Name: Charakterystyka behawioralna mysiego modelu zespołu Angelmana (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-20T12:10:00.000+00:00
Duration: 11 min 5 s
Description: Poznaj walidację modelu mysiego zespołu Angelmana za pomocą powtarzalnych testów behawioralnych. Metoda obejmuje labirynt plus, pole otwarte i analizę chodu, wspierając badania nad przyczynami choroby i terapią genową.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez RVO 68378050 Czeskiej Akademii Nauk, LM2018126 Czeskie Centrum Fenogenomiki dostarczone przez MEYS CR, OP RDE CZ.02.1.01/0.0/0.0/16_013/0001789 (Modernizacja Czeskiego Centrum Fenogenomiki: rozwój w kierunku badań transgenicznych przez MEYS i ESIF), OP RDE CZ.02.1.01/0.0/0.0/18_046/0015861 (Modernizacja infrastruktury CCP II przez MEYS i ESIF) oraz OP RDI CZ.1.05/2.1.00/19.0395 (wyższa jakość i zdolność do modeli transgenicznych przez MEYS i Europejskiego Funduszu Rozwoju Obszarów Wiejskich). Ponadto badanie to otrzymało finansowanie od organizacji pozarządowej "Stowarzyszenie Terapii Genowej (ASGENT)", Czechy (https://asgent.org/) oraz LM2023036 Czeskie Centrum Fenogenomiki zapewnione przez Ministerstwo Edukacji, Młodzieży i Sportu Republiki Czeskiej.

Validating a Murine Model of Angelman Syndrome Using Behavioral Tests

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Modele AS stworzone w różnych szczepach myszy są powszechnie walidowane za pomocą testów stanu emocjonalnego zwierząt, funkcji motorycznych i zdolności poznawczych, aby ułatwić porównanie z objawami ludzkimi31,32. Deficyt motoryczny w modelach AS jest najbardziej spójnym odkryciem we wszystkich laboratoriach, po którym następuje niezmieniony stan emocjonalności mutantów i trudności w budowaniu gniazd 31,32,33.<...

