Name: Model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji przy użyciu przeszczepów żył do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-05-15T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 2 s
Description: Poznaj model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi. Ta metoda pozwala badać strategie leczenia chorób niedokrwiennych serca i kończyn dolnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez granty badawcze z Ministerstwa Edukacji, Kultury, Sportu, Nauki i Technologii Japonii (25462136).

UWAGA: Wszystkie zabiegi chirurgiczne wykonywane na zwierzętach powinny być przeprowadzane zgodnie z Przewodnikiem Opieki i Użytkowania Zwierząt Laboratoryjnych (www.nap.edu/catalog/5140.html) lub innymi odpowiednimi wytycznymi etycznymi. Przed przystąpieniem do dalszych czynności protokoły powinny zostać zatwierdzone przez komitet ds. dobrostanu zwierząt w odpowiedniej instytucji.
1. Przygotowanie zwierząt
<ol>
	<li>Kup samce japońskich białych królików (lub królików o równoważnej wielkości ciała) o wadze 2,7–3,0 kg.</li>
	<li>Aklimatyzuj króliki przez 1 tydzień w 12-godzinnym cyklu światło-ciemność i podawaj regularną dietę dla królików przed zabiegiem.</li>
</ol>
2. Znieczulenie i otoczenie zwierząt
UWAGA: Wszystkie kolejne procedury muszą być wykonywane w warunkach aseptycznych. Pole operacyjne i urządzenia przed użyciem należy zdezynfekować 10% roztworem jodu powidonu, 70% alkoholem lub czwartorzędowym związkiem amoniowym.
<ol>
	<li>Znieczulić królika dożylnym podaniem pentobarbitalu sodu (25 mg/kg) przez żyłę uszną.</li>
	<li>Po upewnieniu się, że królik stracił siłę, przenieś go na stół operacyjny i ustaw w pozycji leżącej. Zakryj nos i usta maską znieczulającą. Podanie znieczulenia ogólnego należy rozpocząć od inhalacji 0,7–1,0% mieszanki izofluranu i tlenu. 
	UWAGA: Jeśli królik zacznie się poruszać, skuteczny będzie czasowy wzrost izofluranu do 2%.</li>
	<li>Przytnij futro na szyi i ramieniu za pomocą elektrycznej maszynki do strzyżenia włosów. Po zdezynfekowaniu powierzchni poprzez rozpylenie 70% etanolu lub innego roztworu antyseptycznego, resztę włosów w okolicy szyjki macicy należy ogolić brzytwą. Zdezynfekować pole operacyjne 10% jodowidonem i podać podskórnie chlorowodorek lidokainy (3 mg/kg) w znieczuleniu miejscowym. 
	UWAGA: Zbadaj powtarzające się ruchy tchawicy. Obserwuj pulsację żyły szyjnej i tętnicy szyjnej. Gdy częstość oddechów i pulsacji zmniejszy się, rozważ tymczasowe zmniejszenie podawania znieczulenia. Pomocne jest również monitorowanie przezskórnego wysycenia tlenem i częstości tętna. 
	UWAGA: W tym miejscu protokół można wstrzymać.</li>
</ol>
3. Pobranie żyły szyjnej
UWAGA: Miejscowe środki znieczulające (takie jak lidokaina) powinny być użyte przed wykonaniem nacięcia skóry.
<ol>
	<li>Przed nacięciem skóry należy podać profilaktycznie enrofloksacynę (5 mg/kg) podskórnie. W przypadku znieczulenia należy podawać podskórnie 0,05 mg/kg buprenorfiny dwa razy dziennie przez 3 dni. 
	UWAGA: Aby uniknąć spadku temperatury ciała, zamiast spryskiwać ciało zwierzęcia 70% etanolem, można zastosować chirurgiczny peeling miejsca nacięcia.</li>
	<li>Naciąć 50–60 mm odcinka szyjki macicy skalpelem chirurgicznym wzdłużnie. Tępo wypreparuj tkanki podskórne i powięź, aby odsłonić odcinek żyły szyjnej o średnicy 20–30 mm. Podwiązaj wszystkie gałęzie odsłoniętej żyły za pomocą jedwabnych szwów 4-0.</li>
	<li>Umieść jedwabny szew 2-0 wokół żył szyjnych wewnętrznych i zewnętrznych, aby wykonać podwiązanie natychmiast po nacięciu żyły szyjnej w następnym kroku.</li>
	<li>Naciąć ścianę żylną (około 1 mm) dystalnej strony żyły. Wprowadzić 2-francuski cewnik balonowy od nacięcia w kierunku bliższej strony żyły. Podwiązać jedwabny szew 2-0 w dystalnych miejscach żył szyjnych.</li>
	<li>Napompuj balon 0,2 ml powietrza. Ogołocić błonę wewnętrzną żyły za pomocą trzech kanałów cewnika do złuszczania śródbłonka. 
	UWAGA: Ta procedura jest uważana za równoważną rozdęciu przeszczepu żyły odpiszczelowej w operacjach rewaskularyzacji u ludzi, co powoduje złuszczanie śródbłonka.</li>
	<li>Podwiązywać bliższy koniec żyły. Przetnij żyłę, aby zebrać. 
	UWAGA: Dokładnie rozróżnij dystalny i bliższy koniec pobranej żyły, ponieważ zespolenie z tętnicą powinno być wykonane w sposób odwrócony (tj. dystalny koniec żyły powinien być zespoleny z bliższym końcem tętnicy). Na przykład wprowadzenie cewnika dożylnego z określonej strony działałoby jako marker.</li>
	<li>W przypadku manipulacji terapeutycznych dla pobranej żyły szyjnej, należy potraktować pobraną żyłę metodami opracowanymi dla każdego pytania badawczego (np. elektroporacja26 lub bezpośrednie zanurzenie roztworami27 do transdukcji mikroRNA do żył). 
	UWAGA: W przypadku tego protokołu przeszczepy żył nasączono solą fizjologiczną buforowaną fosforanami, kontrolnym mikroRNA i mikroRNA-145. W tym miejscu protokół można wstrzymać.</li>
</ol>
4. Wprowadzenie tętnicy szyjnej przez pobraną żyłę szyjną
<ol>
	<li>Odsłoń odcinek 20–30 mm tętnicy szyjnej ipsilateralnej. Ostrożnie oddziel tętnicę od żyły i nerwu w pobliżu. Podwiązać wszystkie gałęzie odsłoniętej żyły za pomocą jedwabnego szwu 4-0.</li>
	<li>Heparynę sodową podawać dożylnie (200 j.m./kg). Odczekaj 3–4 minuty.</li>
	<li>Zacisnąć proksymalne i dystalne końce tętnicy za pomocą zacisków chirurgicznych. Przetnij tętnicę pośrodku, między zaciskami. Wstrzyknąć sól fizjologiczną zwykłą do naciętej tętnicy szyjnej proksymalnie i dystalnie, aby rozciągnąć tętnicę. 
	UWAGA: Tętnica szyjna królika ma tendencję do kurczenia się. Wybierz dobrze rozdęte miejsce jako miejsce zespolenia.</li>
	<li>Zespolenie pobranej żyły z tętnicą w odwrócony sposób od końca do końca.
	<ol>
		<li>Wprowadzić cewnik dożylny o sile 20 G do pobranej żyły od dystalnego do bliższego, aby utrzymać otwarte światło żylne podczas zespolenia dystalnego.</li>
		<li>Zespolenie bliższego końca żyły z dystalnym końcem tętnicy za pomocą 8-0 Szwy przerywane polipropylenowe. Umieść dwa szwy kotwiące w miejscu i w przeciwległym miejscu. Dodaj szwy po górnej stronie linii zespolenia między szwami kotwiczącymi.</li>
		<li>Odwróć tętnicę i przeszczep żyły do góry nogami. Dodaj szwy na pozostałej części linii zespolenia.</li>
		<li>Usunąć cewnik dożylny z żyły. Zacisnąć przeszczep żyły proksymalnie i dystalnie odkleić tętnicę szyjną. Upewnij się, że przeszczep żyły rozszerza się stopniowo.</li>
		<li>Zespolenie dystalnego końca żyły z bliższym końcem tętnicy za pomocą 8-0 Szwy przerywane polipropylenowe. Odkleić tętnicę, aby sprawdzić krwawienie z miejsc zespolenia. W razie potrzeby dodać szwy do hemostazy. 
		UWAGA: Delikatne uciskanie miejsca krwawienia gazą i odczekanie może wystarczyć do hemostazy. Sprawdź natychmiastowe rozszerzanie się i silne pulsowanie przeszczepu żyły po bliższym odkleszczeniu. Jeśli nie zostanie to zaobserwowane, rozważ powtórzenie kroków 4.4.2–4.4.3</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Podwiązywać tętnicę szyjną wewnętrzną za pomocą jedwabnego szwu 4-0, aby symulować zły stan odpływu i ułatwić przerost błony wewnętrznej.</li>
	<li>Oczyść ranę solą fizjologiczną. Zamknąć ranę za pomocą poliglaktyny 3-0 910, warstwa po warstwie.</li>
</ol>
5. Zabiegi pooperacyjne
<ol>
	<li>Zakończ znieczulenie i zdejmij maskę anestezjologiczną po sprawdzeniu spontanicznego oddechu zwierzęcia. Często sprawdzaj stan zwierzęcia, aż wyzdrowieje ze znieczulenia.</li>
	<li>Zwierzę należy trzymać oddzielnie od innych zwierząt do czasu całkowitego przywrócenia funkcji oddechowych. W razie potrzeby wspomagaj oddychanie ręcznie. Nie zwracaj zwierzęcia do większej grupy, dopóki nie wyzdrowiejesz.</li>
	<li>Sprawdź spożycie pokarmu i wody po wyzdrowieniu ze znieczulenia i zapewnij odpowiednie wsparcie żywieniowe. Podawać leki przeciwbólowe (np. buprenorfinę 0,05–0,2 mg/kg podskórnie 2x dziennie przez 3 dni) i sprawdzać, czy nie ma oznak dyskomfortu lub bólu.</li>
</ol>

