Procedura badania nawrotów heroiny wywołanych stresem Poszukiwanie abstynencji nałożonej karą

Opisana jest procedura, która wykazuje silny ostry nawrót do heroiny spowodowany brakiem jedzenia po nałożonej karze abstynencji. Model abstynencji narzuconej karą został z powodzeniem wdrożony przy użyciu harmonogramu łańcucha poszukiwania i zażywania do samodzielnego podawania heroiny. Testy na obecność heroiny są następnie wykonywane po 24 godzinach stresu związanego z deprywacją pokarmową.

Jest to pierwszy przypadek, w którym nawrót do heroiny wywołany stresem występuje po narzuconej karze abstynencji. Metody te mogą pomóc nam zrozumieć mechanizm neuronalny leżący u podstaw nawrotów wywołanych stresem u ludzi po dobrowolnej abstynencji. Stosując abstynencję w postaci deprywacji jedzenia i kar narzucanych abstynencji, coraz bardziej naśladujemy kondycję ludzką i nadajemy ekologiczną wartość zwierzęcym modelom nawrotu.

Zacznij od ustawienia komór kondycjonowania instrumentalnego zgodnie z opisem w manuskrypcie. Po powrocie do zdrowia po operacji należy przyzwyczaić szczura w komorze treningowej na 24 godziny przed rozpoczęciem protokołu bez mocowania szczura do metalowej sprężyny. Umieść szczura trzymanego w komorach operacyjnych przez cały czas trwania eksperymentu.

Następnie przymocuj złącze 5up do rurki Tygon i metalowej sprężyny. Rozpocznij sesję treningową na początku ciemnej fazy odwróconego cyklu światła. Do samodzielnego podawania heroiny dźwignia poboru powinna być dostępna w stałym stosunku jeden lub FR.

Zaprogramuj każdą próbę tak, aby rozpoczynała się od włożenia dźwigni zabierania i włączenia światła w domu. Gdy szczur naciśnie dźwignię take jeden raz, cofnij dźwignię take, włącz lampkę cue nad dźwignią i włącz sygnał dźwiękowy na 20-sekundowy okres przekroczenia limitu czasu. Wyłącz światło w domu i zezwól na podanie 0,13 mililitra naparu heroiny w dawce 0,1 miligrama na kilogram.

Następnie zaprogramuj 30-sekundowy interwał międzypróbny, w którym nie są wyświetlane żadne sygnały, światło w domu jest wyłączane, a dźwignia jest cofana. Na następną próbę włóż dźwignię take i włącz światło w domu. W przypadku samodzielnego administrowania z łańcuchem wyszukiwania w ramach FR jeden, zaprogramuj system szkolenia operacyjnego tak, aby wkładał tylko dźwignię wyszukiwania i włączał światło w domu, aby sygnalizować rozpoczęcie sesji z dźwignią pobierania w stanie wsuniętym.

Gdy szczur naciśnie jeden raz dźwignię wyszukiwania, program cofa dźwignię wyszukiwania i wkłada dźwignię pobierania. Jedno naciśnięcie dźwigni take cofa dźwignię take i inicjuje procedurę włączenia lampki cue oraz 30-sekundowego interwału między próbami, jak pokazano wcześniej. Po przerwie między próbami zaprogramuj system szkolenia operacyjnego tak, aby włożył dźwignię wyszukiwania i włączył światło w domu, aby zasygnalizować początek następnej próby.

Następnie zaprogramuj wszystkie kroki do samodzielnego administrowania za pomocą łańcucha wyszukiwania pod stałym współczynnikiem jeden, jak pokazano wcześniej, wprowadzając zmienny interwał pięciu przez trzy dni jako nowy harmonogram wzmacniania dźwigni wyszukiwania. Skonfiguruj oprogramowanie tak, aby pierwsze naciśnięcie dźwigni wyszukiwania powodowało aktywację pięciu harmonogramów o zmiennym interwale czasowym. Zezwól oprogramowaniu na losowy wybór czasu interwału z listy 0,1, pięciu i 10 sekund, co daje średni interwał pięciosekundowy.

