Name: Akupunktura w szczurzym modelu astmy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Poznaj metodę akupunktury w szczurzym modelu astmy z wykorzystaniem wysokiej platformy do nieograniczonego dostępu do punktów akupunkturowych. Technika umożliwia nieinwazyjną pomiarową ocenę funkcji oddechowych w czasie rzeczywistym.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (nr 81922076, 81973951, 81873373), Projekt budowlany wspólnej innowacji w Szanghaju (No. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały sprawdzone i zatwierdzone przez Komitet ds. Etyki Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Szanghaju (numer poświadczenia etycznego PZSHUTCM190308020).
1. Wykonanie wysokiej platformy
<ol>
	<li>Ustaw długość i szerokość urządzenia nośnego na 86 cm x 17 cm (<silna klasa="xfig">Rysunek 1).</li>
	<li>Zamocuj urządzenie łączące pionowo z urządzeniem nośnym. Urządzenie łączące powinno mieć około 30 cm długości, aby zapobiec bieganiu szczura na górną powierzchnię wysokiej platformy i mieć szerokość 14 cm.</li>
	<li>Przymocuj pedał poziomy (5 cm x 5 cm) do urządzenia łączącego. Wysokość zawieszenia u dołu pedału poziomego powinna być większa lub równa 50 cm. 
	UWAGA: W zależności od liczby szczurów doświadczalnych można użyć wielu poziomych pedałów, z jednym szczurem umieszczonym na każdym pedale.</li>
</ol>
2. Stworzenie szczurzego modelu astmy
<ol>
	<li>Uczulanie szczurów za pomocą OVA
	<ol>
		<li>Przygotować roztwór uczulający w dniu 0. Przygotować każdy 1 ml roztworu uczulającego z 1 mg OVA i 10 mg wodorotlenku glinu, z solą fizjologiczną jako rozpuszczalnikiem.</li>
		<li>Wstrzyknąć dootrzewnowo każdemu szczurowi 1 ml roztworu uczulającego w dniu 0. Narysuj roztwór uczulający za pomocą odpowiedniej strzykawki do późniejszego użycia.</li>
		<li>Chwyć ogon i podnieś szczura, połóż go na szorstkiej powierzchni i delikatnie pociągnij ogon do tyłu. Chwyć skórę obu uszu i szyi lewym kciukiem i palcem wskazującym, mocno przytrzymując tylną skórę pozostałymi trzema palcami i dłońmi (uważaj, aby nie przykładać nadmiernej siły, która może udusić szczura).</li>
		<li>Prawą ręką wykonać wstrzyknięcie dootrzewnowe u szczura za pomocą przygotowanej strzykawki z 1 ml roztworu uczulającego.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Trudne szczury z OVA
	<ol>
		<li>Wybierz pudełko z pokrywką (długość, szerokość i wysokość to 39 cm x 28 cm x 23 cm) i wywierć mały otwór z boku. Połączyć szczelnie zamknięte pudełko, miseczkę nebulizacyjną i nebulizator uciskowy za pomocą gumowej rurki (rysunek uzupełniający 1). 
		UWAGA: Wielkość cząstek nebulizowanych w sprężonym nebulizatorze wynosi 1 - 5 μm, szybkość nebulizacji jest większa niż 0,2 ml/min, a ciśnienie końcowe wynosi 205 kPa.</li>
		<li>Czternastego dnia po uczuleniu otwórz wieczko domowego szczelnego pudełka i umieść szczura w pudełku (pudełko może pomieścić 5 szczurów), a następnie umieść zapieczętowane pudełko w komorze bezpieczeństwa biologicznego.</li>
		<li>Przygotuj rozwiązanie wyzwania. Dokładnie wymieszaj 300 mg OVA z 30 ml soli fizjologicznej.</li>
		<li>Włącz nebulizator ultradźwiękowy i dodaj 30 ml roztworu prowokacyjnego do kubka nebulizującego. Dostosuj dawkę roztworu prowokacyjnego i liczbę szczurów w zależności od objętości domowego zapieczętowanego pudełka.</li>
		<li>Powtórz nebulizację kilka razy (raz dziennie) lub dostosuj procedurę w zależności od nasilenia objawów astmy.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Leczenie akupunkturą
<ol>
	<li>Wybierz punkty akupunkturowe, w tym GV14, obustronne BL12 i obustronne BL13, zgodnie z teorią tradycyjnej medycyny chińskiej w leczeniu astmy (rysunek uzupełniający 2). Zastosuj akupunkturę manualną w drugim dniu i wykonuj raz na drugi dzień, w sumie przez 7 sesji (<silna klasa="xfig">Rysunek 2).
	<ol>
		<li>Akupunktura GV14 znajduje się między siódmym kręgiem szyjnym a pierwszym kręgiem piersiowym (zagłębienie łopatki), na linii środkowej pleców (<silna klasa="xfig">Ryc. 3).</li>
		<li>Akupunktura BL13 znajduje się poniżej trzeciego kręgu piersiowego, po obu stronach przestrzeni międzyżebrowych (dolna krawędź łopatki).</li>
		<li>Akupunktura BL12 znajduje się poniżej drugiego kręgu piersiowego, po obu stronach przestrzeni międzyżebrowych (poniżej łopatki, pozycja zidentyfikowana zgodnie z BL13).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Chwyć szczury i umieść je na wysokiej platformie.</li>
