Name: Szybki model do oceny potencjału przeciw otyłości kombinacji Syzygium aromaticum (goździk) i Cuminun cyminum (kminku) na myszach C57BL6/j karmionych dietą wysokotłuszczową (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-31T13:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 9 s
Description: Poznaj protokół oceny przeciwotyłościowego działania ekstraktu z goździka i kminku u myszy C57BL6/j na diecie wysokotłuszczowej. Metoda umożliwia szybką weryfikację potencjału roślin w terapii otyłości.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez Instituto Politécnico Nacional México.

Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet Eksperymentów na Zwierzętach Escuela Nacional de Ciencias Biologicas (IPN; Protokół nr 2732).
1. Przygotowanie ekstraktu z połączenia goździków i kminku
UWAGA: Rośliny jadalne, Syzygium aromaticum (goździk) i Cuminum cyminum (kminek) zostały zakupione w Central de Abastos CDMX w Meksyku.
<ol>
	<li>Zmiel 500 g nasion z roślin i wykonaj ekstrakcję wspomaganą ultradźwiękami. Sonikuj je (320 W; częstotliwość 24 kHz, 30 min) etanolem:wodą (60:40 v/v) w zakresie temperatur 30 ± 4 °C.13</li>
	<li>Przefiltrować ciała stałe za pomocą bibuły filtracyjnej Whatman numer 2 w próżni i zagęścić ekstrakt za pomocą wyparki obrotowej.</li>
	<li>Zmierz widmo UV-vis ekstraktu z obu roślin (CC).</li>
</ol>
2. Zwierzęta
<ol>
	<li>Do badania wykorzystano samce myszy C57BL6/J w wieku sześciu tygodni (łącznie 48 sztuk, masa ciała 24-29 g).</li>
	<li>Zwierzęta trzyma się w grupach po osiem osób w standardowych warunkach laboratoryjnych: temperatura (20-22 ± 1 °C), wilgotność względna (45-54 ± 2%), oświetlenie (08:00-20:00) jedzeniem i wodą ad libitum. Zaaklimatyzuj myszy w tych warunkach przez tydzień przed eksperymentem.</li>
</ol>
3. Procedura eksperymentalna
<ol>
	<li>Przygotuj dietę wysokotłuszczową14 jak w Tabeli 1.</li>
	<li>Na początku badania poddaj każdą z utworzonych grup (n = 8) różnym zabiegom: Podaj grupę 1 na normalnej diecie; Grupa 2, na diecie wysokotłuszczowej; Grupa 3, na diecie wysokotłuszczowej + 100 mg/kg ekstraktu CC; Grupa 4, na diecie wysokotłuszczowej + 250 mg/kg ekstraktu CC; Grupa 5, na diecie wysokotłuszczowej + 450 mg/kg ekstraktu CC; Grupa 6, na diecie wysokotłuszczowej + Fentermina (lek przeciw otyłości stosowany jako kontrola pozytywna)<klasa sup = "xref">15.</li>
	<li>Karm wszystkie grupy myszy przez 5 tygodni i rejestruj ilość spożywanego pokarmu dziennie.
