Name: Opracowanie modelu przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika do badania zwłóknienia i zwyrodnienia mięśniowego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-03-31T14:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 20 s
Description: Poznaj technikę chirurgiczną indukcji przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika. Model ten umożliwia badanie patogenezy i rozwoju terapii regeneracyjnych dla mięśniowo-ścięgnistych urazów.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Badania Dai Fei Elmera Kera są wspierane przez fundusze z Biura ds. Żywności i Zdrowia, Hong Kong SAR (Health Medical and Research Fund: 08190466), Innovation and Technology Commission, Hong Kong SAR (Tier 3 Award: ITS/090/18; Health@InnoHK programie), Research Grants Council of Hong Kong, Hong Kong SAR (Early Career Scheme Award: 24201720 and General Research Fund: 14213922) oraz The Chinese University of Hong Kong (Faculty Innovation Award: FIA2018/A/01). Badania Dana Wanga są wspierane przez fundusze Biura ds. Żywności i Zdrowia, Hongkong SAR (Health Medical and Research Fund, 07180686), Komisji ds. Innowacji i Technologii, Hongkong SAR (nagroda Tier 3: ITS/333/18; Health@InnoHK) oraz Research Grants Council of Hong Kong, Hong Kong SAR (General Research Fund: 14118620 i 14121121).

Wszystkie procedury muszą być wykonywane przy użyciu sterylnej techniki chirurgicznej w odpowiednio wyposażonym pomieszczeniu przeznaczonym do operacji na zwierzętach, zgodnie z protokołem zatwierdzonym przez komisję etyki eksperymentów na zwierzętach instytutu. W niniejszym badaniu operacje na królikach przeprowadzono zgodnie z protokołem zatwierdzonym przez Komitet Etyki Eksperymentów na Zwierzętach Chińskiego Uniwersytetu w Hongkongu.
1. Zabieg chirurgiczny
<ol>
	<li>Aby przygotować obszar operacyjny, podgrzej poduszkę grzewczą i przykryj ją sterylnymi obłożeniami chirurgicznymi, aby utrzymać temperaturę ciała królika. Następnie ułóż wysterylizowane narzędzia i materiały chirurgiczne (zgodnie ze Tabelą materiałów) i uporządkuj je zgodnie z preferencjami chirurga.</li>
	<li>Wywołać znieczulenie poprzez domięśniowe podanie 35 mg/kg ketaminy i 5 mg/kg ksylazyny białym królikom nowozelandzkim (o wadze od 3,5 do 4,5 kg, w wieku około 5-6,5 miesiąca; w tym badaniu wykorzystano dwa samce i jedną samicę królika). Następnie potwierdź znieczulenie za pomocą testu szczypania łapy i/lub ogona.</li>
	<li>Jeśli do podtrzymania płaszczyzny operacyjnej wymagane jest dodatkowe znieczulenie, należy podać dożylnie 10 mg/kg ketaminy i 3 mg/kg ksylazyny przez żyłę ucha brzeżnego28 i monitorować częstość oddechów zwierzęcia w regularnych odstępach czasu 5-10 min.</li>
	<li>Aby przygotować okno operacyjne, należy ogolić zamierzone miejsce nacięcia (obszar skóry powierzchowny w stosunku do jednostki mięśniowo-ścięgnistej SSC) i oczyścić trzema naprzemiennymi aplikacjami betadyny i 70% alkoholu. Za pomocą bawełnianego wacika nałóż betadynę i 70% alkohol okrężnymi ruchami (od wewnątrz na zewnątrz). Użyj maści do oczu, aby oczy królika były wilgotne i nawilżone. Cefaleksynę należy podawać domięśniowo w dawce 20 mg/kg mc. jako środek przeciwinfekcyjny.</li>
	<li>Wykonaj 3-4 cm nacięcie skóry poniżej obojczyka, podziel odstęp naramienny za pomocą skalpela chirurgicznego nr 11 i cofnij się, aby uzyskać dostęp do ramienia (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1A, B).</li>
	<li>Aby zlokalizować jednostkę mięśniowo-ścięgnistą SSC, najpierw zidentyfikuj mięsień kruczo-ścięgnisty (jako tkankę pokrywającą przyczep ścięgna SSC) i podziel go. Następnie zidentyfikuj ścięgno SSC i włóż zacisk pod kątem prostym, aby odsłonić całe ścięgno SSC w momencie jego przyczepienia do mniejszej guzowatości kości ramiennej (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1C).</li>