Po upływie wybranego interwału pierwsze naciśnięcie dźwigni wyszukiwania powoduje cofnięcie dźwigni wyszukiwania i wysunięcie dźwigni zabierania. Po wykonaniu kroków dla dźwigni take i po zakończeniu próby, trenuj szczura przez pięć dni zgodnie ze zmiennym harmonogramem interwału 30 dla linku wyszukiwania. Aby to zrobić, pozwól oprogramowaniu losowo wybrać czas z listy 15, 30 i 45 sekund przez średnio 30 sekund.

Następnie trenuj szczury przez trzy dni w zmiennych odstępach czasu 60, co pozwala oprogramowaniu losowo wybrać czas z listy 45, 60 i 75 sekund. W przypadku abstynencji nałożonej karą należy przeprowadzać sesje karne przez osiem dni pod regularnym nadzorem, aby zagwarantować, że szczury nie wykazują oznak nienormalnego bólu lub żadnych problemów zdrowotnych. Rozpocznij sesje karne od włożenia dźwigni wyszukiwania i włączenia światła w domu.

Zaprogramuj system szkolenia operacyjnego tak, aby po zakończeniu linku wyszukiwania w zmiennym interwale 60, dźwignia wyszukiwania cofała się, światło w domu było wyłączane, a szczur był poddawany łagodnemu wstrząsowi stopy na 30% ukończonych linków wyszukiwania zamiast wkładania dźwigni pobierania. Dźwignia take rozciąga się na pozostałe 70% zakończonych linków wyszukiwania, tak jak w przypadku regularnej próby samodzielnego podawania. Po zaprogramowaniu siedmiominutowego interwału międzypróbnego ustaw intensywność wstrząsu stopy na 0,2 miliampera i zwiększaj o 0,1 miliampera na dzień kary, aż do 1,0 miliampera.

Gdy szczur naciśnie dźwignię pobierania, powtórz ustalony stosunek o jeden krok, aby cofnąć dźwignię, podać wlew heroiny i przedstawić wskazówki, po których następuje siedmiominutowa przerwa między próbami. Po ostatnim dniu nałożonej karą abstynencji należy wyjąć z komór pojemniki na żywność dla szczurów, które przechodzą test nawrotu wywołany deprywacją pokarmową, i zachować pojemniki na żywność dla grupy nasyconej. Zapewnij nieograniczony dostęp do wody w obu grupach i czuwaj nad zdrowiem zwierząt.

Po 24 godzinach pozbawienia pokarmu należy przystąpić do trzygodzinnego testu na poszukiwanie heroiny wywołanego deprywacją pokarmową w zmiennym schemacie 60 interwałów z siedmiominutową interwencją bez podawania wstrząsu lub wlewów heroiny. Po sesji zwróć pojemniki na żywność szczurom pozbawionym pokarmu. Następnego dnia wyjmij pojemniki na żywność z komór szczurów, które były nasycone podczas pierwszego testu nawrotu.

Pozwól szczurom, które wcześniej były pozbawione pożywienia, nieograniczony dostęp do pożywienia przed i w trakcie badania. Po 24-godzinnym pozbawieniu jedzenia wykonaj trzygodzinny test na obecność heroiny, jak pokazano wcześniej. W badaniu samce szczurów wykazały wzrost liczby naciśnięć dźwigni wyszukiwania wraz ze wzrostem harmonogramu wzmacniania.

W ciągu dni treningowych zaobserwowano wiarygodną, stałą liczbę wlewów heroiny. Podczas kary szczury zmniejszyły liczbę naciśnięć dźwigni i infuzji wraz ze wzrostem intensywności wstrząsu stopy w ciągu ośmiu dni kary. W teście poszukiwania heroiny stan deprywacji pokarmowej znacznie zwiększył poszukiwanie heroiny po nałożonej karze abstynencji i nie zaobserwowano statystycznie istotnego wpływu na czas ani na poszukiwanie narkotyków w czasie w różnych warunkach żywienia. Ważne jest, aby poświęcić czas na szkolenie zwierząt w zakresie uczenia się podstawowego łańcucha poszukiwania i zażywania w ramach FR jeden.

Bez tego kroku zwierzęta nie będą w stanie posunąć się naprzód w eksperymentach. Po wdrożeniu modelu możemy teraz zaprojektować eksperymenty, które przyjrzą się neurobiologii nawrotów wywołanych stresem po dobrowolnej abstynencji.