Name: Drosophila Pasywne zachowanie unikające jako nowy paradygmat badania awersyjnego uczenia się awersyjnego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-10-15T15:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 20 s
Description: Poznaj prosty test behawioralny do badania uczenia się awersyjnego u Drosophila melanogaster. Ta metoda pozwala analizować mechanizmy pamięci oraz wpływ genetycznych i środowiskowych manipulacji na procesy poznawcze.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było częściowo wspierane przez NIH R15ES029673 (AKM).

1. Przygotowanie aparatu do pasywnego unikania
<ol>
	<li>Wywierć otwór o średnicy 4 mm prostopadły do powierzchni ścianki probówki do hodowli polipropylenu o pojemności 14 ml i w odległości 8 mm od dna probówki. 
	UWAGA: Aby uzyskać najlepsze wyniki, użyj wiertarki elektrycznej i wiertła 5/32.</li>
	<li>Za pomocą stalowego noża uniwersalnego odetnij górną część probówki do hodowli polipropylenu o pojemności 14 ml, aby utworzyć fragment dna probówki o długości 45 mm. Dolny fragment służy jako dolna komora.</li>
	<li>Odetnij końcówkę niebieskiej końcówki do pipet o pojemności 1 000 μl za pomocą żyletki o pojedynczej krawędzi, aby otwór był wystarczająco szeroki, aby mogła przejść jedna mucha. Odetnij zwężającą się część niebieskiej końcówki, aby utworzyć fragment o średnicy 12 mm. Włóż ten fragment mocno do 4 mm otworu w dolnej komorze. Służy on jako dok załadunkowy do przenoszenia much.</li>
	<li>Wytnij 15-milimetrowy kawałek przezroczystej rurki winylowej 5/8" ID (patrz tabela materiałów), aby utworzyć złącze. Włóż górną i dolną komorę do złącza z przeciwległych końców, aby bezpiecznie przymocować dolną komorę do górnej komory.</li>
	<li>Za pomocą 2-bolcowego regulowanego zacisku przymocuj zespół do pionowego stojaka. Ustaw zespół pionowo z rurką amortyzującą jako górną komorą.</li>
	<li>Podłącz przewody rurki uderzeniowej do stymulatora elektrycznego (patrz tabela materiałów), aby wywołać wstrząsy elektryczne. Czas trwania szkolenia wynosi 1 min. 
	UWAGA: Aby ułatwić obserwację, umieść kawałek białego papieru za rurką uderzeniową, aby służył jako białe tło urządzenia. Umieść lampę z miękką żarówką o mocy 75 W nad komorą amortyzatorów. Umieść lampę powiększającą z regulowanym ramieniem przed zestawem. Reprezentacja pasywnego aparatu unikania jest pokazana w Rysunek 1.</li>
</ol>
2. Przygotowanie much do procedury pasywnego unikania
<ol>
	<li>Unieruchomić 3-4 dniowe muchy D. melanogaster lub D. simulans za pomocą lodowatego bloku i przenieść je do indywidualnych fiolek z jedzeniem na 24 godziny przed eksperymentem (1 mucha na fiolkę) zgodnie z procedurą opisaną wcześniej19. 
	UWAGA: W opisanych tutaj eksperymentach porównano 3-4 dniowych chłopców i mężczyzn. samice much u D. melanogaster i D. simulans.</li>
	<li>Przed eksperymentami behawioralnymi zakoduj wszystkie fiolki. W tym celu przypisz każdej grupie literę, na przykład "A", "B", "C" itp., a każda z nich ma liczbę. Ujawnij ten kod dopiero po zarejestrowaniu i przeanalizowaniu wszystkich danych. Użyj co najmniej 20 much na genotyp lub zabieg, aby przeciwdziałać indywidualnym wariacjom. 
	UWAGA: Przeprowadzanie eksperymentów i analiz "na ślepo" pozwala wykluczyć błąd systematyczny w ocenie wydajności muchy i analizie danych.</li>
</ol>
3. Przeprowadzanie pierwszej próby
<ol>
	<li>Za pomocą aspiratora do pyska muchy (patrz Tabela Materiałów) opisanego wcześniej20, delikatnie przenieś muchę z pojedynczej fiolki do dolnej komory przez dok załadowczy. Delikatnie zassaj jedną muchę do aspiratora do ust, zasysając powietrze. Zdeponuj muchę, lekko do doku załadunkowego. 
	UWAGA: Unikaj stresowania zwierzęcia podczas łapania i załadunku.</li>
	<li>Natychmiast po załadowaniu muchy do dolnej komory uruchom 1-minutowy timer i stoper. 
	UWAGA: Stoper służy do pomiaru opóźnień i licznika tally do zliczania liczby wstrząsów.</li>
	<li>Naciśnij stoper, aby zarejestrować pierwsze opóźnienie, gdy mucha wejdzie do rurki amortyzującej, umieszczając wszystkie łapy na siatce. Włącz stymulator, aby spowodować porażenie prądem muchy. Parametry stymulacji to 120 woltów, czas trwania 1000 ms, 1 impuls/s (PPS), czas trwania pociągu 2000 ms.</li>
	<li>Dostarcz dodatkowe wstrząsy, jeśli mucha ponownie wejdzie do rurki amortyzującej. Zapisz liczbę otrzymanych wstrząsów podczas 1-minutowej próby za pomocą licznika zliczeń lub licznika opartego na Arduino (patrz Tabela materiałów). Jeśli korzystasz z licznika opartego na Arduino, wykonaj poniższe czynności. 
	UWAGA: Opcjonalne urządzenie oparte na Arduino AKM-007 (patrz Tabela materiałów) może być używane do pomiaru czasu, opóźnienia, liczby wstrząsów oraz częstotliwości i czasu trwania napadów pielęgnacyjnych dla każdego zwierzęcia poprzez naciśnięcie i zwolnienie odpowiednich przycisków na urządzeniu. Przyciski na urządzeniu są przypisane do pomiaru opóźnienia, administrowania i rejestrowania liczby wstrząsów oraz pomiaru częstotliwości i czasu trwania napadów pielęgnacyjnych.
	<ol>
		<li>Naciśnij przycisk Start w kroku 3.2 i naciśnij przycisk Shock w kroku 3.3.</li>
		<li>Aby zarejestrować czas trwania zabiegu pielęgnacji, naciśnij przycisk Pielęgnacja na początku zabiegu pielęgnacji na urządzeniu i zwolnij ten przycisk po zakończeniu zabiegu pielęgnacji. 
		UWAGA: Napady pielęgnacyjne były mierzone przez 1 minutę próby. Intensywna pielęgnacja może wskazywać na stres zwierząt21,22. Urządzenie oparte na Arduino zapisuje wszystkie dane w postaci pliku CSV na karcie pamięci.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Pod koniec 1-minutowej próby delikatnie przenieś muchę z powrotem do pojedynczej fiolki. Zapisz opóźnienie, liczbę otrzymanych wstrząsów i wszelkie zauważalne zmiany w zachowaniu.</li>
	<li>Wyczyść dolną i amortyzatorową komorę 70% etanolem, przetrzyj niestrzępiącą się chusteczką czyszczącą (patrz tabela materiałów) i osusz suszarką do włosów. Powtórz próbę z następną muchą.</li>
	<li>Po eksperymentach behawioralnych wyczyść dolną komorę wodą i bezwonnym detergentem. Wytrzyj dolną komorę i komorę amortyzatora 70% etanolem i wysusz na powietrzu przez noc.</li>
</ol>
4. Przeprowadzanie drugiej próby
<ol>
	<li>Wykonaj drugą próbę, powtarzając procedurę opisaną powyżej (krok 3) 24 godziny później. Przetestuj muchy w tej samej kolejności, co poprzedniego dnia.</li>
</ol>
5. Analiza wyników
<ol>
	<li>Oblicz średnie opóźnienie, średnią liczbę wstrząsów i czas trwania napadów pielęgnacyjnych dla próby 1 i próby 2 dla każdej eksperymentalnej grupy zwierząt. Wykonaj test t-studenta dla porównania dwóch grup lub ANOVA dla wielokrotnych porównań z analizami post-hoc przy użyciu testu Tukeya23.</li>
</ol>