	<li>Przytrzymaj jednorazową igłę ze stali nierdzewnej (0.3 mm x 13.0 mm, Rysunek Uzupełniający 3) kciukiem i palcem wskazującym prawej ręki i naciśnij grzbiet szczura dłonią prawej ręki. 
	UWAGA: Igły jednorazowe mogą być jednorazowego użytku. Ponieważ wielokrotne użycie spowoduje stępienie igły, co prowadzi do zwiększonego bólu u szczurów.</li>
	<li>Dotknij wgłębienia na środku górnej krawędzi (GV14) lub dolnej krawędzi łopatki (BL12 i BL13), a następnie delikatnie nakłuj skórę szczura końcówką igły, aby zlokalizować punkty akupunkturowe.</li>
	<li>Szybko włóż igłę po ustaleniu konkretnego położenia punktu akupunkturowego i szybko wyjmij prawą rękę.</li>
	<li>Równomiernie skręć igły o około 360° z prędkością 60 razy/min przez 10 - 20 s, manipuluj nimi co 5 minut, a następnie wyjmij je po 20 - 30 minutach (rysunek uzupełniający 4).</li>
</ol>
4. Pomiar Penh
<ol>
	<li>Przygotowanie metacholiny: Umieścić 100 mg metacholiny w probówce wirówkowej o pojemności 5 ml i dodać PBS do objętości 2 ml (50 mg/ml metacholiny). Następnie rozcieńczyć roztwór metacholiny o stężeniu 50 mg/ml do 25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 6,25 mg/ml i 3,125 mg/ml.</li>
	<li>Inspekcja przyrządów
	<ol>
		<li>Włącz wzmacniacz sygnału (system dystrybucji aerozolu i system zasilania polaryzacją gryzoni są wyłączone, a złącze nebulizacji jest zamknięte).</li>
		<li>Sprawdź kanały: Kliknij przycisk Kalibruj, przywróć linię bazową regulacji zgrubnej do 0 i przełącz na pozycję prądu stałego (DC). Dostosuj linię bazową do 0 i wstrzyknij 5 ml gazu za pomocą strzykawki. Następnie przełącz się w pozycję prądu przemiennego (AC).</li>
		<li>Po sprawdzeniu kanałów upewnij się, że wartość błędu jest mniejsza niż 0,5%.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ustawianie parametrów
	<ol>
		<li>Włącz system dystrybucji aerozoli i system zasilania w kierunku odchylenia gryzoni. Dostosuj natężenie przepływu do 4.5 ml w zależności od poziomu cieczy na kuli rtęciowej.</li>
		<li>Kliknij przycisk Create Study Options (Utwórz opcje badania) i wybierz Dose Response Study (Badanie odpowiedzi na dawkę), wybierz opcję Szczur gatunku i kliknij przycisk Dalej.</li>
		<li>Wybierz opcję Prosta lista dawek, ustaw liczbę dawek na 6 i kliknij przycisk Dalej.</li>
		<li>Wybierz parametry Penh i Obszar: Ustaw czas adaptacji zwierzęcia na 5 minut, czas nebulizacji na 2 minuty, czas reakcji na 3 minuty, a czas rekonwalescencji na 2 minuty.</li>
		<li>Do nebulizatora należy kolejno dodawać następujące roztwory (200 μl na szczura): metacholina (0 mg/ml, 3,125 mg/ml, 6,25 mg/ml, 12,5 mg/ml, 25 mg/ml i 50 mg/ml). Zmiany w Penh w czasie rzeczywistym można zaobserwować (<silna klasa="xfig">Rysunek 4).</li>
		<li>Po przereagowaniu wszystkich 6 roztworów o różnych stężeniach kliknij Plik i Zakończ sesję, aby zakończyć eksperyment.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Asthma.</a> Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2019. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://ginasthma.org/gina-reports/">https://ginasthma.org/gina-reports/</a> (2019).</li>
<li>Enilari, O., Sinha, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Global+Impact+of+Asthma+in+Adult+Populations%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Global+Health%22%5BJournal%5D)">The Global Impact of Asthma in Adult Populations.</a> Annals of Global Health. 85 (1), (2019).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2020. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://ginasthma.org/gina-reports/">https://ginasthma.org/gina-reports/</a> (2020).</li>
<li>Zhuang, Y., Xing, J. J., Li, J., Zeng, B. Y., Liang, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((History+of+acupuncture+research%5BTitle%5D)+AND+%22International+Review+of+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">History of acupuncture research.</a> International Review of Neurobiology. 111, 1-23 (2013).</li>
<li>Yang, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+use+of+acupuncture+as+supplemental+therapy+for+patients+with+allergic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Reviews+in+Allergy+%26+Immunology%22%5BJournal%5D)">Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma.</a> Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).</li>
