Opracowanie i ocena szczurzego modelu ubytków chrząstki pełnej grubości

Protokół ten nie tylko naśladuje występowanie i rozwój klinicznej FTCD, ale także zapewnia wiarygodny model zwierzęcy do oceny leczenia przeciwko FTCD. Ale ta technika jest łatwa do wykonania i umożliwia obserwację wzrostu natychmiast po urazie. Technika ta może z powodzeniem naśladować kliniczne wady chrząstki, stanowiąc platformę do badania patologicznego procesu wad chrząstki i opracowywania odpowiednich leków terapeutycznych.

Metoda ta może być stosowana do badania urazowych wad chrząstki, a konkretnie pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów. Podczas wypróbowywania tej techniki po raz pierwszy ważne jest, aby zgiąć kość piszczelową i strzałkową pod kątem 90 stopni, aby w pełni odsłonić ślimak kłykcia kości udowej i utrzymać wiertło prostopadłe do powierzchni chrząstki. Zacznij od umieszczenia znieczulonego szczura na stole operacyjnym w pozycji leżącej.

Umieść sterylną serwetę na szczurze, odsłaniając ogolony i zdezynfekowany staw kolanowy. Za pomocą ostrza skalpela numer 11 wykonaj jednocentymetrowe pionowe nacięcie na środku stawu kolanowego. I przeciąć torebkę stawową i ścięgno mięśnia czworogłowego uda wzdłuż przyśrodkowej krawędzi rzepki.

Następnie obróć rzepkę na zewnątrz i zegnij kość piszczelową i strzałkową pod kątem 90 stopni, aby odsłonić kłykieć kości udowej ślimaka. Za pomocą wiertła okrągłego o średnicy 1,6 milimetra wykonaj ubytek chrząstki o pełnej grubości i głębokości 0,1 milimetra w kłykciu kości udowej ślimaka. Przetrzyj miejsce operacji wacikami nasączonymi 0,9% roztworem soli fizjologicznej i załóż rzepkę.

Następnie, utrzymując kolano w pozycji wyprostowanej, zszyj nacięcie warstwa po warstwie za pomocą niewchłanialnych szwów 4-0. Aby zmierzyć mechaniczny próg wycofania lub MWT" szczurów, umieść zwierzę w pojedynczej plastikowej komorze na platformie z siatki drucianej. Umieść podstawę z siatki drucianej 50 centymetrów nad stołem.

Rozpocznij pomiar MWT po 30 minutach adaptacji. Następnie dociśnij włókno Von Freya prostopadle do powierzchni tylnej łapy szczura w sadzarce. Następnie zegnij szczoteczkę na dwie sekundy, unikając najgrubszej części środkowej części łapy.

Stopniowo zwiększaj wagę bodźca od 4 gramów, aż pojawi się pozytywna reakcja, taka jak wycofanie łapy lub lizanie. 3 dni po modelowaniu szczury w grupie modelowej wykazały obniżoną MWT w porównaniu z grupą pozorowaną. Sugerowanie hiperalgezji w grupie modelowej.

MWT grupy modelowej utrzymywał się na niskim poziomie nawet po 17 dniach. Wskazuje na długość wrażliwości na ból. Zabarwienie histopatologiczne grupy pozorowanej wykazało wyraźną powierzchnię chrząstki stawowej i nienaruszonej, równomierne rozmieszczenie chondrocytów i wysoką ekspresję kolagenu typu II.

W przeciwieństwie do tego, grupa modelowa wykazuje obniżone powierzchnie chrząstki, utracone chondrocyty, zwiększoną ekspresję metaloproteinazy macierzy MMP13 i zmniejszoną ekspresję kolagenu typu II. Najważniejszą rzeczą do zapamiętania jest to, że rzepka musi zostać zmniejszona przed szyciem.