<ol><li>Kandel, E. R., Dudai, Y., Mayford, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+molecular+and+systems+biology+of+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">The molecular and systems biology of memory.</a> Cell. 157 (1), 163-186 (2014).</li>
<li>McGuire, S. E., Deshazer, M., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thirty+years+of+olfactory+learning+and+memory+research+in+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Thirty years of olfactory learning and memory research in Drosophila melanogaster.</a> Progress in Neurobiology. 76 (5), 328-347 (2005).</li>
<li>Livingstone, M. S., Sziber, P. P., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Loss+of+calcium%2Fcalmodulin+responsiveness+in+adenylate+cyclase+of+rutabaga%2C+a+Drosophila+learning+mutant%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Loss of calcium/calmodulin responsiveness in adenylate cyclase of rutabaga, a Drosophila learning mutant.</a> Cell. 37 (1), 205-215 (1984).</li>
<li>Quinn, W. G., Sziber, P. P., Booker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Drosophila+memory+mutant+amnesiac%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">The Drosophila memory mutant amnesiac.</a> Nature. 277 (5693), 212-214 (1979).</li>
<li>Dudai, Y., Jan, Y. N., Byers, D., Quinn, W. G., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((dunce%2C+a+mutant+of+Drosophila+deficient+in+learning%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">dunce, a mutant of Drosophila deficient in learning.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 73 (5), 1684-1688 (1976).</li>
<li>Busto, G. U., Cervantes-Sandoval, I., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Olfactory+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Physiology%22%5BJournal%5D)">Olfactory learning in Drosophila.</a> Physiology. 25 (6), Bethesda, Md. 338-346 (2010).</li>
<li>Tully, T., Quinn, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Classical+conditioning+and+retention+in+normal+and+mutant+Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Comparative+Physiology.+A%3A+Sensory%2C+Neural%2C+and+Behavioral+Physiology%22%5BJournal%5D)">Classical conditioning and retention in normal and mutant Drosophila melanogaster.</a> Journal of Comparative Physiology. A: Sensory, Neural, and Behavioral Physiology. 157 (2), 263-277 (1985).</li>
<li>Wright, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evolution+of+the+techniques+used+in+studying+associative+olfactory+learning+and+memory+in+adult+Drosophila+in+vivo%3A+A+historical+and+technical+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Invertebrate+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Evolution of the techniques used in studying associative olfactory learning and memory in adult Drosophila in vivo: A historical and technical perspective.</a> Invertebrate Neuroscience. 14 (1), 1-11 (2014).</li>
<li>Vogt, K., Yarali, A., Tanimoto, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversing+stimulus+timing+in+visual+conditioning+leads+to+memories+with+opposite+valence+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Reversing stimulus timing in visual conditioning leads to memories with opposite valence in Drosophila.</a> PloS One. 10 (10), 0139797(2015).</li>
<li>Koemans, T. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+courtship+conditioning+as+a+measure+of+learning+and+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Drosophila courtship conditioning as a measure of learning and memory.</a> Journal of Visualized Experiments. (124), e55808(2017).</li>
<li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assaying+locomotor%2C+learning%2C+and+memory+deficits+in+Drosophila+models+of+neurodegeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila models of neurodegeneration.</a> Journal of Visualized Experiments. (49), e2504(2011).</li>
<li>Bozler, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systems+level+approach+to+temporal+expression+dynamics+in+Drosophila+reveals+clusters+of+long+term+memory+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Plos+Genetics%22%5BJournal%5D)">A systems level approach to temporal expression dynamics in Drosophila reveals clusters of long term memory genes.</a> Plos Genetics. 13 (10), 1007054(2017).</li>
<li>Atucha, E., Roozendaal, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inhibitory+avoidance+discrimination+task+to+investigate+accuracy+of+memory%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">The inhibitory avoidance discrimination task to investigate accuracy of memory.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 9, 60(2015).</li>
<li>Thiels, E., Hoffman, E. K., Gorin, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+reliable+behavioral+assay+for+the+assessment+of+sustained+photophobia+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">A reliable behavioral assay for the assessment of sustained photophobia in mice.</a> Current Eye Research. 33 (5), 483-491 (2008).</li>
<li>Detrait, E. R., Hanon, E., Dardenne, B., Lamberty, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+inhibitory+avoidance+test+optimized+for+discovery+of+cognitive+enhancers%5BTitle%5D)+AND+%22Behavior+Research+Methods%22%5BJournal%5D)">The inhibitory avoidance test optimized for discovery of cognitive enhancers.</a> Behavior Research Methods. 41 (3), 805-811 (2009).</li>
<li>Piper, M. D. W., Partridge, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drosophila+as+a+model+for+ageing%5BTitle%5D)+AND+%22Biochimica+et+Biophysica+Acta+-+Molecular+Basis+of+Disease%22%5BJournal%5D)">Drosophila as a model for ageing.</a> Biochimica et Biophysica Acta - Molecular Basis of Disease. 1864 (9), Pt A 2707-2717 (2018).</li>
<li>Chalmers, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multicomponent+screen+for+feeding+behaviour+and+nutritional+status+in+Drosophila+to+interrogate+mammalian+appetite-related+genes%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Metabolism%22%5BJournal%5D)">A multicomponent screen for feeding behaviour and nutritional status in Drosophila to interrogate mammalian appetite-related genes.</a> Molecular Metabolism. 43, 101127(2021).</li>
<li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+iterative+negative+geotaxis+%28RING%29%3A+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Gerontology%22%5BJournal%5D)">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Experimental Gerontology. 40 (5), 386-395 (2005).</li>
