Name: Przepływ pracy w celu ilościowego określenia zmian w autofluorescencji dna plamki zwyrodnienia plamki żółtej związanych z wiekiem (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-05-26T12:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 54 s
Description: Poznaj metodę ilościowej autofluorescencji do badania zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem. Protokół umożliwia pomiar intensywności autofluorescencji w określonych obszarach siatkówki.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca została sfinansowana przez grant Niemieckiego Towarzystwa Okulistycznego (DOG) dla doktorantów (MW) oraz NIH/NEI 1R01EY027948 (TA).

Exploring Quantitative Autofluorescence in Age-Related Macular Degeneration

<ol><li>Schmitz-Valckenberg, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundus+autofluorescence+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Fundus autofluorescence imaging.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 81, 100893(2021).</li>
<li>Bermond, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescent+granules+of+the+human+retinal+pigment+epithelium%3A+phenotypes%2C+intracellular+distribution%2C+and+age-related+topography%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Autofluorescent granules of the human retinal pigment epithelium: phenotypes, intracellular distribution, and age-related topography.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 61 (5), 35(2020).</li>
<li>Bermond, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescent+organelles+within+the+retinal+pigment+epithelium+in+human+donor+eyes+with+and+without+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Autofluorescent organelles within the retinal pigment epithelium in human donor eyes with and without age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 63 (1), 23(2022).</li>
<li>Delori, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+measurements+of+autofluorescence+with+the+scanning+laser+ophthalmoscope%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative measurements of autofluorescence with the scanning laser ophthalmoscope.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 52 (13), 9379-9390 (2011).</li>
<li>Fleckenstein, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration.</a> Nature Reviews Disease Primers. 7 (1), 31(2021).</li>
<li>Greenberg, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+healthy+eyes%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in healthy eyes.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 54 (8), 5684-5693 (2013).</li>
<li>Sparrow, J. R., Boulton, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((RPE+lipofuscin+and+its+role+in+retinal+pathobiology%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">RPE lipofuscin and its role in retinal pathobiology.</a> Experimental Eye Research. 80 (5), 595-606 (2005).</li>
<li>vonder Emde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natural+history+of+quantitative+autofluorescence+in+intermediate+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Natural history of quantitative autofluorescence in intermediate age-related macular degeneration.</a> Retina. 41 (4), 694-700 (2021).</li>
<li>Reiter, G. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+changes+in+quantitative+autofluorescence+during+progression+from+intermediate+to+late+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Longitudinal changes in quantitative autofluorescence during progression from intermediate to late age-related macular degeneration.</a> Retina. 41 (6), 1236-1241 (2021).</li>
<li>Gliem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+early+and+intermediate+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in early and intermediate age-related macular degeneration.</a> JAMA Ophthalmology. 134 (7), 817-824 (2016).</li>
<li>Hussain, R. M., Gregori, N. Z., Ciulla, T. A., Lam, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacotherapy+of+retinal+disease+with+visual+cycle+modulators%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opinion+on+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Pharmacotherapy of retinal disease with visual cycle modulators.</a> Expert Opinion on Pharmacotherapy. 19 (5), 471-481 (2018).</li>
<li>Ammar, M. J., Hsu, J., Chiang, A., Ho, A. C., Regillo, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+macular+degeneration+therapy%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Age-related macular degeneration therapy: a review.</a> Current Opinion in Ophthalmology. 31 (3), 215-221 (2020).</li>
<li>Ach, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lipofuscin+redistribution+and+loss+accompanied+by+cytoskeletal+stress+in+retinal+pigment+epithelium+of+eyes+with+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Lipofuscin redistribution and loss accompanied by cytoskeletal stress in retinal pigment epithelium of eyes with age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3242-3252 (2015).</li>
<li>Zanzottera, E. C., Messinger, J. D., Ach, T., Smith, R. T., Curcio, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subducted+and+melanotic+cells+in+advanced+age-related+macular+degeneration+are+derived+from+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Subducted and melanotic cells in advanced age-related macular degeneration are derived from retinal pigment epithelium.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3269-3278 (2015).</li>
<li>Cao, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hyperreflective+foci%2C+optical+coherence+tomography+progression+indicators+in+age-related+macular+degeneration%2C+include+transdifferentiated+retinal+pigment+epithelium%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Hyperreflective foci, optical coherence tomography progression indicators in age-related macular degeneration, include transdifferentiated retinal pigment epithelium.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 62 (10), 34(2021).</li>
<li>Zanzottera, E. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Project+MACULA+retinal+pigment+epithelium+grading+system+for+histology+and+optical+coherence+tomography+in+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">The Project MACULA retinal pigment epithelium grading system for histology and optical coherence tomography in age-related macular degeneration.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3253-3268 (2015).</li>
<li>Sparrow, J. R., Duncker, T., Schuerch, K., Paavo, M., de Carvalho, dR. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lessons+learned+from+quantitative+fundus+autofluorescence%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Lessons learned from quantitative fundus autofluorescence.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 74, 100774(2020).</li>
<li>Schmitz-Valckenberg, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Correlation+between+the+area+of+increased+autofluorescence+surrounding+geographic+atrophy+and+disease+progression+in+patients+with+AMD%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Correlation between the area of increased autofluorescence surrounding geographic atrophy and disease progression in patients with AMD.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 47 (6), 2648-2654 (2006).</li>
<li>Ach, T., Bermond, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autofluorescence+of+the+human+retinal+pigment+epithelium+in+normal+aging+and+in+age-related+macular+degeneration%3A+histology+and+clinical+correlation%5BTitle%5D)+AND+%22Klinische+Monatsblatter+Fur+Augenheilkunde%22%5BJournal%5D)">Autofluorescence of the human retinal pigment epithelium in normal aging and in age-related macular degeneration: histology and clinical correlation.</a> Klinische Monatsblatter Fur Augenheilkunde. 236 (5), 672-681 (2017).</li>