	<ol>
		<li>W probówce z korkiem homogenizować ekstrakt lub lek z dawką wody odpowiadającą grupie, której podawany jest zabieg. Odbywa się to za pomocą wytrząsarki wirowej.</li>
		<li>Po homogenizacji dodaj wszystkie odpowiednie zabiegi do poidełka z każdej grupy.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Pobieranie próbek
<ol>
	<li>Mierz zarówno spożycie pokarmu, jak i masę ciała raz w tygodniu. Pościć myszy przez noc przez okres 5 tygodni.</li>
	<li>Składaj je w ofierze przez zwichnięcie szyjki macicy i sekcję zwłok.</li>
	<li>Po złożeniu myszy w ofierze unieruchamiaj je w pozycji leżącej.</li>
	<li>Za pomocą czystych kleszczy chirurgicznych i nożyczek zlokalizuj i unieś środkową skórę w pobliżu narządów płciowych i wykonaj małe nacięcie 0,2 mm.</li>
	<li>Włóż płaskie nożyczki poziomo do nacięcia i ostrożnie oddziel skórę brzucha od ściany brzucha.</li>
	<li>Za pomocą kleszczy podnieś środkową skórę i nożyczkami chirurgicznymi przetnij ją na poziomie klatki piersiowej. Następnie przetnij skórę nad obiema tylnymi kończynami, aby ułatwić gromadzenie się tkanki tłuszczowej.</li>
	<li>Zapewnić pobranie całej tkanki tłuszczowej z organizmu poprzez wypreparowanie nożyczkami i kleszczami. Po zebraniu umieść tkankę tłuszczową w folii aluminiowej. Pamiętaj o zbieraniu tłuszczu wokół narządów rozrodczych. Unikaj gromadzenia się włosów i skóry, aby nie zmienić wyników.</li>
	<li>Aby uzyskać dostęp do trzewnej tkanki tłuszczowej, przetnij mięsień brzucha nożyczkami chirurgicznymi od narządów płciowych do klatki piersiowej, wykonując nacięcie w mięśniach brzucha od narządów płciowych w kierunku grzbietu myszy.</li>
	<li>Wykonaj hepatektomię, aby usunąć 100% wątroby. Aby uzewnętrznić wątrobę, usuń niepotrzebne narządy i przetnij żyły wątrobowe i tętnice, aby oddzielić wątrobę od reszty ciała. Na koniec dokładnie wyekstrahuj woreczek żółciowy z wątroby16.</li>
	<li>Zmierz hipercholesterolemię (cholesterol) i hipertriglicerydemię (trójglicerydy) za pomocą komercyjnych zestawów testowych zgodnie ze wskazaniami producenta.</li>
</ol>
5. Analiza statystyczna
UWAGA: Wszystkie wyniki eksperymentalne powinny być reprezentatywne dla trzech niezależnych testów, wyrażone jako średnia ± odchylenie standardowe.
<ol>
	<li>Oblicz błąd standardowy za pomocą jednoczynnikowej analizy wariancji ANOVA, po której następuje test zakresu Tukeya. Uznaj, że P< 0,05 jest statystycznie istotne.</li>
</ol>