<li>Yang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simple+homemade+tools+to+handle+fruit+flies-Drosophila+melanogaster%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Simple homemade tools to handle fruit flies-Drosophila melanogaster.</a> Journal of Visualized Experiments. (149), e59613(2019).</li>
<li>Barradale, F., Sinha, K., Lebestky, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+Drosophila+grooming+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Quantification of Drosophila grooming behavior.</a> Journal of Visualized Experiments. (125), e55231(2017).</li>
<li>Denmark, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+chronic+social+defeat+stress+on+mouse+self-grooming+behavior+and+its+patterning%5BTitle%5D)+AND+%22Behavioural+Brain+Research%22%5BJournal%5D)">The effects of chronic social defeat stress on mouse self-grooming behavior and its patterning.</a> Behavioural Brain Research. 208 (2), 553-559 (2010).</li>
<li>Kalueff, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobiology+of+rodent+self-grooming+and+its+value+for+translational+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Neurobiology of rodent self-grooming and its value for translational neuroscience.</a> Nature Reviews: Neuroscience. 17 (1), 45-59 (2016).</li>
<li>Motulsky, H. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMotulsky%2C+H+%22Intuitive+biostatistics%3A+A+nonmathematical+guide+to+statistical+thinking.+Fourth+edition%22">Intuitive biostatistics: A nonmathematical guide to statistical thinking. Fourth edition</a>. , Oxford University Press. (2018).</li>
<li>Qiao, B., Li, C., Allen, V. W., Shirasu-Hiza, M., Syed, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+analysis+of+long-term+grooming+behavior+in+Drosophila+using+a+k-nearest+neighbors+classifier%5BTitle%5D)+AND+%22Elife%22%5BJournal%5D)">Automated analysis of long-term grooming behavior in Drosophila using a k-nearest neighbors classifier.</a> Elife. 7, 34497(2018).</li>
<li>Mu, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+limbic+circuitry+involved+in+emotional+stress-induced+grooming%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">A limbic circuitry involved in emotional stress-induced grooming.</a> Nature Communications. 11 (1), 2261(2020).</li>
<li>Song, C., Berridge, K. C., Kalueff, A. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stressing%27+rodent+self-grooming+for+neuroscience+research%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews%3A+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Stressing' rodent self-grooming for neuroscience research.</a> Nature Reviews: Neuroscience. 17 (9), 591(2016).</li>
<li>Wang, C., Chan, J. S., Ren, L., Yan, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+reduces+cognitive+and+motor+functions+across+the+lifespan%5BTitle%5D)+AND+%22Neural+Plasticity%22%5BJournal%5D)">Obesity reduces cognitive and motor functions across the lifespan.</a> Neural Plasticity. 2016, 2473081(2016).</li>
<li>Lewis, A. R., Singh, S., Youssef, F. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cafeteria-diet+induced+obesity+results+in+impaired+cognitive+functioning+in+a+rodent+model%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Cafeteria-diet induced obesity results in impaired cognitive functioning in a rodent model.</a> Heliyon. 5 (3), 01412(2019).</li>
<li>Yohn, S. E., Galbraith, J., Calipari, E. S., Conn, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shared+behavioral+and+neurocircuitry+disruptions+in+drug+addiction%2C+obesity%2C+and+binge+eating+disorder%3A+Focus+on+Group+I+mGluRs+in+the+mesolimbic+dopamine+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Chemical+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Shared behavioral and neurocircuitry disruptions in drug addiction, obesity, and binge eating disorder: Focus on Group I mGluRs in the mesolimbic dopamine pathway.</a> ACS Chemical Neuroscience. 10 (5), 2125-2143 (2019).</li>
<li>Lopez-Taboada, I., Gonzalez-Pardo, H., Conejo, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Western+Diet%3A+Implications+for+brain+function+and+behavior%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Psychololgy%22%5BJournal%5D)">Western Diet: Implications for brain function and behavior.</a> Frontiers in Psychololgy. 11, 564413(2020).</li>
<li>Murashov, A. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preference+and+detrimental+effects+of+high+fat%2C+sugar%2C+and+salt+diet+in+wild-caught+Drosophila+simulans+are+reversed+by+flight+exercise%5BTitle%5D)+AND+%22FASEB+Bioadvances%22%5BJournal%5D)">Preference and detrimental effects of high fat, sugar, and salt diet in wild-caught Drosophila simulans are reversed by flight exercise.</a> FASEB Bioadvances. 3 (1), 49-64 (2021).</li>
<li>Krypotos, A. M., Effting, M., Kindt, M., Beckers, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Avoidance+learning%3A+A+review+of+theoretical+models+and+recent+developments%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Behavioral+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Avoidance learning: A review of theoretical models and recent developments.</a> Frontiers in Behavioral Neuroscience. 9, 189(2015).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Encyclopedia+of+Neuroscience%22">Encyclopedia of Neuroscience</a>. Binder, M. D., Hirokawa, N., Windhorst, U. , Springer Berlin Heidelberg. 3093(2009).</li>
<li>Mery, F., Belay, A. T., So, A. K., Sokolowski, M. B., Kawecki, T. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+polymorphism+affecting+learning+and+memory+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Natural polymorphism affecting learning and memory in Drosophila.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (32), 13051-13055 (2007).</li>
<li>Tan, Y., Yu, D., Pletting, J., Davis, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gilgamesh+is+required+for+rutabaga-independent+olfactory+learning+in+Drosophila%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">Gilgamesh is required for rutabaga-independent olfactory learning in Drosophila.</a> Neuron. 67 (5), 810-820 (2010).</li>
<li>Ögren, S. O., Stiedl, O. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3a%C3%96gren%2C+SO+%22Encyclopedia+of+Psychopharmacology%22">Encyclopedia of Psychopharmacology</a>. Stolerman, I. P. , Springer Berlin Heidelberg. 960-967 (2010).</li>
</ol>

