Name: Dynamiczne pobieranie w czasie rzeczywistym płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów za pomocą systemu mikrodializy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-10-21T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 43 s
Description: Poznaj technikę mikrodializy mózgu do dynamicznego pobierania płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów. Ta metoda umożliwia ciągły monitoring markerów chorobowych w regionie CA1.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (82104533), Departament Nauki i Technologii Prowincji Syczuan (2021YJ0175) oraz Chińską Fundację Nauk Podoktoranckich (2020M683273). Autorzy pragną podziękować panu Yuncheng Hongowi, starszemu inżynierowi ds. sprzętu w Tri-Angels D&H Trading Pte. Ltd. (Singapur) za świadczenie usług technicznych w zakresie techniki mikrodializy.

Protokół eksperymentalny został przeprowadzony zgodnie z wymaganiami Komitetu ds. Wykorzystania Zwierząt Laboratoryjnych oraz Instytucjonalnej Opieki i Użytkowania Zwierząt na Uniwersytecie Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Chengdu (Numer rekordu: 2021-11). W niniejszym badaniu wykorzystano samce szczurów rasy Sprague Dawley (SD) (280 ± 20 g, w wieku 6-8 tygodni).
1. Operacja wszczepienia sondy do mikrodializy mózgu
<ol>
	<li>Użyj odpowiednio 3% i 1,5% izofluranu do indukcji i utrzymania znieczulenia szczurów, używając systemu znieczulenia zwierzęcego w mieszaninie powietrza i tlenu w tempie 0,6 l/min. Upewnij się, że szczury są głęboko znieczulone bez odruchu bólowego i odruchu rogówkowego. Stosuj maść weterynaryjną na oczy, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia.</li>
	<li>Usuń sierść z czaszki znieczulonego szczura za pomocą golarki elektrycznej w obszarze przygotowania. Następnie przymocuj znieczulonego szczura do stereotaktycznego lokalizatora mózgu. Zdezynfekuj miejsce operacyjne przed operacją, nakładając powidon-jod i etanol 3x na obszar operacji za pomocą sterylnego wacika. Apply bupiwakaina miejscowo do miejscowego znieczulenia. UWAGA: Cały proces pozyskiwania próbek HECF na podstawie mikrodializy jest zilustrowany na <silna klasa="xfig">Rysunek 1.</li>
	<li>Wykonaj 1,5 cm nacięcie twarzoczaszki pośrodku nożyczkami chirurgicznymi i usuń okostną za pomocą nożyczek chirurgicznych i kleszczy okulistycznych.</li>
	<li>Rozważ bregmę jako pozycję podstawową i przebij śródczaszkę, aby wywiercić otwór 2 mm w pozycji przednio-tylnej (AP) (-2 mm), przyśrodkowo-bocznej (ML) (-3,5 mm) i grzbietowo-brzusznej (DV) (-3,5 mm) (region hipokampa CA1) za pomocą wiertła czaszkowego.</li>
	<li>Zamocuj trzon cewnika na chwytaku stereotaktycznego lokalizatora mózgu i wyreguluj położenie osłonki mikrodializy w pozycjach AP (-2 mm), ML (-3,5 mm) i DV (0 mm). Dostosuj wartość DV lokalizatora stereo mózgu i wszczep osłonę mikrodializy do regionu CA1 na głębokości 3,5 mm. 
	UWAGA: Utrzymuj temperaturę zwierzęcia na poziomie 37 °C podczas operacji za pomocą regulatora temperatury zwierzęcia.</li>
	<li>Wywierć trzy kolejne otwory o średnicy 2 mm tak, aby trzy otwory tworzyły trójkąt, w którym otwór sondy jest umieszczony centralnie. Implant wkręca się w otwory na głębokości 1 mm.</li>
	<li>Zamocuj cewnik sondy za pomocą cementu dentystycznego i użyj szwu chirurgicznego 4-0, aby zamknąć skórę. Zobacz Rysunek 2, aby dowiedzieć się, jak umieścić sondę.</li>
	<li>Umieść szczura w klatkach na 7 dni, aby wyzdrowiał. Bupiwakainę należy podawać miejscowo naciekając (1,5 mg/kg) raz na dobę po zabiegu chirurgicznym. Zapewnij jedzenie i wodę ad libitum. Stosuj krople do oczu z hialuronianem sodu 3 razy dziennie, aby zapobiec wysuszeniu po operacji. 
	UWAGA: Wszystkie zabiegi należy wykonywać w sterylnej sali operacyjnej. Nie pozostawiać zwierzęcia bez opieki, dopóki nie odzyska przytomności na tyle, aby utrzymać pozycję leżącą na mostku w temperaturze 37 °C. Nie należy zwracać zwierzęcia, które przeszło operację, w towarzystwie innych zwierząt, dopóki nie zostanie w pełni wyleczone.</li>
</ol>
