Name: Złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania organizacji społecznej i interakcji u szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-08T14:00:00.000+00:00
Duration: 10 min 29 s
Description: Poznaj metodę nurkowania po pokarm w celu badania hierarchii społecznej u szczurów Sprague Dawley. Technika ta pozwala obserwować dynamikę grupową i procesy decyzyjne w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Chcielibyśmy podziękować profesor Ołenie Siewierynowskiej, Anastazji Halińskiej i Marynie Kuscheriawie z Wydziału Fizjologii Wydziału Biologii, Ekologii i Medycyny, a także Olesowi Honczarowi z Uniwersytetu Dnieprowskiego w Dnieprze na Ukrainie za pomoc w analizie nagrań wideo z testu organizacji społecznej.

Eksperymenty zostały przeprowadzone zgodnie z zaleceniami Deklaracji z Helsinek i Tokio oraz Wytycznych Wspólnoty Europejskiej dotyczących wykorzystania zwierząt doświadczalnych. Eksperymenty zostały zatwierdzone przez Komitet Opieki nad Zwierzętami Uniwersytetu Ben-Guriona w Negev. Kodem autoryzacyjnym dla tego eksperymentu była IL-55-8-12.
1. Przygotowanie szczura
<ol>
	<li>Uzyskanie zgody na eksperymenty od Instytucjonalnego Komitetu ds. Opieki nad Zwierzętami i Ich Użytkowania (IACUC).</li>
	<li>Wybierz dorosłe szczury Sprague Dawley. Wyklucz zwierzęta, które wykazują nieprawidłowe cechy fizyczne, takie jak drgawki lub inne deficyty motoryczne. 
	UWAGA: Do tego protokołu użyliśmy dorosłych samców szczurów o wadze 300-350 g, w wieku 4-8 miesięcy. Można również wykorzystać samice szczurów.</li>
	<li>Utrzymuj szczury w temperaturze pokojowej (22 °C ± 1 °C), z 12 godzinnymi cyklami światła i 12 godzinami ciemności. Zapewnij karmę dla szczurów i wodę ad libitum. Dom 3 szczury w klatce. 
	UWAGA: Wszystkie szczury trzymane w tej samej klatce muszą należeć do tej samej grupy doświadczalnej.</li>
	<li>Losowo umieść 120 szczurów w jednej z trzech grup eksperymentalnych. Użyj grupy 1 (n=60) w jako grupy kontrolnej. Indukuj grupę eksperymentalną, grupę 2 (n = 30), za pomocą stresorów, jak opisano poniżej. Wywołać grupę 3, grupę eksperymentalną leczeniem (n = 30), anhedonią, a następnie podać leczenie przeciwdepresyjne. Oś czasu dla protokołu eksperymentalnego można znaleźć w Rysunek 1.</li>
	<li>Oznacz szczury kolorowymi długopisami na początku eksperymentu, aby umożliwić indywidualną identyfikację.</li>
	<li>Wszystkie eksperymenty wykonuj w godzinach od 6:00 do 12:00.</li>
	<li>Waż szczury codziennie przez cały zabieg pod kątem możliwej utraty wagi. Utrata masy ciała powyżej 20% wykluczy szczury z badania. Patrz sekcja 3.1.3.</li>
</ol>
2. Indukcja anhedonii u szczurów
<ol>
	<li>Model przewlekłego nieprzewidywalnego stresu
	<ol>
		<li>Indukuj szczury z grupy eksperymentalnej i grupy eksperymentalnej leczeniem z cechami stanu depresyjnego za pomocą modelu przewlekłego nieprzewidywalnego stresu, jak wcześniej szczegółowo opisano23.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Model przewlekłego nieprzewidywalnego stresu
	<ol>
		<li>Indukuj szczury z dwóch grup eksperymentalnych z zachowaniami podobnymi do depresji za pomocą modelu przewlekłego nieprzewidywalnego stresu, jak wcześniej szczegółowo opisano23. 
		UWAGA: Szczury są codziennie narażone na 2 z 7 stresorów w losowej kolejności; jeden w ciągu dnia, a drugi w nocy przez 5 tygodni24,25.</li>
		<li>Wprowadź następujące stresory w losowej kolejności:
		<ol>
			<li>Szczury domowe z 6 zwierzętami w klatce zamiast 3 przez 18 godzin.</li>
			<li>Ustawienie klatki przechylnej pod kątem 45° wzdłuż osi pionowej na 3 godziny.</li>
			<li>Pozbawić zwierzęta jedzenia przez 18 godzin.</li>
			<li>Pozbawij zwierzęta wody na 18 godzin, a następnie wprowadź pustą butelkę z wodą.</li>
			<li>Utrzymuj zabrudzoną klatkę przez 8 godzin z 300 ml wody rozlanej do ściółki.</li>
			<li>Utrzymuj ciągłe oświetlenie i odwróć cykl światła/ciemności przez 48 godzin tygodniowo.</li>
			<li>Podgrzewać otoczenie do temperatury 40 °C przez 5 min.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Potwierdź rozwój anhedonii, jednej z cech stanu podobnego do depresji, wykonując test preferencji sacharozy. Patrz punkt 4.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Terapia antydepresyjna
	<ol>
		<li>Podawać 20 mg/kg chlorowodorku imipraminy (trójpierścieniowy lek przeciwdepresyjny) dootrzewnowo raz dziennie przez 3 tygodnie szczurom z grupy eksperymentalnej26,27,28. 
		UWAGA: Podgrupie (n = 3 w każdej grupie szczurów) grupy eksperymentalnej podaje się 0,9% soli fizjologicznej (placebo) dootrzewnowo raz dziennie przez okres 3 tygodni, w tej samej objętości, co w grupie leczenia przeciwdepresyjnego.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Test organizacji społecznej (skomplikowane zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu jedzenia)
UWAGA: Eksperymentalna aparatura została opisana w poprzednich badaniach9,29,30 z niewielkimi modyfikacjami. Wszystkie części aparatu powinny być wykonane z przezroczystej pleksi.
<ol>
	<li>Przygotuj aparaturę i zaaklimatyzuj szczury.