	<li>Przed wprowadzeniem urazu należy odizolować mięsień-ścięgno SSC (<silna klasa = "xfig" >Ryc. 1D) i podać śródoperacyjne znieczulenie (0,2 mg/kg 0,5% bupiwakainy) lokalnie w pobliżu miejsca przecięcia. Owiń jednostkę mięśniowo-ścięgnistą SSC rurką penrose'a na bazie silikonu (ryc. 1E), aby zapobiec niepożądanemu przyczepieniu się do otaczających tkanek i ułatwić późniejsze pobieranie tkanek.</li>
	<li>Aby wywołać uraz, wykonaj transsekcję o pełnej grubości na połączeniu mięśniowo-ścięgnistym za pomocą skalpela chirurgicznego nr 11 (<silna klasa = "xfig">Ryc. 1F). W razie potrzeby zatamuj krwawienie, uciskając kawałkiem gazy i w razie potrzeby użyj soli fizjologicznej do przepłukania rany.</li>
	<li>Aby zamknąć ranę, użyj nici 4-0 z kwasu poliglikolowego (PGA), aby ponownie zbliżyć tkankę mięśnia naramiennego (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1G) i nylonowy szew 4-0 aby zamknąć ranę skóry (<silna klasa = "xfig">Rysunek 1H).</li>
	<li>Zapewnienie opieki pooperacyjnej poprzez podskórne podanie 0,03 mg/kg buprenorfiny jako środka przeciwbólowego (raz bezpośrednio po operacji i dwa razy dziennie przez następne 48 godzin29).</li>
	<li>Pozwól królikom dojść do siebie na przykrytej poduszce grzewczej i załóż miękką obrożę, aby zapobiec niepożądanym zachowaniom, w tym samookaleczeniom, lizaniu miejsc operowanych i usuwaniu szwów (<silna klasa="xfig">Rysunek 1I).</li>
	<li>Monitoruj zwierzęta pod kątem zmian w wadze i zachowaniu. Zgłaszaj weterynarzowi każdy spadek masy ciała o więcej niż 10% i silny ból, którego nie można kontrolować (oceniany na podstawie pięciu działań behawioralnych: zaciśnięcie oczodołu, spłaszczenie policzków, zmiany kształtu nozdrzy, zmiany pozycji wąsów oraz zmiany kształtu i pozycji uszu) do weterynarza, aby ustalić, czy wymagana jest interwencja, taka jak wczesna eutanazja.</li>
</ol>
2. Pobieranie próbek
<ol>
	<li>Poddaj króliki eutanazji po 4 tygodniach od momentu urazu. Znieczulić króliki i podać śmiertelną dawkę pentobarbitalu sodu (ponad 60 mg/kg). Potwierdź zgon przez torakotomię.</li>
	<li>Zidentyfikuj głowę kości ramiennej i wytnij ją chirurgicznie, zachowując większe i mniejsze guzki oraz wszystkie przyczepy tkanek miękkich. Utrwalić 4% paraformaldehydem (PFA) przez 72 godziny w temperaturze 4 °C przed przeniesieniem do roztworu 10% kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) na 1 miesiąc w temperaturze pokojowej (ze zmianą podłoża co 72 godziny) w celu odwapnienia kości.</li>
	<li>Po odwapnieniu należy poddać próbki standardowej obróbce histologicznej przy użyciu stopniowego odwadniania etanolu, zatapiania parafiny, cięcia histologicznego (skrawki 8 μm) oraz barwienia hematoksyliną i eozyną (H&E) oraz roztworami trichromu Massona30,31,32.</li>
	<li>Rejestruj obrazy za pomocą mikroskopu pionowego przy 10-krotnym powiększeniu.</li>
	<li>Przeprowadź półkwantyfikację obrazów trichromowych H&E i Massona, mierząc powierzchnię i procent mięśni, tkanki włóknistej i tłuszczu w mięśniach, zgodnie z wcześniejszym opisem33,34 przy użyciu wybranego oprogramowania do projektowania graficznego. W tym przykładzie używane jest oprogramowanie Adobe Photoshop (https://www.adobe.com).
	<ol>
		<li>Wybierz obszar o określonym kolorze reprezentujący określony typ tkanki za pomocą narzędzia magicznej różdżki (czerwony to tkanka mięśniowa, niebieski to zwłóknienie, a biały reprezentuje tłuszcz).</li>
		<li>Kliknij punkty menu Wybierz | Odwrotność | Zapisz wybór | Nazwij sekcję.</li>
		<li>Policz liczbę pikseli w zaznaczonym obszarze, klikając pozycje menu Okno | Dziennik pomiarów | Rejestruj pomiar, aby zarejestrować te wartości pikseli i ręcznie obliczyć procent wybranych typów tkanek.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Analiza statystyczna
<ol>
	<li>W przypadku danych histologicznych należy przeprowadzić analizę statystyczną przy użyciu wybranego oprogramowania analitycznego. Wykonaj test t-Studenta w celu porównania dwóch niezależnych próbek między grupą kontrolną a grupą poszkodowaną.</li>
	<li>Wyrazić dane jako średnią ± błąd standardowy średniej. Uznajmy, że wartość p <0,05 jest statystycznie istotna.</li>
</ol>

