu, że pomiary uzyskane z siatkówki za pomocą reflektometru miały lepszy stosunek sygnału do szumu, gdy źrenice były rozszerzone. Aby uzyskać dokładne i stabilne pomiary reflektometrii obwodowej, uczestnicy używali tarcz fiksacji, które zostały umieszczone w nieskończoności optycznej30,31.
Uzyskaliśmy pomiary reflektometryczne dla 30 s i odrzuciliśmy pierwsze 10 s danych. Ta procedura ma dwie zalety: 1) źródło sygnału jest jasne i pozwala oczom dostosować się i dostosować do zadania; i 2) co najważniejsze, pigment fotoreceptora blednie w ciągu pierwszych 10 sekund. W związku z tym wyeliminowanie pierwszych 10 s pomiaru pozwala na uzyskanie bardziej stabilnego i dokładnego sygnału29. W niniejszym badaniu przeprowadziliśmy wszystkie testy reflektometryczne dwukrotnie, po czym uśredniliśmy pomiary, aby uzyskać średnie wartości MPOD, L-OD i Z-OD oraz stosunek Z-OD/L-OD dla każdego uczestnika.

<table><tbody><tr><td>1-1/4-calowy x 36-calowy srebrny próg pod drzwiami</td><td>Frost King LLC</td><td>77578013947</td><td>Wystarczy dowolna regulowana listwa, którą można zamontować na ścianie.</td></tr><tr><td>taśma izolacyjna</td><td>3M Company</td><td>054007-00053</td><td>Służy do regulacji światła mocującego w celu stworzenia obszaru o wymiarach 1 cm na 1 cm.</td></tr><tr><td>Lampy LED z pilotem</td><td>Elfeland LLC</td><td>ELFELANDhoasupic1295</td><td>Wystarczą dowolne małe czerwone światło LED z pilotem, które można zamontować na szynie.</td></tr><tr><td>Reflektometr pigmentowy plamki żółtej</td><td>Zeavision LLC</td><td>N/A</td><td>Prototype nie jest dostępny w sprzedaży.</td></tr><tr><td>Quantifeye Spektrumter pigmentu plamki żółtej 2</td><td>Zeavision LLC</td><td>Numer katalogowy Nie</td> dotyczy <td>Dostępny tylko model w Zeavision LLC.</td></tr><tr><td>Ultra Gel Control 4g Super Klej</td><td>Henkel AG & Firma</td><td>1405419</td><td>Służy do mocowania świateł LED do toru, ale wystarczy każdy mocny klej</td></tr>.<tr><td>Zastrzeżone oprogramowanie reflektometryczne Zeavision, natywne dla reflektometru pigmentowego plamki żółtej</td><td>Zeavision LLC Nie</td><td>dotyczy</td><td>Oprogramowanie i algorytm są zastrzeżone przez Zeavision LLC.</td></tr></tbody></table>

pomiar karotenoidów w peryfovea za pomocą reflektometru pigmentu plamki żółtej

Measurement of Carotenoids in Perifovea using the Macular Pigment Reflectometer

Reflektometr pigmentu plamki żółtej (MPR) obiektywnie mierzy ogólną gęstość optyczną pigmentu plamki żółtej (MPOD) i dodatkowo podaje gęstość optyczną luteiny (L-OD) i gęstość optyczną zeaksantyny (Z-OD) w centralnym 1 stopniu dołka żółtego. Opracowano modyfikację tej techniki w celu oceny in vivo gęstości karotenoidów ekscentrycznej w stosunku do dołka centralnego. Regulowany system torów z czerwonymi światłami LED został umieszczony w odległości 6,1 m od uczestnika, aby ułatwić fiksację oka. Światła zostały odpowiednio rozmieszczone, aby uzyskać przyrosty różnicy siatkówki o 1 stopień podczas pomiarów reflektometrycznych. Wszystkie pomiary reflektometryczne uzyskano z rozszerzeniem źrenic. Średnia wartość MPR-MPOD dla pomiaru centralnego wynosiła 0,593 (SD 0,161) przy stosunku L-OD do Z-OD wynoszącym 1:2,61. Wartość MPR-MPOD przy 1 stopniu wynosiła 0,248, a średnia wartość MPR-MPOD przy 2 stopniach w okolicy przydołkowej wynosiła 0,143. Stosunek L-OD do Z-OD przy 1 stopniu i 2 stopniach od środka wynosił odpowiednio 1,38:1,0 i 2,08:1,0. Wyniki pokazują, że pomiary MPOD uzyskane za pomocą MPR zmniejszają się w funkcji mimośrodu siatkówki i że występuje wyższe stężenie zeaksantyny centralnie w porównaniu z luteiną. Stosunek L-OD do Z-OD zmienia się wraz z mimośrodem dołka, z dwukrotnie większą ilością luteiny niż zeaksantyny przy 2 stopniach od środka. Nasza technika z powodzeniem zapewnia szybką metodę pomiaru gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej w różnych mimośrodach dołka. Wyniki zgadzają się z wcześniej opublikowanymi pomiarami rozkładu gęstości karotenoidów ksantofilu in vivo i in vitro.

