Nowoczesne urządzenie rozgrzewające/ograniczające do skutecznych iniekcji żył ogonowych w mysim modelu sepsy grzybiczej

Urządzenie grzewcze i krępujące oferuje uproszczoną technikę skutecznego przeprowadzania dożylnych iniekcji do żyły ogonowej, zapewnia ogrzewanie w kontrolowanym środowisku i skuteczną obsługę w celu przeprowadzenia dożylnego wstrzyknięcia żyły ogonowej. Przed wypróbowaniem tej techniki ważne jest, aby zapoznać się z protokołem i poćwiczyć wstrzykiwanie soli fizjologicznej. Demonstracja wizualna daje możliwość pokazania wskazówek i zastrzeżeń, które pomogą w procedurze.

Junko Yano, adiunkt w moim laboratorium, ustawi sprzęt, a ja zademonstruję procedurę. Aby zainicjować urządzenie grzewcze, kontroluj urządzenie grzewcze na czystym płaskim blacie stołu i włącz je, upewniając się, że wskaźnik mocy termostatu lamp świeci na zielono. Następnie umieść materiał ściółkowy w komorze grzewczej, aby obszar był suchy i zatrzymywał ciepło.

W przypadku ustawienia urządzenia przytrzymującego należy umieścić jednostkę przytrzymującą obok jednostki grzewczej i określić odpowiednie rozmiary stożków dla zwierzęcia. Ręcznie wyreguluj szerokości podstawy giętkiego aluminiowego stożka, aby zapewnić zwierzęciu odpowiednie unieruchomienie. Alternatywnie zastąp stożek modelami dopasowanymi na zamówienie, aby pomieścić zwierzęta o różnych rozmiarach.

Ustaw termostat na żądaną temperaturę za pomocą pokrętła sterującego, upewniając się, że wskaźnik grzałki świeci na czerwono i że żarówka jest włączona. Uważnie monitoruj wyświetlacz temperatury wewnętrznej, gdy żarówka jest włączona. Aktywuje się automatycznie po osiągnięciu temperatury docelowej.

Ustawić wysokość stożka platformy przytrzymującej na optymalnym poziomie dla użytkownika za pomocą pokrętła regulacji wysokości. Po osiągnięciu temperatury docelowej delikatnie przenieść zwierzęta z klatki do komory grzewczej. W komorze grzewczej można bezpiecznie przechowywać od czterech do sześciu myszy lub jednego szczura przez maksymalnie 20 do 30 minut.

Obróbka cieplna przez 5 do 10 minut wystarczy, aby wywołać rozszerzenie naczyń krwionośnych i poprawić widoczność żył ogonowych. Monitoruj zwierzę pod kątem wszelkich oznak ostrego stresu cieplnego, takich jak szybkie oddychanie, letarg lub skakanie. Wyjmij zwierzę z komory, podnosząc je za podstawę ogona i umieść na otworze stożkowym jednostki krępującej.

Gdy zwierzę chwyta przednimi łapami daleką krawędź stożka, delikatnie pociągnij ogon do tyłu i przełóż ogon przez otwartą szczelinę. Zabezpiecz jedną z tylnych nóg wystających ze stożka tak, aby żyła boczna była widoczna w miejscu godziny 12. Chwyć ogon od połowy do 2/3 długości ręką niedominującą między kciukiem a palcem wskazującym, wywierając lekkie napięcie na żyłę boczną, aby utrzymać pozycję ogona i rozszerzenie naczyń krwionośnych.

Przetrzeć skórę w miejscu wstrzyknięcia gąbką z gazy lub wacikiem zwilżonym 70% alkoholem. Trzymać strzykawkę ręką dominującą i ustawić igłę równolegle do ogonka. Włóż igłę w kierunku przepływu krwi pod kątem od 10 do 25 stopni i wsuń się dalej w światło żyły, penetrując od dwóch do czterech milimetrów.

Powoli wstrzykiwać roztwór. W przypadku oporu lub białych pęcherzy powyżej miejsca wstrzyknięcia, należy usunąć igłę i podjąć próbę drugiego wstrzyknięcia w miejsce powyżej pierwotnego umieszczenia igły. Jeśli wstrzyknięcie jednej żyły bocznej nie powiedzie się, należy przestawić zwierzę na przeciwną stronę i podjąć więcej prób na żyle przeciwległej.

Wyjąć igłę i mocno docisnąć kciukiem miejsce wstrzyknięcia, aby zapobiec cofaniu się wstrzykniętego roztworu lub krwi. Kontynuuj delikatny ucisk czystą gazą lub chusteczką higieniczną, aż krwawienie zostanie zatrzymane. Wróć zwierzę do klatki i monitoruj je przez pięć minut, upewniając się, że zwierzę wznawia normalną aktywność bez dalszego krwawienia.

Po uruchomieniu grzałki komory grzewczej, emisja ciepła przez żarówkę gwałtownie podnosi temperaturę wewnętrzną w ciągu pierwszych 5 do 15 minut, w zależności od temperatury docelowej. Grzałka dezaktywuje żarówkę, jeśli wykryta temperatura wewnętrzna przekroczy ustawioną temperaturę. Następnie urządzenie automatycznie powtarza cykl grzewczy, aby utrzymać temperaturę wewnętrzną.

W mysim modelu kandydozy krwioobiegu prowadzącej do sepsy, dożylne podanie Candida albicans u szwajcarskich myszy Webster spowodowało szybki początek sepsy i rozprzestrzenianie się organizmów, prowadząc do wysokiej śmiertelności w ciągu trzech do czterech dni. Natomiast zwierzęta mogą być chronione przed sepsą poprzez wstępne szczepienie lub szczepienie awirulentowym szczepem Candida dubliniensis, osiągając ponad 95% przeżywalności po śmiertelnym prowokacji dożylnej zjadliwymi C. albicans. Nieszczepione zwierzęta ze śmiertelną infekcją miały znaczny wzrost zachorowalności wywołanej sepsą, podczas gdy grupa zaszczepiona wykazywała minimalne objawy po śmiertelnym prowokacji.

Wyniki dotyczące postępującej śmiertelności w porównaniu z ochroną za pośrednictwem szczepionki uzyskano w sposób powtarzalny w czterech niezależnych eksperymentach. Zachowaj ostrożność podczas ustawiania zwierzęcia w stożku, aby prawidłowo ustawić igłę, aby uzyskać dostęp do żyły, wyregulować igłę do żyły i wstrzyknąć żyłę. Ta usprawniająca technika oferuje wydajny i skuteczny sposób przeprowadzania iniekcji do żył ogonowych, co poprawi wyniki naukowe badaczy.