Name: Pobieranie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej bocznej u szczurów podczas zapisów EEG (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-09-01T13:40:00.000+00:00
Duration: 10 min 46 s
Description: Poznaj metodę pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej u szczurów podczas zapisów EEG. Technika ta umożliwia identyfikację biomarkerów epilepsji bez wywoływania stresu u zwierząt.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie zostało wsparte grantem z Programu Prac Unii Europejskiej Horyzont 2020 (zaproszenie H2020-FETOPEN-2018-2020) na podstawie umowy o grant 964712 (PRIME; dla M. Simonato).

Cerebrospinal Fluid and Blood Withdrawal from Rats with Concurrent EEG Recording

<ol><li>Hanin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrospinal+fluid+and+blood+biomarkers+of+status+epilepticus%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Cerebrospinal fluid and blood biomarkers of status epilepticus.</a> Epilepsia. 61 (1), 6-18 (2020).</li>
<li>Pitkänen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+the+development+of+biomarkers+for+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet+Neurology%22%5BJournal%5D)">Advances in the development of biomarkers for epilepsy.</a> The Lancet Neurology. 15 (8), 843-856 (2016).</li>
<li>Dlugos, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+Absence+Epilepsy+Study+Team+%282013%29.+Pretreatment+EEG+in+childhood+absence+epilepsy%3A+associations+with+attention+and+treatment+outcome%5BTitle%5D)+AND+%22Neurology%22%5BJournal%5D)">Childhood Absence Epilepsy Study Team (2013). Pretreatment EEG in childhood absence epilepsy: associations with attention and treatment outcome.</a> Neurology. 81 (2), 150-156 (2013).</li>
<li>Lorenzo, N. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intractable+frontal+lobe+epilepsy%3A+pathological+and+MRI+features%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+research%22%5BJournal%5D)">Intractable frontal lobe epilepsy: pathological and MRI features.</a> Epilepsy research. 20 (2), 171-178 (1995).</li>
<li>van Dellen, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epilepsy+surgery+outcome+and+functional+network+alterations+in+longitudinal+MEG%3A+a+minimum+spanning+tree+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">Epilepsy surgery outcome and functional network alterations in longitudinal MEG: a minimum spanning tree analysis.</a> NeuroImage. 86, 354-363 (2014).</li>
<li>Shah, A. K., Mittal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Invasive+electroencephalography+monitoring%3A+Indications+and+presurgical+planning%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Indian+Academy+of+Neurology%22%5BJournal%5D)">Invasive electroencephalography monitoring: Indications and presurgical planning.</a> Annals of Indian Academy of Neurology. 17 (Suppl 1), S89-S94 (2014).</li>
<li>Whiting, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+the+effectiveness+and+cost-effectiveness+of+neuroimaging+assessments+used+to+visualise+the+seizure+focus+in+people+with+refractory+epilepsy+being+considered+for+surgery%5BTitle%5D)+AND+%22Health+technology+assessment%22%5BJournal%5D)">A systematic review of the effectiveness and cost-effectiveness of neuroimaging assessments used to visualise the seizure focus in people with refractory epilepsy being considered for surgery.</a> Health technology assessment. 10 (4), 1-iv (2006).</li>
<li>Lenkov, D. N., Volnova, A. B., Pope, A. R., Tsytsarev, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advantages+and+limitations+of+brain+imaging+methods+in+the+research+of+absence+epilepsy+in+humans+and+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neuroscience+methods%22%5BJournal%5D)">Advantages and limitations of brain imaging methods in the research of absence epilepsy in humans and animal models.</a> Journal of neuroscience methods. 212 (2), 195-202 (2013).</li>
<li>Leach, J. P., Stephen, L. J., Salveta, C., Brodie, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+electroencephalography+%28EEG%29+for+epilepsy%3F+The+relative+usefulness+of+different+EEG+protocols+in+patients+with+possible+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neurology%2C+neurosurgery%2C+and++psychiatry%22%5BJournal%5D)">Which electroencephalography (EEG) for epilepsy? The relative usefulness of different EEG protocols in patients with possible epilepsy.</a> Journal of neurology, neurosurgery, and psychiatry. 77 (9), 1040-1042 (2006).</li>
<li>Huppertz, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Localization+of+interictal+delta+and+epileptiform+EEG+activity+associated+with+focal+epileptogenic+brain+lesions%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroImage%22%5BJournal%5D)">Localization of interictal delta and epileptiform EEG activity associated with focal epileptogenic brain lesions.</a> NeuroImage. 13 (1), 15-28 (2001).</li>
<li>Linder, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+between+dried+blood+spot+and+plasma+sampling+for+therapeutic+drug+monitoring+of+antiepileptic+drugs+in+children+with+epilepsy%3A+A+step+towards+home+sampling%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+biochemistry%22%5BJournal%5D)">Comparison between dried blood spot and plasma sampling for therapeutic drug monitoring of antiepileptic drugs in children with epilepsy: A step towards home sampling.</a> Clinical biochemistry. 50 (7-8), 418-424 (2017).</li>
<li>Wegner, I., Wilhelm, A. J., Lambrechts, D. A., Sander, J. W., Lindhout, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+oral+contraceptives+on+lamotrigine+levels+depends+on+comedication%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+neurologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Effect of oral contraceptives on lamotrigine levels depends on comedication.</a> Acta neurologica Scandinavica. 129 (6), 393-398 (2014).</li>
