Name: Iniekcja komórek zrębu tkanki tłuszczowej pochodzącej z tkanki tłuszczowej świń za pomocą technologii strumienia wody (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-11-23T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 5 s
Description: Poznaj technologię strumienia wody do precyzyjnej iniekcji komórek zrębu tkanki tłuszczowej w badaniach nad terapią komórkową nietrzymania moczu. Metoda minimalnie inwazyjna zapewnia wysoką żywotność komórek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Dziękujemy naszym współautorom z oryginalnych publikacji za pomoc i wsparcie.

<ol><li>Milsom, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+prevalence+and+economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Global prevalence and economic burden of urgency urinary incontinence: a systematic review.</a> European Urology. 65 (1), 79-95 (2014).</li>
<li>Lee, J. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+periurethral+muscle-derived+stem+cell+injection+on+leak+point+pressure+in+a+rat+model+of+stress+urinary+incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22International+Urogynecology+Journal+and+Pelvic+Floor+Dysfunction%22%5BJournal%5D)">The effects of periurethral muscle-derived stem cell injection on leak point pressure in a rat model of stress urinary incontinence.</a> International Urogynecology Journal and Pelvic Floor Dysfunction. 14 (1), 31-37 (2003).</li>
<li>Tran, C., Damaser, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+role+of+stem+cells+in+the+treatment+of+urinary+incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22Therapeutic+Advances+in+Urology%22%5BJournal%5D)">The potential role of stem cells in the treatment of urinary incontinence.</a> Therapeutic Advances in Urology. 7 (1), 22-40 (2015).</li>
<li>Fu, Q., Song, X. F., Liao, G. L., Deng, C. L., Cui, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myoblasts+differentiated+from+adipose-derived+stem+cells+to+treat+stress+urinary+incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Myoblasts differentiated from adipose-derived stem cells to treat stress urinary incontinence.</a> Urology. 75 (3), 718-723 (2010).</li>
<li>Corcos, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((marrow+mesenchymal+stromal+cell+therapy+for+external+urethral+sphincter+restoration+in+a+rat+model+of+stress+urinary+incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">marrow mesenchymal stromal cell therapy for external urethral sphincter restoration in a rat model of stress urinary incontinence.</a> Neurourology and Urodynamics. 30 (3), 447-455 (2011).</li>
<li>Smaldone, M. C., Chen, M. L., Chancellor, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stem+cell+therapy+for+urethral+sphincter+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Urologica+e+Nefrologica%22%5BJournal%5D)">Stem cell therapy for urethral sphincter regeneration.</a> Minerva Urologica e Nefrologica. 61 (1), 27-40 (2009).</li>
<li>Perin, E. C., López, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Methods+of+stem+cell+delivery+in+cardiac+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Clinical+Practice+Cardiovascular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Methods of stem cell delivery in cardiac diseases.</a> Nature Clinical Practice Cardiovascular Medicine. 3, Suppl 1 110-113 (2006).</li>
<li>Zhang, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cardiomyocyte+grafting+for+cardiac+repair%3A+graft+cell+death+and+anti-death+strategies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Molecular+and+Cellular+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Cardiomyocyte grafting for cardiac repair: graft cell death and anti-death strategies.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 33 (5), 907-921 (2001).</li>
<li>Amer, M. H., White, L. J., Shakesheff, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+injection+using+narrow-bore+needles+on+mammalian+cells%3A+administration+and+formulation+considerations+for+cell+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacy+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">The effect of injection using narrow-bore needles on mammalian cells: administration and formulation considerations for cell therapies.</a> Journal of Pharmacy and Pharmacology. 67 (5), 640-650 (2015).</li>