	<ol>
		<li>Połącz dwie klatki (50 cm x 50 cm x 50 cm) z akwarium (130 cm x 35 cm x 50 cm) za pomocą tuneli (45 cm x 15 cm x 15 cm) (<silna klasa="xfig">Rysunek 2). Upewnij się, że nie ma dostępu z jednej klatki do drugiej bez zanurzenia się w akwarium25. Utrzymuj temperaturę wody na poziomie 25 °C.</li>
		<li>Umieść probówki z granulkami pokarmu (po jednym granulku spożywczym w każdej probówce) na jednym końcu akwarium. 
		UWAGA: Zmniejszenie dostępności granulek pokarmowych w klatce ucieczki powinno stopniowo zachęcać szczura, który w przeciwnym razie rozwinąłby nawyk kradzieży, do nurkowania w celu dotarcia do jedzenia.</li>
		<li>W pierwszym dniu eksperymentu należy zapoznać każdą grupę 6 szczurów z aparaturą eksperymentalną bez wody na 3-godzinne sesje. Po sesji szczury wracają do standardowej klatki.
		<ol>
			<li>Ogranicz dostęp szczurów do karmy dla szczurów podczas 3-godzinnych sesji, bez innego dostępu do jedzenia przez resztę dnia.</li>
			<li>Usuń szczury, które straciły więcej niż 20% swojej wyjściowej masy ciała z eksperymentu wraz z ich grupą społeczną i podawaj im ad libitum jedzenie i wodę.</li>
			<li>Ręcznie osusz szczury ręcznikiem lub zapewnij dostęp do źródła ciepła do czasu wyschnięcia i przed umieszczeniem ich z powrotem w zwykłym pomieszczeniu, aby uniknąć hipotermii.</li>
			<li>Powtórz te sesje przez dni 2-3. 
			UWAGA: Nagrywaj szczury w aparacie w sposób ciągły przez 3-godzinne sesje. Upewnij się, że aparat jest ustawiony na wysoką rozdzielczość (720p), a autofokus jest wyłączony.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wykonaj zadanie nurkowania w poszukiwaniu jedzenia
	<ol>
		<li>W dniach 4-17 dodawaj wodę stopniowo, aż do osiągnięcia maksymalnego poziomu wody, jak opisano wcześniej4. W dniach 17-21 utrzymuj maksymalny poziom wody.</li>
		<li>Obserwuj szczury nurkujące w poszukiwaniu dostępu do granulek.</li>
		<li>Zapisz następujące parametry dla każdego szczura:
		<ol>
			<li>Oceń częstotliwość wjazdu do tunelu.</li>
			<li>Policz każdą próbę nurkowania w poszukiwaniu jedzenia. 
			UWAGA: Podróż z klatki do akwarium z powrotem do klatki nie powinna przekraczać 5-6 sekund, co zapewni, że granulat pozostanie jadalny.</li>
			<li>Oceń, ile razy pożywienie jest zdobywane przez atak między szczurami, które pływają w poszukiwaniu pożywienia, a szczurami, które tego nie robią.</li>
			<li>Zapisz, ile razy zwierzę pływa niosące pokarm</li>.
			<li>Zapisz czas, jaki szczury spędziły w oddzielnych klatkach w porównaniu z czasem spędzonym w oryginalnej klatce. 
			UWAGA: Wszystkie dane uzyskano poprzez ciągłą obserwację wzrokową.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Ocena anhedonii: Test preferencji sacharozy
<ol>
	<li>Oceń anhedonię za pomocą testu preferencji sacharozy z niewielkimi modyfikacjami, jak opisano wcześniej23,25,31,32,33. Wykonaj ten test w dniach -6, 0, 35, 41, 62 i 68 procedury (zobacz <silna klasa="xfig">Rysunek 1 dla osi czasu protokołu).
	<ol>
		<li>Pozwolić szczurom na spożywanie roztworu sacharozy przez 24 godziny, zapewniając swobodny dostęp do dwóch butelek w każdej klatce, zawierających 100 ml roztworu sacharozy (1%, w/v).</li>
		<li>Po 24 godzinach wymień jedną z butelek na wodę na dodatkowe 24 godziny.</li>
		<li>Pozbawij szczury wody na 12 godzin34.</li>
		<li>Daj szczurom obie butelki (jedną z wodą i jedną z sacharozą). Po 4 godzinach zapisz objętość zarówno spożytego roztworu sacharozy, jak i wody.</li>
		<li>Obliczać preferencję sacharozy jako preferencję sacharozy (%) = spożycie sacharozy (ml)/(spożycie sacharozy (ml) + zużycie wody (ml)) × 100%. 
		UWAGA: Korzystając z modelu chronicznego nieprzewidywalnego stresu w połączeniu z testem organizacji społecznej, zalecamy nie tylko rejestrowanie średniego spożycia sacharozy i wody, ale także odnotowanie zmian w zachowaniu każdego szczura z osobna. Pozwoli to na bardziej szczegółowe zrozumienie zmian behawioralnych w obrębie jednostki, a nie w grupie, w konfrontacji z modelem hierarchicznym, takim jak zadanie nurkowania w poszukiwaniu jedzenia.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
5. Analiza statystyczna
<ol>
	<li>Określ porównania między grupami, używając metody Kruskala-Wallisa, a następnie Manna-Whitneya dla danych nieparametrycznych lub jednokierunkowej analizy wariancji (ANOVA), a następnie testu post hoc Bonferroniego lub testu t Studenta dla danych parametrycznych. 
	UWAGA: Wyniki są uważane za statystycznie istotne, gdy p < 0,05 i bardzo istotne, gdy p < 0,01.</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Hierarchie społeczne determinują zachowanie wielu gatunków, w tym ludzi, i często są definiowane przez relacje oparte na agresji i uległości. Relacje te często zależą nie tylko od struktur społecznych, ale także od czynników środowiskowych35. Formacje społeczne oparte na dominacji i podporządkowaniu są wieloaspektowe36,37. Wśród ludzi agresja jest opisywana jako składająca się z zachowań od niefizycznego znęcania się po wojnę i przemoc 38,...

