January 26th, 2024
Prezentujemy protokół wykorzystujący symulator manipulacji tuina do przeprowadzenia terapii tuina "Three-Manipulation and Three-Acupoint" dla szczurów z niewielkimi przewlekłymi urazami zwężeniowymi i oceny skutecznych punktów czasowych przeciwbólowych tuiny w ciągu 24 godzin, testując zmiany bólu poprzez analizę behawioralną i zmiany w ekspresji czynnika zapalnego za pomocą testu immunoenzymatycznego
.Nasz zakres badawczy dotyczy weryfikacji skuteczności i badania mechanizmu terapii tuina w bólu neuropatycznym. Chcemy odpowiedzieć na pytanie o skuteczność tuiny poprzez eksperymenty na zwierzętach, dostarczając naukowych dowodów na skuteczność przeciwbólową tuiny w praktyce klinicznej. Obecnie sekwencjonowanie RNA, obrazowanie wapnia i technologie biologii molekularnej są wykorzystywane do promowania dalszych badań w tej dziedzinie.
Skuteczność przeciwbólowa tuiny w ciągu 24 godzin po interwencji jest znacząco różna w różnych punktach czasowych. Stanowi to naukową podstawę do wyboru odpowiednich behawioralnych punktów czasowych i pobierania próbek do dalszej eksploracji mechanizmu molekularnego w późniejszych badaniach nad mechanizmem inicjacji analgezji tuina metodą trójelementową i trójpunktową. Protokół badawczy dodatkowo potwierdza natychmiastowe i trwałe efekty przeciwbólowe techniki Trzech Metod i Trzech Punktów Akupunkturowych oraz zapewnia dokładniejszy punkt czasowy do zbadania mechanizmu inicjacji analgezji tuina na późniejszym etapie.
W kolejnych badaniach będziemy nadal koncentrować się na badaniu mechanizmu inicjacji analgezji przez tuinę, aby dostarczyć dowodów naukowych na kliniczne leczenie tuina chorób związanych z bólem neuropatycznym. Po znieczuleniu ułóż szczura w pozycji leżącej na stole. Ogol sierść prawej okolicy stawu biodrowego i zdezynfekuj obszar jodem.
Wykonaj nacięcie skóry o długości około 0,5 do jednego centymetra wzdłuż kierunku chodzenia nerwu kulszowego i tępo oddziel warstwę mięśni, aby odsłonić pień nerwu kulszowego. W przypadku szczura z grupy tuina luźno zawiąż wchłanialny chromowy szew jelitowy wokół nerwu kulszowego, nie przerywając krążenia krwi w naczyniach pozanerwowych. W interfejsie operacyjnym komputera ustaw instrument na siłę stymulacji 4 niutonów, częstotliwość 60 razy na minutę i temperaturę 36 stopni Celsjusza.
Umieść szczura w stabilizatorze i odsłoń punkty akupunkturowe kończyn tylnych. Na ekranie komputera kliknij punkt naciskania, skubania i ugniatania w sekwencji na Aby rozpocząć, umieść szczura interweniowanego tuina na inteligentnym wykrywaczu bólu na zimnej i gorącej płycie o temperaturze powierzchni czterech stopni Celsjusza. Przykryj szczura przezroczystą plastikową klatką.
Gdy szczur zaaklimatyzuje się w plastikowej klatce, zapisuj liczbę uniesień stóp po operacyjnej stronie tylnej kończyny przez następne pięć minut. Umieść szczura na powierzchni siatki w pudełku testowym na 15 do 30 minut przed badaniem. Przesuń sondę bólu do środka prawego tylnego obszaru podeszwowego szczura i liniowo zwiększ nacisk ręką.
Gdy szczur podnosi lub liże stopy, zapisz próg wyświetlany na ekranie instrumentu. Przystosuj szczura do pudełka testowego ze szklanym dnem na 15 minut przed rozpoczęciem testu. Na instrumencie do bólu stymulacji termicznej kliknij przyciski set i kierunkowe, aby ustawić czas odcięcia na 30 sekund i intensywność na 50%, a następnie kliknij start.
Umieść sondę podczerwieni na środku prawego tylnego obszaru podeszwowego szczura. Kiedy szczur podnosi lub liże stopy, zapisz opóźnienie odruchu wycofania stopy. W analizie progu wrażliwości na zimno, w porównaniu z grupą modelową, grupa tuina wykazała znaczne zmniejszenie podnoszenia stóp sześć godzin po zabiegu.
Grupa modelowa wykazała znaczny wzrost podnoszenia stóp w porównaniu z grupą pozorowaną, co podkreśla efekt interwencji modelowej. Mechaniczny próg wycofania dla każdej podgrupy tuiny był znacznie wyższy niż w grupie modelowej. Z wyjątkiem 18 godzin po tuinie, grupa modelowa miała znacznie niższy próg mechanicznego wycofania niż grupa operacji pozorowanej.
Analiza opóźnienia termicznego wycofania wykazała znaczny wzrost natychmiast po sześciu godzinach i 18 godzinach od tuiny w porównaniu z grupą modelową. Grupa modelowa wykazała znaczny spadek w porównaniu z grupą operacji pozorowanej.
To badanie bada skuteczność terapii tuina w leczeniu bolesnych objawów neuropatycznych u szczurów z małym przewlekłym uszkodzeniem ścisku. Badania wykorzystują analizę behawioralną i enzymatyczne testy immunologiczne w celu oceny zmian w bólu i czynników zapalnych po interwencji. Kluczowe punkty czasowe dla działania przeciwbólowego są określane w ciągu 24 godzin, co zapewnia podstawę dla przyszłych badań mechanistycznych.
Precise characterization of pain modulation in neuropathic models is critical for target validation and mechanistic de-risking in analgesia discovery. This study establishes time-resolved, quantitative endpoints for tuina intervention, enabling robust hypothesis testing and translational continuity from preclinical models. The approach supports portfolio decisions by clarifying intervention windows and biological response dynamics.
This method integrates into the discovery-to-preclinical continuum by providing standardized, quantitative pain endpoints and cytokine readouts for analgesic candidate evaluation.