<ol><li>Causes of death, 2000-2016, Global Health Estimates (GHE). World Health Organization (WHO). , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/">https://www.who.int/healthinfo/global_burden_disease/estimates/en/</a> (2019).</li>
<li>Benjamin, E. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2019+Update%3A+A+Report+From+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Heart Disease and Stroke Statistics-2019 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 139 (10), 56(2019).</li>
<li>Norgren, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inter-Society+Consensus+for+the+Management+of+Peripheral+Arterial+Disease+%28TASC+II%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Inter-Society Consensus for the Management of Peripheral Arterial Disease (TASC II).</a> Journal of Vascular Surgery. 45, Suppl S 5-67 (2007).</li>
<li>Caliskan, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Saphenous+vein+grafts+in+contemporary+coronary+artery+bypass+graft+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Saphenous vein grafts in contemporary coronary artery bypass graft surgery.</a> Nature Reviews: Cardiology. , (2020).</li>
<li>Goldman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+patency+of+saphenous+vein+and+left+internal+mammary+artery+grafts+after+coronary+artery+bypass+surgery%3A+results+from+a+Department+of+Veterans+Affairs+Cooperative+Study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 44 (11), 2149-2156 (2004).</li>
<li>Muto, A., Model, L., Ziegler, K., Eghbalieh, S. D., Dardik, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+vein+graft+adaptation+to+the+arterial+circulation%3A+insights+into+the+neointimal+algorithm+and+management+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Journal%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of vein graft adaptation to the arterial circulation: insights into the neointimal algorithm and management strategies.</a> Circulation Journal. 74 (8), 1501-1512 (2010).</li>
<li>Motwani, J. G., Topol, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aortocoronary+saphenous+vein+graft+disease%3A+pathogenesis%2C+predisposition%2C+and+prevention%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Aortocoronary saphenous vein graft disease: pathogenesis, predisposition, and prevention.</a> Circulation. 97 (9), 916-931 (1998).</li>
<li>Schachner, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacologic+inhibition+of+vein+graft+neointimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Pharmacologic inhibition of vein graft neointimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 131 (5), 1065-1072 (2006).</li>
<li>Kulik, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Secondary+prevention+after+coronary+artery+graft+surgery%3A+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Secondary prevention after coronary artery graft surgery: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Circulation. 131 (10), 927-964 (2015).</li>
<li>Gerhard-Herman, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2016+AHA%2FACC+Guideline+on+the+Management+of+Patients+With+Lower+Extremity+Peripheral+Artery+Disease%3A+Executive+Summary%3A+A+Report+of+the+American+College+of+Cardiology%2FAmerican+Heart+Association+Task+Force+on+Clinical+Practice+Guidelines%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">2016 AHA/ACC Guideline on the Management of Patients With Lower Extremity Peripheral Artery Disease: Executive Summary: A Report of the American College of Cardiology/American Heart Association Task Force on Clinical Practice Guidelines.</a> Circulation. 135 (12), 686-725 (2017).</li>
<li>Aboyans, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2017+ESC+Guidelines+on+the+Diagnosis+and+Treatment+of+Peripheral+Arterial+Diseases%2C+in+collaboration+with+the+European+Society+for+Vascular+Surgery+%28ESVS%29%3A+Document+covering+atherosclerotic+disease+of+extracranial+carotid+and+vertebral%2C+mesenteric%2C+renal%2C+upper+and+lower+extremity+arteries+Endorsed+by%3A+the+European+Stroke+Organization+%28ESO%29+The+Task+Force+for+the+Diagnosis+and+Treatment+of+Peripheral+Arterial+Diseases+of+the+European+Society+of+Cardiology+%28ESC%29+and+of+the+European+Society+for+Vascular+Surgery+%28ESVS%29%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">2017 ESC Guidelines on the Diagnosis and Treatment of Peripheral Arterial Diseases, in collaboration with the European Society for Vascular Surgery (ESVS): Document covering atherosclerotic disease of extracranial carotid and vertebral, mesenteric, renal, upper and lower extremity arteries Endorsed by: the European Stroke Organization (ESO) The Task Force for the Diagnosis and Treatment of Peripheral Arterial Diseases of the European Society of Cardiology (ESC) and of the European Society for Vascular Surgery (ESVS).</a> European Heart Journal. 39 (9), 763-816 (2018).</li>
<li>Neumann, F. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2018+ESC%2FEACTS+Guidelines+on+myocardial+revascularization%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">2018 ESC/EACTS Guidelines on myocardial revascularization.</a> European Heart Journal. 40 (2), 87-165 (2019).</li>
<li>Alexander, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+and+safety+of+edifoligide%2C+an+E2F+transcription+factor+decoy%2C+for+prevention+of+vein+graft+failure+following+coronary+artery+bypass+graft+surgery%3A+PREVENT+IV%3A+a+randomized+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Medical+Association%22%5BJournal%5D)">Efficacy and safety of edifoligide, an E2F transcription factor decoy, for prevention of vein graft failure following coronary artery bypass graft surgery: PREVENT IV: a randomized controlled trial.</a> Journal of the American Medical Association. 294 (19), 2446-2454 (2005).</li>
<li>Carrel, A., Guthrie, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uniterminal+and+biterminal+venous+transplantations%5BTitle%5D)+AND+%22Surgery%2C+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">Uniterminal and biterminal venous transplantations.</a> Surgery, Gynecology and Obstetrics. 2 (3), 266-286 (1906).</li>
<li>Nabatoff, R. A., Touroff, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+maximal-size+vein+graft+feasible+in+the+replacement+of+experimental+aortic+defects%2C+long+term+observations+concerning+the+function+and+ultimate+fate+of+the+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+of+the+New+York+Academy+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">The maximal-size vein graft feasible in the replacement of experimental aortic defects, long term observations concerning the function and ultimate fate of the graft.</a> Bulletin of the New York Academy of Medicine. 28 (9), 616(1952).</li>
<li>Kanar, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+vascular+grafts.+I.+The+effects+of+dicetyl+phosphate+on+venous+autografts+implanted+in+the+thoracic+aorta+of+growing+pigs%3A+a+preliminary+report%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Experimental vascular grafts. I. The effects of dicetyl phosphate on venous autografts implanted in the thoracic aorta of growing pigs: a preliminary report.</a> Annals of Surgery. 138 (1), 73-81 (1953).</li>
<li>Jones, T. I., Dale, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+peripheral+autogenous+vein+grafts%5BTitle%5D)+AND+%22AMA+Archives+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Study of peripheral autogenous vein grafts.</a> AMA Archives of Surgery. 76 (2), 294-306 (1958).</li>
<li>Stehbens, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+production+of+aneurysms+by+microvascular+surgery+in+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Experimental production of aneurysms by microvascular surgery in rabbits.</a> Vascular Surgery. 7 (3), 165-175 (1973).</li>
<li>Bannister, C. M., Mundy, L. A., Mundy, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fate+of+small+diameter+cervical+veins+grafted+into+the+common+carotid+arteries+of+growing+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Fate of small diameter cervical veins grafted into the common carotid arteries of growing rabbits.</a> Journal of Neurosurgery. 46 (1), 72-77 (1977).</li>