<li>Pollreisz, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Visualizing+melanosomes%2C+lipofuscin%2C+and+melanolipofuscin+in+human+retinal+pigment+epithelium+using+serial+block+face+scanning+electron+microscopy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">Visualizing melanosomes, lipofuscin, and melanolipofuscin in human retinal pigment epithelium using serial block face scanning electron microscopy.</a> Experimental Eye Research. 166, 131-139 (2018).</li>
<li>Bernstein, P. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((meso-zeaxanthin%3A+The+basic+and+clinical+science+underlying+carotenoid-based+nutritional+interventions+against+ocular+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Progress+in+Retinal+and+Eye+Research%22%5BJournal%5D)">meso-zeaxanthin: The basic and clinical science underlying carotenoid-based nutritional interventions against ocular disease.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 50, 34-66 (2016).</li>
<li>Göbel, A. P., Fleckenstein, M., Heeren, T. F. C., Holz, F. G., Schmitz-Valckenberg, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In-vivo+mapping+of+drusen+by+fundus+autofluorescence+and+spectral-domain+optical+coherence+tomography+imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Graefe%27s+Archive+for+Clinical+and+Experimental+Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">In-vivo mapping of drusen by fundus autofluorescence and spectral-domain optical coherence tomography imaging.</a> Graefe's Archive for Clinical and Experimental Ophthalmology. 254 (1), 59-67 (2016).</li>
<li>Pfau, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesopic+and+dark-adapted+two-color+fundus-controlled+perimetry+in+geographic+atrophy+secondary+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Mesopic and dark-adapted two-color fundus-controlled perimetry in geographic atrophy secondary to age-related macular degeneration.</a> Retina. 40 (1), 169-180 (2020).</li>
<li>vonder Emde, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mesopic+and+dark-adapted+two-color+fundus-controlled+perimetry+in+choroidal+neovascularization+secondary+to+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Mesopic and dark-adapted two-color fundus-controlled perimetry in choroidal neovascularization secondary to age-related macular degeneration.</a> Translational Vision Science and Technology. 8 (1), 7(2018).</li>
<li>Aumann, S., Donner, S., Fischer, J., Müller, F. Optical coherence tomography (OCT): principle and technical realization. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aAumann%2C+S+%22High+Resolution+Imaging+in+Microscopy+and+Ophthalmology%3A+New+Frontiers+in+Biomedical+Optics%22">High Resolution Imaging in Microscopy and Ophthalmology: New Frontiers in Biomedical Optics</a>. , Cham (CH), Springer. 59-85 (2019).</li>
<li>Schindelin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((FIJI%3A+an+open-source+platform+for+biological-image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">FIJI: an open-source platform for biological-image analysis.</a> Nature Methods. 9 (7), 676-682 (2012).</li>
<li>Kleefeldt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence%3A+advanced+analysis+tools%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence: advanced analysis tools.</a> Translational Vision Science and Technology. 9 (8), 2(2020).</li>
<li>Hong, I. H., Jung, W. H., Lee, J. H., Chang, I. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+pigment+optical+density+in+the+Korean+population%3A+a+cross+sectional+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Korean+Medical+Science%22%5BJournal%5D)">Macular pigment optical density in the Korean population: a cross sectional study.</a> Journal of Korean Medical Science. 35 (5), e30(2020).</li>
<li>Putnam, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+imaging+of+macular+pigment+optical+density+and+spatial+distribution%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+and+Experimental+Optometry%22%5BJournal%5D)">Clinical imaging of macular pigment optical density and spatial distribution.</a> Clinical and Experimental Optometry. 100 (4), 333-340 (2017).</li>
<li>Zweifel, S. A., Spaide, R. F., Curcio, C. A., Malek, G., Imamura, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reticular+pseudodrusen+are+subretinal+drusenoid+deposits%5BTitle%5D)+AND+%22Ophthalmology%22%5BJournal%5D)">Reticular pseudodrusen are subretinal drusenoid deposits.</a> Ophthalmology. 117 (2), 303-312 (2010).</li>
<li>Curcio, C. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subretinal+drusenoid+deposits+in+non-neovascular+age-related+macular+degeneration%3A+morphology%2C+prevalence%2C+topography%2C+and+biogenesis+model%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Subretinal drusenoid deposits in non-neovascular age-related macular degeneration: morphology, prevalence, topography, and biogenesis model.</a> Retina. 33 (2), 265-276 (2013).</li>
<li>Spaide, R. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outer+retinal+atrophy+after+regression+of+subretinal+drusenoid+deposits+as+a+newly+recognized+form+of+late+age-related+macular+degeneration%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Outer retinal atrophy after regression of subretinal drusenoid deposits as a newly recognized form of late age-related macular degeneration.</a> Retina. 33 (9), 1800-1808 (2013).</li>
<li>Reiter, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+lens+opacities+and+cataract+severity+on+quantitative+fundus+autofluorescence+as+a+secondary+outcome+of+a+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Influence of lens opacities and cataract severity on quantitative fundus autofluorescence as a secondary outcome of a randomized clinical trial.</a> Scientific Reports. 11 (1), 12685(2021).</li>
<li>Gliem, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+pseudoxanthoma+elasticum%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in pseudoxanthoma elasticum.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 58 (14), 6159-6165 (2017).</li>
<li>Burke, T. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+recessive+Stargardt+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in recessive Stargardt disease.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 55 (5), 2841-2852 (2014).</li>
<li>Armenti, S. T., Greenberg, J. P., Smith, R. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+for+the+evaluation+of+retinal+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence for the evaluation of retinal diseases.</a> Journal of Visualized Experiments. (109), 53577(2016).</li>
<li>Pröbster, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+in+the+developing+and+maturing+healthy+eye%5BTitle%5D)+AND+%22Translational+Vision+Science+and+Technology%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence in the developing and maturing healthy eye.</a> Translational Vision Science and Technology. 10 (2), 15(2021).</li>
<li>Duncker, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+fundus+autofluorescence+and+optical+coherence+tomography+in+PRPH2%2FRDS-+and+ABCA4-associated+disease+exhibiting+phenotypic+overlap%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Quantitative fundus autofluorescence and optical coherence tomography in PRPH2/RDS- and ABCA4-associated disease exhibiting phenotypic overlap.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 56 (5), 3159-3170 (2015).</li>
</ol>

