Name: Inkubacja strachu przy użyciu rozszerzonego protokołu warunkowania strachu dla szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-22T13:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 38 s
Description: Poznaj rozszerzony protokół warunkowania strachu dla szczurów, który pozwala badać inkubację strachu i pamięć emocjonalną w krótkim oraz długim okresie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Wsparcie finansowe dla tych badań zostało zapewnione przez Fundación Universitaria Konrad Lorenz - grant numer 9IN15151. Autorzy pragną podziękować Działowi Komunikacji Uniwersytetu Konrada Lorenza za pomoc w nagraniu i montażu filmu, a w szczególności Natalii Riverze i Andrésowi Serrano (producenci). Nicole Pfaller-Sadovsky i Lucia Medina za komentarze do manuskryptu oraz Johanna Barrero, dziekan Corporacion Universitaria Iberoamericana, za współpracę instytucjonalną. Autorzy nie pozostają w konflikcie interesów.

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Obecny rozszerzony protokół warunkowania strachu jest skutecznym i ważnym podejściem do oceny pamięci emocjonalnej w krótkich (48 godzin) i długoterminowych okresach (6 tygodni). Tym samym protokół pozwala na badanie zjawisk przetrenowania i inkubacji strachu u szczurów. Wśród różnych zalet tego protokołu są następujące. Oferuje dwa rodzaje testów pamięciowych, a mianowicie kontekst i cue, które pozwalają zidentyfikować efekt różnicowy dwóch opóźnień (48 godzin i 6 tygodni) w manipulacjach kontekstem i cue. Po drugie, za...

Pamięć to proces psychologiczny obejmujący różne fazy: zdobywanie informacji, konsolidację (pozwala na stabilność nabytych informacji) i wyszukiwanie (dowody na proces konsolidacji)1. W fazie konsolidacji dochodzi do tworzenia nowych połączeń synaptycznych i modyfikacji wcześniej istniejących połączeń. Sugeruje to konieczność istnienia okresu czasu, w którym zachodzą zdarzenia molekularne i fizjologiczne odpowiedzialne za te zmiany1,2. Te fizjologiczne lub molekularne zmiany różnią się w zależności od tego, czy odzyskane zdarzenia są naładowane emocjonalnie, czy nie (tj. pamięć emocjonalna). Na przykład badania wykazały, że jądro boczne i kompleks ciała migdałowatego podstawno-bocznego są szczególnie istotne dla pamięci emocjonalnej3,4,5.
Zjawiska pamięci emocjonalnej były głównie badane za pomocą paradygmatów warunkowania strachu5,6. Warunkowanie strachu jest formą uczenia się, dzięki której jednostki uczą się relacji między zdarzeniami awersyjnymi a bodźcami neutralnymi7. Paradygmaty warunkowania strachu powodują zmiany molekularne, komórkowe i strukturalne w ciele migdałowatym. Ponadto warunkowanie strachu modyfikuje łączność hipokampa podczas procesów konsolidacji i odzyskiwania pamięci emocjonalnej.
Jedną z najczęściej używanych procedur do badania wspomnień strachu jest klasyczne (Pawłowa) warunkowanie u szczurów. Ta procedura zazwyczaj wykorzystuje wstrząs stopą (US) jako bodziec awersyjny, który jest dostarczany raz lub kilka razy w ciągu jednej lub kilku sesji. Reakcją warunkową (CR) szczurów poddanych tej procedurze jest zamrożenie (tj. "uogólniony bezruch spowodowany uogólnioną reakcją toniczną mięśni szkieletowych zwierząt, z wyjątkiem mięśni używanych w oddychaniu"7 ). Odpowiedź tę można ocenić za pomocą dwóch rodzajów testów: testów kontekstowych i testów podpowiedzi. W teście kontekstowym badany przechodzi określoną liczbę wstrząsów stopą podczas sesji treningowej, a następnie jest usuwany z komory eksperymentalnej na określony czas. Podczas testu badany jest przenoszony do tego samego kontekstu, w którym odbywał się trening, i zbierane są różne miary zamrożenia w przypadku braku wstrząsów stopą (np. czas trwania, procent lub częstotliwość epizodów zamrożenia) i porównywane z poziomami wyjściowymi ustalonymi podczas fazy treningu. W przypadku drugiego rodzaju testu, testu wskazówek, bodziec (zazwyczaj ton) jest sparowany z wstrząsami stopy podczas fazy treningu (tj. bodziec warunkowy, CS). Po zakończeniu szkolenia zwierzę jest usuwane z kontekstu treningowego na określony czas, a następnie umieszczane w zmodyfikowanym kontekście (np. w innej komorze doświadczalnej, która ma inne kształty ścian i inny zapach). Cue jest następnie prezentowany określoną liczbę razy, a reakcje zamrożenia na cue są mierzone i porównywane z poziomami wyjściowymi zebranymi podczas treningu. Najpowszechniejsza wersja tego paradygmatu wykorzystuje od 1 do 3 par ton-shock podczas jednej sesji treningowej, a następnie testy kontekstu i wskazówek przeprowadzane przez kilka godzin lub kilka dni później.
Inne, rzadziej wdrażane procedury warunkowania strachu obejmują dużą liczbę par sygnałów szokujących (tj. prób), które często nazywano procedurami przetrenowania8. Rosnące zainteresowanie tymi zadaniami jest związane z ich długotrwałymi i zwiększonymi efektami pamięciowymi zwanymi inkubacją strachu (tj. uwarunkowane reakcje strachu nasilają się z czasem przy braku dalszej ekspozycji na zdarzenia awersyjne lub bodźce warunkowe)9,10,11. Przykładem takich procedur przetrenowania jest faza treningowa składająca się ze 100 par ton-shock rozłożonych na 10 sesji, po której następują testy kontekstu i wskazówek przeprowadzane 48 godzin i 30 dni później11,12. Aby uniknąć intensywnego treningu rozłożonego na kilka dni, Maren (1998) poinformowała, że przetrenowanie można ustalić i zoptymalizować w jednej sesji z 25 parami8. Efekt inkubacji jest udowodniony w znacznie wyższym poziomie uwarunkowanego strachu u szczurów badanych 31 dni po treningu, w porównaniu ze szczurami testowanymi 48 godzin po. Rozszerzone zadania warunkowania strachu były kluczem do zrozumienia behawioralnych i neurobiologicznych aspektów leżących u podstaw inkubacji strachu, w tym jej związku z innymi zjawiskami psychologicznymi (np. zespołem stresu pourazowego o opóźnionym początku)11,12,13.
Tutaj opisujemy rozszerzony protokół warunkowania strachu, który wywołuje przetrenowanie i inkubację strachu u szczurów. W przeciwieństwie do innych paradygmatów, które wymagają kilku dni treningu11, obecny protokół koncentruje się na pojedynczej sesji treningowej8. Użyliśmy 25 par ton-szok, aby uzyskać wyższe reakcje warunkowego zamrożenia podczas testów kontekstowych i cue przeprowadzonych 6 tygodni po treningu, w porównaniu z testami przeprowadzonymi 48 godzin po.

