Name: Dostarczanie terapii kardioaktywnej w modelu zawału mięśnia sercowego u świń (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-10T12:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Poznaj trzy metody dostarczania terapii kardioaktywnej w modelu zawału mięśnia sercowego u świń: wstrzyknięcie przez śródsercową, przez śródkomorową i infuzję dożylną. Protokół zapewnia wysoką retencję lokalną i niezawodność w badaniach przedklinicznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ta praca została sfinansowana z grantów Narodowej Rady Zdrowia i Badań Medycznych APP1194139/APP1126276 (JC), Narodowej Fundacji Komórek Macierzystych Australii oraz Biura Zdrowia i Badań Medycznych Rządu Nowej Południowej Walii (JC). DS był wspierany przez Royal Australasian College of Physicians, Instytut Patologii Klinicznej i Badań Medycznych oraz Program Szkoleniowy Rządu Australijskiego. TD był wspierany przez Instytut Patologii Klinicznej i Badań Medycznych, Stypendium Rodziny Penfolds, Narodową Radę Zdrowia i Badań Medycznych (APP2002783) oraz Narodową Fundację Serca Australii (104615).

<ol><li>Vogel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ST-segment+elevation+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">ST-segment elevation myocardial infarction.</a> Nature Reviews Disease Primers. 5 (1), 39(2019).</li>
<li>Niccoli, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimized+treatment+of+ST-elevation+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Optimized treatment of ST-elevation myocardial infarction.</a> Circulation Research. 125 (2), 245-258 (2019).</li>
<li>Ezekowitz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Declining+in-hospital+mortality+and+increasing+heart+failure+incidence+in+elderly+patients+with+first+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Declining in-hospital mortality and increasing heart failure incidence in elderly patients with first myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 53 (1), 13-20 (2009).</li>
<li>Hastings, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drug+and+cell+delivery+for+cardiac+regeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Advanced+Drug+Delivery+Reviews%22%5BJournal%5D)">Drug and cell delivery for cardiac regeneration.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 84, 85-106 (2015).</li>
<li>Silva, K. A. S., Emter, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Large+animal+models+of+heart+failure%3A+a+translational+bridge+to+clinical+success%5BTitle%5D)+AND+%22JACC%3A+Basic+to+Translational+Science%22%5BJournal%5D)">Large animal models of heart failure: a translational bridge to clinical success.</a> JACC: Basic to Translational Science. 5 (8), 840-856 (2020).</li>
<li>Suzuki, Y., Yeung, A. C., Ikeno, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+representative+porcine+model+for+human+cardiovascular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedicine+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">The representative porcine model for human cardiovascular disease.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 195483(2011).</li>
<li>Thavapalachandran, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Platelet-derived+growth+factor-AB+improves+scar+mechanics+and+vascularity+after+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Platelet-derived growth factor-AB improves scar mechanics and vascularity after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (524), (2020).</li>
<li>Hou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiolabeled+cell+distribution+after+intramyocardial%2C+intracoronary%2C+and+interstitial+retrograde+coronary+venous+delivery%3A+implications+for+current+clinical+trials%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Radiolabeled cell distribution after intramyocardial, intracoronary, and interstitial retrograde coronary venous delivery: implications for current clinical trials.</a> Circulation. 112, 150-156 (2005).</li>
<li>Tousoulis, D., Briasoulis, A., Antoniades, C., Stefanadi, E., Stefanadis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+regeneration%3A+what+cells+to+use+and+how%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Heart regeneration: what cells to use and how.</a> Current Opinion in Pharmacology. 8 (2), 211-218 (2008).</li>
<li>Bonnet, G., Ishikawa, K., Hajjar, R. J., Kawase, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Direct+myocardial+injection+of+vectors%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Direct myocardial injection of vectors.</a> Methods in Molecular Biology. 1521, 237-248 (2017).</li>
<li>Marchlinski, F. E., Callans, D. J., Gottlieb, C. D., Zado, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Linear+ablation+lesions+for+control+of+unmappable+ventricular+tachycardia+in+patients+with+ischemic+and+nonischemic+cardiomyopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Linear ablation lesions for control of unmappable ventricular tachycardia in patients with ischemic and nonischemic cardiomyopathy.</a> Circulation. 101 (11), 1288-1296 (2000).</li>
<li>Polin, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocardial+unipolar+voltage+mapping+to+identify+epicardial+substrate+in+arrhythmogenic+right+ventricular+cardiomyopathy%2Fdysplasia%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Rhythm%22%5BJournal%5D)">Endocardial unipolar voltage mapping to identify epicardial substrate in arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy/dysplasia.</a> Heart Rhythm. 8 (1), 76-83 (2011).</li>
<li>Tatay, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aTatay%2C+J+%22Veterinary+Sutures+Handbook%22">Veterinary Sutures Handbook</a>. , Editorial Servet. (2018).</li>
<li>McCall, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myocardial+infarction+and+intramyocardial+injection+models+in+swine%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Protocol%22%5BJournal%5D)">Myocardial infarction and intramyocardial injection models in swine.</a> Nature Protocol. 7 (8), 1479-1496 (2012).</li>
<li>Sun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishing+a+swine+model+of+post-myocardial+infarction+heart+failure+for+stem+cell+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Establishing a swine model of post-myocardial infarction heart failure for stem cell treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. (159), e60392(2020).</li>
<li>Gwon, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+feasibility+and+safety+of+fluoroscopy-guided+percutaneous+intramyocardial+gene+injection+in+porcine+heart%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">The feasibility and safety of fluoroscopy-guided percutaneous intramyocardial gene injection in porcine heart.</a> International Journal of Cardiology. 79 (1), 77-88 (2001).</li>
<li>Krause, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Percutaneous+intramyocardial+stem+cell+injection+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%3A+first-in-man+study%5BTitle%5D)+AND+%22Heart%22%5BJournal%5D)">Percutaneous intramyocardial stem cell injection in patients with acute myocardial infarction: first-in-man study.</a> Heart. 95 (14), 1145-1152 (2009).</li>
<li>Wang, X., Shangguan, W., Li, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Angiotensin-%281-7%29+prevents+atrial+tachycardia+induced-heat+shock+protein+27+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Electrocardiology%22%5BJournal%5D)">Angiotensin-(1-7) prevents atrial tachycardia induced-heat shock protein 27 expression.</a> Journal of Electrocardiology. 51 (1-7), 117-120 (2018).</li>
<li>Klatt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+nonfibrotic+left+ventricular+hypertrophy+in+an+ANG+II-induced+chronic+ovine+hypertension+model%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reports%22%5BJournal%5D)">Development of nonfibrotic left ventricular hypertrophy in an ANG II-induced chronic ovine hypertension model.</a> Physiological Reports. 4 (17), 12897(2016).</li>
<li>Singh, B., Dyce, K. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSingh%2C+B+%22Dyce%2C+Sack%2C+and+Wensing%27s+Textbook+of+Veterinary+Anatomy%22">Dyce, Sack, and Wensing's Textbook of Veterinary Anatomy</a>. , Saunders. St. Louis, Missouri. (2018).</li>