Zespół Angelmana (AS) jest rzadką chorobą neurorozwojową. Najczęstszym genetycznym pochodzeniem ZA jest duża delecja regionu 15q11-q13 chromosomu pochodzącego od matki, która występuje u prawie 74% pacjentów1. Delecja tego regionu powoduje utratę UBE3A, głównego genu sprawczego ZZSK, który koduje ligazę ubikwityny E3. Ojcowski allel genu UBE3A w neuronach jest wyciszany w procesie znanym jako imprinting. W konsekwencji, ojcowskie wdrukowanie genu pozwala tylko na matczyną ekspresję w ośrodkowym układzie nerwowym (OUN)2. Dlatego delecja genu UBE3A z chromosomu pochodzącego od matki prowadzi do rozwoju objawów ZZSK. U ludzi AS objawia się w wieku około 6 miesięcy, z opóźnieniem rozwojowym, które utrzymuje się przez wszystkie etapy rozwoju i powoduje poważne objawy wyniszczające u osób dotkniętych chorobą3,4. Do podstawowych objawów zaburzenia należy deficyt zdolności motorycznych małych i dużych, w tym gwałtowny chód ataksyjny, poważne upośledzenie mowy i niepełnosprawność intelektualna. Około 80% pacjentów z ZA cierpi również na zaburzenia snu i epilepsję. Do tej pory jedynym dostępnym sposobem leczenia są leki objawowe, które zmniejszają napady padaczkowe i poprawiają jakość snu1. W związku z tym opracowanie solidnych modeli zwierzęcych z powtarzalnymi fenotypami behawioralnymi wraz z udoskonaloną analizą fenotypowania będzie niezbędne do wyjaśnienia patofizjologicznych mechanizmów zaburzenia i odkrycia skutecznych leków i metod leczenia.
Złożoność ludzkiego zaburzenia wpływającego na OUN wymaga, aby organizmy modelowe posiadały porównywalny genom, fizjologię i zachowanie. Myszy są popularne jako organizmy modelowe ze względu na ich krótki cykl rozrodczy, niewielkie rozmiary i względną łatwość modyfikacji DNA. W 1984 roku Paul Willner zaproponował trzy podstawowe kryteria walidacji modelu choroby: konstrukt, twarz i trafność predykcyjna, które są używane do określenia wartości modelu5. Po prostu trafność konstruktu odzwierciedla mechanizmy biologiczne odpowiedzialne za rozwój zaburzenia, trafność twarzy podsumowuje jego objawy, a trafność predykcyjna opisuje modelową odpowiedź na leki terapeutyczne.
Aby przestrzegać powyższych zasad, wybraliśmy najczęstszą etiologię genetyczną, dużą delecję matczynego locus 15q11.2-13q, w tym genu UBE3A, aby stworzyć model myszy AS. Użyliśmy techniki CRISPR/Cas9 do usunięcia regionu o długości 76 225 pz obejmującego cały gen UBE3A, obejmującego zarówno kodujące, jak i niekodujące elementy genu, u myszy z tła C57BL/6N 6. Następnie wyhodowaliśmy zwierzęta, aby uzyskać myszy heterozygotyczne UBE3A+/-. Do walidacji twarzy modelu wykorzystaliśmy zwierzęta z krzyżówek samic UBE3A+/- i samców typu dzikiego, aby uzyskać potomstwo UBE3A+/- (szczep o nazwie C57BL/6NCrl-UBE3A<em1(IMPC)Ccpcz>/Ph, a następnie przypisane jako UBE3AmGenedel/+) i kontrolne rodzeństwo z miotu. Przetestowaliśmy ich umiejętności motoryczne, emocjonalność i afekt, aby podsumować podstawowe objawy ZZSK. W poprzednim artykule oceniliśmy również funkcje poznawcze zwierząt, ponieważ pacjenci z ZA również cierpią na niepełnosprawność intelektualną6. Nie znaleźliśmy jednak żadnych zaburzeń poznawczych u myszy UBE3AmGenedel/+, być może ze względu na młody wiek zwierząt w czasie testów7. Późniejsze badania starszych zwierząt, w wieku około 18 tygodni, ujawniły deficyt elastyczności behawioralnej podczas uczenia się odwróconego w paradygmacie preferencji miejsca. Jednak złożoność sprzętu zastosowanego do tej analizy wymaga osobnego modułu metodologicznego i nie został on tutaj uwzględniony.
Przedstawione tutaj testy behawioralne należą do powszechnie stosowanych narzędzi fenotypowania w badaniach genetycznych, dzięki ich wysokiej wartości predykcyjnej i wystarczającej trafności konstrukcji8,9,10. Wykorzystaliśmy te testy do walidacji mysiego modelu ZZSK poprzez rekapitulację podstawowych objawów choroby u ludzi w powtarzalny, niezależny od wieku sposób. Emocjonalność zwierzęcia oceniano w testach na podwyższonym plusie labiryntu i w otwartym polu. Oba te testy opierają się na konflikcie podejście-unikanie, w którym zwierzęta eksplorują nowe środowisko w poszukiwaniu pożywienia, schronienia lub możliwości krycia, jednocześnie unikając anksjogennych przedziałów11. Dodatkowo, test otwartego pola służy do testowania aktywności lokomotorycznej myszy8. Test zawieszenia ogona jest szeroko stosowany w badaniach nad depresją do badań przesiewowych pod kątem nowych leków przeciwdepresyjnych lub fenotypów podobnych do depresji w modelach nokautujących myszy12. Ten test ocenia rozpacz, jaką zwierzęta rozwijają z czasem w nieuniknionej sytuacji. Uczenie motoryczne i szczegółową charakterystykę chodu określono odpowiednio na rotarod i w DigiGait. Wytrzymałość zwierzęcia na pręcie przyspieszającym charakteryzuje jego umiejętności równowagi i koordynacji ruchów, podczas gdy szczegółowa analiza wzorców kroków myszy jest czułą oceną zaburzeń nerwowo-mięśniowych związanych z wieloma neurogeneracyjnymi zaburzeniami ruchowymi13,14,15. Test rozdrabniania gniazd jest częścią standardowej metodologii wykrywania impulsywnych zachowań u gryzoni, a ponieważ wykorzystuje naturalne zachowanie gryzoni, wskazuje na dobre samopoczucie zwierzęcia16,17.
Wielkość grup eksperymentalnych była wynikiem kompromisu, który miał na celu spełnienie wymagań reguły 3R i efektywne wykorzystanie wydajności hodowli kolonii. Jednak, aby uzyskać moc statystyczną, grupy liczyły nie mniej niż 10 osobników, ze względu na ustanowienie wystarczającej liczby par lęgowych. Niestety, wyniki hodowlane nie zawsze skutkowały wystarczającą liczbą zwierząt.

