Name: Ocena skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu podejścia łączącego metody statyczne i dynamiczne (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-12-09T13:50:00.000+00:00
Duration: 11 min 47 s
Description: Poznaj metodę oceny skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu połączenia statycznego i dynamicznego podejścia badawczego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez Consortium de Recherche et Innovations en Bioprocédés Industriels au Québec (CRIBIQ)(2016-049-C22), Agropur, Groupe Sani Marc, oraz Natural Sciences and Engineering Research Council of Canada (NSERC) (RDCPJ516460-17). Dziękujemy Teresie Paniconi za krytyczną recenzję manuskryptu.

<ol><li>Canada's dairy industry at a glance. Canadian Dairy Information Centre. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://agriculture.canada.ca/en/canadas-agriculture-sectors/animal-industry/canadian-dairy-information-centre/canadas-dairy-industry-glance">https://agriculture.canada.ca/en/canadas-agriculture-sectors/animal-industry/canadian-dairy-information-centre/canadas-dairy-industry-glance</a> (2017).</li>
<li>Oliver, S. P., Jayarao, B. M., Almeida, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Foodborne+pathogens+in+milk+and+the+dairy+farm+environment%3A+food+safety+and+public+health+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Foodborne+Pathogens+and+Disease%22%5BJournal%5D)">Foodborne pathogens in milk and the dairy farm environment: food safety and public health implications.</a> Foodborne Pathogens and Disease. 2 (2), 115-129 (2005).</li>
<li>Fondation de technologie laitière du Québec. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Science+et+technologie+du+lait.+3rd+edn%22">Science et technologie du lait. 3rd edn</a>. , Les Presses de l'Université Laval. Quebec. (2018).</li>
<li>Evanowski, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Short+communication%3A+Pseudomonas+azotoformans+causes+gray+discoloration+in+HTST+fluid+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+dairy+science%22%5BJournal%5D)">Short communication: Pseudomonas azotoformans causes gray discoloration in HTST fluid milk.</a> Journal of dairy science. 100, 7906-7909 (2017).</li>
<li>Bower, C. K., McGuire, J., Daeschel, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+adhesion+and+detachment+of+bacteria+and+spores+on+food-contact+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+in+Food+Science+%26+Technology%22%5BJournal%5D)">The adhesion and detachment of bacteria and spores on food-contact surfaces.</a> Trends in Food Science & Technology. 7 (5), 152-157 (1996).</li>
<li>Gupta, S., Anand, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+pitting+corrosion+on+stainless+steel+%28grades+304+and+316%29+used+in+dairy+industry+by+biofilms+of+common+sporeformers%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Dairy+Technology%22%5BJournal%5D)">Induction of pitting corrosion on stainless steel (grades 304 and 316) used in dairy industry by biofilms of common sporeformers.</a> International Journal of Dairy Technology. 71 (2), 519-531 (2018).</li>
<li>Marchand, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilm+formation+in+milk+production+and+processing+environments%3B+Influence+on+milk+quality+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Reviews+in+Food+Science+and+Food+Safety%22%5BJournal%5D)">Biofilm formation in milk production and processing environments; Influence on milk quality and safety.</a> Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 11 (2), 133-147 (2012).</li>
<li>Silva, H. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficiency+of+different+disinfectants+on+Bacillus+cereus+sensu+stricto+biofilms+on+stainless-steel+surfaces+in+contact+with+milk%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Efficiency of different disinfectants on Bacillus cereus sensu stricto biofilms on stainless-steel surfaces in contact with milk.</a> Frontiers in Microbiology. 9, 2934(2018).</li>
<li>Sedlak, D. L., von Gunten, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemistry.+The+chlorine+dilemma%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Chemistry. The chlorine dilemma.</a> Science. 331 (6013), 42-43 (2011).</li>
<li>vander Veen, S., Abee, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mixed+species+biofilms+of+Listeria+monocytogenes+and+Lactobacillus+plantarum+show+enhanced+resistance+to+benzalkonium+chloride+and+peracetic+acid%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Mixed species biofilms of Listeria monocytogenes and Lactobacillus plantarum show enhanced resistance to benzalkonium chloride and peracetic acid.</a> International Journal of Food Microbiology. 144 (3), 421-431 (2011).</li>
<li>Saa Ibusquiza, P., Herrera, J. J., Cabo, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resistance+to+benzalkonium+chloride%2C+peracetic+acid+and+nisin+during+formation+of+mature+biofilms+by+Listeria+monocytogenes%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Resistance to benzalkonium chloride, peracetic acid and nisin during formation of mature biofilms by Listeria monocytogenes.</a> Food Microbiology. 28 (3), 418-425 (2011).</li>
<li>Goetz, C., Larouche, J., Velez Aristizabal, M., Niboucha, N., Jean, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+organic+peroxyacids+for+eliminating+biofilm+preformed+by+microorganisms+isolated+from+dairy+processing+plants%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+and+Environmental+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Efficacy of organic peroxyacids for eliminating biofilm preformed by microorganisms isolated from dairy processing plants.</a> Applied and Environmental Microbiology. 88 (4), 0188921(2022).</li>
<li>Vimont, A., Fliss, I., Jean, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Study+of+the+virucidal+potential+of+organic+peroxyacids+against+norovirus+on+food-contact+surfaces%5BTitle%5D)+AND+%22Food+and+Environmental+Virology%22%5BJournal%5D)">Study of the virucidal potential of organic peroxyacids against norovirus on food-contact surfaces.</a> Food and Environmental Virology. 7 (1), 49-57 (2015).</li>
<li>ASTM International. ASTM E2562-17. Standard Test Method for Quantification of Pseudomonas aeruginosa Biofilm Grown with High Shear and Continuous Flow using CDC Biofilm Reactor. ASTM International. , West Conshohocken, PA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.astm.org/e2562-17.html">https://www.astm.org/e2562-17.html</a> (2017).</li>