<ol><li>Singla, P., Bardoloi, A., Parkash, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+effects+of+obesity%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Metabolic effects of obesity: A review.</a> World Journal of Diabetes. 1 (1), 76-88 (2010).</li>
<li>Ojulari, O. V., Lee, S. G., Nam, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+Effects+of+Natural+Bioactive+Compounds+from+Hibiscus+sabdariffa+L.+on+Obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Beneficial Effects of Natural Bioactive Compounds from Hibiscus sabdariffa L. on Obesity.</a> Molecules. 24 (1), 210(2019).</li>
<li>Bahmani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+phytotherapy%3A+review+of+native+herbs+used+in+traditional+medicine+for+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Evidence-Based+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Obesity phytotherapy: review of native herbs used in traditional medicine for obesity.</a> Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 21 (3), 228-234 (2016).</li>
<li>Ríos-Hoyo, A., Gutiérrez-Salmeán, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+Dietary+Supplements+for+Obesity%3A+What+We+Currently+Know%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Obesity+Reports%22%5BJournal%5D)">New Dietary Supplements for Obesity: What We Currently Know.</a> Current Obesity Reports. 5 (2), 262-270 (2016).</li>
<li>Hasani-Ranjbar, S., Nayebi, N., Larijani, B., Abdollahi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+the+efficacy+and+safety+of+herbal+medicines+used+in+the+treatment+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">A systematic review of the efficacy and safety of herbal medicines used in the treatment of obesity.</a> World Journal Gastroenterology. 15 (25), 3073-3085 (2009).</li>
<li>Hardeman, W., Griffin, S., Johnston, M., Kinmonth, A. L., Wareham, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interventions+to+prevent+weight+gain%3A+a+systematic+review+of+psychological+models+and+behaviour+change+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Nternational+Journal+of+Obesity+and+Related+Metabolic+Disorders%22%5BJournal%5D)">Interventions to prevent weight gain: a systematic review of psychological models and behaviour change methods.</a> Nternational Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders. 24 (1), 131-143 (2000).</li>
<li>Dinda, B., Dinda, M., Roy, A., Dinda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+plant+flavonoids+in+prevention+of+obesity+and+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Protein+Chemistry+and+Structural+Biology%22%5BJournal%5D)">Dietary plant flavonoids in prevention of obesity and diabetes.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 120, 159-235 (2020).</li>
<li>Mayer, M. A., Hocht, C., Puyo, A., Taira, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+obesity+pharmacotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Clinical+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Recent advances in obesity pharmacotherapy.</a> Current Clinical Pharmacology. 4 (1), 53-61 (2009).</li>
<li>Rafie, A. Z. M., Syahir, A., Ahmad, W. A. N. W., Mustafa, M. Z., Mariatulqabtiah, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2018+supplementation+of+stingless+bee+honey+from+heterotrigona+itama+improves+antiobesity+parameters+in+high-fat+diet+induced+obese+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">2018 supplementation of stingless bee honey from heterotrigona itama improves antiobesity parameters in high-fat diet induced obese rat model.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , 6371582(2018).</li>
<li>Song, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-obesity+effects+of+the+flower+of+prunus+persica+in+high-fat+diet-induced+obese+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Anti-obesity effects of the flower of prunus persica in high-fat diet-induced obese mice.</a> Nutrients. 11, 2176(2019).</li>
<li>Jung, C. H., Ahn, J., Jeon, T. -I., Kim, T. W., Ha, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syzygium+aromaticum+ethanol+extract+reduces+high-fat+diet-induced+obesity+in+mice+through+downregulation+of+adipogenic+and+lipogenic+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic+Medicine%22%5BJournal%5D)">Syzygium aromaticum ethanol extract reduces high-fat diet-induced obesity in mice through downregulation of adipogenic and lipogenic gene expression.</a> Experimental and Therapeutic Medicine. 4 (3), 409-414 (2012).</li>
<li>Said, O., Saad, B., Fulder, S., Khalil, K., Kassis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weight+Loss+in+Animals+and+Humans+Treated+with+%22Weigh+level%22%2C+a+Combination+of+Four+Medicinal+Plants+Used+in+Traditional+Arabic+and+Islamic+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Weight Loss in Animals and Humans Treated with "Weigh level", a Combination of Four Medicinal Plants Used in Traditional Arabic and Islamic Medicine.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , 874538(2011).</li>
<li>Anaya-Esparza, L. M., Ramos-Aguirre, D., Zamora-Gasga, V. M., Yahia, E., Montalvo-Gonzalez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+ultrasonic-assisted+extraction+of+phenolic+compounds+from+Justicia+spicigera+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Science+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Optimization of ultrasonic-assisted extraction of phenolic compounds from Justicia spicigera leaves.</a> Food Science and Biotechnology. 27 (4), 1093-1102 (2018).</li>
<li>Ayoub, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+anthocyanin-rich+purple+vegetable+diets+on+metabolic+syndrome+in+obese+Zucker%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Food%22%5BJournal%5D)">The effect of anthocyanin-rich purple vegetable diets on metabolic syndrome in obese Zucker.</a> Journal of Medical Food. , (2017).</li>
<li>Go, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anti-obesity+drugs%2C+phentermine+and+mahuang%2C+on+the+behavioral+patterns+in+Sprague-Dawley+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+of+Animals+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of anti-obesity drugs, phentermine and mahuang, on the behavioral patterns in Sprague-Dawley rat model.</a> Laboratory of Animals Research. 30 (2), 73-78 (2014).</li>
<li>Tan, P., Pepin, É, Lavoie, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Adipose+Tissue+Collection+and+Processing+for+RNA+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (13), e57026(2018).</li>
<li>Bjorndal, B., Burri, L., Staalesen, V., Skorve, J., Berge, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+adipose+depots%3A+Their+role+in+the+development+of+metabolic+syndrome+and+mitochondrial+response+to+hypolipidemic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obesity%22%5BJournal%5D)">Different adipose depots: Their role in the development of metabolic syndrome and mitochondrial response to hypolipidemic agents.</a> Journal of Obesity. 2011, 490650(2011).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

