Name: Masaż brzucha w celu poprawy dysfunkcji motorycznej u szczurów z porażeniem mózgowym (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-08-11T13:40:00.000+00:00
Duration: 8 min 24 s
Description: Poznaj techniki masażu brzucha poprawiające funkcje motoryczne u szczurów z porażeniem mózgowym. Metoda chińskiego masażu akupunkturowego wspiera rozwój i koordynację ruchową.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Komisja Etyki Zwierząt Szpitala Jinshan, afiliowanego przy Uniwersytecie Fudan w Szanghaju, zatwierdziła to badanie. Młode szczury Sprague Dawley (SD) były hodowane w pomieszczeniu dla zwierząt SPF ze światłem od 08:00 do 20:00, ciemnością od 20:00 do 08:00, temperaturą kontrolowaną na poziomie 22 °C i wilgotnością względną w pomieszczeniu 40%-50%. Mieli oni swobodny dostęp do żywności i wody. Wszystkie czynności doświadczalne na zwierzętach są zgodne z etyką dobrostanu zwierząt doświadczalnych i przepisami dotyczącymi bezpieczeństwa doświadczalnego na zwierzętach.
1. Model zwierzęcy encefalopatii niedotlenieniowo-niedokrwiennej noworodków 21
<ol>
	<li>Losowo podziel 18 szczeniąt szczura Sprague Dawley (SD) 7 dni po urodzeniu (P7) na następujące grupy: sham (bez masażu), model i Massage (grupa model + masaż) (n = 6 dla każdej grupy).</li>
	<li>znieczulenie
	<ol>
		<li>Użyj urządzenia do znieczulenia gazem dla małych zwierząt, aby podać 5% gazu sewofluranu, dostosuj natężenie przepływu tlenu do 4 i użyj 4% frakcji indukcyjnej do znieczulenia młodych szczurów. Upewnij się, że zwierzę jest w pełni znieczulone, czekając na moment, w którym młody szczur leży na plecach, jego kończyny przestają się poruszać, nie ma reakcji na dotyk, a mięśnie rozluźniają się.</li>
		<li>Dodaj maść do oczu zwierząt domowych i krople do oczu do znieczulonych młodych szczurów, aby zapobiec wysuszeniu oczu.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Mikroskopijny proces chirurgiczny
	<ol>
		<li>Najpierw zdezynfekuj skórę szyi szczurów raz jodoforem, a następnie raz 75% etanolem (wykonaj tę procedurę trzy razy) i wykonaj podłużne nacięcie o długości ~0,5 cm na środku szyi młodych szczurów. Oddziel biernie prawą tkankę podskórną i odsłoń tętnicę szyjną wspólną.</li>
		<li>Modelowanie i masowanie grup: Ostrożnie oddziel tętnicę szyjną wspólną od nerwu błędnego (<silna klasa="xfig">Rysunek 1A). Po rozcięciu tętnicy szyjnej wspólnej należy skoagulować tętnicę szyjną wspólną za pomocą elektrycznego pistoletu do koagulacji. Po potwierdzeniu, że nie ma krwawienia, zszyj skórę warstwa po warstwie i ponownie zdezynfekuj nacięcie chirurgiczne (<silna klasa="xfig">Rysunek 1C).</li>
		<li>Grupa pozorna (bez CP, bez masażu): Oddziel tylko wspólną tętnicę szyjną bez żadnego leczenia naczyń krwionośnych. Zszyj skórę warstwa po warstwie i ponownie zdezynfekuj nacięcie chirurgiczne. Obserwując nieskrępowane pełzanie młodego szczura, umieść młodego szczura z powrotem obok matki szczura.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Dezynfekować jodem po zabiegu. Szczury, które przeszły operację, należy umieścić na podkładce izolacyjnej o temperaturze 37 °C i stale obserwować, czy rana krwawi i czy nie ma stanu zapalnego w oczach.</li>
	<li>Umieść model i grupy masujące młode szczury w otwartej komorze hipoksji i obserwuj przez 1 godzinę, aż się obudzą. 
	UWAGA: Kiedy młode szczury mogą się swobodnie czołgać, są gotowe do poddania się leczeniu hipoksji.</li>
	<li>Leczenie niedotlenienia
	<ol>
		<li>Po wyzdrowieniu ze znieczulenia młode szczury umieścić w zamkniętym urządzeniu beztlenowym w temperaturze 37 °C z 92% N2 i 8% O2 gazem (2 l / min) przez 3 godziny hipoksji. Po leczeniu hipoksyjnym umieść obudzonego młodego szczura z powrotem obok matki szczura.</li>
		<li>Zdezynfekuj narzędzia chirurgiczne i przetrzyj komorę hipoksyjną alkoholem. Po zabiegu zdezynfekuj młodego szczura jodoforem, codziennie monitoruj ranę pod kątem oznak infekcji i używaj sterylnej wyściółki. Ukończ cały proces chirurgiczny w pomieszczeniu dla zwierząt SPF i trzymaj zwierzęta w pomieszczeniu dla zwierząt SPF.</li>
		<li>Podnieś grupę modelową normalnie po pomyślnym ustanowieniu modelu bez żadnych środków interwencyjnych. Po zakończeniu modelowania poddaj grupę masażu ręcznej interwencji. 
