Name: Ocena funkcji pamięci u myszy z padaczką indukowaną pilokarpiną (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 34 s
Description: Poznaj metody oceny zaburzeń pamięci u myszy z padaczką indukowaną pilokarpiną. Protokół wykorzystuje testy behawioralne minimalizujące stres zwierząt, co pozwala na wiarygodną ocenę upośledzenia poznawczego w modelu epilepsji.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy Dr. Jae-Min Lee za jego wsparcie techniczne. Prace te były wspierane przez granty Narodowej Fundacji Badawczej Korei (NRF) finansowane przez rząd koreański (NRF-2019R1A2C1003958, NRF-2019K2A9A2A08000167).

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W pracy opisano eksperymentalne procedury oceny funkcji poznawczych u myszy z przewlekłą padaczką. Wiele różnych paradygmatów testów behawioralnych jest używanych do oceny funkcji uczenia się i pamięci u myszy18. Labirynt wodny Morrisa, labirynt ramion promieniowych, labirynt Y, kontekstowe warunkowanie strachu i testy oparte na obiektach są najczęściej stosowanymi testami behawioralnymi i zapewniają wiarygodne wyniki. Wśród nich testy NL, NO i PS są skutecznymi, prostymi metodami oceny uczenia si...

Padaczka jest przewlekłym zaburzeniem charakteryzującym się spontanicznymi, nawracającymi napadami1,2,3. Ponieważ powtarzające się napady mogą powodować nieprawidłowości strukturalne i funkcjonalne w mózgu1,2,3, nieprawidłowa aktywność napadowa może przyczyniać się do dysfunkcji poznawczych, które są jedną z najczęstszych chorób współistniejących związanych z padaczką4,5,6. W przeciwieństwie do przewlekłych napadów padaczkowych, które są przemijające i chwilowe, zaburzenia poznawcze mogą utrzymywać się przez całe życie pacjentów z padaczką, pogarszając jakość ich życia. Dlatego ważne jest, aby zrozumieć patofizjologiczne mechanizmy pogorszenia funkcji poznawczych związanego z padaczką.
Różne eksperymentalne modele zwierzęce epilepsji zostały użyte do zademonstrowania deficytów uczenia się i pamięci związanych z przewlekłą padaczką7,8,9,10,11,12. Na przykład labirynt wodny Morrisa, kontekstowe warunkowanie strachu, tablica otworów, nowa lokalizacja obiektu (NL) i testy rozpoznawania nowych obiektów (NO) były często wykorzystywane do oceny dysfunkcji pamięci w padaczce skroniowej (TLE). Ponieważ hipokamp jest jednym z podstawowych regionów, w których TLE wykazuje patologię, testy behawioralne, które mogą ocenić funkcję pamięci zależną od hipokampa, są często wybierane preferencyjnie. Biorąc jednak pod uwagę, że napady mogą indukować nieprawidłową neurogenezę hipokampa i przyczyniać się do pogorszenia funkcji poznawczych związanego z padaczką10, paradygmaty behawioralne do testowania funkcji neuronów u noworodków (tj. separacji wzorców przestrzennych, PS)8,13 mogą również dostarczyć cennych informacji na temat komórkowych mechanizmów zaburzeń pamięci w padaczce.
W tym artykule prezentujemy zestaw testów pamięciowych, NL, NO i PS, dla myszy z padaczką. Testy są proste i łatwo dostępne i nie wymagają skomplikowanego systemu.

