Name: Synteza mikroprzepływowa mikrożelowych bloków budulcowych do rusztowania cząstek wyżarzonych mikroporowato (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-06-16T14:40:00.000+00:00
Duration: 9 min 34 s
Description: Poznaj mikroprzepływową syntezę monodyspersyjnych mikrożeli do rusztowań MAP w medycynie regeneracyjnej. Ta metoda umożliwia precyzyjną kontrolę porowatości i wielkości porów dla lepszej integracji tkanek.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy chcieliby podziękować Joe de Rutte i Laboratorium Di Carlo na Uniwersytecie Kalifornijskim w Los Angeles za pomoc w oryginalnym projekcie urządzenia mikroprzepływowego, na podstawie którego powstało zgłoszone urządzenie, a także za ich wczesne wskazówki dotyczące produkcji urządzeń PDMS i rozwiązywania problemów. Schematy rysunkowe zostały stworzone za pomocą Biorender.com.

<ol><li>Griffin, D. R., Weaver, W. M., Scumpia, P. O., di Carlo, D., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Accelerated+wound+healing+by+injectable+microporous+gel+scaffolds+assembled+from+annealed+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Accelerated wound healing by injectable microporous gel scaffolds assembled from annealed building blocks.</a> Nature Materials. 14 (7), 737-744 (2015).</li>
<li>Koh, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+in+vivo+delivery+of+stem+cells+using+microporous+annealed+particle+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Small%22%5BJournal%5D)">Enhanced in vivo delivery of stem cells using microporous annealed particle scaffolds.</a> Small. 15 (39), 1903147(2019).</li>
<li>Pruett, L. J., Jenkins, C. H., Singh, N. S., Catallo, K. J., Griffin, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heparin+microislands+in+microporous+annealed+particle+scaffolds+for+accelerated+diabetic+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Heparin microislands in microporous annealed particle scaffolds for accelerated diabetic wound healing.</a> Advanced Functional Materials. 31 (35), 2104337(2021).</li>
<li>Darling, N. J., Sideris, E., Hamada, N., Carmichael, S. T., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+and+spatially+patterned+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+hydrogels+for+tissue+repair+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Science%22%5BJournal%5D)">Injectable and spatially patterned microporous annealed particle (MAP) hydrogels for tissue repair applications.</a> Advanced Science. 5 (11), 1801046(2018).</li>
<li>Isaac, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microporous+bio-orthogonally+annealed+particle+hydrogels+for+tissue+engineering+and+regenerative+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Microporous bio-orthogonally annealed particle hydrogels for tissue engineering and regenerative medicine.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 5 (12), 6395-6404 (2019).</li>
<li>Pruett, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+a+microporous+annealed+particle+hydrogel+for+long-term+vocal+fold+augmentation%5BTitle%5D)+AND+%22Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">Development of a microporous annealed particle hydrogel for long-term vocal fold augmentation.</a> Laryngoscope. 130 (10), 2432-2441 (2020).</li>
<li>Nih, L. R., Sideris, E., Carmichael, S. T., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injection+of+microporous+annealing+particle+%28MAP%29+hydrogels+in+the+stroke+cavity+reduces+gliosis+and+inflammation+and+promotes+NPC+migration+to+the+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Materials%22%5BJournal%5D)">Injection of microporous annealing particle (MAP) hydrogels in the stroke cavity reduces gliosis and inflammation and promotes NPC migration to the lesion.</a> Advanced Materials. 29 (32), (2017).</li>
<li>Griffin, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Activating+an+adaptive+immune+response+from+a+hydrogel+scaffold+imparts+regenerative+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Materials%22%5BJournal%5D)">Activating an adaptive immune response from a hydrogel scaffold imparts regenerative wound healing.</a> Nature Materials. 20 (4), 560-569 (2021).</li>
<li>Sideris, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Particle+hydrogels+based+on+hyaluronic+acid+building+blocks%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Particle hydrogels based on hyaluronic acid building blocks.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 2 (11), 2034-2041 (2016).</li>
<li>Schaeffer, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Injectable+microannealed+porous+scaffold+for+articular+cartilage+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Plastic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Injectable microannealed porous scaffold for articular cartilage regeneration.</a> Annals of Plastic Surgery. 84, 6S Suppl 5 446-450 (2020).</li>
<li>Pruett, L., Ellis, R., McDermott, M., Roosa, C., Griffin, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spatially+heterogeneous+epidermal+growth+factor+release+from+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+hydrogel+for+improved+wound+closure%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Materials+Chemistry+B%22%5BJournal%5D)">Spatially heterogeneous epidermal growth factor release from microporous annealed particle (MAP) hydrogel for improved wound closure.</a> Journal of Materials Chemistry B. 9 (35), 7132-7139 (2021).</li>
<li>Jivan, F., Alge, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bio-orthogonal%2C+site-selective+conjugation+of+recombinant+proteins+to+microporous+annealed+particle+hydrogels+for+tissue+engineering%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Bio-orthogonal, site-selective conjugation of recombinant proteins to microporous annealed particle hydrogels for tissue engineering.</a> Advanced Therapeutics. 3 (1), 1900148(2020).</li>
<li>de Rutte, J. M., Koh, J., di Carlo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scalable+high-throughput+production+of+modular+microgels+for+in+situ+assembly+of+microporous+tissue+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Functional+Materials%22%5BJournal%5D)">Scalable high-throughput production of modular microgels for in situ assembly of microporous tissue scaffolds.</a> Advanced Functional Materials. 29 (25), 1900071(2019).</li>
<li>Pfaff, B. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+and+improved+photoannealing+of+microporous+annealed+particle+%28MAP%29+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Biomaterials+Science+and+Engineering%22%5BJournal%5D)">Selective and improved photoannealing of microporous annealed particle (MAP) scaffolds.</a> ACS Biomaterials Science and Engineering. 7 (2), 422-427 (2021).</li>