Szczury są bardzo towarzyskimi zwierzętami, co czyni je idealnym modelem do zrozumienia zachowań społecznych i ich związku z podejmowaniem decyzji. Szczury dzielą się na grupy hierarchiczne oparte na relacjach dominujących i uległych. Szczury można szkolić do zadań, które wyrażają współpracę, zarządzanie ryzykiem, oszukańcze zachowania i zachowania, które zmieniają się w zależności od decyzji innych szczurów1,2. Badania z modelami szczurzymi wyrażającymi te zachowania okazują się pomocne w zrozumieniu struktury społecznej i jej związku z podejmowaniem decyzji, co ma znaczenie dla psychologii człowieka.
Jako niezbędny zasób, dostęp do jedzenia jest głównym powodem organizacji społecznej wśród szczurów3. Zaobserwowano, że naiwne szczury angażują się w interakcje społeczne i różnicują się w sytuacjach, gdy dostęp do jedzenia był ograniczony1,2,4,5,6,7,8. W jednym z badań dorosłe szczury musiały przejść przez tunel pod wodą, aby uzyskać dostęp do jedzenia, a następnie przynieść jedzenie z powrotem przez tunel do klatki9. Poszczególne szczury w każdej grupie można było sklasyfikować zgodnie z ich metodą pozyskiwania pożywienia. Pojawiły się dwa profile behawioralne: pierwszy to "przewoźnicy", którzy nurkują i pływają pod wodą do karmnika, zdobywają wypluwkę i trzymają ją w pysku, gdy płyną z powrotem do klatki. Drugą grupę stanowią "nie-nosiciele", którzy nie nurkują i zdobywają pożywienie wyłącznie poprzez okradanie nosicieli. W grupach po sześć szczurów, około połowa była nosicielami, a druga połowa nie9. Zaobserwowano, że wszystkie szczury są nosicielami, gdy były indywidualnie szkolone w aparacie do nurkowania10.
Podobne zadania behawioralne zwierząt obejmują rywalizację o jedzenie lub przestrzeń i zostały zastosowane w przypadku kurczaków11, gryzonie12,13,14,15, oraz pigs16. W teście probówkowym dwie myszy są wysyłane przez wąską rurkę z przeciwległych końców, przy czym jedna mysz musi ustąpić pierwszeństwa drugiej. Ten test pomaga w pomiarze dominacji społecznej17,18,19. Test behawioralny określany jako test ciepłego punktu polega na tym, że myszy rywalizują o pozycję w małym ciepłym miejscu w zimnej klatce19,20.
Kolejne zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu jedzenia, które jest bardziej złożone, pozwala szczurom-nosicielom na dostęp do drugiej klatki, z dala od osób niebędących nosicielami, gdzie mogłyby spożywać swoje jedzenie oddzielnie4. W tym protokole przedstawiamy zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia jako alternatywny model hierarchii społecznej i zachowania u szczurów. To zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia zapewnia szczurom metodę unikania grup społecznych w głównej klatce, a tym samym ucieczki przed agresją i interakcjami społecznymi innych szczurów. To zadanie wprowadza opcję unikających zachowań społecznych u szczurów, która może wyjaśnić nasze zrozumienie agresji społecznej.
Na funkcjonowanie społeczne, które opisuje zdolność do angażowania się w normalne role społeczne, mogą wpływać stany takie jak depresja3. Osoby cierpiące na depresję często zmagają się z bezrobociem, mają niewiele kontaktów społecznych i prawie nie angażują się w spędzanie wolnego czasu3. Skuteczność leczenia depresji jest często mierzona poprawą funkcji społecznych i interpersonalnych21. Leki przeciwdepresyjne różnią się jednak skutecznością w leczeniu zaburzeń funkcjonowania społecznego związanych z depresją3.
W tej metodologii wywołaliśmy u szczurów stan podobny do depresji za pomocą testu przewlekłego stresu i oceniliśmy poziom anhedonii u szczurów, jedną z cech stanu podobnego do depresji, za pomocą testu preferencji sacharozy. Szczury anhedoniczne, jak również szczury anhedoniczne, którym podawano leki przeciwdepresyjne, były monitorowane poprzez zadanie nurkowania w poszukiwaniu pożywienia w porównaniu z grupą kontrolną.
Wspomniane wcześniej zadania związane z nurkowaniem w poszukiwaniu jedzenia przypominają testy konkurencji żywnościowej, które często wykorzystują tylko jedną parę zwierząt lub jedną dychotomię jako punkt porównania, takie jak nosiciele i nie-nosiciele oraz pojedyncza analiza, która porównuje uległość do dominacji15,17,22. Nasza metoda definiuje bardziej złożone interakcje między szczurami poprzez podział na wiele typów zachowań, w tym: nosiciele i nie-nosiciele, ci, którzy walczą o pożywienie i ci, którzy tego nie robią, oraz szczury, które dzielą się jedzeniem lub chodzą do oddzielnych klatek. Uważamy, że ten protokół jest jedynym typem, który wykorzystuje hierarchię do oceny złożonej struktury interakcji społecznych w grupie zwierząt, a nie w parach. Będzie to pomocne w badaniach, które testują dominację w oparciu o preferencje żywieniowe, a także w badaniach, które mają na celu wyjaśnienie bardziej hierarchicznych relacji, które nie ograniczają się do modelu dominująco-uległego.
W tym protokole szczegółowo opisujemy skomplikowane zadanie polegające na poszukiwaniu pożywienia, aby zbadać organizację społeczną i interakcje u szczurów ze zmianami w zachowaniu osobniczym, szczególnie po rozwoju anhedonii. Ten model zwierzęcy może być również wykorzystany do badania innych schorzeń psychicznych związanych ze zmianami w zachowaniu społecznym i hierarchii.