<table><tbody><tr><td>Strzykawka 1 ml</td><td>Sung-strzykawka</td><td></td><td>Używaj z igłą o rozmiarze 26 lub 30</td></tr><tr><td>70% Etanol</td><td>Duksan</td><td>UN1170</td><td>Spray do czyszczenia pudełka i przedmiotów</td></tr><tr><td>zasłona</td><td></td><td></td><td>Aby uniknąć niepotrzebnych wskazówek wizualnych</td></tr><tr><td>Fiolet kresylowy</td><td>Sigma</td><td>C5042</td> Do kriotomu <td>barwienia fioletem krezylowym</td></tr><tr><td></td><td>Leica</td><td>E21040041</td><td>Do tkanek sekcyjna</td></tr><tr><td>dwustronna taśma</td><td></td><td></td> klejąca <td>Do stabilnego umieszczenia przedmiotów</td></tr><tr><td>Nośnik montażowy DPX</td><td>Sigma</td><td>06522</td><td></td></tr> seria etanolu <tr><td></td><td>Duksan</td><td>UN1170</td><td>Zrób 100%, 95%, 90%, 80%, 70% roztwory etanolu</td></tr><tr><td>płyta podłogowa z wąskimi wzorami siatki</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>Sprzęt do eksperymentów behawioralnych, rozmiar płytki: 42,5 x 42,5 x 0,5 cm, rozmiar siatki: 2,75 x Płyta podłogowa 2,75 cm</td></tr><tr><td>z szerokimi wzorami siatki</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>Sprzęt do eksperymentów behawioralnych, rozmiar płytki: 42,5 x 42,5 x 0,5 cm, rozmiar siatki: 5,5 x 5,5 cm</td></tr><tr><td>iluminometr</td><td>TES Electrical Electronic Corp.</td><td>1334A</td><td>Do pomiaru oświetlenia pomieszczenia (60 luksów)</td></tr><tr><td>Oddział intensywnej terapii</td><td>Thermocare</td><td>#W-1</td><td></td></tr><tr><td>chlorowodorek ketaminy</td><td>Yuhan</td><td>7003</td><td>Służy do znieczulenia myszy do perfuzji przezsercowej</td></tr><tr><td>Lampa LED</td><td>Lungo</td><td>P13A-0422-WW-04</td><td>Oświetlenie obiektów</td></tr> <tr><td></td><td></td><td></td><td>w pomieszczeniu do testów behawioralnychGumowa lalka, plastikowa tuba 50 ml, szklany słoik Coplin, plastikowa kolba T, szklana butelka</td></tr><tr><td>otwarte pudełko polowe</td><td>Leehyo-bio</td><td></td><td>Sprzęt do eksperymentów behawioralnych, rozmiar: 44 x 44 x 31 cm</td></tr><tr><td>ręcznik papierowy</td><td>Yuhan-Kimberly</td><td>47201</td><td>Służy do suszenia otwartego pudełka i przedmiotów</td></tr><tr><td>paraformaldehyd</td><td>Merck Millipore</td><td>104005</td><td>Przygotuj 4% roztwór</td></tr><tr><td>chlorowodorku pilokarpiny</td><td>Sigma</td><td>P6503</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td>linijka</td><td>Służy do lokalizowania obiektów w otwartym polu</td></tr> pole <tr><td>azotan metylu skopolaminy</td><td>Sigma</td><td>S2250</td><td>Make 10X stock</td></tr><tr><td>Smart system 3.0</td><td>Panlab</td><td></td><td>System śledzenia wideo</td></tr><tr><td>stoper</td><td>Junso</td><td>JS-307</td><td>Do pomiaru aktywności eksploracyjnej myszy</td></tr><tr><td>sacharoza</td><td>Sigma</td><td>S9378</td><td>Do krioochrony skrawków tkanek</td></tr><tr><td>sól półsiarczanu terbutaliny</td><td>Sigma</td><td>T2528</td><td>Zrób 10X standardową</td></tr><tr><td>kamerę wideo (kamera CCD)</td> <td>Wizja</td><td>VCE56HQ-12</td><td>Umieść kamerę bezpośrednio nad głową pudełka na otwartym polu</td></tr><tr><td>ksylazyna (Rompun)</td> <td>Bayer korea</td><td>KR10381</td><td>Służy do znieczulenia myszy do perfuzji przezsercowej</td></tr><tr><td>ksylen</td><td>Duksan</td><td>UN1307</td><td>Dla Barwienie fioletem krezylowym</td></tr></tbody></table>