<li>Darling, N. J., Hung, Y. S., Sharma, S., Segura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Controlling+the+kinetics+of+thiol-maleimide+Michael-type+addition+gelation+kinetics+for+the+generation+of+homogenous+poly%28ethylene+glycol%29+hydrogels%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Controlling the kinetics of thiol-maleimide Michael-type addition gelation kinetics for the generation of homogenous poly(ethylene glycol) hydrogels.</a> Biomaterials. 101, 199-206 (2016).</li>
<li>Sandell, J. L., Zhu, T. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+review+of+in-vivo+optical+properties+of+human+tissues+and+its+impact+on+PDT%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biophotonics%22%5BJournal%5D)">A review of in-vivo optical properties of human tissues and its impact on PDT.</a> Journal of Biophotonics. 4 (11-12), 773-787 (2011).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Protokół ten opisuje metody syntezy i charakterystyki mikrożeli, które służą jako elementy budulcowe rusztowań z mikroporowatymi cząstkami wyżarzonymi (MAP). Protokół ten wykorzystuje wysokoprzepustowe podejście mikroprzepływowe do generowania dużych objętości jednorodnych mikrożeli, czego nie można osiągnąć innymi metodami, takimi jak mikrofluidykaskupiająca przepływ 1,4,7,9 (wysoka monodyspersja, niska wydajność), emulsja wsadowa 6,10 i elektronatryskiwanie 5,12 (niska monodyspersyjność, wysoka wydajność). Dzięki metodom opisanym w niniejszym dokumencie, mikrożele monodyspersyjne mogą być wytwarzane do stosowania w rusztowaniach MAP, które mogą być wykorzystywane do różnych zastosowań w medycynie regeneracyjnej (np. dostarczanie komórek, gojenie się ran).
Kluczowym etapem tego protokołu jest stworzenie urządzeń mikroprzepływowych PDMS. Jeśli urządzenia nie są wykonane prawidłowo, może to mieć negatywny wpływ na tworzenie mikrożeli i monodyspersyjność. Ważne jest, aby zapobiec wprowadzaniu artefaktów (tj. pęcherzyków, kurzu) do PDMS przed jego utwardzeniem, ponieważ może to zatkać kanały i znacząco wpłynąć na tworzenie mikrożelu. Aby to w jak największym stopniu złagodzić, należy użyć taśmy do usunięcia kurzu, przechowywać urządzenia w pojemniku bezpyłowym i pracować w okapie odpylającym, jeśli to możliwe. Zaleca się również przechowywanie urządzeń w temperaturze 60 °C w celu uzyskania najlepszych rezultatów obróbki powierzchni.
Podczas nalewania urządzeń PDMS ważne jest, aby utrzymać jednolitą grubość, która jest mniej więcej równa lub mniejsza niż długość stempla biopsyjnego. Jeśli urządzenie jest zbyt grube, stempel biopsyjny nie będzie w stanie przeniknąć na wylot. Ważne jest również, aby nie rozerwać wlotów/wylotów urządzenia PDMS podczas przebijania dziurkaczem do biopsji i/lub wkładania rurki. Rozdarcie w urządzeniu PDMS spowoduje wyciek z wlotów/wylotów, co może spowodować utratę roztworu prekursora żelu. Jeśli w urządzeniu PDMS występuje nieszczelność, najlepszym rozwiązaniem jest jak najszybsza wymiana go na nowe.
Podczas obróbki plazmowej urządzenia, użycie czystego tlenu i obróbka plazmowa przez 30 s dały najlepsze wyniki w przypadku przylegania PDMS do szkiełka podstawowego. Jeśli urządzenie nie łączy się prawidłowo (tj. PDMS można nadal podnieść ze szkiełka po obróbce plazmowej), należy dokładnie sprawdzić, czy urządzenie do obróbki plazmowej działa prawidłowo i czy urządzenie i szkiełka zostały dokładnie wyczyszczone. Ważne jest również, aby stosować odpowiednią obróbkę powierzchni silanową, a w celu uzyskania najlepszych wyników urządzenia PDMS powinny być poddane obróbce powierzchniowej bezpośrednio przed użyciem. Można również zastosować inne metody obróbki powierzchni, takie jak chemiczne osadzanie z fazy gazowej.
Kolejnym kluczowym krokiem jest prawidłowe użycie urządzeń mikroprzepływowych PDMS do tworzenia mikrożelu. Zaleca się stosowanie współczynnika przepływu co najmniej 2:1 (w tym protokole wykorzystuje się natężenie przepływu oleju 6 ml/h i natężenie przepływu wody 3 mL/h), ale można go dostroić, aby osiągnąć pożądany rozmiar mikrożelu. pH roztworu prekursora mikrożelu jest również ważnym wskaźnikiem, który należy zoptymalizować, aby zapobiec zatkaniu urządzenia. Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS) przyspiesza tworzenie tiolanów w chemii addycji typu Michaela, a stężenia PBS stosowane w tym protokole dają najlepsze wyniki żelowania mikrożeli w urządzeniach mikroprzepływowych. Po uruchomieniu pomp strzykawkowych w kanałach mikroprzepływowych mogą pojawić się pęcherzyki, ale po kilku minutach powinny się one zrównoważyć. Zaleca się monitorowanie tworzenia się mikrożelu pod mikroskopem. Jeśli przepływ nie wygląda podobnie jak na tym filmie i/lub istnieje kilka kanałów wytwarzających duże cząstki, prawdopodobnie jest to spowodowane problemami z etapem obróbki powierzchni. Najlepszym rozwiązaniem jest wymiana urządzenia na takie, które zostało świeżo poddane obróbce powierzchniowej.
Jeśli mikrożele wydają się łączyć w konwalescencję, może to być spowodowane niewystarczającym stężeniem FluoroSurfaktantu. Zalecanym rozwiązaniem jest zwiększenie % wag. surfaktantu w fazie olejowej. Jednak jednym z ograniczeń w stosowaniu wysokich stężeń środka powierzchniowo czynnego jest to, że może on być trudniejszy do usunięcia na etapie oczyszczania. Zaleca się jednorazowe użycie urządzeń mikroprzepływowych, ale urządzenia mogą być ponownie użyte, jeśli zostaną przepłukane olejem Novec natychmiast po użyciu w celu usunięcia roztworu wodnego, który mógłby zalać urządzenie i zatkać kanały. Podczas gdy jedno urządzenie mikroprzepływowe może wyprodukować dużą przepustowość mikrożeli (ml/h), ta szybkość produkcji może być skalowana poprzez równoległe stosowanie wielu urządzeń mikroprzepływowych.
Etap wyżarzania montażu rusztowania MAP opiera się na zastosowaniu aktywowanego światłem fotoinicjatora polimeryzacji rodnikowej, a fotoinicjator można wybrać w zależności od pożądanego zastosowania. Na przykład fotoinicjator LAP ma krótki czas wyżarzania (<30 s) przy użyciu długofalowego światła UV, co ma minimalny wpływ na żywotność komórek in vitro14. Jednak ta długość fali jest silnie absorbowana przez tkankę16 i może nie mieć tak wysokiej skuteczności wyżarzania in vivo , jak in vitro.
Eozyna Y jest kolejnym fotoinicjatorem aktywowanym przez widzialne długości fal (505 nm) i ma głębszą penetrację w tkankę, co zwiększa zdolność rusztowania MAP do wyżarzania pod tkanką. Jednak długie czasy ekspozycji na światło potrzebne do wyżarzania eozyny Y mogą przedłużyć narażenie komórek na wolne rodniki i wpłynąć na żywotność komórek in vitro14. Wykorzystanie tych metod do wysokoprzepustowego generowania wysoce jednorodnych bloków budulcowych mikrożelu przyspieszy badania skoncentrowane na rusztowaniach MAP i przyczyni się do rozwoju wiedzy w dziedzinie wstrzykiwanych materiałów porowatych dla medycyny regeneracyjnej.