<li>Palmio, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CSF+and+plasma+adipokines+after+tonic-clonic+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22Seizure%22%5BJournal%5D)">CSF and plasma adipokines after tonic-clonic seizures.</a> Seizure. 39, 10-12 (2016).</li>
<li>Hogg, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Elevation+in+plasma+tRNA+fragments+precede+seizures+in+human+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Investigation%22%5BJournal%5D)">Elevation in plasma tRNA fragments precede seizures in human epilepsy.</a> Journal of Clinical Investigation. 129 (7), 2946-2951 (2019).</li>
<li>Ellul, M., Solomon, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+encephalitis+-+diagnosis+and+management%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+medicine%22%5BJournal%5D)">Acute encephalitis - diagnosis and management.</a> Clinical medicine. 18 (2), 155-159 (2018).</li>
<li>Diamond, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IL-1%CE%B2+associations+with+posttraumatic+epilepsy+development%3A+a+genetics+and+biomarker+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">IL-1β associations with posttraumatic epilepsy development: a genetics and biomarker cohort study.</a> Epilepsia. 55 (7), 1109-1119 (2014).</li>
<li>Auvin, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prospective+clinical+trials+to+investigate+clinical+and+molecular+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Prospective clinical trials to investigate clinical and molecular biomarkers.</a> Epilepsia. 58 (Suppl 3), 20-26 (2017).</li>
<li>Weber, Y. G., Nies, A. T., Schwab, M., Lerche, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+biomarkers+in+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Genetic biomarkers in epilepsy.</a> Neurotherapeutics. 11 (2), 324-333 (2014).</li>
<li>Fornari, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+stereotaxic+surgery+and+animal+welfare+outcome+improvements+for+behavioral+neuroscience%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Rodent stereotaxic surgery and animal welfare outcome improvements for behavioral neuroscience.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), e3528(2012).</li>
<li>Geiger, B. M., Frank, L. E., Caldera-Siu, A. D., Pothos, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Survivable+stereotaxic+surgery+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Survivable stereotaxic surgery in rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (20), e880(2008).</li>
<li>Gardiner, T. W., Toth, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Stereotactic+Surgery+and+Long-Term+Maintenance+of+Cranial+Implants+in+Research+Animals%5BTitle%5D)+AND+%22Contemporary+Topics+in+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Stereotactic Surgery and Long-Term Maintenance of Cranial Implants in Research Animals.</a> Contemporary Topics in Laboratory Animal Science. 38 (1), 56-63 (1999).</li>
<li>Westergren, I., Johansson, B. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+physiological+parameters+of+rat+cerebrospinal+fluid+during+chronic+sampling%3A+evaluation+of+two+sampling+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Changes in physiological parameters of rat cerebrospinal fluid during chronic sampling: evaluation of two sampling methods.</a> Brain Research Bulletin. 27 (2), 283-286 (1991).</li>
<li>Soukupová, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impairment+of+GABA+release+in+the+hippocampus+at+the+time+of+the+first+spontaneous+seizure+in+the+pilocarpine+model+of+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Neurology%22%5BJournal%5D)">Impairment of GABA release in the hippocampus at the time of the first spontaneous seizure in the pilocarpine model of temporal lobe epilepsy.</a> Experimental Neurology. 257, 39-49 (2014).</li>
<li>Soukupová, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+of+Excitatory+Amino+Acids+During+EEG+Recordings+in+Freely+Moving+Rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Microdialysis of Excitatory Amino Acids During EEG Recordings in Freely Moving Rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (141), e58455(2018).</li>
<li>Guarino, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Low-dose+7%2C8-Dihydroxyflavone+Administration+After+Status+Epilepticus+Prevents+Epilepsy+Development%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotherapeutics%22%5BJournal%5D)">Low-dose 7,8-Dihydroxyflavone Administration After Status Epilepticus Prevents Epilepsy Development.</a> Neurotherapeutics. 19 (6), 1951-1965 (2022).</li>
<li>Curia, G., Longo, D., Biagini, G., Jones, R. S. G., Avoli, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pilocarpine+model+of+temporal+lobe+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">The pilocarpine model of temporal lobe epilepsy.</a> Journal of Neuroscience Methods. 172 (2), 143-157 (2008).</li>
<li>Racine, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modification+of+seizure+activity+by+electrical+stimulation%3A+II.+Motor+seizure%5BTitle%5D)+AND+%22Electroencephalography+and+Clinical+Neurophysiology%22%5BJournal%5D)">Modification of seizure activity by electrical stimulation: II. Motor seizure.</a> Electroencephalography and Clinical Neurophysiology. 32 (3), 281-294 (1972).</li>
<li>Zou, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Repeated+Blood+Collection+from+Tail+Vein+of+Non-Anesthetized+Rats+with+a+Vacuum+Blood+Collection+System%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Repeated Blood Collection from Tail Vein of Non-Anesthetized Rats with a Vacuum Blood Collection System.</a> Journal of Visualized Experiments. (130), e55852(2017).</li>