<table><tbody><tr><td>Kwas octowy (kwas etanowy)</td><td></td><td></td><td>https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/acetic_acid</td></tr><tr><td>Pakiet prądowy stymulacji awersyjnej</td><td>MED Associates Inc</td><td>ENV-420</td><td>https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/</td></tr> <tr><td>Test kontekstowy protocol.pro</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ Test Cue protocol.pro</td><td></td><td></td><td>http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ</td></tr><tr><td>Zakrzywiona wkładka</td><td>ścienna MED Associates Inc</td><td>VFC-008-CWI</td><td>https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/</td></tr> <tr><td>Data processing.zip</td><td></td><td></td><td>http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ</td></tr><tr><td>Skrzynka kontrolna NIR/światła białego</td><td>MED Associates Inc</td><td>NIR-100</td><td></td></tr><tr><td>Szybka wymiana Jednostka podłogowa/patelnia do myszy</td><td>MED Associates Inc</td><td>ENV-005FPU-M</td><td>https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/</td></tr> <tr><td>Mała szafka stołowa i zasilacz</td><td>MED Associates Inc</td><td>SG-6080D</td><td>https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/</td></tr> <tr><td>Samodzielny stymulator awersyjny/scrambler (115 V / 60 Hz)</td><td>MED Associates Inc</td><td>ENV-414S</td><td>https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/</td></tr> <tr><td>Standardowa komora do kondycjonowania strachu</td><td>MED Associates Inc</td><td>VFC-008</td><td>https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/</td></tr> <tr><td>Protokół treningowy VFC.pro</td><td></td><td></td><td>http://doi.org/10.17605/OSF.IO/4NKFQ</td></tr><tr><td>Pakiet kondycjonowania strachu wideo dla szczura</td><td>MED Associates Inc</td><td>MED-VFC-SCT-R</td><td></td></tr></tbody></table> https://www.med-associates.com/product-category/video-fear-packages-for-rat/

inkubacja strachu przy użyciu rozszerzonego protokołu warunkowania strachu dla szczurów