Platforma rusztowań MAP to wstrzykiwalny biomateriał składający się wyłącznie z mikrocząsteczek hydrożelu (mikrożeli), które po usieciowaniu zapewniają mikroporowatość w skali komórki, co pozwala na migrację komórek niezależną od degradacji i integrację tkanek masowych1. Ze względu na zdolność do szybkiej integracji z tkanką gospodarza i z natury niską immunogenność, platforma rusztowań MAP wykazała przedkliniczne zastosowanie w szerokiej gamie terapii medycyny regeneracyjnej2,3,4,5,6,7,8,9,10, w tym przyspieszanie gojenia się ran skórnych1,3,11, rewaskularyzacja jamy mózgu po udarze7, dostarczanie mezenchymalnych komórek macierzystych2, oraz zapewnianie masowania tkanek w leczeniu niewydolności głośniowej6. Wykazano również, że MAP przekazuje działanie przeciwzapalne do tkanki gospodarza poprzez rekrutację makrofagów M23 i może być nawet dostrojony do promowania odpowiedzi immunologicznej Th2 "naprawy tkanek"8. Te korzystne właściwości platformy rusztowania MAP pozwalają na jej rozbudowę do różnorodnych zastosowań klinicznych.
Wcześniej opublikowane metody generowania mikrożeli do tworzenia rusztowań MAP obejmowały mikrofluidykę kropelkową skupiającą przepływ1,4,7,9, elektronatryskiwanie5,12, oraz wirowanie nad głową z emulsją wsadową6,10. Kropelkowa metoda mikroprzepływowa może wytwarzać cząstki o wysokiej monodyspersyjności, ale wykorzystuje bardzo niskie prędkości przepływu, które dają niską wydajność cząstek (μL/h). Alternatywnie, metody elektronatryskiwania i emulsji wsadowej mogą wytwarzać dużą ilość cząstek, ale z wysoką polidyspersją cząstek. Protokół ten wykorzystuje wysokoprzepustową metodę mikroprzepływową do produkcji mikrożeli z populacją monodyspersyjną, w oparciu o pracę de Rutte et al13. Metoda ta wykorzystuje techniki miękkiej litografii do wykonania urządzenia mikroprzepływowego z polidimetylosiloksanu (PDMS) z fotomaski, która jest następnie łączona ze szkiełkiem podstawowym . Konstrukcja urządzenia opiera się na emulgowaniu krokowym w celu wytworzenia dużej objętości cząstek mikrożelu (ml/h). Monodyspersjność, którą można osiągnąć za pomocą tej metody, zapewnia lepszą kontrolę porowatości w porównaniu z innymi technikami, ponieważ mikrożele monodyspersyjne mogą tworzyć rusztowania o bardziej jednolitych rozmiarach porów2.
Metody syntezy i charakterystyki poszczególnych mikrożeli, które mogą działać jako elementy budulcowe rusztowań MAP, są opisane w tym manuskrypcie, szczególnie w zakresie tworzenia mikrożeli, które składają się ze szkieletu PEG z grupą maleimidową (MAL), która łatwo uczestniczy w efektywnym dodawaniu typu Michaela z funkcjonalizowanymi tiolem środkami sieciującymi do żelowania mikrożeli. Aby oddzielić żelowanie mikrożelowe od wyżarzania rusztowań MAP, w tym manuskrypcie opisano również, jak zsyntetyzować opublikowany makromer do wyżarzania 14, MethMAL, który jest heterofunkcjonalnym 4-ramiennym makromerem PEG metakryloamidu/maleimidu. Grupy funkcyjne metakryloamidu łatwo uczestniczą w fotopolimeryzacji wolnorodnikowej (do wyżarzania mikrożeli), pozostając jednocześnie stosunkowo obojętne na warunki, które sprzyjają dodawaniu typu Michaela do grup funkcyjnych MAL.
Dodatkowo, ten manuskrypt opisuje protokoły tworzenia urządzeń mikroprzepływowych PDMS, określania kinetyki żelowania mikrożelu i charakteryzowania wielkości mikrożelu. Ostatnia część manuskryptu szczegółowo opisuje wyżarzanie rusztowań MAP, które ma miejsce, gdy mikrożele są przekształcane in situ w rusztowanie masowe poprzez wtórny, inicjowany foto etap sieciowania, który kowalencyjnie łączy ze sobą powierzchnie mikrożeli. Ważne jest, aby pamiętać, że istnieją inne metody wyżarzania, które można zastosować w systemach rusztowań MAP, które nie opierają się na chemii opartej na świetle, takie jak wyżarzanie za pośrednictwem enzymów, jak opisano wcześniej1. Ogólnie rzecz biorąc, metody te mogą być stosowane bezpośrednio lub z różnymi rodzajami chemicznymi hydrożelu (np. na bazie kwasu hialuronowego) w celu generowania rusztowań MAP do dowolnego zastosowania.