<li>Percie du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reporting+animal+research%3A+Explanation+and+elaboration+for+the+ARRIVE+guidelines+2.0%5BTitle%5D)+AND+%22PLOS+Biology%22%5BJournal%5D)">Reporting animal research: Explanation and elaboration for the ARRIVE guidelines 2.0.</a> PLOS Biology. 18 (7), 3000411(2020).</li>
<li>Schüttler, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+practical+guide+to+setting+up+pig+models+for+cardiovascular+catheterization%2C+electrophysiological+assessment+and+heart+disease+research%5BTitle%5D)+AND+%22Lab+Animals%22%5BJournal%5D)">A practical guide to setting up pig models for cardiovascular catheterization, electrophysiological assessment and heart disease research.</a> Lab Animals. 51 (2), 46-67 (2022).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Iniekcja przeznasierdziowa do mięśnia sercowego Zaletą tej procedury jest bezpośrednia wizualizacja pracy serca i wykazano, że zapewnia większą miejscową retencję leków niż metody podawania ogólnoustrojowego 9,10,14. Jednak torakotomia jest inwazyjna, wymaga znacznych umiejętności technicznych i stwarza większe ryzyko zachorowalności i śmiertelności niż inne omawiane metody10,15. Wiedza na temat krytycznych i niepewnych etapów procedury może pomóc w zażegnaniu tego zwiększonego ryzyka.
Należy zachować dużą ostrożność podczas manipulowania sercem w celu odsłonięcia wierzchołka serca ze względu na wysokie ryzyko arytmii i związanego z nią zaburzenia hemodynamicznego. Ciągłe inwazyjne monitorowanie ciśnienia krwi i elektrokardiografia pozwalają na szybką identyfikację niedociśnienia lub niestabilnych arytmii, ułatwiając szybką interwencję i korekcję. Przemijające niedociśnienie tętnicze można na ogół leczyć bolusami metaraminolu. Utrzymujące się niedociśnienie można zmniejszyć, zmniejszając wziewny środek znieczulający (uważne monitorowanie głębokości znieczulenia) i rozpoczynając wlew wazopresyjny, jednocześnie ustalając przyczynę zmienionej hemodynamiki. Niestabilne zaburzenia rytmu serca, takie jak częstoskurcz komorowy lub migotanie komór, można leczyć za pomocą kardiowersji elektrycznej z dożylnymi lekami przeciwarytmicznymi lub bez nich.
Równie ważne dla przetrwania zwierząt jest skuteczne usunięcie wolnego gazu z jamy opłucnej przed zamknięciem klatki piersiowej. Niezastosowanie się do tego może doprowadzić do rozwoju odmy opłucnowej, narażając zwierzę na duże ryzyko upośledzenia oddechowego i śmierci po odłączeniu od respiratora mechanicznego podczas rekonwalescencji. Dodatnie ciśnienie w drogach oddechowych musi być utrzymywane przez co najmniej 30 s, aż do momentu, gdy przestanie być obserwowane bulgotanie. Silikonowa rurka jest natychmiast usuwana po ustaniu bulgotania, a klatka piersiowa jest następnie szybko zamykana. Możliwe jest również chirurgiczne założenie rurki torakostomicznej przy zamknięciu, co pozwala na ręczne usunięcie powietrza i płynu zapalnego w ciągu najbliższych 24-72 godzin. Jest to jednak trudne do utrzymania w czystości i nienaruszonym stanie, zwłaszcza jeśli zwierzęta są trzymane razem. Uszkodzenie lub zanieczyszczenie rurki może prowadzić do ropnego gardła, odmy opłucnowej lub sepsy. Z naszego doświadczenia wynika, że założenie tymczasowego drenażu klatki piersiowej nie jest wymagane, jeśli wolny gaz zostanie odpowiednio usunięty przed zamknięciem klatki piersiowej.
Przezskórne wstrzyknięcie przezwsierdziowe do mięśnia sercowego Ta metoda podawania terapeutycznego ma tę zaletę, że pozwala na miejscowe dostarczenie tkanek przy mniejszym ryzyku ze względu na jej mniej inwazyjny charakter w porównaniu z podejściem chirurgicznym10,14. Technika ta jest już stosowana w badaniach na dużych zwierzętach, z zarówno fluoroskopią, jak i mapowaniem elektromechanicznym jako wskazówką w przypadku braku bezpośredniej wizualizacji 10,16,17.
Biorąc pod uwagę, że serce nie jest pod bezpośrednim widzeniem, rozsądne jest, aby procedurolog używał ortogonalnych widoków fluoroskopowych przy wyborze miejsca wstrzyknięcia. Co więcej, wstrzyknięcie rozcieńczonego jodu kontrastowego przed i podanie leku jest niezwykle cenne w potwierdzaniu kontaktu mięśnia sercowego. Odpowiedni kontakt można potwierdzić, obserwując charakterystyczny "rumieniec mięśnia sercowego", który może być jednym z niewielu markerów powodzenia wstrzyknięcia przed pobraniem tkanki. Ze względu na ryzyko perforacji komory, zaleca się również, aby grubość ściany mięśnia sercowego w wybranym miejscu wstrzyknięcia była większa niż 9 mm14,16.
Minipompa osmotyczna żył szyjnych Minipompa osmotyczna jest popularnym urządzeniem powszechnie stosowanym w badaniach na małych zwierzętach. Rośnie zainteresowanie stosowaniem tego urządzenia w dużych modelach zwierzęcych 7,18,19, ze względu na jego wyjątkową zaletę polegającą na podawaniu środka terapeutycznego w stałej dawce przez określony czas. Możliwym ograniczeniem tej metody jest niemożność zmiany lub zatrzymania szybkości infuzji leku bez wymiany lub wyjęcia pompy. Należy to wziąć pod uwagę przed wypróbowaniem terapii w ten sposób.
Badanie to wykazało, że metoda ta może być stosowana z wysokim wskaźnikiem powodzenia u świń, z niską zachorowalnością i śmiertelnością. Należy zauważyć, że do pola operacyjnego przylega wiele ważnych struktur, w tym węzły chłonne, grasica i tętnica szyjna. Zdecydowanie zaleca się przestrzeganie metody i zapoznanie się z tekstami anatomicznymi20, aby zapobiec niezamierzonemu uszkodzeniu którejkolwiek z tych struktur. Najbardziej niepokojącym powikłaniem tej metody jest wstrząs krwotoczny spowodowany nieumyślnym uszkodzeniem żyły szyjnej lub otaczającej ją struktury. Dlatego tak ważne jest, aby tkanka miękka otaczająca żyłę szyjną została ostrożnie usunięta. Nieprawidłowe wykonanie tego kroku może prowadzić do trudności w umieszczeniu rurki minipompy lub opanowania niezamierzonego krwawienia.
W artykule opisano trzy metody dostarczania terapii kardioaktywnej. Pomimo doniesień o sukcesie każdej techniki, istnieją nieodłączne ograniczenia, które należy wziąć pod uwagę. Zabiegi inwazyjne (iniekcja przeznasierdziowa) pozwalają na zwiększenie dokładności dostarczania terapeutycznego; Niosą jednak ze sobą większe ryzyko potencjalnie śmiertelnych powikłań. Co więcej, poród inwazyjny wiąże się z większym wymaganiem umiejętności technicznych, aby zminimalizować ryzyko powikłań. Podobnie, wstrzyknięcie przezwsierdziowe pod kontrolą fluoroskopii wymaga pewnego stopnia umiejętności technicznych w zakresie cewnikowania i manipulacji sprzętem. Jeśli ta metoda zostanie wykonana nieprawidłowo, możliwe jest niepowodzenie wstrzyknięcia i śmiertelne powikłania.
Opisane metody iniekcji bezpośredniej pozwalają na jednorazowe podanie środka terapeutycznego do tkanki docelowej. Minipompa osmotyczna żył szyjnych pozwala na ogólnoustrojowe podawanie leku przez okres 7 dni. Dla porównania, ta metoda jest prostsza i wiąże się z mniejszym ryzykiem, jednak opiera się na ogólnoustrojowym leczeniu znajdującym drogę do mięśnia sercowego. Dodatkowo, po założeniu pompy, nie można przerwać podawania ani zmienić dawki bez ponownego znieczulenia zwierzęcia i odłączenia pompy.
Wszystkie metody opisane w tym artykule zostały wykonane na zwierzętach w dniu lub 2 tygodnie po zawale mięśnia sercowego. W związku z tym praca ta nie może informować o sukcesie wspomnianych metod u zwierząt zdrowych lub zwierząt poddanych alternatywnej patologii serca. Wreszcie, farmakologia i biotechnologia każdego zamierzonego środka muszą być dokładnie przemyślane, ponieważ będzie to nierozerwalnie związane ze skutecznością wybranej drogi podawania. Szczegółowe omówienie tego zagadnienia wykracza poza zakres tego manuskryptu.
Kompleksowe przedstawienie metod przedklinicznych przynosi korzyści dobrostanowi zwierząt i szerszej społeczności naukowej. Wynikająca z tego zwiększona powtarzalność procedur i wyników prowadzi do mniejszej liczby komplikacji zdrowotnych zwierząt, zmniejszenia liczby zwierząt potrzebnych do uzyskania znaczących wyników oraz większej pewności co do wyników eksperymentalnych21,22. W artykule opisano trzy metody podawania nowatorskich środków terapeutycznych w leczeniu zawału mięśnia sercowego na modelu świniowym. Przewiduje się, że dzięki wyszczególnieniu zastosowanych technik i określeniu korzyści i zagrożeń związanych z każdą z nich, naukowcy będą w stanie wygodnie tworzyć spójne i wiarygodne modele przedkliniczne, które będą odpowiadały ich celom badawczym.