Autorzy deklarują brak konfliktu interesów.

Unikanie zagrażających bodźców jest kluczową cechą zachowań adaptacyjnych u różnych gatunków, od C. elegancji po człowieka32. Procedury uczenia się unikania, które zazwyczaj pociągają za sobą ucieczkę przed zdarzeniem awersyjnym, są powszechnie stosowanymi zadaniami behawioralnymi do badania procesów uczenia się i zapamiętywania u gryzoni laboratoryjnych13 od lat 1970-tych32. W procedurach aktywnego unikania po obojętnym bodźcu lub sygnale w...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/63163">Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning</a>. The Representative Results and Discussion&#160;sections were&#160;updated.
In the Representative Results, the legend for Figure 5 was updated from:
Figure 5: Comparison of passive avoidance and grooming behavior in D. simulans males and females. (A)&#160;Average latency (s) per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the latencies. (B) An average number of received shocks per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the number of received shocks. (C) The total duration of grooming bouts in trials 1-3. While there were no statistically significant differences between males and females, the female flies showed a considerable increase in grooming behavior during trials 2 and 3 compared to trial 1. Abbreviations: *- P&#60;0.05. One-way ANOVA with Tukey&#39;s multiple comparisons test.
to:
Figure 5: Comparison of passive avoidance and grooming behavior in D. simulans males and females. (A)&#160;Average latency (s) per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the latencies. (B) An average number of received shocks per trial. The graph shows no statistically significant differences between males and females in the number of received shocks. (C) The total duration of grooming bouts in trials 1-3. While there were no statistically significant differences between males and females, the female flies showed a considerable decrease in grooming behavior during trials 2 and 3 compared to trial 1. Abbreviations: *- P&#60;0.05. One-way ANOVA with Tukey&#39;s multiple comparisons test.
In the Discussion, the third paragraph&#160;was updated from:
The assay worked equally well in D. melanogaster and D. simulans male and female flies, demonstrating that the paradigm could be adapted to different D. species. The changes in fly behavior characterized by increased latencies and decreased number of shocks were statistically significant in the second trial and would strengthen with subsequent trials. Interestingly, if na&#239;ve flies were habituated to the apparatus without electric shock, they would enter the upper compartment a little faster on the second and the third trials. However, the decrease in latencies was not statistically significant (data not shown). No statistically significant differences were observed between sexes, although female flies had somewhat longer latencies and received slightly more shocks. This difference could be due to a combination of factors, including females&#39; failure to associate the shock with the upper compartment, a stronger geotaxis, or possibly because females are slightly larger and slower than males. The total duration of grooming bouts was significantly higher in the second and third trials in female flies, which draws a parallel between D. and rodent anxiety-like behaviors26.
to:
The assay worked equally well in D. melanogaster and D. simulans male and female flies, demonstrating that the paradigm could be adapted to different D. species. The changes in fly behavior characterized by increased latencies and decreased number of shocks were statistically significant in the second trial and would strengthen with subsequent trials. Interestingly, if na&#239;ve flies were habituated to the apparatus without electric shock, they would enter the upper compartment a little faster on the second and the third trials. However, the decrease in latencies was not statistically significant (data not shown). No statistically significant differences were observed between sexes, although female flies had somewhat longer latencies and received slightly more shocks. This difference could be due to a combination of factors, including females&#39; failure to associate the shock with the upper compartment, a stronger geotaxis, or possibly because females are slightly larger and slower than males. The total duration of grooming bouts was significantly lower&#160;in the second and third trials in female flies, which draws a parallel between D. and rodent anxiety-like behaviors26.

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/63163">Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning</a>. The Representative Results and Discussion&#160;sections were&#160;updated.