<li>Bergmann, M., Walther, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrastructural+changes+of+venous+autologous+bypass+grafts+in+rabbits%3A+correlation+of+patency+and+development%5BTitle%5D)+AND+%22Basic+Research+in+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Ultrastructural changes of venous autologous bypass grafts in rabbits: correlation of patency and development.</a> Basic Research in Cardiology. 77 (6), 682-694 (1982).</li>
<li>Murday, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intimal+hyperplasia+in+arterial+autogenous+vein+grafts%3A+a+new+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+Research%22%5BJournal%5D)">Intimal hyperplasia in arterial autogenous vein grafts: a new animal model.</a> Cardiovascular Research. 17 (8), 446-451 (1983).</li>
<li>Quist, W. C., LoGerfo, F. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevention+of+smooth+muscle+cell+phenotypic+modulation+in+vein+grafts%3A+a+histomorphometric%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Prevention of smooth muscle cell phenotypic modulation in vein grafts: a histomorphometric.</a> Journal of Vascular Surgery. 16 (2), 225-231 (1992).</li>
<li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+perioperative+catheter+injury+on+the+long-term+vein+graft+function+and+morphology%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Surgical+Research%22%5BJournal%5D)">Influence of perioperative catheter injury on the long-term vein graft function and morphology.</a> Journal of Surgical Research. 66 (2), 109-114 (1996).</li>
<li>Davies, M. G., Dalen, H., Svendsen, E., Hagan, P. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Balloon+catheter+injury+and+vein+graft+morphology+and+function%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Balloon catheter injury and vein graft morphology and function.</a> Annals of Vascular Surgery. 10 (5), 429-442 (1996).</li>
<li>Jiang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+vein+grat+model%3A+adaptation+to+differential+flow+environments%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">A novel vein grat model: adaptation to differential flow environments.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 286 (1), 240-245 (2004).</li>
<li>Ohnaka, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+microRNA-145+to+prevent+vein+graft+disease+in+rabbits+by+regulation+of+smooth+muscle+cell+phenotype%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Effect of microRNA-145 to prevent vein graft disease in rabbits by regulation of smooth muscle cell phenotype.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 148 (2), 676-682 (2014).</li>
<li>Nishio, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA-145-loaded+poly%28lactic-co-glycolic+acid%29+nanoparticles+attenuate+venous+intimal+hyperplasia+in+a+rabbit+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">MicroRNA-145-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles attenuate venous intimal hyperplasia in a rabbit model.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 157 (6), 2242-2251 (2019).</li>
<li>Ohno, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+reendothelialization+with+suppressed+thrombogenic+property+and+neointimal+hyperplasia+of+rabbit+jugular+vein+grafts+by+adenovirus-mediated+gene+transfer+of+C-type+natriuretic+peptide%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Accelerated reendothelialization with suppressed thrombogenic property and neointimal hyperplasia of rabbit jugular vein grafts by adenovirus-mediated gene transfer of C-type natriuretic peptide.</a> Circulation. 105 (14), 1623-1626 (2002).</li>
<li>Osgood, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+vein+graft+preparation+promotes+cellular+dysfunction%2C+oxydative+stress%2C+and+intimal+hyperplasia+in+human+saphenous+vein%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Vascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Surgical vein graft preparation promotes cellular dysfunction, oxydative stress, and intimal hyperplasia in human saphenous vein.</a> Journal of Vascular Surgery. 60 (1), 202-211 (2014).</li>
<li>Shintani, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intraoperative+transfection+of+vein+grafts+with+the+NFkappaB+decoy+in+a+canine+aortocoronary+bypass+model%3A+a+strategy+to+attenuate+intimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Intraoperative transfection of vein grafts with the NFkappaB decoy in a canine aortocoronary bypass model: a strategy to attenuate intimal hyperplasia.</a> Annals of Thoracic Surgery. 74 (4), 1132-1137 (2002).</li>
<li>Petrofski, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gene+delivery+to+aortocoronary+saphenous+vein+grafts+in+a+large+animal+model+of+intimal+hyperplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Gene delivery to aortocoronary saphenous vein grafts in a large animal model of intimal hyperplasia.</a> Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 127 (1), 27-33 (2004).</li>
<li>Steger, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neointimal+hyperplasia+in+a+porcine+model+of+vein+graft+disease%3A+comparison+between+organ+culture+and+coronary+artery+bypass+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22European+Surgery%22%5BJournal%5D)">Neointimal hyperplasia in a porcine model of vein graft disease: comparison between organ culture and coronary artery bypass grafting.</a> European Surgery. 43 (3), 174-180 (2011).</li>
<li>Thim, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oversized+vein+grafts+develop+advanced+atherosclerosis+in+hypercholesterolemic+minipigs%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Cardiovascular+Disorders%22%5BJournal%5D)">Oversized vein grafts develop advanced atherosclerosis in hypercholesterolemic minipigs.</a> BMC Cardiovascular Disorders. 12 (24), (2012).</li>
<li>Zou, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+venous+bypass+graft+arteriosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Mouse model of venous bypass graft arteriosclerosis.</a> American Journal of Pathology. 153 (4), 1301-1310 (1998).</li>
<li>de Vries, M. R., Simons, K. H., Jukema, J. W., Braun, J., Quax, P. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vein+graft+failure%3A+from+pathophysiology+to+clinical+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Vein graft failure: from pathophysiology to clinical outcomes.</a> Nature Reviews Cardiology. 13 (8), 451-470 (2016).</li>
<li>Dietrich, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+development+of+vein+graft+atheroma+in+ApoE-deficient+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Rapid development of vein graft atheroma in ApoE-deficient mice.</a> American Journal of Pathology. 157 (2), 659-669 (2000).</li>
<li>Kumar, A., Lindner, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Remodeling+with+neointima+formation+in+the+mouse+carotid+artery+after+cessation+of+blood+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Arteriosclerosis%2C+Thrombosis%2C+and+Vascular+Biology%22%5BJournal%5D)">Remodeling with neointima formation in the mouse carotid artery after cessation of blood flow.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 17 (10), 2238-2244 (1997).</li>
<li>Lindner, V., Fingerie, J., Reidy, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+model+of+arterial+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Mouse model of arterial injury.</a> Circulation Research. 73 (5), 792-796 (1993).</li>
<li>Moroi, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+genetic+deficiency+of+endothelial+nitric+oxide%2C+gender%2C+and+pregnancy+in+vascular+response+to+injury+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Interaction of genetic deficiency of endothelial nitric oxide, gender, and pregnancy in vascular response to injury in mice.</a> Journal of Clinical Investigation. 101 (6), 1225-1232 (1998).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Niniejszy protokół ma na celu zapewnienie eksperymentalnej platformy do testowania różnych interwencji molekularnych lub genetycznych dla VSMC w celu kontrolowania fenotypu od stanu proliferacyjnego do skurczowego, a następnie tłumienia progresji przerostu żylnego błony wewnętrznej in vivo. Korzystając z tego modelu, z powodzeniem przygotowaliśmy przerost błony wewnętrznej po 2 tygodniach od operacji (ryc. 1A) i wskazaliśmy potencjał terapeutyczny mikroRNA-145 do kontrolowania fenotypu<sup c...