Leon von der Emde informuje, że otrzymuje płatności od Heidelberg Engineering. Merten Mallwitz nie ujawnia żadnych informacji finansowych. Kenneth R. Sloan również nie ujawnia żadnych informacji finansowych. Frank G. Holz informuje o płatnościach konsultingowych/osobistych dla firm Acucela, Alcon (C), Gyroscope Allergan Apellis, Bayer Bioeq/Formycon, CenterVue, Roche/Genentech, Geuder, Ivericbio, NightStarX, Novartis, Optos, Oxurion, Pixium Vision, Stealth BioTherapeutics, Zeiss i GRADE Reading center. Thomas Ach zajmuje się doradztwem/płatnościami osobistymi dla firm Bayer, Apellis, Roche i Novartis.

Ten przepływ pracy zawiera przewodnik krok po kroku dotyczący korzystania z narzędzi wtyczek FIJI typu open source do określania i porównywania migotania przedsionków zmian specyficznych dla AMD. Wtyczki zapewniają łatwe w użyciu szablony, które nie wymagają żadnej wiedzy z zakresu kodowania i mogą być stosowane przez lekarzy bez wsparcia technicznego27. Według naszej wiedzy narzędzia te są jedyne w swoim rodzaju do ilościowego oznaczania AF specyficznego dla zmiany chorobowej.
Wartości QAF naturalnie różnią się w siatkówce, przy czym wartości są wyższe na obrzeżach i niższe w plamce żółtej ze względu na nierównomierny rozkład lipofuscyny i melanolipofuscyny w siatkówce, niski AF naczyń i nierównomierny rozkład pigmentu plamki żółtej. Ze względu na dużą zmienność naturalnie występujących poziomów QAF w siatkówce, bezpośrednia analiza bezwzględnych wartości QAF zmian chorobowych nie jest obiecującym podejściem. Na przykład zmiana hipoautofluorescencyjna na obrzeżach może nadal mieć wyższe bezwzględne wartości QAF niż fizjologiczne poziomy fluorescencji plamki żółtej. Zastosowanie StandardRetina i użycie wskaźników z do pomiaru poziomów fluorescencji druz jest poprawne dla tej naturalnie występującej wariancji wartości QAF.
Wskaźnik Z jest numeryczną miarą stosunku wartości obszaru zainteresowania do średniej w StandardRetina. Oblicza się go, odejmując średnią od osoby od średniej z StandardRetina w tym samym miejscu, a następnie dzieląc wynik przez odchylenie standardowe. Ta standaryzacja pozwala na porównywanie różnych obrazów QAF, ponieważ wskaźnik Z wskazuje, ile odchyleń standardowych wartość różni się od średniej. Dodatni wskaźnik Z wskazuje, że wartość jest powyżej średniej, a ujemny wskaźnik Z wskazuje, że jest poniżej średniej.
Ważne jest, aby pamiętać, że mogą istnieć potencjalne pułapki, które należy wziąć pod uwagę. Chociaż ta metoda uwzględnia różną ilość poziomów migotania przedsionków w całym dnie płuca, nadal może nie być najdokładniejszym sposobem pomiaru i porównywania AF RPE. Osoby mają różne poziomy i topografię barwnika lutealnego plamki żółtej, a zmiany chorobowe mogą również wpływać na przezierność leżącej nad nią siatkówki28,29. Jest zatem prawdopodobne, że zmierzone zmniejszone AF w obszarach SDD (patrz reprezentatywne wyniki) jest konsekwencją efektów cieniowania, a nie zmniejszonej fluorofory w RPE30,31,32.
Obecnie pracujemy nad przepływem pracy, aby uwzględnić współczynnik odbicia, grubość i ilościowy pigment plamki żółtej (przy użyciu zielonego i niebieskiego AF) za pomocą liniowych modeli mieszanych. Dodatkowo, do tej pory, QAF wykorzystuje współczynnik korekcyjny zależny od wieku, aby uwzględnić zmętnienie soczewkowe, które pomija różnice międzyosobnicze w zmętnieniu soczewkowym uczestników w podobnym wieku33 lata. W związku z tym obecnie pracujemy nad przepływem pracy dla spersonalizowanego współczynnika korekcyjnego autofluorescencji soczewkowej i zmętnienia. Aby wiarygodnie wyodrębnić informacje o migotaniu przedsionków z małych zmian, potrzebna jest odpowiednia wiarygodność obrazów QAF w testach wielokrotnych. Aby jeszcze bardziej rozróżnić te obrazy QAF, w przypadku których możliwa jest bardziej szczegółowa analiza, badamy "wskaźniki wiarygodności obrazów QAF", które mogą przewidzieć wiarygodność obrazów QAF w teście testowym. Na obecnym etapie ostrożnym podejściem jest pozyskanie zduplikowanych obrazów i zbadanie wiarygodności ponownego testu AF specyficznego dla zmiany chorobowej.
Przedstawiona metoda dodatkowej analizy izokadłubów zmian była technicznie trudna do wdrożenia, ponieważ izokadłuby sąsiednich zmian łączą się. Obszary połączonych izokadłubów można scharakteryzować w sposób charakterystyczny w zależności od tego, która zmiana jest brana pod uwagę. Nasze rozwiązanie polegało na uznaniu wszystkich zmian jednego typu za jedną zmianę i analizie ich obwodu jako wspólnego izokadłuba. Metoda ta jednak drastycznie ogranicza możliwość pomiaru izokadłubów poszczególnych druzów i może być uważana za kolejną pułapkę tej techniki. Bardziej wyrafinowane technicznie metody uwzględniania połączonych izokadłubów lub zawieszonego raportowania AF w obszarach połączonych izokadłubów mogą ułatwić analizę migotania przedsionków w obwodzie zmian chorobowych w przyszłości.
W tym badaniu wykorzystaliśmy AMD jako chorobę modelową. Przebieg pracy można dostosować do badania zmian chorobowych w innych chorobach. Do tej pory QAF był stosowany w wielu chorobach naczyniówkowo-siatkówkowych, w tym recesywnej chorobie Stargardta, chorobach związanych z Bestrophiną-1, różnych postaciach barwnikowego zwyrodnienia siatkówki, ostrej strefowej utajonej retinopatii zewnętrznej, pseudoxanthoma elasticum i innych 17,33,34,35,36,37. Ponieważ ten przepływ pracy wykorzystuje oprogramowanie typu open source, zachęcamy innych do powielania tej pracy w określaniu migotania przedsionków specyficznych dla zmian i poszerzania naszej wiedzy na temat zaburzeń siatkówki. Podsumowując, przedstawiamy przebieg pracy w celu określenia i porównania poziomów AF różnych zmian siatkówki w całej plamce żółtej. Ten przebieg pracy toruje drogę do bardziej dogłębnej analizy migotania przedsionków i może ułatwić opracowanie nowych biomarkerów w AMD i poza nim.