Erratum: Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

Uczenie się i pamięć to ewolucyjnie starożytny mechanizm adaptacji do środowiska, zachowany od Drosophila (D.) do human1. Muszka owocowa jest solidnym organizmem modelowym do badania podstawowych zasad uczenia się i pamięci, ponieważ oferuje szeroki zakres potężnych narzędzi genetycznych do analizowania wewnętrznych mechanizmów molekularnych2. Pionierskie genetyczne badania przesiewowe, które zidentyfikowały rutabaga<sup class="xref">3, amnesiac4 i dunce5 genów krytycznych dla uczenia się i pamięci2, wykorzystały warunkowanie węchowe, ponieważ muszki owocowe polegają na swoim wyostrzonym węchu, aby znaleźć pożywienie, potencjalnych partnerów i uniknąć drapieżników6.
Kondycjonowanie węchowe stało się popularnym paradygmatem do badania mechanizmu uczenia się i pamięci, dzięki wprowadzeniu węchowego labiryntu T-labiryntu przez Tully'ego i Quinna7,8. Następnie zaproponowano inne metody pomiaru różnych typów uczenia się i pamięci, w tym warunkowanie wizualne9, warunkowanie zalotów10, awersyjne badanie tłumienia fototaksji11 oraz warunkowanie ekspozycji na osy12. Jednak większość z tych testów ma złożoną konfigurację, która musi być zbudowana na zamówienie w warsztacie uniwersyteckim lub zakupiona za pośrednictwem dostawcy. Opisany tutaj paradygmat opiera się na prostym teście behawioralnym do badania awersyjnego uczenia się asocjacyjnego u much, które można łatwo złożyć za pomocą kilku dostępnych materiałów.
Opisany paradygmat jest równoznaczny z pasywnym (lub hamującym) zachowaniem unikającym u myszy laboratoryjnych i szczurów, w którym zwierzęta uczą się unikać przedziału, w którym wcześniej zostały porażenie prądem nożnym13. U muridów procedura opiera się na ich wrodzonym unikaniu jasnego światła i preferowaniu ciemniejszych obszarów14. Podczas pierwszej próby zwierzę umieszcza się w jasnym pomieszczeniu, skąd zwierzę szybko wychodzi, wchodząc do ciemnego pomieszczenia, w którym wywoływany jest wstrząs elektryczny stopy. Zazwyczaj pojedyncze badanie wystarcza do stworzenia solidnej pamięci długotrwałej, co skutkuje znacznie zwiększonym opóźnieniem 24 godziny później. Opóźnienie jest następnie używane jako wskaźnik zdolności zwierzęcia do zapamiętania związku między bodźcem awersyjnym a określonym środowiskiem15.
Ta praca opisuje analogiczną procedurę wykorzystującą D. jako system modelowy, który oferuje kilka zalet w porównaniu z modelami gryzoni, w tym opłacalność, większy rozmiar próbki, brak nadzoru regulacyjnego i dostęp do potężnych narzędzi genetycznych16,17. Procedura opiera się na negatywnym zachowaniu geotaksji, które przejawia się w dążeniu much do wspinania się na górę, gdy są umieszczone na pionowej powierzchni18. Konfiguracja składa się z dwóch pionowych komór. Podczas pierwszej próby muszkę owocową umieszcza się w dolnej komorze. Stamtąd zwykle wychodzi w ciągu 3-15 s, wchodząc do górnej komory, gdzie doznaje porażenia prądem. Podczas 1-minutowej próby niektóre muchy mogą od czasu do czasu ponownie dostać się do górnej komory, co powoduje dodatkowe porażenie prądem. W fazie testowania, 24 godziny później, opóźnienie jest znacznie zwiększone. Jednocześnie liczba wstrząsów zmniejszyła się w porównaniu z pierwszym dniem, co wskazuje, że muchy utworzyły awersyjną pamięć asocjacyjną dotyczącą górnego przedziału. Opóźnienie, liczba wstrząsów oraz czas trwania i częstotliwość napadów pielęgnacyjnych są następnie wykorzystywane do analizy zachowania zwierząt oraz zdolności do tworzenia i zapamiętywania związku między bodźcem awersyjnym a określonym środowiskiem. Reprezentatywne wyniki ujawniają, że ekspozycja na zachodnią dietę (WD) znacznie upośledza pasywne zachowanie unikające u samców much, co sugeruje, że WD głęboko wpływa na zachowanie i funkcje poznawcze muchy. I odwrotnie, ćwiczenia w locie złagodziły negatywny wpływ WD, poprawiając pasywne unikanie.

