-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biochemistry
Ręczne zamrażanie próbek biologicznych metodą blot and plunge do kriogenicznej mikroskopii elektr...
Ręczne zamrażanie próbek biologicznych metodą blot and plunge do kriogenicznej mikroskopii elektr...
JoVE Journal
Biochemistry
Author Produced
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biochemistry
Manual Blot-and-Plunge Freezing of Biological Specimens for Single-Particle Cryogenic Electron Microscopy

Ręczne zamrażanie próbek biologicznych metodą blot and plunge do kriogenicznej mikroskopii elektronowej pojedynczych cząstek

Full Text
7,517 Views
09:16 min
February 7, 2022

DOI: 10.3791/62765-v

Hoang P. M. Nguyen*1, Kelly L. McGuire*1, Brian D. Cook*1, Mark A. Herzik, Jr.1

1Department of Chemistry and Biochemistry,University of California, San Diego

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This manuscript outlines the blot-and-plunge method to manually freeze biological specimens for single-particle cryogenic electron microscopy. The manual plunging method is a cost-effective and reliable technique for preparing samples for transmission electron microscopy.

Key Study Components

Area of Science

  • Neuroscience
  • Biological specimen preparation
  • Cryogenic electron microscopy

Background

  • Manual plunging is essential for preserving biological samples.
  • Maintaining specific temperature and humidity conditions is crucial.
  • Proper setup of equipment is necessary for successful sample preparation.
  • This method is accessible and cost-effective for researchers.

Purpose of Study

  • To demonstrate the manual plunging technique for cryogenic electron microscopy.
  • To provide a reliable method for sample preparation.
  • To enhance the accessibility of cryogenic techniques for researchers.

Methods Used

  • Setting up the manual plunger.
  • Preparing cryogen and EM grids.
  • Performing manual blotting and plunging.
  • Conducting the procedure in a controlled environment.

Main Results

  • Successful demonstration of the manual plunging method.
  • Establishment of optimal conditions for sample preparation.
  • Validation of the method's reliability and cost-effectiveness.
  • Guidance on equipment setup and procedure execution.

Conclusions

  • The manual plunging method is effective for cryogenic sample preparation.
  • Researchers can achieve high-quality results with this technique.
  • This method promotes accessibility to advanced microscopy techniques.

Frequently Asked Questions

What is the manual plunging method?
It is a technique for preparing biological specimens for cryogenic electron microscopy.
Why is temperature control important?
Maintaining specific temperature and humidity is crucial for preserving sample integrity.
What equipment is needed for this method?
You need a manual plunger, cryogen Dewar, and EM grids.
Is this method cost-effective?
Yes, the manual plunging method is a cost-effective solution for sample preparation.
Can this method be used for all biological specimens?
It is suitable for a variety of biological specimens, particularly for electron microscopy.
What are the main steps in the manual plunging process?
The main steps include setting up the plunger, preparing cryogen, and performing blotting and plunging.

Ten manuskrypt przedstawia metodę ręcznego zamrażania próbek biologicznych do kriogenicznej mikroskopii elektronowej z pojedynczymi cząstkami.

Opisana tutaj ręczna metoda zagłębiania jest opłacalną i niezawodną metodą przygotowania próbek do transmisyjnej mikroskopii elektronowej. W tym filmie pokażemy, jak ustawić ręczny tłok, przygotować kriogen oraz wykonać ręczne osuszanie i zanurzanie siatek EM. Przygotuj środowisko ręcznego zanurzania.

Zabieg ten należy wykonywać w chłodni utrzymywanej w temperaturze 40 stopni Celsjusza i wilgotności powyżej 95%Zalecamy stosowanie materiałów pokazanych tutaj i zgodnie z opisem w protokole online do ręcznego osuszania i zanurzania. Przygotuj kriogen Dewara i ręczny tłok. Aby zmontować kriogen Dewar, najpierw zainstaluj podstawę platformy na dole niebieskiego styropianu Dewara, upewniając się, że jest płaska i wypoziomowana.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Ręczne zamrażanie metodą blot i wgłęb próbki biologiczne kriogeniczna mikroskopia elektronowa jednocząsteczkowa transmisyjna mikroskopia elektronowa ręczny tłok przygotowanie kriogenu naczynie etanoweńskie wgłębne Dewar pęseta zaciskowa ciekły azot środki ochrony osobistej techniki kriogeniczne siatki EM

Related Videos

Kriotomografia elektronowa komórek bakteryjnych

14:23

Kriotomografia elektronowa komórek bakteryjnych

Related Videos

26.3K Views

Nano-fEM: Lokalizacja białek za pomocą mikroskopii lokalizacyjnej aktywowanej światłem i mikroskopii elektronowej

13:13

Nano-fEM: Lokalizacja białek za pomocą mikroskopii lokalizacyjnej aktywowanej światłem i mikroskopii elektronowej

Related Videos

16.7K Views

Przygotowanie próbki do mikroskopii krioelektronowej za pomocą skupionej wiązki jonów

10:54

Przygotowanie próbki do mikroskopii krioelektronowej za pomocą skupionej wiązki jonów

Related Videos

27.3K Views

Zamrażanie wgłębne: narzędzie do badań ultrastrukturalnych i immunolokalizacyjnych komórek zawiesinowych w transmisyjnej mikroskopii elektronowej

13:35

Zamrażanie wgłębne: narzędzie do badań ultrastrukturalnych i immunolokalizacyjnych komórek zawiesinowych w transmisyjnej mikroskopii elektronowej

Related Videos

11.6K Views

Zminiaturyzowane przygotowanie próbki do transmisyjnej mikroskopii elektronowej

09:04

Zminiaturyzowane przygotowanie próbki do transmisyjnej mikroskopii elektronowej

Related Videos

20.8K Views

Przygotowanie próbki biologicznej poprzez zamrażanie pod wysokim ciśnieniem, wspomagane mikrofalami wzmocnienie kontrastu i minimalne zatapianie żywicy w celu obrazowania objętościowego

07:33

Przygotowanie próbki biologicznej poprzez zamrażanie pod wysokim ciśnieniem, wspomagane mikrofalami wzmocnienie kontrastu i minimalne zatapianie żywicy w celu obrazowania objętościowego

Related Videos

11.6K Views

Mikroskopia krioelektronowa pojedynczych cząstek: od próbki do struktury

11:52

Mikroskopia krioelektronowa pojedynczych cząstek: od próbki do struktury

Related Videos

9.8K Views

Solidny przebieg przetwarzania w mikroskopii krioelektronowej jednocząsteczkowej (cryo-EM) z cryoSPARC, RELION, i Scipion

13:43

Solidny przebieg przetwarzania w mikroskopii krioelektronowej jednocząsteczkowej (cryo-EM) z cryoSPARC, RELION, i Scipion

Related Videos

15.6K Views

Technika peel-blot: metoda przygotowania próbek cryo-EM w celu oddzielenia pojedynczych warstw od wielowarstwowych lub skoncentrowanych próbek biologicznych

07:27

Technika peel-blot: metoda przygotowania próbek cryo-EM w celu oddzielenia pojedynczych warstw od wielowarstwowych lub skoncentrowanych próbek biologicznych

Related Videos

2.8K Views

Przygotowanie próbki do kriotomografii in situ komórek ssaków

08:17

Przygotowanie próbki do kriotomografii in situ komórek ssaków

Related Videos

3.9K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code