Operacyjne poprzeczne zwężenie aorty z wchłanialnym szwem w celu uzyskania przejściowego przerostu mięśnia sercowego

Protokół ten przedstawia ulepszoną metodę uzyskiwania przejściowego przerostu mięśnia sercowego za pomocą szwów wchłanialnych, które stymulują zmniejszenie przerostu lewej komory po usunięciu przeciążenia ciśnieniowego. Korzystając z tego protokołu, naukowcy mogą łatwo opanować model przy niższej śmiertelności operacyjnej. Procedurę zademonstruje Xiaoxia Huang, technik z mojego laboratorium.

Zacznij od ściśnięcia końcówki igły o rozmiarze 25 za pomocą uchwytu na igłę i stępienia jej. Następnie przełóż przez tę igłę wchłanialny szew 5/0 i wygiąć igłę pod kątem 90 stopni za pomocą uchwytu. Ściśnij końcówkę innej igły o rozmiarze 25, a następnie wygnij ją pod kątem 120 stopni i wygładź końcówkę za pomocą uchwytu, który będzie używany jako przekładka na etapie podwiązywania.

Przygotuj wysterylizowane narzędzia chirurgiczne, w tym jedne nożyczki okulistyczne, jedne mikronożyczki, dwie mikrochirurgiczne pęsety łokciowe, jeden uchwyt na igłę i jeden uchwyt na mikroigły. Aby rozpocząć operację, potwierdź całkowite znieczulenie myszy za pomocą odruchu wycofania pedału. Utrzymuj mysz w pozycji leżącej, mocując siekacze za pomocą szwu i mocując kończyny taśmą klejącą.

Usuń włosy z szyi i zdezynfekuj obszar jodem i 75% alkoholem. Rozpocznij operację od wykonania nacięcia powyżej 10 milimetrów w pozycji środkowej między wcięciem nadmostkowym a klatką piersiową. Następnie oddziel skórę i powięź powierzchowną.

Wykonaj nacięcie w pierwszej przestrzeni międzyżebrowej jak najbliżej mostka i tępo przebij, aby otworzyć tę przestrzeń pęsetą łokciową. Delikatnie oddziel miąższ i grasicę, aż widoczny będzie poprzeczny łuk aorty. Przełóż szew wchłanialny 5/0 pod łukiem aorty między tętnicą ramienno-głowową a lewą tętnicą szyjną wspólną za pomocą igły zatrzaskowej.

Umieść wcześniej przygotowaną przekładkę na aorcie poprzecznej i wykonaj podwójny węzeł na przekładce ze szwem. Delikatnie, ale szybko zdejmij przekładkę i odetnij końce szwu. Zamknij pierwszą przestrzeń międzyżebrową i skórę za pomocą nylonowych szwów 5/0.

Ponownie zdezynfekuj skórę 75% alkoholem. Siedem dni po operacji ułóż mysz w pozycji leżącej, utrzymując ją w temperaturze 37 stopni Celsjusza, a jej kończyny przyklej do elektrody. Usuń włosy na klatce piersiowej i nałóż ultradźwiękowy środek sprzęgający na klatkę piersiową myszy.

Następnie uzyskaj dostęp do TAC za pomocą sondy 30 megaherców. Przechyl platformę maksymalnie w lewo. Trzymaj sondę w pozycji pionowej i opuść ją na klatkę piersiową wzdłuż prawej linii przymostkowej.

Dostosuj osie X i Y w trybie B, aż łuk aorty i zwężenie będą wyraźnie widoczne. Korzystając z trybu Dopplera, zmierz prędkość szczytową, wymiary i kurczliwość lewej komory. Wybierz myszy o prędkości większej niż 3000 milimetrów na sekundę jako grupę TAC.

Za pomocą sondy 30 megaherców oceń wymiary lewej komory i kurczliwość. Zresetuj platformę do pozycji poziomej, trzymając sondę pod kątem 30 stopni w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara do lewej linii przymostkowej. Uzyskaj widok serca z krótkiej osi, manipulując osiami X i Y w trybie B.

Następnie naciśnij tryb M, aby wyświetlić linię wskaźnika i uzyskać obrazy za pomocą Cine Store i Frame Store w celu późniejszego pomiaru wymiaru komory NN, skrócenia ułamkowego i grubości ścianki NN. Obrazowanie dopplerowskie falą pulsacyjną wykonane po 14 dniach TAC wykazało, że prędkość przepływu krwi w miejscu zwężenia była większa niż 3000 milimetrów na sekundę, mimo że do zwężenia łuku aorty zastosowano wchłanialny szew. Gradient ciśnienia przepływu krwi po 14 dniach TAC utrzymywał się powyżej 40 milimetrów słupa rtęci.

Co ciekawe, w czwartym tygodniu po operacji nie stwierdzono zwężenia, co wskazuje, że szew wchłanialny został całkowicie wchłonięty. Parametry lewej komory w grupie szwów jedwabnych i grupie szwów wchłanialnych w dniach zero, 14 i 28 po TAC, w obrazowaniu w trybie M, pokazano tutaj. W 14 dniu po TAC grubość tylnej ściany lewej komory przy końcu rozkurczu wzrosła, podczas gdy wewnętrzna średnica lewej komory przy końcu rozkurczu nieznacznie się zmniejszyła.

Na frakcję wyrzutową lewej komory nie miało wpływu zastosowanie szwów wchłanialnych. Porównanie stosunku masy serca do masy ciała w grupie szwów jedwabnych, grupy szwów wchłanialnych i grupy pozorowanej pokazano tutaj. Histologiczne wycinki serca wykazały, że kardiomiocyty znacznie się powiększyły od 14 do 28 dnia w grupie szwów jedwabnych, ale w większości uległy regresji w 28 dniu w grupie szwów wchłanialnych.

Podczas próbowania tego protokołu najważniejsze jest, aby nie uszkodzić opłucnej rodzicielskiej, aby uniknąć odmy opłucnowej. Upewnij się, że końcówka igły jest jak najbardziej stępiona i delikatnie wykonaj zabieg. Istnieje wiele potencjalnych zastosowań tej metody, takich jak ustalenie modelu wstępnego kondycjonowania przerostu mięśnia sercowego, zbadanie mechanizmu regresji hipertrofii i zbadanie czasu odwracalnej przebudowy lewej komory.