<table><tbody><tr><td>Chlorowodorek 2-aminoetanotiolu</td><td>Acros Organics</td><td>AC153770250</td><td>Do syntezy metMalu MW: 113,61 Da</td></tr><tr><td>Wirnik płytowy 35 mm</td><td>Geometria HAAKE</td><td>P35/Ti</td><td>do wiskozymetru HAAKE</td></tr><tr><td>4-ramienny PEG-Maleimide (10 kDa)</td><td>NOF AMERICA Corporation</td><td>SUNBRIGHT PTE-100MA</td><td>Do roztworu prekursora mikrożelu</td></tr><tr><td>4-ramienny PEG-Maleimid (20 kDa)</td><td>NOF AMERICA Korporacja</td><td>SUNBRIGHT PTE-200MA</td><td>Do syntezy metMal Masa cząsteczkowa specyficzna dla każdej partii</td></tr><tr><td>Strzykawka BD z końcówkami Luer-Lok</td><td>Becton Dickinson</td><td></td><td>Jednorazowe plastikowe strzykawki</td></tr><tr><td>Dziurkacz do biopsji</td><td>Mitex</td><td>MLTX33-31A-P/25</td><td></td></tr><tr><td>Chloroform-d</td><td>Acros Organics</td><td>AC209561000 o</td> średnicy 1,5 mm <td>do syntezy metMalu</td></tr><tr><td>Kolimowane światło LED Źródło</td>: <td>ThorLabs</td><td>M365LP1-C1</td><td>365 nm</td></tr><tr><td>Naczynie hodowlane (15 cm)</td><td>Corning</td><td>CLS430599</td><td>150 mm x 25 mm</td></tr><tr><td>DMTMM(chlorek 4-(4,6-dimetoksy-1,3,5-triazyno-2-ylo)-4-metylo-morfoliny)</td><td>Oakwood Chemical</td><td>151882</td><td>do syntezy metmalu MW: 276.72 Da</td></tr><tr><td>Fluorosurfactant</td><td>Ran Technologies</td><td>008-Flurosurfactant-5wtH-200G</td><td>5 procent wagowy 008- Flurosurfaktant w</td></tr><tr><td>systemie liofilizacji triady FreeZone HFE7500 FreeZone</td><td>Seria Labconco</td><td>7400000</td><td>do syntezy metmalu Liofilizator</td></tr><tr><td>Szkiełka szklane</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-A3</td><td>Szkiełka zwykłe szklane, niepowlekane</td></tr><tr><td>Wiskozymetr HAAKE Rheowin</td><td>HAAKE</td><td></td><td></td></tr><tr><td>ImageJ</td><td></td><td></td><td>wersja 1.8.0_172</td></tr><tr><td>KDS Legato 210 Strzykawka z podwójnym bolcem Pompa</td><td>Kd Scientific&nbsp;</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sterownik LED</td><td>ThorLabs</td><td>DC2200</td><td></td></tr><tr><td>Fenylo-2,4,6-trimetylobenzoilofosfinian litu (LAP)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>900889</td><td>Fotoinicjator</td></tr><tr><td>Kwas metakrylowy</td><td>Sigma Aldrich</td><td>155721</td><td>do syntezy metmalu MW: 86,09 Da Gęstość: 1,015 g / ml</td></tr><tr><td>Urządzenie mikroprzepływowe SU8-Si wafel główny</td><td>FlowJem</td><td>N/A</td><td>Wykonane na zamówienie, z</td></tr><tr><td>silanizacją MMP-2 degradowalny środek sieciujący</td><td>Sekwencja FlowJem</td><td></td><td>: Ac-GCGPQGIAGQDGCG-NH2</td></tr><tr><td>Igły (25 G, fazowane)</td><td>BD</td><td>305122</td><td>Długość: 15,88 mm Wskaźnik: 0,5 mm</td></tr><tr><td>Novec 7500</td><td>3M</td><td>7100025016</td><td>Olej fluorowany</td></tr><tr><td>Tlen</td><td>Praxair</td><td>UN1072</td><td>Rurki kompresyjne</td></tr><tr><td>Peek</td><td>Trajan Scientific</td><td>03-350-523</td><td>1/32" Średnica zewnętrzna; 0.02" Średnica wewnętrzna; 10' Długość</td></tr><tr><td>PFOCTS (trichloro(1H,1H,2H,2H-perfluorooktylo)silan)Silan)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>448931</td><td>Do obróbki powierzchni</td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna buforowana fosforanami</td><td>Fisher BioReagants</td><td>BP3994</td><td>Rozcieńczony do 1x w ultraczystej wodzie, pH = 7,4</td></tr><tr><td>Środek do czyszczenia plazmowego</td><td>Harrick Plasma</td><td>PDC-001-HP</td><td></td></tr><tr><td>Żyletka</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-640</td><td></td></tr><tr><td>RGD peptyd adhezyjny do komórek</td><td>WatsonBio Sciences</td><td></td><td>Sekwencja: Ac-RGDSPGGC-NH2</td></tr><tr><td>Rheowin oprogramowanie</td><td>HAAKE&nbsp;</td><td></td><td>Oprogramowanie kompatybilne z wiskozymetrem HAAKE</td></tr><tr><td>Ostrze skalpela</td><td>Bard-Parker</td><td>371210</td><td>Rozmiar: #10</td></tr><tr><td>Rękojeść skalpela</td><td>Bard-Parker</td><td>371030</td><td>Rozmiar: #3</td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>Fisher BioReagents</td><td>BP358-1</td><td>do syntezy metmalu MW: 58.44 Da</td></tr><tr><td>Sylgard 184 zestaw elastomerów silikonowych</td><td>DOW Chemical</td><td>2065622</td><td>Baza i utwardzacz</td></tr><tr><td>Triethylamine</td><td>Fisher Scientific</td><td>O4884-100</td><td>Do syntezy metmalu MW: 101,19 Da Gęstość: 0,73 g / ml</td></tr><tr><td>Rurka Tygon</td><td>Saint Gobain Performance Plastics</td><td>AAD04103</td><td>ID: 0,51 mm OD: 1,52 mm</td></tr><tr><td>Spektrometr Varian Inova 500 Varian</td><td></td><td></td><td>NMR Znajduje się w Zakładzie Biomolekularnego Rezonansu Magnetycznego UVA</td></tr></tbody></table>