<table><tbody><tr><td>Klatki indywidualnie wentylowane</td><td>Techniplast</td><td></td><td></td></tr><tr><td>DigiGait</td><td>Mouse Specifics, Inc., 2 Central Street Level Unit 110 Framingham, MA 01701, USA</td><td>Sprzęt został ogłoszony w przetargu, nie podano numeru katalogu&nbsp, ani nie można go było znaleźć na stronie internetowej firmy</td><td>Szczegółowa analiza chodu myszy, dostarczony sprzęt i oprogramowanie.&nbsp;</td></tr><tr><td>FDA Nestlet</td><td>squares Datesand Ltd., 7 Horsfield Way, Bredbury, Stockport SK6, Wielka Brytania</td><td>Materiał został zakupiony od dostawcy Velaz za pośrednictwem bezpośredniego zapytania e-mail. Velaz nie podaje żadnego numeru katalogowego.</td><td>Bawełniane gniazda do testu budowy gniazda. Opis gniazda: 2-3 g każdy, o średnicy około 5 x 5 x 0,5 cm.</td></tr><tr><td>Wóz dla myszy</td><td>Altramion</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotarod</td><td>TSE Systems GmbH, Barbara-McClintock-Str.4 12489 Berlin, Niemcy</td><td>Sprzęt został ogłoszony w drodze przetargu, nie podano numeru katalogu, ani nie można go było znaleźć na stronie internetowej firmy</td><td>Rotarod dla 5 myszy, dostarczony sprzęt i oprogramowanie. Wymiary bębna: średnica: 30 mm, szerokość na pas: 50 mm, odległość spadania 147 mm.</td></tr><tr><td>Test zawieszenia ogona</td><td>Bioseb, In Vivo Research Instruments, 13845 Vitrolles FRANCJA</td><td>Indeks: BIO-TST5</td><td>W pełni zautomatyzowany sprzęt do oceny czasu bezruchu 3 myszy zawieszonych na ogonie, dostarczony sprzęt i oprogramowanie</td></tr><tr><td>Taśma medyczna Transpore</td><td>Medical M, Ltd.</td><td>P-AIRO1291</td><td>Taśma służąca do przytwierdzania zwierzęcia do haka za ogon.</td></tr><tr><td>Przeglądarka - Video Tracking System</td><td>Biobserve GmbH, Wilhelmstr. 23 A 53111 Bonn, Niemcy</td><td>Sprzęt wraz z oprogramowaniem został zamówiony, nie podano numeru katalogu, ani nie można go było znaleźć na stronie internetowej firmy Oprogramowanie</td><td>z niestandardowym sprzętem: labirynt, baza IR, kamery czułe na podczerwień. Wymiary na wymiary: powierzchnia 42 x 42 cm, ściana o wysokości 49 cm, powierzchnia strefy środkowej: 39 cm2. Wykonany na zamówienie EPM został podniesiony 50 cm nad podłogą, z otwartym ramieniem o długości 79 cm, &nbsp; 9 cm szerokości i zamknięte ramię 77 cm długości, 7,6 cm szerokości.</td></tr></tbody></table>

charakterystyka behawioralna mysiego modelu zespołu angelmana

Behavioral Characterization of an Angelman Syndrome Mouse Model

Ten manuskrypt opisuje zestaw testów behawioralnych dostępnych do scharakteryzowania fenotypów podobnych do zespołu Angelmana (AS) w ustalonym mysim modelu AS. Używamy paradygmatu uczenia się rotarod, szczegółowej analizy chodu i testu budowy gniazda, aby wykryć i scharakteryzować upośledzenie motoryczne zwierząt. Badamy emocjonalność zwierząt w otwartym terenie i testy podwyższone plus labirynt, a także afekt w teście zawieszenia ogona. Kiedy myszy z AS są testowane w teście w otwartym polu, wyniki należy interpretować ostrożnie, ponieważ dysfunkcje motoryczne wpływają na zachowanie myszy w labiryncie i zmieniają wyniki aktywności.
Powtarzalność i skuteczność prezentowanych testów behawioralnych została już potwierdzona w kilku niezależnych liniach myszy Uba3a z różnymi wariantami nokautu, co czyni ten zestaw testów doskonałym narzędziem walidacji w badaniach nad AS. Modele z odpowiednią konstrukcją i trafnością twarzy będą uzasadniać dalsze badania w celu wyjaśnienia patofizjologii choroby i umożliwienia opracowania metod leczenia przyczynowego.

