Name: Wywiad: Prezentacja antygenu glikolipidowego przez CD1d i potencjał terapeutyczny aktywacji komórek NKT (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2007-12-31T19:27:00.000+00:00
Duration: 18 min 8 s
Description: Poznaj mechanizmy aktywacji komórek NKT przez antygeny glikolipidowe prezentowane przez CD1d. Ta metoda pozwala badać odpowiedzi immunologiczne w raku, autoimmunologii i infekcjach.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Khurana, A., Kronenberg, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+Method+for+Production+of+Recombinant+CD1d+Protein+in+Insect+Cells%5BTitle%5D)+AND+%2212%2F10%2F2007%29+Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A Method for Production of Recombinant CD1d Protein in Insect Cells.</a> 12/10/2007) Journal of Visualized Experiments. , Forthcoming.</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

wywiad: prezentacja antygenów glikolipidowych przez cd1d oraz potencjał terapeutyczny aktywacji komórek nkt

Interview: Glycolipid Antigen Presentation by CD1d and the Therapeutic Potential of NKT cell Activation

Komórki Natural Killer T (NKT) są kluczowymi czynnikami determinującymi odpowiedź immunologiczną na nowotwory, regulację chorób autoimmunizacyjnych, eliminację czynników zakaźnych oraz rozwój blaszek miażdżycowych. W tym wywiadzie Mitch Kronenberg omawia wysiłki swojego laboratorium mające na celu zrozumienie mechanizmu, dzięki któremu komórki NKT są aktywowane przez antygeny glikolipidowe. Centralnym elementem tych badań jest CD1d – cząsteczka prezentująca antygen, która prezentuje glikolipidy komórkom NKT. Wprowadzenie technologii tetramerów CD1d, opracowanej przez laboratorium Kronenberga, ma krytyczne znaczenie dla sortowania i identyfikacji subpopulacji specyficznych limfocytów T reaktywnych na glikolipidy. Mitch wyjaśnia, w jaki sposób agoniści glikolipidowi są wykorzystywani jako środki terapeutyczne do aktywacji komórek NKT u pacjentów z nowotworami oraz jak tetramery CD1d mogą być użyte do oceny stanu populacji komórek NKT in vivo po terapii agonistami glikolipidowymi. Omówiono również aktualny stan trwających badań klinicznych z wykorzystaniem tych agonistów, a także przewidywania Mitcha dotyczące obszarów w dziedzinie immunologii, które zyskają na znaczeniu w najbliższej przyszłości.

Komórki Natural Killer T (NKT) są kluczowymi czynnikami determinującymi odpowiedź immunologiczną na nowotwory, regulację autoimmunizacji, eliminację infekcji oraz rozwój blaszek miażdżycowych. W tym wywiadzie Mitch Kronenberg omawia wysiłki swojego laboratorium mające na celu zrozumienie mechanizmu, poprzez który komórki NKT są aktywowane przez antygeny glikolipidowe.

Wywiad: Prezentacja antygenów glikolipidowych przez CD1d oraz potencjał terapeutyczny aktywacji komórek NKT

Komórki Natural Killer T (NKT) są kluczowymi determinantami odpowiedzi immunologicznej na nowotwory, regulacji chorób autoimmunologicznych oraz eliminacji infekcji...

Witajcie, nazywam się Mitchell Cronenberg i reprezentuję La Jolla Institute for Allergy and Immunology. Pełnię funkcję prezesa i dyrektora naukowego, ale prowadzę również bardzo aktywną pracownię badawczą. Oczywiście będziemy rozmawiać o jednej z naszych technologii, mianowicie o tetramerach CD 1D. Większość prac w moim laboratorium dotyczy limfocytów T reaktywnych wobec CD 1D.Komórki te są wyjątkowe, ponieważ rozpoznają glikolipidy, a nie peptydy. Inna część mojego laboratorium zajmuje się zupełnie innym tematem – błon śluzowym układem odpornościowym i jego regulacją. Cząsteczki CD1 są cząsteczkami prezentującymi antygen, co oznacza, że wiążą one antygeny lub fragmenty białek bądź inne cząsteczki i prezentują je w celu rozpoznania przez limfocyty T.W rzeczywistości istnieją dwa różne rodzaje cząsteczek prezentujących antygen. Występują takie, które wiążą lub prezentują peptydy, oraz takie, które wiążą lipidy i glikolipidy. Cząsteczki CD1 wiążą lipidy i glikolipidy.Jest to ich funkcja i prezentują one te lipidy oraz glikolipidy limfocytom T. Istnieją w rzeczywistości cztery różne rodzaje cząsteczek CD1: CD1A, B, C i D. W szczególności skupiamy się na CD1D, która jest prawdopodobnie

interview-glycolipid-antigen-presentation-cd1d-therapeutic-potential

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Wywiad: Prezentacja antygenu glikolipidowego przez CD1d i potencjał terapeutyczny aktywacji komórek NKT

Metoda przygotowania komórek owadzie i zakażania ich bakulowirusem w celu produkcji rekombinowanego białka mCD1d oraz generowania tetramerów mCD1d.