Obrazowanie autofluorescencji dna oka (FAF) zapewnia nieinwazyjne mapowanie naturalnie i patologicznie występujących fluoroforów dna oka1. Najpowszechniejsza niebieska (wzbudzenie 488 nm) autofluorescencja (AF) wzbudza granulki lipofuscyny i melanolipofuscyny nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE)2,3,4. Dystrybucja i zwiększanie/zmniejszanie ziarnistości odgrywają kluczową rolę w prawidłowym starzeniu się i różnych chorobach siatkówki, w tym zwyrodnieniu plamki żółtej związanym z wiekiem (AMD)5.
Dalszy rozwój FAF, ilościowej autofluorescencji dna oka (QAF), teraz pozwala na dokładne określenie topograficznie rozdwojonych intensywności AF siatkówki4,6. Włączając odniesienie do ścieżki optycznej urządzenia do obrazowania FAF, można porównać intensywność AF między urządzeniami, punktami czasowymi i obiektami. Technika ta doprowadziła do zmiany paradygmatu w odniesieniu do przypuszczalnego czynnika patogenetycznego w AMD, który przez długi czas spekulowano, że jest spowodowany nadmierną akumulacją lipofuscyny w komórkach RPE7. Histologiczna i kliniczna kwantyfikacja migotania przedsionków ujawniła jednak spadek migotania przedsionków w AMD (z powodu redystrybucji i utraty granulek autofluorescencyjnej lipofuscyny i melanolipofuscyny), zamiast proponowanego wzrostu AF8,9,10.
Monitorowanie AF ma implikacje kliniczne. Von der Emde i inni i inni wykazali, że migotanie przedsionków nie tylko ulega zmniejszeniu, ale także dalszemu spadkowi w przebiegu AMD u wysokiego ryzyka, pośrednich AMD eyes8,9. Ponadto badania histologiczne sugerują, że większość komórek RPE dotkniętych AMD wykazuje charakterystyczne zachowanie z agregacją i ekstruzją granulek przed utratą komórek RPE w wyniku subdukcji, złuszczania, migracji lub atrofii13,14,15,16. To dodatkowo wskazuje, że utrata migotania przedsionków może być wyzwalaczem lub zastępczym sygnałem zbliżającego się postępu choroby.
Badania QAF do tej pory oceniały AF tylko globalnie na tylnym biegunie - przy użyciu prefabrykowanych siatkowych układów współrzędnych biegunowych (np. QAF8/Delori Grid)17. Użycie prefabrykowanych siatek do pomiaru AF powoduje uzyskanie wielu wartości AF w określonych obszarach na oko obiektu. Badanie wartości migotania przedsionków w ten sposób może przeoczyć lokalne zmiany w obszarach z patologicznie zmienionym migotaniem przedsionków, na przykład w AMD na szczycie lub w pobliżu druz lub podsiatkówkowych złogów druzenoidowych (SDD). Druzy, a w większym stopniu SDD, wiążą się z wysokim ryzykiem rozwoju późnego AMD i utraty wzroku. W szczególności druzy mają typowy cykl zwiększania rozmiarów przez wiele lat i mogą szybko ulec pogorszeniu przed atrofią. Można sobie wyobrazić, że na przykład globalne migotanie przedsionków zmniejsza się w AMD, ale zwiększa się lub jest jeszcze bardziej zmniejszone w tych specyficznych zmianach ogniskowych związanych z chorobą i wokół nich.
Różne lokalne wzorce migotania przedsionków mogą mieć również znaczenie prognostyczne dla postępu choroby. Na przykład poziomy autofluorescencji mogą być wykorzystane do oceny, czy druzy zwiększają swoją wielkość, czy też są już w fazie regresji do atrofii. Wykazano już, że zmienione wzorce perylezyjne migotania przedsionków w atrofii geograficznej w dużej mierze wpływają na postęp atrofii w czasie18. Dodatkowo, lokalne wzorce autofluorescencji mogą ujawnić dalsze szczegóły dotyczące zdrowia RPE. Często optyczna tomografia koherentna (OCT) wykazuje hiperrefleksję w naczyniówce włosowatej, chociaż warstwa RPE wydaje się nienaruszona. Podejście multimodalne łączące lokalne wartości QAF i OCT może pomóc w różnicowaniu zmian o wysokim ryzyku zakłócenia RPE i zbliżającej się atrofii.
Jednym z powodów, dla których nie przeprowadzono analiz przestrzennie rozdzielczych w badaniach, jest to, że najczęściej używane oprogramowanie producenta nie dostarcza narzędzia do tego typu analiz. Właściwości migotania przedsionków różnych zmian chorobowych w zależności od stopnia zaawansowania choroby AMD mogą dodatkowo wyjaśnić patogenezę AMD. W związku z tym pożądane byłoby narzędzie do pomiaru regionalnego, specyficznego dla zmiany chorobowej migotania przedsionków. Aby dokładnie porównać zmiany chorobowe zlokalizowane w całej siatkówce, przepływ pracy musi uwzględniać różne stopnie migotania przedsionków w ludzkim dnie oka19. Przede wszystkim AF jest charakterystycznie niższy ze względu na zacieniające efekty pigmentu plamki żółtej i różną liczbę granulek20,21.
AF osiąga swój szczyt na ~9° (odległość do dołka we wszystkich kierunkach) i zmniejsza się w większym stopniu peryferyjnie4. W związku z tym, gdyby porównać bezwzględne wartości poziomów AF z miękkich druz (zlokalizowanych na dołku centralnym i paradołku w obszarach niskiego AF) i SDD (zlokalizowanych przycentralnie w obszarach wysokiego AF), wyniki nie byłyby porównywalne22. Zainspirowany pracą Pfau i wsp. oraz koncepcją utraty wrażliwości (korygowanie czułości mierzonej w AMD dla wzgórza widzenia [zmniejszająca się wrażliwość siatkówki wraz z odległością do dołka środkowego] u zdrowych osób z grupy kontrolnej) dla perymetrii kontrolowanej dna oka, AF jest porównywany ze standaryzowanymi wartościami AF w całej plamce żółtej23,24. Wyniki są przedstawiane jako wskaźniki Z (numeryczny pomiar stosunku wartości regionu zainteresowania do średniej).
Celem tego badania jest ocena wykorzystania nowego narzędzia do pomiaru lokalnych poziomów QAF w różnych typach zmian u pacjentów z AMD. To narzędzie jest przeznaczone do pomiaru poziomu autofluorescencji zmian zidentyfikowanych na skanach OCT. Umożliwia to ocenę miejscowych poziomów autofluorescencji w zmianach chorobowych, takich jak miękkie druzy lub SDD, oraz umożliwia śledzenie zmian AF spowodowanych zmianami w czasie. Potencjalną użytecznością tego narzędzia jest umożliwienie nowego biomarkera strukturalnego, który szacuje stan zdrowia RPE i może mieć wartość prognostyczną dla badanych zmian.