ocena funkcji pamięci u myszy z padaczką indukowaną pilokarpiną

Assessment of Memory Function in Pilocarpine-induced Epileptic Mice

Upośledzenie funkcji poznawczych jest jedną z najczęstszych chorób współistniejących w padaczce skroniowej. Aby podsumować spadek funkcji poznawczych związany z padaczką w zwierzęcym modelu padaczki, wygenerowaliśmy myszy z przewlekłą padaczką leczoną pilokarpiną. Przedstawiamy protokół trzech różnych testów behawioralnych z użyciem tych myszy padaczkowych: testy lokalizacji nowych obiektów (NL), rozpoznawania nowych obiektów (NO) i separacji wzorców (PS) w celu oceny uczenia się i pamięci odpowiednio dla miejsc, obiektów i kontekstów. Wyjaśniamy, jak ustawić aparat behawioralny i zapewniamy procedury eksperymentalne dla testów NL, NO i PS po teście w otwartym polu, który mierzy podstawową aktywność lokomotoryczną zwierząt. Opisujemy również zalety techniczne testów NL, NO i PS w odniesieniu do innych testów behawioralnych do oceny funkcji pamięci u myszy z padaczką. Na koniec omawiamy możliwe przyczyny i rozwiązania dla myszy padaczkowych, które nie nawiązują 30 sekund dobrego kontaktu z obiektami podczas sesji zapoznawczych, co jest krytycznym krokiem dla udanych testów pamięci. W związku z tym protokół ten dostarcza szczegółowych informacji na temat tego, jak ocenić zaburzenia pamięci związane z padaczką za pomocą myszy. Testy NL, NO i PS są prostymi, skutecznymi testami, które są odpowiednie do oceny różnych rodzajów pamięci u myszy z padaczką.

Ogólny harmonogram eksperymentalny i konfiguracja służąca do oceny funkcji poznawczych zostały przedstawione na Ryc. 1. Sześć tygodni po wywołaniu ostrych napadów za pomocą pilocarpiny, myszy poddano kolejno testom NL, NO i PS, z zachowaniem 3-dniowych okresów odpoczynku między testami (Ryc. 1A). W teście NL podczas sesji zapoznawczej (F1) w otwartym polu umieszczono dwa identyczne obiekty, a następnego dnia jeden z obiektów przeniesiono w nowe miejsce. W teście...

Ten artykuł przedstawia eksperymentalne procedury oceny zaburzeń pamięci u myszy z padaczką wywołaną pilokarpiną. Protokół ten może być wykorzystany do badania patofizjologicznych mechanizmów spadku funkcji poznawczych związanego z padaczką, który jest jedną z najczęstszych chorób współistniejących w padaczce.

Ocena funkcji pamięci u myszy z padaczką indukowaną pilokarpiną

Cognitive impairment is one of the most common comorbidities in temporal lobe epilepsy. To recapitulate epilepsy-associated cognitive decline in an animal ...

