Wykrywanie transkryptów RNA białka antysensownego (ASP) ludzkiego wirusa niedoboru odporności typu 1 (HIV-1) u pacjentów za pomocą RT-PCR swoistego dla nici

6.9K wyświetleń

Cytowany 3 razy

08:01 min

27 listopada 2019

10.3791/60511-v

27 listopada 2019

6.9K wyświetleń

Antonio Mancarella¹ , Francesco A. Procopio¹ , Tilmann Achsel² , Elisa De Crignis³ , Brian T. Foley⁴ , Giampietro Corradin⁵ , Claudia Bagni² , Giuseppe Pantaleo¹ , Cecilia Graziosi¹

¹Division of Immunology and Allergy, Lausanne University Hospital, ²Department of Fundamental Neuroscience, University of Lausanne, ³Department of Biochemistry, Erasmus Medical Center, ⁴Theoretical Biology and Biophysics Group, Los Alamos National Laboratories, ⁵Department of Biochemistry, University of Lausanne

Spinki i pętle RNA mogą funkcjonować jako startery do odwrotnej transkrypcji (RT) w przypadku braku starterów specyficznych dla sekwencji, zakłócając badanie nakładających się na siebie transkryptów antysensownych. Opracowaliśmy technikę zdolną do identyfikacji swoistego dla nici RNA i wykorzystaliśmy ją do badania białka antysensownego HIV-1 ASP.

Przeglądaj więcej filmów

Startery biotylowane

denaturacja RNA

magnetyczne kulki streptawidynowe

detekcja RNA ASP

limfocyty T CD4

zapobieganie niespecyficznemu cDNA

elektroforeza w elu

Chapters in this video

0:04

Title

1:14

Reverse Transcription and RNA Isolation

2:49

Affinity Purification of ASP Biotinylated cDNA

4:29

Standard PCR

5:10

Results: ASP RNA Detection in CD4+ Cells from HIV Patients

6:56

Conclusion

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Wszelkie prawa zastrzeżone.