synteza mikroprzepływowa mikrożelowych bloków budulcowych do rusztowania cząstek wyżarzonych mikroporowato

Microfluidic Synthesis of Microgel Building Blocks for Microporous Annealed Particle Scaffold

Platforma rusztowania z mikroporowatymi cząstkami wyżarzonymi (MAP) jest podklasą granulowanych hydrożeli. Składa się z wstrzykiwanej zawiesiny mikrożeli, które mogą tworzyć strukturalnie stabilne rusztowanie z porowatością w skali komórkowej in situ po wtórnym etapie sieciowania chemicznego opartego na świetle (tj. wyżarzaniu). Rusztowanie MAP wykazało sukces w różnych zastosowaniach medycyny regeneracyjnej, w tym w gojeniu się ran skórnych, powiększaniu fałdów głosowych i dostarczaniu komórek macierzystych. W artykule opisano metody syntezy i charakterystyki mikrożeli z poli(glikolu etylenowego) (PEG) jako elementów budulcowych tworzących rusztowanie MAP. Metody te obejmują syntezę niestandardowego makromeru do wyżarzania (MethMAL), oznaczanie kinetyki żelowania prekursorów mikrożeli, wytwarzanie urządzeń mikroprzepływowych, mikroprzepływowe wytwarzanie mikrożeli, oczyszczanie mikrożeli i podstawową charakterystykę rusztowania, w tym wymiarowanie mikrożelu i wyżarzanie rusztowań. W szczególności opisane w niniejszym dokumencie wysokoprzepustowe metody mikroprzepływowe mogą wytwarzać duże ilości mikrożeli, które można wykorzystać do generowania rusztowań MAP do dowolnego pożądanego zastosowania, zwłaszcza w dziedzinie medycyny regeneracyjnej.

Celem tego protokołu jest nakreślenie wszystkich kroków niezbędnych do syntezy bloków budulcowych mikrożelu, które mają być użyte w rusztowaniu MAP. Makromer do wyżarzania MethMAL jest wysoce selektywny i wydajny oraz jest kompatybilny z wieloma szkieletami polimerowymi14. Ważne jest, aby co najmniej 67%-75% z 20 kDa PEG-maleimidu było modyfikowane grupami funkcyjnymi metakryloamidu, aby zapewnić wysoką wydajność wyżarzania. Procentową modyfikację można najłatwiej wyznaczyć, analizując piki widma 1H-NMR, jak pokazano na rysunku Rysunek 1. Kinetyka żelowania, określana za pomocą lepkościomierza, jest ważnym wskaźnikiem, który należy wziąć pod uwagę dla każdej formuły żelu. Protokół ten wykorzystuje roztwór prekursora żelu składający się ze szkieletu PEG z grupą MAL, który skutecznie reaguje z funkcjonalizowanymi tiolami sieciami w celu żelowania mikrożelu. Jednak wiele chemii hydrożeli można wykorzystać do wytwarzania mikrożeli za pomocą opisanej w niniejszym dokumencie metody mikroprzepływowej o wysokiej przepustowości. Czas do rozpoczęcia żelowania zapewni wgląd w czas wytwarzania mikrożelu mikroprzepływowego. Zaleca się wybór pH prekursora żelu, który może zainicjować żelowanie między 30 minutami (<silna klasa="xfig">Rysunek 2) do 2 godzin.
Jeśli czas żelowania jest zbyt krótki, roztwór prekursora żelu zacznie polimeryzować w urządzeniu mikroprzepływowym i zatkać kanały. Ponadto ważne jest, aby pamiętać, że zmiana stężeń tiolowanych ligandów (np. RGD) może mieć wpływ na tworzenie sieci podczas żelowania i może być konieczna do uwzględnienia poprzez dostosowanie preparatu. Etapy produkcji urządzenia mikroprzepływowego mogą być żmudne, ale reprezentatywne wyniki pomyślnie połączonego urządzenia są pokazane w <silna klasa="xfig">Rysunek 3. Protokół ten wykorzystuje wysokowydajne, równoległe, krokowe urządzenie mikroprzepływowe, które zostało zaadaptowane z projektu de Rutte et al.13, a produkcja płytek krzemowych została zlecona firmie zajmującej się technologią mikroprzepływową. Jednak kroki opisane w tym protokole mogą być używane z dowolnym projektem urządzenia wytrawionym na fotomasce z wafla krzemowego SU-8. Ważne jest, aby pamiętać, że rozmiar kroku kanałów na fotomasce musi być zoptymalizowany podczas produkcji urządzenia, ponieważ będzie to miało wpływ na wielkość cząsteczek mikrożelu.
Natężenia przepływu dla mikroprzepływowego wytwarzania mikrożeli powinny być zoptymalizowane dla każdej formuły żelu w oparciu o takie czynniki jak czas żelowania, pożądana wielkość cząstek i konstrukcja urządzenia mikroprzepływowego. W przypadku korzystania z urządzenia o wysokiej przepustowości, natężenia przepływu w fazie wodnej mogą sięgać nawet 5 ml/h. <silna klasa="xfig">Rysunek 4B przedstawia konfigurację dla urządzeń o wysokiej przepustowości używanych w tym protokole. Jeśli urządzenie działa poprawnie, tworzenie mikrożelu powinno wyglądać podobnie do pokazanego na Rysunek 4D. Przed oczyszczeniem mikrożele będą nieprzezroczyste. Po zakończeniu różnych myć olejem, PBS i heksanem, żel powinien wyglądać na przezroczysty, jak na reprezentatywnym obrazie na <silna klasa = "xfig">Rysunek 5. W przypadku włączenia fluoroforu do mikrożeli, oczyszczony produkt może mieć lekki odcień koloru, ale nadal powinien być bliski półprzezroczystości. Po oczyszczeniu i spęcznieniu mikrożele powinny mieć bardzo jednolitą wielkość i PDI między 1,00 a 1,05, jak pokazano na <silna klasa = "xfig" >Rysunek 6. Do fotowyżarzania rusztowań MAP można stosować różne fotoinicjatory. W przypadku korzystania z alternatywy dla LAP, opisanej w niniejszym dokumencie, należy określić kinetykę wyżarzania zgodnie z wcześniejszym opisem14. Dodatkowo do fotowyżarzania można stosować różne źródła światła, o ile źródło światła odpowiada fotoinicjatorowi. Należy upewnić się, że źródło światła zostało skalibrowane i ustawione na ostrości. Czas wyżarzania i intensywność światła mogą wymagać optymalizacji w oparciu o formułę żelu i stężenie fotoinicjatora. Metoda wyżarzania opisana w niniejszym protokole może być stosowana w badaniach in vitro i in vivo. Po wyżarzaniu mikrożele utworzą porowate rusztowanie, które można uwidocznić za pomocą mikroskopii dwufotonowej (<klasa silna = "xfig">Rysunek 7B-C).