<table><tbody><tr><td>BatchStandardRetina plugin</td> n.a.n.a.n.a.FIJI <td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>(Image J)</td><td>n.a.n.a.n.a.a.Mark_Bscans_OCT</td><td></td> plugin n.a.n.a.n.a.Microspft <td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>office</td><td>Microsoft</td><td>n.a.n.a.QAF_xml_reader</td><td></td></tr> <tr><td>plugin</td><td>n.a.n.a.n.a.Register_OCT_2</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>plugin</td><td>n.a.</td><td>nie dotyczy</td><td>nie dotyczy</td></tr><tr><td>Rozszerzenie Spectralis</td><td>Heidelberg Engineering</td><td>n.a.QAF</td><td></td></tr> <tr><td>Wtyczka StandardRetina</td> n.a.n.a.n.a<td></td><td></td><td>.</td></tr></tbody></table>

przepływ pracy w celu ilościowego określenia zmian w autofluorescencji dna plamki zwyrodnienia plamki żółtej związanych z wiekiem

A Workflow to Quantitatively Determine Age-Related Macular Degeneration Lesion-Specific Variations in Fundus Autofluorescence

Obrazowanie autofluorescencji dna oka (FAF) pozwala na nieinwazyjne mapowanie wewnętrznych fluoroforów dna oka, szczególnie nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE), teraz mierzalnego dzięki pojawieniu się konfokalnej skaningu laserowego opartej na oftalmoskopii ilościowej autofluorescencji (QAF). Wykazano, że QAF jest ogólnie zmniejszony w tylnym biegunie w zwyrodnieniu plamki żółtej związanym z wiekiem (AMD). Związek między QAF a różnymi zmianami AMD (druzy, podsiatkówkowe złogi druzenoidowe) jest nadal niejasny.
Ten artykuł opisuje proces określania QAF specyficznego dla zmiany chorobowej w AMD. Stosowane jest multimodalne podejście do obrazowania in vivo, w tym między innymi optyczna tomografia koherentna w domenie spektralnej (SD-OCT), skanowanie objętości plamki żółtej i QAF. Korzystając z niestandardowych wtyczek FIJI, odpowiedni obraz QAF jest wyrównywany z obrazem w bliskiej podczerwieni ze skanu SD-OCT (charakterystyczne punkty orientacyjne, tj. rozwidlenia naczyń). Dołek środkowy i krawędź głowy nerwu wzrokowego są oznaczane na obrazach OCT (i przenoszone na zarejestrowany obraz QAF) w celu dokładnego pozycjonowania siatek analizy.
Zmiany specyficzne dla AMD mogą być następnie zaznaczone na poszczególnych BScanach OCT lub na samym obrazie QAF. Normatywne mapy QAF są tworzone w celu uwzględnienia zróżnicowanej średniej i odchylenia standardowego wartości QAF w całym dnie oka (obrazy QAF z reprezentatywnej grupy AMD uśredniono w celu zbudowania normatywnych standardowych map AMD QAF siatkówki). Wtyczki rejestrują współrzędne X i Y, z-score (pomiar numeryczny opisujący wartość QAF w stosunku do średniej map AF pod względem odchylenia standardowego od średniej), średnią wartość intensywności, odchylenie standardowe i liczbę zaznaczonych pikseli. Narzędzia te określają również wskaźniki Z ze strefy granicznej zaznaczonych zmian. Ten przepływ pracy i narzędzia analityczne poprawią zrozumienie patofizjologii i interpretacji klinicznych obrazów AF w AMD.

Analiza wyników 
Aby właściwie przeanalizować wyniki i sformułować wnioski, ważne jest zrozumienie pliku wyjściowego programu Mark_Bscans_OCT. Pierwsze trzy kolumny są opisane jako case ID (identyfikator przypadku), laterality (stronność) pliku oraz wybrana imaging modality (modalność obrazowania). Czwarta kolumna jest określana jako mode (tryb) i opisana jako z-score. Należy zauważyć, że w momencie pisania tego tekstu program Mark BScans może obliczać wszystkie zmiany jednocześnie; wiersze odnoszą się do iso-hulls (izopowłok), których odległości od zewnętrznej krawędzi zmiany są określone w kolumnach lower (dolna) i upper (górna) arkusza kalkulacyjnego. Izopowłoki mierzą AF w jednostkach z-score (w przypadku QAF) w określonym obwodzie otaczającym zmianę. Należy zauważyć, że minimalną wartość piksela w iso-hull można znaleźć w kolumnach opisanych jako min, natomiast kolumny opisane jako median, max, mean i stdev zawierają odpowiednio medianę, wartość maksymalną, średnią oraz odchylenie standardowe średniej wartości pikseli wiso-hull. Kolumna n zawiera całkowitą liczbę pikseli w iso-hull. Rycina 1 przedstawia pojedynczy zaznaczony miękki druz u 84-letniego pacjenta z umiarkowaną postacią zwyrodnienia plamki związanego z wiekiem (iAMD).