2. Podłączenie systemu mikrodializy i sprawdzenie sondy
<ol>
	<li>Podłącz pompę do mikrodializy, mikrostrzykawkę, urządzenie do wybudzenia i kriogeniczny kolektor próbek zgodnie z instrukcjami producenta. Zainstalować mikrostrzykawkę z ACSF na pompie do mikrodializy i ustawić pompę do mikrodializy na szybkość 1 μl/min, aby odprowadzić powietrze do rurociągu.</li>
	<li>Podłączyć rurociąg i sondę do mikrodializy mózgu (membrana: PAES; długość membrany: 4 mm; średnica zewnętrzna membrany: 0,5 mm; odcięcie: 20 kDa; długość trzonu: 14 mm). Uruchomić pompę do mikrodializy z szybkością 1 μl/min, aby wstrzyknąć ACSF do sondy, aż powierzchnia sondy będzie lekko wilgotna. Zanurz sondę w roztworze heparyny sodowej do wstrzykiwań w celu późniejszego użycia. 
	UWAGA: Jeśli duży strumień ACSF spadnie z półprzepuszczalnej membrany sondy, co widać gołym okiem pod wpływem grawitacji, wymień sondę na nową.</li>
</ol>
3. Pobranie HECF od obudzonego szczura
<ol>
	<li>Włóż sondę do mikrodializy mózgu do cewnika sondy i umieść szczura w komorze (wysokość: 360 mm; średnica: 400 mm) z wyściółką, aby upewnić się, że szczury mogą się swobodnie poruszać.</li>
	<li>Podłącz rurociąg, pompę mikrostrzykawkową i sondę do mikrodializy mózgu. Zaprzęgnij szczura przez otwór w górnej części urządzenia przytrzymującego szczury i krętliki ze stali nierdzewnej.</li>
	<li>Włącz wielokanałowy kontroler obrotowy, aby uniknąć splatania rurociągów mikrodializy podczas swobodnego ruchu szczura. Włączyć pompę mikrostrzykawkową i pompować ACSF z szybkością 1 μl/min. Okresowo pobierać HECF po 60-minutowym wyrównaniu systemu pobierania HECF do mikrodializy.</li>
	<li>Upewnij się, że natężenie przepływu próbek HECF w chłodzonym kolektorze frakcji jest zgodne z naparem ACSF. Zebrać 20 μl HECF i automatycznie przełączyć się do następnej probówki do pobierania próbek. Zwróć uwagę, aby sprawdzić, czy membrana sondy nie jest uszkodzona podczas wkładania sondy.</li>
</ol>
4. Pomiar ciśnienia osmotycznego dla HECF
<ol>
	<li>Włącz osmometr i zaloguj się do systemu wykrywania. Kliknij przycisk Cal na ekranie dotykowym i kliknij przycisk Res na stronie, aby wyczyścić poprzednią pamięć kalibracji.</li>
	<li>Zainstaluj probówkę o pojemności 1,5 ml zawierającą 100 μl czystej wody bez pęcherzyków na głowicy pomiarowej. Pociągnij głowicę pomiarową na dno pojemnika z zimną hydrazyną.</li>
	<li>Wprowadź próbkę o numerze 0 na ekranie dotykowym i potwierdź, aby przeprowadzić test. Szybko zanurz igłę diody w probówce z próbką, a następnie szybko ją wyciągnij, aby wywołać krystalizację próbki w temperaturze -6,2 °C.</li>
	<li>Poczekaj na wyświetlenie ekranu: Popchnij głowicę pomiarową do góry i kliknij kolejno Cal i Cal 0, aby skalibrować. Wykonaj pomiary roztworem kalibracyjnym 300 mOsm i zmierz ciśnienie osmotyczne próbek HECF zgodnie z powyższym opisem. 
	UWAGA: Po kalibracji lub pomiarze wytrzyj głowicę pomiarową miękkim ręcznikiem papierowym. Próbki HECF bez pęcherzyków powietrza należy dobrze wymieszać.</li>
</ol>
5. Konserwacja systemu mikrodializy i urządzeń po pobraniu próbek
<ol>
	<li>Wyjąć sondę do mikrodializy mózgu z cewnika sondy po zakończeniu pobierania próbek. Zanurz sondę w wodzie dejonizowanej i przepłucz ją wodą dejonizowaną na 12 godzin, aby usunąć osady soli z rurociągu i sondy.</li>
	<li>Wyjąć sondę i umieścić ją w 0,05% roztworze trypsyny o temperaturze 4 °C. Wysuszyć rurociągi w suszarce do suchego powietrza w temperaturze 25 °C i przechowywać je w temperaturze pokojowej. 
	UWAGA: Sondy do mikrodializy są drogie i ten krok może zwiększyć możliwość ich wielokrotnego użycia. Białka, które przylegają do powierzchni sondy, mogą być trawione przez roztwór trypsyny, aby zapobiec blokowaniu błony sondy przez białka, a trypsyna nie miała wpływu na materiał sondy.</li>
</ol>
6. Leczenie zwierząt po pobraniu próbek
<ol>
	<li>Po pobraniu próbek bezboleśnie poddaj szczury eutanazji, zmuszając je do wdychania 1,5% izofluranu, a następnie przedawkowania 5% izofluranu zgodnie z etyką zwierząt.</li>
</ol>