<li>ASTM International. ASTM E2871-19. Standard Test Method for Evaluating Disinfectant Efficacy Against Pseudomonas aeruginosa Biofilm Grown in CDC Biofilm Reactor Using Single Tube Method. ASTM International. , West Conshohocken, PA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.astm.org/e2871-19.html">https://www.astm.org/e2871-19.html</a> (2019).</li>
<li>Niboucha, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+study+of+different+sampling+methods+of+biofilm+formed+on+stainless-steel+surfaces+in+a+CDC+biofilm+reactor%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Comparative study of different sampling methods of biofilm formed on stainless-steel surfaces in a CDC biofilm reactor.</a> Frontiers in Microbiology. 13, 892181(2022).</li>
<li>ASTM International. ASTM E2799-17. Standard Test Method for Testing Disinfectant Efficacy against Pseudomonas aeruginosa Biofilm using the MBEC Assay. ASTM International. , West Conshohocken, PA. Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.astm.org/e2799-17.html">https://www.astm.org/e2799-17.html</a> (2022).</li>
<li>Parker, A. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ruggedness+and+reproducibility+of+the+MBEC+biofilm+disinfectant+efficacy+test%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Ruggedness and reproducibility of the MBEC biofilm disinfectant efficacy test.</a> Journal of Microbiological Methods. 102, 55-64 (2014).</li>
<li>Stewart, P. S., Parker, A. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+antimicrobial+efficacy+against+biofilms%3A+A+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Antimicrobial+Agents+and+Chemotherapy%22%5BJournal%5D)">Measuring antimicrobial efficacy against biofilms: A meta-analysis.</a> Antimicrobial Agents and Chemotherapy. 63 (5), 00020(2019).</li>
<li>Lindsay, D. K., Fouhy, K., Loh, M., Malakar, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+CDC+biofilm+bioreactor+is+a+suitable+method+to+grow+biofilms%2C+and+test+their+sanitiser+susceptibilities%2C+in+the+dairy+context%5BTitle%5D)+AND+%22International+Dairy+Journal%22%5BJournal%5D)">The CDC biofilm bioreactor is a suitable method to grow biofilms, and test their sanitiser susceptibilities, in the dairy context.</a> International Dairy Journal. 126, 105264(2022).</li>
<li>Buckingham-Meyer, K., Goeres, D. M., Hamilton, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+evaluation+of+biofilm+disinfectant+efficacy+tests%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Microbiological+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparative evaluation of biofilm disinfectant efficacy tests.</a> Journal of Microbiological Methods. 70 (2), 236-244 (2007).</li>
<li>Goeres, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Statistical+assessment+of+a+laboratory+method+for+growing+biofilms%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiology+%28Reading%29%22%5BJournal%5D)">Statistical assessment of a laboratory method for growing biofilms.</a> Microbiology (Reading). 151, 757-762 (2005).</li>
<li>Williams, D. L., Woodbury, K. L., Haymond, B. S., Parker, A. E., Bloebaum, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+CDC+biofilm+reactor+to+produce+mature+biofilms+on+the+surface+of+peek+membranes+for+an+in+vivo+animal+model+application%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Microbiology%22%5BJournal%5D)">A modified CDC biofilm reactor to produce mature biofilms on the surface of peek membranes for an in vivo animal model application.</a> Current Microbiology. 62 (6), 1657-1663 (2011).</li>
<li>Pieranski, M. K., Rychlowski, M., Grinholc, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+Streptococcus+agalactiae+biofilm+culture+in+a+continuous+flow+system+for+photoinactivation+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Pathogens%22%5BJournal%5D)">Optimization of Streptococcus agalactiae biofilm culture in a continuous flow system for photoinactivation studies.</a> Pathogens. 10 (9), 1212(2021).</li>
<li>Mendez, E., Walker, D. K., Vipham, J., Trinetta, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+use+of+a+CDC+biofilm+reactor+to+grow+multi-strain+Listeria+monocytogenes+biofilm%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Microbiology%22%5BJournal%5D)">The use of a CDC biofilm reactor to grow multi-strain Listeria monocytogenes biofilm.</a> Food Microbiology. 92, 103592(2020).</li>
<li>Salgar-Chaparro, S. J., Lepkova, K., Pojtanabuntoeng, T., Darwin, A., Machuca, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nutrient+level+determines+biofilm+characteristics+and+subsequent+impact+on+microbial+corrosion+and+biocide+effectiveness%5BTitle%5D)+AND+%22Applied+and+Environmental+Microbiology%22%5BJournal%5D)">Nutrient level determines biofilm characteristics and subsequent impact on microbial corrosion and biocide effectiveness.</a> Applied and Environmental Microbiology. 86 (7), 02885(2020).</li>
<li>Goeres, D. M., et al. Design and Fabrication of Biofilm Reactors. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGoeres%2C+DM+%22Recent+Trends+in+Biofilm+Science+and+Technology%22">Recent Trends in Biofilm Science and Technology</a>. Simoes, M., Borges, A., Chaves Simoes, L. , Academic Press. Cambridge, MA. 71-88 (2020).</li>
<li>Fjeld, C. S., Schüller, R. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biofilm+formation+during+hexadecane+degradation+and+the+effects+of+flow+field+and+shear+stresses%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Transactions+-+The+Nordic+Rheology+Society%22%5BJournal%5D)">Biofilm formation during hexadecane degradation and the effects of flow field and shear stresses.</a> Annual Transactions - The Nordic Rheology Society. 21, 341-346 (2013).</li>
<li>Gilmore, B. F., Hamill, T. M., Jones, D. S., Gorman, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+the+CDC+biofilm+reactor+as+a+dynamic+model+for+assessment+of+encrustation+formation+on+urological+device+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Biomedical+Materials+Research+Part+B%3A+Applied+Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Validation of the CDC biofilm reactor as a dynamic model for assessment of encrustation formation on urological device materials.</a> Journal of Biomedical Materials Research Part B: Applied Biomaterials. 93 (1), 128-140 (2010).</li>
<li>Picioreanu, C., van Loosdrecht, M. C., Heijnen, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Two-dimensional+model+of+biofilm+detachment+caused+by+internal+stress+from+liquid+flow%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechnology+and+Bioengineering%22%5BJournal%5D)">Two-dimensional model of biofilm detachment caused by internal stress from liquid flow.</a> Biotechnology and Bioengineering. 72 (2), 205-218 (2001).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie pozostają w konflikcie interesów.