<li>Blood sampling: Rat. , https://nc3rs.org.uk/3rs-resources/blood-sampling/blood-sampling-rat (2022).</li>
<li>Powles-Glover, N., Kirk, S., Wilkinson, C., Robinson, S., Stewart, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+toxicological+effects+of+blood+microsampling+in+the+vehicle+dosed+adult+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Regulatory+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Assessment of toxicological effects of blood microsampling in the vehicle dosed adult rat.</a> Regulatory Toxicology and Pharmacology. 68 (3), 325-331 (2014).</li>
<li>Zeller, W., Weber, H., Panoussis, B., Bürge, T., Bergmann, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Refinement+of+blood+sampling+from+the+sublingual+vein+of+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+Animal%22%5BJournal%5D)">Refinement of blood sampling from the sublingual vein of rats.</a> Laboratory Animal. 32 (4), 369-376 (1998).</li>
<li>Wang, D., Zhao, Y., Yang, Y., Xie, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+assessment+of+multiple+repeated+percutaneous+punctures+for+the+collection+of+cerebrospinal+fluid+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brazilian+Journal+of+Medical+and+Biological+Research%22%5BJournal%5D)">Safety assessment of multiple repeated percutaneous punctures for the collection of cerebrospinal fluid in rats.</a> Brazilian Journal of Medical and Biological Research. 54 (6), e10032(2021).</li>
<li>Möller, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+repeated+kindled+seizures+on+heart+rate+rhythms%2C+heart+rate+variability%2C+and+locomotor+activity+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+%26+Behavior%22%5BJournal%5D)">Impact of repeated kindled seizures on heart rate rhythms, heart rate variability, and locomotor activity in rats.</a> Epilepsy & Behavior. 92, 36-44 (2019).</li>
<li>Espinosa-Garcia, C., Zeleke, H., Rojas, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+Stress+on+Epilepsy%3A+Focus+on+Neuroinflammation-A+Mini+Review%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Molecular+Sciences%22%5BJournal%5D)">Impact of Stress on Epilepsy: Focus on Neuroinflammation-A Mini Review.</a> International Journal of Molecular Sciences. 22 (8), 4061(2021).</li>
<li>Cassar, S. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparing+levels+of+biochemical+markers+in+CSF+from+cannulated+and+non-cannulated+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparing levels of biochemical markers in CSF from cannulated and non-cannulated rats.</a> Journal of Neuroscience Methods. 192 (2), 249-253 (2010).</li>
<li>Huang, Y. L., Säljö, A., Suneson, A., Hansson, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+among+different+approaches+for+sampling+cerebrospinal+fluid+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">Comparison among different approaches for sampling cerebrospinal fluid in rats.</a> Brain Research Bulletin. 41 (5), 273-279 (1996).</li>
<li>Hattori, N., Takumi, A., Saito, K., Saito, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+serial+cervical+or+tail+blood+sampling+on+toxicity+and+toxicokinetic+evaluation+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Toxicological+Sciences%22%5BJournal%5D)">Effects of serial cervical or tail blood sampling on toxicity and toxicokinetic evaluation in rats.</a> Journal of Toxicological Sciences. 45 (10), 599-609 (2020).</li>
<li>Roncon, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MicroRNA+profiles+in+hippocampal+granule+cells+and+plasma+of+rats+with+pilocarpine-induced+epilepsy--comparison+with+human+epileptic+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">MicroRNA profiles in hippocampal granule cells and plasma of rats with pilocarpine-induced epilepsy--comparison with human epileptic samples.</a> Scientific Reports. 5, 14143(2015).</li>
<li>van Vliet, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Standardization+procedure+for+plasma+biomarker+analysis+in+rat+models+of+epileptogenesis%3A+Focus+on+circulating+microRNAs%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsia%22%5BJournal%5D)">Standardization procedure for plasma biomarker analysis in rat models of epileptogenesis: Focus on circulating microRNAs.</a> Epilepsia. 58 (12), 2013-2024 (2017).</li>
<li>Kirschner, M. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Haemolysis+during+sample+preparation+alters+microRNA+content+of+plasma%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Haemolysis during sample preparation alters microRNA content of plasma.</a> PLoS One. 6 (9), e24145(2011).</li>
<li>Grimm, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advancing+the+3Rs%3A+innovation%2C+implementation%2C+ethics+and+society%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Veterinary+Science%22%5BJournal%5D)">Advancing the 3Rs: innovation, implementation, ethics and society.</a> Frontiers in Veterinary Science. 10, 1185706(2023).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Niniejsza praca ilustruje łatwą do opanowania technikę płynu mózgowo-rdzeniowego i pobierania krwi u szczurów, która może być przydatna nie tylko w badaniach na modelach padaczki, ale także innych schorzeń lub chorób neurologicznych, takich jak Alzheimer, Parkinson czy stwardnienie rozsiane. W badaniach nad padaczką obie procedury pobierania próbek w połączeniu z wideo-EEG są idealne, gdy poszukuje się korelacji między poziomami różnych rozpuszczalnych cząsteczek a aktywnością napadową. Z tego konkretnego powodu zastosow...