Fear Incubation Using an Extended Fear-Conditioning Protocol for Rats

Pamięć emocjonalna była przede wszystkim badana za pomocą paradygmatów warunkowania strachu. Warunkowanie strachu jest formą uczenia się, dzięki której jednostki uczą się relacji między awersyjnymi zdarzeniami a innymi neutralnymi bodźcami. Najpowszechniej stosowane procedury badania wspomnień emocjonalnych wiążą się z warunkowaniem strachu u szczurów. W tych zadaniach bodziec bezwarunkowy (US) to wstrząs stopy prezentowany raz lub kilka razy w ciągu jednej lub kilku sesji, a reakcja warunkowa (CR) to zamrożenie. W wersji tych procedur, zwanej warunkowaniem strachu z sygnałem, ton (bodziec warunkowy, CS) jest połączony z wstrząsami stóp (US) podczas fazy treningu. Podczas pierwszego badania zwierzęta są wystawione na ten sam kontekst, w którym odbywało się szkolenie, a reakcje zamrażania są testowane przy braku wstrząsów stopami i tonów (tj. test kontekstowy). Podczas drugiego testu mierzy się zamrożenie, gdy zmienia się kontekst (np. poprzez manipulowanie zapachem i ścianami komory doświadczalnej), a ton jest prezentowany przy braku wstrząsów stopą (tj. test wskazówek). Większość procedur warunkowania strachu z sygnałem obejmuje kilka par ton-szok (np. 1-3 próby w jednej sesji). Rośnie zainteresowanie mniej powszechnymi wersjami obejmującymi dużą liczbę par (tj. przetrenowanie) związanych z długotrwałym efektem zwanym inkubacją strachu (tj. reakcje strachu nasilają się z czasem bez dalszej ekspozycji na zdarzenia awersyjne lub bodźce warunkowe). Rozszerzone zadania warunkowania strachu były kluczem do zrozumienia behawioralnych i neurobiologicznych aspektów inkubacji strachu, w tym jej związku z innymi zjawiskami psychologicznymi (np. zespołem stresu pourazowego). Tutaj opisujemy rozszerzony protokół warunkowania strachu, który powoduje przetrenowanie i inkubację strachu u szczurów. Protokół ten obejmuje pojedynczą sesję treningową z 25 parami ton-shock (tj. przetrenowanie) i porównaniem reakcji warunkowego zamrażania podczas testów kontekstowych i cue 48 godzin (krótkoterminowo) i 6 tygodni (długoterminowo) po treningu.

Analizowano zmiany procentowego czasu unieruchomienia w różnych etapach sesji treningowej dla wszystkich badanych osobników (n = 12) przy użyciu testu t dla zależnych grup (Tabela 1). Zwierzęta były aktywne i eksplorowały komorę doświadczalną przez pierwsze trzy minuty sesji treningowej (pierwszy dzień protokołu), w czasie których nie podawano żadnych dźwięków ani bodźców elektrycznych (tj. okres podstawowy – BL). Jak pokazano na Rysunku 2A</stro...

Opisujemy rozszerzony protokół warunkowania strachu, który powoduje przetrenowanie i inkubację strachu u szczurów. Protokół ten obejmuje pojedynczą sesję treningową z 25 parami ton-shock (tj. przetrenowanie) i porównaniem reakcji warunkowego zamrażania podczas testów kontekstowych i cue 48 godzin (krótkoterminowo) i 6 tygodni (długoterminowo) po treningu.

Inkubacja strachu przy użyciu rozszerzonego protokołu warunkowania strachu dla szczurów

Emotional memory has been primarily studied with fear-conditioning paradigms. Fear conditioning is a form of learning through which individuals learn the ...