<table><tbody><tr><td>Dieta Bloomington Formulation</td><td>Nutri-Fly</td><td>&nbsp; 66-112</td><td>Dostępne w Genesee Scientific Inc., San Diego, CA</td></tr><tr><td>1000 &micro; L Niebieska końcówka</td><td>Fisher</td><td>NC9546243</td><td></td></tr><tr><td>17 x 100 mm 14 ml polipropylenowa rurka hodowlana</td><td>VWR&</td><td>nbsp; 60818-689</td><td></td></tr><tr><td>Moduł automatycznego sterowania oparty na Aduino</td><td></td><td>AKM-007</td><td>To urządzenie jest opcjonalne. Pełny opis, schematy, schemat połączeń i kod znajdują się na stronie ECU Digital Market - https://digitalmarket.ecu.edu/akmmodule</td></tr><tr><td>Dual-Display 2-Channel&nbsp; Cyfrowy zegar / timer</td><td>Digi-Sense</td><td>AO-94440-10</td><td>https://www.amazon.com/Cole-Parmer-AO-94440-10-Dual-Display-2-Channel-Jumbo-Digit/dp/B00PR0809G/ref=sr_1_5?dchild=1&keywords=Dual-Display+timer+jumbo&qid=1627660660&sr= 8-5#customerReviews</td></tr><tr><td>Elektroniczny licznik palców</td><td>N/A N</td><td>/A</td><td>https://www.amazon.com/gp/product/B01M8IRK6F/ref=ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8&psc=1</td></tr><tr><td>Fisherbrand Sparkleen 1 Detergent</td><td>Fisher Scientific</td><td>04-320-4</td><td></td></tr><tr><td>Aspirator do ust muchy</td><td>Przygotowany we własnym zakresie</td><td></td><td>zgodnie z opisem w odnośniku 19.</td></tr><tr><td>Stymulator trawy S88</td><td>NIE</td><td>DOTYCZY</td><td>Nie dotyczy Można go zastąpić dowolnym stymulatorem, który może zapewnić opisane parametry</td></tr><tr><td>Kim-wipes</td><td>Fisher Scientific</td><td>06-666</td><td>Kimberly-Clark Professional 34120</td></tr><tr><td>Metalowy blok do unieruchomienia much</td><td>Własny</td><td></td><td>blok aluminiowy 4 x 13 x 23,5 cm</td></tr><tr><td>Nutiva Certyfikowany przez USDA Organiczny, niemodyfikowany genetycznie, Czerwony olej palmowy</td><td>Nutiva</td><td>N/A</td><td>https://www.amazon.com/Nutiva-Certified-Cold-Filtered-Unrefined-Ecuadorian/dp/B00JJ1E83G/ref=sxts_rp_s1_0?cv_ct_cx=Nutiva+USDA+Certified+Organic%2C+non-GMO%2C+Red+Palm+Oil&dchild=1&keywords=Nutiva+USDA+Certified+Organic%2C+non-GMO%2C+Red+Palm+Oil&pd_rd_i=B00JJ1E83G&pd_ rd_r=f35e9d2f-afe4-44b6-afc2-1c9cd705be18& pd_rd_w= R3Zb4& pd_rd_wg=eUv1m& pf_rd_ p=c6BDE456-f877-4246-800f-44405f638777& pf _rd_r=M94N11RC7NH333EMJ66Y & psc=1& qid=1627661533& sr=1-1-f0029781-b79b-4b60-9cb0-eeda4dea34d6</td></tr><tr><td>Rurka amortyzująca</td><td>CelExplorer</td><td>TMA-201</td><td></td></tr><tr><td>https://www.celexplorer.com/product_detail.asp?id=217&MainType=110&SubType=8 Stoper</td><td>Accusplit</td><td></td><td>A601XLN https://www.amazon.com/gp/product/B0007ZGZYI/ref=ppx_yo_dt_b_search_asin_title?ie=UTF8&psc=1</td></tr><tr><td>Przezroczyste rurki winylowe (3/4" Średnica zewnętrzna, 5/8" ID)</td><td>Lowes</td><td></td><td>Dostępne w Lowes</td></tr></tbody></table>

drosophila pasywne zachowanie unikające jako nowy paradygmat badania awersyjnego uczenia się awersyjnego

Drosophila Passive Avoidance Behavior as a New Paradigm to Study Associative Aversive Learning

Ten protokół opisuje nowy paradygmat analizy awersyjnego uczenia się awersyjnego u dorosłych muszek (Drosophila melanogaster). Paradygmat jest analogiczny do pasywnego zachowania unikającego u gryzoni laboratoryjnych, w którym zwierzęta uczą się unikać komory, w której wcześniej zostały porażenie prądem. Test wykorzystuje ujemną geotaksję u much, która objawia się chęcią wspinania się na górę, gdy są one umieszczone na pionowej powierzchni. Konfiguracja składa się z pionowo zorientowanych górnych i dolnych komór. Podczas pierwszej próby mucha jest umieszczana w dolnej komorze, skąd zwykle wychodzi w ciągu 3-15 sekund, i wchodzi do górnej komory, gdzie zostaje porażenia prądem. Podczas drugiej próby, 24 godziny później, opóźnienie jest znacznie zwiększone. Jednocześnie liczba wstrząsów zmniejszyła się w porównaniu z pierwszym badaniem, co wskazuje, że muchy tworzyły długotrwałą pamięć o górnym przedziale. Zapisy opóźnień i liczby wstrząsów można było wykonać za pomocą licznika liczników i stopera lub za pomocą prostego urządzenia opartego na Arduino. Aby zilustrować, w jaki sposób można zastosować test, scharakteryzowano pasywne zachowanie unikające D. melanogaster i D. simulans samca i samicy. Porównanie opóźnień i liczby wstrząsów wykazało, że zarówno muchy D. melanogaster, jak i D. simulans skutecznie nauczyły się pasywnego unikania. Nie zaobserwowano różnic statystycznych między samcami i samicami much. Jednak samce były nieco szybsze podczas wchodzenia do górnego przedziału w pierwszej próbie, podczas gdy samice otrzymywały nieco większą liczbę wstrząsów w każdej próbie retencji. Zachodnia dieta (WD) znacznie upośledzała uczenie się i pamięć u samców much, podczas gdy ćwiczenia w locie równoważyły ten efekt. Podsumowując, pasywne zachowanie unikające u much oferuje prosty i powtarzalny test, który można wykorzystać do badania podstawowych mechanizmów uczenia się i pamięci.

Badanie unikania biernego przeprowadzono w D. melanogaster (Canton-S) oraz D. simulansW ramach eksperymentów porównano czasy utajenia oraz liczbę otrzymanych wstrząsów pomiędzy kolejnymi próbami. Początkowo doświadczenia przeprowadzono na samcach w wieku 3-4 dni. D. melanogaster muchy. Muchy utrzymywano na standardowej pożywce Bloomington Formulation w środowisku o kontrolowanej temperaturze i wilgotności przy 24 °C w cyklu światło-ciemność 12 h, przy wilgotności 70% i kontrolowanej gę...

Ta praca opisuje prosty paradygmat behawioralny, który pozwala na analizę awersyjnego uczenia się asocjacyjnego u dorosłych muszek owocowych. Metoda opiera się na tłumieniu wrodzonego negatywnego zachowania geotaksji ze względu na związek powstały między określonym kontekstem środowiskowym a porażeniem prądem.