Choroba wieńcowa (CAD) i związany z nią zawał mięśnia sercowego z uniesieniem odcinka ST (STEMI) są najczęstszymi przyczynami zgonów na całym świecie. W ciągu ostatnich dwóch dekad poczyniono ogromne postępy w zmniejszaniu śmiertelności wewnątrzszpitalnej pacjentów z STEMI, dzięki wprowadzeniu przezskórnej interwencji wieńcowej, terapii fibrynolitycznych i standaryzacji algorytmów leczenia, aby zapewnić terminowe osiągnięcie reperfuzji1,2,3. Mimo to zachorowalność związana ze STEMI pozostaje znaczącym obciążeniem, co stwarza ogromną potrzebę opracowania nowych terapii kardioprotekcyjnych i regeneracyjnych2,3. Istotnym elementem rozwoju terapeutycznego jest określenie, w jaki sposób nowa terapia ma być podawana4. Bezpieczeństwo, skuteczność i wykonalność każdej metody muszą być dopasowane do charakterystyki samej terapii.
Fizjologicznie istotne duże modele zwierzęce są kluczowe w ocenie tych atrybutów różnych strategii terapeutycznych5. Ze względu na podobieństwa do ludzi w fizjologii układu krążenia, anatomii naczyń wieńcowych i stosunku masy serca do masy ciała, świnie są jednym z preferowanych gatunków w przedklinicznej ocenie nowych terapii zawału mięśnia sercowego6. Wcześniej używaliśmy modelu STEMI u świń, aby zademonstrować zdolność naprawczą terapii rekombinowanym białkiem7 i kontynuujemy badania nad nowymi terapiami farmakologicznymi, komórkowymi i genetycznymi przy użyciu tego modelu. Opisano tutaj trzy techniki podawania terapeutycznego stosowane w modelach świń po wytworzeniu zawału: torakotomia i iniekcja przeznasierdziowa, przezskórna iniekcja przezwsierdziowa oraz implantacja minipompy osmotycznej żyły szyjnej. Pierwsze dwie metody umożliwiają miejscowe dostarczanie do tkanek, zmniejszając wymagane dawki, efekty niezamierzone i metabolizm pierwszego przejścia w wątrobie8,9,10. Minipompa osmotyczna umożliwia ciągłe dostarczanie leku o krótkim okresie półtrwania, eliminując zależność od pompy infuzyjnej i opatentowanej kaniuli dożylnej, które są trudne do wprowadzenia w dużych modelach zwierzęcych.
Opisując te techniki, mamy nadzieję, że ten artykuł może pomóc naukowcom zajmującym się translacją w badaniu nowych środków kardioprotekcyjnych lub regeneracyjnych po zawale mięśnia sercowego na dużych modelach zwierzęcych.