Pamięć to proces psychologiczny, który obejmuje różne fazy zdobywania, utrwalania i wyszukiwania informacji. W fazie konsolidacji następuje tworzenie nowych połączeń synaptycznych i modyfikacja wcześniej istniejących połączeń. Ta faza konsolidacji zależy od wartości bodźców z silniejszym śladem pamięciowym, gdy bodźce są emocjonalnie istotne.Większość badań nad pamięcią emocjonalną koncentrowała się na jądrze ciała migdałowatego i jego związkach z innymi strukturami mózgu. Zjawisko to badano przede wszystkim za pomocą paramentów warunku strachu. Stan strachu jest formą uczenia się, która umożliwia poznanie relacji między zdarzeniami awersyjnymi a bodźcami neutralnymi.Jedną z najczęściej stosowanych procedur jest warunkowanie klasyczne lub Pawłowa u ssaków. W tym gryzonie i ludzie. W przypadku gryzoni symbole warunków lub US to zazwyczaj obraz, który jest prezentowany jeden lub kilka razy w ciągu jednej lub kilku sesji.Protokoły warunkowania strachu zazwyczaj pociągają za sobą wstrząsy o długości od jednej do dwóch ton. Jednak inna, rzadziej stosowana niechęć dotyczy obszernych, niespalonych łożysk. Nazywa się to treningiem awersyjnym, który powoduje długotrwały efekt pamięci zwany inkubacją strachu.Inkubacja strachu pociąga za sobą wzrost intensywności reakcji warunkowej w czasie. Te w zdenerwowaniu spowodowanym dalszą ekspozycją na inne takie zdarzenia lub bodźce warunkowe. Niedawne zrozumienie inkubacji strachu w nerwach behawioralnych i neurobiologicznych wykazało izolację od innych gryzoni i zjawisk psychologicznych, w tym opóźnioną odpowiedź na niektóre zaburzenia. Tutaj opisujemy rozszerzający się stan strachu w kwiecie wieku, w którym testowaliśmy pamięć kontekstową i podpowiedziową przez 48 godzin i sześć tygodni po i ponad 20 sesjach.To pozwala nam przetestować siłę pamięci emocjonalnej w czasie. Wybierz 12 samców, dorosłych szczurów Wistar i trzymaj je w grupach po cztery osoby w klatce, ze swobodnym dostępem do wody przez cały czas trwania eksperymentu. Utrzymuj szczury na poziomie 85% ich masy wolnego karmienia, podając ograniczone pożywienie tego samego dnia, o tej samej godzinie.Losowo przydziel badanych do następujących grup:Testy emocjonalne, sześć tygodni po treningu. Testy emocjonalne, 48 godzin po treningu. Oczyść wszystkie wewnętrzne powierzchnie komory doświadczalnej i podłogi kratki 10% roztworem etanolu.Podłącz czerwone i czarne klipsy kalibratora intensywności wstrząsów do dwóch prętów na podłodze siatki. Podłącz USB do odpowiedniego portu komputera. Uruchom oprogramowanie kalibratora intensywności wstrząsów.Wybierz jedną intensywność miliamperów w aplikacji, klikając przycisk. Następnie zmień przełącznik uruchamiania/zatrzymywania na bieg. Uruchom stymulator awersyjny i spójrz na intensywność wstrząsu wyświetlaną na panelu aplikacji.W razie potrzeby dostosuj intensywność do jednego miliampera za pomocą pokrętła na stymulatorze awersyjnym. Zamknij komorę doświadczalną i włącz pudełko z narracją. Uruchom oprogramowanie systemu wykrywania zamarzania i otwórz eksperymentalne okno dialogowe.Wprowadź szczegóły każdego tematu i załaduj plik protokołu treningowego. Wybierz odpowiednią kamerę i zaznacz opcję bocznego wideo. Ustaw próg ruchu na 100 i minimalny współczynnik zamrożenia na 13 klatek.Sprawdź, czy na ekranie pojawia się transmisja na żywo z wybranej kamery. Wraz z wykresem progu ruchu i osią czasu różnych bodźców, które są prezentowane podczas treningu. Kliknij opcję kalibracji trzy razy, sprawdzając, czy indeks ruchu pozostaje poniżej 100 Następnie wybierz