Autorzy nie mają do zadeklarowania żadnych sprzecznych interesów.

Powtarzalny i fizjologicznie istotny model zwierzęcy umożliwia pogłębienie wiedzy na temat patogenezy choroby, ocenę wyników terapii klinicznych oraz ulepszenie i dalszy rozwój leczenia chirurgicznego35. W tym badaniu ustalono wiarygodny i dokładny model SSC królika, który naśladuje aspekty anatomii i patofizjologii człowieka RC. Łzy RC są związane z postępującymi i prawdopodobnie nieodwracalnymi zmianami zwyrodnieniowymi mięśni, co skutkuje zmniejszonym potencjałem gojenia. Na przykład, Ko i wsp. wykazali, że ponowne przyłączenie króliczego TPK po 6 tygodniach nie odwróciło atrofii mięśni lub FD w ciągu następnych 6 tygodni. Taki zanik mięśni za pośrednictwem FD wpływa na kilka ważnych parametrów klinicznych, w tym siłę ścięgien i zakres ruchu stawów, co może wpływać na wyniki operacji36,37.
Ustalony tu protokół wykazywał istotne cechy podobne do przewlekłych po przecięciu jednostek mięśniowo-ścięgnistych SSC. W szczególności zmiany te obejmują widocznie zmniejszoną masę mięśniową oraz zwiększoną zawartość tkanki tłuszczowej i zwłóknieniowej (ryc. 2, ryc. 3 i ryc. 4). Wyniki te są zgodne ze zmianami zwyrodnieniowymi zgłaszanymi w ludzkich łzach RC38. W ostatnich latach szczur stał się jednym z najintensywniej badanych modeli zwierzęcych pod kątem chorób i urazów RC ze względu na swoje wysokie podobieństwa anatomiczne zarówno do ludzkich, jak i szczurzych TPK podróżujących pod wyrostkiem barkowym 38,39,40. Należy jednak zauważyć, że część TPK szczura, która przechodzi pod łukiem barkowym, jest mięśniowa, a nie ścięgnista, jak ma to miejsce u ludzi41. Co najważniejsze, Barton i wsp. stwierdzili brak znaczącej akumulacji tłuszczu po oderwaniu ścięgna SSP u szczurów23, co kontrastuje z kondycją ludzką42. W związku z tym uważa się, że kompleks SSC królika może stanowić odpowiedni model do naśladowania przewlekłego rozdarcia RC u ludzi.
Aby zapewnić odtwarzalność tego modelu, podczas wykonywania tego protokołu warto zwrócić uwagę na dwa punkty. Po pierwsze, po przecięciu jednostek mięśniowo-ścięgnistych, wolny koniec przeciętego ścięgna może być zagrożony tworzeniem zrostów, co może utrudnić odzyskanie ścięgna przy kolejnych manipulacjach. Aby uniknąć tego problemu, zastosowano niewchłanialną rurkę silikonową do owinięcia wolnego końca połączenia mięśniowo-ścięgnistego po przecięciu, aby uniknąć spontanicznego przylegania do otaczających tkanek, a także spontanicznego gojenia (ryc. 1E). Co więcej, przecięta jednostka mięśniowo-ścięgnista podczas drugiej procedury interwencji (tj. w celu wykonania bezpiecznej naprawy; dane nie są pokazane) może być wyraźnie zidentyfikowana poprzez owinięcie końca uszkodzonych tkanek w czasie początkowej operacji. Technika ta jest ekonomiczna, skuteczna i może być łatwo wdrożona w chirurgii43. Po drugie, króliki są bardzo wrażliwym gatunkiem, który może wykazywać szkodliwe zachowanie po operacji. Aby uniknąć takich problemów, zdecydowanie zaleca się również zastosowanie miękkiego kołnierza, aby zapobiec niepożądanym zachowaniom, w tym samookaleczeniom, lizaniu miejsc operowanych i usuwaniu szwów (ryc. 1I). W porównaniu z konwencjonalnymi obrożami elektronicznymi, które są wykonane ze sztywnego tworzywa sztucznego, samodzielnie wykonana miękka obroża nie spowodowała żadnych obrażeń skóry ani innych skutków ubocznych, które wpłynęłyby na dobrostan zwierząt lub jakość badań naukowych. Łącznie takie kroki mają kluczowe znaczenie dla stworzenia dokładnie powtarzalnego modelu urazów RC królików i dają możliwość badania strategii naprawy regeneracyjnej.
Aby badać patofizjologię ścięgien i gojenie się w modelu zwierzęcym, należy stworzyć wyraźny i powtarzalny uraz, a punkty czasowe badania muszą być starannie dobrane. Zdecydowana większość badań nad uszkodzeniem ścięgien i gojeniem została przeprowadzona na w pełni przeciętych ścięgnach zwierzęcych44, ponieważ przecięcie jest prostą procedurą, która jest wysoce powtarzalna i może odpowiednio symulować scenariusz kliniczny 45,46. Huegel i wsp. wykazali, że uraz częściowo przeciętego ścięgna był mniej poważny niż w przypadku ścięgna w pełni przeciętego, a unieruchomienie miało szkodliwy wpływ na mechanikę ścięgna, w tym zwiększoną sztywność stawu47. Aby ocenić atrofię i FD, które są widoczne w otoczeniu masywnego rozdarcia RC, konieczne jest zdefiniowanie eksperymentalnie zaobserwowanych charakterystycznych punktów czasowych. Gupta i in. zwalidowali model urazu RC u samca królika i zaobserwowali zanik mięśni w 2 i 6 tygodniach, ze zwiększoną zawartością tłuszczu w późniejszych punktach czasowych (mniej niż 5% zawartości tłuszczu w 2 tygodniach w porównaniu z ponad 10% zawartością tłuszczu w 6 tygodniach), zgodnie z procesem patologicznym obserwowanym w ludzkich łzach RC11. W tym badaniu masywne rozdarcie RC powstało w wyniku przecięcia jednostki mięśniowo-ścięgnistej SSC u samców i samic królików przez 4 tygodnie, co spowodowało FD mięśnia SSC (36,5% zawartości tłuszczu). Tak więc, 4-tygodniowy punkt czasowy jest odpowiedni do generowania mięśni SSC FD u samców i samic białych królików nowozelandzkich.
Istnieje kilka ograniczeń tego badania. Obejmują one: (i) etapy związane z generowaniem modeli zwierzęcych, takie jak stosunkowo krótki punkt czasowy i potencjalnie zapalne materiały (rurki penrose na bazie silikonu) do generowania przewlekłych urazów; (ii) charakterystyka i analiza modelu zwierzęcego, np. brak analizy chodu i elektromiografii w celu oceny kinematyki stawów i generowania siły kurczliwości mięśni; oraz (iii) porównanie modeli zwierzęcych, takie jak brak porównania z innymi miejscami urazów RC.
Jeśli chodzi o generowanie modeli, urazy RC u ludzi zazwyczaj obejmują postępującą atrofię i FD, które mogą wystąpić w ciągu kilku lat, czyli stosunkowo dłużej niż 4-tygodniowy punkt czasowy opisany tutaj. Jest to uważane za dopuszczalne, ponieważ model zwierzęcy, który generuje około 36,5% tłuszczu śródmięśniowego w stosunkowo krótkim czasie, będzie logistycznie wygodny i może zostać przedłużony, jeśli zostanie uznany za konieczny. Co więcej, biokompatybilność implantów na bazie silikonu, takich jak rurki Penrose'a, jest źródłem długotrwałych kontrowersji ze względu na doniesienia o komórkowej odpowiedzi immunologicznej i zapaleniu47; w związku z tym alternatywny materiał obojętny, taki jak glikol polietylenowy (PEG), może być zastąpiony do owijania wyciętego ścięgna w przypadku prowadzenia badań RC związanych ze stanem zapalnym.
Jeśli chodzi o charakterystykę i analizę modelu zwierzęcego, brak analizy chodu49 i badań elektromiografem50 może ograniczyć wyniki badania do jakościowych danych histologicznych. Aspekty te mogą zostać uwzględnione w przyszłych badaniach przy użyciu analizy ruchu wideo51 i elektromiografii powierzchniowej50 w celu wygenerowania danych ilościowych na temat kinematyki barku i wydajności mięśni RC.
Jeśli chodzi o porównanie modeli, ponieważ TPK i ścięgna podgrzebieniowe u królików były również szeroko stosowane w badaniach RC, porównanie ciężkości urazu, w tym FD między tymi różnymi miejscami urazu w przyszłości, pozwoli zidentyfikować dodatkowe miejsca do optymalizacji modelu.
Podsumowując, w ramach tego badania opracowano protokół modelowania przewlekłych urazów RC u samców i samic królików. Model ten jest wygodny dla badaczy ze względu na swoją prostotę (przecięcie) i stosunkowo krótki okres indukcji przewlekłości (4 tygodnie) przy jednoczesnym generowaniu dużego stopnia (36,5%) domięśniowego FD. W związku z tym oczekuje się, że protokół ten pomoże badaczom w badaniu patofizjologii RC, a także ułatwi opracowanie nowych terapii naprawy i regeneracji ścięgien mięśniowych.