<table><tbody><tr><td><mocne>Centralne umieszczenie linii</mocne></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>2-0</td><td>szwy Ethicon</td><td>JJ9220</td><td></td></tr><tr><td>Pediatryczny dwukanałowy zestaw do cewnikowania żył centralnych Arrow' z niebieskim cewnikiem FlexTip (zawiera igłę kuchenną 18 g i drut 0,035 cala z końcówką J)</td><td>Teleflex</td><td>CS-14502</td><td></td></tr><tr><td>Białko zielonej fluorescencji Central Line (GFP)</td><td>Abcam</td><td>ab13970</td><td>Stosunek rozcieńczenia 1:100</td></tr><tr><td>Histology przeciwciała</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ku80</td><td>Cell Signalling Technology</td><td>C48E7</td><td>Stosunek rozcieńczenia 1:500</td></tr><tr><td>Skalpel nr 11</td> System ultrasonograficzny <td>Swann-Morton</td><td>203</td><td></td></tr><tr><td>Sparq'</td><td>Philips</td><td>MP11742 Medpick</td><td></td></tr><tr><td>Sterylna osłona sondy ultradźwiękowej</td><td>Atris</td><td>28041947</td><td></td></tr><tr><td>Kurtka dla świń z kieszenią, rozmiar 'Medium'Lomir</td> <td>Biomedical</td><td>SS J2YJJET</td><td></td></tr><tr><td>Implantacja minipompy osmotycznej żyły szyjnej</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adson Brązowe kleszczyki do tkanek</td><td>Icon Artykuły medyczne</td><td>KLINI316012</td><td></td></tr><tr><td>Bellucci Retraktor samozabezpieczający</td><td>surgicalinstruments.net.au</td><td>grupa-24.26.02</td><td>Samozatrzymujący się retraktor tkankowy</td></tr><tr><td>Ołówki elektrochirurgiczne z elektrodami powlekanymi "Edge" Covidien</td><td></td><td>E2450H</td><td>Ołówek kauteryczny</td></tr><tr><td>Nożyczki Metzenbaum</td><td>Icon Artykuły medyczne</td><td>ARMO3250</td><td></td></tr><tr><td>Ostrze skalpela nr 22 Szew</td> nylonowy <td>Swann-Morton</td><td>208</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; (2:0, 3:0)</td><td>Ethicon</td><td>D9635, 663G</td><td></td></tr><tr><td>Minipompka do infuzji osmotycznej</td><td>Alzet</td><td>2ML1, 2ML2, 2ML4</td><td></td></tr><tr><td>Naczyniowe opaski silikonowe</td><td>Vecmedical</td><td>95001</td><td></td></tr><tr><td>Szew Vicryl (5-0)</td><td>Ethicon</td><td>W9982</td><td></td></tr><tr><td>Przezskórne wstrzyknięcie przezsercowe</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Artis Zee' C-Arm Fluoroscopy&nbsp;</td><td>Siemens&nbsp;</td><td>IR-19-1994</td><td></td></tr><tr><td>System CARTO' 3&nbsp; &nbsp;</td>Oprogramowanie do mapowania elektrofizjologicznego <td>Biosense Webster</td><td></td><td>i System</td></tr><tr><td>Cook Access Needle</td><td>Cook Medical</td><td>G07174</td><td>Igła do kaniulacji</td></tr><tr><td>Fast-Cath' Introducer (6 francuskich, 8 francuskich)</td><td>Abbott</td><td>406204, 406142</td><td>Osłonka naczyniowa z wprowadzaczem i prowadnikiem</td></tr><tr><td>Cewnik iniekcyjny Myostar'</td><td>Biosense Webster</td><td>121117S, 121119S, 1211120S</td><td>Cewnik do iniekcji domięśniowej</td></tr><tr><td>serca Skalpel nr 11</td><td>Swann-Morton</td><td>203</td><td></td></tr><tr><td>Omnipaque' Iohexol Contrast</td><td>GE Healthcare</td><td>AUST R 39861&nbsp;</td><td>Jodowany środek kontrastowy</td></tr><tr><td>System ultrasonograficzny Sparq</td><td>Philips</td><td>MP11742 Medpick</td><td></td></tr><tr><td>Sedation & znieczulenie ogólne</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Compound Mleczan sodu Hartmann's Solution</td><td>Free flex</td><td>894451</td><td></td></tr><tr><td>Fentanyl 50 mcg/ml</td><td>Pfizer</td><td>AUST R 107027.</td><td>Znieczulenie dożylne i analgezja</td></tr><tr><td>Forthane' Isoflurane</td><td>Abbott</td><td>AUST R 29656&nbsp;</td><td>Wziewny środek znieczulający</td></tr><tr><td>Aparat anestezjologiczny GE Aestiva 5&nbsp;</td><td>Datex Ohmeda</td><td>17002-9, 17002A9 Avante Health Solutions</td><td>Maszyna anestezjologiczna&nbsp;</td></tr><tr><td>Hypnovel' Midazolam 5 mg / ml</td><td>Roche</td><td>AUST R 13726</td><td>Uspokajająca</td></tr><tr><td>Kaniula dożylna</td><td>BD Angiocath</td><td>381137</td><td>Kaniula 20 G</td></tr><tr><td>Ketamil' Ketamina 10 mg / ml</td><td>Numer</td><td>APVMA: 51188c&nbsp;</td><td>środek uspokajający</td></tr><tr><td>Laryngoskop</td><td>Miller</td><td>VDI-6205</td><td></td></tr><tr><td>Medetomidyna 1 mg/ml</td><td>Ilium</td><td>Numer APVMA 64251; Numer ACVM A10488&nbsp;</td><td>środek uspokajający</td></tr><tr><td>Metaraminol 10 mg/ml</td><td>Phebra</td><td>AUST R 284784</td><td>Krótko działający wazopresor</td></tr><tr><td>Metadon 10 mg/ml</td><td>Ilium</td><td>Numer APVMA: 63712&nbsp;</td><td>Środek uspokajający, Lek podlegający ograniczeniom</td></tr><tr><td>Onsetron' Ondansetron 2 mg/ml</td><td>Accord Healthcare</td><td>AUST R 205593&nbsp;</td><td>Działa przeciwwymiotnie</td></tr><tr><td>Propofol-Lipuro' Propofol 10 mg/ml</td><td>Braun</td><td>AUST R 142906&nbsp;</td><td>Znieczulenie dożylne</td></tr><tr><td>Pulsoksymetr&nbsp;</td><td>Przenośny pulsoksymetr</td> <td>Meditech</td><td>GVPMT-M3S</td></tr><tr><td>Podstawowa rurka dotchawicza Shiley' z mankietem (rozmiar 5.5 i 6.0)</td> <td>Medtronic</td><td>86108-, 86109-Shiley</td><td></td></tr><tr><td>' Stylik do intubacji, 10 Fr</td><td>Medtronic</td><td>85864</td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu 0,9%</td> <td>Free flex</td><td>FAH1322</td><td></td></tr><tr><td><silny>Torakotomia i wstrzyknięcie komórek nasierdzia< / silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Igła do insuliny 27 G</td><td>Terumo</td><td>51907</td><td></td></tr><tr><td>Adson Brązowe kleszcze do tkanek</td><td>Icon Artykuły medyczne</td><td>KLINI316012</td><td></td></tr><tr><td>System CARTO' 3&nbsp; &nbsp;</td>Oprogramowanie do mapowania elektrofizjologicznego <td>Biosense Webster</td><td></td><td>i System</td></tr><tr><td>Cefazolin 1 g Fiolka</td><td>AFT Farmaceutyki</td><td>9421900137367 CH2</td><td>Profilaktyka antybiotykowa&nbsp;</td></tr><tr><td>Rurka drenażowa klatki piersiowej</td><td>SurgiVet</td><td>SKU-336</td><td></td></tr><tr><td>Igła Cook Access</td><td>Cook Medical</td><td>G07174</td><td>Igła do kaniulacji</td></tr><tr><td>Cooley Retraktor sternotomii Pediatryczny</td><td>Millennium Chirurgiczny</td><td>9-61287</td><td></td></tr><tr><td>Durogesic' 100 mcg/h Plaster fentanylowy</td><td>Janssen</td><td>AUST R 112371&nbsp;</td><td>Analgezja pooperacyjna</td></tr><tr><td>Ołówki elektrochirurgiczne z elektrodami powlekanymi "Edge"</td><td>Ołówek kauteryczny</td><td>Covidien</td><td>E2450H</td></tr><tr><td>Ołówki elektrochirurgiczne z elektrodami powlekanymi "Edge" Ołówek</td><td>kauteryczny</td><td>Covidien</td><td>E2450H</td></tr><tr><td>Fast-Cath' Introducer (6 francuskich, 8 francuskich)</td><td>Abbott</td><td>406204, 406142</td><td>Osłonka naczyniowa z wprowadzaczem i prowadnikiem</td></tr><tr><td>Lignocaina 20 mg/ml</td><td>Pfizer</td><td>AUST R 49296, AUST R 49297, AUST R 49293 i AUST R 49295.</td><td>Znieczulenie miejscowe, antyarytmiczne</td></tr><tr><td>Marcaine' Bupiwakaina 0,5%</td><td>Pfizer</td><td>AUST R 48328&nbsp;</td><td>Znieczulenie miejscowe.&nbsp;</td></tr><tr><td>Nożyczki Metzenbaum</td><td>Icon Zaopatrzenie medyczne</td><td>ARMO3250</td><td></td></tr><tr><td>Skalpel nr 22 Szew</td> nylonowy <td>Swann-Morton</td><td>208</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp; (2:0, 3:0)</td><td>Ethicon</td><td>D9635, JJ76264</td><td></td></tr><tr><td>Rozmiar 1 Szew PDS</td><td>System</td><td></td> ultrasonograficzny Ethicon JJ75414 <td></td></tr><tr><td>Sparq'</td><td>Philips</td><td>MP11742 Medpick</td><td></td></tr><tr><td>Sterylna gaza</td><td>Kerlix</td><td>KE5072</td><td></td></tr><tr><td>Sterylne gąbki do laparotomii</td><td>Cewnik Propax</td><td>2907950</td><td></td></tr><tr><td>Thermocool Smartouch</td><td>Biosense Webster</td><td>D133601, D133602, D133603</td><td>cewnik do mapowania nasierdzia</td></tr></tbody></table>