Liczba pacjentów doświadczających chorób niedokrwiennych spowodowanych miażdżycą rośnie na całym świecie1. Pomimo obecnego postępu w medycznych i chirurgicznych terapiach chorób sercowo-naczyniowych, choroby niedokrwienne serca, takie jak zawał mięśnia sercowego, pozostają główną przyczyną zachorowalności i śmiertelności2. Ponadto choroby tętnic obwodowych charakteryzujące się zmniejszonym przepływem krwi do kończyn wywołują krytyczne niedokrwienie kończyn, w którym około 40% pacjentów traci nogi w ciągu 6 miesięcy od diagnozy, a śmiertelność wynosi do 20%3.
Operacje rewaskularyzacji, takie jak pomostowanie aortalno-wieńcowe (CABG) i chirurgia pomostowania tętnic obwodowych, są głównymi opcjami terapeutycznymi dla chorób niedokrwiennych. Celem tych operacji jest zapewnienie nowej ścieżki krwi, aby zapewnić wystarczający przepływ krwi w kierunku dystalnego miejsca zwężonych lub niedrożnych zmian tętnic miażdżycowych. Chociaż przeszczepy tętnicze in situ, takie jak tętnice piersiowe wewnętrzne dla CABG, są preferowane jako przeszczepy pomostowe ze względu na oczekiwaną dłuższą drożność, przeszczepy żył, takie jak autologiczne żyły odpiszczelowe, są powszechnie stosowane ze względu na większą dostępność i dostępność4. Słabym punktem przeszczepów żylnych jest słaba drożność w porównaniu do przeszczepów tętnic5 z powodu przyspieszonego przerostu błony wewnętrznej pod wpływem ciśnienia tętniczego, co prowadzi do choroby przeszczepu żyły6.
Choroba przeszczepu żył rozwija się w następujących trzech etapach: 1) zakrzepica; 2) przerost błony wewnętrznej; oraz 3) miażdżyca<klasa sup="xref">7. Aby rozwiązać problem choroby przeszczepów żył, przeprowadzono wiele badań podstawowych8. Jak dotąd, żadna strategia farmakologiczna inna niż terapie przeciwpłytkowe i obniżające stężenie lipidów nie jest zalecana w prewencji wtórnej po operacjach rewaskularyzacji naczyń wieńcowych lub obwodowych w najnowszych wytycznych9,10,11,12. W związku z tym, aby przezwyciężyć chorobę przeszczepów żylnych, zwłaszcza przerost błony wewnętrznej, konieczne jest stworzenie odpowiedniej platformy eksperymentalnej do dalszych badań.
Przerost błony wewnętrznej jest zjawiskiem adaptacyjnym, które występuje w odpowiedzi na zmianę otoczenia, gdzie komórki mięśni gładkich naczyń krwionośnych (VSMC) namnażają się, gromadzą i generują macierz zewnątrzkomórkową w błonie wewnętrznej. W związku z tym stanowi podstawę dla miażdżycy przeszczepu7. W błonie wewnętrznej hiperplastycznej VSMC wykazują proliferację i produkcję, a nie kurczenie się, co określa się mianem "zmiany fenotypowej"8. Jest to kluczowy cel badawczy mający na celu kontrolowanie fenotypu VSMC przeszczepów żylnych w celu zapobiegania chorobom przeszczepów żylnych, a na ten temat przeprowadzono liczne badania podstawowe8. Jednak randomizowane, kontrolowane badanie kliniczne, które miało na celu osiągnięcie farmakologicznej kontroli fenotypu VSMC, wykazało ograniczone wyniki13. Ponadto nie ma standardowych terapii zapobiegających przerostowi błony wewnętrznej. Konieczne są bardziej podstawowe badania, w tym badania na modelach zwierzęcych.
Aby promować badania w tej dziedzinie, kluczowe jest stworzenie modelu zwierzęcego, który rekapituluje przeszczepy żył pod ciśnieniem tętniczym, umożliwiając długoterminową, pooperacyjną obserwację. Carrel i wsp. ustalili psi model implantacji żyły szyjnej zewnętrznej do tętnicy szyjnej14. Następnie zastosowano różne przeszczepy żyłowe do zbadania fizjologicznych i patologicznych skutków zmian ciśnienia tętniczego krwi, w tym żyły głównej dolnej wszczepionej do aorty piersiowej lub brzusznej lub żyły odpiszczelowej wszczepionej do tętnicy udowej15,16,17. Modele te zostały zbudowane na większych zwierzętach, takich jak świnie lub psy, które nadają się do naśladowania choroby przeszczepu żyły w przypadku klinicznym. Jednak stworzenie modelu zwierzęcego, który można przygotować bez specjalnych technik chirurgicznych i przy niższych kosztach, byłoby idealne dla naukowców próbujących opracować nową strategię terapeutyczną tłumienia przerostu błony wewnętrznej poprzez kontrolę fenotypu VSMC in vivo. Początkowo wprowadzenie żyły szyjnej do tętnicy szyjnej u królika zostało wprowadzone w dziedzinie neurochirurgii18,19. Następnie zastosowano go do badań nad przerostem błony wewnętrznej20,21. Początkowy model polega na samej inpozycji żylnej, co pozwala zaoszczędzić czas. Co więcej, późniejsze badanie wykazało, że przygotowanie przeszczepu żyły wpłynęło również na przerost błony wewnętrznej22. Davies i wsp. ocenili wpływ uszkodzenia cewnika balonowego na przerost błony wewnętrznej w modelu interpozycji żylnej królika23,24. Chociaż uszkodzenie cewnika balonowego oprócz wstawiania żył było bardziej istotne w warunkach klinicznych, pożądany był również bardziej powtarzalny model. W związku z tym Jiang i wsp. zbadali wpływ środowisk przepływu różnicowego na przerost błony wewnętrznej i ustalili procedurę podwiązywania dystalnych gałęzi jako powtarzalny model25. Jednak w momencie wszczepienia przeszczepu żyły zastosowali technikę mankietową, która wydaje się różnić od zespolenia szytego ręcznie w warunkach klinicznych. W niniejszym protokole przedstawiamy powtarzalną, istotną klinicznie i szeroko dostępną procedurę przygotowania modelu wstawiania żył królika do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi.