<li>Amer, M. H., Rose, F. R. A. J., Shakesheff, K. M., Modo, M., White, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Translational+considerations+in+injectable+cell-based+therapeutics+for+neurological+applications%3A+concepts%2C+progress+and+challenges%5BTitle%5D)+AND+%22NPJ+Regenerative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Translational considerations in injectable cell-based therapeutics for neurological applications: concepts, progress and challenges.</a> NPJ Regenerative Medicine. 2, 23-23 (2017).</li>
<li>Linzenbold, W., Fech, A., Hofmann, M., Aicher, W. K., Enderle, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+Techniques+to+Improve+Precise+Cell+Injection%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Novel Techniques to Improve Precise Cell Injection.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (12), 6367(2021).</li>
<li>Adamo, A., Roushdy, O., Dokov, R., Sharei, A., Jensen, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microfluidic+jet+injection+for+delivering+macromolecules+into+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Micromechanics+and+Microengineering%3A+Structures%2C+Devices%2C+and+Systems%22%5BJournal%5D)">Microfluidic jet injection for delivering macromolecules into cells.</a> Journal of Micromechanics and Microengineering: Structures, Devices, and Systems. 23, 035026(2013).</li>
<li>Jäger, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+waterjet+technology+for+transurethral+cystoscopic+injection+of+viable+cells+in+the+urethral+sphincter+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">A novel waterjet technology for transurethral cystoscopic injection of viable cells in the urethral sphincter complex.</a> Neurourology and Urodynamics. 39 (2), 594-602 (2020).</li>
<li>Weber, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrojet-based+delivery+of+footprint-free+iPSC-derived+cardiomyocytes+into+porcine+myocardium%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Hydrojet-based delivery of footprint-free iPSC-derived cardiomyocytes into porcine myocardium.</a> Scientific Reports. 10 (1), 16787(2020).</li>
<li>Jäger, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+waterjet+technology+for+transurethral+cystoscopic+injection+of+viable+cells+in+the+urethral+sphincter+complex%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">A novel waterjet technology for transurethral cystoscopic injection of viable cells in the urethral sphincter complex.</a> Neurourology and Urodynamics. 39 (2), 594-602 (2020).</li>
<li>Linzenbold, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+and+precise+delivery+of+cells+in+the+urethral+sphincter+complex+by+a+novel+needle-free+waterjet+technology%5BTitle%5D)+AND+%22BJU+International%22%5BJournal%5D)">Rapid and precise delivery of cells in the urethral sphincter complex by a novel needle-free waterjet technology.</a> BJU International. 127 (4), 463-472 (2021).</li>
<li>Danalache, M., Tiwari, A., Sigwart, V., Hofmann, U. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+Atomic+Force+Microscopy+to+Detect+Early+Osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Application of Atomic Force Microscopy to Detect Early Osteoarthritis.</a> Journal of Visualized Experiments. (159), e61041(2020).</li>
<li>Gálvez-Martín, P., Hmadcha, A., Soria, B., Calpena-Campmany, A. C., Clares-Naveros, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+the+stability+of+packaging+and+storage+conditions+of+human+mesenchymal+stem+cell+for+intra-arterial+clinical+application+in+patient+with+critical+limb+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Pharmaceutics+and+Biopharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Study of the stability of packaging and storage conditions of human mesenchymal stem cell for intra-arterial clinical application in patient with critical limb ischemia.</a> European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics. 86 (3), 459-468 (2014).</li>
<li>Danalache, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+of+Porcine+Adipose+Tissue-Derived+Stromal+Cells+by+a+Novel+Waterjet+Technology%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stromal Cells by a Novel Waterjet Technology.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (8), (2021).</li>
<li>Amend, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Precise+injection+of+human+mesenchymal+stromal+cells+in+the+urethral+sphincter+complex+of+G%C3%B6ttingen+minipigs+without+unspecific+bulking+effects%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Precise injection of human mesenchymal stromal cells in the urethral sphincter complex of Göttingen minipigs without unspecific bulking effects.</a> Neurourology and Urodynamics. 36 (7), 1723-1733 (2017).</li>