Test podwyższonego labiryntu plus oraz test otwartej przestrzeni 
Testy EPM i OF wykorzystują naturalną tendencję gryzoni do eksploracji nowych środowisk18,19. Eksploracja jest sterowana konfliktem podejście-unikanie, w którym gryzonie wybierają między badaniem nowego otoczenia a unikaniem potencjalnego niebezpieczeństwa. Zwierzęta eksplorują nieznane miejsca w poszukiwaniu schronienia, kontaktu społecznego lub pożywienia. Jednakże nowe miejsc...

Ten manuskrypt przedstawia zestaw wysoce powtarzalnych testów behawioralnych do walidacji mysiego modelu zespołu Angelmana.

Charakterystyka behawioralna mysiego modelu zespołu Angelmana

This manuscript describes a battery of behavioral tests available to characterize Angelman syndrome (AS)-like phenotypes in an established murine model of ...

Naszym celem jest wyjaśnienie fizjologicznych ról genów na przykładzie myszy jako modelu eksperymentalnego. Koncentrujemy się również na opracowywaniu mysich modeli konkretnych chorób, które naukowcy mogą wykorzystać do zbadania przyczyn chorób i opracowania skutecznych metod leczenia. Przykładem takiej aktywności jest mysi model zespołu Angelmana.Prawdopodobnie najbardziej obiecującą nową technologią z potencjałem jest integracja sztucznej inteligencji opartej na technikach głębokiego uczenia się w badaniach na zwierzętach. Takie podejście można zastosować do bezpośredniego monitorowania zachowania zwierząt w klatce domowej, bez konieczności przeszkadzania zwierzętom przez eksperymentatora. Największym wyzwaniem w badaniach behawioralnych jest obecnie odtwarzalność.Dlatego wprowadzamy zestaw testów, które weryfikują mysi model zespołu Angelmana w sposób, który nie zależy od wieku ani gatunku modela. Używamy sprawdzonych testów behawioralnych do walidacji naszego modelu AS, jednak z nowatorskim podejściem do rozwoju modelu bardzo przypominającym kondycję ludzką z dużą delecją. Korzystając z technologii CRISPR, usunęliśmy cały gen UBE3A z genomu myszy, w przeciwieństwie do innych modeli, w których delecja jest ograniczona do 3 KB.Pracujemy nad opracowaniem terapii genetycznej, która mogłaby przywrócić wszelkie objawy w modelu mysim. Aby rozpocząć, umieść labirynt w kształcie plusa na platformie testowej tuż pod kamerą. Za pomocą potencjometru umieszczonego na ścianie wyreguluj natężenie światła do 70 luksów w jego środku za pomocą luksometru z czujnikiem umieszczonym na środku labiryntu podczas regulacji.Otwórz oprogramowanie, klikając dwukrotnie ikonę oprogramowania przeglądarki i załaduj konfigurację do testowania labiryntu z podwyższonym poziomem plus lub EPM, klikając ikonę w lewym górnym rogu karty konfiguracji. Wprowadź informacje o zwierzęciu w odpowiednich polach karty eksperymentu, w tym identyfikator zwierzęcia, genotyp, płeć i informacje o eksperymencie. Sprawdź, czy położenie strefy, otwarte ramiona i zamknięte ramiona są poprawnie skonfigurowane.Za pomocą kontroli wizualnej i myszy komputerowej upewnij się, że wirtualne strefy konspektu są zgodne z odpowiednimi strefami EPM. Umieść kursor myszy na ikonie strzałki w lewym górnym rogu karty pozyskiwania. Wyjmij zwierzę z domowej klatki i delikatnie umieść je na środku EPM.Rozpocznij