<table><tbody><tr><td>10% roztwór powidonu i jodu</td><td>Nakakita</td><td>872612</td><td>Materiały chirurgiczne</td></tr><tr><td>2-0 VICRYL Plus</td><td>Johnson and Johnson</td><td>VCP316H</td><td>Materiały chirurgiczne</td></tr><tr><td>4-0 Szew jedwabny</td><td>Alfresa pharma</td><td>GA04SB</td><td>Materiały chirurgiczne</td></tr><tr><td>8-0 szew polipropylenowy</td><td>Ethicon</td><td>8741H</td><td>Materiały chirurgiczne</td></tr><tr><td>Cefazorin sodu</td><td>Nichi-Iko Pharmaceutical</td><td>6132401D3196</td><td>Antybiotyki</td></tr><tr><td>Cewnik Fogarty'ego (2Fr)</td><td>Edwards Lifesciences LLC</td><td>E-060-2F</td><td>Materiały chirurgiczne</td></tr><tr><td>Heparyna</td><td>Nipro</td><td>873334</td><td>Antykoagulant</td></tr><tr><td>Cewnik dożylny (20G)</td><td>Terumo</td><td>SR-OT2051C</td><td>Materiały chirurgiczne</td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>Fujifilm</td><td>095-06573</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Chlorowodorek lidokainy</td><td>MP Biomedicals</td><td>193917</td><td>Znieczulenie</td></tr><tr><td>Pentobarbital sodu</td><td>Tokio Przemysł chemiczny</td><td>P0776</td><td>Znieczulenie</td></tr></tbody></table>