Test MBEC (test mikropłytek biofilmu) był pierwszą metodą, która została uznana przez ASTM17 za standardowy test eliminacji biofilmu. Nasze i inne badania wykazały, że istnieją dwa krytyczne etapy podczas korzystania z tego testu: etap sonikacji (czas i moc) oraz czas leczenia środkiem dezynfekującym18. Stewart i Parker zasugerowali również inne parametry, które mogą wpłynąć na wynik testu, takie jak gatunki drobnoustrojów, wiek biofilmu, stosunek powierzchni do objętości <...

Przemysł mleczarski jest głównym sektorem przemysłowym na całym świecie, w tym w Kanadzie, gdzie istnieje ponad 10 500 gospodarstw mlecznych produkujących prawie 90 milionów hL mleka rocznie1. Pomimo rygorystycznych wymogów higienicznych nałożonych w przemyśle mleczarskim, w tym w zakładach przetwórczych, mleko stanowi doskonałą pożywkę dla mikroorganizmów, a co za tym idzie, produkty mleczne mogą zawierać mikroorganizmy, w tym mikroorganizmy psujące się lub chorobotwórcze. Te patogeny mogą powodować różne choroby; na przykład Salmonella sp. i Listeria monocytogenes mogą powodować odpowiednio zapalenie żołądka i jelit oraz zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych2. Mikroorganizmy powodujące psucie się mogą wpływać na jakość i właściwości organoleptyczne produktów mlecznych poprzez wytwarzanie gazów, enzymów zewnątrzkomórkowych lub kwasów3. Wygląd i kolor mleka mogą być również zmieniane, na przykład przez Pseudomonas spp.4.
Niektóre z tych mikroorganizmów mogą tworzyć biofilmy na różnych powierzchniach, w tym na stali nierdzewnej. Takie biofilmy umożliwiają utrzymywanie się i namnażanie mikroorganizmów na powierzchni urządzenia, a tym samym zanieczyszczenie produktów mlecznych5. Biofilmy są również problematyczne ze względu na ich zdolność do utrudniania wymiany ciepła i przyspieszania korozji sprzętu, co prowadzi do przedwczesnej wymiany sprzętu, a tym samym do strat ekonomicznych6.
Procedury czyszczenia na miejscu () pozwalają przemysłowi spożywczemu kontrolować rozwój mikroorganizmów. Procedury te polegają na sekwencyjnym stosowaniu wodorotlenku sodu, kwasu azotowego, a czasami środków odkażających zawierających kwas podchlorawy i kwas nadoctowy7,8. Chociaż kwas podchlorawy jest bardzo skuteczny przeciwko mikroorganizmom, reaguje również z naturalną materią organiczną, powodując powstawanie toksycznych produktów ubocznych9. Kwas nadoctowy nie wytwarza szkodliwych produktów ubocznych10; Jednak jego skuteczność w walce z biofilmami w przemyśle spożywczym jest bardzo zmienna<klasa SUP = 'xref'>10,< klasa SUP = 'xref'>11. Ostatnio inne nadtlenokwasy, w tym kwas perpropionowy i nadmlekowy, zostały przebadane pod kątem ich aktywności przeciwdrobnoustrojowej i wydają się być dobrą alternatywą dla kontroli wzrostu drobnoustrojów w biofilmach12,13.
Dlatego to badanie miało na celu ocenę skuteczności organicznych nadtlenokwasów (kwasów nadoctowego, perpropionowego i nadmlekowego oraz środka dezynfekującego na bazie kwasu nadoctowego) w zwalczaniu biofilmów mlecznych przy użyciu podejścia łączącego test minimalnego stężenia eliminacji biofilmu (MBEC), statyczną metodę wysokoprzepustowego badania przesiewowego oraz reaktor biofilmu Centrum Kontroli Chorób (CDC), dynamiczną metodę naśladującą in situ Warunki. Test MBEC jest dalej określany w protokole jako "płytki do mikromiareczkowania biofilmu". Przedstawiony tutaj protokół i reprezentatywne wyniki wskazują na skuteczność organicznych nadtlenokwasów i ich potencjalne zastosowanie w kontrolowaniu biofilmów mikrobiologicznych w przemyśle mleczarskim.