W badaniu wzięło udział ośmioro uczestników w wieku od 22 do 29 lat. Tabela 1 opisuje sposób obliczania odległości w celu uzyskania każdego stopnia ekscentryczności od środka plamki żółtej. Tabela 2 przedstawia dane demograficzne uczestników. Próba badawcza obejmowała równą liczbę mężczyzn i kobiet o szerokiej różnorodności etniczno-rasowej. Tabela 3 przedstawia średnie wyniki MPOD uzyskane za pomocą obu urządzeń oraz L-OD i Z-OD wszystkich uczestników badania przy różnych stopniach ekscentryczności. Średnie MPOD i odchylenie standardowe uzyskane za pomocą heterochromatycznego fotometru migotania oraz techniki reflektometrii wyniosły odpowiednio 0.480 (SD 0.14) i 0.593 (SD 0.161). Odnotowano doskonałą korelację między pomiarami MPOD uzyskanymi obiema technikami, przy współczynniku korelacji Pearsona r = 0.92 (p &lt; 0.001). W obszarze dołeczka Z-OD było większe w porównaniu do zmierzonego L-OD. Stosunek L-OD do Z-OD w centrum wynosił 1:2.61. Z-OD malało jako funkcja ekscentryczności w centrum dołeczka. W odległości 1 stopnia od centrum dołeczka stężenie Z-OD mierzone metodą reflektometrii uległo znacznemu zmniejszeniu, przy jednoczesnym wzroście L-OD. Stosunek L-OD do Z-OD w odległości 1 stopnia od centralnej fiksacji wynosił 1.38:1.0. W obszarze parafovealnym, w odległości 2 stopni od centralnej fiksacji, luteina stała się dominującym karotenoidem, a stosunek L-OD do Z-OD wyniósł 2.08:1.0. Tabele 4, 5 i 6 przedstawiają dane uzyskane od wszystkich ośmiorga badanych. Analiza tabel wykazuje oczywistą, znaczącą zmienność międzyosobniczą wartości L-OD, Z-OD i MPOD, co wskazuje na szerokie granice fizjologicznej normy.
<img alt="Konfiguracja stanowiska mikroskopii optycznej do obrazowania próbek; obejmuje mikroskop i podłączony laptop." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60429/60429fig1a.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1: Reflektometr pigmentu plamki. Reflektometr pigmentu plamki użyty w tym eksperymencie. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60429/60429fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Schemat spektroskopii optycznej; układ do pomiaru siatkówki; obejmuje spektrometr USB i źródło QH." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60429/60429fig2a.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2: Schemat operacyjny reflektometru pigmentu plamki. Schemat wewnętrznych układów operacyjnych urządzenia MPR. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60429/60429fig2large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Układ eksperymentalny do badania równowagi statycznej z obrazowaniem mikroskopowym; badanie rozkładu obciążenia na belce." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60429/60429fig3.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 3"> 
Rysunek 3: System toru pomiarów peryferyjnych. (A) Reflektometr pigmentu plamki z systemem toru peryferyjnego w odległości 6,1 m. (B) System toru z badaczem wskazującym diodę LED pod kątem 0 stopni. (C) Cały system w konfiguracji podczas badania uczestnika. (D) System toru z włączoną diodą LED pod kątem 1 stopnia. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60429/60429fig3large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Układ spektroskopowy wyświetlający emisję zależną od długości fali na spektrogramie w fałszywych kolorach." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/60429/60429fig4.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 4"> 
Rysunek 4: Okno wyświetlające suwaki używane do edycji pomiarów do pożądanego czasu. Suwaki służące do edycji pożądanego przedziału czasowego. Na obrazie pokazano usuwanie pierwszych 10 s. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/60429/60429fig4alarge.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody >
		<tr>
			<td>Dystans testowy [m]</td>
			<td>3</td>
			<td>4</td>
			<td>5</td>
			<td>6,1</td>
			<td>7</td>
			<td>8</td>
			<td>9</td>
			<td>10</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Odległość między światłami [m]</td>
			<td>0,052</td>
			<td>0,07</td>
			<td>0,087</td>
			<td>0,107</td>
			<td>0,122</td>
			<td>0,14</td>
			<td>0,157</td>
