-1::1
Simple Hit Counter
Skip to content

Products

Solutions

×
×
Sign In

PL

EN - EnglishCN - 简体中文DE - DeutschES - EspañolKR - 한국어IT - ItalianoFR - FrançaisPT - Português do BrasilPL - PolskiHE - עִבְרִיתRU - РусскийJA - 日本語TR - TürkçeAR - العربية
Sign In Start Free Trial

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

Behavior
Biochemistry
Bioengineering
Biology
Cancer Research
Chemistry
Developmental Biology
View All
JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

Biological Techniques
Biology
Cancer Research
Immunology
Neuroscience
Microbiology
JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduate courses

Analytical Chemistry
Anatomy and Physiology
Biology
Calculus
Cell Biology
Chemistry
Civil Engineering
Electrical Engineering
View All
JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

Advanced Biology
Basic Biology
Chemistry
View All
JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

Biology
Chemistry

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

Accounting
Finance
Macroeconomics
Marketing
Microeconomics

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Authors

Teaching Faculty

Librarians

K12 Schools

Biopharma

Products

RESEARCH

JoVE Journal

Peer reviewed scientific video journal

JoVE Encyclopedia of Experiments

Video encyclopedia of advanced research methods

JoVE Visualize

Visualizing science through experiment videos

EDUCATION

JoVE Core

Video textbooks for undergraduates

JoVE Science Education

Visual demonstrations of key scientific experiments

JoVE Lab Manual

Videos of experiments for undergraduate lab courses

BUSINESS

JoVE Business

Video textbooks for business education

OTHERS

JoVE Quiz

Interactive video based quizzes for formative assessments

Solutions

Authors
Teaching Faculty
Librarians
K12 Schools
Biopharma

Language

pl_PL

EN

English

CN

简体中文

DE

Deutsch

ES

Español

KR

한국어

IT

Italiano

FR

Français

PT

Português do Brasil

PL

Polski

HE

עִבְרִית

RU

Русский

JA

日本語

TR

Türkçe

AR

العربية

    Menu

    JoVE Journal

    Behavior

    Biochemistry

    Bioengineering

    Biology

    Cancer Research

    Chemistry

    Developmental Biology

    Engineering

    Environment

    Genetics

    Immunology and Infection

    Medicine

    Neuroscience

    Menu

    JoVE Encyclopedia of Experiments

    Biological Techniques

    Biology

    Cancer Research

    Immunology

    Neuroscience

    Microbiology

    Menu

    JoVE Core

    Analytical Chemistry

    Anatomy and Physiology

    Biology

    Calculus

    Cell Biology

    Chemistry

    Civil Engineering

    Electrical Engineering

    Introduction to Psychology

    Mechanical Engineering

    Medical-Surgical Nursing

    View All

    Menu

    JoVE Science Education

    Advanced Biology

    Basic Biology

    Chemistry

    Clinical Skills

    Engineering

    Environmental Sciences

    Physics

    Psychology

    View All

    Menu

    JoVE Lab Manual

    Biology

    Chemistry

    Menu

    JoVE Business

    Accounting

    Finance

    Macroeconomics

    Marketing

    Microeconomics

Start Free Trial
Loading...
Home
JoVE Journal
Biology
Niezawodna metoda produkcji sferoid na dużą skalę do zastosowań związanych z przesiewaniem i anal...
Niezawodna metoda produkcji sferoid na dużą skalę do zastosowań związanych z przesiewaniem i anal...
JoVE Journal
Biology
A subscription to JoVE is required to view this content.  Sign in or start your free trial.
JoVE Journal Biology
A Robust Method for the Large-Scale Production of Spheroids for High-Content Screening and Analysis Applications

Niezawodna metoda produkcji sferoid na dużą skalę do zastosowań związanych z przesiewaniem i analizą o wysokiej zawartości

Full Text
3,973 Views
06:40 min
December 28, 2021

DOI: 10.3791/63436-v

Alannah S. Chalkley1, Margaritha M. Mysior1, Jeremy C. Simpson1

1Cell Screening Laboratory, UCD School of Biology and Environmental Science,University College Dublin

AI Banner

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This protocol outlines a technique for generating multicellular tumorous spheroids in a multi-well plate format, suitable for high-content screening. The spheroids can be analyzed both at the level of individual cells and collectively, allowing for detailed morphological assessments.

Key Study Components

Research Area

  • Cell biology
  • Microscopy
  • High-content screening

Background

  • Production of multicellular spheroids for automated analysis
  • Importance of size classification and morphological studies
  • Potential applications in drug delivery and cellular toxicity assessments

Methods Used

  • Cell seeding in ECM-coated wells
  • Use of confocal microscopy for imaging
  • Fluorescent staining for segmentation of spheroids and cells

Main Results

  • Demonstration of effective spheroid formation across different size classes
  • Quantification of spheroid morphology including volume, surface area, and number of nuclei
  • Capability for transcriptomic and proteomic analyses

Conclusions

  • This study provides a robust method for spheroid generation and analysis.
  • The findings contribute to advancing high-throughput analysis in cellular research.

Frequently Asked Questions

What is the purpose of generating spheroids?
Spheroids are used to model tumor microenvironments for various biochemical analyses.
What type of microscopy is employed in this protocol?
Confocal microscopy is used for high-resolution imaging of spheroids.
How are the morphological properties of spheroids assessed?
Morphological properties are assessed using segmentation based on fluorescent staining.
What applications can arise from this research?
This research can facilitate drug delivery studies and toxicity assessments in a multicellular context.
Is this method scalable for high-throughput screening?
Yes, the method is designed for scalable production in multi-well plates.
Can this method be used for RNA interference studies?
Yes, the produced spheroids can be utilized for RNA interference studies.
What are the critical parameters for successful spheroid formation?
Initial cell seeding density is critical to prevent fusion of spheroids.