<ol><li>Erkkinen, M. G., Kim, M. O., Geschwind, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+neurology+and+epidemiology+of+the+major+neurodegenerative+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harbor+Perspectives+in+Biology%22%5BJournal%5D)">Clinical neurology and epidemiology of the major neurodegenerative diseases.</a> Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. 10 (4), 033118(2018).</li>
<li>Salehi, A., Zhang, J. H., Obenaus, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Response+of+the+cerebral+vasculature+following+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Response of the cerebral vasculature following traumatic brain injury.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 37 (7), 2320-2339 (2017).</li>
<li>Kurtzman, R. A. em3, Caruso, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-altitude+illness+death+investigation%5BTitle%5D)+AND+%22Academic+Forensic+Pathology%22%5BJournal%5D)">High-altitude illness death investigation.</a> Academic Forensic Pathology. 8 (1), 83-97 (2018).</li>
<li>Matsumoto, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetic+study+of+Ninjin%27yoeito%3A+Absorption+and+brain+distribution+of+Ninjin%27yoeito+ingredients+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ethnopharmacology%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetic study of Ninjin'yoeito: Absorption and brain distribution of Ninjin'yoeito ingredients in mice.</a> Journal of Ethnopharmacology. 279, 114332(2021).</li>
<li>Mahat, M. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+of+transcutaneous+cisterna+magna+puncture+for+cerebrospinal+fluid+sampling+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">An improved method of transcutaneous cisterna magna puncture for cerebrospinal fluid sampling in rats.</a> Journal of Neuroscience Methods. 211 (2), 272-279 (2012).</li>
<li>Ceaglio, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+performance+collection+of+cerebrospinal+fluid+in+rats%3A+evaluation+of+erythropoietin+penetration+after+osmotic+opening+of+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">High performance collection of cerebrospinal fluid in rats: evaluation of erythropoietin penetration after osmotic opening of the blood-brain barrier.</a> Journal of Neuroscience Methods. 219 (1), 70-75 (2013).</li>
<li>Bothwell, S. W., Janigro, D., Patabendige, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrospinal+fluid+dynamics+and+intracranial+pressure+elevation+in+neurological+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Fluids+and+Barriers+of+the+CNS%22%5BJournal%5D)">Cerebrospinal fluid dynamics and intracranial pressure elevation in neurological diseases.</a> Fluids and Barriers of the CNS. 16 (1), 9(2019).</li>
<li>Barthel, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+step-by-step+guide+for+microsurgical+collection+of+uncontaminated+cerebrospinal+fluid+from+rat+cisterna+magna%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">A step-by-step guide for microsurgical collection of uncontaminated cerebrospinal fluid from rat cisterna magna.</a> Journal of Neuroscience Methods. 352, 109085(2021).</li>
<li>Zhao, Y., Yang, Y., Wang, D. X., Wang, J., Gao, W. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrospinal+fluid+amino+acid+metabolite+signatures+of+diabetic+cognitive+dysfunction+based+on+targeted+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Alzheimer%27s+Disease%22%5BJournal%5D)">Cerebrospinal fluid amino acid metabolite signatures of diabetic cognitive dysfunction based on targeted mass spectrometry.</a> Journal of Alzheimer's Disease. 86 (4), 1655-1665 (2022).</li>
<li>Lim, N. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+improved+method+for+collection+of+cerebrospinal+fluid+from+anesthetized+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">An improved method for collection of cerebrospinal fluid from anesthetized mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (133), e56774(2018).</li>
<li>Hendrickx, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+capillary+LC-UV+method+for+the+simultaneous+analysis+of+olanzapine%2C+chlorpromazine+and+their+FMO-mediated+N-oxidation+products+in+brain+microdialysates%5BTitle%5D)+AND+%22Talanta%22%5BJournal%5D)">A sensitive capillary LC-UV method for the simultaneous analysis of olanzapine, chlorpromazine and their FMO-mediated N-oxidation products in brain microdialysates.</a> Talanta. 162, 268-277 (2017).</li>
<li>Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+brain+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Protocols+in+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Overview of brain microdialysis.</a> Current Protocols in Neuroscience. , Chapter 7, Unit 7.1 (2009).</li>
<li>Hammarlund-Udenaes, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+as+an+important+technique+in+systems+pharmacology-a+historical+and+methodological+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+AAPS+Journal%22%5BJournal%5D)">Microdialysis as an important technique in systems pharmacology-a historical and methodological review.</a> The AAPS Journal. 19 (5), 1294-1303 (2017).</li>
<li>Anderzhanova, E., Wotjak, C. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+microdialysis+and+its+applications+in+experimental+neurochemistry%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+and+Tissue+Research%22%5BJournal%5D)">Brain microdialysis and its applications in experimental neurochemistry.</a> Cell and Tissue Research. 354 (1), 27-39 (2013).</li>
<li>Mohammadi, A., Rashidi, E., Amooeian, V. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain%2C+blood%2C+cerebrospinal+fluid%2C+and+serum+biomarkers+in+schizophrenia%5BTitle%5D)+AND+%22Psychiatry+Research%22%5BJournal%5D)">Brain, blood, cerebrospinal fluid, and serum biomarkers in schizophrenia.</a> Psychiatry Research. 265, 25-38 (2018).</li>
<li>Lashley, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+biomarkers+of+Alzheimer%27s+disease%3A+progress+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Disease+Models+%26+Mechanisms%22%5BJournal%5D)">Molecular biomarkers of Alzheimer's disease: progress and prospects.</a> Disease Models & Mechanisms. 11 (5), 031781(2018).</li>
<li>Kawata, K., Tierney, R., Langford, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Blood+and+cerebrospinal+fluid+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Handbook+of+Clinical+Neurology%22%5BJournal%5D)">Blood and cerebrospinal fluid biomarkers.</a> Handbook of Clinical Neurology. 158, 217-233 (2018).</li>
<li>Zhao, Q. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+dehydrocostuslactone+on+rat+hippocampal+slice+injury+induced+by+oxygen-glucose+deprivation%2Freoxygenation%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Protective effects of dehydrocostuslactone on rat hippocampal slice injury induced by oxygen-glucose deprivation/reoxygenation.</a> International Journal of Molecular Medicine. 42 (2), 1190-1198 (2018).</li>
<li>Wang, X. B. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Protective+effects+of+dehydrocostuslactone+on+oxygen-glucose+deprivation+injury+in+rat+hippocampal+slices%22">Protective effects of dehydrocostuslactone on oxygen-glucose deprivation injury in rat hippocampal slices</a>. , Ningxia Medical University. Master's thesis (2017).</li>