Drosophila Pasywne zachowanie unikające jako nowy paradygmat badania awersyjnego uczenia się awersyjnego

This protocol describes a new paradigm for analyzing aversive associative learning in adult flies (Drosophila melanogaster). The paradigm is analogous to ...

Protokół ten opisuje prosty test behawioralny, który pozwala na badanie niekorzystnego uczenia się asocjacyjnego i konsolidacji pamięci u muszek, w tym wpływu interakcji genów ze środowiskiem. Przedstawiony tutaj test jest prostą, powtarzalną i opłacalną procedurą badania mechanizmów pamięci, którą można łatwo zmontować za pomocą kilku dostępnych materiałów. Test ten może dostarczyć informacji na temat podstawowych mechanizmów leżących u podstaw zaburzeń uczenia się i pamięci wynikających z różnych manipulacji genetycznych, farmakologicznych i dietetycznych.Tę procedurę zademonstrują Morgan Tedder i Steven Bradley, studenci studiów licencjackich z mojego laboratorium. Aby rozpocząć, wywierć czteromilimetrowy otwór prostopadle około czterech milimetrów od dna w 14-mililitrowej probówce do hodowli polipropylenu. Usuń górną część probówki hodowlanej, aby uzyskać 45-milimetrowy dolny fragment używany jako dolna komora.Odetnij górną część końcówki pipety o pojemności 1000 mikrolitrów, aby utworzyć fragment o średnicy 12 milimetrów. Włóż fragment do czteromilimetrowego otworu w probówce hodowlanej jako dok załadowczy do przenoszenia much. Wytnij 15-milimetrowy kawałek przezroczystej rurki winylowej i włóż dolną i górną komorę z przeciwległych końców do rurki.Przymocuj zespół pionowo za pomocą dwubolcowego regulowanego zacisku. Umieść górną komorę pionowo przymocowaną rurkami amortyzującymi. Połącz rurki uderzeniowe ze stymulatorem elektrycznym, aby wytworzyć wstrząsy elektryczne.Za pomocą lodowatego bloku unieruchom trzy- lub czterodniowe muchy i przenieś je do oddzielnych fiolek z jedzeniem na 24 godziny przed eksperymentem. Przypisać kod do wszystkich fiolek zgodnie z opisem w manuskrypcie tekstowym. Delikatnie zassaj jedną muchę do aspiratora do ust, zaciągając powietrze.Umieść muchę, lekko w dok załadunkowy i natychmiast uruchom jednominutowy minutnik i stoper. Włącz stymulator i dostarcz porażenie prądem, gdy mucha dostanie się do rurki szokowej. Naciśnij stoper, aby zarejestrować pierwsze opóźnienie.Jeśli mucha ponownie dostanie się do rurki amortyzującej, dostarcz dodatkowe wstrząsy. Korzystając z licznika lub licznika opartego na Arduino, zapisz liczbę wstrząsów podczas jednominutowej próby. Delikatnie przenieść muchę z powrotem do fiolki pod koniec jednominutowej próby.Rejestruj opóźnienia, liczbę otrzymanych wstrząsów i wszelkie zauważalne zmiany w zachowaniu. Używając 70% etanolu, wyczyść dolną i amortyzatorową komorę. Wytrzyj niestrzępiącą się chusteczką czyszczącą i wysusz za pomocą suszarki do włosów.Powtórz próbę z następną muchą. Po zakończeniu eksperymentu wyczyść dolną komorę wodą i bezwonnym detergentem. Używając 70% etanolu, wytrzyj dolną komorę i komorę amortyzatora i wysusz na powietrzu przez noc.Powtarzając powyższy proces po 24 godzinach, wykonaj drugą próbę. W podobnej kolejności przetestuj muchy. Po przeprowadzeniu testu pasywnego unikania u samców muszek Drosophila melanogaster, wyniki wykazały, że opóźnienie wzrasta, liczba wstrząsów maleje, co pokazuje, że muchy nauczyły się związku między górnym przedziałem a porażeniem prądem.Rozkład częstotliwości ujawnił, że większość much dostaje się do górnego przedziału i otrzymuje od jednego do trzech wstrząsów w pierwszej próbie. W czwartej próbie większość much nie wchodzi do górnego przedziału i nie otrzymuje żadnych wstrząsów. W kolejnych eksperymentach czas trwania próby został skrócony do jednej minuty, ponieważ rozkład częstotliwości dla opóźnień wyraźnie pokazał, że jeśli mucha nie wejdzie do górnego przedziału w ciągu 60 sekund w pierwszej próbie, zwykle nie wchodzi wcale.Eksperymenty z pasywnym unikaniem powtórzono na samcach i samicach much Drosophila simulans. Wyniki wykazały, że muchy były skuteczne w uczeniu się pasywnego unikania, co widać po zmianach w rozkładach częstotliwości opóźnień i wstrząsów u samców i samic much. Porównanie opóźnień i liczby wstrząsów między mężczyznami i kobietami nie wykazało istotnych statystycznie różnic.Jednak samice much otrzymywały nieco więcej wstrząsów w każdej próbie. Analiza napadów pielęgnacji w badaniach drugim i trzecim wykazała, że całkowity czas trwania pielęgnacji znacznie się skraca u samic much od próby pierwszej do trzeciej. Sugeruje to, że muchy doświadczają stresu behawioralnego, który jest równoległy do zachowań podobnych do lęku gryzoni.Porównanie wpływu zachodniej diety i ćwiczeń w locie na pasywne zachowania unikające pokazuje, że zachodnia dieta zmniejsza opóźnienie i zwiększa liczbę wstrząsów, co wskazuje, że zachodnia dieta upośledza awersyjne uczenie się asocjacyjne u much. I odwrotnie, ćwiczenia w locie złagodziły negatywny wpływ zachodniej diety. Próbując wykonać tę procedurę, pamiętaj, aby nie stresować much.Zestresowane muchy albo zbyt szybko wejdą do górnego komory, albo w ogóle nie wejdą. Wszystkie eksperymenty powinny być przeprowadzane w tych samych warunkach środowiskowych i o tej samej porze dnia. Technika ta daje naukowcom nowy, prosty test, który można wykorzystać do analizy wewnętrznych mechanizmów uczenia się i konsolidacji pamięci u much.

drosophila-passive-avoidance-behavior-as-new-paradigm-to-study

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Testy behawioralne służące do pomiaru funkcji lokomocyjnych, zdolności uczenia się i pamięci u Drosophila.