dostarczanie terapii kardioaktywnej w modelu zawału mięśnia sercowego u świń

Delivery of Cardioactive Therapeutics in a Porcine Myocardial Infarction Model

Zawał mięśnia sercowego jest jedną z głównych przyczyn zgonów i niepełnosprawności na całym świecie, dlatego istnieje pilna potrzeba opracowania nowych strategii kardioprotekcyjnych lub regeneracyjnych. Istotnym elementem opracowywania leku jest określenie, w jaki sposób nowy lek ma być podawany. Fizjologicznie istotne duże modele zwierzęce mają kluczowe znaczenie w ocenie wykonalności i skuteczności różnych strategii terapeutycznych. Ze względu na podobieństwa do ludzi w fizjologii układu krążenia, anatomii naczyń wieńcowych i stosunku masy serca do masy ciała, świnie są jednym z preferowanych gatunków w przedklinicznej ocenie nowych terapii zawału mięśnia sercowego. Niniejszy protokół opisuje trzy metody podawania kardioaktywnych środków terapeutycznych w modelu świniowym. Po przezskórnie wywołanym zawale mięśnia sercowego, samice świni rasy landrace były leczone nowymi środkami poprzez: (1) torakotomię i wstrzyknięcie przeznasierdziowe, (2) wstrzyknięcie przezwsierdziowe przez cewnik lub (3) wlew dożylny za pomocą minipompy osmotycznej żyły szyjnej. Procedury stosowane w każdej technice są powtarzalne, co skutkuje niezawodnym dostarczaniem leków kardioaktywnych. Modele te można łatwo dostosować do indywidualnych projektów badań, a każda z tych technik dostarczania może być wykorzystana do zbadania różnych możliwych interwencji. W związku z tym metody te są użytecznym narzędziem dla naukowców zajmujących się badaniami translacyjnymi nad nowatorskimi metodami biologicznymi w naprawie serca po zawale mięśnia sercowego.

