Name: Nieinwazyjne obrazowanie PET/MR w ortotopowym mysim modelu raka wątrobowokomórkowego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-08-31T13:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 47 s
Description: Poznaj nieinwazyjne obrazowanie PET/MR w ortotopowym mysim modelu raka wątrobowokomórkowego. Ta metoda umożliwia monitorowanie hipoksji nowotworowej in vivo przy użyciu [18F]FMISO i [18F]FDG.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Dziękujemy za wsparcie Funduszu Powierniczego Hong Kong Anticancer Trust Fund, Hong Kong Research Grants Council Collaborative Research Fund (CRF C7018-14E) dla eksperymentów z obrazowaniem małych zwierząt. Dziękujemy również za wsparcie Centrum Obrazowania Molekularnego i Cyklotronu Medycznego (MIMCC) na Uniwersytecie w Hongkongu za udostępnienie [18F]FMISO i [18F]FDG.

<ol><li>Sung, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+cancer+statistics+2020%3A+GLOBOCAN+estimates+of+incidence+and+mortality+worldwide+for+36+cancers+in+185+countries%5BTitle%5D)+AND+%22CA%3A+A+Cancer+Journal+for+Clinicians%22%5BJournal%5D)">Global cancer statistics 2020: GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries.</a> CA: A Cancer Journal for Clinicians. 71 (3), 209-249 (2021).</li>
<li>Chen, C., Lou, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+inducible+factors+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Oncotarget%22%5BJournal%5D)">Hypoxia inducible factors in hepatocellular carcinoma.</a> Oncotarget. 8 (28), 46691-46703 (2017).</li>
<li>Lu, R. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Positron-emission+tomography+for+hepatocellular+carcinoma%3A+Current+status+and+future+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Positron-emission tomography for hepatocellular carcinoma: Current status and future prospects.</a> World Journal of Gastroenterology. 25 (32), 4682-4695 (2019).</li>
<li>Larsson, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adding+11C-acetate+to+18F-FDG+at+PET+examination+has+an+incremental+value+in+the+diagnosis+of+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Radionuclide+Therapy%22%5BJournal%5D)">Adding 11C-acetate to 18F-FDG at PET examination has an incremental value in the diagnosis of hepatocellular carcinoma.</a> Molecular Imaging and Radionuclide Therapy. 21 (1), 6-12 (2012).</li>
<li>Huo, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Kinetic+analysis+of+dynamic+11C-acetate+PET%2FCT+imaging+as+a+potential+method+for+differentiation+of+hepatocellular+carcinoma+and+benign+liver+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22Theranostics%22%5BJournal%5D)">Kinetic analysis of dynamic 11C-acetate PET/CT imaging as a potential method for differentiation of hepatocellular carcinoma and benign liver lesions.</a> Theranostics. 5 (4), 371-377 (2015).</li>
<li>Lopci, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PET+radiopharmaceuticals+for+imaging+of+tumor+hypoxia%3A+A+review+of+the+evidence%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">PET radiopharmaceuticals for imaging of tumor hypoxia: A review of the evidence.</a> American Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 4 (4), 365-384 (2014).</li>
<li>Mao, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+through+which+hypoxia-induced+caveolin-1+drives+tumorigenesis+and+metastasis+in+hepatocellular+carcinoma%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Mechanisms through which hypoxia-induced caveolin-1 drives tumorigenesis and metastasis in hepatocellular carcinoma.</a> Cancer Research. 76 (24), 7242-7253 (2016).</li>
