-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Neuroscience
Celowanie in vivo w neuronalne komórki progenitorowe w korze nowej fretki za pomocą elektroporacj...
Celowanie in vivo w neuronalne komórki progenitorowe w korze nowej fretki za pomocą elektroporacj...
JoVE Journal
Neuroscience
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Neuroscience
In Vivo Targeting of Neural Progenitor Cells in Ferret Neocortex by In Utero Electroporation

Celowanie in vivo w neuronalne komórki progenitorowe w korze nowej fretki za pomocą elektroporacji in utero

Full Text
6,499 Views
07:03 min
May 6, 2020

DOI: 10.3791/61171-v

Nereo Kalebic1,2, Barbara Langen1,3, Jussi Helppi1, Hiroshi Kawasaki4, Wieland B. Huttner1

1Max Planck Institute of Molecular Cell Biology and Genetics, 2Human Technopole, 3Landesdirektion Sachsen, 4Department of Medical Neuroscience, Graduate School of Medical Sciences,Kanazawa University

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study presents a protocol for genetic manipulation in the embryonic ferret brain using in utero electroporation. The method focuses on targeting neural progenitor cells in vivo within the developing neocortex, providing insights into brain development mechanisms.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Developmental Biology
  • Genetic Manipulation

Background

  • In utero electroporation allows precision targeting of neural stem cells.
  • The ferret is a key model for studying neocortex expansion and folding.
  • This method enhances understanding of the developmental processes in the brain.
  • Previous studies have explored evolutionary gene functions using this approach.

Purpose of Study

  • To develop a reliable method for genetic manipulation in the embryonic ferret brain.
  • To investigate the roles of specific genes in neocortical development.
  • To understand the expansion and folding mechanisms of the neocortex.

Methods Used

  • In vivo electroporation is performed on embryonic ferrets.
  • DNA solution is injected into the cerebral ventricles of 33-day-old embryos.
  • Five electrical pulses are applied to facilitate gene expression at targeted sites.
  • Key steps include anesthesia, incision, and careful administration of the DNA solution.
  • Following electroporation, various molecular markers are used to analyze targeted cells.

Main Results

  • Postnatal analysis shows targeted cells differentiate into neurons and glia.
  • Gene expression in progenitor cells can be tracked using transcription factor markers.
  • Significant findings include the identification of key genes related to neocortex expansion.

Conclusions

  • This method opens avenues for studying gene functions in brain development.
  • Findings have implications for understanding evolution of the human neocortex.
  • The electroporation technique enables targeted manipulation of gene expression during critical developmental phases.

Frequently Asked Questions

What are the advantages of using ferrets in this study?
Ferrets provide a valuable model for studying neocortex development due to their similar developmental progression to humans.
How is the genetic manipulation implemented?
Performing in utero electroporation allows for DNA delivery specifically to neural progenitor cells, enhancing targeted studies.
What types of outcomes are obtained from this method?
The method yields vital insights into cell differentiation, gene expression, and the structural development of the neocortex.
Can this technique be adapted for other species?
Yes, while this study focuses on ferrets, in utero electroporation can be adapted for other developing mammals.
What are the key limitations of this protocol?
The procedure requires precise execution and careful monitoring of the embryos to ensure successful outcomes and minimize risks.
How can the results of this study contribute to understanding brain disorders?
By manipulating specific genes, researchers can identify pathways involved in developmental disorders and potential therapies.
What is the timeline for observing effects after electroporation?
Effects can be analyzed within days of electroporation, with significant observations noted from postnatal day zero to day 16.

Prezentowany tutaj jest protokół do przeprowadzenia manipulacji genetycznej w mózgu fretki embrionalnej za pomocą elektroporacji in utero. Metoda ta pozwala na celowanie w neuronalne komórki progenitorowe w korze nowej in vivo.