Upośledzenie funkcji poznawczych jest jedną z najczęstszych chorób współistniejących w padaczce skroniowej. Przedstawimy protokół opisujący, w jaki sposób oceniać upośledzenie pamięci na mysim modelu padaczki przewlekłej. Nowatorska lokalizacja obiektu, rozpoznawanie nowych obiektów i test separacji wzorców to proste i krótkie osły, które mogą minimalnie stresować zwierzęta.To sprawia, że ten test jest optymalny do oceny funkcji pamięci u myszy z padaczką, bez dodatkowych wyzwalaczy spontanicznych nawracających napadów. Na początek przyzwyczaj zwierzęta do słabego oświetlenia w ich domowych klatkach przez co najmniej 30 minut. Przygotuj pudełko z otwartym polem.W pierwszym dniu habituacji umieść i iluminometr w środku pudełka na otwartym polu. I dostosuj natężenie oświetlenia do 60 luksów. Aby ocenić aktywność lokomotoryczną każdej myszy, użyj oprogramowania do śledzenia wideo zachowania zwierząt.Po otwarciu oprogramowania do śledzenia wideo skalibruj rozmiar otwartego pola pola. Następnie delikatnie umieść eksperymentalną mysz w pudełku na otwartym polu przodem do ściany. Otwórz program inteligentny, kliknij opcję Dostosowane i Zaakceptuj.Kliknij opcję Image Source (Źródło obrazu). Po wybraniu zainstalowanej kamery naciśnij przycisk Set. Dostosuj rozdzielczość kamery i naciśnij Akceptuj.Po naszym kliknięciu kalibracji przeciągnij mysz komputerową, aby dopasować ją do rozmiaru pola. I wypełnij rozmiar pudełka wewnętrznego. Kliknij przycisk Definicja strefy, aby zapisać i dostosować rozmiar każdego pola, a następnie kliknij przycisk Zapisz.Czerwone pole to śledzony zakres, więc mieści się w wewnętrznym rozmiarze pudełka, podczas gdy różowe pole pasuje do konturu. Naciśnij ustawienie wykrywania. Kliknij pozycję Migawka i naciśnij przycisk Rozpocznij test, aby sprawdzić, czy określony obszar jest śledzony, a następnie naciśnij przycisk Zatrzymaj test, a następnie przycisk Zaakceptuj.Kliknij Ustawienia czasu. Po wybraniu wstępnie ustawionego czasu ustaw czas opóźnienia, przy trzysekundowym czasie akwizycji na 15 minut i naciśnij Akceptuj. Naciśnij przycisk Tematy, aby ustawić nazwę kodową.Kliknij przycisk Harmonogram, aby usunąć istniejące szczegóły i przeciągnij zmodyfikowaną nazwę kodową w tematach do pierwszej sesji. Kliknij Pozyskiwanie danych. Kliknij przycisk Nagraj, a następnie kliknij przycisk Start.Umieść mysz w pudełku i śledź ją przez 15 minut. Po 15 minutach nagrywania przywróć mysz do klatki domowej. Przywróć jasne światło.Kliknij opcję Pozyskiwanie danych. A następnie kliknij Aktywna analiza Przeciągnij nazwę kodową Sham do okna obok. Kliknij przycisk Definicje raportów.Kliknij przycisk Nowe definicje raportów, a następnie Raport podsumowujący i naciśnij Akceptuj. Kliknij opcję Nazwa obiektu i odległość w strefie, a następnie przesuń go na bok. Następnie naciśnij przycisk Akceptuj.Kliknij czerwony znacznik wyboru i kliknij Analizuj. Sprawdź wyniki. W drugim i trzecim dniu powtórz sesje habituacji.Czwartego dnia przeprowadź sesję zapoznawczym. W przyćmionym świetle umieść każdą mysz na pustym otwartym polu na trzy minuty. Po tym krótkim przyzwyczajeniu zwierzę wraca do swojej domowej klatki.Umieść dwa identyczne przedmioty, gumowe lalki, na otwartej arenie, w odległości pięciu centymetrów od sąsiednich ścian. Przymocuj przedmioty za pomocą taśmy dwustronnej. Wprowadź eksperymentalną mysz do otwartego pola skierowanego w stronę ściany najbardziej oddalonej od obiektów.Pozwól na swobodną eksplorację przez 20 minut i ręcznie zmierz czas spędzony na eksploracji obu obiektów za pomocą dwóch stoperów. Nie określaj ilościowo jako czasu eksploracyjnego żadnych zachowań, w których pysk zwierzęcia nie jest skierowany w stronę obiektu. Gdy mysz osiągnie minimalny czas eksploracji wynoszący 30 sekund, dla dwóch obiektów zatrzymaj sesję F1 i przenieś mysz do jej klatki domowej.Jeśli mysz nie będzie w stanie eksplorować obiektów przez 30 sekund w ciągu 20 minut, wyjmij ją z pola otwartego pola i wyklucz ją z dalszych sesji. Piątego dnia przeprowadź sesję testowania lokalizacji nowego obiektu. Przenieś mysz na otwarte pole w celu ponownego przyzwyczajenia przez trzy minuty.Następnie umieść go z powrotem w klatce domowej. Przesuń jeden obiekt do pozycji ukośnej i umieść eksperymentalną mysz przodem do ściany pudełka z otwartym polem. Pozwól na 10 minut swobodnej eksploracji i nagrywaj za pomocą systemu śledzenia wideo.Zmierz czas spędzony na eksploracji każdego obiektu za pomocą dwóch stoperów. Następnie przenieś mysz do jej klatki domowej, chwytając za ogon. Przez trzy dni pozwól myszy odpocząć ze swobodnym dostępem do jedzenia i wody.Dziewiątego dnia wykonaj 15-minutową sesję habituacyjną dla jednej myszy. W dniu 10 wykonaj krótką sesję rehabituacyjną przez trzy minuty. Następnie tymczasowo przywróć go do klatki domowej.Umieść dwa identyczne przedmioty, 50-mililitrowe plastikowe rurki wypełnione 40 mililitrami wody, na otwartym polu, w odległości pięciu centymetrów od sąsiednich ścian. Wprowadź eksperymentalną mysz do otwartego pola, przodem do ściany najbardziej oddalonej od obiektów. Ponieważ mysz będzie wystawiona na dwa różne obiekty w teście NO, 50-mililitrową plastikową rurkę wypełnioną 40 mililitrami wody i szklany słoik Coplin.Przeciwwaga dla obiektu podczas sesji zapoznawczej, poprzez prezentację dwóch identycznych przedmiotów, szklanych słoików Coplin słoiczków, dla połowy zwierząt w grupie. Następnie, mając dwa różne obiekty, pozwól na swobodną eksplorację przez 20 minut i ręcznie zmierz czas spędzony na eksploracji obu obiektów za pomocą dwóch stoperów. Gdy mysz osiągnie minimalny czas wygaśnięcia wynoszący 30 sekund dla obu obiektów, przerwij sesję zapoznawczą.Następnego