		UWAGA: Grupa pozorowana była karmiona normalnie i nie była poddawana leczeniu hipoksji.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Umieść każdą grupę szczurów obok szczurów-matek na sterylnej i sterylizowanej w wysokiej temperaturze ściółce. Obserwuj je przez 1-2 godziny, aż matki szczurów nakarmią potomstwo szczurów. Obserwuj je codziennie, aby sprawdzić, czy rana krwawi i czy nie ma stanu zapalnego w oczach; Obserwuj, aż rana całkowicie się zagoi.</li>
</ol>
2. Parametry techniki masażu
UWAGA: Podstawowe techniki masażu obejmują uciskanie i pocieranie jako podstawowe techniki interwencji. Przed eksperymentem naukowcy skorzystali z działania testera techniki, który zebrał techniki od eksperta od masażu brzucha z Tianjin, Wang Jingui.
<ol>
	<li>Ustaw siły nacisku i tarcia odpowiednio na 6 N i 3 N22,23,24,25.</li>
</ol>
3. Manipulacja masażem
UWAGA: Upewnij się, że nacisk kciuka badacza na punkty akupunkturowe jest stabilny i długotrwały.
<ol>
	<li>Na drugi dzień po operacji (P8) wyjąć młode szczury z klatki, nie przeszkadzając matkom szczurów. W grupie masażu masuj szczury od 8 dnia urodzenia do 40 dnia.</li>
	<li>Przed masowaniem młodych szczurów lekko potrzyj ręce, aby rozgrzać je do prawie takiej samej temperatury jak skóra młodych szczurów.</li>
	<li>Postępuj zgodnie z tą sekwencją masażu: Punkty akupunkturowe kończyn → Punkty akupunkturowe brzucha → brzucha.</li>
	<li>Umieść młodego szczura w dłoni lewej ręki i delikatnie dotykaj grzbietu młodego szczura od głowy do ogona powierzchnią gwintu czterech palców przez 1 minutę, aby się uspokoił.</li>
	<li>Wykonaj następujące kroki pocierania.
	<ol>
		<li>Pocieraj brzuch prawego kciuka i palca wskazującego w przód iw tył.</li>
		<li>Pocieraj kończynę przednią, od bliższego końca do dystalnego końca przez ~30 s. Naciskaj punkty Quchi (LI11), Waiguan (SJ5) i Hegu (LI4) 10x przez 1 s za każdym razem.</li>
		<li>Pocieraj tylne nogi, od bliższego końca do dystalnego końca przez ~30 s, a następnie naciskaj punkty Yanglingquan (SP9), Zusanli (ST36), Sanyinjiao (SP6) i Taichong (LR3) 10x przez 1 s za każdym razem przez łączny okres ~5 minut.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Użyj prawego kciuka, aby nacisnąć Zhongwan (RN12), Tianshu (ST25), Guanyuan (CV4) i Qihai (CV6). Naciśnij każdy punkt akupunkturowy 10x, za każdym razem przez ~1 s, utrzymując się przez 1 min.</li>
	<li>Trzymaj młodego szczura w pozycji leżącej, a prawym kciukiem naciśnij i pocieraj punkt Zhongwan na brzuchu. Weź pępek młodego szczura jako środek i użyj kciuka, aby poruszać się zgodnie z ruchem wskazówek zegara 120x/min przez ~5 min.</li>
	<li>Na koniec użyj powierzchni nici czterech palców prawej ręki, aby delikatnie dotknąć głowy młodego szczura do jego ogona, uciszyć go, a następnie umieść go z powrotem w klatce i pozwól matce szczura go nakarmić.</li>
</ol>
4. Lokalizacja punktu akupunkturowego
UWAGA: Dla szczurów urodzonych w ciągu 2 tygodni, waga i długość szczurów są takie same jak u myszy. Dlatego użyliśmy metod masażu myszy w odpowiedniej literaturze, aby masować szczury podczas 8-15 dni szczurów24.
<ol>
	<li>Dwa tygodnie do 40 dni później traktuj szczury regularnym masażem szczurów przy użyciu następujących punktów akupunkturowych: LI11, SJ5, LI4, SP9, ST36, SP6, LR3, RN12, ST25, CV4 i CV626. 
	UWAGA: Zobacz Tabelę 1 i szczegółowe opisy lokalizacji punktów akupunkturowych u szczurów w innych miejscach26 i Rysunek 2, aby zapoznać się z konkretnymi pozycjami punktów akupunkturowych.</li>
</ol>
5. Test wagi i zachowania
<ol>
	<li>Waż młode szczury codziennie od P7 do P40.</li>
	<li>Przeprowadź eksperymenty behawioralne na równoważni na P37 do P40. Przetestuj funkcję równowagi motorycznej młodych szczurów za pomocą równoważni (35 cm długości, 1,5 cm szerokości i 100 cm wysokości).
	<ol>
		<li>Umieść młodego szczura na równoważni i pozwól mu wbiec do czarnej skrzynki umieszczonej na drugim końcu równoważni.</li>
		<li>Przeprowadź trening równoważni dla młodych szczurów na P37-P39, 3 razy dziennie i przeprowadź test na P40. Zapisz czas, w którym trzy grupy młodych szczurów przechodzą przez równoważnię i ile razy ich tylne kończyny się ślizgają (<silna klasa="xfig">Rysunek 1D). 
		UWAGA: Użyj metody duszenia dwutlenkiem węgla, aby poddać szczury eutanazji.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Chinese Massage Techniques: Enhancing Motor Function in Cerebral Palsy Rats