W tym badaniu po raz pierwszy oceniliśmy wpływ doustnego podawania kombinacji goździków i ekstraktu z kminku (CC) na profile lipidowe i otyłość u myszy karmionych dietą wysokotłuszczową przez 5 tygodni. Wyniki wykazały, że grupy HFD wykazały znacznie wyższy przyrost masy ciała w porównaniu z grupą ND, co pokazało, że indukcja otyłości w modelu otyłym zakończyła się sukcesem. Podana dawka CC (100, 200 i 450 mg/kg/dobę) powodowała zmniejszenie spożycia pokarmu i masy ciała. W związku z tym zmniejszenie spożycia pokarmu mus...

Nadmierne gromadzenie tkanki tłuszczowej jest cechą charakterystyczną otyłości. Brak równowagi między poborem a zużyciem energii prowadzi do magazynowania nadmiaru energii w adipocytach, co jest związane z metabolicznymi czynnikami ryzyka hiperglikemii i insulinooporności w cukrzycy typu 2, nadciśnieniu, hipercholesterolemii i chorobach sercowo-naczyniowych1,2.
Naturalne produkty o minimalnych skutkach ubocznych i niskich kosztach zyskały większą uwagę, ponieważ poprzednie badania wykazały bioaktywne fitochemikalia i potencjalne środki przeciw otyłości z mechanizmami odwracającymi lub opóźniającymi zespół metaboliczny i związane z nim patologie8.
Kilka roślin leczniczych zostało przebadanych pod kątem zapobiegania otyłości i pokrewnym chorobom. Wśród nich Syzygium aromaticum został przebadany pod kątem jego potencjału przeciw otyłości w leczeniu in vitro na komórkach 3T3-L1 oraz leczeniu in vivo na myszach karmionych dietą wysokotłuszczową11. Ponadto, znaczące działanie przeciw nadwadze zaobserwowano w wieloośrodkowym otwartym badaniu Cuminum cyminum na skrajnie otyłych osobach12. W tym badaniu myszy C57BL6 / J wykorzystano do zbadania eksperymentalnego modelu szybkiego w celu oceny potencjalnego środka przeciw otyłości przy użyciu kombinacji obu jadalnych roślin.

<table><tbody><tr><td>Woda destylowana</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>nie dotyczy</td><td>Dostępne również dla innych dostawców</td></tr><tr><td>Etanol</td><td>Fermont</td><td>6063</td><td>99,8% czystości</td></tr><tr><td><mocny>&nbsp; Składniki diety</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Casein</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>nie dotyczy</td><td></td></tr><tr><td>celulozy</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Centrum balance multivitamin</td><td>Pfizer</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Choline Bitwinian</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>L- cystein</td><td>Sigma Aldrich</td><td>168149</td><td>Dostępne również dla innych dostawców</td></tr><tr><td>Smalec</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>nie dotyczy</td><td></td></tr><tr><td>Maltodekstryna 10</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>Nie dotyczy</td><td></td></tr><tr><td>Granulki Nutricubos</td><td>Purina</td><td>nie dotyczy</td><td>Dostępne również dla innych dostawców</td></tr><tr><td>Olej sojowy</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>nie dotyczy</td><td></td></tr><tr><td>Sacharozy</td><td>Dowolny sprzedawca</td><td>nie</td><td></td> dotyczy nie</tr> dotyczy <tr><td>< silny>Sprzęt do ekstrakcji</silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotavapor</td><td>Buchi</td><td>R-300</td><td></td></tr><tr><td>Shimadzu UV-1800 Spektrofotometr skanujący UV/widzialny</td><td>Cole Parmer</td><td>T-83400-20</td><td>Dostępne również dla innych dostawców</td></tr><tr><td>Jednostka ultradźwiękowa</td><td>Elma</td><td>TI-H-20</td><td>Dostępna również dla innych dostawców</td></tr><tr><td>Pompa próżniowa</td><td>Buchi</td><td>V-100</td><td></td></tr></tbody></table>

szybki model do oceny potencjału przeciw otyłości kombinacji syzygium aromaticum (goździk) i cuminun cyminum (kminku) na myszach c57bl6/j karmionych dietą wysokotłuszczową

Rapid Model to Evaluate the Anti-Obesity Potential of a Combination of Syzygium aromaticum (Clove) and Cuminun cyminum (Cumin) on C57BL6/j Mice Fed High-Fat Diet

Kilka badań wykazało, że zawartość fitochemiczna roślin jest potencjalnym środkiem przeciw otyłości. W tym badaniu badamy wpływ stosowania kombinacji suchych guzików z Syzygium aromaticum i nasion z Cuminum cyminum (CC) na myszy C57BL6 / J wywołane otyłością poprzez dietę wysokotłuszczową (HFD). Celem pracy jest wykazanie, że metoda zaproponowana w badaniu istotnie zmniejszyła otyłość po kilku tygodniach eksperymentów. Ekstrakt z obu roślin został wyekstrahowany za pomocą ultradźwięków w celu wzmocnienia ekstrakcji fitochemikaliów. Optymalne warunki ekstrakcji uzyskano przy użyciu etanolu w następujący sposób: woda 50:50 v/v o mocy ultradźwięków 300 W i czasie ultradźwięków 30 minut. Jednoczesne podawanie ekstraktu CC w HFD przez 5 tygodni doprowadziło do regulacji profili lipidowych (cholesterolu i trójglicerydów), zmniejszenia spożycia pokarmów, przyrostu masy ciała, tkanki tłuszczowej i masy wątroby. Wyniki uzyskane przez ten model otyłości wskazują, że ekstrakt CC może zapobiegać otyłości. W porównaniu z tradycyjną metodą 16 tygodni (8 tygodni na przytycie i 8 tygodni na odchudzanie), podobne wyniki uzyskano w niniejszym badanym modelu otyłości w krótszym czasie eksperymentów.