Torakotomia i wstrzyknięcie komórek do osierdzia 
Z 29 zwierząt, u których przeprowadzono torakotomię i wstrzyknięcie do osierdzia, 26 przeżyło. Analiza histologiczna potwierdziła przyjęcie ludzkich komórek dostarczonych tą metodą u wszystkich przeżywających zwierząt (Rysunek 1E). U jednego zwierzęcia podczas wstrzykiwania komórek wystąpiły śmiertelne arytmie, których nie udało się zniwelować poprzez reanimację. U innego podczas zamykania rany wystąpiła elektryczna aktywność bez tętna, a mimo przedłużonego stosowania dodatniego ciśnienia w drogach oddechowych nie udało się go uratować. Trzecie zwierzę po ekstubacji wymiotowało i doznało zatrzymania oddechu. Reanimacja tego zwierzęcia zakończyła się niepowodzeniem.
U dwóch zwierząt wystąpiły poważne powikłania, ale udało się je uratować. U jednego zwierzęcia podczas wstrzyknięcia domięśniowego rozwinęła się migotanie komór, a następnie dokonano reanimacji przy użyciu wewnętrznych elektrod defibrylacyjnych i masażu serca. Drugie zwierzę zwymiotowało po ekstubacji, co doprowadziło do krótkiego zatrzymania oddechu, jednak szybko reintubowano zwierzę i w pełni odzyskało ono sprawność. Wszystkie te zdarzenia miały miejsce podczas wczesnych eksperymentów, a liczba zdarzeń niepożądanych malała wraz ze wzrostem doświadczenia zespołu w stosowaniu protokołu (Tabela 1).
Implantacja osmotycznej minipompy do żyły szyjnej 
Nie zgłoszono żadnych przypadków śmiertelności ani poważnych powikłań związanych z implantacją osmotycznej minipompy do żyły szyjnej. U większości z siedmiu zwierząt wystąpił łagodny obrzęk w miejscu operacyjnym w ciągu pierwszych 24 h, który ustąpił bez interwencji. Analiza ELISA przeprowadzona na surowicy w 3. dniu po implantacji pompy wykazała skuteczność urządzenia, osiągając istotne stężenie ludzkiego czynnika wzrostu pochodzenia płytkowego-AB (PDGF-AB) we krwi w porównaniu z grupą kontrolną7 (Rycina 2E).
Przezskórne wstrzykiwanie przezwsierdniowe 
Łącznie 22 zwierzęta otrzymały wstrzyknięcia wsierdniowe. Z tych wstrzyknięć 17 uznano za „skuteczne”, co określono na podstawie fluorescencji lub barwienia tuszem zaobserwowanego w tkance docelowej podczas sekcji (Rycina 3B). Nie odnotowano żadnych zgonów związanych z tą procedurą. U jednego zwierzęcia rozwinął się niewielki wysięk osierdziowy w wyniku perforacji prawej komory. Miał on charakter samoograniczający i nie doprowadził do upośledzenia funkcji układu sercowo-naczyniowego. To samo zwierzę padło, jednak stało się to w wyniku niezwiązanej z tym dodatkowej procedury przeprowadzonej po wstrzyknięciu wewnątrzmięśniowym.
<img alt="Procedura chirurgiczna, mapowanie serca, mikroskopia fluorescencyjna; eksperyment z elektrofizjologii, tkanka serca." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64177/64177fig01.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Transepicardialna iniekcja kardiomiocytów umożliwia bezpośrednią wizualizację serca i pozwala na dostarczenie wysokiego odsetka żywotnych komórek do mięśnia sercowego. (A) Wierzchołek serca zostaje odsłonięty za pomocą wilgotnej gazy prowadzonej pod podstawę serca. (B) Cewnik do mapowania epikardialnego wyznacza bliznę oraz strefy brzeżne i oznacza miejsca iniekcji. (C) Do transepicardialnej iniekcji komórek do mięśnia sercowego używa się igły 31 G. (D) Mapa napięcia epikardialnego z oznaczeniem miejsc iniekcji. Fioletowy: prawidłowe napięcie, zdrowy mięsień sercowy; Czerwony: nieprawidłowe napięcie, chory mięsień sercowy; Szare kropki: miejsca iniekcji. Po uśmierceniu zwierzęcia serce jest pobierane i utrwalane w formalinie do dalszej oceny histologicznej. Na obrazie (E) przeszczepione ludzkie komórki są wykrywane poprzez immunobarwienie przeciwciałem przeciwjądrowym przeciwko białku ludzkiemu Ku80 oraz przeciwciałem anty-GFP. Pasek skali = 200 µm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64177/64177fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Proces implantacji chirurgicznej, eksperyment uwalniania PDGF; wykres przedstawiający poziomy PDGF w grupie kontrolnej i badawczej." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64177/64177fig02.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rycina 2Wprowadzenie minipompy do żyły szyjnej zapewnia bezpieczną i niezawodną metodę dostarczania PDGF w okresie 7 dni. (AOdsłania się prawą żyłę szyjną i usuwa tkankę miękką z okolic naczynia.B) Naczynia zostają zamknięte za pomocą podwiązek naczyniowych, a następnie za pomocą igły 14 G wykonuje się nakłucie, przez które wprowadza się rurkę minipompy. (CPrzewód minipompy zostaje wprowadzony do żyły, a korpus minipompy zostaje przymocowany do sąsiednich tkanek miękkich.D) Korpus minipompy i cewka przed implantacją. (E) Stężenie rekombinowanego białka w surowicy po podaniu poprzez minipompę oraz poziom PDGF-AB zmierzono za pomocą testu ELISA u każdego zwierzęcia w 3. dobie po implantacji. Wykazano, że zwierzęta otrzymujące PDGF-AB miały znacznie wyższe stężenie PDGF-AB we krwi niż zwierzęta kontrolne, co potwierdziło skuteczność metody podawania za pomocą osmotycznej minipompy. **oznacza statystycznie istotną różnicę między grupami (p = 0,005, test U Manna-Whitneya) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64177/64177fig02large.jpg" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Obraz rentgenowski i fluorescencyjny cewników do wizualizacji przewodu żółciowego w procedurze chirurgicznej." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64177/64177fig03.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3: Przezendokardialna iniekcja domięśniowa umożliwia małoinwazyjną metodę podawania środków terapeutycznych. (A) Fluoroskopowy obraz w prawej projekcji skośnej przedniej, przedstawiający cewnik do iniekcji (biała strzałka) podający materiał kontrastowy (żółta strzałka) do mięśnia sercowego. Podanie materiału kontrastowego odbywa się zarówno przed, jak i po iniekcji terapeutycznej, aby potwierdzić prawidłowe umiejscowienie igły w mięśniu sercowym. (B) Wstrzyknięty wektor wykazywał ekspresję zielonego białka fluorescencyjnego (GFP), dzięki czemu wstrzyknięty materiał fluorescował podczas pobierania tkanek, co potwierdziło powodzenie iniekcji. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64177/64177fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td ></td >
			<td >Iniekcja transepikardialna (n = 29)</td >
			<td >Iniekcja transendokardialna (n = 22)</td >
			<td >Osmotyczna minipompa (n = 7)</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Śmiertelność</td >
			<td >3</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Powymiotowanie i zatrzymanie oddechu pooperacyjnego</td >
			<td >1</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Migotanie komór podczas iniekcji</td >
			<td >1</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Elektryczna aktywność bez tętna podczas zamykania klatki piersiowej</td >
			<td >1</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Zachorowalność</td >
			<td >0</td >
			<td >1</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Odma opłucnowa</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Wysięk opłucnowy</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Perforacja komory serca</td >
			<td >0</td >
			<td >1</td >
			<td >0</td >
		</tr >
		<tr >
			<td >Krwotok</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
			<td >0</td >
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 1: Lista powikłań.