Protokół ten pozwala nam na przeprowadzenie manipulacji genetycznej in vivo w kluczowym modelu zwierzęcym, który pozwala nam badać rozszerzanie się i fałdowanie rozwijającej się kory nowej. Główną zaletą tej metody jest wykorzystanie wysokiej specyficzności przestrzennej i czasowej w celowaniu w te nerwowe komórki macierzyste, które są kluczowym typem komórek dla rozwoju mózgu. Przed rozpoczęciem zabiegu należy naciągnąć szklane naczynia włosowate na ściągacz do mikropipet i za pomocą kleszczyków odciąć dystalną część kapilary, aby wyregulować średnicę końcówki kapilary.

W 33 dniu embrionalnym dodaj odpowiednie stężenie DNA w PBS, uzupełnione 0,1%Fast Green z delikatnym mieszaniem i umieść 3-godzinną, znieczuloną, ciężarną samicę fretki na stole operacyjnym z poduszką rozgrzewającą. Potwierdź odpowiedni poziom sedacji, dotykając skóry okołogałkowej i ściskając skórę między drugim a trzecim lub trzecim i czwartym palcem obu kończyn tylnych. Izofluran może powodować działania niepożądane, w tym nudności i zawroty głowy.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Celowanie in vivo neuronalne komórki progenitorowe kora nowa fretki manipulacja genetyczna elektroporacja rozwój mózgu manipulacja embrionalna zabieg chirurgiczny iniekcja DNA roztwór PBS mikropipeta kapilarna protokół znieczulenia podawanie leków przeciwbólowych nacięcie chirurgiczne technika sterylna iniekcja mikrolitrowa

Related Videos

Wstrzyknięcie dokomorowe in utero i elektroporacja zarodków szczurów E16

19:04

Wstrzyknięcie dokomorowe in utero i elektroporacja zarodków szczurów E16

Related Videos

16.5K Views

Iniekcja dokomorowa in utero i elektroporacja zarodków myszy E15

26:17

Iniekcja dokomorowa in utero i elektroporacja zarodków myszy E15

Related Videos

28.7K Views

W macicy Elektroporacja, a następnie pierwotna hodowla neuronów w celu badania funkcji genów w podzbiorze neuronów korowych

08:24

W macicy Elektroporacja, a następnie pierwotna hodowla neuronów w celu badania funkcji genów w podzbiorze neuronów korowych

Related Videos

18.3K Views

Skuteczne dostarczanie genów do wielu terytoriów OUN za pomocą elektroporacji in utero

13:12

Skuteczne dostarczanie genów do wielu terytoriów OUN za pomocą elektroporacji in utero

Related Videos

20.6K Views

Elektroporacja myszy w macicy: kontrolowana czasoprzestrzenna transfekcja genów

09:30

Elektroporacja myszy w macicy: kontrolowana czasoprzestrzenna transfekcja genów

Related Videos

44K Views

Elektroporacja powierzchni pialu noworodków

06:22

Elektroporacja powierzchni pialu noworodków

Related Videos

14.4K Views

Elektroporacja selektywna dla podtypów interneuronów korowych

06:42

Elektroporacja selektywna dla podtypów interneuronów korowych

Related Videos

9.2K Views

Kora mózgowa, hipokamp, wzgórze, podwzgórze, jądro przegrody bocznej i jądro prążkowia specyficzne dla macicy elektroporacja u myszy C57BL/6

06:00

Kora mózgowa, hipokamp, wzgórze, podwzgórze, jądro przegrody bocznej i jądro prążkowia specyficzne dla macicy elektroporacja u myszy C57BL/6

Related Videos

29.1K Views

In Utero (w macicy) Podejścia elektroporacyjne do badania pobudliwości subpopulacji neuronalnych i połączeń pojedynczych komórek

10:49

In Utero (w macicy) Podejścia elektroporacyjne do badania pobudliwości subpopulacji neuronalnych i połączeń pojedynczych komórek

Related Videos

10.2K Views

Podwójna elektroporacja in utero w celu ukierunkowania na czasowo i przestrzennie oddzielone populacje komórek

10:45

Podwójna elektroporacja in utero w celu ukierunkowania na czasowo i przestrzennie oddzielone populacje komórek

Related Videos

8K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code