model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji przy użyciu przeszczepów żył do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi

A Rabbit Venous Interposition Model Mimicking Revascularization Surgery using Vein Grafts to Assess Intimal Hyperplasia under Arterial Blood Pressure

Chociaż przeszczepy żył były powszechnie używane jako przeszczepy autologiczne w operacjach rewaskularyzacji chorób niedokrwiennych, długoterminowa drożność pozostaje słaba z powodu przyspieszenia przerostu błony wewnętrznej spowodowanego ekspozycją na ciśnienie tętnicze krwi. Niniejszy protokół ma na celu ustalenie eksperymentalnego przerostu żył wewnętrznych poprzez wstawienie żył szyjnych królika do ipsilateralnych tętnic szyjnych. Protokół nie wymaga zabiegów chirurgicznych w głąb tułowia, a rozległość nacięcia jest ograniczona, co jest mniej inwazyjne dla zwierząt, umożliwiając długotrwałą obserwację po implantacji. Ta prosta procedura umożliwia naukowcom zbadanie strategii tłumienia progresji przerostu błony wewnętrznej wszczepionych przeszczepów żylnych. Korzystając z tego protokołu, opisaliśmy efekty transdukcji mikroRNA-145 (miR-145), o którym wiadomo, że kontroluje fenotyp komórek mięśni gładkich naczyń krwionośnych (VSMC) od stanu proliferacyjnego do skurczowego, do pobranych przeszczepów żył. Potwierdziliśmy osłabienie przerostu błony wewnętrznej przeszczepów żył poprzez transdukcję miR-145 przed zabiegiem implantacji poprzez zmianę fenotypu VSMC. Tutaj przedstawiamy mniej inwazyjną platformę eksperymentalną do zbadania strategii, które można zastosować do osłabienia przerostu błony wewnętrznej przeszczepów żył w operacjach rewaskularyzacji.

Rysunek 1A przedstawia reprezentatywny obraz prawidłowej hiperplazji intimy 2 tygodnie po operacji interpozycji żylnej (panel górny). Panel dolny pokazuje efekty terapeutyczne nanocząsteczek kopolimeru kwasu mlekowego i glikolowego (poly(lactic-co-glycolic acid)) obciążonych microRNA-145, które osłabiły hiperplazję intimy (panel dolny). Rysunek 1B przedstawia porównanie hiperplazji intimy pomiędzy grupą kontrolną z zastosowaniem soli fizjologicznej (PBS), grupą ...

Obecny protokół ma na celu eksperymentalne stworzenie przerostu żył wewnętrznych poprzez poddanie żył działaniu ciśnienia krwi tętniczej w celu opracowania strategii osłabienia przerostu żył wewnętrznych po operacji rewaskularyzacji za pomocą przeszczepów żyłowych.

Model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji przy użyciu przeszczepów żył do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi

Although vein grafts have been commonly used as autologous grafts in revascularization surgeries for ischemic diseases, the long-term patency remains poor ...