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Noworodkowy szczurzy model niedokrwienia i niedotlenienia jest najbardziej klasycznym modelem do badania porażenia mózgowego 27,28,29,30. Interweniowaliśmy na szczurach od8 do 40dnia, co jest w przybliżeniu równoważne ingerencji w ludzi w wieku od 3 miesięcy do 11,5 roku, czyli w złotym okresie dla wzrostui rozwoju człowieka. Wyniki wskazują, że masaż jest skuteczną metodą łagodzenia dysfunkcji CP. Wcześniejsze eksperymenty na zwierzętach wykazały, że masaż może zmniejszyć stan zapalny i poprawić funkcje motoryczne i poznawcze u młodych szczurów z CP14,32. Niektóre badania kliniczne wykazały, że masaż meridianów pleców i pęcherza moczowego poprawia funkcje motoryczne u dzieci z CP33. Wyniki te pokazują również, że masaż może skrócić czas przejścia młodych szczurów z MPD przez równoważnię i zmniejszyć liczbę poślizgnięć tylnych nóg. W ten sposób można zauważyć, że masaż brzucha może poprawić funkcje motoryczne młodych szczurów z MPD.
Tradycyjna medycyna chińska uważa, że MPD należy do pięciu opóźnionych i pięciu łagodnych objawów, przy czym podstawowym czynnikiem jest wrodzony niedobór qi nerek, a czynnikiem sprzyjającym jest nabyte osłabienie śledziony i żołądka. Nerka zarządza kością i wytwarza szpik, więc gdy nerka jest pełna qi, szpik staje się obfity, a inteligencja pozostaje normalna. Śledziona kontroluje mięśnie i kończyny, więc jeśli śledziona jest zdrowa, mięśnie będą silne, a stawy będą się swobodnie poruszać. Dlatego konieczne jest uzupełnienie śledziony i wzmocnienie nerek, poprawa funkcji przewodu pokarmowego, poruszanie kończynami i stawami oraz poprawa funkcji. Po pierwsze, teoria TCM utrzymuje, że brzuch jest korzeniem wszystkich chorób. Masaż brzucha może oczyszczać w górę iw dół, oddzielać yin i yang, usuwać stare i tworzyć nowe, wzbogacać pięć narządów wewnętrznych, wypędzać zewnętrzne zło i eliminować choroby wewnętrzne. Po drugie, badania wykazały, że dzieci z MPD mają niższą masę ciała i są podatne na niedożywienie, w tym nadmierne lub niezrównoważone spożycie, energię lub stan odżywienia 34,35,36,37. Opóźnienie wzrostu i niedożywienie są powszechne u dzieci z MPD i są bezpośrednio związane z poważniejszą dysfunkcją motoryczną37. Ryzyko niedożywienia jest ściśle związane z rokowaniem pacjentów z CP 34,38,39. Obecnie głównym obszarem badawczym masażu brzucha jest poprawa objawów żołądkowo-jelitowych, takich jak dyspepsja czynnościowa, zaparcia, biegunka i jadłowstręt u niemowląt 33,40,41,42. Ostatecznie liczne badania pokazują, że stymulacja Zhongwan, Tianshu, Guanyuan i Qihai może leczyć choroby żołądkowo-jelitowe, promować wchłanianie i poprawiać stan odżywienia 43,44,45. Punkty brzuszne mogą leczyć choroby związane z żołądkowo-jelitowym, przeczesywać mechanizm qi centralnego energetyka, uzupełniać pierwotną moc qi i promować biochemię qi i krwi. Dlatego wprowadziliśmy masaż brzucha do metody eksperymentalnej w celu poprawy dysfunkcji motorycznej u młodych szczurów z MPD.
Masaż brzucha łączy się głównie z punktami brzusznymi, uzupełnionymi punktami kończynowymi, takimi jak Quchi i Zusanli. Zewnętrzne poboczne i stawy czterech punktów akupunkturowych kończyn są połączone z narządami wewnętrznymi, a masaż brzucha stosuje się w celu osiągnięcia najlepszego efektu terapeutycznego. Z jednej strony eksperymentalne badania na zwierzętach pokazują, że akupunktura Zusanli nowonarodzonych szczurów z niedotlenieniem niedokrwiennym CP może poprawić funkcję młodych szczurów z CP46. Z drugiej strony, badania kliniczne pokazują, że akupunktura w Hegu47i inne punkty akupunkturowe mogą skutecznie wspomagać rozwój CP. Quchi i Zusanli to punkty akupunkturowe w jelicie grubym Yang-Ming meridian dłoni48 i meridian Foot-Yang-Ming na somatostatynie49, które są najczęściej stosowanymi punktami akupunkturowymi w klinicznym leczeniu udaru mózgu w Chinach w celu poprawy paraliżu kończyn50, Lokal mieszkalny 51. Ponadto Quchi i Zusanli są punktami zbiegu odpowiednio meridianów jelita grubego i żołądka. Od tego momentu meridian qi dociera do wnętrzności i jest połączony z górną i dolną częścią oraz meridianami i pobocznymi. Ponadto akupunktura i moksowanie oraz masaż wykazały lepszy wpływ na poprawę stanu dzieci z MPD w wynikach badań klinicznych52. Podsumowując, terapia TCM może pomóc w poprawie dysfunkcji pacjentów z MPD.
Chociaż przeprowadzono wiele badań na temat tego, jak masaż może poprawić CP, różnorodność technik masażu stała się ogromnym wyzwaniem. Istnieje wiele szkół masażu, a różnice w sile, kierunku i innych czynnikach stanowią liczne wyzwania. Nauczyliśmy się różnych metod masażu i poznaliśmy zestaw prostych i łatwych technik masażu. Nie możemy jednak symulować różnych technik masażu. Po drugie, czas masażu jest ważnym etapem w rozwoju młodych szczurów. Jego waga i szybki wzrost różnych układów organizmu prowadzą do ciągłej zmiany siły naszych palców u szczurów na różnych etapach. Należy kontynuować wysiłki w celu zbadania stabilności masażu.