<li>Kung-Chun Chiu, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia+regulates+the+mitochondrial+activity+of+hepatocellular+carcinoma+cells+through+HIF%2FHEY1%2FPINK1+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Death+%26+Disease%22%5BJournal%5D)">Hypoxia regulates the mitochondrial activity of hepatocellular carcinoma cells through HIF/HEY1/PINK1 pathway.</a> Cell Death & Disease. 10 (12), 934(2019).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+cell+clones+with+different+metastatic+potential+from+the+metastatic+hepatocellular+carcinoma+cell+line+MHCC97%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">Establishment of cell clones with different metastatic potential from the metastatic hepatocellular carcinoma cell line MHCC97.</a> World Journal of Gastroenterology. 7 (5), 630-636 (2001).</li>
<li>Faustino-Rocha, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Estimation+of+rat+mammary+tumor+volume+using+caliper+and+ultrasonography+measurements%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animal%22%5BJournal%5D)">Estimation of rat mammary tumor volume using caliper and ultrasonography measurements.</a> Lab Animal. 42 (6), 217-224 (2013).</li>
<li>Liu, Q., Tan, K. V., Chang, H. C., Khong, P. L., Hui, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualization+and+quantification+of+brown+and+beige+adipose+tissues+in+mice+using+%5B18F%5D+FDG+micro-PET%2FMR+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%3A+JoVE%22%5BJournal%5D)">Visualization and quantification of brown and beige adipose tissues in mice using [18F] FDG micro-PET/MR imaging.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (173), e62460(2021).</li>
<li>Lin, W. -H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-activated+cytotoxic+agent+tirapazamine+enhances+hepatic+artery+ligation-induced+killing+of+liver+tumor+in+HBx+transgenic+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-activated cytotoxic agent tirapazamine enhances hepatic artery ligation-induced killing of liver tumor in HBx transgenic mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 113 (42), 11937-11942 (2016).</li>
<li>Wong, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CRAF+methylation+by+PRMT6+regulates+aerobic+glycolysis-driven+hepatocarcinogenesis+via+ERK-dependent+PKM2+nuclear+relocalization+and+activation%5BTitle%5D)+AND+%22Hepatology%22%5BJournal%5D)">CRAF methylation by PRMT6 regulates aerobic glycolysis-driven hepatocarcinogenesis via ERK-dependent PKM2 nuclear relocalization and activation.</a> Hepatology. 71 (4), 1279-1296 (2020).</li>
<li>Yang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+cisplatin-loaded+hydrogels+for+trans-portal+vein+chemoembolization+in+an+orthotopic+liver+cancer+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Delivery%22%5BJournal%5D)">Development of cisplatin-loaded hydrogels for trans-portal vein chemoembolization in an orthotopic liver cancer mouse model.</a> Drug Delivery. 28 (1), 520-529 (2021).</li>
<li>Shi, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+evaluation+of+five+nasopharyngeal+carcinoma+animal+models+on+the+microPET%2FMR+platform%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Nuclear+Medicine+and+Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Longitudinal evaluation of five nasopharyngeal carcinoma animal models on the microPET/MR platform.</a> European Journal of Nuclear Medicine and Molecular Imaging. 49 (5), 1497-1507 (2021).</li>
<li>Kilian, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Imaging+of+hypoxia+in+small+animals+with+F+fluoromisonidasole%5BTitle%5D)+AND+%22Nukleonika%22%5BJournal%5D)">Imaging of hypoxia in small animals with F fluoromisonidasole.</a> Nukleonika. 61 (2), 219-223 (2016).</li>
<li>Kawamura, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+optimal+post-injection+timing+of+hypoxic+imaging+with+18F-Fluoromisonidazole-PET%2FCT%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging+and+Biology%22%5BJournal%5D)">Evaluation of optimal post-injection timing of hypoxic imaging with 18F-Fluoromisonidazole-PET/CT.</a> Molecular Imaging and Biology. 23 (4), 597-603 (2021).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