<table><tbody><tr><td>0,2 &mikro; M Filtry&nbsp;</td><td>Corning</td><td>09-754-28</td><td>średnica: 50 mm, PTFE- Membrana</td></tr><tr><td>316 dysk ze stali nierdzewnej</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>RD128-316</td><td></td></tr><tr><td>316 kupon ślizgowy ze stali nierdzewnej</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 2128-316</td><td></td></tr><tr><td>96-mikropłytka do miareczkowania</td><td>Corning</td><td>07-200-89</td><td>Mikropłytka z płaskim dnem poddana działaniu kultur komórkowych&nbsp;</td></tr><tr><td>Kwas octowy</td><td>Sigma Aldrich</td><td>27225</td><td>sklep w RT</td></tr><tr><td>Aluminiowe króćce</td><td>Mikroskopia elektronowa Nauka</td><td>75830-10</td><td>32x5mm</td></tr><tr><td>Wodny aldehyd glutarowy EM Grade 25%</td> <td>Mikroskopia elektronowa Sciences</td><td>16220</td><td>przechowuj przy -20 &deg; C</td></tr><tr><td>AB204-S/FACT Waga analityczna</td><td>Mettler Toledo</td><td>AB204-S</td><td></td></tr><tr><td>Bakteryjny filtr odpowietrzający (0,45 &mikro; m)</td> <td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>BST 02915</td><td></td></tr><tr><td>BioDestroy</td><td>Groupe Sani Marc</td><td>09-10215</td><td>komercyjny środek dezynfekujący na bazie kwasu nadoctowego, przechowywać w RT</td></tr><tr><td>Carboy LDPE 20 L</td><td>Cole Parmer</td><td>06031-52</td><td></td></tr><tr><td>Reaktor biofilmu CDC</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CRB 90</td><td></td></tr><tr><td>Siarczan ceru (IV)</td><td>Thermo Scientific</td><td>35650-K2</td><td>sklep w RT</td></tr><tr><td>Konfokalny laserowy mikroskop skaningowy&nbsp; LSM 700</td><td>Zeiss</td><td>LSM 700</td><td></td></tr><tr><td>Dey-Engley bulion neutralizujący</td><td>Millipore</td><td>D3435-500G</td><td>przechowywać w 4 stopniach; C</td></tr><tr><td>EMS950x + 350s złoto napylanie&nbsp;</td><td>Mikroskopia elektronowa Sciences</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Żywica epoksydowa</td><td>Mikroskopia elektronowa Sciences</td><td>14121</td><td>z</td></tr><tr><td>BDMA Alkohol etylowy 95%, globalny sklep P016EA95 USP</td><td>Greenfield</td><td></td><td>w RT</td></tr><tr><td>Roztwór wskaźnika żelazoiny</td><td>Sigma Aldrich</td><td>318922-100ML</td><td>sklep w RT</td></tr><tr><td>Korek napełniający/odpowietrzający</td><td>Cole Parmer</td><td>RK-06258-00</td><td></td></tr><tr><td>FilmTracer LIVE/DEAD Biofilm Viability Kit</td> Zestaw do żywotności komórek fluorescencyjnych <td>Invitrogen</td><td>L10316</td><td>(SYTO 9: zielone barwienie fluorescencyjne, jodek propidy: czerwone barwienie fluorescencyjne), przechowywać w temperaturze -20 stopni; C</td></tr><tr><td>Szklana bariera przepływowa</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>FB 50</td><td></td></tr><tr><td>Gold ze srebrną farbą&nbsp;</td><td>Mikroskopia elektronowa Sciences</td><td>12684-15</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw płyt grzewczych</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>110V Mieszadło Śrubokręt</td><td></td></tr><tr><td>sześciokątny</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 5497</td><td></td></tr><tr><td>Nadtlenek</td><td>wodoru Sigma</td><td>216763</td><td>sklep pod adresem 4 stopni; C</td></tr><tr><td>Pętle inokulacyjne</td><td>VWR</td><td>12000-812</td><td>sterylne, 10 i mikro; l</td></tr><tr><td>Kwas mlekowy</td><td>Laboratoire MAT</td><td>LU-0200</td><td>przechowywać w RT</td></tr><tr><td>MASTERFLEX L/S 7557-04 W/ 7557-02 z pompą perystaltyczną EASY-LOAD II i głowicą 77200-50</td><td>Cole Parmer</td><td>77200-60</td><td></td></tr><tr><td>MBEC (minimalne stężenie eliminacji biofilmu) inokulator biofilmu z 96-dołkową podstawą</td><td>Innovotech</td><td>19111</td><td>Płytka do mikromiareczkowania Biofilm</td></tr><tr><td>na bazie agaru Oxford</td><td>Thermo Scientific</td><td>OXCM0856B</td><td>przechowywać w temperaturze 4 & deg; C</td></tr><tr><td>Plastikowy uchwyt na kupony</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 2203</td><td></td></tr><tr><td>Plastikowy pręt uchwytu ślizgowego</td><td>Biosurface Technologies Corporation</td><td>CBR 2203-GL</td><td></td></tr><tr><td>Jodek potasu</td><td>Fisher Chemical</td><td>P410-500</td><td>sklep w RT</td></tr><tr><td>Precyzyjny śrubokręt płaski (1,5 mm x 40 mm)</td><td>Wiha</td><td>26015</td><td></td></tr><tr><td>Kwas propionowy</td><td>Laboratoire MAT</td><td>PF-0221</td><td>sklep pod adresem RT</td></tr><tr><td>Sartorius BCE822-1S Entris&reg; II Podstawowa niezbędna równowaga ładowana od góry</td><td>Cole Parmer</td><td>&nbsp; UZ-11976-3</td><td></td></tr><tr><td>Skaningowy mikroskop elektronowy JSM-6360LV model</td><td>JEOL</td><td>JSM-6360LV</td><td>SEM i interfejs sterowania użytkownika Rurka</td></tr><tr><td>z nakrętką, 15 ml</td><td>Sarstedt</td><td>62.554.205</td><td>(Lx&Oslash;): 120 x 17 mm, materiał: PP, stożkowa podstawa, przezroczysta, HD-PE</td></tr><tr><td>Rurka z nakrętką, 50 ml</td><td>Sarstedt</td><td>62.547.205</td><td>(Lx&Oslash;): 114 x 28 mm, materiał: PP, stożkowa podstawa, przezroczysta, HD-PE</td></tr><tr><td>Kakodylan sodu Trójwodny</td><td>mikroskopia elektronowa Nauki</td><td>&nbsp; 12300</td><td>Sklep przy -20 &deg; C</td></tr><tr><td>Tiosiarczan sodu</td><td>Thermo Scientific</td><td>AC124270010</td><td>przechowywać w RT</td></tr><tr><td>Kąpiel sonikocyjna</td><td>Fisher</td><td>15-336-122</td><td>5,7 L</td></tr><tr><td>Roztwór skrobi</td><td>Anachemia</td><td>AC8615</td><td>przechowywać w RT</td></tr><tr><td>Kwas siarkowy</td><td>Sigma Aldrich</td><td>258105-500ML</td><td>przechowywać w RT</td></tr><tr><td>Tryptyczny agar sojowy</td><td>BD Bacto</td><td>DF0369-17-6</td><td>przechowywać w RT</td></tr><tr><td>Tryptyczny bulion sojowy</td><td>BD Bacto</td><td>DF0370-17-3</td><td>przechowywać w RT</td></tr><tr><td>Rurki Masterflex L/S 16 25'</td> <td>Cole Parmer</td><td>MFX0642416</td><td></td></tr><tr><td>Rurki Masterflex L/S 18 25'</td> <td>Cole Parmer</td><td>MFX0642418</td><td></td></tr><tr><td>Tygon SPT-3350 rurki silikonowe&nbsp;</td><td>Saint-Gobain</td><td>ABW18NSF</td><td>IDx OD: 1/4 cala x 7/16 cala</td></tr><tr><td>Vortex</td><td>Cole Parmer</td><td>UZ-04724-00</td><td></td></tr><tr><td>Łaźnia wodna&nbsp;</td><td>Oprogramowanie Zen VWR</td><td>89202-970</td><td></td></tr><tr><td></td><td>Zeiss</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