<li>Danalache, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+of+Porcine+Adipose+Tissue-Derived+Stromal+Cells+by+a+Novel+Waterjet+Technology%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stromal Cells by a Novel Waterjet Technology.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (8), 3958(2021).</li>
<li>Strasser, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((328%3A+Transurethral+Ultrasound+Guided+Stem+Cell+Therapy+of+Urinary+Incontinence%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">328: Transurethral Ultrasound Guided Stem Cell Therapy of Urinary Incontinence.</a> Journal of Urology. 175 (4), 107(2006).</li>
<li>Vining, K. H., Mooney, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+forces+direct+stem+cell+behaviour+in+development+and+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+reviews.+Molecular+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Mechanical forces direct stem cell behaviour in development and regeneration.</a> Nature reviews. Molecular Cell Biology. 18 (12), 728-742 (2017).</li>
<li>Ding, Y., Xu, G. -K., Wang, G. -F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((On+the+determination+of+elastic+moduli+of+cells+by+AFM+based+indentation%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">On the determination of elastic moduli of cells by AFM based indentation.</a> Scientific Reports. 7 (1), 45575(2017).</li>
<li>Charras, G. T., Horton, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Single+cell+mechanotransduction+and+its+modulation+analyzed+by+atomic+force+microscope+indentation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Single cell mechanotransduction and its modulation analyzed by atomic force microscope indentation.</a> Biophysical Journal. 82 (6), 2970-2981 (2002).</li>
<li>Carl, P., Schillers, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elasticity+measurement+of+living+cells+with+an+atomic+force+microscope%3A+data+acquisition+and+processing%5BTitle%5D)+AND+%22Pfl%C3%BCgers+Archiv%3A+European+Journal+of+Physiology%22%5BJournal%5D)">Elasticity measurement of living cells with an atomic force microscope: data acquisition and processing.</a> Pflügers Archiv: European Journal of Physiology. 457 (2), 551-559 (2008).</li>
<li>Darling, E. M., Topel, M., Zauscher, S., Vail, T. P., Guilak, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viscoelastic+properties+of+human+mesenchymally-derived+stem+cells+and+primary+osteoblasts%2C+chondrocytes%2C+and+adipocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanics%22%5BJournal%5D)">Viscoelastic properties of human mesenchymally-derived stem cells and primary osteoblasts, chondrocytes, and adipocytes.</a> Journal of Biomechanics. 41 (2), 454-464 (2008).</li>
<li>Thomas, G., Burnham, N. A., Camesano, T. A., Wen, Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+the+mechanical+properties+of+living+cells+using+atomic+force+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Measuring the mechanical properties of living cells using atomic force microscopy.</a> Journal of Visualized Experiments. (76), e50497(2013).</li>
<li>Li, M., Dang, D., Liu, L., Xi, N., Wang, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atomic+Force+Microscopy+in+Characterizing+Cell+Mechanics+for+Biomedical+Applications%3A+A+Review%5BTitle%5D)+AND+%22IEEE+Trans+Nanobioscience%22%5BJournal%5D)">Atomic Force Microscopy in Characterizing Cell Mechanics for Biomedical Applications: A Review.</a> IEEE Trans Nanobioscience. 16 (6), 523-540 (2017).</li>
<li>Morimoto, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+conserved+KASH+domain+protein+associates+with+telomeres%2C+SUN1%2C+and+dynactin+during+mammalian+meiosis%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">A conserved KASH domain protein associates with telomeres, SUN1, and dynactin during mammalian meiosis.</a> The Journal of Cell Biology. 198 (2), 165(2012).</li>
<li>Lombardi, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interaction+between+nesprins+and+sun+proteins+at+the+nuclear+envelope+is+critical+for+force+transmission+between+the+nucleus+and+cytoskeleton%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biological+Chemistry%22%5BJournal%5D)">The interaction between nesprins and sun proteins at the nuclear envelope is critical for force transmission between the nucleus and cytoskeleton.</a> Journal of Biological Chemistry. 286 (30), 26743-26753 (2011).</li>