Nasz protokół zapewnia łatwy, opłacalny, powtarzalny i klinicznie istotny model dla badaczy zajmujących się przerostem żylnym błony wewnętrznej. Nasz protokół jest zrównoważony ekonomicznie, klinicznie i technicznie. Dlatego jest to wysoce zalecane dla badaczy, którzy chcą zastosować swoje wyniki in vitro w warunkach in vivo.Wierzymy, że nasz protokół może być zastosowany do większego modelu zwierzęcego w celu opracowania nowych strategii leczenia chorób niedokrwiennych serca i kończyn dolnych. Nasz protokół dotyczy głównie dziedziny chirurgii sercowo-naczyniowej. Jednak może być również stosowany w leczeniu zmian zwyrodnieniowych w przetokach tętniczo-żylnych u pacjentów ze schyłkową niewydolnością nerek.Po znieczuleniu miejscowym i profilaktycznym podaniu antybiotyku przeciwbólowego należy zdezynfekować miejsce operowane 10% jodowidonem. I wykonaj nacięcie o grubości od 50 do 60 milimetrów za pomocą skalpela chirurgicznego w okolicy szyjki macicy znieczulonego samca japońskiego białego królika. Tępo wypreparuj tkanki podskórne i powięź, aby odsłonić 20 do 30 milimetrowy odcinek żyły szyjnej.I użyj jedwabnych szwów 4-0, aby podwiązać wszystkie gałęzie odsłoniętej żyły. Umieść jedwabny szew 2-0 wokół wewnętrznych i zewnętrznych żył szyjnych i wykonaj jednomilimetrowe nacięcie w ścianie żylnej dystalnej strony żyły. Wprowadzić 2-francuski cewnik balonowy od nacięcia w kierunku bliższej strony żyły.I podwiązaj jedwabny szew 2-0 w dystalnych miejscach żył szyjnych. Napompuj balon 200 mikrolitrami powietrza. I użyj balonu, aby trzykrotnie usunąć błonę wewnętrzną żyły w celu złuszczenia śródbłonka.Po trzecim pasażu podwiązaj bliższy koniec żyły i przetnij żyłę w miejscu dystalnym. Następnie wprowadzić cewnik dożylny o rozmiarze 20 do pobranej żyły od kierunku dystalnego do bliższego i przeciąć żyłę w miejscu bliższym. Aby połączyć tętnicę szyjną z żyłą szyjną żniwną, odsłoń 20 do 30 milimetrowy odcinek ipsilateralnej tętnicy szyjnej.I ostrożnie oddziel tętnicę od pobliskiej żyły i nerwu. Podwiązać wszystkie gałęzie odsłoniętej żyły za pomocą jedwabnego szwu 4-0. I podać dożylnie 200 jednostek międzynarodowych na kilogram heparyny sodu.Zacisnąć proksymalny i dystalny koniec tętnicy za pomocą gumowych klamer chirurgicznych. I przetnij tętnicę między zaciskami. Wstrzyknąć normalną sól fizjologiczną do naciętej tętnicy szyjnej proksymalnie i dystalnie, aby rozciągnąć tętnicę.I umieść żyłę żniwną w pobliżu tętnicy, aby zespolić naczynie w odwrócony sposób od końca do końca. Aby zespoleć bliższy koniec żyły z dystalnym końcem tętnicy, umieść dwa szwy kotwiczne 8-0 polipropylen w miejscu i po przeciwnej stronie. Dodaj szwy po górnej stronie linii zespolenia między szwami kotwiczącymi.Odwróć tętnicę i przeszczep żyły do góry nogami. I dodaj szwy na pozostałej części linii zespolenia. Następnie wyjmij cewnik dożylny z żyły i zaciśnij przeszczep żyły proksymalnie.Odciąć dystalnie tętnicę szyjną. I obserwuj, czy przeszczep żyły rozszerza się stopniowo. Korzystanie z 8-0 Szwy przerywane polipropylenowe, zespolenie dystalnego końca żyły z bliższym końcem tętnicy.I odkleić tętnicę, aby sprawdzić, czy nie ma krwawienia z miejsc zespolenia. Na koniec podwiązaj tętnicę szyjną wewnętrzną za pomocą jedwabnego szwu 4-0, aby zasymulować zły stan spływu i ułatwić przerost błony wewnętrznej. Następnie oczyść ranę solą fizjologiczną.Zamknij nacięcie warstwami poliglaktyną 910 3-0. I pozwól królikowi w pełni wyzdrowieć dzięki monitorowaniu przed powrotem zwierzęcia do jego domowej klatki. Na tym reprezentatywnym obrazie można zaobserwować udany przerost błony wewnętrznej po 2 tygodniach od operacji wstawiania żył.Tutaj można zaobserwować terapeutyczne działanie nanocząstek poli(kwasu mlekowo-ko-glikolowego) naładowanych mikroRNA-145 na morfologię przerostu błony wewnętrznej. Rzeczywiście, leczenie mikroRNA załadowanymi nanocząstkami poli(kwasu mlekowo-ko-glikolowego) powoduje znaczne osłabienie przerostu błony wewnętrznej. Ponadto barwienie immunologiczne Ki-67, markera proliferacji komórek, ujawnia mniej komórek Ki-67-dodatnich w grupie leczonej mikroRNA-145, co wskazuje na zmianę fenotypu komórek mięśni gładkich naczyń krwionośnych z niedojrzałego stanu proliferacyjnego do dojrzałego stanu skurczowego.Głównym celem naszego protokołu jest osiągnięcie drożności wszczepionego przeszczepu. Ważne jest również, aby potwierdzić, że przeszczep rozszerza się po odciśnięciu tętnicy szyjnej.

a-rabbit-venous-interposition-model-mimicking-revascularization

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Opisano zoptymalizowaną technikę mikrosurgicalnego tworzenia tętniaków rozwidleń tętniczych, naśladujących ludzkie tętniaki rozwidleń naczyń mózgowych. Torebka żylna zostaje wszyta w sztucznie stworzone prawdziwe rozwidlenie obu tętnic szyjnych wspólnych. Zastosowanie ułatwionych technik mikrosurgicalnych oraz agresywnego przeciwkrzeplenia i analgezji pooperacyjnej prowadzi do zminimalizowania wskaźników zachorowalności oraz wysokiego stopnia drożności tętniaków.