ocena skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu podejścia łączącego metody statyczne i dynamiczne

Evaluation of the Efficacy of Organic Peroxyacids for Eradicating Dairy Biofilms Using an Approach Combining Static and Dynamic Methods

Obecność biofilmów w przemyśle mleczarskim jest poważnym problemem, ponieważ mogą one prowadzić do produkcji niebezpiecznych i zmienionych produktów mlecznych ze względu na ich wysoką odporność na większość procedur czyszczenia na miejscu () często stosowanych w zakładach przetwórczych. Dlatego konieczne jest opracowanie nowych strategii kontroli biofilmu dla przemysłu mleczarskiego. Protokół ten ma na celu ocenę skuteczności organicznych nadtlenokwasów (kwasu nadoctowego, perpropionowego i nadmlekowego oraz dostępnego w handlu środka dezynfekującego na bazie kwasu nadoctowego) w zwalczaniu biofilmów mlecznych przy użyciu kombinacji metod statycznych i dynamicznych. Wszystkie środki dezynfekcyjne zostały przetestowane na najsilniejszych bakteriach wytwarzających biofilm w pojedynczym lub mieszanym biofilmie przy użyciu testu minimalnego stężenia eliminacji biofilmu (MBEC), statycznej metody przesiewowej o wysokiej przepustowości. Czas kontaktu ze środkami dezynfekującymi w zalecanych stężeniach wynoszący 5 minut skutecznie wyeliminował zarówno pojedyncze, jak i mieszane biofilmy. Obecnie trwają badania mające na celu potwierdzenie tych obserwacji przy użyciu reaktora biofilmu Centrum Kontroli Chorób (CDC), dynamicznej metody naśladowania warunków in situ. Ten typ bioreaktora umożliwia wykorzystanie powierzchni ze stali nierdzewnej, która stanowi większość urządzeń i powierzchni przemysłowych. Wstępne wyniki badań reaktora wydają się potwierdzać skuteczność organicznych nadtlenokwasów w walce z biofilmami. Podejście łączone opisane w tym badaniu może być wykorzystane do opracowania i przetestowania nowych preparatów biologicznych lub chemicznych do zwalczania biofilmów i zwalczania mikroorganizmów.

Analiza SEM wykazuje obecność biofilmów wytworzonych przez P. azotoformans PFl1A na wypustkach mikropłytki do biofilmów (Rysunek 2A). Można zaobserwować trójwymiarową strukturę biofilmu. P. azotoformans PFl1A został wcześniej zidentyfikowany jako silny producent biofilmu (A570 &gt; 1,5) z wykorzystaniem mikropłytek miareczkowych z 96 dołkami12.
Dodatkowo biofilm P. azotoformans PFl1A, który utworzył się...

Ten protokół opisuje podejście łączące metody statyczne i dynamiczne do oceny skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmów w przemyśle mleczarskim. Podejście to może być również wykorzystane do testowania skuteczności nowych preparatów biologicznych lub chemicznych w zwalczaniu biofilmów.

Ocena skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu podejścia łączącego metody statyczne i dynamiczne

The presence of biofilms in the dairy industry is of major concern, as they may lead to the production of unsafe and altered dairy products due to their ...