eksperyment, klikając lewym przyciskiem myszy komputera. Po pięciu minutach zapisz zarejestrowane dane, klikając OK.Name plik i kliknij przycisk Zapisz. Eksportuj wyniki do pliku CSV w celu analizy offline, klikając ikonę w lewym panelu pionowym zakładki analizy danych.W teście EPM żaden z parametrów związanych z zachowaniem podobnym do lęku nie uległ zmianie u matczynych heterozygotycznych mutantów UBE3A. Umieść cztery otwarte pola testowe lub pudełka testowe OF na platformie testowej pod kamerą. Za pomocą potencjometru na ścianie dostosuj natężenie światła do 200 luksów w środku każdego testu OF za pomocą luksomierza, z czujnikiem umieszczonym na środku każdego pudełka podczas regulacji.Otwórz oprogramowanie, klikając dwukrotnie ikonę oprogramowania przeglądarki i załaduj konfigurację do testowania OF, klikając ikonę w lewym górnym rogu karty konfiguracji. Wprowadź informacje o zwierzętach w odpowiednich polach zakładki eksperymentu. Sprawdź, czy położenie strefy jest zgodne z polami testowymi OF i dostosuj je w razie potrzeby.Korzystając ze sterowania wizualnego i myszki komputerowej, upewnij się, że wirtualny konspekt środkowy i strefy peryferyjne są zgodne z odpowiednimi strefami testowymi OF. Umieść kursor myszy na ikonie strzałki w lewym górnym rogu karty pozyskiwania. Wyjmij cztery zwierzęta z klatki domowej i umieść je w rogu każdego pudełka testowego.Rozpocznij eksperyment, klikając lewym przyciskiem myszy komputera. W teście OF heterozygotyczne zmutowane zwierzęta UBE3A były znacznie hipoaktywne, co znalazło odzwierciedlenie w krótszym pokonywanym dystansie, niższej średniej prędkości i dłuższym czasie odpoczynku. Jednak żaden z parametrów związanych z zachowaniem podobnym do lęku nie został zmieniony w mutantach UBE3A.Podłącz klatkę zawieszenia ogonowego do komputera za pomocą USB. Podłącz klucz USB do komputera i uruchom oprogramowanie, klikając dwukrotnie ikonę oprogramowania BIO TST. Na karcie ustawień w obszarze Globalne upewnij się, że czas trwania pobierania jest ustawiony na 360 sekund.W zakładce Eksperyment wybierz nową listę badanych i utwórz nowy plik eksperymentu oraz nową listę badanych, postępując zgodnie z instrukcjami w otwartej zakładce. Przygotuj zwierzęta do testu, owijając jednostronną taśmą klejącą 3/4 ogona zwierzęcia, zaczynając od podstawy. Uruchom bieg, klikając przycisk Rozpocznij uruchamianie.Następnie kontynuuj w zakładce akwizycja. Zaraz po zawieszeniu zwierzęcia na haku kliknij ikonę start pod wizualizowaną pozycją, aby pozyskać dane. Po przetestowaniu wszystkich zwierząt, w zakładce analiza wybierz ostatnie cztery minuty pozyskania do analizy.Zaznacz wszystkie prawidłowe przebiegi w okresie analizy i kliknij przycisk Analizuj wybrane tematy. Wybierz żądany format danych i kliknij przycisk Eksportuj wybrane dane, aby wyeksportować zebrane dane. W teście zawieszenia ogona zmutowane zwierzęta UBE3A były unieruchomione znacznie dłużej niż ich rodzeństwo z miotu kontrolnego, co wskazuje na ich zachowanie podobne do depresji.Włącz bieżnię i ręcznie ustaw prędkość taśmy na 20 centymetrów na sekundę na panelu sprzętu przed włączeniem suwaka aparatu. Uruchom oprogramowanie DigiGait Imager i ustaw czas