Ekstrakcja wspomagana ultradźwiękami 
Optymalne warunki ekstrakcji to mieszanina etanol:woda (50:50, v/v) przy mocy ultradźwięków 300 W i czasie sonikacji 30 min. W ten sposób ekstrakcja przebiegała szybciej niż w przypadku konwencjonalnych metod ekstrakcji (Tabela 2). Ekstrakt wykazał intensywny pik absorpcyjny przy 320 nm w widmach UV-vis (Rycina 1).
Pobór pokarmu i masa ciała 
Zmiany masy ciała myszy, którym przez 5 tygo...

Ta praca przedstawia protokół do zbadania działania przeciw otyłości dwóch roślin stosowanych razem, przez okres 5 tygodni. U otyłych myszy podawano jednocześnie ekstrakt i dietę wysokotłuszczową (HFD). Metoda może promować korzyści płynące z roślin w leczeniu otyłości.

Szybki model do oceny potencjału przeciw otyłości kombinacji Syzygium aromaticum (goździk) i Cuminun cyminum (kminku) na myszach C57BL6/j karmionych dietą wysokotłuszczową

Several studies have demonstrated that the phytochemical contents of plants are potential anti-obesity agents. In this study we examine the effect of ...

W niniejszej pracy przedstawiono protokół mający na celu zbadanie wpływu dwóch roślin stosowanych razem przez pięć tygodni. U otyłych myszy podawano jednocześnie ekstrakt i dietę wysokotłuszczową. Metoda może promować korzyści płynące z roślin w leczeniu otyłości.Nadmierna zmodyfikowana akumulacja jest charakterystyczna dla otyłości. między spożyciem a wydatkiem energii. Zajmijmy się magazynowaniem nadmiaru energii w adipocytach.W rzeczywistości otyłość jest przyczyną 78% przypadków cukrzycy typu drugiego, 68% choroby nadciśnieniowej i 45% przypadków udaru niedokrwiennego. Przewiduje się, że do 2030 roku na całym świecie będzie 2 000 000 osób z nadwagą i 1 000 000 osób otyłych. Dowody dotyczące leków przeciw otyłości wskazują na dużą częstość występowania działań niepożądanych i toksyczności.Zabiegi chirurgiczne, takie jak chirurgia bariatryczna, nie zawsze są uleczalne. W związku z tym potrzebne są dalsze badania w celu opracowania nowych metod leczenia, które można by zastosować w celu zmniejszenia częstości występowania otyłości. Rośliny lecznicze zawierają farmakodynamiczne związki bioaktywne, których synergistyczne działanie jest korzystne w leczeniu zaburzeń metabolicznych.Odkrycie tych składników fitochemicznych i ich zastosowanie zmniejsza obciążenie finansowe związane z poleganiem na niedrogich lekach syntetycznych. Innym czynnikiem napędzającym stosowanie roślin leczniczych jest przekonanie, że są one pozbawione niepożądanych skutków ubocznych. Dlatego badania nad roślinami leczniczymi i ich związkami biotycznymi stały się kluczowym osiągnięciem współczesnej medycyny.Badano kilka roślin leczniczych w celu uniknięcia otyłości i powiązanych chorób. Wśród nich Syzygium aromaticum zostało przebadane pod kątem jego potencjału przeciw otyłości we wzajemnych leczeniu. Znaczące działanie przeciw nadwadze zaobserwowano w wieloośrodkowym otwartym badaniu Cuminum cyminum u osób skrajnie otyłych.W tym badaniu używamy myszy C, 57, B, L, sześciu, J, aby zbadać eksperymentalny pierwszy model do oceny potencjalnego środka przeciw otyłości w celu zmniejszenia otyłości. Jadalne rośliny Syzygium aromaticum, goździki i Cuminum cyminum, kminek, zostały zakupione z Meksyku. Przeprowadzanie procedur ekstrakcji poprzez ekstrakcję wspomaganą ultradźwiękami ze zmieleniem nasion dwóch roślin.500 gramów. Sonic-ate je etanolem. Woda, 50 do 50, V nad V, w zakresie temperatur 30 plus minus