			<td>0,175</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Odległość między światłami utrwalającymi w zależności od odległości od celu. Odległość między światłami to wartość x w poniższym równaniu: 
<img alt="Trygonometria, równanie tan(1)=x/d, obliczanie kąta, pojęcie matematyczne, schemat edukacyjny." src="/files/ftp_upload/60429/60429eq1.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Równanie 1"> 
gdzie d to odległość testowa.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Przedmiot</td>
			<td>Wiek</td>
			<td>Płeć</td>
			<td>Przynależność etniczna</td>
			<td>Rasa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3002</td>
			<td>27</td>
			<td>F</td>
			<td>hiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Kaukazoid/Więcej niż jedna rasa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3003</td>
			<td>28</td>
			<td>F</td>
			<td>hiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Proszę podać tekst źródłowy do przetłumaczenia.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3004</td>
			<td>26</td>
			<td>F</td>
			<td>Niehiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Afroamerykanin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3005</td>
			<td>24</td>
			<td>M</td>
			<td>hiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Azjatycki/Więcej niż jedna rasa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3006</td>
			<td>27</td>
			<td>M</td>
			<td>Niehiszpańskojęzyczny</td>
			<td>azjatycki</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3007</td>
			<td>25</td>
			<td>F</td>
			<td>Niehiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Afroamerykanie</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3009</td>
			<td>29</td>
			<td>M</td>
			<td>hiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Rasa kaukaska/Więcej niż jedna rasa</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3010</td>
			<td>22</td>
			<td>M</td>
			<td>Niehiszpańskojęzyczny</td>
			<td>Azjatycki</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Dane demograficzne uczestników badania. Tabela przedstawia wiek, płeć i pochodzenie etniczne badanych uczestników. Średni wiek uczestników wynosił 26 lat. Stosunek liczby mężczyzn do kobiet wynosił 1:1. Zadeklarowane pochodzenie etniczne uczestników obejmowało 50% osób pochodzenia hiszpańskiego oraz około 37,5% osób pochodzenia azjatyckiego lub więcej niż jednej rasy.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td></td>
			<td>Średnia wartość L-OD</td>
			<td>Średnie Z-OD</td>
			<td>MPOD metodą średniej reflektometrii</td>
			<td>Średni stosunek Z-L</td>
			<td>Fotometria średniego migotania MPOD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centralny</td>
			<td>0.247</td>
			<td>0.425</td>
			<td>0.593</td>
			<td>2.61:1</td>
			<td>0.48</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Obwodowe 1 stopień</td>
			<td>0.402</td>
			<td>0.122</td>
			<td>0.248</td>
			<td>1:1.38</td>
			<td>Niedostępne</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Obwodowe 2 stopnie</td>
			<td>0.366</td>
			<td>0.03</td>
			<td>0.143</td>
			<td>1:2.08</td>
			<td>Niedostępne</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 3: Średnie wartości karotenoidów dla różnych ekscentryczności. Tabela przedstawia średnie wyniki ośmiu uczestników badania. SD dla średniego centralnego L-OD (0,188) oraz średniego centralnego Z-OD (0,142). SD dla średniego centralnego MPOD pomiaru MPR (0,161) oraz SD dla średniego centralnego MPOD pomiaru reflektometrem (0,14). SD dla średniego L-OD w obszarze obwodowym 1 stopnia (0,224) oraz średniego Z-OD w obszarze obwodowym 1 stopnia (0,122). SD dla średniego MPOD pomiaru MPR w obszarze obwodowym 1 stopnia (0,248). SD dla średniego L-OD w obszarze obwodowym 2 stopni (0,366) oraz SD dla średniego Z-OD w obszarze obwodowym 2 stopni (0,030). SD dla średniego MPOD pomiaru MPR w obszarze obwodowym 2 stopni (0,143).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Uczestnik</td>
			<td>L-OD</td>
			<td>Z-OD</td>
			<td>MPOD (makularna gęstość pigmentu)</td>
			<td>Stosunek Z/L</td>
			<td>MPS</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3002</td>
			<td>0.525</td>