Ten protokół opisuje zestaw metod syntezy mikrożelowych bloków budulcowych dla mikroporowatych rusztowań z wyżarzonymi cząstkami, które mogą być używane do różnych zastosowań medycyny regeneracyjnej.

Synteza mikroprzepływowa mikrożelowych bloków budulcowych do rusztowania cząstek wyżarzonych mikroporowato

The microporous annealed particle (MAP) scaffold platform is a subclass of granular hydrogels. It is composed of an injectable slurry of microgels that ...

Wysokowydajne wytwarzanie monodyspersyjnych mikrożelowych bloków budulcowych do rusztowań z mikroporowatymi cząstkami wyżarzonymi zapewnia lepszą kontrolę porowatości rusztowań. Może to mieć wpływ na wielkość porów i późniejsze wyniki integracji tkanek. Protokół ten wykorzystuje wysokoprzepustowe podejście mikroprzepływowe do generowania dużych ilości monorozproszonych mikrożeli, czego nie można osiągnąć innymi metodami, takimi jak mikrofluidyka skupiająca przepływ, emulsja wsadowa i elektronatryskiwanie.Powstałe mikrożele można formować w mikroporowate rusztowania z cząstkami wyżarzonych, które są korzystne w zastosowaniach medycyny regeneracyjnej ze względu na porowatość skali komórkowej, która pozwala na szybki wzrost tkanki i wzrostu. Zacznij od przygotowania jednego szkiełka podstawowego na urządzenie mikroprzepływowe PDMS. Użyj taśmy, przefiltrowanego powietrza lub płynów do płukania alkoholem izopropylowym, aby usunąć kurz ze szkiełka.Umieść szklane szkiełko w szkiełku o konstrukcji urządzenia PDMS, obok siebie na 96-dołkowej pokrywie płytki i umieść je w myjce plazmowej. Zamknij drzwiczki i zawór przepływu powietrza i włącz pompę próżniową. Pozwól mu działać przez co najmniej 30 sekund, a następnie wyłącz go.Podłącz rurkę gazową butli tlenu do zaworu przepływu powietrza. Pozwól, aby komora plazmowa napełniła się tlenem przez 30 sekund, a następnie wyłącz tlen i zamknij zawór przepływu powietrza. Włącz pompę próżniową i ustaw poziom częstotliwości radiowej na wysoki.Poczekaj, aż komora zmieni kolor na fioletowo-różowy i odczekaj 30 sekund. Gdy timer się wyłączy, wyłącz plazmę i odkurzanie, a następnie powoli otwórz zawór przepływu powietrza, aby uwolnić podciśnienie. Wyjmij tackę z urządzenia do czyszczenia plazmowego.Delikatnie obróć urządzenie PDMS na szklane szkiełko, aby je połączyć. W miarę wiązania należy zwrócić uwagę na niewielką różnicę w przezroczystości PDMS. Aby uzyskać najlepsze wyniki, przechowuj połączone urządzenia w temperaturze 60 stopni Celsjusza do momentu bezpośrednio przed użyciem.Przygotuj obróbkę powierzchni, rozcieńczając PFOCTS i olej Novec i użyj jednego mililitra na trzy do czterech urządzeń. Przenieść objętość do strzykawki o pojemności jednego mililitra i założyć igłę o rozmiarze 25. Wytnij od 10 do 12 centymetrów rurki Tygon na urządzenie.Wytnij kawałek rurki PEEK o długości około jednego cala. Włóż kilka milimetrów rurki PEEK do końca rurki Tygon, aby zapobiec przebiciu przez igłę wlotów rurki Tygon. Wyjmij urządzenia z podgrzewanej komory i włóż końcówkę rurki Tygon bez PEEK do wodnego otworu wlotowego.Włóż igłę strzykawki do obróbki powierzchni do rurki PEEK i zakryj otwór wylotowy komory olejowej. Wstrzykiwać lek powoli i upewnić się, że wypełnia on urządzenie bez pęcherzyków. Poczekaj, aż najpierw wypełnią się komory wodne, następnie mniejsze kanały, a następnie komora olejowa.Wyjmij rurkę Tygon z urządzenia. Po napełnieniu urządzenia odstaw je na 10 minut w temperaturze pokojowej. Napełnij pięciomililitrową strzykawkę samym olejem i przymocuj igłę o rozmiarze 25.Zassać obróbkę powierzchniową z urządzenia przez wloty i wyloty. Włóż rurkę Tygon do wlotu wody wodnej. Włóż strzykawkę z olejem do rurki PEEK i przepłucz każde urządzenie olejem.Odessać olej z urządzenia. Powtórz dwukrotne płukanie olejem i wyjmij rurkę Tygon. Włóż końcówkę rurki Tygon bez PEEK do wlotów urządzeń mikroprzepływowych.Włóż pozostały kawałek rurki Tygon bez rurki PEEK na końcu do wylotu urządzenia mikroprzepływowego. Dodaj co najmniej trzy mililitry oleju do pięciomililitrowej plastikowej strzykawki i przymocuj ją do igły o rozmiarze 25. Ostrożnie włóż igłę do rurki PEEK na jednym z wlotów Tygon.Delikatnie przepłucz rurkę i urządzenie olejem. Zbierz olej z wylotu do stożkowej rurki. Powtórz płukanie olejem na drugim wlocie Tygon.Ustawić