Opracowanie modelu myszy z przetoką ustno-nosową
September 8th, 2023
Ten artykuł przedstawia krok po kroku procedurę tworzenia modelu myszy z przetoką ustno-nosową. Przetoka ustno-nosowa została utworzona przez zastosowanie podgrzanej kauteryzacji okulistycznej w celu uszkodzenia środkowej części podniebienia twardego, co spowodowało powstanie otworu między jamą ustną a nosową.
Nasze badania skupiły się na tym, jak ustalić stabilny i standaryzowany mysi model przetoki ustno-nosowej. Protokół ten wykazał również zmiany masy ciała, wszystkie zmiany wielkości oraz cechy histologiczne tworzenia się przetoki ustno-nosowej. Obecne eksperymentalne zmiany w tworzeniu modeli przetok ustnych nosowych to śmiertelność myszy z powodu uduszenia lub utraty krwi, a także standaryzacja wielkości rany.
Nasz protokół znacznie zmniejsza ilość krwawienia u myszy podczas operacji, w porównaniu z tradycyjnym stosowaniem stempla biopsyjnego. Zmniejsza to ryzyko uduszenia się z powodu silnego krwawienia. Dodatkowo nasza metoda eksperymentalna jest również prostsza i mniej wrażliwa technicznie.
Nasze przyszłe badania mają na celu skupienie się na obserwacji reakcji zapalnej podczas tworzenia się przetoki ustno-nosowej. Planujemy również opracowanie nowatorskich strategii zmniejszania reakcji zapalnej przy jednoczesnym wspomaganiu gojenia się ran podniebienia w celu zmniejszenia częstości występowania przetoki ustno-nosowej. Zacznij od przymocowania znieczulonej samicy myszy do piankowej deski pokrytej sterylnymi prześcieradłami.
Następnie ostrożnie przyklej mysz w pozycji leżącej na plecach do platformy chirurgicznej. Umieść dwie igły przed płaszczyzną ucha oczodołowego. Umieść za nim jeszcze dwie igły.
Następnie umieść gumkę wokół igieł i skrzyżuj siekacze, aby utrzymać otwarte usta. Użyj pęsety mikrochirurgicznej, aby podeprzeć kąciki ust. Przystąp do pobierania podgrzanej kauteryzacji okulistycznej.
Teraz umieść końcówkę kauteryzacyjną jeden milimetr od przecięcia linii środkowej podniebienia i pierwszego przedtrzonowca, aby stworzyć pełnowymiarowe uszkodzenie błony śluzowej podniebienia twardego. Usuń kauteryzację, gdy błona śluzowa wokół końcówki zmieni kolor na biały. Podgrzej kauteryzację okulistyczną do 250 stopni Celsjusza w kiełkowniku przez 10 minut.
Następnie umieść go na podniebieniu twardym i powiększ ranę wokół krawędzi. Na koniec użyj nożyczek mikrochirurgicznych, aby wyciąć nadmiar zdenaturowanej tkanki miękkiej otaczającej ranę. Następnie nałóż sterylną bawełnę, aby zatrzymać krwawienie i zapobiec uduszeniu wziewnemu myszy.
Zauważalną zmienność zaobserwowano w wielkości generowanej przetoki ustno-nosowej. Rozmiar rany wykazywał znaczne odchylenia w siódmym dniu po operacji. Znaczne zmniejszenie masy ciała myszy zaobserwowano również w siódmym dniu, czyli około 25%Analiza histologiczna przetoki ustnej nosa wykazała utratę błony śluzowej podniebienia twardego, obnażoną kość i tworzenie się przetoki ustno-nosowej.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Przegląd
Ten artykuł opisuje protokół ustanowienia stabilnego modelu mysiego przetoki oranozalnej. Metoda znacznie zmniejsza krwawienie podczas operacji, minimalizując ryzyko związane z zabiegiem.
Kluczowe elementy badania
Obszar nauki
- Neuronauki
- Modele zwierzęce
- Fizjologia jamy ustnej i nosowej
Tło
- Ustanowienie modelu mysiego przetoki oranozalnej jest kluczowe dla badania związanych z tym zmian fizjologicznych.