Płyn mózgowo-rdzeniowy (CSF) i pobieranie próbek krwi są ważne dla identyfikacji i walidacji biomarkerów padaczki, zarówno w badaniach przedklinicznych, jak i klinicznych1,2. Obecnie diagnostyka padaczki i większość badań nad biomarkerami padaczki koncentruje się na EEG i neuroobrazowaniu3,4,5. Podejścia te mają jednak kilka ograniczeń. Oprócz rutynowych pomiarów skóry głowy, w wielu przypadkach EEG wymaga inwazyjnych technik, takich jak elektrody głębokościowe6. Metody obrazowania mózgu mają słabą rozdzielczość czasową i przestrzenną oraz są stosunkowo drogie i czasochłonne7,8. Z tego powodu identyfikacja nieinwazyjnych, tanich biomarkerów opartych na biopłynach stanowiłaby bardzo atrakcyjną alternatywę. Ponadto te biomarkery płynów biologicznych można połączyć z dostępnymi metodami diagnostycznymi w celu poprawy ich predykcyjności.
Pacjenci, u których zdiagnozowano epilepsję, są rutynowo poddawani EEG9,10 i pobieranie krwi11,12,13,14, a wielu również do wycofania płynu mózgowo-rdzeniowego, aby wykluczyć przyczyny zagrażające życiu (np. ostre infekcje, autoimmunologiczne zapalenie mózgu)15. Te próbki krwi i płynu mózgowo-rdzeniowego mogą być wykorzystane w badaniach klinicznych mających na celu identyfikację biomarkerów padaczki. Na przykład Hogg i współpracownicy odkryli, że wzrost liczby trzech fragmentów tRNA osocza poprzedza wystąpienie napadu w ludzkiej padaczce14. Podobnie, poziomy interleukiny-1beta (IL-1β) w ludzkim płynie mózgowo-rdzeniowym i surowicy, wyrażone jako stosunek poziomów IL-1β w płynie mózgowo-rdzeniowym do surowicy, mogą przewidywać rozwój padaczki pourazowej po urazowym uszkodzeniu mózgu16. Badania te podkreślają znaczenie pobierania próbek płynów biologicznych dla badań nad biomarkerami padaczki, ale napotykają one wiele ograniczeń nieodłącznie związanych z badaniami klinicznymi, np. czynnik współtworzący leki przeciwpadaczkowe (AED) we krwi, częsty brak informacji o etiologii, nieodpowiednie kontrole, niewielka liczba pacjentów i inne17,18.
Badania przedkliniczne oferują inne możliwości badania cząsteczek w płynach biologicznych jako potencjalnych biomarkerów padaczki. W rzeczywistości możliwe jest pobranie osocza i/lub płynu mózgowo-rdzeniowego od zwierząt podczas wykonywania zapisów EEG. Co więcej, pobieranie próbek może być wykonywane wielokrotnie przez wiele dni eksperymentu, a liczba grup kontrolnych dopasowanych do wieku, płci i epilepsji może być wykorzystana w celu poprawy wiarygodności badania. W tym miejscu szczegółowo opisano elastyczną technikę pozyskiwania płynu mózgowo-rdzeniowego z cisterna magna z równoległym wycofywaniem osocza z żyły ogonowej u szczurów monitorowanych pod kątem EEG. Prezentowana technika ma kilka zalet w porównaniu z metodami alternatywnymi. Dzięki zastosowaniu metody igłowej możliwe jest kilkukrotne pobranie płynu mózgowo-rdzeniowego bez uszczerbku dla funkcji elektrod EEG lub podobnych implantów głowy. Stanowi to udoskonalenie procedur pobierania cewnika dooponowego, które wiążą się ze stosunkowo wysokim ryzykiem infekcji. Ponadto, zgłoszone podejście do swobodnego opadania stosowane do pobierania krwi jest lepsze od innych podejść do pobierania krwi z żył ogonowych ze względu na znacznie zmniejszone ryzyko hemolizy, ze względu na fakt, że krew nie przepływa przez rurki i nie stosuje się podciśnienia. Jeśli jest wykonywany w ściśle wolnych od zarazków, ryzyko infekcji u zwierząt jest szczególnie niskie. Ponadto, rozpoczynając pobieranie krwi na samym końcu ogonów zwierząt, pobieranie próbek można powtórzyć kilka razy. Takie techniki są łatwe do opanowania i mogą być stosowane w wielu badaniach przedklinicznych zaburzeń ośrodkowego układu nerwowego.