sprzęt do zablokowania, klikając odpowiedni przycisk na ekranie.Wprowadź obiekt doświadczalny do komory. Rozpocznij sesję, klikając przycisk nagrywania, 25-tonowe pary wstrząsów lub próby są dostarczane z 60-sekundowym interwałem między próbami. Zaczynając od minuty sesji.Ton jest prezentowany przez ostatnie 10 sekund każdego interwału między próbami, a wstrząs podczas ostatnich dwóch sekund każdego interwału między próbami. Usuń szczura z komory doświadczalnej po zakończeniu 28-minutowej sesji. Zwróć zwierzęta do ich odpowiedniej klatki domowej.Przewoź szczura w jego domowej klatce, szafce. Od sali do treningu behawioralnego po placówkę opieki nad zwierzętami. Szczury pozostają 48 godzin lub sześć tygodni bez żadnego leczenia, w zależności od grupy, do której zostały przydzielone.W tym okresie zwierzęta odpoczywają w swoich domowych klatkach i są trzymane indywidualnie. Monitorować masę ciała zwierząt dwa razy w tygodniu przez sześć tygodni okresu inkubacji. Delikatnie manipuluj każdym zwierzęciem przez dwie minuty, gdy są obciążone.Sześć zwierząt może zostać przebadanych 48 godzin po ustaleniu czasu. Te sześć zwierząt musi zostać przebadanych sześć tygodni później. Powtórz kalibrację systemu wykrywania zamarzania.Załaduj nazwę pliku, kontekstowy protokół testowy. Rozpocznij sesję, klikając przycisk nagrywania. Podczas tej pojedynczej 10-minutowej sesji testu kontekstowego nie są prezentowane żadne bodźce.Dzień po teście kontekstowym powtórz następujące kroki z każdym zwierzęciem, w zależności od grupy. Aby zmienić kontekst wizualny, do komory doświadczalnej wstawiono plastikową ścianę otaczającą. Aby zmienić kontekst węchowy, na nasz wacik nasączony taśmą bawełnianą nałożono jeden procent kwasu octowego.Który został umieszczony w metalowej tacy, pod podłogą z siatki. Powtórz kalibrację systemu wykrywania zamarzania przy użyciu innego pliku. Załaduj plik o nazwie Protokół testu Cue"Rozpocznij sesję, klikając przycisk nagrywania.Podczas tej pojedynczej 15-minutowej sesji testowej Cue, warunkowy ton bodźca jest prezentowany 10 razy, począwszy od trzeciej minuty sesji. To jest 10 prób testowych Cue i reboot z tymi samymi międzypróbnymi ścianami bez wstrząsów. Użyj dodatkowego programowania na zamówienie, aby uzyskać:Procent zamrożenia tonów podczas sesji treningowych i testów Cue.B procent zamrażania dla każdego z ośmiu trzyminutowych przedziałów sesji treningowej. C procent zamrożenia podczas pierwszych trzech minut sesji treningowej. Potraktuj ten ostatni środek jako podstawowe zamrożenie, ponieważ w ciągu tych trzech minut nie wystąpiły żadne wstrząsy ani kości.Aby uzyskać te dane, otwórz oprogramowanie systemu wykrywania zamarzania i wykonaj następujące kroki. Wybierz plik, raporty, podsumowanie komponentów stanowiska. Wybierz plik cmd dostępny w bezpłatnym repozytorium Open Science Framework'Nazwa, a następnie otwórz plik.Zmień próg ruchu na 100 i kliknij przycisk OK Wybierz pliki do analizy. Otwarte pliki można otwierać w programie Microsoft Excel. Do dalszej analizy.Na koniec oblicz średni czas trwania każdego epizodu zamrożenia. Dla każdej sesji, dzieląc całkowity czas trwania zamrażania przez całkowitą liczbę epizodów zamrażania. Zwierzęta były aktywne i eksplorowały komorę doświadczalną w ciągu trzech minut okresu bazowego.Wyjściowy czas zamrażania był znacznie krótszy w porównaniu z pozostałą częścią sesji. Jest to oznaka nabywania strachu. Segmentacja sesji próbnej w trzyminutowych przedziałach pokazuje, że procent czasu przydzielonego na zamrażanie osiągnął asymptotę