W tym badaniu opisaliśmy procedury wykonywania HAL na ortotopowych ksenoprzeszczepach HCC wątroby przy użyciu guzów podskórnych, wraz z metodami nieinwazyjnego monitorowania niedotlenienia guza w ortotopowych ksenoprzeszczepach przy użyciu [18F] FMISO i [18F] FDG PET/MR. Interesujemy się obrazowaniem metabolicznym różnych modeli nowotworów i chorób w celu wczesnej diagnozy i oceny odpowiedzi na leczenie 11,13,14,15.<sup class="xre...

Rak wątrobowokomórkowy (HCC) jest szóstym najczęściej diagnozowanym nowotworem i trzecią najczęstszą przyczyną zgonów z powodu raka na świecie, z ponad 900 000 nowych przypadków i 800 000 zgonów w 2020 roku1. Głównym czynnikiem ryzyka jest marskość wątroby, która występuje w wyniku infekcji wirusowych (wirusy zapalenia wątroby typu B i C), nadużywania alkoholu, cukrzycy i niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby2. Leczenie HCC jest dość złożone i dostępnych jest kilka opcji leczenia, w tym resekcja chirurgiczna, ablacja termiczna lub chemiczna, przeszczep, chemoembolizacja przeztętnicza, radioterapia i chemioterapia, w zależności od stopnia zaawansowania choroby2,3. HCC jest nowotworem opornym na chemioterapię, z nawrotem choroby u nawet 70% pacjentów po terapii z zamiarem wyleczenia2.
Pomimo wysokiego stopnia niejednorodności guza, HCC wiąże się z dwoma powszechnymi wynikami: (i) HCC jest bardzo niedotlenione, oraz (ii) niedotlenienie guza wiąże się z większą agresywnością guza i niepowodzeniem leczenia. Niekontrolowana proliferacja komórek HCC powoduje wysokie tempo zużycia tlenu, które poprzedza unaczynienie, tworząc w ten sposób niedotlenione mikrośrodowisko. Niski poziom tlenu w obrębie guza wyzwala następnie szereg reakcji biologicznych, które wpływają na agresywność guza i odpowiedź na leczenie. Czynniki indukowane hipoksją (HIF) są często uznawane za podstawowe regulatory transkrypcji w odpowiedzi na niedotlenienie2,3. W związku z tym zdolność do wykrywania niedotlenienia jest kluczowa dla wizualizacji tkanek nowotworowych i identyfikacji miejsc niedostępnych, które wymagają inwazyjnych zabiegów. Pomaga również lepiej zrozumieć zmiany molekularne, które prowadzą do agresywności guza i poprawić wyniki leczenia pacjentów.
Obrazowanie molekularne za pomocą pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) jest powszechnie stosowane w diagnostyce i ocenie stopnia zaawansowania wielu nowotworów, w tym HCC. W szczególności łączne zastosowanie dwuznacznikowego obrazowania PET z udziałem [18F]fluorodeoksyglukozy ([18F]FDG) i [11C] octanu może znacznie zwiększyć ogólną czułość w diagnostyce HCC4,5. Z drugiej strony obrazowanie hipoksji można uzyskać za pomocą powszechnie stosowanego markera hipoksji [18F]Fluoromisonidazol ([18F]FMISO). W praktyce klinicznej nieinwazyjna ocena niedotlenienia jest ważna dla rozróżnienia różnych typów nowotworów i regionów do planowania radioterapii6.
Obrazowanie przedkliniczne stało się niezastąpionym narzędziem do nieinwazyjnej i długotrwałej oceny modeli mysich dla różnych chorób. Solidny i wysoce powtarzalny model HCC stanowi ważną platformę dla badań przedklinicznych i translacyjnych nad patofizjologią HCC u ludzi oraz oceny nowych terapii. Wraz z obrazowaniem PET, zachowania in vivo mogą zostać wyjaśnione, aby dostarczyć ważnych informacji na poziomie molekularnym dla dowolnego punktu czasowego. W tym miejscu opisujemy protokół wytwarzania ortotopowych ksenoprzeszczepów HCC do podwiązania tętnic wątrobowych (HAL) i analizy ich metabolizmu guza in vivo przy użyciu [18F] FMISO i [18F] FDG PET/MR. Włączenie HAL tworzy odpowiedni model transgenicznych lub chemicznie indukowanych ksenoprzeszczepów myszy HCC do badania niedotlenienia guza in vivo, ponieważ HAL może skutecznie blokować dopływ krwi tętniczej w celu wywołania niedotlenienia wewnątrznowotworowego7,8. Ponadto, w przeciwieństwie do barwienia immunohistochemicznego ex vivo przy użyciu pimonidazolu, zmiany w metabolizmie guza w wyniku niedotlenienia można łatwo zobrazować i dokładnie określić ilościowo nieinwazyjnie za pomocą obrazowania PET, umożliwiając podłużną ocenę odpowiedzi na leczenie lub ocenę pojawienia się oporności3,7,8. Przedstawiona tutaj metoda pozwala na stworzenie solidnego modelu hipoksyjnego HCC wraz z nieinwazyjnym monitorowaniem niedotlenienia guza za pomocą obrazowania PET/MR w celu zbadania biologii HCC in vivo.