<table><tbody><tr><td>Zestaw do pobierania krwi BD Vacutainer Safety-Lok</td><td>BD Italy SpA, Mediolan, Włochy</td><td></td><td>367246 Materiałowe</td></tr><tr><td>probówki do pobierania krwi (Microtainer K2E)</td><td>BD Italy SpA, Mediolan, Włochy</td><td>365975</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Zestaw do naparu ze skrzydłami motyla 23G x 3/4'' 0,6 x 19 mm</td><td>Nipro, Osaka, Japonia&nbsp;</td><td>PSY-23-ET-ICU</td><td>Wirówka materiałowa</td></tr> z <tr><td>chłodzeniem ALC PK 130R</td><td>DJB Labcare Ltd, Buckinghamshire, Anglia</td><td>112000033</td><td></td></tr><tr><td>Materiał Szew bawełniany 3-0</td><td>Ethicon, Johnson & Johnson surgical technologies, Raritan, New Jersey, USA</td><td>7343H</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Diazepam 5 mg / 2 ml, Solupam</td><td>Dechra Veterinary Products, Turyn, Włochy</td><td>105183014 (AIC)</td> <td>Rozwiązanie</td></tr><tr><td>Cyfrowy 8-kanałowy rejestrator mediów wideo system telemetrii EEG Data</td><td>Sciences International (DSI), St Paul, MN, USA</td><td>PNM-VIDEO-008</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Cyfrowy system nadzoru wideo z przewodem EEG</td><td>EZVIZ Network, Hangzhou, Cina</td><td>EZVIZ (V5.3.2)</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Środek dezynfekujący na bazie stabilizowanych nadtlenków i czwartorzędowej aktywności amoniowej</td><td>Laboratoire Garcin-Bactinyl, Francja</td><td>LB 920111</td><td>Solution</td></tr><tr><td>Atrapa kaniuli prowadzącej 8 mm</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml;, Szwecja</td><td>CXD-8</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Elektroda 3-kanałowa dwuskrętna</td><td>Invivo1, Plastic One, Roanoke, Virginia, USA</td><td>MS333/3-B/SPC</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Uchwyt elektrody do chirurgii stereotxic</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml;, Szwecja</td><td>1776-P1</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Eppendorf BioSpectrometer basic</td><td>Eppendorf AG, Hamburg, Niemcy</td><td>6137</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td> Eppendorf PCR Tubes 0,2 ml</td><td>Eppendorf Srl, Mediolan, Włochy</td><td>30124332</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Eppendorf &mu; Kuweta G1.0</td><td>Eppendorf AG, Hamburg, Niemcy</td><td>6138</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Igła do karmienia elastyczna 17G dla</td><td>szczurów Agn Tho's, Lindig&ouml; Szwecja</td><td>7206</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Aparatura do technologii trawy</td><td>Grass Technologies, Natus Neurology Incorporated, Pleasanton, Kalifornia, USA</td><td>M665G08</td><td>Sprzęt (wzmacniacz AS40, skrzynka główna, połączeniowe, telefaktor model RPSA S40)</td></tr><tr><td>Isoflurane 100%, IsoFlo</td><td>Zoetis, Rzym, Włochy</td><td>103287025 (AIC)</td><td>Solution</td></tr><tr><td>Ketamine (Imalgene)</td><td>Merial, Tuluza, Francja</td><td>221300288 ( AIC)</td><td>Roztwór</td></tr><tr><td>chlorku litu&nbsp;</td><td>Sigma-Aldrich, Mediolan, Włochy</td><td>L9650</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Kaniula mikroiniekcyjna 31G 9 mm</td><td>Agn Tho's, Lindig&ouml; Szwecja</td><td>CXMI-9</td><td></td></tr><tr><td>Materiał MP150 modułowa akwizycja danych i&nbsp; System analizy&nbsp;</td><td>Biopac, Goleta, Kalifornia, USA</td><td>MP150WSW</td><td>Equipment</td></tr><tr><td>Maść okulistyczna weterynaryjna, Hylo night</td><td>Ursapharm, Mediolan, Włochy</td><td>941791927 (AIC)</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Chlorowodorek pilokarpiny</td><td>Sigma-Aldrich, Mediolan, Włochy</td><td>P6503</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Rurka PTFE ze</td><td>złączem Agn Tho's, Lindig&ouml;, Szwecja</td><td>JT-10</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna</td><td>0,9% NaCl, pH dostosowany do 7.0</td><td></td><td>Roztwór</td></tr><tr><td>Trójwodny bromowodorek skopolaminy</td><td>Sigma-Aldrich, Mediolan, Włochy</td><td>S2250</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Skopolamina azotan metylu</td><td>Sigma-Aldrich, Mediolan, Włochy</td><td>S1876</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Srebrny&nbsp; Sulfadiazyna 1% śmietana&nbsp;</td><td>Sofar, Trezzano Rosa, Mediolan, Włochy</td><td>025561010 (AIC)</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Cement metakrylowy simplex rapid dental&nbsp; &nbsp;</td><td>Kemdent, Associated Dental Products Ltd, Swindon, Wielka Brytania</td><td>ACR811</td><td>Materiał</td></tr><tr><td>Aparat stereotaktyczny</td><td>David Kopf Instruments, Los Angeles, CA, USA</td><td>Model 963</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Roztwór sacharozy</td><td>10% sacharozy w wodzie destylowanej</td><td></td><td>Domowy roztwór</td></tr><tr><td>Strzykawka 1 ml&nbsp;</td><td>Biosigma, Cona, Venezia, Włochy</td><td>20,71,26,03,00,350</td><td>Telemetry materiałowe</td></tr><tr><td></td><td>Data Sciences International (DSI), St Paul, MN, USA</td><td>CTA-F40</td><td>Telemetria materiałowa</td></tr><tr><td>Analizator śladów EEG</td><td>Data Sciences International (DSI), St Paul, MN, USA</td><td>NeuroScore v3-0</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>System telemetryczny</td><td>Data Sciences International (DSI), St Paul, MN, USA</td><td>Sprzęt plus oprogramowanie Ponemah rdzeń 6.51</td><td>Sprzęt</td></tr><tr><td>Chlorowodorek ksylazyny</td><td>Sigma-Aldrich, Mediolan, Włochy</td><td>X1251</td><td>Materiał</td></tr></tbody></table>