Porażenie mózgowe (CP) jest chorobą o wysokim wskaźniku niepełnosprawności i zachorowalności. Badania epidemiologiczne nad porażeniem mózgowym pokazują, że 3-5 niemowląt ma porażenie mózgowe na każde 1000 niemowląt1. Typowymi objawami porażenia mózgowego są utrzymujące się zaburzenia rozwoju motoryki i postawy ośrodkowej2, ograniczenie aktywności sensory3, percepcja, poznanie4, communication5, zaburzenia zachowania, epilepsja i wtórne problemy mięśniowo-szkieletowe1. Jak dotąd nie ma lekarstwa na tę chorobę powodującą niepełnosprawność na całe życie. Obecne metody leczenia obejmują terapię ruchową6, hydroterapię7, funkcjonalną stymulację elektryczną8, egzoszkielet mięśniowy9, terapię komórkami krwi pępowinowej10, wstrzyknięcie toksyny botulinowej i chirurgię11. Jednak rehabilitacja kliniczna trwa długo i pochłania dużo energii, a rehabilitacja wymaga aktywnej współpracy ze strony pacjentów, co utrudnia jej odtworzenie w modelach zwierzęcych. Operacja ma ograniczenia, wskazania i nieodwracalność. Leki doustne mają słabą skuteczność w leczeniu funkcji motorycznych u dzieci z porażeniem mózgowym12. Terapia egzoszkieletem mięśniowym i terapia krwią pępowinową wiążą się z wysokimi kosztami ekonomicznymi i trudno jest sobie na nie pozwolić, co sprawia, że tak ważne jest znalezienie odpowiednich strategii leczenia.
Masaż jest nieinwazyjną, wolną od skutków ubocznych, wysoce akceptowaną i opłacalną metodą leczenia dzieci. Udowodniono, że zarówno w badaniach klinicznych13, jak i w eksperymentach na zwierzętach14 poprawia dysfunkcję CP. Tradycyjna medycyna chińska uważa, że masaż może poprawić dysfunkcję CP poprzez regulację narządów i odblokowanie meridianów15. Jako skuteczna metoda leczenia TCM, masaż wymaga nowoczesnych metod badań medycznych, aby wyjaśnić jego mechanizm działania, aby promować go na świecie. Istnieją jednak obiektywne ograniczenia badawcze i etyczne w badaniu odpowiednich mechanizmów u dzieci z MPD. Dlatego badanie odpowiednich mechanizmów masażu w celu poprawy CP u zwierząt jest wygodniejsze. Chociaż zwierzęta różnią się od dzieci, badanie wpływu masażu na zwierzęta wymaga przestrzegania podstawowych teorii TCM. Z perspektywy zoologii klinicznej i eksperymentalnej odtworzymy tę technologię z ciała ludzkiego do ciała zwierzęcia, aby zbadać skuteczność masażu, co pomoże promować stosowanie terapii masażem.
Po pierwsze, tradycyjna medycyna chińska uważa, że CP należy do objawów "pięciu spóźnień" i "pięciu miękkości"16. Przyczynami MPD są wrodzona dysfunkcja płodu, niewydolność wątroby i nerek, niewystarczająca esencja i qi lub nabyte niedobory żywieniowe15. Nerka dominuje we wzroście, rozwoju lub regeneracji i naprawie ludzkich narządów i tkanek, a substancje te mają kluczowe znaczenie dla wzrostu, rozwoju, naprawy tkanek i zmartwychwstania organizmu. Niezbędna Qi nerki jest podstawą wzrostu i rozwoju. Niewystarczająca ilość esencji nerkowej może prowadzić do niewydolności szpiku kostnego, zaburzeń qi i krwi oraz braku odżywiania narządów wewnętrznych ciała, mięśni i kości. Dzieci z MPD są podatne na opóźniony wzrost i rozwój, zmniejszoną ruchomość stawów kończyn i zwiększone napięcie mięśni. Ponadto długotrwała choroba może prowadzić do nadmiernego niedoboru i zastoju krwi, powodując niedrożność meridianów, co prowadzi do niepełnosprawności intelektualnej, powolnej reakcji, zaburzeń motorycznych, niejednoznaczności językowej, osłabienia połykania i objawów ślinotokowania, takich jak zaburzenia ruchu kończyn.
Śledziona rządzi krążeniem i transformacją, służąc jako źródło qi i biochemii krwi oraz podstawa nabytych zdolności. Ludzkie meridiany łączące wnętrzności, ramiona i nogi to ścieżki, które krążą w qi i krwi, komunikują się w górę i w dół oraz regulują yin i yang. Masowanie meridianu Ren może poprawić funkcję nerek oraz regulować qi i krew. Zastosowanie punktów akupunkturowych na meridian śledziony stopy Tai-Yin, mełudian żołądka stopy Yang-Ming i mełudian jelita grubego ręki Yang-Ming w technikach masażu poprawia funkcjonowanie śledziony i żołądka, co pomaga promować krążenie Qi i krwi. Masaż wykorzystuje meridiany, określone części i punkty akupunkturowe, aby zapewnić łagodną stymulację fizyczną ciała dziecka, powodując reaktywne zmiany od powierzchni do wewnątrz i od zewnątrz do wewnątrz, poprawiając w ten sposób miejscowe i ogólne krążenie krwi, przywracając normalną pobudliwość i hamowanie mózgu oraz osiągając odpowiednią równowagę w trzewnej i tkankowej funkcji krwi. Zgodnie z tą teorią stosujemy głównie masaż na akupunkturach takich jak brzuch, Zhongwan (RN12), Tianshu (ST25), Guanyuan (CV4) i Qihai (CV6). Masaż brzucha może poprawić objawy kliniczne u dzieci z CP17,18,19, i jest wysoce prawdopodobne, że będzie sprzyjać naprawie uszkodzeń mózgu poprzez ścieżkę mózg-jelita20. Ponieważ śledziona i żołądek są podstawą rozwoju poporodowego, mogą wspomagać regenerację po urazach mózgu poprzez wzmacnianie śledziony, korzystnie wpływając na żołądek oraz uzupełniając qi i krew.
Powtórzyliśmy tę technikę na szczurach, aby jak najbardziej symulować interwencję TCM na CP i stwierdziliśmy, że masaż brzucha może poprawić dysfunkcję szczurów CP. Podsumowując, przedstawiamy zestaw metod badania masażu brzucha w celu zbadania odpowiednich mechanizmów poprawy CP poprzez masaż brzucha. Ponieważ istnienie wielu gatunków masażu bardzo utrudnia badanie mechanizmów masażu, konieczna jest standaryzacja metod masażu.