podczas pierwszych trzech prób szokowych.Odkrycie to było spójne z wcześniejszymi badaniami i wskazywało na inne szkolenia. Odsetek zamrożenia wszystkich zwierząt w okresie szkolenia był znacznie wyższy niż w okresie odniesienia. Zwierzęta testowane sześć tygodni po treningu wykazywały znacznie wyższy odsetek zamrożenia podczas testu kontekstowego niż zwierzęta testowane po 48 godzinach.Nie zaobserwowano różnic w czasie zamrażania między testami treningowymi a testami pamięciowymi. Reakcja zamrożenia różnych grup badanych podczas testu kontekstowego była dalej badana za pomocą innych środków. Poziom aktywności osób, które były testowane sześć tygodni po treningu, był znacznie niższy niż u zwierząt badanych 48 godzin po sekcji kondycjonowania.Czas zamrażania zwierząt badanych krótko po treningu był znacznie krótszy niż u zwierząt badanych sześć tygodni po. Wyniki te wskazują na efekt inkubacji strachu. Analiza niechęci do każdej reakcji na zamrożenie wykazała, że zwierzęta testowane 48 godzin sesji kondycjonowania wykazywały dłuższe epizody zamrożenia niż zwierzęta badane 48 godzin po treningu.Odsetek zamrożenia wszystkich zwierząt podczas podstawowej sesji treningowej i testu Cue był znacznie niższy niż w okresie testowym testu Cue. Jedynie wartość wyjściowa zwierzęcia badanego sześć tygodni później w teście Cue różniła się istotnie od okresu testowego testu Cue. Średnie zamrożenie podczas treningu Cue było znacznie niższe niż średnie zamrożenie podczas testu Cue po sześciu tygodniach.Średnie zamrożenie w przerwie między próbami w teście Cue było znacznie niższe niż średnie zamrożenie w przerwie między próbami w treningu po 48 godzinach. Tutaj opisujemy rozszerzony protokół warunkowania strachu, który spowodował nadmierny trening u szczura inkubującego strach. Jest to skuteczne i ważne podejście do oceny pamięci emocjonalnej w krótkich 48 godzinach i długoterminowych okresach sześciu tygodni.Istnieją górskie dowody farmakologiczne, fizjologiczne i anatomiczne, które potwierdzają jego zasadność w ocenie zjawisk pamięci emocjonalnej. Wśród różnych zalet tego protokołu są następujące:Po pierwsze, pierwsze dwa rodzaje testów pamięci, a mianowicie kontekstowy i Cue. Test ten pozwala zidentyfikować efekt różnicowy testowania linii dla kontekstu i Cue.Po drugie, wymaga pojedynczej 28-minutowej sesji treningowej, która z kolei daje długotrwały efekt, który wykracza poza kilka tygodni. Ta zaleta jest niezwykła, biorąc pod uwagę, że niektóre osoby spodziewały się, że warunkowanie strachu wymaga co najmniej 100 wstrząsów w ciągu 10 sesji treningowych. Fear oferuje kilka alternatyw pomiarowych, które są obliczane automatycznie.W porównaniu z innymi paradygmatami warunkowania strachu z krótkimi sesjami treningowymi. Mniej uwagi poświęcono rozszerzonym protokołom, które wywołują niepożądane efekty treningowe. Istotnym efektem związanym z takim niechętnym treningiem jest inkubacja strachu, która dopiero niedawno zaczęła być rozumiana na poziomie behawioralnym i neurobiologicznym.I wydaje się być związane z innymi zjawiskami, w tym opóźnionym wystąpieniem zespołu stresu pourazowego. Końcowe zalecenia dotyczące najlepszych wdrożeń i badań tych protokołów obejmują: prawidłowe czyszczenie komory doświadczalnej, zwłaszcza podłogi uchwytu. Kalibracja, intensywność wstrząsu przed włączeniem wstrząsu i kalibracja systemu wykrywania zamarzania.Protokół ten można przetestować na wszystkich rasach szczurów lub innych gryzoni. W takich przypadkach ważne jest, aby dostosować próg ruchu i intensywność wstrząsu.