<table><tbody><tr><td>Alcohol</td><td>Pharmacy</td><td></td><td>99% alkohol farmaceutyczny rozcieńczony do 5% i używany do czyszczenia pudełka testowego w otwartym polu przed wprowadzeniem każdego szczura</td></tr><tr><td>Butelki</td><td>Techniplast</td><td>ACBT0262SU</td><td>150 ml butelki wypełnione 100 ml wody i 100 ml 1% (w/v) roztworu sacharozy</td></tr><tr><td>Sprzęt do nurkowania w celu jedzenia Zadanie (pleksi)</td><td>samodzielnie wykonany na Uniwersytecie Ben Guriona w Negev</td><td></td><td>Dwie klatki (50 x 50 x 50 cm) do akwarium (130 x 35 x 50 cm) przez tunele</td></tr><tr><td>Chlorowodorek imipraminy</td><td>SIGMA</td><td>Lot# SLBB9914V (</td><td>trójpierścieniowy lek przeciwdepresyjny) 20 mg/kg dootrzewnowo raz dziennie przez 3 tygodnie</td></tr><tr><td>Purina Chow</td><td>Purina</td><td>5001</td><td>Karma laboratoryjna dla gryzoni podawana szczurom, myszom i chomikom to żywienie oparte na cyklu życia, które jest stosowane w badaniach biomedycznych od ponad 5</td></tr><tr><td>Klatki dla szczurów</td><td>Techniplast</td><td>2000P</td><td>Konwencjonalne trzymanie dla gryzoni. Był używany do trzymania szczurów przez cały eksperyment</td></tr><tr><td>Kamera wideo</td><td>Canon</td><td></td><td>Cyfrowa kamera wideo do nagrywania w wysokiej rozdzielczości zachowania szczurów w teście plus labirynt</td></tr></tbody></table>

złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania organizacji społecznej i interakcji u szczurów

A Complex Diving-For-Food Task to Investigate Social Organization and Interactions in Rats

Dla wielu gatunków, gdzie status jest istotnym czynnikiem motywującym, który może wpływać na zdrowie, hierarchie społeczne wpływają na zachowanie. Hierarchie społeczne, które obejmują relacje dominująco-uległe, są powszechne zarówno w społeczeństwach zwierzęcych, jak i ludzkich. Na relacje te mogą wpływać interakcje z innymi i ich otoczeniem, co utrudnia ich analizę w kontrolowanym badaniu. Zamiast prostej hierarchii dominacji, formacja ta ma skomplikowaną prezentację, która pozwala szczurom uniknąć agresji. Status może być stały lub zmienny, co skutkuje złożonymi stratyfikacjami społecznymi. Tutaj opisujemy złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania hierarchii społecznej gryzoni i interakcji behawioralnych. Ten model zwierzęcy może pozwolić nam ocenić związek między szerokim zakresem chorób psychicznych a organizacją społeczną, a także zbadać skuteczność terapii dysfunkcji społecznych.

Zmiany masy ciała 
Jednoczynnikowa analiza wariancji (ANOVA) nie wykazała różnic w zmianach masy ciała między grupami eksperymentalnymi w ciągu 21 dni zadania nurkowania w poszukiwaniu pożywienia. Od 2. do 21. dnia odnotowano zmiany masy ciała we wszystkich 3 grupach (p&lt;0,01, Tabela 1).
Test preferencji do sacharozy 
Na początku eksperymentu (dzień 0) nie stwierdzono różnic w procencie preferencji do sacharozy pomiędzy grupą eksperyme...

Ten protokół opisuje metodę badania hierarchii społecznej w modelu szczurzym. Szczury wykonują złożone zadanie nurkowania w poszukiwaniu pożywienia, w którym tworzą wyraźną hierarchię zgodnie z ich chęcią nurkowania pod wodą i pływania w celu uzyskania granulki pokarmu. Metoda ta służy do zrozumienia procesu podejmowania decyzji i relacji społecznych wśród wysoce towarzyskich zwierząt w małych grupach.

Złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania organizacji społecznej i interakcji u szczurów

For many species, where status is a vital motivator that can affect health, social hierarchies influence behavior. Social hierarchies that include ...