Przewlekłe naderwania stożka rotatorów (RC) charakteryzują się zmianami zwyrodnieniowymi mięśni i ścięgien, w tym zanikiem mięśni, nagromadzeniem tkanki tłuszczowej i zwłóknieniem, co może zagrozić wynikowi naprawy RC i ostatecznie spowodować ból i dysfunkcję barku1,2,3,4,5. Aby lepiej zrozumieć patogenezę łez RC i poprawić wyniki chirurgiczne, kluczowe jest opracowanie odpowiednich modeli zwierzęcych, które mogą naśladować aspekty anatomii i patofizjologii RC człowieka. W szczególności modele urazów RC powinny spełniać następujące kryteria: (i) brak spontanicznego gojenia się po urazie; (ii) zawierają znaczącą obecność zwłóknienia, zaniku mięśni i nagromadzenia tkanki tłuszczowej; oraz (iii) mieć odpowiedni rozmiar, aby umożliwić przybliżenie technik chirurgicznych stosowanych u ludzi6.
W tym kontekście, mięsień podłopatkowy królika (SSC) może być używany jako dokładny i wiarygodny model zwierzęcy do badania patofizjologii RC, biorąc pod uwagę jego unikalną anatomię, patofizjologiczną reakcję i właściwości biomechaniczne7. Rzeczywiście, anatomia SSC RC królika jest podobna do ludzkiego nadgrzebieniowego RC (SSP), który jest jednostką mięśniowo-ścięgnistą najczęściej związaną z urazem wynikającym z przeciążenia8,9. W szczególności kompleks ścięgna SSC królika przechodzi przez tunel kostny i pod mięśniem kruczo-ramiennym, co jest analogiczne do sytuacji u ludzi, gdzie kompleks ścięgna SSP przechodzi przez podbarkowy tunel kostny i pod więzadłem kruczo-ramiennym7. To anatomiczne podobieństwo powoduje, że SSC królika przechodzi podobne ruchy mięśniowo-szkieletowe jak ludzki SSP, w którym ścięgno przemieszcza się pod wyrostkiem barkowym podczas podnoszenia i odwodzenia kości ramiennej7,10.
Ponadto, zmiany patohistologiczne, podobne do ludzkich łez RC11, zaobserwowano u królika po rozdarciu SSC. W szczególności brzuch mięśniowy ulega poważnemu FD, ze znaczną utratą masy mięśniowej, zmniejszoną powierzchnią przekroju poprzecznego włókien mięśniowych i zwiększoną otyłością. Ponadto, Otarodifard i in. ocenili charakterystykę biomechaniczną SSC królika po (1) technikach naprawy RC jednorzędowej, (2) dwurzędowej i (3) transkostnej równoważnej równoważnej RC i stwierdzili, że początkowe cechy biomechaniczne tych napraw były podobne do napraw RC TPK u ludzi wykonanych w próbkach zwłok12. W związku z tym anatomiczne, fizjologiczne i biomechaniczne podobieństwo SSC królika do ludzkiego SSP sprawia, że jest on przydatny do modelowania urazów RC.
Chociaż wiele gatunków zwierząt, w tym szczury, myszy, psy i owce, zostało wykorzystanych do badań nad chorobami RC i naprawami6,13,14,15, stopień przewlekłości obrażeń jest kluczowym czynnikiem. Dzieje się tak dlatego, że łzy RC mogą przebiegać bezobjawowo i często mogą zostać zdiagnozowane znacznie później, gdy rozdarcie powiększyło się i stało się przewlekłe, a zarówno ścięgno, jak i mięsień wykazują poważne zwyrodnienie16,17,18. Jednak większość modeli naprawczych RC wykorzystuje modele ostrych urazów, w których zdrowe ścięgno jest transektowane, a następnie natychmiast naprawiane19,20,21,22. Dzieje się tak głównie ze względu na celowość logistyczną i łatwość techniczną, co skutkuje nielicznymi badaniami, które badają patofizjologię RC w warunkach przypominających przewlekłość. Co więcej, kilka modeli zwierzęcych może posiadać cechy, które utrudniają ich wykorzystanie w badaniach nad przewlekłym RC.
Na przykład, chociaż szczur był szeroko wykorzystywany do modelowania rozdarcia RC i interwencji, brak znaczącej akumulacji tkanki tłuszczowej po urazie kontrastuje z kondycją ludzką, a jego mały rozmiar sprawia, że powtarzające się zabiegi chirurgiczne stanowią wyzwanie23. Ponadto, mimo że Gerber i in. wykorzystali infraspinatus owiec do badania atrofii mięśni i FD po przewlekłym RC tear24, istnieje pewna anatomiczna odmienność między owczym infraspinatus a ludzkim TPK, a także liczne wyzwania logistyczne związane z badaniem i trzymaniem tak dużego modelu zwierzęcego. Ponadto Gerber i wsp. opracowali model opóźnionego uszkodzenia RC u owiec poprzez uwolnienie powierzchownej głowy mięśnia podgrzebieniowego i ścięgna, aby naśladować cechy przewlekłego zerwania RC, a następnie ocenili skuteczność różnych technik naprawy ścięgna po 4 do 6 tygodniach. Niestety, ten chroniczny model owcy miał pewne ograniczenie, polegające na tym, że koniec uwolnionego ścięgna stał się nie do odróżnienia od tkanki bliznowatej podczas drugiego zabiegu chirurgicznego25.
Coleman i wsp. opracowali również model przewlekłego rozdarcia RC u owiec, pokrywając przecięty koniec ścięgna syntetyczną membraną podczas pierwszej operacji, co pozwoliło na dyfuzję składników odżywczych i skutecznie zminimalizowało tworzenie się tkanki bliznowatej wokół uszkodzonej tkanki, jednocześnie poprawiając rozróżnianie między ścięgnem a tkanką bliznowatą26. Tymczasem Turner i wsp. zasugerowali, że opóźniona naprawa powinna zostać przeprowadzona w ciągu 4 tygodni, ponieważ bezpośrednie ponowne przyczepienie rzadko zdarza się w przypadku masywnego retrakcji ścięgna27. Łącznie badania te przyczyniły się do opracowania powtarzalnych i wiarygodnych protokołów w celu pomyślnego ustanowienia chronicznego modelu urazów RC SSC u królików.
W tym protokole, po 4 tygodniach ustalany jest model przewlekłego uszkodzenia RC u królika, w którym zmiany patologiczne związane ze zwłóknieniem i zanikiem mięśni za pośrednictwem FD mogą być badane za pomocą oceny histologicznej. W szczególności owinięcie wolnego końca połączenia mięśniowo-ścięgnistego za pomocą rurki Penrose na bazie silikonu w czasie początkowej operacji umożliwia wyraźną identyfikację tkanek RC podczas drugiego zabiegu chirurgicznego, a w konsekwencji ułatwia bezpieczną naprawę w celu zbadania gojenia RC z augmentacją rusztowania i bez niej. Ogólnie rzecz biorąc, chroniczny model SSC królika może lepiej naśladować patofizjologię RC i stwarzać minimalne wymagania techniczne i logistyczne.