<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+interleukin-17+level+by+acupuncture+at+Feishu+%28BL13%29+is+strengthened+by+acupuncture+at+Zusanli+%28ST36%29+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%3A+An+experimental+study%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Acupuncture%22%5BJournal%5D)">Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study.</a> Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).</li>
<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+inflammation+and+airway+remodelling+after+acupuncture+at+BL13+and+ST36+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Acupuncture+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma.</a> Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).</li>
<li>Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+allergen+induced+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine model of allergen induced asthma.</a> Journal of Visualized Experiments. (63), e3771(2012).</li>
<li>Zhou, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metallothionein-2+is+associated+with+the+amelioration+of+asthmatic+pulmonary+function+by+acupuncture+through+protein+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+%26+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation.</a> Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785(2020).</li>
<li>Yin, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgelin-2+as+a+therapeutic+target+for+asthmatic+pulmonary+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance.</a> Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).</li>
<li>Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+asthma+using+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy+Asthma+%26+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Understanding asthma using animal models.</a> Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).</li>
<li>Cui, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-acupuncture+relieves+chronic+visceral+hyperalgesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats.</a> Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).</li>
<li>Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+anesthetic+inhibition+of+brain+nitric+oxide+synthase%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase.</a> Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).</li>
<li>Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+of+rat+immobilization+during+experimental+acupuncture%5BTitle%5D)+AND+%22Scripta+Scientifica+Medica%22%5BJournal%5D)">Method of rat immobilization during experimental acupuncture.</a> Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).</li>
<li>Aguilar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((emotional+reactivity+and+fear+of+heights%3A+a+factor+analytic+map+from+a+large+F%282%29+intercross+of+Roman+rat+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains.</a> Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).</li>
<li>Lai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+response+to+acupuncture+treatment+in+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats.</a> PloS One. 7 (9), 44216(2012).</li>
<li>Niu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+uni-acupoint+electroacupuncture+stimulation+method+for+pain+relief%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879(2011).</li>
<li>McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+action+of+suggestion+in+the+induction+of+acute+asthma+attacks%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosomatic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks.</a> Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).</li>
<li>Savov, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ozone-induced+acute+pulmonary+injury+in+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Punkty akupunkturowe GV14, obustronne BL12 i obustronne BL13 użyte w tym badaniu znajdują się z tyłu, a zatem wysoka platforma nadaje się do mocowania szczurów. W innych badaniach należy dobrać odpowiednią metodę utrwalania w zależności od pozycji punktów akupunkturowych15. W przypadku punktów akupunkturowych na brzuchu szczura można umieścić w dół w czarnym stożku (podobnym do torby na ciasto używanej przez piekarzy)17. Łańcuch jest przymocowany do stożka przytrzymującego ...