Mikrochirurgiczne tętniaki rozwidleń tętniczych z wykorzystaniem zastawki żylnej w modelu królika: aspekty techniczne

Hiperplazja neointimy jest główną przyczyną zwężenia w żyłach arteryalizowanych. Proponujemy nowy protokół, w którym żyła zewnętrzna szyjna prawa jest przeszczepiana z wykorzystaniem techniki mankietowej do tętnicy szyjnej wspólnej u szczurów Sprague Dawley. Przeżywalność w momencie uśmiercenia zwierząt wynosiła 100 %.

Szkolenie z zaawansowanej techniki mikrosurgicalnej: Interpozycja przeszczepu z żyły szyjnej zewnętrznej w tętnicy szyjnej wspólnej u szczurów

W tym filmie demonstrujemy procedurę chirurgicznego pobrania odcinka żyły szyjnej z modelu królika. Wycięty segment może być używany jako autologiczny przeszczep żyły do badania przerostu błony wewnętrznej, który rozwija się z powodu ciśnienia tętniczego krwi.

Pobranie przeszczepu żyły szyjnej od modelu królika: zabieg chirurgiczny polegający na wycięciu odcinka żyły szyjnej królika do badań ex vivo

Ten film pokazuje interpozycję tętnicy szyjnej królika z żyłą szyjną w celu wywołania przerostu żył wewnętrznych poprzez poddanie żył ciśnieniu tętniczemu. Model ten pomoże w badaniu interwencji molekularnych i genetycznych w celu osłabienia progresji przerostu błony wewnętrznej po operacjach rewaskularyzacji.

Interpozycja tętnicy szyjnej i żyły szyjnej: technika wywoływania przerostu żylnej błony wewnętrznej w modelu królika

Źródło: Wanderer, S.,  i inni. Model tętniaka mikrochirurgicznego bifurkacji u królika. J. Vis. Exp. (2020)Ten film pokazuje tworzenie eksperymentalnego modelu tętniaka u królika przy użyciu torebki naczyniowej poddanej elastazie. Po wycięciu fragmentu prawego CCA, worek jest traktowany elastazą, a następnie zszywany do lewego CCA w celu przywrócenia przepływu krwi. Powstałe naprężenia na osłabionych ściankach worka indukują powstawanie tętniaka.

Opracowanie eksperymentalnego modelu tętniaka u królika przy użyciu torebki naczyniowej nasączonej elastazą

Ten film demonstruje model do badania rozwoju przerostu mięśniowo-wewnętrznego, po operacji wstawiania żył u szczurów.

Model wstawiania żył: odpowiedni model do badania drożności przeszczepu bypassów

Ta metoda opisuje umieszczanie przeszczepów żył interpozycyjnych u królików, transdukcję przeszczepów i osiągnięcie trwałej ekspresji transgenu. Pozwala to na badanie fizjologicznych i patologicznych ról transgenów i ich produktów białkowych w przeszczepionych żyłach oraz testowanie terapii genowych w chorobach przeszczepów żył.

Króliczy model trwałej ekspresji transgenu w przeszczepach interpozycji żyły szyjnej do tętnicy szyjnej wspólnej

Opisujemy zabieg chirurgiczny stosowany do wywołania niedokrwienia obwodowego u królików z hiperlipidemią i cukrzycą. Operacja ta działa jako model przedkliniczny dla stanów doświadczanych w chorobie tętnic obwodowych u pacjentów. Angiografia jest również opisywana jako sposób pomiaru stopnia wprowadzonego niedokrwienia i odzyskania perfuzji.

Przedkliniczny model niedokrwienia kończyn tylnych u królików z cukrzycą

Rozwój i testowanie urządzeń wewnątrznaczyniowych do leczenia tętniaków wewnątrzczaszkowych jest nadal bardzo ważne. Większość stosowanych obecnie modeli tętniaków pomija albo ważne cechy zwyrodniałej ściany tętnicy, albo hemodynamikę prawdziwego rozwidlenia. Dlatego naszym celem było zaprojektowanie nowatorskiego modelu bifurkacji worka tętniczego u królików.

Worek tętniczy Model tętniaka bifurkacji mikrochirurgicznej u królika

W tym protokole, nowatorskie obejście żył świni zostało przeprowadzone przez małe nacięcie w lewej ścianie klatki piersiowej bez krążenia pozaustrojowego. Wykonano pooperacyjne badanie patomorfologiczne, które wykazało pogrubienie błony wewnętrznej.

Opracowanie i ocena modelu choroby przeszczepu żyły świni

Odpowiedni model zwierzęcy jest potrzebny do zrozumienia mechanizmów patologicznych leżących u podstaw zwężenia zastawki aortalnej (AVS) i oceny skuteczności interwencji terapeutycznych. Niniejszy protokół opisuje nową procedurę opracowywania modelu królika AVS poprzez bezpośrednie uszkodzenie balonu in vivo.

Model zwężenia zastawki aortalnej królika wywołany bezpośrednim uszkodzeniem balonu

Poznaj model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi. Ta metoda pozwala badać strategie leczenia chorób niedokrwiennych serca i kończyn dolnych.

Model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji przy użyciu przeszczepów żył do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi (Wideo) | JoVE Journal

Model wstawiania żył królika naśladujący operację rewaskularyzacji przy użyciu przeszczepów żył do oceny przerostu błony wewnętrznej pod ciśnieniem tętniczym krwi

Przeglądaj więcej filmów