Ocena deficytów motorycznych, uczenia się i pamięci w modelach neurodegeneracji u Drosophila

Drosophila larwy są w stanie kojarzyć bodźce zapachowe z nagrodą smakową. W niniejszej pracy opisujemy prosty paradygmat behawioralny, który umożliwia analizę apetytywnego uczenia się asocjacyjnego w odpowiedzi na zapachy.

Apetytywne warunkowanie węchowe u larw Drosophila

Ten film opisuje klasyczny test warunkowania, który testuje uczenie się i pamięć u Drosophila, zwany warunkowaniem zalotów. Test opiera się na zmniejszeniu zalotów samców po doświadczeniu odrzucenia przez niereceptywną samicę przed kryciem. Przykładowy protokół przedstawia konfigurację procedury, która może być wykorzystana do oceny pamięci krótko- i długotrwałej.

Drosophila Warunkowanie zalotów: metoda testowania uczenia się i pamięci u much

Agresja jest wrodzonym zachowaniem, a wcześniejsze doświadczenie w walce wpływa na strategię walki i wynik późniejszych zawodów w muchach. Ten film opisuje test używany do badania agresywnego zachowania Drosophila. Przykładowy protokół obejmuje test wykonywany w konfiguracji, która eliminuje obsługę much, a tym samym zmniejsza stres u zwierząt, który w przeciwnym razie wpłynąłby na wydajność badanych.

Drosophila Test agresji: metoda badania plastyczności behawioralnej u much

Opisano metodę pomiaru pamięci asocjacyjnej dorosłego Drosophila. Test opiera się na zdolności muchy do kojarzenia prezentowanego zapachu z negatywnym wzmacniaczem (porażeniem prądem), a następnie przywoływania tych informacji w późniejszym czasie, co pozwala na pomiar pamięci.

Drosophila Uczenie się szoku węchowego u dorosłych

Tutaj prezentujemy protokół do ilościowego określenia unikania osób zestresowanych. Ten paradygmat jest potężny, ale przyjazny dla użytkownika i może być wykorzystany do oceny wpływu genów i środowiska na jeden rodzaj interakcji społecznych u Drosophila melanogaster.

Prosty test do ilościowego oznaczania unikania społecznego u Drosophila melanogaster

Podczas walk muszek owocowych, obserwowane wzorce zachowań, dynamika walki oraz związane z nią uczenie się i pamięć są pod wpływem warunków eksperymentalnych. Przedstawiony tutaj protokół opisuje nowatorską procedurę, która całkowicie eliminuje obchodzenie się z muchami podczas eksperymentów. Poprawia to dynamikę walki i pozwala na tworzenie silnych efektów "przegranych".

Nowe podejście, które eliminuje postępowanie w celu badania agresji i efektu "przegranego" u Drosophila melanogaster

Ten protokół opisuje test uczenia się i zapamiętywania u Drosophila zwany warunkowaniem zalotów. Ten klasyczny test opiera się na zmniejszeniu zachowań związanych z zalotami samców po odrzuceniu seksualnym przez niepodatną samicę z premfetem. Ta naturalna forma plastyczności behawioralnej może być wykorzystana do testowania uczenia się, pamięci krótkotrwałej i pamięci długotrwałej.

Drosophila Warunkowanie zalotów jako miara uczenia się i pamięci

Tutaj prezentujemy protokół, za pomocą którego można wizualizować wapń pre- i/lub postsynaptyczny w kontekście uczenia się i zapamiętywania Drosophila. Obrazowanie wapnia in vivo przy użyciu synaptycznie zlokalizowanych czujników wapnia jest połączone z klasycznym paradygmatem warunkowania węchowego, dzięki czemu można określić plastyczność synaptyczną leżącą u podstaw tego typu uczenia się asocjacyjnego.

Optyczne obrazowanie wapnia in vivo plastyczności synaptycznej indukowanej uczeniem się u Drosophila melanogaster

Zaburzenie ze spektrum autyzmu (ASD) wiąże się z zaburzeniami zachowań społecznych i komunikacyjnych oraz pojawieniem się powtarzających się zachowań. W celu zbadania wzajemnych relacji między genami ASD a deficytami behawioralnymi w modelu Drosophila, w tym artykule opisano pięć paradygmatów behawioralnych do oceny odstępów społecznych, agresji, zalotów, pielęgnacji i zachowań habituacyjnych.

Paradygmaty oceny behawioralnej w modelu zaburzenia ze spektrum autyzmu Drosophila

Istotną przeszkodą w badaniu aktywności komórkowej podczas procesów poznawczych, takich jak uczenie się i pamięć, jest stosowanie środków znieczulających do przygotowania obrazowania in vivo. Znieczulenie upośledza pamięć krótkotrwałą i funkcje poznawcze w wielu modelach, w tym u Drosophila. W pracy przedstawiono unikalną metodę przygotowania dorosłej Drosophila do obrazowania in vivo bez znieczulenia.

In vivo (in vivo) Obrazowanie aktywności neuronalnej u nieznieczulonych dorosłych much Drosophila

Poznaj prosty test behawioralny do badania uczenia się awersyjnego u Drosophila melanogaster. Ta metoda pozwala analizować mechanizmy pamięci oraz wpływ genetycznych i środowiskowych manipulacji na procesy poznawcze.

Drosophila Pasywne zachowanie unikające jako nowy paradygmat badania awersyjnego uczenia się awersyjnego

Przeglądaj więcej filmów