February 14th, 2021
Ten artykuł przedstawia podstawowe warunki laboratoryjne i protokoły dla reżimu przyrostu temperatury w celu stymulowania maksymalnego tarła u meksykańskiej tetra Astyanax mexicanus, która jest nowym modelem do badań rozwojowych i ewolucyjnych.
Tak więc, ponieważ Astyanax mexicanas jest małą rybą. Pochodzi z północno-wschodniego Meksyku i południowego Teksasu. Ważną rzeczą jest to, że istnieje w dwóch formach.
Jedna forma to ryba żyjąca na powierzchni, która ma duże oczy i pigmentację, a druga forma to ryba żyjąca w jaskini, która straciła oczy i straciła pigmentację. Nadal są zdolne do tarła, do hybrydyzacji ze sobą, więc można je wykorzystać w analizie genetycznej do badania genetyki i rozwoju. Mają również duże zarodki, które są przezroczyste i mogą być wykorzystywane do badań porównawczej biologii rozwojowej.
Są one więc używane od wielu lat jako system do zrozumienia ewolucji rozwoju. Na kilka dni przed pożądanym tarłem zaczynamy lepiej karmić ryby. Zwiększamy również temperaturę stopniowo, tak aby w czasie, w którym chcemy, aby się tarło, przeszły około dwóch lub trzech dni nadmiernego tarła, wytwarzając dużą liczbę zapłodnionych zarodków, które rozwijają się dobrze i przechodzą przez stadia larwalne do dorosłych.
Po nakarmieniu ryb o godzinie 10:00 szczyptą płatków Tetra, sprawdź inkubator, który będzie służył do przechowywania misek palcowych rozwijających się zarodków i w razie potrzeby zmień wodę. Sprawdź poziom wody we wszystkich zbiornikach i dodaj wodę systemową do wszystkich zbiorników, w których jest na wyczerpaniu.
Następnie ustaw inkubator na 23 stopnie Celsjusza Co najmniej 30 minut po pierwszym karmieniu, nakarm ryby w zbiornikach hodowlanych szczyptą płatków żółtka jaja, wystarczającą ilością skupisk czarnych robaków, aby każda ryba w zbiorniku mogła spożyć około pięciu do 10 robaków lub jedno i drugie. Co najmniej godzinę po drugim karmieniu w razie potrzeby wyszoruj zbiorniki hodowlane i ostrożnie ustaw siatki hodowlane, nie zakłócając dopływu powietrza do zbiornika. Następnego ranka usuń siatki hodowlane z dna zbiorników systemu dla dorosłych między 9:00 a 10:00
.i użyj węża dołączonego do urządzenia, aby delikatnie spłukać zarodki do ręcznej siatki. Odwróć siatkę do miski na palec z czystą wodą systemową i przenieś około 100 zarodków na miskę na palec do 200 mililitrów czystej wody systemowej uzupełnionej 0,00003% błękitu metylenowego. Etapuj zarodki pod mikroskopem świetlnym, aby oszacować czas zapłodnienia zgodnie z harmonogramem rozwoju A-mexicanas.
Po inscenizacji umieść miseczki paluszkowe w inkubatorze na pięć do siedmiu dni i nakarm kultury żywymi krewetkami solankowymi. Dla każdego zbiornika, w którym upuściły się zarodki, zapisz datę i numer zbiornika oraz zapisz liczbę i jakość upuszczonych zarodków. Zapisać średni czas tarła zgodnie z tabelą postoju i zapisać temperaturę systemu w czasie tarła ryb
.Monitoruj miseczki palcowe zarodków przez cały dzień, używając pipety do pastwisk, aby usunąć martwe lub zdeformowane zarodki i zanieczyszczenia, takie jak niezjedzone jedzenie lub kał, i w razie potrzeby zmieniając niebieską wodę. O godzinie 13:00 nakarm ryby w zbiornikach hodowlanych zgodnie z demonstracją i ustaw temperaturę wody na 24 stopnie Celsjusza.
Następnie usuń nadmiar jedzenia i zanieczyszczeń ze zbiorników i wyszoruj zbiorniki przed ponownym ustawieniem sieci. W środę i czwartek powtórz pobieranie i ocenę zarodków, jak pokazano we wtorek. Nakarm rybę i ustaw wodę na odpowiednią temperaturę.
Sprawdzić zarodki w inkubatorze i zastąpić wodę z miski na palec świeżą wodą systemową uzdatnioną błękitem metylenowym. Następnie w razie potrzeby wyczyść zbiorniki hodowlane i zresetuj siatki. W piątek po nakarmieniu ryb ustaw temperaturę wody na 23 stopnie Celsjusza i sprawdź zarodki w inkubatorze.
W soboty i niedziele karm ryby. Na tym rysunku przedstawiono dane hodowlane od lipca 2017 r. do marca 2020 r. dla ryb powierzchniowych Rio Choy i Texas oraz ryb jaskiniowych Los Sabinos, Tinaha i Pakon. Dane analizowano w podziale na tygodnie lęgowe i średnią liczbę zarodków zbieranych dziennie w ciągu jednego tygodnia hodowlanego.
Dane wskazują, że rozmnażanie było ciągłe przez cały rok u ryb z Rio Choy i Texas Surface oraz u ryb jaskiniowych Pakon. Ilość i jakość większości ryb powierzchniowych Rio Choy mieściła się między niską a wysoką, podczas gdy ilość i jakość większości ryb powierzchniowych z Teksasu i ryb jaskiniowych Pachon mieściła się między niską a średnią. Występowanie tarła nie było ciągłe u ryb jaskiniowych Tinaja lub Los Sabinos, przy czym tarło było niskie lub nie występowało u tych ryb od późnego lata do jesieni
.Chociaż najniższy poziom tarła odnotowano w przypadku ryb jaskiniowych Los Sabinos, jakość zarodków była najlepsza. Ogólnie rzecz biorąc, ta ryba powierzchniowa wykazywała lepszą ilość i jakość tarła niż ryby jaskiniowe. Korzystając z tego systemu, możemy rozmnażać setki, a właściwie tysiące jaj co dwa miesiące, a następnie te jaja są wykorzystywane, te zarodki są następnie wykorzystywane do wielu różnych celów.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Ten artykuł opisuje podstawowe warunki laboratoryjne i protokoły dla zwiększającego się reżimu temperaturowego w celu stymulacji maksymalnego tarła u ryby meksykańskiej tetra Astyanax mexicanus, która jest nowym modelem do badań rozwojowych i ewolucyjnych.