Ustanowienie urządzenia do deprywacji snu u myszy

Mechanizmy leżące u podstaw szkodliwych skutków deprywacji snu pozostają w dużej mierze nieznane, a ustanowienie modeli deprywacji snu jest niezbędne do pogłębienia naszej wiedzy w tym zakresie. Ta metoda jest tania, skuteczna, minimalnie stresująca, kontrolowana i zautomatyzowana. Obecny protokół pozwala nam stworzyć urządzenie oparte na platformie kołyskowej za około 10 razy tańsze niż w przypadku wytrząsarek orbitalnych w oparciu o naszą dostępność.

Zacznij od zabezpieczenia jednego końca stalowego kanału z rowkiem o długości 50 centymetrów na środku 40-centymetrowego kanału stalowego z rowkiem za pomocą. Spowoduje to powstanie konstrukcji w kształcie litery T. Ustaw dwie konstrukcje w kształcie litery T pionowo w odległości 30 centymetrów od siebie.

Połącz spody konstrukcji za pomocą 30-centymetrowego stalowego cylindra kompatybilnego ze za pomocą. Następnie umieść stalową prostokątną platformę pomiędzy dwiema konstrukcjami w kształcie litery T. Zabezpiecz każdy koniec 30-centymetrowego stalowego cylindra kompatybilnego ze za pomocą dwóch łożysk.

Za pomocą przymocuj mocowanie silnika do jednej z konstrukcji w kształcie litery T 25 centymetrów w dół od góry. Teraz zainstaluj silnik na tym uchwycie silnika za pomocą. Zamocuj wentylator chłodzący za pomocą samoblokujących się opasek na konstrukcji w kształcie litery T pod silnikiem.

Za pomocą przymocuj łożysko korbowodu do narożnika platformy skierowanego w stronę silnika, a drugi koniec do wału silnika. Następnie za pomocą wiertarki elektrycznej wykonaj dwa czteromilimetrowe otwory w każdym rogu plastikowego pojemnika. Po lewej stronie pojemnika wywierć dwa dodatkowe czteromilimetrowe otwory wraz z jednym dolnym sześciomilimetrowym otworem.

Zablokuj plastikowy pojemnik na prostokątnej platformie za pomocą taśm samoblokujących przez wywiercone otwory narożne. Zabezpiecz butelkę z wodą po lewej stronie plastikowego pojemnika za pomocą samoblokujących się opasek przez dwa czteromilimetrowe otwory, tak aby dysza przechodziła przez sześciomilimetrowy otwór. Teraz podłącz wyjściowe przewody elektryczne adaptera Power Brick do dwóch zacisków silnika.

Następnie podłącz przewody wejściowe do stycznika czasowego. Naciskaj skrajne prawe przyciski znaku odpowiednio na lewej i prawej połówce stycznika czasowego, aż M pojawi się na licznikach mechanicznych po obu stronach. Postępuj zgodnie z tą czynnością, naciskając środkowe przyciski znaku na obu połówkach stycznika czasowego, aż na licznikach mechanicznych pojawi się 5M.

Zakończ tę konfigurację, naciskając skrajny lewy przycisk znaku po lewej połowie stycznika czasowego, aż na lewym liczniku mechanicznym pojawi się 15M. Następnie umieść mysz w klatce. Następnie włącz stycznik czasowy i wentylator chłodzący.

W siódmym dniu po rozpoczęciu deprywacji snu monitorowanie EEG i EMG wykazało, że urządzenie do deprywacji snu znacznie skróciło czas snu i wydłużyło czas czuwania u myszy. W porównaniu z grupą kontrolną zaobserwowano podwyższony poziom skutecznych markerów deprywacji snu, takich jak nagromadzenie adenozyny i poziomy mRNA Homer1a w mózgu. Nie zaobserwowano jednak istotnych zmian w stężeniu kortykosteronu w surowicy.

Po siedmiu dniach braku snu zaobserwowano znaczny spadek wielkości, ciała i masy grasicy myszy. Dodatkowo tolerancja glukozy była znacznie upośledzona u myszy po braku snu. Brak snu ujawnił również znaczącą zmianę we wzorcach ekspresji genów zegara w mózgu, co wskazuje na zakłócenie zegara molekularnego.

Najważniejsze jest wyważenie korbowodu i względne położenie korbowodu między stalową prostokątną platformą a silnikiem. Badacz może wykorzystać tę technikę do zbadania skutków i podstawowych mechanizmów deprywacji snu na różne schorzenia.