<table><tbody><tr><td>0,9% sterylna sól fizjologiczna</td><td>BBraun</td><td>N/A</td><td>0,9% chlorek sodu wlew dożylny, 500 ml</td></tr><tr><td>10 # Ostrze skalpela</td><td>RWD Life Science Co., ltd</td><td>S31010-01</td><td>Narzędzie do chirurgii zwierząt</td></tr><tr><td>10% roztwór jodu powidonu</td><td>Banitore</td><td>6.425.678</td><td>Do dezynfekcji</td></tr><tr><td>igła 25G ze strzykawką 1 ml</td><td>BD PrecisionGlide</td><td>N/A</td><td>Strzykawka 1 ml z igłą 25G do wstrzykiwań zawiesin komórkowych</td></tr><tr><td>Strzykawka 5 ml</td><td>Terumo</td><td>SS05L</td><td>Strzykawka 5 ml Luer Lock</td></tr><tr><td>70% etanolu</td><td>Merck</td><td>1.07017</td><td>Do dezynfekcji</td></tr><tr><td>Automatyczny licznik komórek</td><td>Invitrogen</td><td>AMQAF2000</td><td>Do automatycznego liczenia komórek</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td><td>HealthDirect</td><td>N/A</td><td>Wstrzyknięcie podskórne (0,05-0,2 mg/kg/12 godzin) dla przeciwbólowe po zabiegu chirurgicznym</td></tr><tr><td>Naczynie do hodowli komórkowych (średnica 60 mm)</td><td>Thermo Scientific</td><td>150462</td><td>Do przetwarzania tkanek nowotworowych</td></tr><tr><td>Wirówka</td><td>Sigma</td><td>3-16KL, rotor o stałym kącie nachylenia 12311</td><td>Do zbierania zawiesin komórkowych</td></tr><tr><td>Wirówka Rurka stożkowa</td><td>Eppendorf</td><td>EP0030122151</td><td>Do zbierania zawiesin komórkowych</td></tr><tr><td>Pożywki hodowlane (Dulbecco' s zmodyfikowany Orzeł" s średnie)</td><td>Gibco</td><td>10566024</td><td>wysoka glukoza, GlutaMAX&trade; Suplement</td></tr><tr><td>Suwmiarka cyfrowa</td><td>RS Pro</td><td>841-2518</td><td>Do podskórnego pomiaru wielkości guza</td></tr><tr><td>Inkubator CO2 inkubator</td><td>Techcomp Limited</td><td>NU5841</td><td>Do hodowli komórkowych</td></tr><tr><td>Kalibrator dawki</td><td>Biodex</td><td>&nbsp; Nie dotyczy</td><td>Atomlab 500</td></tr><tr><td>DPBS (Dulbecco' s sól fizjologiczna buforowana fosforanami)</td><td>Gibco</td><td>14287072</td><td>Do płukania komórek i iniekcji</td></tr><tr><td>Smar do oczu</td><td>Alcon Duratears</td><td>&nbsp; Nie dotyczy</td><td>Sterylna maść nawilżająca do oczu, 3,5 g</td></tr><tr><td>Surowica bydlęca płodu (FBS)</td><td>Gibco</td><td>A4766801</td><td>Stosowany do szerokiego zakresu typów komórek, szczególnie wrażliwych linii komórkowych</td></tr><tr><td>Kleszcze (zakrzywione, cienkie i proste,)</td> <td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>F12012-10 & F12011-13</td><td>Narzędzie do chirurgii zwierząt</td></tr><tr><td>Poduszka grzewcza</td><td>ALA Scientific Instruments</td><td>N/A</td><td>Poduszka grzewcza dla myszy podczas operacji</td></tr><tr><td>Strzykawka insulinowa</td><td>Terumo</td><td>10ME2913</td><td>1 mL strzykawka insulinowa z igłą do wstrzykiwań radioznacznikowych</td></tr><tr><td>Oprogramowanie InterView</td><td>Fusion Mediso Wersja 3.03</td><td>Oprogramowanie do przetwarzania końcowego i analizy obrazu</td><td></td></tr><tr><td>Mikroskop odwrócony</td><td>Yu Lung Scientific Co., Ltd</td><td>BM-209G</td><td>Do wizualizacji morfologii komórek</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Chanelle Pharma</td><td>&nbsp; N/A</td><td>Iso-Vet, wziewny środek znieczulający, 250 ml</td></tr><tr><td>Ketamine</td><td>Alfasan International B.V.</td><td>HK-37715</td><td>Ketamina 10% roztwór do wstrzykiwań, 10 ml&nbsp;</td></tr><tr><td>Tlen medyczny</td><td>Linde HKO</td><td>101-HR</td><td>sprężony gaz, czystość 99,5%</td></tr><tr><td>nanoScan Skaner PET/MR</td><td>Mediso</td><td>&nbsp; Nie dotyczy</td><td>3 Tesla MR</td></tr><tr><td>Uchwyt igły</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>F31026-12</td><td>Narzędzie do chirurgii zwierząt</td></tr><tr><td>Oprogramowanie Nucline nanoScan</td><td>Mediso</td><td>Wersja 3.0</td><td>Oprogramowanie operacyjne skanera</td></tr><tr><td>Szew nylonowy (6/0 i 5/0)</td> <td>Healthy Medical Company Ltd</td><td>000524 & 000526</td><td>Narzędzie do chirurgii zwierząt</td></tr><tr><td>Penicylina - Streptomycyna</td><td>Gibco</td><td>15140122</td><td>Pożywki hodowlane o końcowym stężeniu 50 do 100 j.m./ml penicyliny i 50 do 100 &mikro; g/ml streptomycyny.</td></tr><tr><td>Pentabarbital</td><td>AlfaMedic</td><td>13003</td><td>Wstrzyknięcie dootrzewnowe (330 mg / kg) w celu wywołania ustania oddychania myszy</td></tr><tr><td>Ostre nożyczki</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>S14014-10</td><td>Narzędzie do chirurgii zwierząt</td></tr><tr><td>Nożyczki sprężynowe</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>S11005-09</td><td>Narzędzie do chirurgii zwierząt</td></tr><tr><td>Trypan Blue Solution, 0,4%</td> <td>Gibco</td><td>15250061</td><td>Do liczenia komórek</td></tr><tr><td>Kwas trypsynowo-etylenodiaminotetraoctowy (EDTA, 0,25%), czerwień fenolowa.</td><td>Gibco</td><td>25200072</td><td>Do trawienia komórkowego</td></tr><tr><td>Ksylazyna</td><td>Alfasan International B.V.</td><td>HK-56179</td><td>Ksylazyna 2% roztwór do wstrzykiwań, 30 ml</td></tr></tbody></table>