Mikroorganizmy tworzące biofilm są poważnym problemem w przemyśle spożywczym, w tym w przemyśle mleczarskim. Ze względu na ich negatywny wpływ na jakość produktów, ważne jest opracowanie strategii kontroli biofilmu. Podejście to łączy statyczną metodę badań przesiewowych o wysokiej przepustowości i metodę dynamiczną, która naśladuje warunki in situ.Te dwie metody uzupełniają się w badaniu skuteczności środków dezynfekcyjnych przeciwko biofilmowi. Podejście to może być wykorzystane do testowania nowych preparatów biologicznych lub chemicznych w celu kontroli biofilmów w sektorze spożywczym, medycznym lub środowiskowym. Zacznij od wirowania probówek z kulturami bakterii Pseudomonas azotoformans.Aseptycznie przenieść 100 mikrolitrów kultury bakteryjnej do 10 mililitrów sterylnego tryptycznego bulionu sojowego lub pożywki TSB, aby osiągnąć końcowe stężenie około dwa razy 10 do siódmej CFU na mililitr. Odwiruj rurkę hodowlaną. Następnie za pomocą pipety wielokanałowej przenieść 150 mikrolitrów rozcieńczonej kultury bakteryjnej do dołków na płytce mikrofilmu biofilmu w trzech egzemplarzach.Załaduj 150 mikrolitrów pożywki TSB do trzech nowych studzienek jako kontrola. Następnie inkubować płytkę do mikrofilmu biofilmu w temperaturze 30 stopni Celsjusza przez 24 godziny bez mieszania. Oczyść i wysusz na powietrzu części bioreaktora przed umieszczeniem płaskiego ostrza w jednolitrowej szklanej zlewce przymocowanej do uchwytu za pomocą pręta magnetycznego.Utrzymuj konfigurację w pozycji pionowej za pomocą plastikowego pręta przymocowanego po wewnętrznej stronie pokrywy bioreaktora. Użyj śrubokręta, aby umieścić kupony lub prowadnice ze stali nierdzewnej na prętach polipropylenowych. Włóż kupony lub szkiełka do otworów w pokrywie bez umieszczania ich kołków wyrównujących w nacięciach, umożliwiając ucieczkę pary podczas sterylizacji.Przykryj wszystkie otwory wentylacyjne bioreaktora folią aluminiową i owiń resztę sprzętu, a mianowicie rurkę w rozmiarze 18 i rurkę w rozmiarze 16, szklany hamulec przepływu, nakrętki pojemników, śrubokręty, kleszcze i filtry 0,2 mikrometra folią aluminiową. Autoklawować bioreaktor ustawiony w suchym cyklu w temperaturze 121 stopni Celsjusza przez 20 minut. Aby wykonać pierwszy etap tworzenia biofilmu w bioreaktorze w trybie wsadowym, wewnątrz szafy bezpieczeństwa biologicznego, podłącz jeden koniec rurki o rozmiarze 18 do wylewki bioreaktora, a drugi koniec trzymaj owinięty folią aluminiową.Wyjmij jeden uchwyt na kupon lub szkiełko z pokrywy bioreaktora i umieść go w sterylnej probówce o pojemności 50 mililitrów. Następnie za pomocą pipety serologicznej o pojemności 50 mililitrów napełnij zlewkę bioreaktora 340 mililitrami 300 miligramów na mililitr pożywki TSB przez otwór zajmowany przez pręt. Aby zaszczepić pożywkę hodowlaną w bioreaktorze, dodaj jeden mililitr 10 do ósmej CFU na mililitr roztworu bakteryjnego Pseudomonas azotoformans przez otwór za pomocą pięciomililitrowej pipety i umieść pręt z powrotem w jego pierwotnej pozycji.Umieść pręty już umieszczone w otworach pokrywy, aby kołki pasowały do odpowiednich nacięć. Następnie umieść bakteryjny filtr przedmuchujący powietrzem o średnicy 0,2 mikrometra na końcu rurki o najmniejszej średnicy znajdującej się na pokrywie bioreaktora. Druga rurka o tej samej średnicy pozostaje na stałe zatkana metalową nakrętką lub silikonową zatyczką, która szczelnie się zamyka.Umieść bioreaktor na 24 godziny nad płytą grzewczą ustawioną na 30 stopni Celsjusza i mieszaj z prędkością 130 obr./min. Po 24 godzinach należy wykonać drugi etap tworzenia biofilmu w bioreaktorze w trybie ciągłego przepływu. Umieść balon zawierający 18 litrów sterylnej wody destylowanej w komorze bezpieczeństwa biologicznego.Następnie dodaj dwa litry 1000 miligramów na litr pożywki hodowlanej TSB, aby uzyskać końcowe stężenie 100 miligramów na litr. Przykryj pojemnik sterylną nakrętką, do której podłączone są dwie probówki. Pierwszą z nich jest silikonowa rurka zamocowana na powierzchni styku nasadki do pompowania medium.Drugi, rurka w rozmiarze 16, jest podłączona do zewnętrznego portu, umożliwiając przepływ cieczy w kierunku bioreaktora. Po podłączeniu rurki o rozmiarze 16 do końca szklanego hamulca przepływu, włóż tę ostatnią do największej rurki na pokrywie bioreaktora na drugim końcu, a następnie zainstaluj rurkę o rozmiarze 16 w pompie perystaltycznej. Użyj kolejnego 20-litrowego balonu, aby zebrać ścieki z bioreaktora.Przymocuj koniec rurki podłączonej do wylewki wylotowej bioreaktora do nakrętki pojemnika na odpady. Włóż filtr 0,2 mikrometra do rurki znajdującej się na pokrywie tego pojemnika. Po zakończeniu uruchom pompę perystaltyczną przy natężeniu przepływu 11,3 mililitra na minutę i pozostaw system włączony na 24 godziny.Po 24 godzinach wyłącz pompę perystaltyczną i przestań mieszać i podgrzewać bioreaktor. Aby odzyskać biofilm bakteryjny, przepłucz kupony lub szkiełka w 40 mililitrach PBS, aby wyeliminować bakterie planktonowe. Następnie wypuść je do sterylnej stożkowej rurki o pojemności 50 mililitrów zawierającej 40 mililitrów PBS.Po 30 sekundach wirowania, sonikuj rurki z częstotliwością 40 