dnia przeprowadź sesję testową rozpoznawania nowych obiektów. Najpierw przenieś mysz na otwarte pole w celu ponownego przyzwyczajenia się na trzy minuty, a następnie wróć do klatki domowej. W odległości pięciu centymetrów od sąsiednich ścian zastąp rurkę szklanym słoikiem ze słoików z koplinu, tak aby myszy były wystawione na jedną rurkę i jeden szklany słoik ze słoików z koplinu.W przypadku połowy zwierząt, które były narażone na szklane słoiki Coplin podczas pierwszej sesji zapoznawczej, zastąp szklany słoik Coplin słoikiem 50-mililitrową plastikową tubką wypełnioną 40 mililitrami wody. Tak aby myszy były wystawione na jedną tubkę i jeden szklany słoik Coplin Jar. Pozwól sobie na 10 minut swobodnej eksploracji, nagrywając ją za pomocą systemu śledzenia wideo.Następnie chwyć ogon eksperymentalnej myszy i przenieś ją do jej domowej klatki. Przez trzy dni i pozwól myszy odpocząć ze swobodnym dostępem do jedzenia i wody. W przypadku analizy NL otwórz Uruchom program niestandardowy i Zaakceptuj.Kliknij opcję Image Source (Źródło obrazu). Po wybraniu zainstalowanej kamery naciśnij przycisk Set. Tylko rozdzielczość kamery i naciśnij Akceptuj.Kliknij Otwórz folder wideo, aby otworzyć zapisane wideo. Oglądaj zapisane wideo przez 10 minut od momentu wejścia myszy i zmierz czas spędzony na eksploracji każdego obiektu. W dniu 15 przeprowadziliśmy pierwszą sesję zapoznawczą z testem PS.To jest dla myszy na otwartym polu w celu ponownego przyzwyczajenia się przez trzy minuty. Umieść płytę podłogową z szeroką siatką i dwoma identycznymi przedmiotami. Plastikowe termosy wypełnione 50 mililitrami wody, w otwartym pudełku polowym.Następnie wprowadzono eksperymentalną mysz do pudełka na otwartym polu, zwróconego przodem do ściany najbardziej oddalonej od obiektów. Zezwól na swobodną eksplorację przez 20 minut. I ręcznie mierz czas spędzony na eksploracji obu obiektów za pomocą dwóch stoperów.Gdy mysz osiągnie minimalny czas eksploracji wynoszący 30 sekund dla obu obiektów, przerwij pierwszą sesję zapoznawczą i przenieś zwierzę do jego domowej klatki. Aby zrównoważyć test separacji obiektów i wzorów dla połowy zwierząt, umieść płytę podłogową z szeroką siatką i dwoma identycznymi przedmiotami, szklanymi butelkami do eksperymentu z równoważeniem w otwartym pudełku polowym. Następnie przyłóż eksperymentalną mysz do pola otwartego i pozwól na swobodną eksplorację przez 20 minut.Gdy mysz osiągnie minimalny czas eksploracji wynoszący 30 sekund dla dwóch obiektów, przerwij pierwszą sesję zapoznawczą i przenieś zwierzę do jego domowej klatki. Następnego dnia przenieś mysz na teren pola w celu ponownego przyzwyczajenia się przez trzy minuty. A następnie wróć do klatki domowej.Następnie wykonaj drugą sesję zapoznawcze z dwiema szklanymi butelkami na wąskiej siatkowej podłodze. W przypadku eksperymentów z przeciwwagą wykonaj drugą sesję zapoznawczą z dwiema kolbami w kształcie litery T wypełnionymi wodą na wąskiej podłodze siatki. Następnego dnia przeprowadź sesję testową separacji wzorców.Przenieś mysz na otwarte pole, na którym nie ma żadnego obiektu do ponownego przyzwyczajenia się przez trzy minuty. A następnie wróć do klatki domowej. Następnie umieść kolbę wypełnioną wodą i szklaną butelką na wąskiej podłodze kratki.Spraw, aby kolby T były wypełnione wodą, w nowatorskim przedmiocie. Aby uzyskać przeciwwagę, umieść każdy przedmiot na podłodze z wąską siatką, aby szklana butelka stała się w tym przypadku nowym obiektem. Następnie mysz eksperymentalna przenosi się na otwarte pole na 10 minut w celu eksploracji.Pozwól na 10 minut swobodnej eksploracji i nagrywaj za pomocą systemu śledzenia wideo. Chwyć ogon eksperymentalnej myszy i przenieś ją do jej domowej klatki. Zmierz czas spędzony na eksploracji każdego obiektu za pomocą dwóch stoperów.I oblicz współczynnik dyskryminacji równy różnicy czasu spędzonego między nowym obiektem a znanym obiektem podzielonej przez całkowity czas eksploracji tych dwóch obiektów. Sześć tygodni po wprowadzeniu pilokarpiny wywołane ostre drgawki. Myszy zostaną poddane testowi lokalizacji nowego obiektu.Test rozpoznawania nowych obiektów i test separacji wzorców. W tej kolejności oddzielone trzydniowymi okresami odpoczynku między badaniami. Potwierdzono, że nie ma znaczącej preferencji między dwoma obiektami prezentowanymi razem.Myszy z padaczką wykazały znaczne zmniejszenie współczynnika dyskryminacji w trzech testach w porównaniu z kontrolami pozorowanymi. Wykazywanie upośledzenia pamięci przestrzennej. Pomiar aktywności lokomotorycznej wykazał znaczny wzrost u zwierząt padaczkowych.Natomiast motywacja do eksploracji obiektów była porównywalna między zwierzętami Sham i epileptycznymi. Wreszcie, śmierć komórek hipokampa oceniono po stanie padaczkowym wywołanym pilokarpiną przy użyciu barwienia fioletem krystalicznym w celu potwierdzenia uszkodzenia neuronów wywołanego napadem. U zwierząt, którym podawano pilokarpinę, wykazano obecność komórek piknotycznych w podpolu i CA3 hipokampa, w przeciwieństwie do kontrolnych preparatów Sham.Liczenie w teście NO i PS ma kluczowe znaczenie dla zmniejszenia wrodzonej stronniczości możliwej w obiektach specyficznych dla tego urządzenia. Ponadto przewlekłe myszy padaczkowe wykazują zwiększony niepokój, co wymaga wielu etapów przyzwyczajenia, aby uzyskać wystarczające uznanie narodu w warunkach eksperymentalnych. Modyfikacje czasu, takie jak liczba lub lokalizacja obiektów w naszym protokole, mogą dostarczyć testów pamięci.Co może być przydatne do opracowania złożonych mechanizmów padaczki związanych ze spadkiem funkcji poznawczych. Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak oceniać różne aspekty upośledzenia pamięci w padaczce.