nieinwazyjne obrazowanie pet/mr w ortotopowym mysim modelu raka wątrobowokomórkowego

Non-Invasive PET/MR Imaging in an Orthotopic Mouse Model of Hepatocellular Carcinoma

Przedkliniczne modele eksperymentalne raka wątrobowokomórkowego (HCC), które opisują chorobę człowieka, stanowią ważne narzędzie do badania nowotworzenia i oceny nowych podejść terapeutycznych. Nieinwazyjne obrazowanie całego ciała za pomocą pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) zapewnia krytyczny wgląd w charakterystykę in vivo tkanek na poziomie molekularnym w czasie rzeczywistym. Przedstawiamy tutaj protokół tworzenia ortotopowego ksenoprzeszczepu HCC z podwiązaniem tętnic wątrobowych (HAL) i bez niego w celu wywołania niedotlenienia guza oraz oceny ich metabolizmu guza in vivo za pomocą obrazowania [18F]Fluoromisonidazol ([18F]FMISO) i [18F]fluorodeoksyglukozy ([18F]fdg) PET/rezonansu magnetycznego (MR). Niedotlenienie guza można było łatwo uwidocznić za pomocą markera hipoksji [18F] FMISO i stwierdzono, że wychwyt [18F] FMISO był wyższy u myszy HCC, które przeszły HAL niż w grupie bez HAL, podczas gdy [18F] FDG nie mógł odróżnić niedotlenienia guza między dwiema grupami. Guzy HAL wykazywały również wyższy poziom ekspresji czynnika indukowanego hipoksją (HIF)-1α w odpowiedzi na niedotlenienie. Kwantyfikacja guzów HAL wykazała 2,3-krotny wzrost wychwytu FMISO [18F] w oparciu o podejście wychwytu wartości standaryzowanej (SUV).

Aby uzyskać odpowiedni blok nowotworowy do kolejnej implantacji ortotopowej, w pierwszej kolejności wygenerowano stabilne klony poprzez podskórny wtrysk 200 μL zawiesiny komórkowej w DPBS (zawierającej komórki MHCC97L) w dolny bok myszy nago (Rysunek 1A). Monitorowano wzrost guza i gdy jego objętość osiągnęła 800-1000 mm3 (około 4 tygodnie po wstrzyknięciu), myszy uśmiercono, a otrzymany blok nowotworowy pocięto na fragmenty o wielkości około 1 mm3 do późniejszej implan...