<table><tbody><tr><td>Maszyna do znieczulenia zwierząt</td><td>RWD OF SCIENCE</td><td>R550</td><td></td></tr><tr><td>Rękawice eksperymentalne</td><td>Sri Trang Gloves (Thailand) Co., Ltd</td><td>0169</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD OF SCIENCE</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>Rat</td><td>Shanghai Jihui Experimental Animal Breeding Co., Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tester manipulacyjny YF-3</td><td>Opracowany wspólnie przez Uniwersytet Fudan w Szanghaju i Uniwersytet Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Szanghaju</td><td>Numer patentu Chińskiej Republiki Ludowej</td><td></td> (ZL200710187403.1)</tr></tbody></table>

masaż brzucha w celu poprawy dysfunkcji motorycznej u szczurów z porażeniem mózgowym

Abdominal Massage to Improve Motor Dysfunction in Rats with Cerebral Palsy

Porażenie mózgowe (CP) jest chorobą o wysokim wskaźniku niepełnosprawności i zachorowalności. Objawami klinicznymi mózgowego porażenia dziecięcego są dysfunkcje ruchowe i nieprawidłowy rozwój postawy, którym często towarzyszą zaburzenia funkcji poznawczych. Masaż, tradycyjna terapia medycyny chińskiej, może koordynować Zang i Fu, regulować Qi i krew, sprawiać, że wnętrzności działają płynniej i uspokajać Yin i Yang. Co więcej, jest to skuteczna metoda leczenia CP w warunkach klinicznych. Ten artykuł podsumowuje zestaw prostych i ustandaryzowanych manipulacji masażem dla młodych szczurów z MPD, który jest łatwy do naśladowania. Procedura jest następująca: najpierw masaż czterech punktów akupunkturowych kończyn, w tym Quchi (LI11) i Zusanli (ST36); drugi masaż brzucha akupunkturów Zhongwan (RN12), Tianshu (ST25), Guanyuan (CV4) i Qihai (CV6); i wreszcie masaż brzucha szczurów. Ten zestaw metod masażu znacznie poprawił funkcje motoryczne młodych szczurów z MPD i jest prosty, ustandaryzowany i łatwy do naśladowania. Dostosowaliśmy ten zestaw metod manipulacji w modelach zwierzęcych, aby promować internacjonalizację i standaryzację masażu.