Metoda produkcji rekombinowanego białka mCD1d w komórkach owadzych.

W niniejszej pracy opisujemy metodę aktywacji i ekspansji ludzkich komórek NKT z populacji zmieszanych limfocytów T przy użyciu sztucznych komórek prezentujących antygen (aAPC). Wykorzystanie aAPC opartych na CD1d zapewnia zestandaryzowaną metodę generowania wysokiej liczby funkcjonalnych komórek NKT.

Aktywacja i ekspansja komórek Natural Killer T (NKT) za pośrednictwem sztucznych komórek prezentujących antygen (aAPC)

Odrębne podzbiory komórek dendrytycznych istnieją jako rzadkie populacje w narządach limfoidalnych, dlatego są trudne do wyizolowania w wystarczającej liczbie i czystości do eksperymentów immunologicznych. W tym miejscu opisujemy metodę o wysokiej skuteczności i wysokiej wydajności do izolacji wszystkich obecnie znanych głównych podzbiorów komórek dendrytycznych śledziony myszy.

Wydajna i wysokowydajna metoda izolacji podzbiorów komórek dendrytycznych myszy

Prosta i niezawodna metoda jest tutaj opisana do analizy zestawu funkcji komórek NK, takich jak degranulacja, produkcja cytokin i chemokiny w różnych podzbiorach komórek NK.

Test oparty na cytometrii przepływowej do monitorowania funkcji komórek NK

Unikanie eliminacji za pośrednictwem komórek NK przez komórki rakowe jest ważne dla inicjacji i progresji raka. Tutaj przedstawiamy dwa protokoły nieoparte na radioaktywności do oceny cytotoksyczności komórek NK w stosunku do komórek nowotworowych wątroby. Dodatkowo przedstawiono trzeci protokół do analizy migracji komórek NK.

Pomiar cytotoksyczności i migracji komórek NK w kontekście komórek nowotworowych wątroby

Protokół do badania zdarzeń wywołanych przez FcγRIIIa przez przeciwciała terapeutyczne w ludzkich komórkach NK jest opisany tutaj. Ta platforma sztucznej stymulacji umożliwia badanie dalszych funkcji efektorowych, takich jak degranulacja, produkcja chemokin/cytokin i szlaki sygnałowe, w których pośredniczą części FcγRIIIa i Fc przeciwciał zaangażowanych w wiązanie.

Ocena zdarzeń związanych z ludzkimi komórkami NK wywołanych zaangażowaniem FcγRIIIa w obecności przeciwciał terapeutycznych

Prezentujemy dwa różne protokoły barwienia do wykrywania ligandów NKG2D (NKG2DL) w próbkach ludzkiej pierwotnej ostrej białaczki szpikowej (AML). Pierwsze podejście opiera się na białku fuzyjnym, zdolnym do rozpoznania wszystkich znanych i potencjalnie jeszcze nieznanych ligandów, podczas gdy drugi protokół opiera się na dodaniu wielu przeciwciał anty-NKG2DL.

Dwa podejścia cytometrii przepływowej do wykrywania powierzchni liganda NKG2D w celu odróżnienia komórek macierzystych od subpopulacji masowych w ostrej białaczce szpikowej

Opisujemy szybki i solidny protokół wzbogacania niezmiennych komórek T natural killer (iNKT) ze śledziony myszy i rozszerzania ich in vitro do odpowiedniej liczby dla badań in vitro i in vivo.

Oczyszczanie i namnażanie mysich niezmiennych limfocytów T NK do badań in vitro i in vivo

Protokół ten opisuje przeprogramowanie in vivo mysich komórek rakowych na komórki dendrytyczne typu 1 w mikrośrodowisku guza poprzez wymuszoną ekspresję czynników transkrypcyjnych PU.1, IRF8 i BATF3.

Wykonalne przeprogramowanie in vivo komórek nowotworowych na konwencjonalne komórki dendrytyczne typu 1

Ten protokół zapewnia zstandaryzowany in vitro przepływ pracy dla spójnego pomiaru naturalnej, chimerycznej receptora antygenowego–pośredniczonej i zależnej od przeciwciał cytotoksyczności ludzkich naturalnych komórek zwanych zbójcami przy użyciu żywego obrazu komórkowego i cytometrii przepływowej.

Kwantyfikacja cytotoksyczności komórek NK potencjowanej przez chimeryczne receptory antygenowe i przeciwciała terapeutyczne z wykorzystaniem obrazowania żywych komórek i cytometrii przepływowej

Poznaj mechanizmy aktywacji komórek NKT przez antygeny glikolipidowe prezentowane przez CD1d. Ta metoda pozwala badać odpowiedzi immunologiczne w raku, autoimmunologii i infekcjach.

Wywiad: Prezentacja antygenów glikolipidowych przez CD1d oraz potencjał terapeutyczny aktywacji komórek NKT

Przeglądaj więcej filmów