cztery stopnie Celsjusza.Później przefiltruj substancje rozpuszczone za pomocą bibuły filtracyjnej numer dwa Whatmana pod próżnią i zagęść ekstrakt za pomocą wyparki obrotowej. Następnie zmierzono widmo UV/vis ekstraktu z obu roślin. Do badania wykorzystano samce myszy C, 57, B, L, sześć, J w wieku sześciu tygodni.Zwierzęta trzymano w grupach po osiem osób w standardowych warunkach laboratoryjnych z temperaturą, wilgotnością względną, oświetleniem, z jedzeniem i wodą ad linium. Myszy były zaaklimatyzowane w tych warunkach przez tydzień przed eksperymentem. Wszystkie doświadczenia na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet Doświadczeń na Zwierzętach Kilogram diety wysokotłuszczowej użytej w tym eksperymencie przygotowuje się ze 140 gramów kazeiny, w jednym miejscu osiem gramów L cysteiny, 120 gramów smalcu, 40 gramów oleju sojowego, 150 gramów maltodekstryny 10, 450 gramów sacharozy, 50 gramów celulozy, odpowiednik witaminy L i minerałów w tabletce oraz dwa pięć gramów dwuwinianu choliny.Na początku testu poddaj każdą z grup różnym zabiegom. Karma grupa pierwsza na diecie normalnej, grupa druga na diecie wysokotłuszczowej, grupa trzecia na diecie wysokotłuszczowej plus 100 miligramów na kilogramy ekstraktu C, grupa czwarta na diecie wysokotłuszczowej plus 250 miligramów na kilogramach ekstraktu C, grupa piąta na diecie wysokotłuszczowej plus 450 miligramów na kilogramy ekstraktu C, C ekstrakt, grupa sześć na diecie wysokotłuszczowej plus Fentermina, lek przeciw otyłości stosowany jako kontrola pozytywna. Karm wszystkie grupy myszy przez pięć tygodni i rejestruj ilość spożywanego pokarmu dziennie.W tym celu w probówce z korkiem ekstrakt lub lek homogenizuje się z dawką wody odpowiadającą grupie, do której podawany jest zabieg. Odbywa się to za pomocą wytrząsarki wirowej. Po homogenizacji odpowiedni dozór jest opróżniany do poidła każdej grupy.Mierz zarówno spożycie pokarmu, jak i masę ciała raz w tygodniu. Pościć myszy przez noc przez okres pięciu tygodni, a następnie złożyć je w ofierze przez zwichnięcie szyjki macicy i sekcję zwłok. Po złożeniu myszy w ofierze unieruchamiaj je w pozycji leżącej.Używając czystych kleszczy chirurgicznych i nożyczek, zlokalizuj i unieś środkową skórę w pobliżu narządów płciowych i wykonaj małe nacięcie na dwa milimetry. Włóż płaskie nożyczki poziomo do nacięcia i ostrożnie oddziel skórę brzucha od ściany brzucha. Za pomocą kleszczy podnieś środkową skórę i nożyczkami chirurgicznymi przetnij ją na poziomie klatki piersiowej.Następnie należy przeciąć skórę nad obiema tylnymi kończynami, aby ułatwić gromadzenie się tkanki tłuszczowej. Upewnij się, że cała tkanka tłuszczowa została pobrana z ciała przez blondynkę do przekroju nożyczkami i kleszczami, a po zebraniu umieść tkankę tłuszczową w folii aluminiowej. Pamiętaj o zbieraniu tłuszczu wokół narządów rozrodczych.Unikaj gromadzenia się włosów i skóry, aby nie zmieniać wyników. Aby uzyskać dostęp do trzewnej tkanki tłuszczowej, przyciąć do mięśnia brzucha nożyczkami chirurgicznymi od narządów płciowych przez klatkę piersiową, wykonując nacięcie w mięśniach brzucha od narządów płciowych w kierunku grzbietu myszy. Hepatektomia jest wykonywana w celu usunięcia stu procent wątroby.Aby uzewnętrznić wątrobę, usuwa się zbędne narządy, a żyły i tętnice wątrobowe są przecinane w celu oddzielenia wątroby od reszty ciała. Ostatnim krokiem jest dokładne pobranie pęcherzyka żółciowego z wątroby. Zmierz