<li>Isermann, P., Lammerding, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nuclear+Mechanics+and+Mechanotransduction+in+Health+and+Disease%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Biology%22%5BJournal%5D)">Nuclear Mechanics and Mechanotransduction in Health and Disease.</a> Current Biology. 23 (24), 1113-1121 (2013).</li>
<li>Méjat, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((LINC+complexes+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Nucleus%22%5BJournal%5D)">LINC complexes in health and disease.</a> Nucleus. 1 (1), 40-52 (2010).</li>
<li>Folker, E. S., Östlund, C., Luxton, G. G., Worman, H. J., Gundersen, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lamin+A+variants+that+cause+striated+muscle+disease+are+defective+in+anchoring+transmembrane+actin-associated+nuclear+lines+for+nuclear+movement%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Lamin A variants that cause striated muscle disease are defective in anchoring transmembrane actin-associated nuclear lines for nuclear movement.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 108 (1), 131-136 (2011).</li>
<li>Guilluy, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Isolated+nuclei+adapt+to+force+and+reveal+a+mechanotransduction+pathway+in+the+nucleus%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+cell+biology%22%5BJournal%5D)">Isolated nuclei adapt to force and reveal a mechanotransduction pathway in the nucleus.</a> Nature cell biology. 16 (4), 376-381 (2014).</li>
<li>Fischer, T., Hayn, A., Mierke, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Nuclear+Stiffness+on+Cell+Mechanics+and+Migration+of+Human+Breast+Cancer+Cells%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Cell+and+Developmental+Biology%22%5BJournal%5D)">Effect of Nuclear Stiffness on Cell Mechanics and Migration of Human Breast Cancer Cells.</a> Frontiers in Cell and Developmental Biology. 8, 393(2020).</li>
<li>Kuznetsova, T. G., Starodubtseva, M. N., Yegorenkov, N. I., Chizhik, S. A., Zhdanov, R. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atomic+force+microscopy+probing+of+cell+elasticity%5BTitle%5D)+AND+%22Micron%22%5BJournal%5D)">Atomic force microscopy probing of cell elasticity.</a> Micron. 38 (8), 824-833 (2007).</li>
<li>Schillers, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardized+Nanomechanical+Atomic+Force+Microscopy+Procedure+%28SNAP%29+for+Measuring+Soft+and+Biological+Samples%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Standardized Nanomechanical Atomic Force Microscopy Procedure (SNAP) for Measuring Soft and Biological Samples.</a> Scientific Reports. 7 (1), 5117(2017).</li>
<li>Costa, K. D., Yin, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+indentation%3A+implications+for+measuring+mechanical+properties+with+atomic+force+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomechanical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Analysis of indentation: implications for measuring mechanical properties with atomic force microscopy.</a> Journal of Biomechanical Engineering. 121 (5), 462-471 (1999).</li>
<li>Stolz, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dynamic+elastic+modulus+of+porcine+articular+cartilage+determined+at+two+different+levels+of+tissue+organization+by+indentation-type+atomic+force+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Biophysical+Journal%22%5BJournal%5D)">Dynamic elastic modulus of porcine articular cartilage determined at two different levels of tissue organization by indentation-type atomic force microscopy.</a> Biophysical Journal. 86 (5), (2004).</li>
<li>Park, S., Costa, K. D., Ateshian, G. A., Hong, K. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+properties+of+bovine+articular+cartilage+under+microscale+indentation+loading+from+atomic+force+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+Institution+of+Mechanical+Engineers%2C+Part+H%22%5BJournal%5D)">Mechanical properties of bovine articular cartilage under microscale indentation loading from atomic force microscopy.</a> Proceedings of the Institution of Mechanical Engineers, Part H. 223 (3), 339-347 (2009).</li>
<li>Usukura, E., Narita, A., Yagi, A., Ito, S., Usukura, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Unroofing+Method+to+Observe+the+Cytoskeleton+Directly+at+Molecular+Resolution+Using+Atomic+Force+Microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">An Unroofing Method to Observe the Cytoskeleton Directly at Molecular Resolution Using Atomic Force Microscopy.</a> Scientific Reports. 6 (1), 27472(2016).</li>
</ol>