Po zakończeniu modelowania niedokrwienia i niedotlenienia27,28,29,30 (eksperyment przeprowadzono w pomieszczeniu dla zwierząt SPF), mózgi młodych szczurów pobrano po 48 h przeżycia w celu oceny obrzęku, rozrzedzenia i innych zjawisk, jak pokazano na Rysunku 3. Porównano zmiany masy ciała młodych szczurów w grupach pozornych (sham) i masażowej z grupą modelową (Tabela uzupełniająca S1). Przyrost masy ciała w grupie modelowej był wolniejszy niż w grupie masażowej (Rysunek 4), co wykazało, że masaż poprawia wzrost i rozwój młodych szczurów z CP. Wyniki testu na belce równowagi wykazały, że grupa modelowa potrzebowała więcej czasu na przejście przez belkę niż grupy pozorne i masażowa (Rysunek 5A oraz Tabela uzupełniająca S2).
Ponadto liczba poślizgów kończyn tylnych w grupie modelowej istotnie wzrosła w porównaniu z grupą sham (Tabela uzupełniająca S3). Z kolei liczba poślizgów kończyn tylnych uległa istotnemu zmniejszeniu w grupie masażowej w porównaniu z grupą modelową (Rycina 5B oraz Tabela uzupełniająca S3). Interwencja w postaci masażu istotnie poprawiła wzrost i funkcje motoryczne szczurów z CP.
<img alt="Ustawienie eksperymentu na gryzoniach: obsługa i procedury chirurgiczne; dłonie w rękawiczkach; narzędzie do oceny behawioralnej." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65625/65625fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Proces modelowania zwierzęcego i powiązane testy behawioralne. (A) Odizolowanie nerwu błędnego podczas modelowania. (B) Masaż 5-tygodniowych szczurów. (C) Szczury po zakończeniu niedokrwienia. (D) Test równoważności na belce. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Schemat akupunktury szczura z zaznaczonymi punktami RN12, CV6, CV4, ST36, LI11 dla badania terapeutycznego" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65625/65625fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2: Wykaz niektórych punktów akupunkturowych związanych z masażem brzucha26. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625fig02large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Disekcja mózgu, dwa oznakowane preparaty na szkiełku przedmiotowym, badanie anatomiczne, przygotowanie do mikroskopii." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65625/65625fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3: Obrzęk po jednej stronie mózgu 48 h po ustanowieniu modelu. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Wykres przyrostu masy ciała w czasie; wykres liniowy porównujący grupy: sham, model oraz masażu; trendy wzrostu." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65625/65625fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 4"> 
Rysunek 4: Wpływ terapii masażem na masę ciała. Średnią masę ciała młodych szczurów (n = 6) mierzono od P7 do P40, a interwencję w postaci niedotlenienia i niedokrwienia przeprowadzono w dniu P7. Po modelowaniu HIE tempo przyrostu masy ciała w grupie modelowej uległo znacznemu obniżeniu, a terapia masażem istotnie je poprawiła (p &lt; 0.05). Dane przedstawiono jako średnia ± SD; #p &lt; 0.05 grupa masażu w porównaniu z grupą modelową. *p &lt; 0.001 grupa modelowa w porównaniu z grupą sham. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625fig04large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Wyniki testu z belką; wykres czasu i poślizgów; grupy: sham, model, masaż; dane z badania behawioralnego." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65625/65625fig05.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 5"> 
Rysunek 5: Wpływ masażu na dysfunkcje motoryczne u szczurów z porażeniem mózgowym. (A) Czas potrzebny szczurom na przejście przez belkę (n = 6). (B) Liczba poślizgów kończyn tylnych szczurów. Na podstawie wyników z Rysunku 4A,B, sprawność motoryczna w grupie z masażem była istotnie lepsza niż w grupie modelowej (p &lt; 0.05). Dane przedstawiono jako średnia ± SD; *p &lt; 0.001 Grupa modelowa w porównaniu z grupą sham. #p &lt; 0.01 Grupa z masażem w porównaniu z grupą modelową. **p &lt; 0.0001 Grupa modelowa w porównaniu z grupą sham. ##p &lt; 0.0001 Grupa z masażem w porównaniu z grupą modelową. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625fig05large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>LI11</td>
			<td colspan="5">Wewnętrzne wgłębienie mięśnia prostownika promieniowego nadgarstka oraz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SJ5</td>
			<td colspan="5">zewnętrzne wgłębienie łokcia 
			w zagłębieniu promieniowo-łokciowym, w punkcie 5/6 od strony dystalnej na linii wyimaginowanej</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LI4</td>
			<td colspan="5">linia łącząca nadgarstek z łokciem, tylna w stosunku do prostownika 
			wspólne ścięgno mięśni palców</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP9</td>
			<td colspan="5">na pierwszym mięśniu międzykostnym grzbietowym, przyśrodkowo w stosunku do środka drugiego 
			kość śródręcza, w przedniej części stopy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ST36</td>
			<td colspan="5">w zagłębieniu poniżej kłykcia przyśrodkowego kości piszczelowej, 
			między kością piszczelową a mięśniem brzuchatym łydki</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>SP6</td>
			<td colspan="5">w punkcie odpowiadającym proksymalnej jednej piątej linii prowadzącej od ST35 do przedniej 
			bok zagięcia kostki</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LR3</td>
			<td colspan="5">w punkcie proksymalnym dystalnej jednej piątej na linii wyimaginowanej 
			połączenie SP9 z kostką przyśrodkową stawu skokowego</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CV4</td>
			<td colspan="5">na końcu proksymalnym wgłębienia między pierwszym a drugim 
			kości śródstopia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ST25</td>
			<td colspan="5">w punkcie 3/5 długości linii pośrodkowej brzusznej łączącej 
			od pępka do guzka łonowego</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CV6</td>
			<td colspan="5">bocznie od pępka, w połowie odległości między pępkiem a linią sutków 
			w punkcie 3/10 wzdłuż linii środkowej brzusznej, łączącym 
			od pępka do guzka łonowego</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Położenie anatomiczne poszczególnych punktów akupunkturowych26.
Tabela uzupełniająca S1: Surowe dane dotyczące masy wszystkich trzech grup szczurów. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625_Supp%20Table%20S1%20weight.xls" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać ten plik.</a>
Tabela dodatkowa S2: Surowe dane dotyczące czasu przejścia przez belkę równoważną dla wszystkich trzech grup szczurów. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625_Supp%20Table%20S2%20Time%20%20to%20cross%20%20the%20%20beam.xls" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać ten plik.</a>
Tabela uzupełniająca S3: Surowe dane dotyczące poślizgów kończyn tylnych we wszystkich trzech grupach szczurów. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65625/65625_Supp%20Table%20S3%20Number%20%20of%20slips%20of%20the%20hind%20%20limbs.xls" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać ten plik.</a>

Tutaj prezentujemy zestaw manipulacji masażem w szczurzym modelu porażenia mózgowego, które mogą znacznie poprawić funkcje motoryczne szczurów z porażeniem mózgowym.

Masaż brzucha w celu poprawy dysfunkcji motorycznej u szczurów z porażeniem mózgowym

Cerebral palsy (CP) is a disease with a high disability rate and morbidity. The clinical symptoms of cerebral palsy are motor dysfunction and abnormal ...