Tutaj prezentujemy protokół tworzenia ortotopowych ksenoprzeszczepów raka wątrobowokomórkowego z podwiązaniem tętnicy wątrobowej i bez niej oraz wykonywania nieinwazyjnego obrazowania hipoksji guza za pomocą pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) przy użyciu [18F]Fluoromisonidazolu ([18F]FMISO) i [18F]Fluorodeoksyglukozy ([18F]FDG).

Nieinwazyjne obrazowanie PET/MR w ortotopowym mysim modelu raka wątrobowokomórkowego

Preclinical experimental models of hepatocellular carcinoma (HCC) that recapitulate human disease represent an important tool to study tumorigenesis and ...

Nasze metody tworzą wiarygodny model niedotlenionego raka wątrobowokomórkowego do nieinwazyjnego obrazowania niedotlenienia guza w celu zbadania biologii HCC in vivo, co może lepiej podsumować rozwój raka u ludzi. Nasz niezawodny model HCC wraz z wysoce wydajną metodą obrazowania służy jako ważna platforma do badań translacyjnych nad patofizjologią HCC u ludzi. Monitorowanie niedotlenienia guza w czasie rzeczywistym zapewnia wgląd w zmiany molekularne prowadzące do agresywności guza, umożliwiając określenie obszarów niedotlenienia i przewidywanie odpowiedzi na leczenie.Chociaż chirurgia wewnątrzbrzuszna może być trudna technicznie, odpowiednie planowanie i opieka nad zwierzętami poprawią ogólny wskaźnik powodzenia operacji i dobrostan małych zwierząt. Na początek wysterylizuj obszar grzbietowy znieczulonej myszy w wieku od 6 do 8 tygodni po lewej lub prawej stronie dolnej strony za pomocą 70% etanolu. Następnie za pomocą kleszczyków unieść skórę i delikatnie wprowadzić igłę do wstrzykiwań pod spód.Aby uniknąć przypadkowego wycieku zawiesiny komórek we wstrzykniętych komórkach podczas wyjmowania igły, należy przesunąć igłę o 4 do 5 milimetrów od miejsca nakłucia wzdłuż płaszczyzny p

non-invasive-petmr-imaging-an-orthotopic-mouse-model-hepatocellular

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Badania nad rakiem

Aby zbadać wzrost guza oraz mikrośrodowisko nowotworowe in vivo, zastosowaliśmy syngeniczny i ortotopowy model raka jajnika u immunokompetentnych myszy. Przetransdukowaliśmy linię komórkową nowotworu mysiego (MOV1) białkiem fluorescencyjnym Katushka (MOV1KAT), a w niniejszej pracy przedstawiamy sposób jej ortotopowej implantacji do jajnika oraz obrazowanie in vivo.

Ortotopowy model surowiczego raka jajnika u immunokompetentnych myszy do obrazowania guzów in vivo i monitorowania odpowiedzi immunologicznych guza

Ten film demonstruje technikę wykorzystującą radioimmunokoniugat do obrazowania in vivo guza na modelu mysim. Po wstrzyknięciu radioimmunokoniugatu przeciwciała koniugatu wiążą się ze specyficznym antygenem błonowym na komórkach nowotworowych. Radioznacznik koniugatu emituje pozytony, które oddziałują z sąsiednimi elektronami w celu wytworzenia energii, która jest wykrywana przez skaner pozytonowej tomografii emisyjnej (PET) w celu stworzenia obrazu guza.

Technika obrazowania PET in vivo do wykrywania guzów w modelu mysim przy użyciu przeciwciał znakowanych radioaktywnie

Mysi model przerzutów do mózgu raka piersi jest tworzony za pomocą obrazowania ultradźwiękowego we wstrzyknięciu dosercowym komórek MDA-MB231/Br-GFP. Rozwój wieloogniskowych przerzutów wewnątrzczaszkowych monitorowano podłużnie za pomocą rezonansu magnetycznego 9,4 T o wysokiej rozdzielczości.