			<td>0.409</td>
			<td>0.669</td>
			<td>0.778</td>
			<td>0.58</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3003</td>
			<td>0.566</td>
			<td>0.415</td>
			<td>0.6525</td>
			<td>0.733</td>
			<td>0.48</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3004</td>
			<td>0.1615</td>
			<td>0.291</td>
			<td>0.437</td>
			<td>1.793</td>
			<td>0.437</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3005</td>
			<td>0.121</td>
			<td>0.414</td>
			<td>0.555</td>
			<td>3.432</td>
			<td>0.555</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3006</td>
			<td>0.148</td>
			<td>0.724</td>
			<td>0.888</td>
			<td>4.892</td>
			<td>0.888</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3007</td>
			<td>0.074</td>
			<td>0.389</td>
			<td>0.536</td>
			<td>5.257</td>
			<td>0.536</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3009</td>
			<td>0.197</td>
			<td>0.26</td>
			<td>0.361</td>
			<td>1.32</td>
			<td>0.361</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3010</td>
			<td>0.183</td>
			<td>0.496</td>
			<td>0.642</td>
			<td>2.71</td>
			<td>0.642</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 4: Indywidualne pomiary gęstości optycznej karotenoidów uzyskane przy fiksacji centralnej. Tabela przedstawia pomiary uzyskane przy fiksacji centralnej dla wszystkich ośmiu uczestników.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Uczestnik</td>
			<td>L-OD</td>
			<td>Z-OD</td>
			<td>MPOD</td>
			<td>Stosunek Z-L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3002</td>
			<td>0.325</td>
			<td>0</td>
			<td>0.012</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3003</td>
			<td>0.385</td>
			<td>0.08</td>
			<td>0.166</td>
			<td>0.208</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3004</td>
			<td>0.121</td>
			<td>0.253</td>
			<td>0.392</td>
			<td>2.091</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3005</td>
			<td>0.7015</td>
			<td>0</td>
			<td>0.119</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3006</td>
			<td>0.362</td>
			<td>0.286</td>
			<td>0.45</td>
			<td>0.79</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3007</td>
			<td>0.104</td>
			<td>0.265</td>
			<td>0.391</td>
			<td>2.548</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3009</td>
			<td>0.589</td>
			<td>0</td>
			<td>0.183</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3010</td>
			<td>0.626</td>
			<td>0.094</td>
			<td>0.273</td>
			<td>0.15</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 5: Pomiary gęstości optycznej poszczególnych karotenoidów uzyskane w odległości 1 stopnia od centralnej fiksacji. Tabela przedstawia pomiary uzyskane w odległości 1 stopnia od centralnej fiksacji dla wszystkich ośmiu uczestników.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Uczestnik</td>
			<td>L-OD</td>
			<td>Z-OD</td>
			<td>MPOD</td>
			<td>Stosunek Z-L</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3002</td>
			<td>0.146</td>
			<td>0</td>
			<td>0.043</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3003</td>
			<td>0.351</td>
			<td>0</td>
			<td>0.066</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3004</td>
			<td>0.063</td>
			<td>0.077</td>
			<td>0.169</td>
			<td>1.222</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3005</td>
			<td>0.189</td>
			<td>0.017</td>
			<td>0.067</td>
			<td>0.09</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3006</td>
			<td>0.902</td>
			<td>0</td>
			<td>0.291</td>
			<td>0</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3007</td>
			<td>0.04</td>
			<td>0.099</td>
			<td>0.201</td>
			<td>2.475</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3009</td>
			<td>0.718</td>
			<td>0.046</td>
			<td>0.232</td>
			<td>0.064</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3010</td>
			<td>0.518</td>
			<td>0</td>
			<td>0.076</td>
			<td>0</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 6: Pomiary gęstości optycznej poszczególnych karotenoidów uzyskane w odległości 2 stopni od centralnego punktu fiksacji. Tabela przedstawia pomiary uzyskane w odległości 2 stopni od centralnego punktu fiksacji dla wszystkich ośmiu uczestników.