otwarcia migawki na 100 dla myszy albinosów lub 130 dla czarnych lub ciemnych myszy w terenie dla czasu otwarcia migawki. Umieść mysz na pasie bieżni i potwierdź, że mysz może wykonać test, ustawiając ją na niską prędkość chodzenia na około trzy sekundy, a następnie zatrzymując ją, obserwując mysz w sposób ciągły.Uruchom pasek, naciskając przycisk start i nagrywaj przez 10 sekund. Upewnij się, że można zaobserwować czystą i płynną lokomocję składającą się z co najmniej 10 do 15 kroków. Zatrzymaj pasek, naciskając przycisk stop i umieść mysz z powrotem w tymczasowej klatce do trzymania.Zekranizuj nagranie pod kątem sekwencji obrazów z płynnymi krokami, klikając przycisk odtwarzania i przeglądając nagranie za pomocą kontrolki wizualnej w trybie edycji. Wybierz od 10 do 15 płynnych ruchów, ręcznie wpisując ich początkowe i końcowe numery klatek w odpowiednich polach. Wprowadź informacje o zwierzęciu, w tym identyfikator zwierzęcia, datę urodzenia, płeć, wagę, prędkość pasa i kąt nachylenia pasa.Zapisz plik, klikając przycisk ZAPISZ. Następnie otwórz oprogramowanie DigiGait Analysis i przeprowadź analizę chodu w oparciu o w pełni zautomatyzowaną analizę nagrań wideo śladów zwierząt. Wskaźniki chodu zwierząt z mutacją UBE3A zostały zmienione.Zmutowane zwierzęta UBE3A miały dłuższy zamach i postawę, co skutkowało wydłużeniem czasu trwania i długości kroku. Zwiększony został również napęd, czas trwania i spowolnienie tylnych kończyn myszy. Odkrycia te ujawniły również większy obszar łapy w pozycji szczytowej.Włącz sprzęt rotarod i uruchom oprogramowanie, klikając dwukrotnie ikonę oprogramowania pręta. Utwórz nowy plik w zakładce plik i zapisz go pod odpowiednią nazwą. W oknie konfiguracji wypełnij szczegóły eksperymentu, takie jak data, nazwa użytkownika i ewentualne komentarze.Ustaw profil prędkości na 300 sekund, prędkość początkową na cztery prędkości na minutę, a prędkość końcową na 40 obr./min. Otwórz panel pomiarowy, klikając przycisk Zmierz. Rozpocznij początkowy obrót pręta przy czterech obrotach na minutę, klikając Start i umieść pierwsze pięć zwierząt w przypisanych im pozycjach.Rozpocznij protokół testowy, klikając Start Profile, a pręt będzie stopniowo przyspieszał do 40 obr./min w ciągu pięciu minut. Gdy wszystkie zwierzęta spadną z pręta, zamknij okno pomiaru, klikając przycisk Zamknij, a następnie kliknij przycisk Pokaż, aby wyświetlić zebrane dane. Wyeksportuj pozyskane dane w formacie CSV, klikając Eksportuj CSV.Wydajność Rotarod wykazała zmniejszone opóźnienie spadku u zwierząt z mutacją UBE3A. Weź bawełniane gniazdo za pomocą kleszczy i ręcznie zarejestruj jego wagę za pomocą wagi. Umieść gniazdo losowo w klatce, ale po przeciwnej stronie dopływu wody.Waż każde gniazdo przez następne cztery dni ręcznie za pomocą wagi. Upewnij się, że gniazdo jest suche po zważeniu. Jeśli nie, wysuszyć na poduszce grzewczej.Jeśli gniazdo jest rozdarte na kilka części, zważ największą część. Zapisz wagi na papierze lub w gotowym arkuszu kalkulacyjnym. Zmutowane zwierzęta UBE3A zużywały znacznie mniej materiału do budowy swoich gniazd, a różnica ta była szczególnie widoczna między transgenicznymi samicami a ich odpowiednikami kontrolnymi.