pobieranie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej bocznej u szczurów podczas zapisów eeg

Sampling Cerebrospinal Fluid and Blood from Lateral Tail Vein in Rats During EEG Recordings

Ponieważ skład płynów ustrojowych odzwierciedla wiele fizjologicznych i patologicznych dynamik, próbki płynów biologicznych są powszechnie uzyskiwane w wielu kontekstach eksperymentalnych do pomiaru interesujących molekuł, takich jak hormony, czynniki wzrostu, białka lub małe niekodujące RNA. Konkretnym przykładem jest pobieranie próbek cieczy biologicznych w badaniach nad biomarkerami padaczki. W tych badaniach pożądane jest porównanie poziomów cząsteczek w płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF) i w osoczu, poprzez równoległe pobieranie płynu mózgowo-rdzeniowego i osocza oraz rozważenie odległości czasowej pobierania próbek od i do napadów. Połączone pobieranie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i osocza, w połączeniu z monitorowaniem wideo-EEG u zwierząt z padaczką, jest obiecującym podejściem do walidacji przypuszczalnych biomarkerów diagnostycznych i prognostycznych. W tym miejscu opisano procedurę połączonego pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego z cisterna magna i pobierania krwi z żyły ogonowej bocznej u szczurów z padaczką, które są stale monitorowane za pomocą wideo-EEG. Ta procedura ma znaczące zalety w porównaniu z innymi powszechnie stosowanymi technikami. Pozwala to na szybkie pobieranie próbek przy minimalnym bólu i inwazyjności oraz skróconym czasie znieczulenia. Dodatkowo może być używany do uzyskiwania próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i osocza zarówno u szczurów zarejestrowanych w EEG na uwięzi, jak i telemetrycznych, i może być używany wielokrotnie przez wiele dni eksperymentu. Oczekuje się, że dzięki zminimalizowaniu stresu spowodowanego pobieraniem próbek poprzez skrócenie znieczulenia izofluranem, pomiary będą dokładniej odzwierciedlać rzeczywiste poziomy badanych cząsteczek w płynach biologicznych. W zależności od dostępności odpowiedniego testu analitycznego, technika ta może być stosowana do pomiaru poziomów wielu, różnych cząsteczek przy jednoczesnym wykonywaniu zapisu EEG.

Wyniki różnych procedur pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego (CSF) i krwi przeprowadzonych u 9 szczurów kontrolnych i 18 szczurów z chroniczną epilepsją, wszystkim zaimplantowanych elektrodami 1 miesiąc po SE, przedstawiono w formie wskaźnika sukcesu. Po implantacji wszystkie szczury były monitorowane za pomocą wideo-EEG przez 1 miesiąc, podczas którego CSF oraz krew pobierano 5 razy co 3 dni w ciągu dwóch ostatnich tygodni eksperymentu (tj. w dniach 52, 55, 58, 61 i 64 po SE; dpSE). Dane z wielokrotnych pobrań od różnyc...

Protokół pokazuje powtarzające się pobieranie płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi od szczurów z padaczką, wykonywane równolegle z ciągłym monitorowaniem wideo-elektroencefalogramu (EEG). Są one niezbędne do zbadania możliwych powiązań między zmianami w różnych cząsteczkach płynów ustrojowych a aktywnością napadową.

Pobieranie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej bocznej u szczurów podczas zapisów EEG

Because the composition of body fluids reflects many physiological and pathological dynamics, biological liquid samples are commonly obtained in many ...