- Poprzednie metody prowadziły do komplikacji, takich jak uduszenie i utrata krwi.
- Standaryzacja modelu jest niezbędna dla powtarzalności w badaniach.
- Ulepszanie technik chirurgicznych może poprawić dobrostan zwierząt i wyniki eksperymentów.
Cel badania
- Opracowanie niezawodnej metody tworzenia przetoki oranozalnej u myszy.
- Ocenienie zmian wagi ciała i rozmiarów po operacji.
- Ocenienie cech histologicznych przetoki oranozalnej.
Stosowane metody
- Podgrzewany kauter okulistyczny do stworzenia przetoki oranozalnej.
- Monitorowanie zmian wagi ciała i rozmiarów u myszy.
- Analiza histologiczna formacji przetoki.
- Porównanie poziomu krwawienia z tradycyjnymi metodami biopsji.
Główne wyniki
- Nowy protokół znacznie zmniejsza krwawienie podczas operacji.
- Zmniejszone są wskaźniki śmiertelności z powodu uduszenia lub utraty krwi.
- Skutecznie dokumentowane są zmiany wagi ciała i rozmiarów.
- Zcharakteryzowane są cechy histologiczne przetoki oranozalnej.
Wnioski
- Ustanowiony protokół zapewnia bezpieczniejszą i bardziej efektywną metodę tworzenia przetoki oranozalnej u myszy.
- Standaryzacja poprawia wiarygodność wyników eksperymentalnych.
- Ten model może ułatwić dalsze badania nad stanami oranozalnymi.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Establishing a reproducible oronasal fistula (ONF) mouse model addresses a critical need for standardized preclinical systems to study palate wound healing and fistula pathogenesis. This model enables mechanistic de-risking and supports predictive confidence for therapeutic hypothesis testing in oral and craniofacial research portfolios. Reliable ONF models facilitate translational continuity from early discovery through preclinical evaluation of wound healing interventions.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables interrogation of palate wound healing mechanisms and inflammatory responses in a controlled in vivo system.
- Supports biological de-risking by providing a standardized injury model for functional target validation.
- Facilitates predictive confidence in evaluating candidate interventions for ONF closure and tissue regeneration.
Screening & Assay Development
- Provides a validated animal model for quantitative assessment of wound size and healing kinetics.
- Enables reproducible measurement of anatomical and functional ONF closure for downstream screening workflows.
- Supports assay standardization by minimizing procedural variability and mortality risk.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with disease-relevant modeling of oronasal fistula for translational biomarker exploration.
- Enables continuity from mechanistic discovery to preclinical validation of wound healing strategies.
- Supports risk-adjusted advancement of therapeutic candidates targeting oral and craniofacial tissue repair.
Pipeline & Workflow Integration
This ONF mouse model integrates into the discovery-to-preclinical continuum, supporting hypothesis testing, screening, and translational research for oral wound healing and fistula repair.
- Discovery Biology: Facilitates null hypothesis testing of wound healing pathways and inflammatory mediators.
- Screening: Provides quantitative, reproducible readouts of ONF size and healing for candidate evaluation.
- Analytics: Enables statistical comparison of intervention effects on wound closure and body weight changes.
- Translational Research: Models clinically relevant ONF pathology for preclinical assessment of novel therapies.
- Enterprise Reuse: Offers a standardized, scalable platform for repeated studies across research teams.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in palate wound healing research.
- Operational Value: Enhances reproducibility, standardization, and safety in animal model generation.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision-making and capital efficiency by enabling robust preclinical evaluation.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of wound healing and tissue repair programs.
Implementation Considerations
- Requires expertise in microsurgical techniques and animal anesthesia.
- Needs access to ophthalmologic cautery and histological analysis infrastructure.
- Demands cross-team standardization of wound size and procedural steps.
- Adaptation to other mouse strains or injury models may require protocol optimization.
- Potential limitations include variability in wound healing and body weight changes post-surgery.