hipercholesterolemię i hipertriglicerydemię za pomocą komercyjnych zestawów ELISA, zgodnie ze wskazaniami producenta.Wszystkie wyniki eksperymentów powinny być reprezentatywne dla trzech niezależnych esejów. Wyrażona nam średnia plus minus odchylenie standardowe. Oblicz błąd standardowy za pomocą jednokierunkowej analizy wariancji ANOVA, a następnie uczciwej metody Tukeya.Niech istotna różnica P mniejsza niż punkt zerowy zero pięć będzie uważana za statystycznie istotną. Optymalne warunki ekstrakcji uzyskano przy użyciu etanolu w następujący sposób: 50 do 50 V nad wodą V o mocy ultradźwięków 300 W. Czas kacji ultradźwiękowej 30 minut. W ten sposób ekstrakcja była szybsza niż w przypadku konwencjonalnych metod ekstrakcji, tabela druga.Ekstrakt wykazał intensywny pik absorpcji przy 320 N, M, w widmie widzialnym UV, rysunek pierwszy. Spożycie pokarmu i masa ciała. Zmiany w masie ciała myszy przy różnych stężeniach ekstraktu.100, 200 i 450 miligramów w ciągu kilogramów przez pięć tygodni pokazano na rysunku drugim, A. Procenty redukcji masy ciała w grupach trzeciej, czwartej i piątej wynosiły odpowiednio 12,2, 30 i 41 procent. Pokazuje to, że najniższy przyrost masy ciała zaobserwowano w starszych grupach, ale grupa HFD miała wzrost o dwa punkty jednokrotnie w porównaniu z grupą stosującą normalną dietę tłuszczową. Dane te wskazują, że 450 miligramów w dawce C, C jest bardziej skuteczne niż 30 miligramów w ciągu kilogramów Fentermina.39%zmniejszenie przyrostu masy ciała. Główne spożycie pokarmu pod koniec eksperymentu w grupie HFD plus C, C było o 31% niższe niż w grupie otyłej. Z jednym punktem trzy gramy zmniejszenie spożycia pokarmu w porównaniu z grupą otyłą.Spożycie pokarmu u myszy karmionych HFD było pięciokrotnie wyższe o jeden punkt niż w normalnej kontroli. W związku z tym jest znacznie zmniejszony we wszystkich grupach C, C w zakresie od 7,14 do 31%Wskaźnik efektywności diety w grupie HFD wynosił 16%, co znacznie różniło się od tego w grupie kontrolnej na poziomie 11%Wyniki te pokazują, że C, C może zmniejszać przyrost masy ciała wywołany HFD. Masa najądrza WAT, podskórnej tkanki tłuszczowej i okołonerkowej tkanki tłuszczowej WAT była wyższa w grupie HFD, ale nie w grupach HFD, C, C.Masa wątroby była znacznie zmniejszona w grupie C, C, w zakresie od 15 do 28,4 procent, w porównaniu z grupą HFD. Poziomy triacyloglicerolu, TG i cholesterolu całkowitego (TC) w surowicy po pięciu tygodniach leczenia pokazano odpowiednio na rycinach 3, A i 3, B. Poziom trójglicerydów i cholesterolu całkowitego był znacznie podwyższony odpowiednio o jeden punkt, trzy, dwa i jeden punkt trzy, jeden w grupach HFD w porównaniu z grupami ND.Zwiększone poziomy TG i TC w osoczu w diecie HFD zostały znacznie osłabione przez podanie 200 i 450 miligramów na kilogram dziennie, ekstraktu C, C odpowiednio o 18,18 i 22,7% dla TG oraz 16,41 i 20,61% dla TC w porównaniu z kontrolą. W tym badaniu stworzyliśmy pierwszy model, aby określić działanie przeciw otyłości ekstraktu z połączenia dwóch jadalnych roślin, Syzygium aromaticum, goździków i Cuminum cyminum, kminku, u myszy C, 57, B, L, sześciu, J, które z grubsza rozwinęły otyłość i złagodziły hiperlipidemię wywołaną karmieniem dietą wysokotłuszczową. Po zweryfikowaniu wyników tego badania dostarczają solidnych dowodów na to, że te pierwsze pięć tygodni trwania można wykorzystać do oceny, czy roślina ma zdolność jako potencjalny środek zmniejszający otyłość.