Przedstawiamy protokół do określania poziomów ogólnej gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej, luteiny i zeaksantyny w centralnych i przydołkowych obszarach siatkówki. Protokół obejmuje nowatorski regulowany system torów używany do pomiaru gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej w mimośrodzie dołka.

Pomiar karotenoidów w peryfovea za pomocą reflektometru pigmentu plamki żółtej

The macular pigment reflectometer (MPR) objectively measures the overall macular pigment optical density (MPOD) and further provides the lutein optical ...

Urządzenie, które może obiektywnie określić poziomy gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej, a także pomiary luteiny i zeaksantyny, stanowi duży przełom w dziedzinie pomiaru pigmentu plamki żółtej. W ramach obecnego badania rozwinięto techniczną zdolność do modyfikacji reflektometrii w celu uzyskania poziomów karotenoidów w obszarach parafovea i parafoveal bez żadnych zmian w optyce reflektometrycznej. W naszym obecnym badaniu rozwinęliśmy techniczną zdolność do modyfikacji reflektometrii tak, abyśmy mogli uzyskać poziomy karotenoidów w obszarach paradołka i dołka.Robimy to bez żadnych zmian w optyce reflektometru. Upewnij się, że badany rozumie potrzebę prawidłowej zbieżności na etapie kalibracji. Nawilżające oczy zwiększają komfort fotografowanego obiektu.Regulacja mrugania obiektu i końcowe odliczanie poprawia zgodność. Demonstracja wizualna ma kluczowe znaczenie, ponieważ jest to prototyp i znacznie różni się od istniejącej technologii. Operacja bez bycia świadkiem wykonywania właściwej procedury może być myląca.Rozpocznij tę procedurę od rekrutacji uczestników zgodnie z opisem w protokole tekstowym. Uzyskaj przesuwną szynę z aluminiową szyną o długości około jednego metra, która zawiera puste wgłębienie z miejscem na przesuwną szynę, taką jak listwa uszczelniająca drzwi. Zamontuj tor w odległości 6.1 metra od osoby siedzącej przy reflektometrze pigmentu plamki żółtej lub MPR, aby wykonać pomiary reflektometryczne.Upewnij się, że tor znajduje się 1.5 metra nad ziemią, aby znajdował się na tej samej wysokości co oko uczestnika podczas pomiaru reflektometrycznego. Zamontuj trzy zdalnie sterowane lampy LED o wymiarach jeden centymetr na jeden centymetr na przesuwnej szynie tak, aby środki świateł były oddalone od siebie o 10,7 centymetra. Wartość ta została określona na podstawie odległości, w jakiej od uczestnika znajduje się każde światło LED.Aby wykonać pomiary centralne za pomocą reflektometru, wprowadź informacje o uczestniku do oprogramowania reflektometru. Następnie kliknij kartę Uruchom test wzroku. Kalibrację spektrometru w reflektometrze należy przeprowadzić raz dziennie na próbkę bieli o pełnym spektrum, gdy urządzenie jest włączone przez technika.Uczestnik nie jest potrzebny do tego kroku. Kliknij biały przycisk obok opcji Kalibruj. Włóż białą rurkę kalibracyjną do reflektometru po wyświetleniu na ekranie komunikatu instruującego użytkownika, aby włożył białą rurkę kalibracyjną.Kliknij OK po włożeniu białej rurki kalibracyjnej, aby rozpocząć białą kalibrację. Po wyświetleniu na ekranie białego komunikatu o powodzeniu kalibracji upewnij się, że przycisk obok opcji Kalibruj jest włączony. Aby wykonać kalibrację czerni, najpierw wlej kroplę sztucznych łez do oczu uczestnika.Następnie poproś uczestnika, aby położył podbródek na podbródku. Poinstruuj uczestnika, aby zbliżył oko do muszli ocznej. Za pomocą joysticka delikatnie ustaw system tak, aby muszla oczna dociskała się do oczodołu uczestnika i blokowała dopływ światła w pomieszczeniu do systemu.Kliknij przycisk, aby wybrać opcję Kalibruj, a następnie dopasuj system do źrenicy uczestnika. Prawidłowe wyrównanie uzyskuje się, gdy źrenica jest wyśrodkowana w okręgu wyświetlanym na monitorze dotykowym. Więc będziesz po prostu obracać małe pokrętło i próbujesz znaleźć Poinstruuj uczestnika, aby wyregulował obrotowe pokrętło z przodu systemu, aby uzyskać wyraźny cel.Kliknij przycisk OK, gdy uczestnik prawidłowo dostosuje system do swojego wzroku. System automatycznie przeprowadzi czarną sekwencję kalibracji. Po pomyślnym zakończeniu kalibracji czerni przyciski Lewe Oko i Prawe Oko zostaną włączone, a na ekranie pojawi się komunikat o powodzeniu kalibracji czerni.Aby rozpocząć pomiar, kliknij przycisk Lewe oko lub Prawe oko na ekranie, w zależności od tego, które oko jest mierzone. Upewnij się, że system wyświetla komunikat Wyrównaj system do oka obiektu. Upewnij się, że system jest dopasowany do źrenicy uczestnika.Użyj joysticka, aby dokonać precyzyjnych regulacji. Kliknij przycisk