<table><tbody><tr><td>Narzędzia chirurgiczne</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>4-0 Szwy z kwasem poliglikolowym (PGA)</td><td></td> <td>GBK884</td><td></td></tr><tr><td>Ząbkowane kleszcze Adson</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cienkie nożyczki&nbsp;</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze hemostatyczne</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Uchwyty do igieł</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Skalpel chirurgiczny z rękojeścią</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td>Szew z ostrzem nr 11</td></tr><tr><td>(nylon 4-0)</td><td>Taobao, Chiny</td><td>19054</td><td>Do zamykania skóry dopuszczalne są szwy nylonowe lub jedwabne. Każdy szew ma swoje zalety i wady, a użytkownikom zaleca się wybór jednego zgodnie z własnymi preferencjami.</td></tr><tr><td>Akcesoria chirurgiczne</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Cotton balls</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Razor</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chirurgiczna poduszka grzewcza</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lampa</td><td></td><td></td><td></td>chirurgiczna</tr><tr><td>Strzykawka z igłami</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td>1 mL, 5 mL, 10 mL</td></tr><tr><td>Drugs</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Buprenorphine</td><td>LASEC, CUHK</td><td></td><td>0,12 mg/kg</td></tr><tr><td>Bupiwakaina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>b5274-5g</td><td>1-2 mg/kg</td></tr><tr><td>Cefaleksyna</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-487556</td><td>20 mg/kg</td></tr><tr><td>Ketamina&nbsp;</td><td>LASEC, CUHK</td><td></td><td>35 mg/kg</td></tr><tr><td>Pentobarbital sodu</td><td>LASEC, CUHK</td><td></td><td>ponad 60 mg/kg</td></tr><tr><td>Ksylazyna</td><td>LASEC, CUHK</td><td></td><td>5 mg/kg</td></tr><tr><td><silny>Sprzęt</silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Nikon Ni-U Eclipse Mikroskop pionowy</td><td>Nikon Instruments Inc, USA</td><td></td><td></td><</tr><tr><td>silny>Oprogramowanie</silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adobe Photoshop 20.01</td><td>Adobe Inc, USA</td><td></td><td></td></tr><<tr><td>silny>Inne odczynniki&nbsp; </td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Betadine</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td>5%</td></tr> <tr><td>etanolu</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td>70%</td></tr> <tr><td>Kwas etylenodiaminotetraoctowy (EDTA)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>EDS-1KG</td><td>10%</td></tr> <tr><td>Paraformaldehyd (PFA)</td><td>Mikroskopia elektronowa Nauki</td><td>15713</td><td>4%</td></tr> <tr><td>rurki silikonowe</td><td>Easy Thru, Chiny</td><td></td><td></td>ISO13485</tr><tr><td>Sól fizjologiczna</td><td>Taobao, Chiny</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Odczynniki do barwienia histologicznego</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Eosin Stain Roztwór barwnika</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>R03040</td><td>5% wodny</td></tr><tr><td>roztwór hematoksyliny</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HHS32</td><td></td></tr><tr><td>Plama trójchromowa&nbsp;( Masson)&nbsp; Zestaw</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT15</td><td></td></tr></tbody></table>

opracowanie modelu przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika do badania zwłóknienia i zwyrodnienia mięśniowego

Development of a Rabbit Chronic-Like Rotator Cuff Injury Model for Study of Fibrosis and Muscular Fatty Degeneration