Rysunek 2 przedstawia lewe oko reprezentatywnego pacjenta z SDD oznaczonymi za pomocą narzędzia QAF-Workflow (Rysunek 3). SDD u tego pacjenta wiązały się ze zmniejszoną AF (z-score = -0,4 ± 0,2). Podobnie, izohulle wokół SDD wykazały zmniejszoną AF (np. najbliższy izohull = -0,3 ± 0,3) w porównaniu do StandardRetina. Prawdopodobnym wyjaśnieniem tego zjawiska mogą być efekty cieniowania (zmniejszona przezroczystość) zmian SDD na RPE. Wykorzystanie SDD było egzemplaryczne. Narzędzie to umożliwia również ocenę lokalnych poziomów AF w innych zmianach, takich jak druzy. Ponadto narzędzie pozwala na śledzenie zmian AF w obrębie zmian chorobowych w czasie.
<img alt="Analiza obrazowania siatkówki z detekcją zmian; zawiera tabelę danych oceny ilościowej." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Pojedyncze zaznaczone miękkie druzy u 84-letniego pacjenta płci męskiej z umiarkowanym stopniem związanego z wiekiem zwyrodnienia plamki żółtej (iAMD). (A) Obraz QAF lewego oka z zaznaczoną druzą. (B) Powiększenie druzy: brązowy środek reprezentujący zaznaczoną druzę oraz kolorowe pasy reprezentujące otaczające powłoki izokinetyczne (iso-hulls). Tabela poniżej przedstawia plik wynikowy. Wartości QAF dla druz są porównywane z odpowiadającymi im wartościami QAF dla danej ekscentryczności z bazy StandardRetina. Wynikiem są wartości z-score, które reprezentują odchylenie od średniej z obszarów nieobjętych zmianami. Niebieska ramka pokazuje od lewej do prawej: identyfikator przypadku (case ID), stronę oka, użytą modalność oraz pożądany wynik (w tym przypadku z-score). Kolumny w pomarańczowej ramce wskazują granice zmierzonego obszaru w milimetrach (lower = dolna granica, upper = górna granica). Zielona ramka oznacza kolumny zawierające pomiary QAF. Od lewej do prawej zawierają one wartość minimalną, medianę, wartość maksymalną, liczbę pikseli, średnią oraz odchylenie standardowe średniej. Każdy wiersz reprezentuje powłokę izokinetyczną, wiersze w niebieskiej ramce reprezentują wartości w obrębie zmiany, a wiersze w fioletowej ramce pokazują powłoki izokinetyczne otaczające każdą zmianę (od góry do dołu wraz ze zwiększającą się odległością od zmiany). Pasek skali = 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Analiza siatkówki ukazująca nerw wzrokowy i naczynia; schemat mapowania pikseli dla rozpoznawania wzorców." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2: Wyznaczone SDD na obrazie QAF u 80-letniej pacjentki z wczesnym AMD. (A) SDD widoczne na obrazie QAF. Ten sam obraz QAF przedstawiono z naniesionymi adnotacjami SDD. (B) Wokół każdej zaznaczonej zmiany przedstawiono iso-powłoki z kodowaniem kolorystycznym (jasnozielony, ciemnozielony i czerwony). (C) Powiększenie obszaru zaznaczonego niebieskim prostokątem. Zewnętrzna krawędź każdego SDD została zaznaczona na niebiesko. Skróty: QAF = ilościowa autofluorescencja; AMD = związane z wiekiem zwyrodnienie plamki żółtej; SDD = podsiatkówkowe złogi druzenoidalne. Pasek skali = 1 mm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig02large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Schemat przetwarzania obrazów siatkówki; dopasowanie OCT, uśrednianie, adnotacje, wykres analizy." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65238/65238fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3: Schemat postępowania w celu określenia AF zmian. Na rycinie przedstawiono wtyczki oprogramowania niezbędne do wyznaczenia AF specyficznej dla zmian. (A) Obraz przedstawia kolorowy obraz QAF, który może służyć do wizualizacji rozkładu wartości QAF, lecz nie powinien być wykorzystywany do dalszych analiz. (B) Przedstawiono obraz QAF na pierwszym planie, a w tle obraz podczerwony z pomiaru SD-OCT. Ma to na celu wizualizację dopasowania z wykorzystaniem rozgałęzień naczyń. Można to zrealizować za pomocą wtyczki Register_OCT_2. (C) StandardRetina, służąca do pomiaru wartości z-score zmian. StandardRetinas mogą być tworzone przy użyciu StandardRetina/BatchStandardRetina. (D) Przedstawiono BScan z niebieskimi strzałkami wskazującymi SDD, które są zaznaczone żółtymi liniami (uwaga: zmiany są zawsze znakowane poniżej RPE, niezależnie od ich położenia w kierunku osi z). (E) Wszystkie zaznaczone zmiany są widoczne jako odciski na obrazie QAF (patrz Rycina 1). Ostatnie dwa kroki są wykonywane za pomocą wtyczki Mark_BScans_OCT. Skróty: AF = autofluorescencja; QAF = ilościowa autofluorescencja; SDD = podsiatkówkowe złogi druzoidalne; IR = podczerwień; RPE = nabłonek pigmentowy siatkówki; SD-OCT = optyczna koherentna tomografia w dziedzinie widmowej. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65238/65238fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>