OK na ekranie, aby rozpocząć pomiar gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej lub MPOD. Czas pomiaru wynosi 30 sekund, przy czym minimum 10 sekund potrzeba na uzyskanie parametrów i wyników.U góry ekranu pojawi się minutnik pokazujący, ile czasu pozostało do pomiaru. Upewnij się, że mrugasz tylko wtedy, gdy ci powiem, dobrze? Poproś uczestnika, aby spojrzał na lampkę fiksacyjną i zachęć go, aby mrugał tylko wtedy, gdy jest to konieczne.Użyj joysticka podczas pomiaru, aby upewnić się, że system pozostaje w jednej linii ze źrenicą uczestnika. Upewnij się, że po zakończeniu pomiaru system wyświetla komunikat Pomiar powiódł się. Kliknij przycisk OK, aby zakończyć.Powtórz kroki kalibracji i pomiaru czerni, aby w razie potrzeby przetestować drugie oko. Cały proces trwa około dwóch do trzech minut. Po wykonaniu kalibracji bieli i czerni rozpocznij kalibrację ścieżki peryferyjnej, naciskając przycisk lewe oko lub prawe oko na ekranie, w zależności od tego, które oko ma być mierzone.System wyświetli komunikat Wyrównaj system do oka fotografowanej osoby. Upewnij się, że system jest dopasowany do źrenicy uczestnika. Użyj joysticka, aby dokonać precyzyjnych regulacji.Włącz światło LED na systemie torów, który znajduje się najdalej na prawo od uczestnika. W tym czasie uczestnik powinien być w stanie zobaczyć zarówno światło z wnętrza reflektometru prawym okiem, jak i czerwone światło LED lewym okiem. W porządku, więc w następnej sekcji pójdziesz dalej i powiesz Shorty'emu, aby albo przesunął go w lewo, albo w prawo.Poinstruuj uczestnika, aby poinstruował wyszkolonego obserwatora, aby dostosował tor peryferyjny do momentu, gdy będzie mógł nałożyć oba bodźce najlepiej jak potrafi. Zmienność odległości nałożonego punktu kalibracji wynika z różnic anatomicznych. Aby rozpocząć pomiar, wyłącz diodę LED i włącz następną diodę LED, aby przeprowadzić kolejny pomiar mimośrodu o jeden stopień.Więc teraz idziemy dalej i przesuniemy to czerwone światło. Więc wiem, że światło będzie się poruszać, ale po prostu wyjaśnij uczestnikowi, że musi patrzeć na nowe czerwone światło LED przez cały pomiar. Kliknij przycisk OK na ekranie, aby rozpocząć pomiar MPOD.Czas pomiaru wynosi 30 sekund. U góry ekranu pojawi się minutnik pokazujący, ile czasu pozostało do pomiaru. Poproś uczestnika, aby spojrzał na odpowiednią czerwoną diodę LED i zachęć go, aby mrugał tylko wtedy, gdy jest to konieczne.Użyj joysticka podczas pomiaru, aby upewnić się, że system pozostaje w jednej linii ze źrenicą uczestnika. Upewnij się, że po zakończeniu pomiaru system wyświetla komunikat Pomiar powiódł się. Kliknij przycisk OK, aby zakończyć.Powtórz te kroki, aby ponownie wykonać pomiar. Dla każdego stopnia zalecane są dwa pomiary, aby umożliwić porównanie. Aby powtórzyć pomiary przy innym mimośrodzie siatkówki, zmień stopień separacji.Poniżej przedstawiono główne wyniki MPOD uzyskane przez oba urządzenia, a także L-OD i Z-OD wszystkich uczestników biorących udział w badaniu przy różnych mimośrodach. Średni MPOD uzyskany przez heterochromatyczny fotometr migotania wynosił 0,480, a uzyskany techniką reflektometryczną 0,593. Z-OD był większy centralnie w porównaniu z L-OD mierzonym w okolicy dołka.Stosunek Z-OD do L-OD w centralnie wynosił 2,61:1. Z-OD zmniejszył się w funkcji mimośrodu w centrum dołka centralnego. W odległości jednego stopnia od dołka centralnego stężenie Z-OD mierzone za pomocą reflektometrii znacznie spadało wraz ze wzrostem L-OD.Stosunek Z-OD do L-OD przy jednym stopniu od centralnego mocowania wynosił 1,0:1,38. W okolicy przydołkowej w odległości dwóch stopni od centralnego unieruchomienia luteina stała się dominującym karotenoidem, a stosunek Z-OD do L-OD wynosił 1,0: 2,08. Poniżej przedstawiono dane uzyskane od wszystkich ośmiu badanych.Analizując tabelę, oczywiste jest, że istnieje znaczna zmienność międzyosobnicza wartości L-OD, Z-OD i MPOD, co wskazuje, że fizjologiczne granice normalności mogą być duże. Jeśli krok kalibracji nie zostanie prawidłowo wykonany, wyniki będą niewiarygodne. Dlatego tak ważna jest edukacja przedmiotowa i techniczna.W tej procedurze nie stosuje się żadnego ryzyka ani materiałów niebezpiecznych. Jednak nadal istnieje ryzyko ogólnego badania wzroku, takiego jak tropikamid 1% stosowany w celu rozszerzenia oczu, co może powodować wzrost ciśnienia wewnątrzgałkowego, jeśli kąty są wąskie. Urządzenie reflektometryczne ma zalety pomiaru gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej w łatwy w użyciu, obiektywny sposób, który odbywa się bez udziału pacjenta, a także może zapewnić poziom luteiny i zeaksantyny.