Autorzy J.K., M.D., T.A., A.S., W.K.A. nie mają nic do ujawnienia. Autorzy W.L. i M.D.E. są pracownikami ERBE Medizintechnik Lt. Tübingen, producenta ERBEJet2 i prototypu WJ zatrudnionego w tym badaniu.

W niniejszym badaniu zademonstrowaliśmy i przedstawiliśmy podejście krok po kroku do procedury dostarczania komórek WJ i zastosowaliśmy następstwa badań ilościowych w celu oceny wpływu dostarczania WJ na cechy komórkowe: żywotność komórkową i cechy biomechaniczne (tj. EM). Po wstrzyknięciu WJ 85,9% pobranych komórek było zdolnych do życia. Jeśli chodzi o wstrzyknięcie WN, 97,2% komórek zachowało swoją żywotność po wstrzyknięciu. W ten sposób podejście WJ spełnia absolutny wymóg wdrożenia klinicznego: ponad 80% żywotnych ...

Nietrzymanie moczu (UI) jest powszechnym zaburzeniem, którego częstość występowania wynosi 1,8 - 30,5% w populacjach europejskich1 i charakteryzuje się przede wszystkim nieprawidłowym funkcjonowaniem zwieracza cewki moczowej. Z klinicznego punktu widzenia leczenie chirurgiczne jest często oferowane pacjentom, gdy terapie zachowawcze lub fizjoterapia nie rozwiązują i nie łagodzą pojawiających się objawów.
Terapia komórkowa w celu potencjalnej regeneracyjnej naprawy nieprawidłowego działania kompleksu zwieraczy staje się awangardowym podejściem do leczenia patologii UI2,3. Jego głównym celem jest wymiana, naprawa i przywrócenie biologicznej funkcjonalności uszkodzonej tkanki. W modelach zwierzęcych dla UI przeszczep komórek macierzystych wykazał obiecujące wyniki w zakresie wyników urodynamicznych2,4,5. Komórki macierzyste są optymalnymi kandydatami komórkowymi, ponieważ mają zdolność do samoodnawiania się i różnicowania multipotencjalnego, wspomagając w ten sposób regenerację dotkniętych chorobą tkanek6. Pomimo nadchodzącego potencjału regeneracyjnego, praktyczne zastosowanie terapii komórkowej pozostaje utrudnione, ponieważ minimalnie inwazyjne dostarczanie komórek nadal napotyka szereg wyzwań związanych z precyzją iniekcji i pokryciem celu. Mimo że obecnie stosowanym podejściem do dostarczania komórek jest wstrzykiwanie za pomocą systemu igły-strzykawki7, zwykle powoduje to ogólny deficyt żywotnych komórek, z deklarowaną żywotnością na poziomie zaledwie 1%-31% po przeszczepie8. Ponadto wykazano również, że dostarczanie komórek za pomocą iniekcji igłowej wpływa na umiejscowienie, szybkość retencji, a także dystrybucję przeszczepionych komórek do docelowej tkanki9,10,11. Wykonalnym, nowatorskim podejściem, które pozwala przezwyciężyć wyżej wymienione ograniczenie, jest bezigłowe dostarczanie komórek za pomocą technologii strumienia wody.
Technologia strumienia wody (WJ) jawi się jako nowe podejście, które umożliwia wysokowydajne dostarczanie komórek przez cystoskop pod kontrolą wizualną w zwieracz cewki moczowej<klasa sup="xref">12,13. WJ umożliwia dostarczanie ogniw przy różnych ciśnieniach (E = efekty w barach) w zakresie od E5 do E8013. W pierwszej fazie (faza penetracji tkanki) roztwór izotoniczny jest nakładany pod wysokim ciśnieniem (tj. E60 lub E80) w celu rozluźnienia macierzy zewnątrzkomórkowej otaczającej tkankę docelową i otwarcia małych łączących się mikroluk. W drugiej fazie (faza iniekcji) ciśnienie jest obniżane w ciągu milisekund (tj. do E10) w celu delikatnego dostarczenia komórek do docelowej tkanki. Po tej dwuetapowej aplikacji komórki nie są poddawane dodatkowemu naciskowi na tkankę podczas wyrzucania, ale unoszą się w strumieniu o niskim ciśnieniu do wypełnionego cieczą obszaru jamistego13. W modelu ex vivo, w którym komórki macierzyste zostały wstrzyknięte za pośrednictwem WJ do tkanki cewki moczowej zwłok, żywe komórki mogły być następnie aspirowane i pobierane z tkanki oraz dalej namnażane in vitro13. Chociaż badanie przeprowadzone w 2020 r. przez Webera i wsp. wykazało wykonalność i możliwość zastosowania WJ do dostarczania kardiomiocytów wolnych od śladów stóp do mięśnia sercowego14, należy pamiętać, że technologia WJ jest nadal w fazie prototypu.
Poniższy protokół opisuje, jak przygotować i oznaczyć komórki zrębu pochodzące z tkanki tłuszczowej świni (pADSC) oraz jak dostarczyć je do płynu wychwytującego i tkanki zwłok za pomocą technologii WJ i igieł do cystoskopii Williamsa (WN). Po wstrzyknięciu komórkowym ocenia się żywotność i elastyczność komórki za pomocą mikroskopii sił atomowych (AFM). Dzięki instrukcjom krok po kroku protokół zapewnia jasne i zwięzłe podejście do pozyskiwania wiarygodnych danych. W części poświęconej dyskusji przedstawiono i opisano główne zalety, ograniczenia i perspektywy na przyszłość tej techniki. Opisywane tutaj analizy potranslacyjne WJ, a także analizy potranslacyjne w następstwie zastępują standardowe wstrzykiwanie igłą i zapewniają solidne ramy dostarczania komórek do regeneracyjnego gojenia tkanki docelowej. W naszych ostatnich badaniach dostarczyliśmy dowodów na to, że WJ dostarczał komórki bardziej precyzyjnie i co najmniej z porównywalną żywotnością w porównaniu do iniekcji igłowych15,16.