Przedstawiliśmy normalne techniki masażu mające na celu złagodzenie objawów porażenia mózgowego u młodych szczurów. Obecnie istnieje niewiele badań na zwierzętach dotyczących stosowania terapii masażem w celu złagodzenia objawów porażenia mózgowego. Znaleźliśmy jednak obiecujące wyniki masażu brzucha u młodych szczurów, które mogą poprawić ich zdolności manipulacyjne.Przeprowadzono ograniczone badania nad tym, w jaki sposób masaż może poprawić porażenie mózgowe. Ustaliliśmy jednak modele zwierzęce i techniki masażu, które mogą ułatwić przyszłe badania nad mechanizmem masażu w porażeniu mózgowym. Tradycyjna terapia ma kluczowe znaczenie w przypadku porażenia mózgowego.Badanie odpowiedniego mechanizmu po ustabilizowaniu technik masażu na zwierzętach może posunąć naprzód badania. Masaż chiński konkurencyjnie wpływa na wzrost i rozwój porażenia mózgowego, dlatego skupimy się na metodzie masażu chińskiego w porażeniu mózgowym. Zacznij od podzielenia 18 samców szczura Sprague Dawley siedem dni po urodzeniu na trzy grupy: pozorowane, modelowane i masujące.Nałóż maść do oczu i krople do oczu zwierząt domowych na znieczulone szczenięta, aby zapobiec suchości oczu. Zdezynfekuj skórę szyi szczurów jodoforem, a następnie 75% etanolem, a następnie wykonaj podłużne nacięcie o długości około 0,5 centymetra na środku szyi młodego szczura. Ostrożnie oddziel prawą tkankę podskórną, odsłaniając wspólną tętnicę szyjną.W grupach modelowych i masujących oddziel tętnicę szyjną wspólną i nerw błędny. Koagulować tętnicę szyjną wspólną za pomocą elektrycznego pistoletu do koagulacji. Po potwierdzeniu, że nie ma krwawienia, zszyj skórę warstwa po warstwie i ponownie zdezynfekuj nacięcie chirurgiczne.W przypadku grupy pozorowanej należy oddzielić wspólną tętnicę szyjną bez leczenia. Zszyj skórę warstwa po warstwie, a następnie zdezynfekuj nacięcie chirurgiczne. Gdy młody szczur będzie pełzał bez ograniczeń, umieść go obok matki.Po zdezynfekowaniu operowanego modelu i grupy masażu szczurów, umieść je na podkładce izolacyjnej o temperaturze 37 stopni Celsjusza i konsekwentnie monitoruj pod kątem oznak krwawienia z rany lub zapalenia oka. Umieść młode szczury w otwartej komorze do hipoksji i obserwuj przez godzinę, aż odzyskają przytomność. Po wyzdrowieniu ze znieczulenia przenieś młode szczury do zamkniętego urządzenia do niedotlenienia na okres niedotlenienia wynoszący trzy godziny.Po leczeniu hipoksyjnym zwróć przytomnego młodego szczura do jego matki. Następnie zdezynfekuj narzędzia chirurgiczne i wyczyść komorę hipoksyjną alkoholem. Po operacji oczyść młodego szczura jodoforem, aby zapobiec infekcji.Codziennie monitoruj ranę pod kątem oznak infekcji i w razie potrzeby stosuj sterylną wyściółkę. Po pomyślnym ustaleniu modelu utrzymuj grupę modelową w normalnych warunkach i zastosuj ręczną interwencję w grupie masującej. Następnie umieść każdą grupę szczurów obok matek szczurów na sterylnej i wysokotemperaturowej ściółce i monitoruj je przez jedną do dwóch godzin, aż matki szczurów nakarmią potomstwo.Wykonuj codzienne obserwacje, aby sprawdzić, czy nie ma krwawienia w miejscu rany i czy nie ma oznak zapalenia oka, aż do całkowitego zagojenia się rany. Aby rozpocząć manipulację masażem, w modelu szczura z porażeniem mózgowym najpierw ustaw pożądane siły nacisku i pocierania. Po indukcji encefalopatii niedotlenieniowo-niedokrwiennej na drugi dzień ostrożnie wyjmij młode szczury z grupy masującej z klatki, przy minimalnym zakłóceniu matek szczurów.Przed masażem rozgrzej dłonie, lekko je pocierając, aby dopasować je do temperatury skóry młodych szczurów. Ułóż młodego szczura wygodnie w dłoni lewej ręki. Delikatnie głaszcz grzbiet szczura od głowy do ogona gwintowaną powierzchnią czterech palców przez minutę, aby go uspokoić.Następnie pocieraj brzuch prawego kciuka i palca wskazującego w przód iw tył. Masuj kończynę przednią od bliższego do dystalnego końca przez około 30 sekund. Wywieraj nacisk na punkty Quchi, Waiguan i Hegu 10 razy, po jednej sekundzie każdy.Następnie pocieraj tylne nogi, zaczynając od bliższej, do dystalnego końca przez około 30 sekund, naciśnij punkty Yanglingquan, Zusanli, Sanyinjiao i Taichong 10 razy, przez jedną sekundę, z których każdy trwa w sumie około pięciu minut. Następnie, używając prawego kciuka, naciśnij Zhongwan, Tianshu i Guanyuan 10 razy, przez około jedną sekundę każdy, przy czym cały proces trwa jedną minutę. Teraz przytrzymaj młodego szczura w pozycji leżącej i naciskaj prawym kciukiem na punkt Zhongwan znajdujący się na brzuchu.Trzymaj pępek szczura jako środek i obracaj kciuk 120 razy na minutę przez około pięć minut w kierunku zgodnym z ruchem wskazówek zegara. Używając czterech palców prawej ręki, delikatnie pogłaszcz szczura od głowy do ogona, używając nitkowatej powierzchni, aby go uspokoić. Gdy się uspokoi, umieść młodego szczura z powrotem w klatce i pozwól matce go nakarmić.Po okresie od dwóch tygodni do 40 dni stosuj regularną terapię masażem szczurów do wszystkich pokazanych wcześniej punktów akupunkturowych. Następnie waż młode szczury codziennie od 7 do 40 dnia. Umieść każdego młodego szczura na równoważni, kierując go w stronę czarnego pudełka na przeciwległym końcu.Przeprowadź trening na równoważni dla tego przedmiotu w dniach od 37 do 39, trzy razy dziennie, a test końcowy w 40 dniu. Zapisz czas potrzebny każdemu szczurowi na przejście przez równoważnię i częstotliwość ślizgania się kończyn tylnych. Po modelowaniu niedokrwienia i niedotlenienia tempo wzrostu masy ciała w grupie modelowej znacznie się zmniejszyło.Terapia masażem znacznie go poprawiła, sugerując, że masaż poprawia wzrost i rozwój młodych szczurów z porażeniem mózgowym. Wyniki testu równoważni wykazały, że grupa modelowa potrzebowała więcej czasu, aby przejść przez belkę niż grupy pozorowane i masujące. Natomiast liczba poślizgnięć kończyn tylnych istotnie zmniejszyła się w grupie masującej w porównaniu z grupą modelową.