Astma jest przewlekłą chorobą charakteryzującą się zwężeniem oskrzeli i nadreaktywnością dróg oddechowych1. U około 339,4 miliona ludzi na całym świecie diagnozuje się astmę2. Częstość występowania astmy wzrasta na całym świecie, a w ciągu następnej dekady spodziewanych jest 100 milionów nowych przypadków3. Wziewne kortykosteroidy i długo działające2-agoniści β nie kontrolują skutecznie objawów u wszystkich pacjentów4. W związku z tym coraz częściej zwraca się uwagę na stosowanie alternatywnych terapii, takich jak akupunktura, w leczeniu astmy5. Skuteczną metodą leczenia astmy jest nakłucie GV14 (Dazhui), obustronne BL12 (Fengmen) i obustronne BL13 (Feishu)6. Akupunktura znacznie obniża poziom wydzielniczej immunoglobuliny A (SIgA) w ślinie i wydzielinie z nosa pacjentów z astmą alergiczną oraz zmniejsza liczbę eozynofili we krwi obwodowej z całkowitym skutecznym wskaźnikiem 85%6. Akupunktura w BL13 i ST36 (Zusanli) u myszy z przewlekłą astmą obniża poziom IL-17 o 40% i zmniejsza grubość mięśni gładkich o 33% w porównaniu z grupą albuminy jaja kurzego (OVA), a tym samym łagodzi objawy stanu zapalnego7,8. Jednak mechanizm leczenia astmy akupunkturą nie jest do końca jasny.
Modele zwierzęce są ważnym narzędziem do badań nad astmą9, ponieważ model zwierzęcy może być używany do ciągłego pomiaru funkcji oddechowych w celu oceny skuteczności leczenia astmy10. Tymczasem badania nad patofizjologią astmy wymagają próbek testowych, w tym próbek z tchawicy, płuc i płukania oskrzelowo-pęcherzykowego, w celu zweryfikowania zmian w poziomach kluczowych czynników11. Szczurze modele astmy są powszechnie używane do oceny patofizjologii astmy, ponieważ wywołują długotrwałe reakcje dróg oddechowych i pokazują natychmiastowe i późne reakcje dróg oddechowych12. Jednak z powodu wielokrotnej stymulacji eksperymentalnej szczury często stają się drażliwe. Dlatego potrzebna jest odpowiednia metoda naprawy szczurów. Powszechnie stosowane metody unieruchamiania szczurów obejmują znieczulenie i wiązanie13. Chociaż metoda znieczulenia zapewnia lepszą ekspozycję punktów akupunkturowych, może wpływać na przewodnictwo nerwowe i ostatecznie wpływać na wyniki eksperymentu14. Metoda wiązania nie wywołuje takich samych efektów fizjologicznych jak znieczulenie, ale skrępowane szczury doświadczają napięcia mięśni szkieletowych. Ponadto igła nie może łatwo dotrzeć do wyznaczonej pozycji15. Tutaj wprowadzamy wysoką platformę, która może być używana do mocowania szczurów bez ich ograniczania i pełnego odsłonięcia punktów akupunkturowych na grzbiecie. Szczury mogą być umieszczane na wysokiej platformie podczas podawania akupunktury. Wysoka platforma jest w stanie pomieścić szczura tylko wtedy, gdy stoi, a ponieważ jest umieszczona w pewnej odległości od ziemi, szczury nie będą się ruszać z powodu lęku wysokości16.
Ten artykuł szczegółowo opisuje produkcję wysokiej platformy, stworzenie szczurzego modelu astmy, operację nakłuwania szczura na wysokiej platformie oraz pomiar funkcji oddechowych za pomocą systemu pletyzmografii całego ciała (WBP).