<table><tbody><tr><td>Probówka wirówkowa 50 ml</td><td>Greiner BioOne</td><td>227261</td><td></td></tr><tr><td>1 mL BD Luer-LokTM Strzykawka</td><td>BD Plastik Inc</td><td>n.a.100</td><td></td></tr> <tr><td>&micro; m sito komórkowe</td><td>Greiner BioOne</td><td>542000</td><td></td></tr><tr><td>15 ml probówka wirówkowa</td><td>Greiner BioOne</td><td>188271</td><td></td></tr><tr><td>75 cm2 kolba do hodowli tkankowych</td><td>Corning Incorporated</td><td>353136</td><td></td></tr><tr><td>głowica AFM</td> <td>(CellHesion 200) Oprogramowanie do</td><td></td> przetwarzania JPK JPK00518 <td></td></tr><tr><td>AFM</td><td></td><td></td> Oprogramowanie Bruker JPK00518 <td></td></tr><tr><td>AFM</td><td>System</td> AFM <td>JPK00518</td><td></td>Bruker</tr><tr><td>Cell Hesion 200</td><td>Wspornik Bruker</td><td>JPK00518</td><td></td></tr><tr><td>All-In-One-Al</td><td>Czujniki budżetowe</td><td>AIO-10</td><td>końcówka A, tryb kontct, kształt: Belka Stała siły: 0,2 N / m (0,04 - 0,7 N / m) Częstotliwość rezonansowa: 15 kHz (10 - 20 kHz) Długość: 500 &mikro; m (490 - 510 &mikro; m) Szerokość: 30 & mikro; m (35 - 45 &mikro; m) Grubość: 2,7 i mikro; m (1,7 - 3,7 &mikro; m)</td></tr><tr><td>Amfoterycyna B roztwór</td><td>Sigma</td><td>A2942</td><td>250 &mikro; g/ml</td></tr><tr><td>Mikroskop sił atomowych (AFM)</td><td>CellHesion 200, JPK Instruments, Berlin, Niemcy</td><td>JPK00518</td><td></td></tr><tr><td>BD Microlance 3 18G</td><td>BD</td><td>304622</td><td></td></tr><tr><td>albumina surowicy bydlęcej</td><td>Gibco</td><td>A10008-01</td><td></td></tr><tr><td>Wspornik&</td><td>nbsp; All-In-One-AleTl, Czujniki budżetowe, Sofia, Bułgaria</td><td>AIO-TL-10</td><td>końcówka A, k &frac14; 0,2 N/m</td></tr><tr><td>jednorazowy hemocytometr C-chip</td><td>Wirówka NanoEnTek</td><td>631-1098</td><td></td></tr><tr><td>: Rotina 420R</td><td>Hettich Zentrifugen</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Collagenase, Typ I, proszek</td><td>Gibco</td><td>17100-017</td><td></td></tr><tr><td>Dulbecco' s Zmodyfikowany Orzeł" s Średni - niski poziom glukozy</td><td>Sigma</td><td>D5546</td><td></td></tr><tr><td>Jednorazowy skalpel z piór (nr 10)</td><td>Feather</td><td>02.001.30.010</td><td></td></tr><tr><td>płodowa surowica bydlęca (FBS)</td><td>Sigma</td><td>F7524</td><td></td></tr><tr><td>HEPES roztwór soli sodowej (1 M)</td><td>Sigma</td><td>H3662</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop kontrastowy z odwróconymi fazami (zintegrowany z AFM)</td><td>AxioObserver D1, Carl Zeiss Microscopy, Jena, Niemcy</td><td>L201306_ 03</td><td></td></tr><tr><td>torby laboratoryjne</td><td>Marka</td><td>759705</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 medium bez l-glutaminy</td><td>Merck</td><td>F1315</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz's L-15 bez L-glutaminy</td> <td>(Merck KGaA, Darmstadt, Niemcy)</td><td>F1315</td><td></td></tr><tr><td>L-glutamina</td><td>Lonza</td><td>BE 17-605C1</td><td>200</td></tr><tr><td>mM LIVE/DEADTM Zestaw</td> <td>do żywotności/cytotoksycznościZ tego zestawu zastosowano Invitrogen firmy Thermo Fisher Scientific</td><td>L3224</td><td>Calcein AM i EthD-1.</td></tr><tr><td>Oprogramowanie mikroskopu: Zen 2.6</td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop: AxioVertA.1</td> Cewnik nelatonowy <td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr><tr><td>żeński</td><td>Bicakcilar</td><td>19512051</td><td></td></tr><tr><td>Penicylina-Streptomycyna</td><td>Gibco</td><td>15140-122</td><td>10000 U/ml Penicylina 10000 &mikro; g/ml Streptomycyna</td></tr><tr><td>Podgrzewacz do szalek Petriego związany z AFM</td><td>Bruker</td><td>T-05-0117</td><td></td></tr><tr><td>Podgrzewacz do szalek Petriego związany z AFM</td><td>JPK Instruments AG, Berlin, Niemcy</td><td>T-05-0117</td><td></td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS)</td><td>Gibco</td><td>10010-015</td><td></td></tr><tr><td>Oprogramowanie statystyczne: SPSS Statistics 22</td><td>Sterylna</td> szalka Petriego IBM <td></td><td></td></tr><tr><td>- CellStar</td><td>Greiner BioOne</td><td>664160</td><td></td></tr><tr><td>Naczynia do hodowli tkankowych</td><td>TPP AG</td><td>TPP93040</td><td></td></tr><tr><td>Naczynia do hodowli tkankowych</td><td>TPP Techno Plastic Products AG, Trasadingen, Szwajcaria</td><td>TPP93040</td><td></td></tr><tr><td>Błękit trypanowy 0,4% 0,85% NaCl</td><td>Lonza</td><td>17-942E</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór trypsyny-EDTA</td><td>Sigma</td><td>T3924</td><td></td></tr><tr><td>Waterjet: urządzenie ERBEJET2</td><td>Erbe Elektromedizin GmbH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Williams Cystoskopowa igła iniekcyjna</td><td>Cook Medical</td><td>G14220</td><td>23G, 5.0 Fr, 35 cm</td></tr></tbody></table>

iniekcja komórek zrębu tkanki tłuszczowej pochodzącej z tkanki tłuszczowej świń za pomocą technologii strumienia wody