<li>Coimbra-Costa, D., Alva, N., Duran, M., Carbonell, T., Rama, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oxidative+stress+and+apoptosis+after+acute+respiratory+hypoxia+and+reoxygenation+in+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Biology%22%5BJournal%5D)">Oxidative stress and apoptosis after acute respiratory hypoxia and reoxygenation in rat brain.</a> Redox Biology. 12, 216-225 (2017).</li>
<li>Liu, H. Y., Chou, K. H., Chen, W. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Migraine+and+the+Hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Pain+and+Headache+Reports%22%5BJournal%5D)">Migraine and the Hippocampus.</a> Current Pain and Headache Reports. 22 (2), 13(2018).</li>
<li>Toda, T., Parylak, S. L., Linker, S. B., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+adult+hippocampal+neurogenesis+in+brain+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The role of adult hippocampal neurogenesis in brain health and disease.</a> Molecular Psychiatry. 24 (1), 67-87 (2019).</li>
<li>Wang, P., Lo Cascio, F., Gao, J., Kayed, R., Huang, X. F., F, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Binding+and+neurotoxicity+mitigation+of+toxic+tau+oligomers+by+synthetic+heparin+like+oligosaccharides%5BTitle%5D)+AND+%22Chemical+Communications%22%5BJournal%5D)">Binding and neurotoxicity mitigation of toxic tau oligomers by synthetic heparin like oligosaccharides.</a> Chemical Communications. 54 (72), 10120-10123 (2018).</li>
<li>Han, J. Y., Li, Q., Ma, Z. Z., Fan, J. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+and+mechanisms+of+compound+Chinese+medicine+and+major+ingredients+on+microcirculatory+dysfunction+and+organ+injury+induced+by+ischemia%2Freperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacology+%26+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Effects and mechanisms of compound Chinese medicine and major ingredients on microcirculatory dysfunction and organ injury induced by ischemia/reperfusion.</a> Pharmacology & Therapeutics. 177, 146-173 (2017).</li>
<li>Peng, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-inflammatory+effects+of+traditional+Chinese+medicines+on+preclinical+in+vivo+models+of+brain+ischemia-reperfusion-injury%3A+Prospects+for+neuroprotective+drug+discovery+and+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Anti-inflammatory effects of traditional Chinese medicines on preclinical in vivo models of brain ischemia-reperfusion-injury: Prospects for neuroprotective drug discovery and therapy.</a> Frontiers in Pharmacology. 10, 204(2019).</li>
<li>König, M., Thinnes, A., Klein, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+and+its+use+in+behavioural+studies%3A+Focus+on+acetylcholine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Microdialysis and its use in behavioural studies: Focus on acetylcholine.</a> Journal of Neuroscience Methods. 300, 206-215 (2018).</li>
<li>Liu, M. Z., Wang, P., Yu, X. M., Dong, G. C., Yue, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracerebral+microdialysis+coupled+to+LC-MS%2FMS+for+the+determination+tramadol+and+its+major+pharmacologically+active+metabolite+O-desmethyltramadol+in+rat+brain+microdialysates%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Testing+and+Analysis%22%5BJournal%5D)">Intracerebral microdialysis coupled to LC-MS/MS for the determination tramadol and its major pharmacologically active metabolite O-desmethyltramadol in rat brain microdialysates.</a> Drug Testing and Analysis. 9 (8), 1243-1250 (2017).</li>
<li>de Lima Oliveira, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+microdialysis+in+traumatic+brain+injury+and+subarachnoid+hemorrhage%3A+state+of+the+art%5BTitle%5D)+AND+%22Neurocritical+Care%22%5BJournal%5D)">Cerebral microdialysis in traumatic brain injury and subarachnoid hemorrhage: state of the art.</a> Neurocritical Care. 21 (1), 152-162 (2014).</li>
<li>Amiridze, N., Dang, Y., Brown, O. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydroxyl+radicals+detected+via+brain+microdialysis+in+rats+breathing+air+and+during+hyperbaric+oxygen+convulsions%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Report%22%5BJournal%5D)">Hydroxyl radicals detected via brain microdialysis in rats breathing air and during hyperbaric oxygen convulsions.</a> Redox Report. 4 (4), 165-170 (1999).</li>
<li>Chang, H. Y., Morrow, K., Bonacquisti, E., Zhang, W., Shah, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antibody+pharmacokinetics+in+rat+brain+determined+using+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22MABS%22%5BJournal%5D)">Antibody pharmacokinetics in rat brain determined using microdialysis.</a> MABS. 10 (6), 843-853 (2018).</li>
<li>Wan, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+of+seven+major+active+components+of+Mahuang+decoction+in+rat+blood+and+brain+by+LC-MS%2FMS+coupled+to+microdialysis+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn-Schmiedeberg%27s+Archives+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics of seven major active components of Mahuang decoction in rat blood and brain by LC-MS/MS coupled to microdialysis sampling.</a> Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 393 (8), 1559-1571 (2020).</li>
<li>Zheng, H. Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetic+analysis+of+Huangqi+Guizhi+Wuwu+decoction+on+blood+and+brain+tissue+in+rats+with+normal+and+cerebral+ischemia-reperfusion+Injury+by+microdialysis+with+HPLC-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Design+Development+and+Therapy%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetic analysis of Huangqi Guizhi Wuwu decoction on blood and brain tissue in rats with normal and cerebral ischemia-reperfusion Injury by microdialysis with HPLC-MS/MS.</a> Drug Design Development and Therapy. 14, 2877-2888 (2020).</li>
<li>Bongaerts, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sensitive+targeted+methods+for+brain+metabolomic+studies+in+microdialysis+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmaceutical+and+Biomedical+Analysis%22%5BJournal%5D)">Sensitive targeted methods for brain metabolomic studies in microdialysis samples.</a> Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. 161, 192-205 (2018).</li>
<li>Zhang, Y. Q., Jiang, N., Yetisen, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+neurochemical+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Biosensors+and+Bioelectronics%22%5BJournal%5D)">Brain neurochemical monitoring.</a> Biosensors and Bioelectronics. 189, 113351(2021).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Patogeneza chorób ośrodkowego układu nerwowego wciąż nie jest w pełni poznana, co utrudnia opracowywanie nowych terapii i leków. Badania wykazały, że większość chorób OUN jest ściśle związana ze zmianami w hipokampie 20,21,22. Proponowana technika mikrodializy mózgu może być ukierunkowana na określone obszary mózgu, zwłaszcza hipokamp, co wyróżnia ją na tle tradycyjnego podejścia do zbierania HECF. Sondy umieszcza się w regionie...