measurement-carotenoids-perifovea-using-macular-pigment

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Analiza obrazu siatkówki to dyskretna procedura wizualizacji mikrokrążenia. Wpływ czynników ryzyka chorób sercowo-naczyniowych może powodować zmiany kalibrów naczyń siatkówki. Opisano procedury pozyskiwania obrazów dna oka oraz etapy obliczania kalibrów statków.

Fotografia dna oka jako wygodne narzędzie do badania odpowiedzi mikronaczyniowych na czynniki ryzyka chorób sercowo-naczyniowych w badaniach epidemiologicznych

Nabłonek barwnikowy siatkówki (RPE) wspiera siatkówkę czuciową poprzez recykling produktów ubocznych cyklu wzrokowego, które gromadzą się jako lipofuscyna. Produkty te są autofluorescencyjne i mogą być jakościowo obrazowane in vivo. W tym miejscu opisujemy metodę ilościowego obrazowania lipofuscyny RPE za pomocą konfokalnej skaningowej oftalmoskopii laserowej.

Ilościowa autofluorescencja dna oka w ocenie chorób siatkówki

Ludzka siatkówka składa się z funkcjonalnie i molekularnie odrębnych regionów, w tym dołka, plamki żółtej i siatkówki obwodowej. W tym miejscu opisujemy metodę wykorzystującą biopsje stemplowe i ręczne usuwanie warstw tkanek z ludzkiego oka w celu wypreparowania i zebrania tych odrębnych obszarów siatkówki do dalszej analizy proteomicznej.