W naszych badaniach dążymy do znalezienia przypuszczalnych biomarkerów diagnostycznych i prognostycznych padaczki. Aby zwalidować je w płynach biologicznych, porównujemy poziomy określonych substancji w płynie mózgowo-rdzeniowym i osoczu z występowaniem napadów samoistnych u szczurów. Do tej pory niektóre małe niekodujące kwasy rybonukleinowe, takie jak miRNA lub fragmenty tRNA, zostały zidentyfikowane jako krążący biomarker padaczki, ale ich przydatność jako skutecznego i wiarygodnego narzędzia diagnostycznego lub prognostycznego w padaczce musi zostać potwierdzona.Badamy różne krążące markery padaczki. Rutynowo pobieramy osocze i płyn mózgowo-rdzeniowy szczurów z padaczką podczas wykonywania zapisu EEG w celu identyfikacji napadów samoistnych. Powtarzając pobieranie próbek przez wiele dni, możemy skorelować poziomy markerów z pojedynczym wystąpieniem napadu lub ich skumulowanym efektem.Obecnym wyzwaniem jest uzyskanie wystarczającej ilości próbek wysokiej jakości do następujących procedur analitycznych bez wywoływania u zwierząt napadów produktów stresu spowodowanych ich manipulacją, które mogą wpływać na poziomy badanych cząsteczek. Istnieje pilna, niezaspokojona potrzeba medyczna, aby odkryć biomarkery dla osób z padaczką, zwłaszcza te prognostyczne i ryzykowne. Pobieranie próbek osocza i płynu mózgowo-rdzeniowego równolegle z monitorowaniem napadów EEG pozwala na znalezienie odpowiedniego markera.Nasza technika pobierania z zablokowaną żyłą ogonową wytwarza wysokiej jakości próbki osocza wolne od hemolizy, ponieważ nie wymaga próżni ani dojenia ogona. Nakłucie Cisterna magna, którego używamy do pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego, ma lepszą sterylność i mniejsze ryzyko utraty implantu głowy w porównaniu z systemem kaniulowanym. Na początek umieść zwierzę w czystej klatce w pomieszczeniu nagraniowym, aby umożliwić przyzwyczajenie się do nowego środowiska.Umieść klatkę w klatce Faradaya, aby uniknąć zakłóceń pola elektromagnetycznego otoczenia w sygnale EEG. Podłącz jeden koniec nagrywającego do urządzenia nagrywającego. Użyj woltomierza do pomiaru potencjału elektrycznego i rozróżnienia elektrod masowych i referencyjnych.Następnie przytrzymaj cementową osłonę na głowie zwierzęcia i włóż drugi koniec nagrywającego do złącza elektrody zamocowanego na głowie szczura. Użyj komutatora, aby zrównoważyć ciężar nagrywającego i umożliwić swobodny ruch zwierzęcia bez skręcania. Przed rozpoczęciem rejestracji należy sprawdzić wszystkie ustawienia używane do pozyskiwania i przetwarzania danych z EEG.Upewnij się, że zastosowano odpowiednie filtrowanie i częstotliwość próbkowania, aby uniknąć artefaktów i szumów w sygnałach EEG. Rozpocznij nagrywanie wideo i zapisy EEG na monitorze. Sprawdź moc w określonych pasmach częstotliwości w czasie, aby upewnić się, że ścieżki pasują do oczekiwanego sygnału EEG.Okresowo sprawdzaj ślady EEG. Sprawdź też zwierzęta. Jeśli nagrywający odczepi się od złącza elektrody, podłącz go ponownie i sprawdź, czy sygnał EEG jest czysty.Przeanalizuj sygnał EEG, przeprowadzając badanie przesiewowe za pomocą zapisu EEG i identyfikuj czynności podobne do napadów. Potwierdź potencjalne napady konwulsyjne, sprawdzając zsynchronizowany zapis wideo zebrany jednocześnie z EEG. Na początek pokryj igłę motylkową i jej rurkę 1% roztworem potasu EDTA.Przeciąć rurkę tuż za igłą, aby zebrać krew kroplami. Umieść znieczulonego szczura na ramie stereotaktycznej, utrzymując znieczulenie przez maskę na twarz. Umieść poduszkę grzewczą pod zwierzęciem, utrzymując część jego ogona w bezpośrednim kontakcie z podkładką.Przesuń grzbiet zwierzęcia tak, aby był skierowany na boki, a boczna żyła ogonowa była widoczna u góry. Zanurz ogon w ciepłej wodzie, aby rozszerzyć żyłę boczną. Następnie przetrzyj ogon 70% etanolem.Umieść ciepłe światło na ogonie za pomocą zwykłej żarówki. Włóż igłę motylkową 21G do bocznej żyły ogonowej pod kątem 20 stopni na głębokość pięciu milimetrów. Następnie zbierz krew w probówce próżniowej o pojemności 500 mikrolitrów zawierającej pięć miligramów potasu EDTA jako antykoagulantu.Wyjąć igłę i zatrzymać przepływ krwi, wywierając nacisk na miejsce nakłucia. Przywróć szczura do jego domowej klatki. Następnie delikatnie odwróć probówkę 10 razy, aby wymieszać antykoagulant z krwią.Zrób w lodzie otwory o głębokości 1,5 cala i umieść w nich rurki pionowo. W ciągu godziny od pobrania odwirować próbkę krwi w wirówce z chłodzeniem w celu oddzielenia osocza. Następnie odessać około 200 mikrolitrów osocza, omijając warstwę czerwonych i białych krwinek.Umieść pobrane osocze w sterylnej mikroprobówce o pojemności 0,2 mililitra. Odłóż na bok pięć mikrolitrów próbki do kontroli jakości, a pozostałą próbkę przechowuj w temperaturze minus 80 stopni Celsjusza do czasu analizy. Krew pobrano od szczurów w pięciu punktach czasowych przy użyciu różnych metod, takich jak technika próżniowa w 52 dniu, dojenie ogona w 55 dniu i techniki upuszczania w dniach od 58 do 64.Jakość próbek osocza ocenianych za pomocą spektrofotometrii UV wykazała, że osocze było zabarwione na różowo ze średnią wartością absorbancji 0,647 przy zastosowaniu techniki próżniowej. Podobnie, technika dojenia ogona dała różowy kolor plazmy o średniej absorbancji 0,620. W przeciwieństwie do tego, w przypadku grawitacyjnego systemu pobierania kropli, uzyskano przezroczyste próbki osocza ze znacznie obniżonymi średnimi wartościami absorbancji osocza, co sugeruje, że procedura ta jest optymalna dla uzyskania wysokiej jakości próbek do analiz.Na początek przygotuj igłę motylkową 203G, przecinając jej plastikową osłonę rękawa tak, aby koniec gołej igły był odsłonięty na siedem milimetrów. Następnie połącz igłę motylkową z rurką polimerową do jednomililitrowej strzykawki. Umieść znieczulonego szczura na stereotaktycznej ramie i utrzymuj znieczulenie przez maskę na twarz.Następnie usuń futro z tylnej głowy i szyi szczura. Przymocuj głowę szczura za pomocą prętów do uszu. Przesuń pasek na nos ramy stereotaktycznej, aby opuścić głowę zwierzęcia o około 45 stopni w pionie.Znajdź lekko wklęsłą powierzchnię na tylnej głowie z aspektem rombu między wypukłością potyliczną a grzbietem atlasu. Przetrzyj powierzchnię 70% etanolem. W przypadku pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego włóż igłę motylkową pionowo do środka wklęsłej powierzchni w kształcie rombu do cisterna magna, aż ruch zostanie zablokowany przez plastikową osłonę tulei igły.Delikatnie pociągnąć tłok strzykawki, aby płyn mózgowo-rdzeniowy powoli przepływał przez igłę. Zbierz około 100 mikrolitrów płynu mózgowo-rdzeniowego do rurki polimerowej. Ściśnij rurkę polimerową bardzo blisko igły motylkowej i odetnij rurkę w tym miejscu.Pobrać przezroczystą próbkę do strzykawki. Wyrzuć próbkę do sterylnej mikroprobówki o pojemności 0,2 mililitra i przechowuj na lodzie do jednej godziny. Zdezynfekować miejsce pobrania płynu mózgowo-rdzeniowego na głowie zwierzęcia.Wyjmij szczura z klatki stereotaktycznej i umieść go z powrotem w klatce. Odłóż dwa mikrolitry próbki do kontroli jakości, a resztę przechowuj w temperaturze minus 80 stopni Celsjusza do dalszej analizy. Wielokrotne wycofywanie płynu mózgowo-rdzeniowego przeprowadzono w ciągu pięciu dni w trzech eksperymentalnych grupach szczurów i wyrażono jako procent udanych wycofań, które zakończyły się czystym płynem mózgowo-rdzeniowym.U szczurów wyposażonych w podwójny implant głowy, którym wykonano kaniulę w celu pobrania płynu mózgowo-rdzeniowego, wskaźnik sukcesu wyniósł 71,1%, co wskazuje, że kaniula na głowie zwierzęcia może przeszkadzać w wielokrotnym pobieraniu próbek płynu mózgowo-rdzeniowego. W przeciwieństwie do tego, gdy pobieranie płynu mózgowo-rdzeniowego przeprowadzono za pomocą nakłucia cisterna magna tylko u zwierząt z elektrodami na uwięzi lub telemetrycznymi, wskaźnik sukcesu wynosił 86,7% i 88,9%Wyniki te sugerują, że technika nakłuwania jest bardziej odpowiednia do wielokrotnego wycofywania płynu mózgowo-rdzeniowego u zwierząt z implantami elektrodowymi.