Injection of Porcine Adipose Tissue-Derived Stroma Cells via Waterjet Technology

Nietrzymanie moczu (UI) jest bardzo rozpowszechnionym schorzeniem charakteryzującym się niedoborem mięśnia zwieracza cewki moczowej. Gałęzie medycyny regeneracyjnej, w szczególności terapia komórkowa, to nowatorskie podejścia do poprawy i przywrócenia funkcji zwieracza cewki moczowej. Mimo że wstrzykiwanie aktywnych komórek funkcjonalnych jest rutynowo wykonywane w warunkach klinicznych za pomocą igły i strzykawki, metody te mają istotne wady i ograniczenia. W tym kontekście technologia bezigłowego strumienia wody (WJ) jest wykonalną i innowacyjną metodą, która może wstrzykiwać żywe komórki za pomocą cystoskopii pod kontrolą wzroku do zwieracza cewki moczowej. W niniejszym badaniu wykorzystaliśmy WJ do dostarczenia komórek zrębowych pochodzących z tkanki tłuszczowej świń (pADSC) do tkanki cewki moczowej zwłok, a następnie zbadaliśmy wpływ dostarczania WJ na wydajność i żywotność komórek. Oceniliśmy również cechy biomechaniczne (tj. elastyczność) za pomocą pomiarów mikroskopii sił atomowych (AFM). Wykazaliśmy, że pADSC dostarczane przez WJ miały znacznie obniżoną elastyczność komórkową. Rentowność była znacznie niższa w porównaniu z grupą kontrolną, ale nadal wynosi ponad 80%.

Po dostarczeniu komórek za pomocą obu metod stwierdzono, że żywotność komórek dostarczonych poprzez WN (97,2 ± 2%, n=10, p&lt;0,002) była wyższa w porównaniu do iniekcji przez WJ przy użyciu ustawień E60-10 (85,9 ± 0,16%, n=12) (Rycina 2). Wyniki oceny biomechanicznej wykazały, że: w przypadku iniekcji komórek WN w płynie przechwytującym nie stwierdzono istotnej różnicy w zakresie modułów sprężystości (EM; 0,992 kPa) w porównaniu do kontroli (1,176 kPa; Rycina 3A</strong...

Prezentujemy metodę wstrzykiwania komórek za pomocą technologii strumienia wody bez użycia igieł w połączeniu z kontynuacją badań po porodzie pod kątem żywotności komórek, proliferacji i pomiarów elastyczności.

Iniekcja komórek zrębu tkanki tłuszczowej pochodzącej z tkanki tłuszczowej świń za pomocą technologii strumienia wody

Urinary incontinence (UI) is a highly prevalent condition characterized by the deficiency of the urethral sphincter muscle. Regenerative medicine ...

Iniekcje strumieniem wody składników aktywnych, takich jak ciecze, nanocząsteczki, mikrocząsteczki, kapsułkowane leki, a nawet żywe komórki, mogą być stosowane znacznie bardziej precyzyjnie w porównaniu z iniekcjami igłowymi w różnych docelowych tkankach. Podejścia minimalnie inwazyjne wymagają precyzyjnej lokalizacji leku w określonych warstwach tkanki docelowej poprzez wstępny wybór ciśnienia iniekcji. Obecnie skupiamy się na terapii komórkowej nietrzymania moczu.Jednak technika ta została już rozszerzona na regenerację zakażonej tkanki mięśniowej po ciężkich zawałach serca. Obecnie technika ta może być stosowana tylko przez doświadczonych badaczy lub licencjonowanych lekarzy w badaniach przedklinicznych. Nie jest przeznaczony do stosowania w rutynowych procedurach laboratoryjnych, ponieważ został opracowany do przyszłych celów klinicznych.Na początek umieść cewkę moczową z pęcherzem łączącym wyciętą od dorosłej samicy świni landrace na gąbce, która naśladuje elastyczność dolnego dna miednicy. Następnie za pomocą pęcherza moczowego określ orientację cewki moczowej. Jest to możliwe dzięki lokalizacji moczowodu i trzech więzadeł, które mocują pęcherz moczowy w jamie brzusznej i mie

injection-porcine-adipose-tissue-derived-stroma-cells-via-waterjet

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Ludzkie okołonaczyniowe komórki macierzyste (PSCs) stanowią nową klasę komórek macierzystych do regeneracji tkanek szkieletowych, podobnie jak mezenchymalne komórki macierzyste (MSCs). PSCs można wyizolować za pomocą FACS (sortowania komórek aktywowanego fluorescencją) z tkanki tłuszczowej pobranej podczas standardowych procedur liposukcji, a następnie połączyć z rusztowaniem osteoindukcyjnym w celu uzyskania formowania kości in vivo.

Zastosowanie ludzkich peryvaskularnych komórek macierzystych w regeneracji kości

Niniejszy protokół opisuje izolację komórek zrębowych pochodzących z tkanki tłuszczowej z aspiratu tłuszczowego oraz stworzenie krytycznego ubytku w kalwaru o rozmiarze 4 mm w celu oceny regeneracji szkieletu.