assessment-of-memory-function-in-pilocarpine-induced-epileptic-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Ten film przedstawia procedurę wywoływania stanu padaczkowego (SE) u myszy poprzez systemowe podawanie pilokarpiny w celu modelowania padaczki skroniowej.

Leczenie układowe pilokarpiny: mysi model padaczki skroniowej

Ten film pokazuje elektroencefalograficzny (EEG) zapis napadów padaczkowych u szczurów z padaczką. Szczur z elektrodami wszczepionymi w brzuszny hipokamp podłącza się do systemu rejestracji EEG i umieszcza w komorze z pleksi. Szczur może się swobodnie poruszać, podczas gdy aktywność mózgu jest rejestrowana w celu monitorowania występowania napadów.

Elektroencefalograficzny zapis napadów padaczkowych u szczurów z padaczką

Źródło: Soukupová, M., et al. Mikrodializa aminokwasów pobudzających podczas zapisów EEG u swobodnie poruszających się szczurów. J. Vis. Exp. (2018)Ten film przedstawia ocenę poziomu zewnątrzkomórkowego neuroprzekaźnika pobudzającego u szczurów z przewlekłą indukcją padaczki. Po wszczepieniu sondy do mikrodializy do mózgu i potwierdzeniu braku napadów za pomocą elektroencefalografii (EEG), pobiera się płyn zewnątrzkomórkowy w celu oceny podwyższonego poziomu neuroprzekaźników u szczurów z...