To badanie opisuje proces określania i porównywania poziomów autofluorescencji z poszczególnych obszarów zainteresowania (np. druzy i podsiatkówkowych złogów druzenoidowych w zwyrodnieniu plamki żółtej związanym z wiekiem [AMD]) przy jednoczesnym uwzględnieniu różnych poziomów autofluorescencji w całym dnie.

Przepływ pracy w celu ilościowego określenia zmian w autofluorescencji dna plamki zwyrodnienia plamki żółtej związanych z wiekiem

Fundus autofluorescence (FAF) imaging allows the noninvasive mapping of intrinsic fluorophores of the ocular fundus, particularly the retinal pigment ...

Do tej pory analiza autofluorescencji ilościowej lub QAF ograniczała się do prefabrykowanych siatek analizujących globalną autofluorescencję tylnego bieguna oka. Nasz protokół pozwala na pomiar i porównanie intensywności autofluorescencji w określonych obszarach zainteresowania. QAF wykazał zmniejszoną intensywność autofluorescencji w zwyrodnieniu plamki żółtej związanym z wiekiem.W rzeczywistości to ważne odkrycie było sprzeczne z historycznym poglądem na patologiczne nagromadzenie lipofuscyny w AMD. Obecnie wyniki kliniczne można łatwo potwierdzić nowymi danymi histologicznymi dotyczącymi nabłonka barwnikowego siatkówki na poziomie komórkowym. Charakterystyczne poziomy autofluorescencji dna oka wykazują silne różnice regionalne.Wydaje się, że istnieje silny związek między autofluorescencją a gęstością fotoreceptorów pręcików. Aby uzyskać dokładne porównanie autofluorescencji, należy wziąć pod uwagę różnice regionalne, co jest wyzwaniem. Mogliśmy po raz pierwszy wykazać, że typowe zmiany AMD, takie jak druzy, wykazują dodatkowo zmniejszoną intensywność autofluorescencji oprócz ogólnie obniżonych poziomów autofluorescencji u tych pacjentów.Obecnie koncentrujemy się na analizie spektralnej światła emitowanego przez fluorofory z nabłonka barwnikowego siatkówki zarówno w warunkach in vivo, jak i ex vivo. Mamy nadzieję, że dzięki takiemu podejściu uzyskamy lepsze informacje na temat fizjologii i patofizjologii fotoreceptorów oraz nabłonka barwnikowego siatkówki w zdrowych i zmarłych oczach.

a-workflow-to-quantitatively-determine-age-related-macular

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Nabłonek barwnikowy siatkówki (RPE) wspiera siatkówkę czuciową poprzez recykling produktów ubocznych cyklu wzrokowego, które gromadzą się jako lipofuscyna. Produkty te są autofluorescencyjne i mogą być jakościowo obrazowane in vivo. W tym miejscu opisujemy metodę ilościowego obrazowania lipofuscyny RPE za pomocą konfokalnej skaningowej oftalmoskopii laserowej.