fear-incubation-using-an-extended-fear-conditioning-protocol-for-rats

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Upośledzenie poznawcze wynikające z radioterapii guzów mózgu stanowi klinicznie trudny do leczenia stan, który negatywnie wpływa na jakość życia. Zdolność do krytycznej oceny potencjalnych interwencji mających na celu złagodzenie wywołanych promieniowaniem deficytów poznawczych zależy w ostateczności od możliwości przeprowadzenia rygorystycznych ilościowych ocen funkcji poznawczych.

Kwantyfikacja upośledzenia funkcji poznawczych spowodowanego radioterapią czaszki

W poniższym eksperymencie opisujemy protokół warunkowania strachu śladowego u myszy. Ten rodzaj pamięci asocjacyjnej obejmuje okres śladowy, który oddziela bodziec neutralny od bodźca bezwarunkowego.

Warunkowanie strachu śladowego u myszy

Hormony gonadalne, takie jak estrogen, modulują tworzenie pamięci w wielu eksperymentalnych paradygmatach, w tym w pamięci wygaszania strachu. Protokół ten opisuje zestaw metod badania wpływu hormonów gonad, szczególnie podczas wymierania u naturalnie zmieniających się na cyklach samic, w tym monitorowanie cyklu rujowego i egzogenne podawanie estrogenów.

Protokół badania wygaszania uwarunkowanego strachu u naturalnie jeżdżących na rowerze samic szczurów

Tutaj opisujemy szczegółową metodologię wymaganą do przeprowadzenia eksperymentów z uczeniem się strachu wzmocnionego stresem (SEFL), przedklinicznego modelu zespołu stresu pourazowego, zarówno u szczurów, jak i myszy. Model wykorzystuje aspekty warunkowania i zamrażania strachu Pawłowa jako wskaźnik zwiększonego strachu u gryzoni.

Uczenie się strachu wzmocnione stresem, solidny model zespołu stresu pourazowego u gryzoni

Defensywne reakcje behawioralne zależą od intensywności zagrożenia, bliskości i kontekstu ekspozycji. Opierając się na tych czynnikach, opracowaliśmy klasyczny paradygmat warunkowania, który wywołuje wyraźne przejścia między warunkowym zamrożeniem a zachowaniem podczas lotu u poszczególnych badanych. Model ten ma kluczowe znaczenie dla zrozumienia patologii związanych z zaburzeniami lękowymi, panikowymi i stresem pourazowym.

Nowy paradygmat warunkowania strachu Pawłowa do badania zachowań związanych z zamarzaniem i ucieczką

Aby badać zachowania związane z lotem w kontekście strachu, wprowadzamy zmodyfikowany protokół warunkowania strachu. Protokół ten zapewnia, że myszy konsekwentnie wykazują zachowania związane z lotem podczas prezentacji wskazówek w warunkowaniu strachu.

Zmodyfikowane warunkowanie strachu w celu wywołania zachowań związanych z lotem u myszy

Paradygmat strachu obserwacyjnego ocenia zastępcze zamrożenie u gryzoni jako model empatii afektywnej. Procedura ta polega na wystawieniu gryzoni-obserwatorów na działanie demonstrantów tego samego gatunku, którzy otrzymują awersyjne wstrząsy stopami w celu wywołania empatycznych reakcji zamrożenia. Stosując obserwacyjne testy strachu, naukowcy mogą zbadać mechanizmy neuronalne leżące u podstaw empatii afektywnej.

Strach obserwacyjny jako model empatii afektywnej u myszy

Ten artykuł przedstawia protokół dla kontekstowego i podpowiedzianego testu warunkowania strachu przy użyciu systemu analizy wideo do oceny uczenia się strachu i pamięci u myszy.

Kontekstowy i sygnalizowany test warunkowania strachu przy użyciu systemu analizy wideo u myszy

Wzmocnienie odruchu zaskoczenia jest mierzone za pomocą elektromiografii mięśnia okrężnego oka podczas niskiego (niepewnego) i wysokiego (pewnego) prawdopodobieństwa porażenia prądem w zadaniu prawdopodobieństwa zagrożenia. Zapewnia to obiektywną miarę różnych negatywnych stanów emocjonalnych (strach/niepokój) dla badań nad psychopatologią, używaniem/nadużywaniem substancji i szeroko pojętą nauką afektywną.

Wykorzystanie zadania Prawdopodobieństwa Zagrożenia do oceny lęku i strachu podczas niepewnego i pewnego zagrożenia

Wzbogacenie środowiska u myszy wymaga złożonej i wymagającej konfiguracji, a także kompleksowych technik hodowli i obsługi, aby zapewnić silne efekty metaboliczne i przeciwnowotworowe u myszy. Protokół ten zawiera szczegółowe procedury mające na celu odtworzenie wyżej wymienionych efektów u myszy.

Protokół trzymania myszy w wzbogaconym środowisku

Poznaj rozszerzony protokół warunkowania strachu dla szczurów, który pozwala badać inkubację strachu i pamięć emocjonalną w krótkim oraz długim okresie.

Inkubacja strachu przy użyciu rozszerzonego protokołu warunkowania strachu dla szczurów

Przeglądaj więcej filmów