Choroby ośrodkowego układu nerwowego (OUN) z dużą zachorowalnością, takie jak choroba neurodegeneracyjna, urazowe uszkodzenie mózgu, uszkodzenie mózgu wywołane niedotlenieniem na dużej wysokości i udar niedokrwienny, są głównymi przyczynami rosnącej śmiertelności na całym świecie1,2,3. Monitorowanie w czasie rzeczywistym zmian cytokin i białek w określonych regionach mózgu przyczynia się do dokładności diagnostycznej chorób OUN i badań farmakokinetycznych mózgu po podaniu leków. Tradycyjne badania naukowe wykorzystują homogenat tkanki mózgowej lub ręczne pobieranie śródmiąższowego płynu mózgowego zwierząt w celu wykrycia określonych substancji i do badań farmakokinetycznych. Ma to jednak pewne wady, takie jak ograniczona wielkość próby, brak możliwości dynamicznego obserwowania zmian wskaźników oraz nierówna jakość próbkowania4,5,6. Płyn mózgowo-rdzeniowy, płyn śródmiąższowy, chroni mózg i rdzeń kręgowy przed uszkodzeniami mechanicznymi. Jego skład różni się od składu surowicy ze względu na istnienie bariery krew-mózg (BBB)7. Bezpośrednia analiza próbek płynu mózgowo-rdzeniowego bardziej sprzyja ujawnieniu mechanizmu uszkodzeń OUN i odkryciu leków. Nieuchronnie próbki płynu mózgowo-rdzeniowego, pobierane ręcznie bezpośrednio z cisterna magna i komór mózgowych za pomocą strzykawki, mają wady w postaci zanieczyszczenia krwi, losowej szansy na pobranie próbki, niepewności co do ilości i prawie zerowej możliwości wielokrotnego pobrania8,9. Co ważniejsze, konwencjonalne metody pobierania próbek śródmiąższowego płynu mózgowego nie pozwalają uzyskać próbek z uszkodzonych obszarów mózgu, co utrudnia badanie patogenezy chorób OUN w określonych regionach mózgu i ocenę skuteczności celowanych terapii etnomedycznych9,10.
Mikrodializa mózgu to technika pobierania próbek śródmiąższowego płynu mózgowego u obudzonych zwierząt11. System mikrodializy imituje przepuszczalność naczyń krwionośnych za pomocą sondy wszczepionej do mózgu. Sonda do mikrodializy jest uzbrojona w półprzepuszczalną membranę i jest wszczepiana w określone obszary mózgu. Po perfuzji izotonicznym sztucznym płynem mózgowo-rdzeniowym (ACSF), dializowany śródmiąższowy płyn mózgowy może być korzystnie pobrany z korzyściami płynącymi z małych rozmiarów próbek, ciągłego pobierania próbek i dynamicznej obserwacji12,13. Jeśli chodzi o lokalizację, sondy do mikrodializy mózgu mogą być selektywnie wszczepiane do struktur mózgu lub cystern czaszkowych będących przedmiotem zainteresowania14. Obserwacja nieprawidłowych poziomów endogennej substancji w płynie zewnątrzkomórkowym hipokampa (HECF) sugeruje występowanie chorób OUN lub patogenezę choroby. Kilka badań wykazało, że biomarkery chorób OUN, takie jak D-aminokwasy w schizofrenii, β-amyloid i białka tau w chorobie Alzheimera, łańcuchy lekkie neurofilamentów w urazowym uszkodzeniu mózgu i hydrolaza karboksylowo-końcowa ubikwityny L1 w encefalopatii niedotlenieniowo-niedokrwiennej, mogą być analizowane w płynie mózgowo-rdzeniowym15,16,17. Metoda analizy chemicznej oparta na technice pobierania próbek z mikrodializy mózgu może być wykorzystana do monitorowania dynamicznych zmian związków egzogennych, takich jak aktywne składniki etnomedycyny, które dyfundują i rozprowadzają się w określonych regionach mózgu14.
Ten artykuł przedstawia specyficzny proces dynamicznego pozyskiwania HECF u obudzonych szczurów i mierzy jego ciśnienie osmotyczne, aby zapewnić jakość próbki.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; Piec do suszenia powietrza</td><td>Suzhou Great Electronic Equipment Co., Ltd</td><td>GHG-9240A</td><td></td></tr><tr><td>System znieczulenia zwierząt</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R500IE</td><td></td></tr><tr><td>Utrzymuje temperaturę zwierząt</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>69020</td><td></td></tr><tr><td>Sztuczny płyn mózgowo-rdzeniowy</td><td>Pekin leagene biotech. Co., Ltd</td><td>CZ0522</td><td></td></tr><tr><td>Sonda</td> <td>do mikrodializy mózgu&nbsp; Cewnik CMA Microdialysis AB</td><td>T56518</td><td></td></tr><tr><td></td><td>&nbsp; Mikrodializa CMA AB</td><td>T56518</td><td></td></tr><tr><td>Uprząż infuzyjna Covance</td><td>Instech Laboratories, Inc.</td><td>CIH95</td><td></td></tr><tr><td>Żywice bazowe do protez</td><td>Shanghai Eryi Zhang Jiang Biomaterials Co., Ltd</td><td>190732</td><td></td></tr><tr><td>Elektryczna wiertarka czaszkowa</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>78001</td><td></td></tr><tr><td>Golarka elektryczna</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>CP-5200</td><td></td></tr><tr><td>Zbiornik o swobodnym ruchu dla zwierząt</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>CMA120</td><td></td></tr><tr><td>Heparyna sodowa do wstrzykiwań</td><td>Chengdu Haitong Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>H51021208</td><td></td></tr><tr><td>Iodophor</td><td>Sichuan Lekang Pharmaceutical Accessories Co., Ltd</td><td>202201</td><td></td></tr><tr><td>Isofluran</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>R510-22</td><td></td></tr><tr><td>Cewnik do mikrodializy stylet</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>8011205</td><td></td></tr><tr><td>Probówka do pobierania mikrodializy</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>7431100</td><td></td></tr><tr><td>Kolektor do mikrodializy</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>CMA4004</td><td></td></tr><tr><td>Rurki do mikrodializy fep</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>3409501</td><td></td></tr><tr><td>Stanowisko do mikrodializy in vitro</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>CMA130</td><td></td></tr><tr><td>Pompa mikroiniekcyjna do mikrodializy</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>788130</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka do mikrodializy (1,0 ml)</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>8309020</td><td></td></tr><tr><td>Adapter rurki do mikrodializy</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>3409500</td><td></td></tr><tr><td>Niewchłanialne szwy chirurgiczne</td><td>Shanghai Tianqing Biological Materials Co., Ltd</td><td>S19004</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze okulistyczne</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>F12016-15</td><td></td></tr><tr><td>Osmometr</td><td>L&ouml; ser</td><td>OM 807</td><td></td></tr><tr><td>Krople do oczu z hialuronianem sodu</td><td>URSAPHARM Arzneimittel GmbH</td><td>H20150150</td><td></td></tr><tr><td>Aparat do stereotaksji</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>68025</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki chirurgiczne</td><td>Rayward Life Technology Co., Ltd</td><td>S14014-15</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki chirurgiczne</td><td>Shanghai Bingyu Fluid technology Co., Ltd</td><td>BY-103</td><td></td></tr><tr><td>Igła strzykawkowa</td><td>&nbsp; CMA Microdialysis AB</td><td>T56518</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór trypsyny</td><td>Boster Biological Technology, Ltd.</td><td></td><td></td>PYG0107</tr><tr><td>Myjka ultradźwiękowa</td><td>Guangdong Goote Ultrasonic Co., Ltd</td><td>KMH1-240W8101</td><td></td></tr></tbody></table>