Ilościowa autofluorescencja dna oka w ocenie chorób siatkówki

Testy laboratoryjne mogą wykorzystać wartość prognostyczną z multimodalnego obrazowania zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem (AMD) opartego na podłużnej optycznej tomografii koherentnej (OCT). Ludzkie oczy dawcy z AMD i bez AMD są obrazowane za pomocą OCT, koloru, skaningowej oftalmoskopii laserowej w bliskiej podczerwieni i autofluorescencji na dwóch długościach fal wzbudzenia przed sekcją tkanki.

Ex vivo Multimodalne obrazowanie oczu ludzkiego dawcy oparte na OCT do badań nad zwyrodnieniem plamki żółtej związanym z wiekiem

Określenie wszczepienia komórek dawcy stanowi wyzwanie w modelach przeszczepu szpiku kostnego u myszy, które nie mają dobrze zdefiniowanych markerów fenotypowych. Opisaliśmy metodologię ilościowego oznaczania wszczepienia męskich komórek dawcy u samic myszy biorców przeszczepu. Metoda ta może być stosowana u wszystkich szczepów myszy do badania funkcji HSC.

Wykorzystanie ilościowej reakcji PCR w czasie rzeczywistym do określenia wszczepienia komórek dawcy w konkurencyjnym modelu przeszczepu mysiego szpiku kostnego

Angiografia z zieleni indocyjaninowej (lub ICGA) wykonywana przez wstrzyknięcie żyły ogonowej dostarcza wysokiej jakości obrazów przebiegu czasu ICGA do scharakteryzowania nieprawidłowości w naczyniówce myszy.

Wykrywanie nieprawidłowości w unaczynieniu naczyniówki w mysim modelu zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem za pomocą zielonej angiografii indocyjaniny w czasie

Test Focus Formation dostarcza prostej metody oceny potencjału transformacyjnego kandydującego onkogenu.

Tworzenie ogniska: test komórkowy w celu określenia potencjału onkogennego genu

Analiza obrazu siatkówki to dyskretna procedura wizualizacji mikrokrążenia. Wpływ czynników ryzyka chorób sercowo-naczyniowych może powodować zmiany kalibrów naczyń siatkówki. Opisano procedury pozyskiwania obrazów dna oka oraz etapy obliczania kalibrów statków.

Fotografia dna oka jako wygodne narzędzie do badania odpowiedzi mikronaczyniowych na czynniki ryzyka chorób sercowo-naczyniowych w badaniach epidemiologicznych

Populacje mikroorganizmów zawierają znaczną heterogeniczność komórek, która może dyktować ogólne zachowanie. Analiza sondy molekularnej za pomocą cytometrii przepływowej może określić stany fizjologiczne komórek, jednak jej zastosowanie różni się w zależności od gatunku. Badanie to zapewnia protokół do dokładnego określenia śmiertelności komórek w populacji cyjanobakterii, bez niedoceniania lub rejestrowania wyników fałszywie dodatnich.

Optymalizacja sondy molekularnej w celu określenia śmiertelności komórek w organizmie fotosyntetyzującym (Microcystis aeruginosa) za pomocą cytometrii przepływowej

Tutaj prezentujemy protokół do trwałego zamknięcia dystalnej tętnicy środkowej mózgu u starszych samic szczurów z jednoczesnym zamknięciem tętnic szyjnych w celu wygenerowania dużych zawałów korowych i utrzymujących się deficytów. Pokazujemy potwierdzenie wielkości zmiany za pomocą strukturalnego rezonansu magnetycznego po 24 godzinach i 8 tygodniach po udarze.

Wykonywanie stałej dystalnej środkowej części mózgu z niedrożnością tętnicy szyjnej wspólnej u starszych szczurów w celu zbadania niedokrwienia kory mózgowej z trwałą niepełnosprawnością

Choroba zwyrodnieniowa stawów (OA), czyli choroba zwyrodnieniowa stawów, jest wyniszczającym stanem związanym z bólem, który pozostaje tylko częściowo kontrolowany przez dostępne leki przeciwbólowe. Opracowywane są modele zwierzęce, które mają na celu lepsze zrozumienie mechanizmów bólu związanych z chorobą zwyrodnieniową stawów. W tym miejscu opisujemy metodologię monojodooctanowego modelu bólu zwyrodnieniowego stawów u myszy.

Model monojodooctanu bólu związanego z chorobą zwyrodnieniową stawów u myszy

Fotografia dna oka zwykle wymaga specjalistycznych aparatów do badania dna oka, które nie zawsze są dostępne we wszystkich warunkach klinicznych. Tutaj opisana jest prosta metoda rejestrowania obrazów dna oka za pomocą aparatu w smartfonie i konwencjonalnej ręcznej soczewki oftalmoskopowej o wysokim plusie.

Fotografia dna oka smartfonem

Poznaj metodę ilościowej autofluorescencji do badania zwyrodnienia plamki żółtej związanego z wiekiem. Protokół umożliwia pomiar intensywności autofluorescencji w określonych obszarach siatkówki.

Przepływ pracy w celu ilościowego określenia zmian w autofluorescencji dna plamki zwyrodnienia plamki żółtej związanych z wiekiem (Wideo) | JoVE Journal

Przepływ pracy w celu ilościowego określenia zmian w autofluorescencji dna plamki zwyrodnienia plamki żółtej związanych z wiekiem

Przeglądaj więcej filmów