Patofizjologia stożka rotatorów królika (RC) może prowadzić do postępujących i wysoce zwyrodnieniowych zmian w związanych z nim mięśniach i ścięgnach, co negatywnie wpływa na klinicznie istotne parametry, takie jak siła i retrakcja mięśnia-ścięgna/mięśniowo-ścięgnistego, ostatecznie powodując utratę funkcji barku i negatywnie wpływając na wyniki naprawy RC. Modele zwierzęce, które naśladują aspekty anatomii i patofizjologii RC człowieka, mają kluczowe znaczenie dla pogłębienia koncepcyjnego zrozumienia progresji urazów oraz opracowania skutecznych terapii opartych na inżynierii tkankowej i medycynie regeneracyjnej.
W tym kontekście, model podłopatkowy królika (SSC) jest odpowiedni ze względu na (i) jego anatomiczne podobieństwo do ludzkiej jednostki nadgrzebieniowo-mięśniowej kości, ścięgna i mięśnia nadgrzebieniowego, która jest najczęściej uszkadzonym miejscem RC; (ii) jego patofizjologiczne podobieństwo do człowieka pod względem zwłóknienia i zwyrodnienia tłuszczowego mięśni (FD); oraz (iii) jego przydatność do zabiegów chirurgicznych. Dlatego celem niniejszej pracy jest opisanie technik chirurgicznych wywoływania urazu RC SSC. Krótko mówiąc, procedura polega na izolacji SSC poprzez identyfikację mięśnia kruczo-bolesnego, a następnie transsekcję pełnej grubości na połączeniu mięśniowo-ścięgnistym i owinięcie wolnego końca połączenia mięśniowo-ścięgnistego rurką Penrose'a na bazie silikonu, aby zapobiec spontanicznemu ponownemu przyczepieniu. Oceny histologiczne są wykonywane w celu monitorowania postępu FD mięśni po 4 tygodniach od operacji przy użyciu hematoksyliny i eozyny (H&E), a także barwienia trichromem Massona.
Utrata mięśni i FD były widoczne 4 tygodnie po przecięciu połączenia mięśniowo-ścięgnistego SSC, podobnie jak w stanach patofizjologicznych u ludzi. Protokół ten demonstruje kroki do pomyślnego ustanowienia chronicznego modelu urazów RC SSC u królika, który może służyć jako potężne narzędzie do badania zmian w mięśniach szkieletowych związanych z patofizjologią RC i pomóc w opracowaniu nowych strategii terapeutycznych dla przewlekłych łez RC.

Aby ocenić przewlekłość zmian patologicznych w obrębie RC po przecięciu jednostek mięśń-ścięgno SSC, scharakteryzowano ogólną morfologię tkanki oraz zmiany komórkowe poprzez ocenę makroskopową i analizę histologiczną (odpowiednio barwienie H&amp;E oraz trichromem Massona) w 4. tygodniu po urazie (Rycina 2, Rycina 3 oraz Rycina 4). Reprezentatywne obrazy makroskopowej morfologii tkanki wykazały obecność białej tkanki przypominającej tkankę tłuszczową w uszkodzonych mięśniach SSC, której nie stwierdzono w grupie kontrolnej (Rycina 2). Barwienie H&amp;E potwierdziło utratę komórkowości i organizacji mięśni, które w uszkodzonych mięśniach SSC zostały zastąpione przez liczne adipocyty (puste przestrzenie otoczone cienkimi obrączkami cytoplazmy z uciśniętymi jądrami) w porównaniu z grupą kontrolną (Rycina 3A).
Półilościowa ocena obrazów barwienia H&amp;E wykazała wysoki stopień obecności adipocytów wewnątrzmięśniowych w uszkodzonych mięśniach SSC (36,5% ± 8,5%) w stosunku do grupy kontrolnej (0,69% ± 0,18%) (Rycina 3B). Barwienie trichromem Massona potwierdziło również zanik mięśni oraz zdezorganizowany układ włókien kolagenowych w uszkodzonych mięśniach SSC w porównaniu z grupą kontrolną (Rycina 4A). Półilościowa ocena obrazów barwienia trichromem Massona wykazała zmniejszenie komórkowości mięśni w uszkodzonych mięśniach SSC (41,3% ± 2,6%) w stosunku do grupy kontrolnej (99,2% ± 0,16%) (Rycina 4B). Chociaż dalsza ocena półilościowa nie wykazała istotnych różnic w tworzeniu tkanki włóknistej między uszkodzonymi mięśniami SSC (22,3% ± 13,1%) a grupą kontrolną (0,07% ± 0,05%), w uszkodzonych mięśniach SSC zaobserwowano wysoki stopień włóknienia (Rycina 4C). Łącznie makroskopowa morfologia tkanki oraz analiza histologiczna wykazały, że uszkodzony kompleks mięśnio-ścięgnisty SSC u królika charakteryzował się ciężkim zanikiem mięśni, akumulacją tłuszczu i włóknieniem, które są znanymi cechami charakterystycznymi chronicznej patofizjologii RC.
<img alt="Sekwencja operacji barku królika; odsłonięcie kości ramiennej; nacięcie mięśnia podłopatkowego; usunięcie obojczyka." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64828/64828fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Procedura chirurgiczna dla modelu przewlekłego urazu kompleksu mięśnia i ścięgna SSC. (A) Wykonano okno chirurgiczne i za pomocą palpacji zidentyfikowano punkty anatomiczne, takie jak kość ramienna, głowa kości ramiennej i obojczyk. (B) Poniżej obojczyka wykonano cięcie skóry o długości 3,0 cm. (C) Rozdzielono mięsień ramienno-kruczy, aby odsłonić mięsień SSC. (D) Wyizolowano kompleks mięśnia i ścięgna SSC. (E) Do owinięcia tkanki mięśnia i ścięgna SSC użyto silikonowego drenu Penrose'a. (F) Przecięto kompleks mięśnia i ścięgna SSC. (G) Mięsień ramienno-kruczy zszyto ponownie za pomocą szwów PGA. (H) Cięcie skóry zamknięto za pomocą szwów nylonowych. (I) Po operacji króliki otrzymały miękki kołnierz. Skróty: SSC = mięsień podłopatkowy; PGA = kwas poliglikolowy. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64828/64828fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Makroskopowe porównanie tkanek: kontrola vs. uraz mięśnia podłopatkowego, podkreślające różnice strukturalne, wynik eksperymentu." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64828/64828fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2: Makroskopowa morfologia reprezentatywnych mięśni SSC. Czarne strzałki wskazują tkankę tłuszczową białą. Skrót: SSC = subscapularis. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64828/64828fig02large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Barwienie hematoksyliną i eozyną tkanek kontrolnych i uszkodzonych SSC; wykres porównania zawartości tłuszczu." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64828/64828fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 3"> 
Rysunek 3: Analiza histologiczna modelu przewlekłego uszkodzenia RC po 4 tygodniach. (A) Reprezentatywne obrazy histologiczne po barwieniu H&amp;E wykazały zanik włókien mięśniowych i akumulację adipocytów. (B) Ilościowe oznaczenie procentowej akumulacji tłuszczu w uszkodzonym mięśniu. n = 3 królików. Słupki błędów oznaczają SEM. *, istotność statystyczna (p≤ 0,05). Paski skali = 5 000 µm (A, lewa kolumna), 600 µm (A, prawa kolumna). Skróty: SSC = mięsień podłopatkowy; RC = stożek rotatorów; H&amp;E = hematoksylina i eozyna. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64828/64828fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Analiza histologiczna i wykresy uszkodzenia m. podłopatkowego; barwienie mięśni, kolagenu, tkanki tłuszczowej, zmiany włókniste." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64828/64828fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 4"> 
Rycina 4: Analiza histologiczna modelu przewlekłego uszkodzenia RC w 4. tygodniu. (A) Obrazy barwione trichromem Massona wykazały znaczną włóknienie. Włóknista tkanka łączna jest zabarwiona na niebiesko. (B) Ilościowe oznaczenie proporcji mięśni i (C) tkanki włóknistej. n = 3 króliki. Słupki błędów wskazują SEM. *, istotność statystyczna (p≤ 0.05). Paski skali = 5 000 µm (A, lewa kolumna), 200 µm (A, prawa kolumna). Skróty: SSC = mięsień podłopatkowy; RC = obręcz barkowa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64828/64828fig04large.jpg" target="_blank">Aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny, kliknij tutaj.</a>