dynamiczne pobieranie w czasie rzeczywistym płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów za pomocą systemu mikrodializy

Real-Time Dynamic Collection of Hippocampal Extracellular Fluid from Conscious Rats Using a Microdialysis System

Różne choroby ośrodkowego układu nerwowego (OUN) są związane ze zmianami w składzie płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa (HECF). Jednak trudności w uzyskaniu HECF w czasie rzeczywistym od przytomnych szczurów od dawna ograniczały ocenę progresji choroby OUN i skuteczność terapii etnomedycznej. Zachęcające jest to, że technika mikrodializy mózgu może być stosowana do ciągłego pobierania próbek z zaletami dynamicznej obserwacji, analizy ilościowej i małego rozmiaru próby. Pozwala to na monitorowanie zmian w zawartości płynu zewnątrzkomórkowego dla związków z tradycyjnych ziół i ich metabolitów w mózgu żywych zwierząt. Celem tego badania było zatem dokładne wszczepienie sondy do mikrodializy płynu mózgowo-rdzeniowego w okolicy hipokampa szczurów Sprague Dawley (SD) za pomocą trójwymiarowego aparatu stereotaktycznego mózgu, odcinającego masy cząsteczkowe większe niż 20 kDa. Wysokiej jakości HECF uzyskano następnie od przytomnych szczurów przy użyciu systemu kontroli pobierania próbek mikrodializy z regulowaną częstotliwością pobierania próbek w zakresie od 2,87 nL/min do 2,98 mL/min. Podsumowując, nasz protokół zapewnia wydajną, szybką i dynamiczną metodę uzyskiwania HECF u wybudzonych szczurów za pomocą technologii mikrodializy, co daje nam nieograniczone możliwości dalszego badania patogenezy chorób związanych z OUN i oceny skuteczności leków.