Protokół ten opisuje metodę badania hierarchii społecznej w modelu szczurzym. Wszystkie szczury wykonują złożone zadanie nurkowania w poszukiwaniu pożywienia, w którym tworzą wyraźną hierarchię w zależności od gotowości do nurkowania pod wodą i pływania w celu uzyskania granulki pokarmu. Metoda ta służy do zrozumienia procesu podejmowania decyzji i relacji społecznych wśród wysoce społecznych zwierząt w małych grupach.Wybierz dorosłego samca szczura Sprague Dawley o wadze od 300 do 350 gramów. Zapewnij karmę dla szczurów i wodę ad libitum. Wszystkie eksperymenty wykonuj między 6:00 a 12:00.Utrzymuj szczury w temperaturze pokojowej 22 stopni Celsjusza z 12-godzinnymi cyklami światła i 12-godzinnymi cyklami ciemności. Kalendarium protokołu eksperymentalnego. Losowo wybierz 120 szczurów do jednej z trzech grup eksperymentalnych.Grupa pierwsza, N równa się 60, zostanie użyta jako grupa kontrolna. Grupa druga, N równa się 30, będzie indukowana depresją. Grupa trzecia, N równa się 30, również zostanie wywołana depresją, a następnie będzie leczona lekami przeciwdepresyjnymi.Niektóre testy preferencji krzyżowych wykonywane przed i po indukcji przewlekłego nieprzewidywalnego stresu oraz po skomplikowanym nurkowaniu w celu wykonania zadania żywieniowego. Następujące stresory są wprowadzane w kolejności losowej. Trzymanie grupowe poprzez umieszczenie sześciu szczurów w klatce na 18 godzin.Ustawienie klatki pod kątem na trzy godziny pod kątem 45 stopni wzdłuż osi pionowej. Deprywacja żywnościowa przez 18 godzin. Deprawacja wody przez 18 godzin, a następnie natychmiastowe wystawienie na pustą butelkę z wodą.Umieszczenie miękkiej klatki na osiem godzin, składającej się z 300 mililitrów wody rozlanej na ściółkę. Ciągłe oświetlenie i cykl ciemności światła wstecznego przez 48 godzin w tygodniu i pięć minut gorącego środowiska w temperaturze 40 stopni Celsjusza. Szczury są codziennie narażone na dwa z siedmiu stresorów w losowej kolejności.Jeden w ciągu dnia, a drugi w nocy przez pięć kolejnych tygodni. Szczurom z grupy trzeciej podaje się leczenie przeciwdepresyjne amikrom hydrofloride, trójpierścieniowym lekiem przeciwdepresyjnym w dawce 20 miligramów na kilogram dootrzewnowo raz dziennie przez trzy tygodnie. Grupie drugiej grupy kontrolnej podaje się placebo z 0,9% soli fizjologicznej dootrzewnowo raz dziennie przez trzy tygodnie w tej samej objętości, co grupa leczona przeciwdepresyjnie.Przygotuj aparaturę i zaaklimatyzuj szczury. Połącz dwie klatki 50 na 50 na 50 centymetrów do akwarium 130 na 35 na 50 centymetrów przez tunele. Umieść probówki z granulkami żywności, po jednym granulce spożywczej w każdej probówce na jednym końcu akwarium.Na początku eksperymentu oznacz wszystkie sześć szczurów różnokolorowym markerem, aby umożliwić indywidualną identyfikację. W dowolnym momencie sześć szczurów uczestniczyło w eksperymentach jednocześnie. Trzy z nich służyły jako grupa kontrolna pierwsza, a pozostałe trzy były albo depresyjne z grupy drugiej, albo depresyjne po leczeniu, grupa trzecia.W pierwszym dniu eksperymentu należy zapoznać każdą grupę szczurów z aparaturą doświadczalną bez wody na trzygodzinną sesję. Po sesji szczury wracają do standardowej klatki. Nagrywaj szczury w aparacie w sposób ciągły podczas trzygodzinnej sesji.Powtórz te sesje przez drugi i trzeci dzień. W dniach od