<table><tbody><tr><td>Igła do akupunktury 0,3 mm x 13,0 mm</td><td>Chiny Fabryka urządzeń medycznych w Suzhou Al</td><td></td><td></td></tr><tr><td>(OH)3</td><td>American Thermo</td><td>77161</td><td></td></tr><tr><td>Nebulizator kompresyjny</td><td>Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd.</td><td>NB-212C</td><td></td></tr><tr><td>Fine Pointe V2.0</td> Amerykański laboratoryjny osuszacz gazu <td>Buxco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>American</td><td>Drierite</td><td>26800</td><td></td></tr><tr><td>Metacholina</td><td>American Sigma</td><td>MKCF6054</td><td></td></tr><tr><td>Albumina jaja kurzego</td><td>American Sigma</td><td>A5503-25G</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór buforu fosforanowego (1x)</td><td>Gelifesciences</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Skrzynka uszczelniająca</td><td>IRIS Corporation of Japan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pletyzmografia całego ciała system pomiaru funkcji oddechowych</td><td>American Buxco</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

akupunktura w szczurzym modelu astmy

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

Wysoka platforma może bez ograniczeń naprawiać szczury i całkowicie odsłaniać punkty akupunkturowe na plecach podczas manipulacji akupunkturą. W artykule opisano metody wytwarzania wysokiej platformy, ustanowiono szczurzy model astmy i zmierzono zmiany w funkcji oddechowej za pomocą nieinwazyjnego systemu pletyzmografii całego ciała (WBP) w czasie rzeczywistym.

Podczas akupunktury w punktach GV14, obustronnie BL12 i obustronnie BL13, szczur pozostaje w pozycji na brzuchu. Szczur może obracać głowę wyłącznie na zewnątrz, a nie do wewnątrz, ponieważ jeden kierunek jest zablokowany drewnianą deską (Rysunek 5).
Wraz ze wzrostem stężenia metacholiny, Penh wykazuje tendencję wzrostową, a tempo wzrostu stopniowo przyspiesza. Przy stężeniach 3,125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg/mL oraz 50 mg/mL, Penh wzrósł odpowiednio o 1...