Iniekcja dosercowa pod kontrolą obrazowania ultrasonograficznego w celu opracowania mysiego modelu przerzutów raka piersi do mózgu, a następnie podłużnego rezonansu magnetycznego

Celem tego protokołu jest zastosowanie dynamicznego rezonansu magnetycznego wzmocnionego kontrastem (DCE-MRI) dla ortotopowych ksenoprzeszczepów guza trzustki u myszy. DCE-MRI jest nieinwazyjną metodą analizy mikrokrążenia w tkance docelowej i przydatną do oceny odpowiedzi naczyniowej w guzie po nowej terapii.

Obrazowanie rezonansu magnetycznego z kontrastem dynamicznym ortotopowego modelu myszy z rakiem trzustki

Przerzutowe rozprzestrzenianie się raka jest główną przyczyną zgonów związanych z rakiem. Przedstawiamy szczegółowy opis naszej metodologii chirurgii przeżycia w celu ustanowienia "podobnego do pacjenta" ortotopowego syngenicznego modelu myszy do badania mechanizmów przerzutów w guzach narządów litych.

"Podobny do pacjenta" ortotopowy syngeniczny mysi model przerzutów raka wątrobowokomórkowego

Rak prostaty jest drugą najczęstszą przyczyną zgonów związanych z rakiem w Stanach Zjednoczonych. Ortotopowy model raka stanowi użyteczne podejście do zrozumienia biologii raka prostaty i oceny skuteczności schematów terapeutycznych. Protokół ten opisuje szczegółowe kroki niezbędne do ustalenia ortotopowego modelu myszy raka prostaty.

Przedkliniczny ortotopowy mysi model ludzkiego raka prostaty

Tutaj opisujemy rozwój klinicznie istotnego mysiego modelu raka wątroby, podsumowującego typowe cechy immunologiczne raka wątrobowokomórkowego (HCC).

Onkogenny, indukowany hepatocytami, ortotopowy mysi model raka wątrobowokomórkowego powstającego w warunkach zapalenia i zwłóknienia wątroby

Ten artykuł opisuje generowanie ortotopowego mysiego modelu ludzkiego międzybłoniaka opłucnej poprzez wszczepienie komórek międzybłoniaka H2052/484 do jamy opłucnej myszy z obniżoną odpornością. Podłużne monitorowanie rozwoju guzów wewnątrzopłucnowych oceniano za pomocą nieinwazyjnej multimodalnej [18F]-2-fluoro-2-deoksy-D-glukozy pozytonowej tomografii emisyjnej i obrazowania tomografii komputerowej.

Implantacja i monitorowanie za pomocą PET/CT ortotopowego modelu ludzkiego międzybłoniaka opłucnej u myszy z atymią

Obecny protokół opisuje ultrasonografię wysokiej częstotliwości do wizualizacji całej tarczycy myszy i monitorowania wzrostu anaplastycznego raka tarczycy.

Ultrasonografia o wysokiej rozdzielczości do analizy ortotopowych guzów ATC w genetycznie zmodyfikowanym modelu myszy

W tym protokole omawiamy implementację modelu udanego ortotopowego przeszczepu wątroby (OLT) u myszy. Dodatkowo omówiono adiuwanty do dalszej analizy drożności przeszczepu allogenicznego po udanym OLT u myszy, w szczególności z wykorzystaniem skanów tomografii mikrokomputerowej (microCT).

Udany ortotopowy przeszczep wątroby u myszy z wykorzystaniem angiografii tomografii mikrokomputerowej

Protokół ten wykorzystuje wielokomorowe łóżko do równoległego rezonansu magnetycznego (MRI) do czterech zwierząt do wykrywania guzów gruczolakoraka trzustki w genetycznie modyfikowanych modelach myszy. Ten protokół MRI wielozwierzęcy jest szybki i opłacalny w wykrywaniu i pomiarze guzów, ułatwiając selekcję zwierząt do badań przedklinicznych oraz podłużne monitorowanie wzrostu guzów.

Wielozwierzęce obrazowanie rezonansu magnetycznego do pomiarów guza w myszych modelach raka trzustki

Poznaj nieinwazyjne obrazowanie PET/MR w ortotopowym mysim modelu raka wątrobowokomórkowego. Ta metoda umożliwia monitorowanie hipoksji nowotworowej in vivo przy użyciu [18F]FMISO i [18F]FDG.

Nieinwazyjne obrazowanie PET/MR w ortotopowym mysim modelu raka wątrobowokomórkowego

Przeglądaj więcej filmów