kiloherców przez 30 sekund. Powtórz to trzy razy. Po zakończeniu zbierz 40 mililitrów zawiesiny biofilmu w sterylnej stożkowej probówce o pojemności 50 mililitrów i przepłucz kupony lub szkiełka dwoma sterylnymi roztworami PBS.Odzyskaj ten płyn płuczący i dodaj go do już zebranej zawiesiny biofilmu. Wyjmij płytkę do mikromiareczkowania z 30 stopni Celsjusza. Dodaj 200 mikrolitrów PBS do trzech dołków 96-dołkowej mikropłytki.Aby umyć biofilmy i wyeliminować bakterie planktonowe, należy przenieść pokrywę mikropłytki biofilmu z biofilmami utworzonymi na kołkach do 96-dołkowej mikropłytki zawierającej PBS na 10 sekund. Przygotować środki dezynfekujące w wymaganych stężeniach i dodać 200 mikrolitrów każdego stężenia środka dezynfekcyjnego do studzienek nowej 96-dołkowej płytki do mikromiareczkowania w trzech egzemplarzach. Przenieść pokrywkę płytki do mikromiareczkowania biofilmu na 96-dołkową płytkę do mikromiareczkowania zawierającą środki dezynfekcyjne i inkubować płytkę w temperaturze pokojowej przez żądany czas ekspozycji.Następnie dodaj 200 mikrolitrów bulionu neutralizującego Dey-Engley do dołków nowej 96-dołkowej płytki do mikromiareczkowania. Przenieść pokrywkę płytki do mikrofilmu biofilmu na 96-dołkową płytkę do mikromiareczkowania zawierającą bulion neutralizujący. Uszczelnij płytkę mikromiareczkową parafilmem i umieść ją w sonikutorze kąpielowym o częstotliwości 40 kiloherców na 30 minut.Po 30 minutach, z pierwszej kolumny sonikowanej płytki, przenieść 100 mikrolitrów oderwanych biofilmów do pierwszego rzędu nowej 96-dołkowej płytki do mikromiareczkowania. Następnie dodaj 180 mikrolitrów sterylnego PBS do 96-dołkowej płytki, z wyjątkiem pierwszego rzędu. Następnie przenieś 20 mikrolitrów roztworu biofilmu z pierwszego rzędu do studzienek w drugim rzędzie zawierających 180 mikrolitrów PBS, aby uzyskać rozcieńczenie 10 do minus jeden.Następnie przenieś 20 mikrolitrów z drugiego rzędu do studzienek w następnym rzędzie, aby uzyskać rozcieńczenie 10 do minus dwóch. Powtórz to, aby uzyskać rozcieńczenie między 10 do minus pięć i od 10 do minus siedem. Zaszczepić 100 mikrolitrów pożądanego rozcieńczenia na TSA i inkubować płytki zgodnie z parametrami wzrostu bakterii.Uformuj biofilmy Pseudomonas azotoformans PFLA 1 na kuponach w bioreaktorze, usuń pręt przytrzymujący kupony i przepłucz pręt wewnątrz stożkowej rurki zawierającej 30 mililitrów PBS w celu usunięcia komórek planktonu. Wrzuć każdy kupon do sterylnej stożkowej rurki o pojemności 50 mililitrów za pomocą śrubokręta. Następnie dodaj cztery mililitry odpowiedniego organicznego roztworu nadtlenkowego lub PBS do kontroli.Po pięciu minutach inkubacji dodaj 36 mililitrów bulionu neutralizującego Dey-Engley. Po wirowaniu stożkowej rurki przez 30 sekund, sonikuj je z częstotliwością 40 kiloherców przez 30 sekund. Powtórz proces trzy razy, aby uzyskać zawiesinę biofilmu.Powtórzyć tę samą procedurę z innymi prętami, przygotować seryjne urojenia zawiesiny biofilmu i utrzymywać zawiesinę na pożywce TSA, jak opisano wcześniej. Analiza SCM wykazała obecność biofilmu Pseudomonas azotoformans PFL1A na kołkach mikropłytki biofilmu. Biofilm Pseudomonas azotoformans PFL1A utworzony na szkiełku ze stali nierdzewnej przy użyciu bioreaktora wydawał się bardzo gęsty i wykazywał cechy morfologiczne dojrzałego trójwymiarowego biofilmu.Wyniki zliczania bakterii w biofilmach wytworzonych przez ten izolat w systemie dynamicznym wykazały znaczne zagęszczenie komórek odpowiadające 8,74 log CFU na centymetr kwadratowy w pożywce hodowlanej TSB i 7,86 log CFU centymetr kwadratowy w sterylnym mleku odtłuszczonym. Wyniki uzyskane za pomocą izolatu B.vesicularis wykazały, że wzrost stężenia składników odżywczych od 100 do 900 miligramów na litr spowodował wzrost liczby bakterii w biofilmach z 6,11 do 8,71 log CFU centymetra kwadratowego. Zaobserwowano również znaczny wzrost biofilmu, gdy natężenie przepływu zostało zmniejszone do 6,0 mililitrów na minutę, co wskazuje, że pewne czynniki mogą wpływać na tworzenie biofilmu w bioreaktorze.Żaden z biofilmów nie zawierał wykrywalnych żywych komórek w ciągu pięciu minut kontaktu w 500 częściach na milion w przypadku organicznych nadtlenokwasów i 100 000 części na milion w stężeniach nadtlenku wodoru środków dezynfekcyjnych zwykle stosowanych w zakładach mleczarskich. SCM wykazał trójwymiarową strukturę niepoddanego działaniu substancji minimalnego stężenia eradykacji biofilmu lub biofilmów MBEC, podczas gdy biofilmy MBEC poddane działaniu środka utraciły swoją trójwymiarową konformację. Istotne jest, aby podczas wykonywania tego protokołu pozostać w stanie sterylnym.Należy również pamiętać, że wygenerowany wynik jest powiązany z unikalnym izolatem i środkiem dezynfekującym. Połączenie środka dezynfekującego z wibracjami mechanicznymi, ultradźwiękami lub zabiegami enzymatycznymi może być ocenione w celu poprawy skuteczności eliminacji biofilmu. Podejście to, wykorzystujące metody statyczne i dynamiczne do tworzenia biofilmów, utorowało naukowcom drogę do badań przesiewowych i badań nad nowymi formułami przeciw biofilmom w celu lepszej kontroli biofilmów w różnych sektorach.