Naprawa modelu krytycznego ubytku kalwarii z wykorzystaniem stromalnych komórek pochodzących z tkanki tłuszczowej pozyskanych z lipoaspiratu

W 2001 roku naukowcy z UCLA opisali izolację populacji dorosłych komórek macierzystych, określanych jako komórki macierzyste pochodzące z tkanki tłuszczowej lub ASC. W tym artykule przedstawiono izolację ASC z lipoaspiratów przy użyciu ręcznego, enzymatycznego protokołu trawienia z użyciem kolagenazy.

Ręczna izolacja komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej z ludzkich lipoaspiratów

Ten protokół opisuje izolację komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej świni (pADSC) z podskórnych tkanek tłuszczowych z badaniem multipotencji. Multipotencjalne pADSC są wykorzystywane do wyznaczania procesów różnicowania adipocytów i badania transdyferencjacji do wielu linii komórkowych mezenchymy mezodermalnej lub dalszych linii ektodermy i endodermy do badań regeneracyjnych.

Izolacja i różnicowanie komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej z podskórnych tkanek tłuszczowych świń

Biała tkanka tłuszczowa (WAT) ma krytyczne braki w swoich obecnych pierwotnych modelach hodowli, co utrudnia rozwój farmakologiczny i badania metaboliczne. W tym miejscu przedstawiamy protokół wytwarzania układu mikrofizjologicznego tkanki tłuszczowej poprzez umieszczanie WAT między arkuszami komórek zrębu. Ta konstrukcja zapewnia stabilną i adaptowalną platformę dla podstawowej kultury WAT.

Platforma mikrofizjologiczna dla ludzkiego tłuszczu: warstwowa biała tkanka tłuszczowa

Tutaj prezentujemy protokół wytwarzania frakcji zrębowej pochodzącej z tkanki tłuszczowej i jej zastosowanie do poprawy funkcji kolana poprzez regenerację tkanki chrzęstnej u pacjentów z chorobą zwyrodnieniową stawów.

Protokół kliniczny wytwarzania frakcji zrębowej naczyniowej pochodzącej z tkanki tłuszczowej w celu potencjalnej regeneracji chrząstki

Tutaj prezentujemy protokół uzyskiwania frakcji naczyniowej zrębu z tkanki tłuszczowej poprzez szereg procesów mechanicznych, które obejmują emulgację i wielokrotne wirowanie.

Mikronizacja mechaniczna lipoaspiratów w terapii regeneracyjnej

Mechanicznie izolowana frakcja naczyniowa zrębu (SVF) w połączeniu z hydrożelem fibrynowym oferuje łatwy i skuteczny nośnik dla żywotnych komórek zrębowych pochodzących z tkanki tłuszczowej dla różnych wskazań, w tym inżynierii tkankowej i/lub gojenia się ran. W tym miejscu przedstawiamy przygotowanie mechanicznego konstruktu hydrożelowego SVF (mSVF)-fibryna do badań translacyjnych i zastosowań klinicznych.

Połączenie mechanicznie izolowanej frakcji zrębu naczyniowego i hydrożelu fibrynowego: protokół przetwarzania

Tutaj prezentujemy protokół demonstrujący użycie hydrożelu jako trójwymiarowego (3D) szkieletu hodowli komórek do hodowli komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej (ADSC) i wprowadzający fotobiomodulację (PBM) w celu zwiększenia proliferacji ADSC w warunkach hodowli 3D.

Trójwymiarowa hodowla komórkowa komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej w hydrożelu z augmentacją fotobiomodulacyjną

Tutaj prezentujemy protokół, który może przekształcić autologiczną tkankę tłuszczową w różne substancje składowe tkanki tłuszczowej o różnych właściwościach i funkcjach fizykochemicznych.

Innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej do przekształcania tłuszczu w specjalistyczne składniki

Przedstawiamy tutaj standardową metodę efektywnej izolacji komórek macierzystych pochodzących z tłuszczu i adipocytów, charakteryzującą się skróceniem czasu przetwarzania o &gt;90%, wysoką żywotnością komórek oraz szeroką kompatybilnością.

Efektywna izolacja komórek macierzystych i adipocytów pochodzących z tłuszczu z tkanki tłuszczowej wieprzi

Poznaj technologię strumienia wody do precyzyjnej iniekcji komórek zrębu tkanki tłuszczowej w badaniach nad terapią komórkową nietrzymania moczu. Metoda minimalnie inwazyjna zapewnia wysoką żywotność komórek.

Iniekcja komórek zrębu tkanki tłuszczowej pochodzącej z tkanki tłuszczowej świń za pomocą technologii strumienia wody

Przeglądaj więcej filmów