pompy strzykawkowe na żądane natężenia przepływu. Podłącz strzykawkę zawierającą środek powierzchniowo czynny do wlotu oleju za pomocą igły o rozmiarze 25 i delikatnie dozuj wystarczającą ilość oleju, aby zalać rurkę i kanał olejowy urządzenia mikroprzepływowego. Po ustawieniu urządzenia i wlotów oleju dodaj 0,5 mililitra oleju do nowej pięciomililitrowej strzykawki, która będzie zawierała prekursor żelu.Użyj tej niewielkiej ilości oleju, aby pomóc przepłukać roztwór prekursora przez urządzenie mikroprzepływowe. W stożkowej rurze połącz 1,5 mililitra roztworu szkieletu PEG i 1,5 mililitra roztworu sieciującego. Wirować przez 30 sekund i szybko przenieść połączony roztwór prekursora żelu do pięciomililitrowej strzykawki.Połączyć strzykawkę z roztworem prekursora żelu z wlotem wody za pomocą igły o rozmiarze 25G. Delikatnie dozuj wystarczającą ilość roztworu, aby zalać rurkę i kanał wodny. Zacisnąć strzykawki na pompkach strzykawkowych i nacisnąć przycisk RUN.Szukaj cząstek o jednolitej wielkości w kanałach. Zbierz mikrożele z wylotu do stożkowej tuby. Po zakończeniu żelowania użyj pipety, aby ostrożnie usunąć fazę olejową z dna probówki.Zdeponuj je w odpowiednim pojemniku na odpady fluorowane. Dodaj więcej oleju do probówki do zbierania mikrożelu. Wymieszaj, delikatnie odwracając probówkę zbiorczą.Pozwól probówce zbiorczej osiąść na pięć minut, aby umożliwić rozdzielenie faz. Poszukaj fazy olejowej na dole i wodnej fazy mikrożelowej na górze. Powtórz płukanie olejem co najmniej dwa razy więcej.Dodaj więcej oleju z żelem, jak pokazano wcześniej, a następnie dodaj PBS do żelu. Odwróć, aby wymieszać kilka razy. Aby oddzielić warstwy, odwiruj probówkę o temperaturze 2 000 RCF przez około 30 sekund.Poszukaj fazy olejowej na dole tubki, żelu w środku i PBS na górze. Usuń fazę olejową za pomocą pipety i wyrzuć ją do pojemnika na odpady. Powtórz dwukrotne mycie olejem i PBS.Poczekaj, czy żel zmieni się z nieprzezroczystego w przezroczysty do ostatniego prania. Usuń cały olej. Nie wyjmuj PBS z rurki stożkowej.W dygestorium chemicznym użyj szklanej pipety, aby dodać heksany do rurki w objętości równej PBS. Obracaj stożkową rurkę przez 30 sekund lub do momentu, gdy dokładnie się wymiesza. Wirować przy 4 696 RCF przez pięć minut.Po oddzieleniu poszukaj heksanów w górnej warstwie, PBS w środku i żelu na dole. Usuń warstwę heksanu i wyrzuć ją do pojemnika na odpady organiczne. Zassać PBS.Powtórz heksan w praniu PBS co najmniej dwa razy lub do momentu, gdy żel stanie się prawie przezroczysty. Ponownie umyj żel PBS, aby usunąć wszelkie pozostałe pozostałości heksanu. Wirować przy 4 696 RCF przez pięć minut i zasysać warstwę PBS.Około 67-75% 20-kilodaltonowego maleimidu PEG zostało zmodyfikowane grupami funkcyjnymi metakrylamidu, aby zapewnić wysoką wydajność wyżarzania. Procentową modyfikację określono poprzez analizę pików widm 1H NMR. Początek żelowania dostarczył informacji na temat czasu wytwarzania mikrożelu mikroprzepływowego.Zaleca się wybór pH prekursora żelu, który może zainicjować żelowanie w ciągu od 30 minut do dwóch godzin. Po oczyszczeniu i spęcznieniu mikrożele miały jednolitą wielkość i wskaźnik polidyspersyjności między 1,00 a 1,02, zdefiniowany jako populacja monorozproszona. Po wyżarzaniu mikrożele utworzyły porowate rusztowanie uwidocznione za pomocą mikroskopii dwufotonowej.Prawidłowe przyklejenie urządzenia PDMS do szkiełka podstawowego i prawidłowa obróbka powierzchni urządzenia ma kluczowe znaczenie dla najlepszej wydajności urządzenia mikroprzepływowego. Technika ta pozwala na szybkie wytwarzanie jednolitych bloków budulcowych mikrożelu w celu utworzenia rusztowań mapowych, które mogą być wykorzystywane do różnych zastosowań regeneracyjnych in vivo, w tym do gojenia się ran.

microfluidic-synthesis-microgel-building-blocks-for-microporous

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Przedstawiamy protokół syntezy mikrohydrożeli Janusa składających się całkowicie z tego samego materiału bazowego, poli(N-izopropylacrylamidu) (PNIPAAm), z wyraźnie podzieloną strukturą opartą na separacji faz przesyconego roztworu monomeru NIPAAm. Zsyntetyzowane mikrohydrożele Janus wykazują unikalne właściwości, takie jak anizotropowa termoczułość i zdolność ładowania organofilowego/hydrofilowego.