evaluation-efficacy-organic-peroxyacids-for-eradicating-dairy

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Źródło: Tay, S. B., et.al. Antywirusowe zaburzenie biofilmów patogennych przy użyciu inżynierowanych laktonan gaśniczych kworum.  J. Vis. Exp. (2016)Ten film demonstruje proces hamowania tworzenia biofilmu poprzez wprowadzenie enzymu zakłócającego sygnalizację komórkową bakterii. Enzym ten zapobiega produkcji przez bakterie pozakomórkowych substancji polimerowych, co ogranicza rozwój biofilmu na mikromisce o szklanym dnie. Na koniec struktura biofilmu jest wizualizowana za pomocą...

Mikroskopowa ocena hamowania powstawania biofilmu przez enzymy

Źródło: Bucher, T. i in. Metodologie badania biofilmów B. subtilis jako modelu charakteryzowania inhibitorów biofilmu małocząsteczkowego. J. Vis. Exp. (2016).Ten film pokazuje, jak integralność matrycy biofilmu wpływa na odporność bakterii na etanol, porównując jednostki tworzące kolonie w biofilmach nieleczonych i zaburzonych przez inhibitory. Zmniejszone CFU w próbkach objętych inhibitorami pokazują, że macierz zewnątrzkomórkowa jest niezbędna do ochrony komórek osadzonych w biofilmie przed...

Test odporności na etanol w celu oceny integralności matrycy biofilmu

Ten film demonstruje opartą na fluorescencji metodę ilościowego określania powstawania biofilmu wywołanego solami żółciowymi. Po dodaniu soli żółciowych do hodowli chorobotwórczych bakterii jelitowych, wytwarzanie biofilmu jest wykrywane za pomocą fluorescencyjnej lektyny, która wiąże się z polisacharydami w matrycy zewnątrzkomórkowej substancji polimerowej (EPS) biofilmu.

Test do badania tworzenia biofilmu indukowanego solą żółciową poprzez wykrywanie matrycy EPS

Film prezentuje test dyspersji biofilmu przy użyciu płytki wielodołkowej. Leczenie buforem i glukozą demontuje biofilm, uwalniając bakterie, podczas gdy sole żółciowe wywołują stres, zatrzymując bakterie w ochronnej zewnątrzkomórkowej substancji polimerowej. Wyższa dyspersja z buforem i glukozą potwierdza udany demontaż biofilmu, oszacowany na podstawie pomiaru jednostek tworzących kolonie.

Wykrywanie demontażu biofilmu za pomocą testu dyspersyjnego

To badanie przedstawia rozwój powtarzalnych metodologii badania inhibitorów biofilmu i ich wpływu na wielokomórkowość Bacillus subtilis.

Metodologie badania biofilmów B. subtilis jako modelu charakteryzującego małocząsteczkowe inhibitory biofilmu

Ten protokół opisuje nową metodę hodowli i jakościowej analizy biofilmów bakteryjnych na strzępkach grzybów za pomocą mikroskopii konfokalnej i elektronowej.

Nowa metoda jakościowej wieloskalowej analizy biofilmów bakteryjnych na koloniach grzybów nitkowatych z wykorzystaniem mikroskopii konfokalnej i elektronowej

Biofilmy na powierzchniach mogą być skutecznie i szybko usuwane za pomocą okresowego strumienia aerozoli dwutlenku węgla bez przedmuchiwania azotem.

Usuwanie biofilmu za pomocą aerozoli dwutlenku węgla bez przedmuchiwania azotem

Produkty naturalne stanowią obiecujące punkty wyjścia dla rozwoju nowych leków i środków terapeutycznych. Jednak ze względu na dużą różnorodność chemiczną znalezienie nowych związków terapeutycznych z roślin jest trudnym i czasochłonnym zadaniem. Opisujemy uproszczone podejście do identyfikacji cząsteczek przeciwdrobnoustrojowych i antybiofilmu z ekstraktów i frakcji roślinnych.

Systematyczne podejście do identyfikacji nowych cząsteczek przeciwdrobnoustrojowych i przeciwbiofilmowych z ekstraktów i frakcji roślinnych w celu zapobiegania próchnicy zębów

Ten artykuł szczegółowo opisuje metody, które demonstrują trzy popularne techniki zbierania i dezagregacji biofilmu na dwóch typach powierzchni, testowanie odporności metody zbierania oraz minimum informacji do rozważenia przy wyborze i optymalizacji technik zbioru i dezagregacji w celu zwiększenia odtwarzalności.

Zbiór i dezagregacja: pomijany krok w badaniach nad metodami biofilmu

Ten protokół przedstawia metodologię wykonywania pomiarów wzrostu biofilmu i biomasy przy użyciu samodzielnie zmontowanych urządzeń do płytek PCR z głębokiej studni do wysokoprzepustowego 96-dołkowego statycznego przesiewania biofilmu z pokrywą potwierdzoną.

Wytwarzanie większej biomasy biofilmu bakteryjnego za pomocą urządzeń do mikropłytek głębinowych PCR-Plate

Poznaj metodę oceny skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu połączenia statycznego i dynamicznego podejścia badawczego.

Ocena skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu podejścia łączącego metody statyczne i dynamiczne (Wideo) | JoVE Journal

Ocena skuteczności organicznych nadtlenokwasów w zwalczaniu biofilmu mlecznego przy użyciu podejścia łączącego metody statyczne i dynamiczne

Przeglądaj więcej filmów