Zgodnie z powyższym protokołem eksperymentalnym oraz parametrami próbkowania określonymi w Tabela 1, bezbarwny i przezroczysty, przypominający wodę płyn HECF szczura, otrzymano przy ustawionej częstotliwości próbkowania (Rysunek 1K). Ciśnienie osmotyczne otrzymanego HECF szczura wynosiło 290–310 mOsm/L, co pozwala pośrednio potwierdzić jakość próbek18,19.
<p class="jove_content biglegend" fo:keep-together.within-...

Protokół tutaj zapewnia szczegółowe, dynamiczne pobieranie próbek płynu zewnątrzkomórkowego w czasie rzeczywistym z hipokampa obudzonych szczurów za pomocą systemu mikrodializy.

Dynamiczne pobieranie w czasie rzeczywistym płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów za pomocą systemu mikrodializy

A variety of central nervous system (CNS) diseases are associated with changes in the composition of hippocampal extracellular fluid (HECF). However, ...

Płyn zewnątrzkomórkowy hipokampa i tłum za pomocą techniki mikrodializy mózgu przyczynia się do monitorowania specyficznych dla choroby mikrochorób ośrodkowego układu nerwowego. Techniczna mikrodializa mózgu osiąga dynamiczną i ciągłą inkwizycję śródmiąższowego płynu mózgowego w określonych obszarach mózgu nieznieczulonych szczurów. Zacznij od unieruchomienia znieczulonego szczura na stereotaktycznym lokalizatorze mózgu i przetrzyj ogoloną powierzchnię chirurgiczną wacikiem z jodonu i etanolu trzy razy przed operacją.Następnie wykonaj 1,5-centymetrowe nacięcie czaszki na środku za pomocą nożyczek chirurgicznych i usuń okostną za pomocą nożyczek chirurgicznych i kleszczy okulistycznych. Biorąc pod uwagę bregmę jako pozycję podstawową, za pomocą wiertła czaszkowego przebij śródczaszkę, aby wywiercić dwumilimetrowy otwór w okolicy hipokampa CA1. Teraz zamocuj stylet cewnika na chwytaku stereotaktycznego lokalizatora mózgu i dostosuj położenie osłonki mikrodializy w pozycji przednio-tylnej, przyśrodkowej i grzbietowej brzusznej.Wyreguluj zastawkę grzbietowo-brzuszną lokalizatora stereo mózgu i wszczep osłonkę mikrodializy do regionu CA1 na głębokości 3,5 milimetra. Wywierć trzy kolejne otwory o średnicy dwóch milimetrów, tak aby trzy otwory tworzyły trójkąt, w którym otwór sondy jest umieszczony centralnie. Implant wkręca się w otwory na głębokości jednego milimetra i mocuje cewnik sondy za pomocą cementu dentystycznego.Następnie użyj szwu chirurgicznego 4-O, aby zamknąć skórę. Połączyć mikrostrzykawkę pompy mikrodializacyjnej z urządzeniem do badania aktywności czuwania ACSF i kolektorem próbek kriogenicznych zgodnie z instrukcjami producenta. Następnie, aby odprowadzić powietrze do rurociągu, ustaw pompę mikrodializy na szybkość jednego mikrolitra na minutę.Następnie podłącz rurociąg i sondę do mikrodializy mózgu i uruchom pompę mikrodializacyjną z szybkością jednego mikrolitra na minutę, aby wstrzyknąć ACSF do sondy, aż powierzchnia sondy będzie lekko wilgotna. Zanurz sondę w roztworze heparyny sodowej do wstrzykiwań w celu późniejszego użycia. Aby pobrać HECF od obudzonego szczura, włóż sondę do mikrodializy mózgu do cewnika sondy i umieść szczura w komorze z wyściółką, aby zapewnić szczurom swobodę poruszania się.Włącz wielokanałowy kontroler obrotowy, aby uniknąć splatania rurociągów mikrodializy podczas swobodnego ruchu szczura. Następnie włącz pompę mikrostrzykawkową i pompuj ACSF z szybkością jednego mikrolitra na minutę. Po 60-minutowym zrównoważeniu systemu pobierania HECF do mikrodializy, należy okresowo pobierać HECF.Po zakończeniu pobierania próbek wyjmij sondę do mikrodializy mózgu z cewnika sondy. Zanurz sondę w wodzie dejonizowanej i przepłucz ją wodą dejonizowaną na 12 godzin, aby usunąć osady soli z rurociągu i sondy. Wyjmij sondę i umieść ją w 0,05% roztworze trysyny w temperaturze czterech stopni Celsjusza.Płyn zewnątrzkomórkowy hipokampa uzyskany techniką mikrodializy mózgu jest podobny do wody, bezbarwny i przezroczysty przy ustawionej częstotliwości próbkowania. Najważniejszymi procedurami są ostrożne wszczepienie mikrodializy w obszar CA1 i wprowadzenie sondy do cewnika pop. Prosta technika mikrodializy umożliwia wspomaganie dynamicznej zmiany markerów chorobowych w określonych obszarach mózgu, substancji skuteczności leku oraz katabolizmu tkankowego składników leku.

real-time-dynamic-collection-hippocampal-extracellular-fluid-from

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Monitorowanie poziomów neurotransmiterów pozakomórkowych w określonych obszarach mózgu swobodnie poruszających się zwierząt dostarcza wiedzy na temat związku między uwalnianiem neurotransmiterów a zachowaniem. Mikrodializa in vivo w połączeniu z detekcją elektrochemiczną zapewnia doskonałą rozdzielczość anatomiczną i chemiczną, a także informacje o tym, w jaki sposób podstawowa neurotransmisja ulega zmianom pod wpływem manipulacji farmakologicznych lub fizjologicznych.