abdominal-massage-to-improve-motor-dysfunction-rats-with-cerebral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

To badanie ilustruje wpływ selektywnej manipulacji kręgosłupa na wzrost i rozwój młodych szczurów z porażeniem mózgowym, kładąc nacisk na specyficzną procedurę i standardowy protokół. W celu oceny protokołu wykonano pomiar masy ciała, test Rotarod, ocenę usterki stopy, inne testy behawioralne i wykrywanie hormonu wzrostu.

Wspomaganie rozwoju i wzrostu niemowląt szczurów z porażeniem mózgowym za pomocą selektywnych manipulacji kręgosłupa

To badanie wprowadza urządzenie do masażu brzucha dla myszy, które naśladuje masaż manualny, jednocześnie minimalizując stres i uszkodzenia tkanek. Urządzenie znacznie obniża poziom glukozy we krwi, poprawia metabolizm lipidów i zwiększa wrażliwość na insulinę u myszy z cukrzycą typu 2, oferując obiecujące, nieinwazyjne podejście terapeutyczne o potencjale klinicznym.

Fiksacja i metoda operacyjna masażu brzucha u myszy z cukrzycą typu 2

Opisano przygotowanie ostrych skrawków mózgu z izolowanych struktur hipokampa oraz jednoczesne rejestracje elektrofizjologiczne astrocytów i neuronów w stratum radiatum podczas stymulacji kolaterali Schaffera. Zaprezentowano farmakologiczną izolację prądów transporterów potasu i glutaminianu w astroglei.

Podwójne rejestracje elektrofizjologiczne odpowiedzi astroglialnych i neuronalnych wywołanych synaptycznie w ostrych skrawkach hipokampa

Ogólnym celem tego protokołu jest dokładne dopasowanie objętości obrazów rezonansu magnetycznego (MRI) do przekrojów histologicznych poprzez tworzenie dostosowanych drukowanych w 3D uchwytów na mózg i slicerów.

Wykorzystanie technologii druku 3D do połączenia rezonansu magnetycznego z histologią: protokół sekcji mózgu

Klasyczne warunkowanie (ECC) zostało użyte do oceny zależnego od hipokampa uczenia się asocjacyjnego u dorosłych szczurów, którym podawano wysokie stężenie (11,9% v/v) alkoholu podczas wczesnego rozwoju mózgu noworodka. Ogólnie rzecz biorąc, procedury ECC są solidnymi narzędziami diagnostycznymi do wykrywania dysfunkcji mózgu w wielu środowiskach psychologicznych i biomedycznych.

Zastosowanie klasycznego warunkowania śladowego mrugnięcia okiem do oceny dysfunkcji hipokampa w szczurzym modelu zaburzeń ze spektrum alkoholowych płodów

Łagodna hipoperfuzja wewnątrzmaciczna została wywołana przez zwężenie tętnicy z metalowymi mikrocewkami owiniętymi wokół macicy i tętnic jajnikowych u szczurów w 17 dniu embrionalnym. Procedura ta spowodowała hipoperfuzję prenatalną i wewnątrzmaciczne ograniczenie wzrostu.

Szczurzy model łagodnej hipoperfuzji wewnątrzmacicznej ze zwężeniem mikrocewki

Przedstawiamy protokół do indukowania i wykrywania CMH spowodowanych wstrzyknięciem LPS u szczurów Sprague-Dawley, który może być wykorzystany w przyszłych badaniach nad patogenezą CMH.

Podostre mikrokrwotoki mózgowe wywołane wstrzyknięciem lipopolisacharydu u szczurów

Przedstawiamy protokół do oceny równowagi między uwalnianiem glutaminianu a klirensem w pojedynczych synapsach glutaminergicznym korowo-prążkowych w ostrych wycinkach od dorosłych myszy. Protokół ten wykorzystuje czujnik fluorescencyjny iGluu do wykrywania glutaminianu, kamerę sCMOS do akwizycji sygnału oraz urządzenie do ogniskowego oświetlenia laserowego.

Wskaźniki uwalniania i wychwytu glutaminianu w pojedynczych synapsach w ostrych wycinkach mózgu od myszy normalnych i myszy z chorobą Huntingtona

Wprowadzamy metodę analizy kinematycznej, która wykorzystuje trójwymiarowy aparat do przechwytywania ruchu zawierający cztery kamery i oprogramowanie do przetwarzania danych do przeprowadzania ocen funkcjonalnych podczas podstawowych badań z udziałem modeli gryzoni.

Analiza kinematyczna 3D do oceny funkcjonalnej w szczurzym modelu uszkodzenia nerwu kulszowego

Przedstawiony tutaj protokół pokazuje technikę tworzenia modelu uszkodzenia mózgu u gryzoni. Opisana tutaj metoda wykorzystuje promieniowanie laserowe i celuje w korę ruchową.

Laserowe uszkodzenie mózgu w korze ruchowej szczurów

Poznaj techniki masażu brzucha poprawiające funkcje motoryczne u szczurów z porażeniem mózgowym. Metoda chińskiego masażu akupunkturowego wspiera rozwój i koordynację ruchową.

Masaż brzucha w celu poprawy dysfunkcji motorycznej u szczurów z porażeniem mózgowym

Przeglądaj więcej filmów