Obecny protokół opisuje trzy metody podawania kardioaktywnych środków terapeutycznych w modelu świniowym. Samice świń rasy lądowej otrzymywały leczenie poprzez: (1) torakotomię i wstrzyknięcie przeznasierdziowe, (2) wstrzyknięcie przezwsierdziowe za pomocą cewnika lub (3) wlew dożylny za pomocą minipompy osmotycznej żyły szyjnej.

Dostarczanie terapii kardioaktywnej w modelu zawału mięśnia sercowego u świń

Myocardial infarction is one of the leading causes of death and disability worldwide, and there is an urgent need for novel cardioprotective or ...

Protokół opisuje trzy powtarzalne techniki dostarczania leków kardioaktywnych świniom. Jest to bardzo interesujące dla naukowców zajmujących się translacją poszukujących nowatorskich biologicznych podejść do naprawy serca po zawale mięśnia sercowego. Na tym filmie pokazano podawanie leku za pomocą wstrzyknięcia do mięśnia sercowego po chirurgicznym odsłonięciu serca.Technika ta pozwala na dokładne dostarczanie leku pod bezpośrednim kątem i wiąże się z wysoką miejscową retencją dostarczonego produktu. Dzisiejszą procedurę zademonstruje ze mną Juntang Lu, weterynarz z naszego laboratorium. Pomagać mu będą dr Alan Marcus, anestezjolog weterynaryjny, dr Sally Kim, Samuel Turnbull i Mr.Vu Tran.Torakotomię i wstrzyknięcie komórek nasierdzia należy rozpocząć od dożylnego profilaktycznego podania antybiotyków i kontynuować je co 90 minut przez cały czas trwania zabiegu. Ustawić zwierzę w prawej bocznej pozycji leżącej i przyłożyć plaster z fentanylem w dawce 100 mikrogramów na godzinę do płaskiej płaszczyzny za uszami świni. Przykryj go opatrunkiem adhezyjnym lub szwem 2-0.Skonfiguruj system mapowania elektroanatomicznego, okablowanie i łatki zgodnie ze specyfikacją produktu. Przed zaznaczeniem 10-centymetrowej poziomej linii między żebrami czwartym a piątym na zwierzęciu. Przygotować mieszaninę lidokainy i bupiwakainy w strzykawce z igłą o rozmiarze 25 i wykonać zabieg blokady linii skórnej na aseptycznym miejscu operacyjnym, jak opisano w manuskrypcie.Po udrapowaniu zwierzęcia należy wykonać 10-centymetrowe nacięcie skóry wzdłuż zaznaczonej linii za pomocą skalpela z numerem 22. Za pomocą kauteryzacji monopolarnej pogłębić nacięcie przez leżące poniżej warstwy mięśni, aż do osiągnięcia mięśni międzyżebrowych. Przygotować sterylną strzykawkę z bupiwakainą i lignokainą.Przymocuj igłę o rozmiarze 25 i włóż igłę na ogonową krawędź czwartego żebra. Powoli wstrzyknąć jedną czwartą objętości strzykawki, nie przechodząc przez żyłę międzyżebrową lub tętnicę. Powtórz to w trzech kolejnych miejscach wzdłuż ogonowej krawędzi czwartego żebra.Po potwierdzeniu przez anestezjologa należy ostrożnie naciąć mięśnie międzyżebrowe za pomocą nożyczek Metzenbaum. Upewnij się, że wyłączyłeś wentylator i naciąłeś opłucną. Po wykonaniu nacięcia ponownie włącz wentylator i dostosuj ciśnienie dodatnie i wydechowe do czterech centymetrów wody.Umieść samozabezpieczające się zwijacze żeber między żebrami i powoli je otwieraj, aby odsłonić serce. Za pomocą kleszczy tkankowych delikatnie chwyć osierdzie i naciąć nożyczkami Metzenbauma, aby uzewnętrznić serce. Umieść tymczasowe szwy rozciągowe 2-0 na obu końcach i bokach nacięcia osierdzia, aby przymocować je do ściany klatki piersiowej.Stwórz studzienkę osierdziową, upewniając się, że boki osierdzia są podparte, aby dobrze nasierdzia były jak najpłytsze. Po zakończeniu upakuj obszar otaczający serce za pomocą zwilżonych wacików lub gąbek do laparotomii, aby zapobiec wysuszeniu odsłoniętych tkanek. Następnie dostarcz wierzchołek serca z jamy osierdzia palcem wskazującym za lewą komorą.Uważaj, aby zminimalizować ucisk lewej komory. Natychmiast przywróć serce do jamy osierdzia i podejmij niezbędne kroki w celu poprawy parametrów hemodynamicznych przed dalszym zwichnięciem. Użyj cewnika do mapowania elektrofizjologicznego i stwórz elektroanatomiczną mapę napięcia powierzchni nasierdzia lewej komory.Zidentyfikuj blizny, granice i odległe strefy za pomocą standardowych odcięć napięcia. Zegnij igłę terapeutycznej strzykawki do dostarczania w rozmiarze 27 pod kątem około 80 do 90 stopni i wsuń igłę w tkankę docelową pod płytkim kątem. Naciskać na tłok strzykawki, aby wypuścić od jednej czwartej do jednej trzeciej całkowitej objętości.Opisz lokalizację miejsca wstrzyknięcia na wygenerowanej mapie napięcia nasierdziowego za pomocą cewnika do mapowania elektrofizjologicznego. Częściowo wyjąć igłę, przekierować ją do mięśnia sercowego i wypuścić kolejną jedną czwartą do jednej trzeciej objętości strzykawki. Powtórz tę czynność, aby dostarczyć pożądaną dawkę.Następnie usuń waciki z serca i delikatnie wyjmij chustę pod sercem, aby powróciła do neutralnej pozycji. Usuń szwy odciągowe 2-0 z osierdzia przed rozluźnieniem i usunięciem zwijacza z klatki piersiowej. Zamknij klatkę piersiową, umieszczając szwy z polidioksanonu w rozmiarze pierwszym lub PDS przez przestrzenie między żebrami trzecim i czwartym oraz żebrami piątym i szóstym za pomocą okrągłej igły z końcówką.Włóż krótką silikonową rurkę do brzusznej krawędzi nacięcia przed zaciśnięciem i zawiązaniem szwów przybliżających żebra. Umieść wolny koniec rurki w misce ze sterylną solą fizjologiczną, aby uzyskać podwodny, szczelny drenaż jamy opłucnej. Aby usunąć wolne powietrze z klatki piersiowej, przekręć wentylator na ustawienie swobodnego oddychania.Użyj worka z bialkiem w obwodzie ponownego oddychania, aby zapewnić stałe dodatnie ciśnienie w drogach oddechowych i kontynuuj to ciśnienie, aż w misce soli fizjologicznej nie będzie już obserwowane bulgotanie. Następnie wyjmij silikonową rurkę. Następnie zamknij leżące nad nią warstwy mięśni w prosty ciągły wzór za pomocą wchłanialnych szwów 2-0 i zamknij skórę w prosty ciągły wzór za pomocą niewchłanialnego szwu 2-0 lub 3-0.Na koniec nałóż opatrunek adhezyjny na miejsce operacji i umieść rozproszone proste, przerwane szwy, aby pomóc w utrzymaniu opatrunku na miejscu. Spośród 29 zwierząt, które przeszły torakotomię i wstrzyknięcie do nasierdzia, przeżyło 26. Analiza histologiczna potwierdziła, że wszczepienie komórek ludzkich zakończyło się sukcesem u wszystkich tych zwierząt, które przeżyły.Ostrożne i delikatne obchodzenie się z sercem przez chirurga, wraz z rygorystyczną obserwacją parametrów hemodynamicznych przez anestezjologa mają kluczowe znaczenie dla zapewnienia bezpieczeństwa tej procedury. Może być konieczne stosowanie leków wazopresyjnych w celu skorygowania przejściowej niestabilności hemodynamicznej. Ten powtarzalny protokół ułatwia niezawodne dostarczanie leków do mięśnia sercowego i może być dostosowany do indywidualnych projektów badań.