czwartego do 17 dodawaj wodę stopniowo, aż do osiągnięcia maksymalnego poziomu wody. W dniach od 17 do 21 utrzymuj maksymalny poziom wody.Obserwuj szczury nurkujące, aby uzyskać dostęp do granulek. Zapisz następujące parametry. Częstotliwość wchodzenia do tunelu, nurkowania w poszukiwaniu pożywienia, jedzenia zdobytego przez atak, jedzenia uzyskanego przez noszenie oraz czasu spędzonego w oddzielnych klatkach.Podczas cyklu ciemności szczury umieszcza się w oddzielnych klatkach w tym samym pomieszczeniu co pomieszczenie. Umieść butelkę ze 100 mililitrami roztworu sacharozy o objętości 1% w każdej klatce na 24 godziny i pozwól na adaptację. Wyjmij butelki i pozbawij szczury jedzenia i wody na 12 godzin.Umieść dwie butelki, jedną zawierającą 100 mililitrów roztworu sacharozy, 1% objętości wagowej, a drugą 100 mililitrów wody z kranu w każdym przypadku na cztery godziny. Zapisać objętość w mililitrach zarówno spożytego roztworu sacharozy, jak i wody i obliczyć ich powinowactwo do preferencji sacharozy w następujący sposób. Preferencja sacharozy w procentach równa się spożyciu sacharozy w mililitrach, podzielonemu przez spożycie sacharozy i zużycie mililitrów plus wody w mililitrach.Jednokierunkowy test Nova nie wykazał żadnych różnic w zmianach masy ciała między grupami eksperymentalnymi przez 21 dni kompleksowego nurkowania w poszukiwaniu jedzenia. Od dwóch dni do 21 wystąpiły zmiany masy ciała we wszystkich trzech grupach, wartość p była mniejsza niż 0,01. Szczury z objawami podobnymi do depresji były bardziej aktywne i agresywne niż szczury kontrolne.Szczury wywołane agresywnym zachowaniem światła wykazały wzrost wejść do tunelu o 130% plus minus 3,7 p wartość poniżej 0,01. Nurkowanie w poszukiwaniu pożywienia 141%plus minus siedem, wartość p mniejsza niż 0,01. Żywność uzyskana przez parowanie, 168% plus minus 12, wartość p mniejsza niż 0,01.Czas spędzony w oddzielnych klatkach 123%plus minus 7,9, wartość p mniejsza niż 0,01, a pożywienie zdobyte przez atak, 232%plus minus 26, wartość p mniejsza niż 0,01. W porównaniu ze szczurami z depresją, które otrzymały terapię przeciwdepresyjną, odpowiednio 67% plus minus 3,4, 54% plus minus pięć, 53% plus minus sześć, 55% plus minus 4,7, 44% plus minus siedem. Różnice między szczurami z objawami podobnymi do depresji a szczurami z depresją leczonymi lekami przeciwdepresyjnymi były statystycznie większe niż różnice między szczurami z objawami podobnymi do depresji a grupą kontrolną we wszystkich pięciu parametrach złożonego nurkowania w celu testów żywnościowych, wartość p mniejsza niż 0,05.Na początku eksperymentu nie było różnicy w spożyciu sacharozy. Do 35 dnia eksperymentu wartość p w grupie depresji jest mniejsza niż 0,01. A grupa z depresją leczona terapią przeciwdepresyjną, wartość p mniejsza niż 0,01 miała znacznie niższą preferencję procentową sacharozy niż grupa kontrolna.W dniu 62 szczury z objawami podobnymi do depresji miały niższy odsetek preferencji w porównaniu zarówno z grupą kontrolną, jak i grupą depresyjną leczoną lekiem przeciwdepresyjnym, p o wartości mniejszej niż 0,05. Złożone zadanie nurkowania w poszukiwaniu pożywienia może pozwolić nam ocenić związek między szerokim zakresem chorób psychicznych a organizacją społeczną, a także zbadać skuteczność terapii i dysfunkcji społecznych. Bardzo dziękuję państwu za uwagę.