behavioral-characterization-of-an-angelman-syndrome-mouse-model

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Inchworming to wysoce powtarzalny synchroniczny ruch kopania wyświetlany przez myszy BTBR T+ Itpr3tf/J (BTBR) po umieszczeniu w klatce testowej z wystarczającą ilością ściółki trocinowej.  Procedura jest modyfikacją protokołu interakcji społecznych dla nieletnich i jest stosowana tutaj do oceny powtarzających się stereotypów motorycznych związanych z zaburzeniami ze spektrum autyzmu.

Gąsienicowość: nowa stereotypia motoryczna w mysim modelu autyzmu BTBR T+ Itpr3tf/J

Tutaj prezentujemy protokół indukowania anoreksji opartej na aktywności (ABA) u samic dorastających myszy. ABA to stan nadpobudliwości wywołany przez nałożenie ograniczenia pokarmowego na gryzonie mające dostęp do koła do biegania. Zjawisko to jest wykorzystywane jako model do badania neurobiologii leżącej u podstaw jadłowstrętu psychicznego.

Wykorzystanie modelu gryzoni anoreksji opartej na aktywności do badania neurobiologicznych podstaw jadłowstrętu psychicznego

Myszy indywidualnie wyposażone w koło do biegania, podczas gdy mają ograniczony dostęp do jedzenia, zmniejszają spożycie jedzenia i zwiększają aktywność na kole do biegania. To eksperymentalne zjawisko nazywa się anoreksją opartą na aktywności. Paradygmat ten stanowi eksperymentalne narzędzie do badania neurobiologii i zachowań leżących u podstaw jadłowstrętu psychicznego.

Ocena anoreksji opartej na aktywności u myszy

Analiza śladów to tania alternatywa dla cyfrowych programów do analizy chodu dla badaczy kwantyfikujących nieprawidłowości ruchowe u myszy. Ze względu na swoją szybkość, prostotę i potencjał podłużny idealnie nadaje się do fenotypowania behawioralnego modeli mysich.

Tania analiza chodu do fenotypowania behawioralnego mysich modeli choroby nerwowo-mięśniowej

Zaburzenie ze spektrum autyzmu (ASD) wiąże się z zaburzeniami zachowań społecznych i komunikacyjnych oraz pojawieniem się powtarzających się zachowań. W celu zbadania wzajemnych relacji między genami ASD a deficytami behawioralnymi w modelu Drosophila, w tym artykule opisano pięć paradygmatów behawioralnych do oceny odstępów społecznych, agresji, zalotów, pielęgnacji i zachowań habituacyjnych.

Paradygmaty oceny behawioralnej w modelu zaburzenia ze spektrum autyzmu Drosophila

Modele gryzoni są cennymi narzędziami do badania podstawowych zachowań związanych z zaburzeniami ze spektrum autyzmu (ASD). W tym artykule wyjaśniamy dwa testy behawioralne do modelowania podstawowych cech ASD u myszy: samopielęgnację, który ocenia powtarzające się zachowanie, oraz trzykomorowy test interakcji społecznych, który dokumentuje upośledzenia społeczne.

Strategie oceny zachowań podobnych do autystycznych u myszy

Pokazujemy użyteczność budowania gniazd u myszy laboratoryjnych jako wskaźnik dobrostanu. Punktacja gniazdowa to wrażliwa technika, która jest zmieniana przez temperaturę, chorobę i agresję. Czas integracji z testem gniazdowym (TINT) to prosta ocena przy klatce, która może wykryć ból pooperacyjny.

Budowanie gniazd jako wskaźnik zdrowia i dobrostanu myszy laboratoryjnych

Długotrwałe i kompleksowe monitorowanie myszy w środowisku domowym pozwala na głębsze zrozumienie nieprawidłowych zachowań w mysich modelach chorób mózgu. W artykule opisano Zintegrowaną Stację Behawioralną (INBEST) jako kluczowy komponent współczesnej analizy behawioralnej.

Fenotypowanie behawioralne modeli chorób myszy za pomocą Zintegrowanej Stacji Behawioralnej (INBEST)

Modele mysie stają się coraz bardziej popularne w badaniach neuronauki behawioralnej.  Wraz z postępem modeli ważne jest, aby opracowywać czułe miary behawioralne specyficzne dla myszy.  Protokół ten opisuje Zadanie Sięgania Matrycy Makaronu, które jest wykwalifikowanym zadaniem motorycznym do stosowania w mysich modelach udaru.

Kompensacyjne użytkowanie kończyn i behawioralna ocena uczenia się umiejętności motorycznych po urazie kory sensomotorycznej w mysim modelu udaru niedokrwiennego

Wiadomo, że kontrola motoryczna i równowaga pogarszają się wraz z wiekiem. W artykule przedstawiono szereg standardowych nieinwazyjnych testów behawioralnych z dodatkiem prostego bodźca obrotowego, który stanowi wyzwanie dla układu przedsionkowego i pokazuje zmiany w wydajności równowagi w mysim modelu starzenia.

Ocena behawioralna układu przedsionkowego starzejącej się myszy

Poznaj walidację modelu mysiego zespołu Angelmana za pomocą powtarzalnych testów behawioralnych. Metoda obejmuje labirynt plus, pole otwarte i analizę chodu, wspierając badania nad przyczynami choroby i terapią genową.

Charakterystyka behawioralna mysiego modelu zespołu Angelmana

Przeglądaj więcej filmów