Akupunktura w szczurzym modelu astmy

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

Akupunktura jest skuteczną metodą leczenia astmy. Chociaż mechanizmy leżące u podstaw tego zjawiska nie są jasne. Protokół ten naśladuje akupunkturę w klinice, aby badać tę mechanikę na modelu zwierzęcym.Główną zaletą tej techniki jest to, że wysoka platforma może być używana do mocowania szczurów bez ograniczeń, co pozwala na pełne odsłonięcie grzbietowych punktów akupunkturowych. Początkujący powinni posiadać podstawowe umiejętności obchodzenia się ze szczurami i powinni ćwiczyć wkładanie igieł do akupunktury w kawałek tektury przed próbą leczenia zwierząt. Wizualizacja techniki pomoże początkującym zapoznać się z umiejętnościami niezbędnymi do pomyślnego przeprowadzenia eksperymentu.Długość i szerokość urządzenia nośnego powinna wynosić 86 na 17 centymetrów. Przymocuj pionowo urządzenie łączące o długości 30 centymetrów i szerokości 14 centymetrów do urządzenia nośnego i przymocuj pedał poziomy o wymiarach pięć na pięć centymetrów do urządzenia łączącego. Wysokość zawieszenia w dolnej części pedału poziomego powinna być większa lub równa 50 centymetrom.W celu uczulenia na OVA chwyć i podnieś ogon dorosłego szczura i połóż zwierzę na szorstkiej powierzchni, delikatnie pociągając ogon. Mocno, ale delikatnie chwyć skórę obu uszu i szyi lewym kciukiem i palcem wskazującym, mocno przytrzymując tylną skórę pozostałymi trzema palcami i dłonią, a prawą ręką wstrzyknij dootrzewnowo jeden mililitr świeżo przygotowanego roztworu uczulającego do brzucha szczura. Czternastego dnia po uczuleniu wywierć mały otwór z boku pudełka o wymiarach 39 na 28 na 23 centymetry i za pomocą gumowej rurki podłącz pudełko do kubka nebulizującego i nebulizatora uciskowego.Umieść szczura w pudełku i umieść pudełko w komorze bezpieczeństwa biologicznego. Włącz nebulizator ultradźwiękowy i załaduj 30 mililitrów świeżo przygotowanego 300 miligrama OVA w roztworze prowokacyjnym soli fizjologicznej do kubka nebulizującego. Nebulizację można powtarzać kilka razy w ciągu jednego dnia lub w zależności od nasilenia objawów astmy, które mają być wywołane.Do leczenia akupunkturą zwierzęcia z astmą wybierz punkty akupunkturowe, w tym GV 14, obustronne BL 12 i obustronne BL 13, zgodnie z teorią tradycyjnej medycyny chińskiej w leczeniu astmy, i stosuj akupunkturę manualną w drugim dniu i co drugi dzień przez łącznie siedem sesji po ustaleniu astmy. W celu umieszczenia igły przenieś szczura na wysoką platformę i chwytając uchwyt jednorazowej igły ze stali nierdzewnej kciukiem i palcem wskazującym dominującej ręki, mocno dociśnij grzbiet szczura dłonią. W celu umieszczenia igły GV 14 dotknij wgłębienia pośrodku górnej krawędzi łopatki między siódmym kręgiem szyjnym a pierwszym kręgiem piersiowym na linii środkowej pleców i delikatnie nakłuj skórę czubkiem igły, aby zlokalizować punkt akupunktury.Następnie szybko włóż igłę i szybko usuń prawe miejsce na rękę. Umieść igły BL 13 poniżej trzeciego kręgu piersiowego po obu stronach przestrzeni międzyżebrowych i umieść igły BL 12 poniżej drugiego kręgu piersiowego po obu stronach przestrzeni międzyżebrowych, jak pokazano. Po umieszczeniu wszystkich igieł przekręć każdą igłę o 360 stopni, 60 razy w ciągu 10 do 20 sekund, co pięć minut przez 20 do 30 minut przed wyjęciem igieł.Do pomiaru Penh u zwierząt leczonych akupunkturą. Najpierw włącz wzmacniacz sygnału i kliknij przycisk kalibruj, aby przywrócić linię bazową korekty kursu do zera. Przełącz się na pozycję prądu stałego i dostosuj linię bazową do zera.Użyj strzykawki, aby wstrzyknąć pięć mililitrów powietrza przed przełączeniem na pozycję prądu przemiennego. Po sprawdzeniu kanałów upewnij się, że wartość błędu jest mniejsza niż 0,5%Następnie włącz systemy dystrybucji aerozoli i przepływu odchylenia gryzoni i dostosuj natężenie przepływu 4,5 mililitra zgodnie z poziomem cieczy na kuli rtęciowej. W obszarze Utwórz opcje badania"wprowadź test do badania i wybierz szczura dla gatunku.Upewnij się, że wybrano prostą listę dawek i ustaw liczbę dawek na sześć. Aby wybrać parametry Penh i obszaru, kliknij dalej i ustaw czas adaptacji zwierzęcia na pięć minut. Czas nebulizacji do dwóch minut, czas reakcji do trzech minut, a czas rekonwalescencji do dwóch minut.Następnie dodać 200 mikrolitrów każdego świeżo przygotowanego stężenia metacholiny w PBS do nebulizatora w kolejności wskazanej. Należy obserwować zmiany w czasie rzeczywistym w Penh. Gdy wszystkie sześć roztworów o różnych stężeniach zostanie dostarczonych i ocenionych, kliknij plik i zakończ sesję.Dzięki akupunkturze w punktach GV 14, obustronnej BL 12 i obustronnej BL 13, szczur utrzymuje pozycję leżącą i może przekręcić głowę tylko na zewnątrz, ponieważ jeden kierunek jest zablokowany drewnianą deską. Jak pokazano na wykresie, po indukcji astmy, wraz ze wzrostem stężenia metacholiny, wzrasta stężenie Penh, co sprzyja stopniowemu wzrostowi tempa wzrostu. Western blot i Real Time PCR mogą być również wykorzystane do rozpoczęcia określonego białka i zmiany po leczeniu akupunkturą.Technika ta może pomóc naukowcom w badaniu konkretnych zmian w kluczowych czynnikach i szlaku sygnałowym za pomocą astmy po akupunkturze.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Eksperymentalne modele mysie astmy alergicznej oferują nowe możliwości badania patogenezy choroby oraz opracowywania nowych terapii. Modele te są odpowiednie do pomiaru czynników kontrolujących alergiczną odpowiedź immunologiczną, zapalenie dróg oddechowych i patofizjologię płuc.