To badanie szczegółowo opisuje procedury ustalania przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika (RC). W szczególności uraz powstaje w jednostce mięśniowo-ścięgnistej / mięśniowo-ścięgnistej podłopatkowej (SSC), aby naśladować ludzką anatomię i patofizjologię RC, w tym ciężkie zwyrodnienie tłuszczowe mięśni (FD). Protokół ten może być stosowany do badania urazów RC i oceny terapii regeneracyjnych.

Opracowanie modelu przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika do badania zwłóknienia i zwyrodnienia mięśniowego

Rabbit rotator cuff (RC) pathophysiology can lead to progressive and highly degenerative changes in its associated musculature and tendons, which ...

Protokół ten demonstruje złożoną technikę chirurgiczną wywoływania przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królików i jest przydatny w badaniu patogenezy stożka rotatorów i opracowywaniu terapii regeneracyjnych. Króliki to średnie i duże modele zwierzęce, które są łatwe do utrzymania logistycznie, manipulują chirurgicznie i wykazują wysoki poziom zwyrodnienia tłuszczowego mięśni stożka rotatorów po zranieniu, podobnie jak ludzie. Przedstawiony tutaj model urazu podłopatkowego jest anatomicznie analogiczny do kompleksu mięśni ścięgna kości nadgrzebieniowej, jednego z najczęściej uszkadzanych zespołów stożka rotatorów.Na początek przygotuj okno chirurgiczne, goląc zamierzone miejsce nacięcia znieczulonego królika. Za pomocą bawełnianych wacików oczyść obszar trzema naprzemiennymi aplikacjami Betadine i 70% alkoholu okrężnymi ruchami. Podawać domięśniowo 20 miligramów na kilogram cefaleksyny jako profilaktyczny środek przeciwinfekcyjny.Wykonaj trzy- lub czterocentymetrowe nacięcie skóry poniżej obojczyka, podziel interwał naramienny za pomocą nożyczek i cofnij się, aby uzyskać dostęp do ramienia. Aby zlokalizować jednostkę ścięgna mięśnia podłopatkowego, najpierw zidentyfikuj mięsień kruczo-łopatkowy. Następnie zidentyfikuj ścięgno podłopatkowe i włóż zacisk pod kątem prostym, aby odsłonić całe ścięgno w momencie jego przyczepu na mniejszej guzowatości kości ramiennej.Odizoluj ścięgno mięśnia podłopatkowego. Po podaniu przedoperacyjnego środka przeciwbólowego miejscowo w pobliżu miejsca przecięcia, owiń jednostkę ścięgna mięśnia podłopatkowego rurką penrose'a na bazie silikonu, aby zapobiec niepożądanemu przyczepieniu się do otaczających tkanek i ułatwić późniejsze pobieranie tkanek. Aby wywołać uraz, wykonaj transsekcję pełnej grubości w połączeniu ścięgien mięśniowych za pomocą skalpela chirurgicznego numer 11.W razie potrzeby zatamuj krwawienie, uciskając kawałkiem gazy i w razie potrzeby użyj soli fizjologicznej do przepłukania rany. Aby zamknąć ranę, użyj szwu 4-0 z kwasu poliglikolowego, aby ponownie zbliżyć tkankę mięśniową naramienną i szwu 4-0 z nylonu lub jedwabiu, aby zamknąć ranę skóry, a następnie oczyścić ranę. Podawać podskórnie 0,03 miligrama buprenorfiny jako środek przeciwbólowy raz bezpośrednio po zabiegu i dwa razy dziennie przez następne 48 godzin.Analiza histologiczna modelu przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów po czterech tygodniach jest pokazana na tym rysunku. Barwienie H&E potwierdziło utratę komórkowości i organizacji mięśni, która została zastąpiona dużą liczbą adipocytów w uszkodzonych mięśniach podłopatkowych w stosunku do grupy kontrolnej. Kwantyfikacja procentowego nagromadzenia uszkodzonej tkanki tłuszczowej w mięśniach jest przedstawiona na tym rysunku.Barwienie trichromem Massona potwierdziło również atrofię mięśni i zdezorganizowane ułożenie włókien kolagenowych w uszkodzonych mięśniach podłopatkowych w porównaniu z grupą kontrolną. Kwantyfikacja proporcji tkanki mięśniowej i zwłóknieniowej jest pokazana na tym rysunku. Ocena wykazała zmniejszenie komórkowości mięśni uszkodzonych mięśni podłopatkowych w porównaniu z grupą kontrolną.Wysoki stopień zwłóknienia zaobserwowano również w uszkodzonych mięśniach podłopatkowych. Identyfikacja ścięgna podłopatkowego i owinięcie jednostki ścięgna mięśnia podłopatkowego rurkami penrose'a to najważniejsze kroki tej procedury. Po tej procedurze można zastosować interwencję terapeutyczną.W takim przypadku opisane tutaj analizy, wraz z dodatkową miografią lub analizą chodu, mogą być wykorzystane do oceny wyniku interwencji. Technika ta ma kluczowe znaczenie dla pomocy naukowcom w badaniu patofizjologii stożka rotatorów, a także ułatwia opracowywanie nowych terapii naprawy i regeneracji ścięgien mięśniowych.