Ocena poziomu neuroprzekaźników pobudzających u szczurów z przewlekłą padaczką

Celem tego protokołu jest zbadanie poznania przestrzennego u gryzoni. Wodny labirynt z podwójnym H to nowatorski test, który jest szczególnie przydatny do wyjaśnienia różnych elementów uczenia się, konsolidacji i pamięci, a także wzajemnego oddziaływania systemów pamięci.

Labirynt Double-H: solidny test behawioralny do uczenia się i pamięci u gryzoni

Ten artykuł demonstruje skuteczność akupunktury, modeli epilepsji i analizy snu u gryzoni. Opisano procedurę akupunktury i identyfikację punktów akupunkturowych. Pilokarpina lub pentylenotetrazol (PTZ) jest stosowany w celu wywołania padaczki. Do analizy snu wykorzystuje się elektrokortykogram (ECoG), elektromiogram (EMG), temperaturę mózgu i zapisy aktywności lokomotorycznej.

Manipulacja elektrokortykogramem padaczkowym (ECoG) i snem u szczurów i myszy za pomocą akupunktury

Ten protokół opisuje metodę chemicznego rozpalania pentylenotetrazolu i dostarcza mysi model padaczki. Protokół ten może być również wykorzystany do badania podatności na indukcję i patogenezę napadów padaczkowych po napadach padaczkowych u myszy.

Model rozpałki indukowany pentylenotetrazolem

Ten manuskrypt opisuje metodę wywoływania stanu padaczkowego poprzez ogólnoustrojowe wstrzykiwanie pilokarpiny oraz monitorowania spontanicznych nawracających napadów u żywych zwierząt za pomocą bezprzewodowego systemu telemetrii wideo i elektroencefalogramu. Protokół ten może być wykorzystany do badania patofizjologicznych mechanizmów przewlekłej padaczki, epileptogenezy i ostrych napadów.

Pilokarpinowy model padaczki skroniowej i monitorowanie EEG z wykorzystaniem systemu radiotelemetrycznego u myszy

Tutaj opisujemy metodę mikrodializy in vivo do analizy uwalniania asparaginianu i glutaminianu w brzusznym hipokampie u szczurów z padaczką i bez padaczki, w połączeniu z zapisami EEG. Zewnątrzkomórkowe stężenia asparaginianu i glutaminianu mogą być skorelowane z różnymi fazami choroby.

Mikrodializa aminokwasów pobudzających podczas zapisów EEG u swobodnie poruszających się szczurów

Ten raport opisuje metody generowania modelu padaczki skroniowej na podstawie elektrycznego rozpalenia transgenicznych myszy VGAT-Cre. Rozpalone myszy VGAT-Cre mogą być przydatne w określaniu, co powoduje padaczkę i w badaniach przesiewowych nowych terapii.

Przygotowanie i wszczepienie elektrod dla elektrycznie zapalających myszy VGAT-Cre w celu wygenerowania modelu padaczki skroniowej

Zakażenie śródmózgowe wirusem mysiego zapalenia mózgu i rdzenia Theilera (TMEV) u myszy C57BL/6 powiela wiele wczesnych i przewlekłych objawów klinicznych wirusowego zapalenia mózgu i późniejszej padaczki u ludzi. W artykule opisano zakażenie wirusem, objawy i histopatologię modelu TMEV.

Model padaczki o etiologii zakaźnej z wykorzystaniem wirusa mysiego zapalenia mózgu i rdzenia Theilera

Napady negatywnie wpływają na różne funkcje i jakość życia. Robaki Planaria były wystawione na działanie różnych stężeń chemoconvulsantów w celu oceny ich fenotypów napadowych i ruchliwości destrukcyjnej. W badaniu tym zaproponowano wykorzystanie robaków wypławkowych jako modelu ostrych napadów padaczkowych u ludzi i ma znaczenie w opracowywaniu leków na padaczkę.

Wypławka jako model zwierzęcy do eksperymentalnego ostrego napadu padaczkowego

Poznaj metody oceny zaburzeń pamięci u myszy z padaczką indukowaną pilokarpiną. Protokół wykorzystuje testy behawioralne minimalizujące stres zwierząt, co pozwala na wiarygodną ocenę upośledzenia poznawczego w modelu epilepsji.

Ocena funkcji pamięci u myszy z padaczką indukowaną pilokarpiną

Przeglądaj więcej filmów