Ten protokół szczegółowo opisuje metodę produkcji trzech różnych typów sferoidów w sposób, który czyni je odpowiednimi do badań przesiewowych i analiz na dużą skalę o wysokiej zawartości. Ponadto przedstawiono przykłady pokazujące, w jaki sposób można je analizować na poziomie sferoidalnym i poszczególnych komórek.

Protokół ten zapewnia metodę wytwarzania kilkuset wielokomórkowych sferoid nowotworowych w każdym dołku płytki wielodołkowej nadającej się do mikroskopii automatycznej. Wytworzone sferoidy można podzielić na różne klasy wielkości, a informacje subkomórkowe można wyodrębnić z każdej komórki. Technika ta wytwarza wystarczającą ilość surowicy, która może być wykorzystana w bezpośrednich badaniach przesiewowych i interferencyjnych RNA.

Rozcieńczyć materiał podstawowy ECM w zimnym podłożu wolnym od czerwonej surowicy fenolowej za pomocą wstępnie schłodzonych końcówek utrzymywanych w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza. Postawiłem 15 mikrolitrów materiału podstawowego ECM i roztworu pożywki na 96-dołkową płytkę obrazową. Wirować płytkę przez 20 minut w temperaturze 91 razy G w czterech stopniach Celsjusza.

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos

Sign In Start Free Trial

Explore More Videos

Produkcja sferoidów produkcja na dużą skalę badania przesiewowe o wysokiej zawartości sferoidy wielokomórkowe mikroskopia zautomatyzowana informacje subkomórkowe badania interferencji RNA materiał podstawowy ECM pożywka wolna od czerwieni fenolowej zawiesina komórek hemocytometr wirowanie inkubacja inkubator nawilżany płytka 96-dołkowa mikroskopia konfokalna barwienie fluorescencyjne analiza morfologii

Related Videos

Produkcja dużej liczby sferoid guza o kontrolowanej wielkości przy użyciu płytek mikrodołkowych

10:44

Produkcja dużej liczby sferoid guza o kontrolowanej wielkości przy użyciu płytek mikrodołkowych

Related Videos

18K Views

Zrobotyzowana produkcja sferoid komórek rakowych z wodnym dwufazowym systemem do testowania leków

09:58

Zrobotyzowana produkcja sferoid komórek rakowych z wodnym dwufazowym systemem do testowania leków

Related Videos

9.5K Views

Wykorzystanie badań przesiewowych genomiki funkcjonalnej do identyfikacji potencjalnie nowych celów leków w hodowlach sferoidalnych komórek nowotworowych

07:48

Wykorzystanie badań przesiewowych genomiki funkcjonalnej do identyfikacji potencjalnie nowych celów leków w hodowlach sferoidalnych komórek nowotworowych

Related Videos

11.9K Views

Wydajna i elastyczna metoda agregacji komórek do produkcji sferoidów 3D

07:46

Wydajna i elastyczna metoda agregacji komórek do produkcji sferoidów 3D

Related Videos

25.6K Views

Wielkoskalowa, zautomatyzowana produkcja sferoid komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej do biodruku 3D

07:40

Wielkoskalowa, zautomatyzowana produkcja sferoid komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej do biodruku 3D

Related Videos

3.1K Views

Generowanie sferoid tkankowych za pomocą wydrukowanego w 3D urządzenia przypominającego stempel

06:39

Generowanie sferoid tkankowych za pomocą wydrukowanego w 3D urządzenia przypominającego stempel

Related Videos

2.5K Views

Szybkie oczyszczanie optyczne do półwysokoprzepustowej analizy sferoidów nowotworowych

08:12

Szybkie oczyszczanie optyczne do półwysokoprzepustowej analizy sferoidów nowotworowych

Related Videos

3.3K Views

Ustalanie trójwymiarowych sferoid na podstawie próbek guza pochodzących od pacjentów i ocena ich wrażliwości na leki

10:38

Ustalanie trójwymiarowych sferoid na podstawie próbek guza pochodzących od pacjentów i ocena ich wrażliwości na leki

Related Videos

2.8K Views

Półautomatyczna analiza fenotypowa funkcjonalnych hodowli komórek sferoidalnych 3D

06:48

Półautomatyczna analiza fenotypowa funkcjonalnych hodowli komórek sferoidalnych 3D

Related Videos

99.3K Views

Generowanie sferoid 3D guza do badań oceny leków

10:33

Generowanie sferoid 3D guza do badań oceny leków

Related Videos

2.9K Views

JoVE logo
Contact Us Recommend to Library
Research
  • JoVE Journal
  • JoVE Encyclopedia of Experiments
  • JoVE Visualize
Business
  • JoVE Business
Education
  • JoVE Core
  • JoVE Science Education
  • JoVE Lab Manual
  • JoVE Quizzes
Solutions
  • Authors
  • Teaching Faculty
  • Librarians
  • K12 Schools
  • Biopharma
About JoVE
  • Overview
  • Leadership
Others
  • JoVE Newsletters
  • JoVE Help Center
  • Blogs
  • JoVE Newsroom
  • Site Maps
Contact Us Recommend to Library
JoVE logo

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. All rights reserved

Privacy Terms of Use Policies
WeChat QR code