Ustalenie i potwierdzenie pourodzeniowego mysiego modelu przeciążenia objętości prawej komory

Zakres naszych badań obejmuje wrodzone wady serca i regenerację serca. Staramy się zrozumieć, w jaki sposób przeciążenie objętościowe lub ciśnieniowe wpływa na poporodowy rozwój serca i płuc, w tym kardiomiopatię, proliferację i dojrzewanie. Opracowaliśmy różne rodzaje poporodowych mysich lub szczurzych modeli wrodzonych wad serca, na przykład przeciążenia komorowego, przeciążenia ciśnieniowego i zmniejszonego przepływu krwi w płucach.

Modele te są fascynujące i mogą przyczynić się do lepszego zrozumienia wrodzonych wad serca u dzieci. Przez dziesięciolecia model AVF był używany do wywoływania przewlekłego VO serca u dorosłych zwierząt. Jednak niewiele wiadomo na temat tego modelu u myszy po urodzeniu.

W tym badaniu wygenerowano model myszy po urodzeniu VO poprzez utworzenie AVF w jamie brzusznej. Wykazano zmiany morfologiczne i hemodynamiczne prawej komory. Zacznij od przetestowania odruchów szczypania na ogonie znieczulonego szczeniaka myszy, aby potwierdzić głębokość znieczulenia.

Następnie zdezynfekuj skórę trzema naprzemiennymi rundami Betadine i 70% etanolu za pomocą sterylnych wacików. Przeciąć ścianę brzucha i otrzewną od dolnej części brzucha do wyrostka mieczykowatego, aby całkowicie odsłonić jamę otrzewnej. Użyj bawełnianych wacików, aby delikatnie odciągnąć przewód pokarmowy i pęcherz, aby uwidocznić pionową aortę brzuszną lub AA oraz żyłę główną dolną lub IVC pod zaotrzewnową.

Po obróceniu stołu operacyjnego o 90 stopni w kierunku przeciwnym do ruchu wskazówek zegara, wyreguluj powiększenie mikroskopu, aby wyraźnie view dwa poziome naczynia. Za pomocą igły do szycia 11-0 o średnicy 0,7 milimetra nakłuć przetokę skośnie od AA do IVC. Sprawdź, czy nakłucie zakończyło się sukcesem, obserwując obrzęk i mieszanie się krwi żylnej i tętniczej w IVC.

Naciśnij punkt krwawienia suchymi wacikami przez 15 sekund, aby szybko go ścisnąć. Natychmiast umieść żołądek, jelita i pęcherz z powrotem w jamie brzusznej, aby pobudzić kompresję hemostatyczną. Wykonaj ścieg kocowy na ścianie brzucha i otrzewnej za pomocą nici do szwów 9-0.

Następnie umieść mysz na ciepłej podkładce. Aby potwierdzić przetokę za pomocą ultradźwięków, zacznij od przyklejenia znieczulonej myszy w pozycji leżącej na ciepłej platformie. Następnie podłącz mysz do monitora EKG z podgrzanym żelem do ultradźwięków.

Użyj kremu do depilacji, aby zrobić depilację skóry klatki piersiowej i brzucha. Umieść przetwornik o częstotliwości 24 megaherców na linii środkowej części brzucha i obróć znacznik przetwornika do głowy myszy. Teraz przesuń platformę w dół na lewą lub prawą stronę myszy i użyj trybu B i trybu kolorowego Dopplera, aby wyświetlić widok długiej osi naczyń krwionośnych i sygnałów krwi.

Użyj trybu dopplerowskiego fali pulsacyjnej, aby zmierzyć prędkość przepływu krwi w AA, IVC i przetoce, aby potwierdzić drożność przetoki tętniczo-żylnej. Aby potwierdzić przeciążenie objętości komory, przesuń tylny koniec platformy w dół, a następnie umieść przetwornik na klatce piersiowej, obracając znacznik do prawego ramienia myszy. Użyj trybu B i trybów kolorowego dopplera, aby uwidocznić zmodyfikowany widok długiej osi przymostkowej tętnicy płucnej lub PA. Teraz, korzystając z trybu dopplerowskiego fali pulsacyjnej, zmierz sygnały przepływu krwi w PA, w tym całkę w czasie prędkości, średnicę zastawki PA, przyspieszenie tętnicy płucnej i czas wyrzutu prawej komory.

W każdym przypadku należy użyć średniej z trzech kolejnych pomiarów. Poporodowe myszy VO wykazywały akceptowalny wskaźnik przeżycia okołooperacyjnego we wczesnym okresie pooperacyjnym. Wskaźniki drożności AVF wynosiły 70% po pierwszym i dwóch tygodniach, 46,7% po miesiącu i 40% po dwóch miesiącach od operacji.

Zarówno średnica zastawki PA, jak i objętość wyrzutowa prawej komory zwiększyły się w ciągu dwóch miesięcy. Całka czasowa prędkości PA była stosunkowo wyższa w grupie VO w ciągu dwóch tygodni po operacji, ale następnie spadła. Wzorce przepływu PA zmieniały się wraz ze zmniejszającym się przyspieszeniem PA.

Ciśnienie skurczowe prawej komory znacznie wzrosło przy niedomykalności płuc dwa miesiące po operacji. Analiza mikroskopowa wykazała znacznie powiększoną prawą komorę grupy VO po AVF, podczas gdy barwienie histologiczne wykazało pogrubienie ściany wolnej od RV i powiększenie jamy RV.