a-complex-diving-for-food-task-to-investigate-social-organization

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

W niniejszym materiale opisujemy szczegółowy protokół badania socjalizacji u myszy z wykorzystaniem testu socjalizacji i preferencji nowości społecznej według Crawleya. Opisujemy zalety i możliwe zastosowania tej procedury, w tym istotne szczegóły ważne dla prawidłowej interpretacji wyników.

Ocena zachowań interakcji społecznych

Walki zabawowe u szczurów obejmują ataki i obronę karku, który w przypadku kontaktu jest delikatnie szturchany pyszczkiem. Ponieważ ruchy jednego zwierzęcia są przeciwdziałane przez działania partnera, walka zabawowa stanowi złożoną, dynamiczną interakcję. Ta dynamiczna złożoność stwarza problemy metodologiczne w zakresie tego, jakie parametry należy oceniać w badaniach eksperymentalnych. Przedstawiamy schemat oceny, który jest uwrażliwiony na skorelowany charakter wykonywanych czynności. Dwa...

Wgląd w dynamikę interakcji społecznych: pomiar walk zabawowych u szczurów

Szczegółowe instrukcje są podane jak trenować szczury do dobrowolnego nurkowania pod wodą przez labirynt z pleksiglasu o długości 5 m. Ponieważ mózgi szczurów zostały bardzo dobrze scharakteryzowane, dobrowolnie nurkujące szczury mogą pomóc w wyjaśnieniu centralnych ścieżek reakcji ssaków na nurkowanie.

Szkolenie szczurów do dobrowolnego nurkowania pod wodą: badania reakcji ssaków na nurkowanie

Zdolność do oceny funkcji wykonawczych, takich jak elastyczność behawioralna u szczurów, jest przydatna do badania neurobiologii funkcji poznawczych zarówno u nienaruszonych zwierząt, jak i w modelach chorób. W tym miejscu opisujemy zautomatyzowane zadania do oceny zmiany strategii i odwróconego uczenia się, które są szczególnie wrażliwe na zakłócenia w sieciach kory przedczołowej.

Procedury instrumentalne do oceny elastyczności behawioralnej u szczurów

Celem przedstawionego tutaj protokołu jest opisanie procedur wystawiania szczurów na umiarkowane poziomy alkoholu podczas prenatalnej ewolucji mózgu oraz ilościowe określenie wynikających z tego zmian w zachowaniach społecznych w wieku dorosłym.

Umiarkowana prenatalna ekspozycja na alkohol i kwantyfikacja zachowań społecznych u dorosłych szczurów

Ten protokół opisuje zmodyfikowaną tablicę do dołków, która jest zestawem testów behawioralnych, który zawiera cechy otwartego pola i tradycyjnej tablicy do dołków. Układ ten umożliwia analizę różnicową nieuwarunkowanych zachowań małych ssaków laboratoryjnych, a także analizę zdolności poznawczych.

Zmodyfikowana tablica z otworami - pomiar zachowania, funkcji poznawczych i interakcji społecznych u myszy i szczurów

Paradygmat jest prezentowany w celu analizy nabywania u szczurów umiejętności sięgania kończynami przednimi do bardzo precyzyjnego dosięgnięcia.

Zdobycie wysoce precyzyjnego zadania dosięgania kończyn przednich u szczurów

Opisany tutaj jest nowatorski zautomatyzowany system eksperymentalny, który stanowi alternatywę dla testu trzykomorowego, a także rozwiązuje kilka zastrzeżeń. System ten dostarcza wielu parametrów behawioralnych, które umożliwiają rygorystyczną analizę dynamiki zachowania małych gryzoni podczas testów preferencji społecznych i preferencji nowości społecznych.

System do śledzenia dynamiki zachowań preferencji społecznych u małych gryzoni

Rola niedawno odkrytych genów związanych z chorobą w patogenezie zaburzeń neuropsychiatrycznych pozostaje niejasna. Zmodyfikowana technika obustronnej elektroporacji in utero pozwala na transfer genów w dużych populacjach neuronów i badanie przyczynowego wpływu zmian ekspresji genów na zachowania społeczne.

Rurociąg wykorzystujący obustronną elektroporację in utero do badania wpływów genetycznych na zachowanie gryzoni

Zadania preferencji społecznych wielokomorowych zostały dostosowane od szczurów do rybek zebra, ułatwiając badania nad zachowaniami społecznymi w organizmach modelowych. Ten protokół waliduje niskobudżetowe zadanie trójkomorowe z otwartym zbiornikiem przy użyciu kamer internetowych i oprogramowania open-source w celu zmierzenia preferencji społecznych rybek zebra, czyniąc je dostępnymi dla badań i nauczania na poziomie licencjackim.

Niedroga alternatywa do badania preferencji społecznych u Danio pręgowanego (Danio rerio) przy użyciu zadania wolnego pływania w trzykomorowym otwartym zbiorniku

Poznaj metodę nurkowania po pokarm w celu badania hierarchii społecznej u szczurów Sprague Dawley. Technika ta pozwala obserwować dynamikę grupową i procesy decyzyjne w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych.

Złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania organizacji społecznej i interakcji u szczurów (Wideo) | JoVE Journal

Złożone zadanie polegające na nurkowaniu w poszukiwaniu pożywienia w celu zbadania organizacji społecznej i interakcji u szczurów

Przeglądaj więcej filmów