delivery-cardioactive-therapeutics-porcine-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Opisano metodę transferu genów w leczeniu niedokrwiennej niewydolności serca z wykorzystaniem modelu zawału mięśnia sercowego u świń. Nasza prosta i powtarzalna metoda pozwala na łatwą ocenę skuteczności różnych transferów genów w sposób bardzo prosty i odtwarzalny.

Transfer genów w przedklinicznym modelu niedokrwiennej niewydolności serca

Ten protokół opisuje model zawału mięśnia sercowego (MI) świni za pomocą 90-minutowej zamkniętej klatki piersiowej zamknięcia balonu wieńcowego lewej tętnicy zstępującej przedniej (LAD), po której następuje reperfuzja. Ponadto przedstawiono również protokół dla kilku parametrów końcowych, takich jak czynność serca, hemodynamika, opór mikronaczyniowy i wielkość zawału.

Zawał mięśnia sercowego i ocena wyników funkcjonalnych u świń

Opracowaliśmy model dla świń do docelowego dostarczania środków farmakologicznych w przestrzeni osierdziowej/płynie. Stosując to podejście, można badać względne korzyści podawanych leków w przypadku indukowanego migotania przedsionków, względnych okresów refrakcji i/lub ochrony niedokrwiennej.

Badanie skuteczności środków farmakologicznych w docelowym modelu dostarczania osierdzia u świń

Rzetelna i dokładna ocena wyników jest kluczem do przełożenia terapii przedklinicznych na leczenie kliniczne. W niniejszej pracy opisano, w jaki sposób można ocenić trzy klinicznie istotne pierwszorzędowe parametry końcowe dotyczące wydolności i uszkodzenia serca w modelu ostrego zawału mięśnia sercowego u świni.

Pierwszorzędowa ocena wyniku w świńskim modelu ostrego zawału mięśnia sercowego

Tutaj demonstrujemy protokół standaryzacji procedur pobierania próbek z ustalonego modelu ostrego zawału mięśnia sercowego u świń, aby zwiększyć jego wartość translacyjną w zrozumieniu patofizjologii niedokrwienia mięśnia sercowego/uszkodzenia reperfuzyjnego i przetestować nowych kandydatów na leki.

Udoskonalenie modelu zawału mięśnia sercowego u świń w zamkniętej klatce piersiowej poprzez standaryzację procedur pobierania próbek tkanek i krwi

Staraliśmy się stworzyć świński model niewydolności serca wywołanej zablokowaniem lewej tętnicy obwodowej i szybką stymulacją, aby przetestować efekt i bezpieczeństwo domięśniowego podawania komórek macierzystych w terapiach komórkowych.

Opracowanie świńskiego modelu niewydolności serca po zawale mięśnia sercowego do leczenia komórkami macierzystymi

Terapia genowa mięśnia sercowego w chorobie niedokrwiennej serca jest bardzo obiecująca dla przyszłych terapii. W tym miejscu przedstawiamy duży model zwierzęcy do oceny skuteczności terapii genowej w niedokrwiennym sercu.

Duży model zwierzęcy do oceny skuteczności terapii genowej w chorobie niedokrwiennej serca

Modele zwierzęce zawału mięśnia sercowego (MI), które naśladują naturalny proces choroby u ludzi, są kluczowe dla zrozumienia mechanizmów patofizjologicznych i testowania bezpieczeństwa i skuteczności nowych terapii. W tym miejscu opisujemy model trzody chlewnej MI utworzony przez zastosowanie przezskórnej cewki embolizującej.

Zawał mięśnia sercowego przez przezskórne wprowadzenie cewki embolizacyjnej w modelu trzody chlewnej

To badanie przedstawia chirurgiczny model przewlekłego niedokrwienia mięśnia sercowego spowodowanego postępującym zwężeniem tętnicy wieńcowej, skutkującym upośledzeniem funkcji serca bez zawału. Po niedokrwieniu zwierzęta przechodzą pomostowanie tętnic wieńcowych poza pompą z nasierdziowym umieszczeniem plastra kolagenowego obciążonego egzosomami pochodzącymi z komórek macierzystych. Ta terapia wspomagająca poprawia funkcję mięśnia sercowego i powrót do zdrowia.

Chirurgiczny model przewlekłego niedokrwienia mięśnia sercowego u świń leczony egzosomem z plastrem kolagenowym i pomostowaniem aortalno-wieńcowym poza pompą

Protokół ten demonstruje zastosowanie wszczepialnego kardiowerter-defibrylatora (ICD) do niezawodnego indukowania arytmii komorowych, wykonywania kardiowersji wewnętrznej oraz uzyskania nagrań EKG wewnątrzsercowych w modelu wieprzowym.

Model zatrzymania akcji serca u wieprzi z użyciem wszczepialnego defibrylatora

Poznaj trzy metody dostarczania terapii kardioaktywnej w modelu zawału mięśnia sercowego u świń: wstrzyknięcie przez śródsercową, przez śródkomorową i infuzję dożylną. Protokół zapewnia wysoką retencję lokalną i niezawodność w badaniach przedklinicznych.

Dostarczanie terapii kardioaktywnej w modelu zawału mięśnia sercowego u świń

Przeglądaj więcej filmów