Przeżywalna operacja stereotaktyczna u gryzoni

Modulacja zależnej od hipokampa przestrzennej pamięci roboczej poprzez bezpośrednią mikroiniekcję wewnątrzhipokampalną, połączoną z następującą po niej mikrodializą in vivo w celu oznaczania metabolitów u świadomych, aktywnych behawioralnie zwierząt.

Mikroiniekcja insuliny do hipokampa i mikrodializa in vivo podczas testów pamięci przestrzennej

Film przedstawia proces używania sondy do mikrodializy do zbierania białek zewnątrzkomórkowych z płynu śródmiąższowego (ISF) mózgu myszy. Sonda do mikrodializy, wyposażona w półprzepuszczalną membranę o dużej masie cząsteczkowej, jest wprowadzana do mózgu znieczulonej myszy za pomocą wszczepionej kaniuli prowadzącej. Sonda, podłączona do pomp, pozwala fizjologicznemu buforowi na perfuzję tkanki mózgowej i zmieszanie się z ISF. Białka w ISF dyfundują przez półprzepuszczalną błonę i są zbierane...

Mikrodializa płynu śródmiąższowego z mózgu myszy w celu wyizolowania białek zewnątrzkomórkowych

Tutaj prezentujemy protokół rejestrowania rytmicznych oscylacji sieci neuronalnej theta i gamma z izolowanego całego preparatu hipokampa. Opisujemy etapy eksperymentalne od ekstrakcji hipokampa do szczegółów nagrań klamry polowej, unitarnej i całokomórkowej, a także optogenetycznej stymulacji rytmu theta.

Dostrajanie w paśmie theta hipokampa in vitro: metodologie nagrywania z izolowanego obwodu septohipokampa gryzoni

Ten protokół opisuje rejestrację lokalnych potencjałów pola za pomocą wielozębowych liniowych sond krzemowych. Konwersja sygnałów za pomocą analizy gęstości źródła prądu pozwala na rekonstrukcję lokalnej aktywności elektrycznej w hipokampie myszy. Dzięki tej technice można badać ograniczone przestrzennie oscylacje mózgu u swobodnie poruszających się myszy.

Rejestrowanie przestrzennie ograniczonych oscylacji w hipokampie zachowujących się myszy

Mikrodializa in vivo umożliwiła pobranie cząsteczek obecnych w płynie śródmiąższowym mózgu (ISF) od obudzonych, swobodnie zachowujących się zwierząt. W celu analizy stosunkowo dużych cząsteczek w ISF, niniejszy artykuł koncentruje się w szczególności na protokole mikrodializy przy użyciu sond z membranami odcinającymi o dużej masie cząsteczkowej.

In vivo (in vivo) Metoda mikrodializy do zbierania dużych białek zewnątrzkomórkowych z płynu śródmiąższowego mózgu za pomocą sond odcinających o dużej masie cząsteczkowej

Tutaj opisujemy metodę mikrodializy in vivo do analizy uwalniania asparaginianu i glutaminianu w brzusznym hipokampie u szczurów z padaczką i bez padaczki, w połączeniu z zapisami EEG. Zewnątrzkomórkowe stężenia asparaginianu i glutaminianu mogą być skorelowane z różnymi fazami choroby.

Mikrodializa aminokwasów pobudzających podczas zapisów EEG u swobodnie poruszających się szczurów

Zmiana neuroprzekaźnika to mechanizm dysfunkcji neuronalnej, który występuje po wstrząśnieniu mózgu i przyczynia się do czasami katastrofalnych długoterminowych konsekwencji. Ten model szczurzy łączy w sobie mikrodializę, umożliwiającą kwantyfikację neuroprzekaźników in vivo, z techniką spadku masy ciała, wywierającą gwałtowne przyspieszanie i zwalnianie głowy i tułowia, co jest ważnym czynnikiem urazów czaszkowo-mózgowych u ludzi.

Nowatorski i translacyjny szczurzy model wstrząsu mózgu łączący siłę i rotację z mikrodializą mózgową in vivo

Obecny protokół opisuje prostą i efektywną metodę dynamicznego pobierania krwi z serca szczura w czasie rzeczywistym za pomocą techniki mikrodializy.

Dynamiczna ciągła ekstrakcja krwi z serca szczura za pomocą nieinwazyjnej techniki mikrodializy

Ten protokół opisuje użycie specjalnie zaprojektowanego urządzenia rejestrującego i elektrod do rejestrowania lokalnych potencjałów pola i badania przepływu informacji w hipokampie myszy i korze przedczołowej.

Podwójne nagrania zewnątrzkomórkowe w hipokampie myszy i korze przedczołowej myszy

Poznaj technikę mikrodializy mózgu do dynamicznego pobierania płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów. Ta metoda umożliwia ciągły monitoring markerów chorobowych w regionie CA1.

Dynamiczne pobieranie w czasie rzeczywistym płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów za pomocą systemu mikrodializy (Wideo) | JoVE Journal

Dynamiczne pobieranie w czasie rzeczywistym płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów za pomocą systemu mikrodializy

Przeglądaj więcej filmów