Mysi model astmy indukowanej alergenem

Ten protokół przedstawia leczniczą procedurę moksowania w leczeniu pacjentów z astmą oskrzelową.

Tradycyjna terapia charakterystyczna dla chińskiej medycyny oskrzelowej: Moxibustion

Tutaj prezentujemy protokół skutecznego i szybkiego elektroakupunktury (EA) u myszy lub młodych szczurów przy użyciu trójwymiarowego (3D) wydrukowanego uchwytu. Technika ta pozwala na jednoczesną operację na wielu zwierzętach, oszczędzając czas i zwiększając wydajność eksperymentów.

Masowa operacja elektroakupunktury u myszy lub młodych szczurów

Tutaj prezentujemy ulepszoną metodę mocowania zawieszenia za pomocą kurtki szczura do skutecznego unieruchamiania szczurów podczas eksperymentów akupunktury. Ponadto wyjaśniono budowę i zastosowanie tego aparatu do fiksacji, a także instrukcje i ocenę jego wykorzystania w terapii elektroakupunkturą.

Ulepszona fiksacja zawieszenia za pomocą kurtki szczura w eksperymentach z akupunkturą szczurów

Tutaj opisujemy protokół wdrażania łagodnego znieczulenia i leczenia akupunkturą na mysim modelu przewlekłego niedotlenienia oraz przeprowadzamy testy behawioralne w celu oceny zmian poznawczych po leczeniu.

Leczenie akupunkturą w mysim modelu przewlekłej dysfunkcji poznawczej wywołanej niedotlenieniem

Ten protokół szczegółowo opisuje procedurę kopania w punktach akupunkturowych i demonstruje jego skuteczność w leczeniu alergicznego nieżytu nosa.

Terapia osadzająca katagut Acupoint w tradycyjnej medycynie chińskiej w leczeniu alergicznego nieżytu nosa

Termoplastyka oskrzeli to niefarmakologiczna procedura stosowana w ciężkiej astmie utrwalonej, która polega na dostarczaniu energii termicznej do ściany dróg oddechowych w precyzyjnie kontrolowany sposób w celu redukcji nadmiernej masy mięśni gładkich oskrzeli. Zmniejszenie masy mięśni gładkich ogranicza zdolność dróg oddechowych do kurczenia się, co w konsekwencji zmniejsza częstotliwość napadów astmy.

Termoplastyka oskrzeli: nowatorskie podejście terapeutyczne w ciężkiej astmie

Płuco jest perfundowane zarówno przez tętnicę oskrzelową systemową, jak i tętnice płucne.  W większości patologii płuc to mniejsze uczynki układowe wykazują solidną neowaskularyzację.  Zatrzymanie przepływu krwi w płucach sprzyja energicznej angiogenezie oskrzeli.  Zapewniamy chirurgiczne szczegóły indukowania niedokrwienia lewej tętnicy płucnej, które sprzyja neowaskularyzacji oskrzeli.

Angiogeneza w niedokrwiennym płucu szczura

Opisano protokół przewlekłych infuzji glukozy i intralipidów u szczurów. Model ten można wykorzystać do badania wpływu nadmiaru składników odżywczych na funkcjonowanie narządów i parametry fizjologiczne.

Model przewlekłego wlewu składników odżywczych u szczura

Ten manuskrypt opisuje szczurzy model chirurgiczny odmiedniczkowego zapalenia nerek wykorzystujący bezpośrednie zakażenie wewnątrznerkowe przez Escherichia coli do miedniczki nerkowej. Procedura eksperymentalna może być wykorzystana do badania patogenezy odmiedniczkowego zapalenia nerek, a także związanego z nim stanu zapalnego i zwłóknienia.

Donerkowe wstrzyknięcie Escherichia coli w szczurzym modelu odmiedniczkowego zapalenia nerek

Poznaj metodę akupunktury w szczurzym modelu astmy z wykorzystaniem wysokiej platformy do nieograniczonego dostępu do punktów akupunkturowych. Technika umożliwia nieinwazyjną pomiarową ocenę funkcji oddechowych w czasie rzeczywistym.

Akupunktura w szczurzym modelu astmy

Przeglądaj więcej filmów