development-rabbit-chronic-like-rotator-cuff-injury-model-for-study

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Opisano eksperymentalną technikę leczenia uszkodzeń chrzęstnych w stawie kolanowym królika. Implantacja autologicznych chondrocytów osadzonych na macierzy jest powszechnie akceptowaną metodą przebudowy i naprawy uszkodzeń chrząstki stawowej, zapewniającą satysfakcjonujące długoterminowe wyniki. Transplantacja autologicznych chondrocytów wspomagana macierzą (MACT) oferuje zstandaryzowaną i klinicznie uznaną metodę implantacji.

Przeszczep chrząstki autologicznej wspomagany macierzą w celu przebudowy i naprawy ubytków chrzęstnych w modelu królika

Zwierzęce modele miażdżycy są niezbędne do zrozumienia mechanizmu i zbadania nowszych metod zapobiegania rozwojowi lub pękaniu płytki nazębnej, głównej przyczynie zgonów w uprzemysłowionym świecie. Protokół ten wykorzystuje połączenie uszkodzenia balonu i diety bogatej w cholesterol w celu wywołania blaszek miażdżycowych w tętnicy biodrowej królika.

Króliczy model przyspieszonej miażdżycy: perspektywa metodologiczna uszkodzenia balonika tętnicy biodrowej

Opisujemy metody rozwoju eksperymentalnego modelu zespołu metabolicznego wywołanego dietą (MetS) u królików stosujących dietę wysokotłuszczową i bogatą w sacharozę. U zwierząt rozwinęła się otyłość centralna, łagodne nadciśnienie, stan przedcukrzycowy i dyslipidemia, reprodukując w ten sposób główne składniki ludzkiego MetS. Ten przewlekły model pozwoli na zdobycie wiedzy leżącej u podstaw mechanizmów progresji choroby.

Eksperymentalny model zespołu metabolicznego wywołanego dietą u królika: rozważania metodologiczne, rozwój i ocena

Ten protokół przedstawia szczurzy model zapalenia torebki stawowej in vivo. Model obejmuje wewnętrzną stabilizację stawu ramiennego z mocowaniem szwem pozastawowym przez dłuższy czas, co skutkuje zmniejszeniem zakresu ruchu obrotowego (ROM) i zwiększoną sztywnością stawu.

Szczurzy model adhezyjnego zapalenia torebki barkowej

Model otwartego wpływu kłykcia kości udowej przyśrodkowej u królików jest wiarygodny do badania pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów (PTOA) i nowych strategii terapeutycznych mających na celu złagodzenie progresji PTOA. Protokół ten generuje izolowany ubytek chrząstki tylnego przyśrodkowego kłykcia kości udowej u królików za pomocą wieży zrzutowej opartej na wózku z głowicą impaktora.

Powtarzalny model wpływu chrząstki w celu wygenerowania pourazowej choroby zwyrodnieniowej stawów u królika

Ten protokół ustanawia model pełnogrubych wad chrząstki (FTCD) poprzez wiercenie otworów w rowku bloczkowym kości udowej szczurów i mierzenie późniejszego zachowania bólowego i zmian histopatologicznych.

Opracowanie i ocena szczurzego modelu ubytków chrząstki pełnej grubości

W tym protokole, model choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego został przygotowany przy użyciu zmodyfikowanej metody Videmana, a procedury operacyjne i środki ostrożności związane z akupotomią są szczegółowo opisane. Skuteczność akukotomii wykazano poprzez badanie właściwości mechanicznych mięśnia czworogłowego uda i ścięgna oraz właściwości mechanicznych i morfologicznych chrząstki.

Zastosowanie akupotomii w modelu choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego u królika

Protokół opisuje metodę interwencji Tuina w króliczym modelu choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego.

Interwencja Tuina w króliczym modelu choroby zwyrodnieniowej stawu kolanowego

Testowanie wrażliwości wizualnej u jaszczurek przy operant paradygmat klimatyzacji, która zatrudnia odtwarzania wideo losowych punktów, kinematograms i generowanych komputerowo bezkręgowców.

Badania wizualne Wrażliwość na prędkość i kierunek ruchu w Jaszczurki

Bodźce wygenerowane komputerowo z wykorzystaniem smoka Jacky jako modelu.

Komputerowo generowane bodźce dla modeli zwierzęcych

Poznaj technikę chirurgiczną indukcji przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika. Model ten umożliwia badanie patogenezy i rozwoju terapii regeneracyjnych dla mięśniowo-ścięgnistych urazów.

Opracowanie modelu przewlekłego uszkodzenia stożka rotatorów u królika do badania zwłóknienia i zwyrodnienia mięśniowego

Przeglądaj więcej filmów