Synteza mikrohydrożeli Janusa z poli(N-izopropyloakrylamidu) Janusa dla anizotropowej reakcji termicznej i zdolności ładowania organofilowego/hydrofilowego

Proponujemy prostą technikę samoorganizacji koloidalnych nanocząstek krzemionki w celu stworzenia nanofluidycznego połączenia między dwoma mikrokanałami w polidimetylosiloksanie (PDMS). Korzystając z tej techniki, nanoporowatą membranę perełkową o wielkości porów do ~45 nm wbudowano w mikrokanał i zastosowano do elektrokinetycznego wstępnego zagęszczenia próbek DNA.

Tworzenie połączeń nanofluidycznych poniżej 50 nm w chipie mikroprzepływowym PDMS poprzez proces samoorganizacji cząstek koloidalnych

Tutaj opisujemy wytwarzanie i działanie dwuwarstwowego systemu mikroprzepływowego wykonanego z polidimetylosiloksanu (PDMS). Pokazujemy potencjał tego urządzenia w zakresie wychwytywania, kierowania szlakiem koordynacyjnym krystalicznego materiału molekularnego i kontrolowania reakcji chemicznych na uwięzionych strukturach na chipie.

Mikroprzepływowe klatki pneumatyczne: nowatorskie podejście do wychwytywania kryształów w chipach, manipulacji i kontrolowanej obróbki chemicznej

Opisane są protokoły wytwarzania degradowalnych termoresponsywnych hydrożeli opartych na sieciowaniu hydrazonów polimerowych oligomerów na skalę masową, mikroskalową i nanoskalę, przy czym ta ostatnia służy do przygotowania zarówno nanocząstek żelowych, jak i nanowłókien.

Wytwarzanie degradowalnych termoczułych hydrożeli w różnych skalach długości za pomocą wytłaczania reaktywnego, mikrofluidyki, samoorganizacji i elektroprzędzenia

Opracowano strategię wytwarzania przyrostowego do przetwarzania hydrożeli sieciowanych UV. Strategia ta pozwala na montaż warstwa po warstwie mikroprefabrykowanych struktur hydrożelowych, a także na montaż niezależnych komponentów, co pozwala na uzyskanie zintegrowanych urządzeń zawierających ruchome elementy, które reagują na aktywację magnetyczną.

Technika wytwarzania przyrostowego do łatwego i szybkiego wytwarzania mikromaszyn na bazie hydrożelu z komponentami reagującymi magnetycznie

Testy kropelek wody w oleju są przydatne do chemii analitycznej, ewolucji enzymów i analizy pojedynczych komórek, ale zazwyczaj wymagają mikrofluidyki do formowania kropel. W tym miejscu opisujemy emulgację z szablonami cząstek, bezprzepływowe podejście do wykonywania testów kropelkowych.

Emulgacja szablonowa cząstek umożliwia oznaczanie kropel bez mikroprzepływowości

Ta praca opisuje proste, elastyczne i tanie metody wytwarzania mikrożeli z fragmentacją ekstruzji, przetwarzania mikrożeli na granulowane hydrożele do wstrzykiwania i stosowania granulowanych hydrożeli jako farb drukarskich do zastosowań biomedycznych.

Fragmentacja hydrożeli luzem i przetwarzanie na granulowane hydrożele do zastosowań biomedycznych

Mikrożelowe pręty z komplementarnymi grupami reaktywnymi są produkowane za pomocą mikrofluidyki z możliwością łączenia się w roztworze wodnym. Anizometryczne mikrożele zacinają się i łączą w stabilne konstrukcje z większymi porami w porównaniu z systemami sferycznymi. Mikrożele modyfikowane za pomocą GRGDS-PC tworzą makroporowate konstrukcje 3D, które można wykorzystać do hodowli komórkowych.

Połączone makroporowate rusztowania 3D z prętów mikrożelowych

Minimalizacja zmienności frakcji cząstek w granulowanych rusztowaniach ułatwia powtarzalne eksperymenty. W pracy opisano metody generowania rusztowań ziarnistych o kontrolowanych frakcjach cząstek do zastosowań w inżynierii tkankowej in vitro.

Kontrolowanie frakcji cząstek w mikroporowatych rusztowaniach z wyżarzonymi cząstkami do hodowli komórek 3D

Obecny protokół opisuje platformę mikroprzepływową do badania rozwoju biofilmu w porowatych ośrodkach quasi-2D poprzez połączenie obrazowania mikroskopowego o wysokiej rozdzielczości z jednoczesnymi pomiarami różnicy ciśnień. Platforma określa ilościowo wpływ wielkości porów i natężenia przepływu płynu w porowatych ośrodkach na biozatkanie.

Platforma mikroprzepływowa do badania biozatykania w pożywkach porowatych

Ten artykuł opisuje protokoły wysokoprzepustowej produkcji mikrożelu żelowego z żelatyny metakryloylowej za pomocą urządzeń mikroprzepływowych, przekształcania mikrożeli w proszek do resuspensable (mikroaerożele), chemicznego łączenia mikrożeli w celu utworzenia granulowanych rusztowań hydrożelowych oraz opracowywania granulowanych biotuszy hydrożelowych o zachowanej mikroporowatości do biodruku 3D.

Rusztowania hydrożelowe żelatynowo-metakryloilowe granulowane: wysokoprzepustowa produkcja mikrożeli, liofilizacja, montaż chemiczny i biodruk 3D

Poznaj mikroprzepływową syntezę monodyspersyjnych mikrożeli do rusztowań MAP w medycynie regeneracyjnej. Ta metoda umożliwia precyzyjną kontrolę porowatości i wielkości porów dla lepszej integracji tkanek.

Synteza mikroprzepływowa mikrożelowych bloków budulcowych do rusztowania cząstek wyżarzonych mikroporowato

Przeglądaj więcej filmów