Rozwarstwienie ludzkiej siatkówki i naczyniówki RPE w celu analizy proteomicznej

Opisujemy ocenę współczynnika determinacji między gęstością naczynia a gęstością perfuzji powierzchownego splotu kapilarycznego przydołkowego, aby określić udział naczyń większych niż naczynia włosowate w gęstości perfuzji.

Ocena udziału naczyń włosowatych i innych naczyń w gęstości perfuzji plamki żółtej mierzonej za pomocą angiografii optycznej koherentnej tomografii

Modele myszy mogą być użytecznymi narzędziami do badania biologii nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE). Ustalono, że u myszy może rozwinąć się szereg patologii RPE. W tym miejscu opisujemy protokół fenotypowania w celu wyjaśnienia i ilościowego określenia patologii RPE u myszy za pomocą światła, elektronów transmisyjnych i mikroskopii konfokalnej.

Protokół oceny i ilościowego określenia patologii barwnikowego nabłonka siatkówki w mysich modelach zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem

To badanie opisuje proces określania i porównywania poziomów autofluorescencji z poszczególnych obszarów zainteresowania (np. druzy i podsiatkówkowych złogów druzenoidowych w zwyrodnieniu plamki żółtej związanym z wiekiem [AMD]) przy jednoczesnym uwzględnieniu różnych poziomów autofluorescencji w całym dnie.

Przepływ pracy w celu ilościowego określenia zmian w autofluorescencji dna plamki zwyrodnienia plamki żółtej związanych z wiekiem

Testy laboratoryjne mogą wykorzystać wartość prognostyczną z multimodalnego obrazowania zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem (AMD) opartego na podłużnej optycznej tomografii koherentnej (OCT). Ludzkie oczy dawcy z AMD i bez AMD są obrazowane za pomocą OCT, koloru, skaningowej oftalmoskopii laserowej w bliskiej podczerwieni i autofluorescencji na dwóch długościach fal wzbudzenia przed sekcją tkanki.

Ex vivo Multimodalne obrazowanie oczu ludzkiego dawcy oparte na OCT do badań nad zwyrodnieniem plamki żółtej związanym z wiekiem

Ten protokół opisuje model akumulacji lipofuscyny w wysoce zróżnicowanych i spolaryzowanych kulturach ludzkiego nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE) oraz ulepszony test fagocytozy zewnętrznego segmentu (OS) w celu wykrycia całkowitej zdolności ZORE/degradacji OS. Metody te przezwyciężają ograniczenia poprzednich modeli lipofuscyny i klasycznych testów fagocytozy zewnętrznego segmentu z pościgiem impulsowym.

Ulepszone modele lipofuscyny i kwantyfikacja zdolności fagocytozy segmentu zewnętrznego w wysoce spolaryzowanych kulturach nabłonka barwnikowego ludzkiej siatkówki

Tutaj opisana jest metoda wysokosprawnej chromatografii cieczowej fazy normalnej, mająca na celu wykrywanie i ilościowe określanie krytycznych retinoidów zaangażowanych w ułatwianie funkcji wzrokowych zarówno w tkance ocznej, jak i ogólnoustrojowej, w kontekście ogólnoustrojowego dostarczania witaminy A do wytwarzania niezbędnego światłoczułego chromoforu rodopsyny 11-cis-retinal.

Analiza ilościowa metabolitów witaminy A w diecie metabolitów witaminy A w mysich tkankach ocznych i nieocznych przy użyciu wysokosprawnej chromatografii cieczowej

Tutaj opisujemy dwie ilościowe metody badania oddziaływań białko-ligand receptorów błonowych witaminy A i opsyny fotoreceptorów z ich odpowiednimi fizjologicznymi ligandami.

Metodologia badania oddziaływań receptorów błonowych witaminy A i białka opsyny z ich ligandami w wytwarzaniu białka retinylidenu

Poznaj protokół pomiaru gęstości optycznej pigmentu plamki żółtej i karotenoidów w peryfovea za pomocą modyfikowanej reflektometrii. Ta metoda poprawia precyzję badań nad zdrowiem siatkówki.

Pomiar karotenoidów w peryfovea za pomocą reflektometru pigmentu plamki żółtej

Przeglądaj więcej filmów