rapid-model-to-evaluate-anti-obesity-potential-combination-syzygium

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Eksperymentalne autoimmunologiczne zapalenie mózgu i rdzenia (EAE) jest uznanym zwierzęcym modelem stwardnienia rozsianego. Myszy C57BL/6 są immunizowane peptydem 35-55 (MOG) glikoproteiny oligodendrocytów mieliny (MOG) (MOG35-55), co powoduje narastający porażenie wiotkie spowodowane przez autoreaktywne komórki odpornościowe w ośrodkowym układzie nerwowym. Omówione zostaną protokoły indukcji i monitorowania choroby.

Glikoproteina oligodendrocytów mielinowych (MOG35-55) indukowana eksperymentalnym autoimmunologicznym zapaleniem mózgu i rdzenia kręgowego (EAE) u myszy C57BL / 6

Opisano przygotowanie antygenowych nanocząsteczek liposomalnych i ich zastosowanie w stymulowaniu aktywacji komórek B in vitro i in vivo. Spójne i silne odpowiedzi przeciwciał doprowadziły do opracowania nowego modelu alergii na orzeszki ziemne. Protokół generowania liposomów antygenowych można rozszerzyć na różne antygeny i modele immunizacji.

Liposomy antygenowe do wytwarzania przeciwciał specyficznych dla choroby

Opisano prosty i niezawodny model gryzoni indukowany dietą dla niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (NASH), osiągnięty dzięki trzymaniu zwierząt bez SPF i podawaniu specyficznej diety wysokotłuszczowej. Opisujemy identyfikację podzbiorów komórek odpornościowych wątroby i tkanki tłuszczowej w celu podsumowania ludzkich warunków immunologicznych poprzez wystawienie myszy na zarazki środowiskowe.

Zaawansowany mysi model niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby w połączeniu z cukrzycą typu 2

Ten artykuł zawiera trzy łatwe i łatwo dostępne testy do oceny metabolizmu lipidów u myszy.

Ocena zdolności całego organizmu do obsługi lipidów u myszy

Ogólnym celem tej procedury jest opisanie metody samodzielnego podawania leków, które mogą być używane w mysich modelach żywienia i otyłości.

Samodzielne podawanie leków w mysich modelach żywienia i otyłości

Tutaj prezentujemy alternatywny protokół aktywnego wywoływania eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia u myszy C57BL/6, przy użyciu immunogennej epitopowej oligodendrocytów glikoproteiny mielinowej (MOG)35-55 zawieszonej w niekompletnym adiuwancie Freunda zawierającym zabity termicznie Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis.

Działanie adiuwantowe Mycobacterium paratuberculosis w zwiększaniu immunogenności autoantygenów podczas eksperymentalnego autoimmunologicznego zapalenia mózgu i rdzenia kręgowego

Dootrzewnowe podawanie leków jest bezpiecznym i skutecznym nieinwazyjnym sposobem na wywołanie uszkodzenia trzustki. W badaniu tym porównano pięć różnych protokołów wstrzyknięć dootrzewnowych na myszach w celu wywołania różnego stopnia uszkodzenia trzustki i ustanowiono model ciężkiego uszkodzenia trzustki w celu zbadania zmian patologicznych i strategii leczenia ciężkiego ostrego zapalenia trzustki (SAP).

Przygotowanie mysiego modelu ciężkiego ostrego zapalenia trzustki za pomocą kombinacji ceruleiny i lipopolisacharydu we wstrzyknięciu dootrzewnowym

Ten protokół przedstawia metodę wywoływania kardiomiopatii cukrzycowej poprzez połączenie diety wysokotłuszczowej i wstrzykiwania streptozotocyny. Podejście to ma na celu zapewnienie wiarygodnych ram dla badań naukowych nad kardiomiopatią cukrzycową oraz zbadanie potencjalnych możliwości zastosowań leczenia klinicznego.

Modelowanie i ocena modelu mysiej kardiomiopatii cukrzycowej

Badanie to oferuje powtarzalną i standaryzowaną metodę mająca na celu ustalenie modeli otyłych szczurów wykazujących prostą otyłość, często charakteryzującą się stłuszczeniem trzustki. Zawiera również szczegółowe protokoły pobierania próbek tkanki trzustki oraz immunohistochemii.

Opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką

Sepsis to zespół ogólnoustrojowej reakcji zapalnej wynikający z infekcji mikrobiologicznej, który można symulować za pomocą techniki chirurgicznej zwanej podwiązaniem i nakłuciem kątnicy (CLP). W niniejszym opracowaniu opisujemy metodę wykorzystania modelu zwierzęcego indukowanego CLP do przesiewowego badania ziół leczniczych w celu poszukiwania czynników terapeutycznych.

Wykorzystanie modelu zwierzęcego sepsy do oceny nowych terapii ziołowych

Poznaj protokół oceny przeciwotyłościowego działania ekstraktu z goździka i kminku u myszy C57BL6/j na diecie wysokotłuszczowej. Metoda umożliwia szybką weryfikację potencjału roślin w terapii otyłości.

Szybki model do oceny potencjału przeciw otyłości kombinacji Syzygium aromaticum (goździk) i Cuminun cyminum (kminku) na myszach C57BL6/j karmionych dietą wysokotłuszczową (Wideo) | JoVE Journal

Szybki model do oceny potencjału przeciw otyłości kombinacji Syzygium aromaticum (goździk) i Cuminun cyminum (kminku) na myszach C57BL6/j karmionych dietą wysokotłuszczową

Przeglądaj więcej filmów