sampling-cerebrospinal-fluid-blood-from-lateral-tail-vein-rats-during

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Transgeniczne (Tg) modele mysie w chorobie Alzheimera (AD) stanowią doskonałą okazję do zbadania, w jaki sposób i dlaczego poziomy Aβ lub tau w płynie mózgowo-rdzeniowym (CSF) zmieniają się wraz z postępem choroby u pacjentów. W niniejszej pracy prezentujemy udoskonaloną technikę punkcji cysterny wielkiej w celu seryjnego pobierania próbek CSF od myszy.

Technika seryjnego pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego z cysterny wielkiej u myszy

Ten film demonstruje procedurę jednoczesnego rejestrowania kolokalizowanej elektroencefalografii (EEG) i lokalnych potencjałów pola (LFP) u znieczulonego szczura. Proces polega na przygotowaniu szczura i przymocowaniu elektrod stymulujących do jego opuszków wąsów. Elektroda pająka EEG jest umieszczana na czaszce szczura w celu powierzchniowych pomiarów EEG. W tym samym czasie wielokanałowa mikroelektroda jest wprowadzana do określonego obszaru mózgu przez otwór w czaszce, aby rejestrować...

Równoczesne zapisy potencjału elektroencefalograficznego i lokalnego potencjału pola u znieczulonego szczura

Ten film przedstawia procedury przygotowania, rejestracji i analizy źródeł wysokorozdzielczego EEG u szczurów poddanych sedacji ze szczególnym przedklinicznym modelem padaczki ogniskowej w warunkach nieinwazyjnych.

Obrazowanie źródła mózgu w przedklinicznych szczurzych modelach padaczki ogniskowej przy użyciu zapisów EEG o wysokiej rozdzielczości

Próbki krwi są przydatne do oceny biomarkerów stanów fizjologicznych lub chorób in vivo. Tutaj opisujemy metodologię pobierania krwi z bocznej żyły ogonowej u szczura. Ta metoda zapewnia szybkie pobieranie próbek przy minimalnym bólu i inwazyjności.

Pobieranie próbek krwi z bocznej żyły ogonowej szczura

Ten protokół opisuje prostą metodę jednoczesnego rejestrowania kolokalizowanej elektroencefalografii (EEG) i wielolaminarnego potencjału pola lokalnego u znieczulonego szczura. Wykazano, że otwór w czaszce wywiercony w czaszce w celu wprowadzenia mikroelektrody powoduje znikome zniekształcenia sygnału EEG.

Jednoczesna rejestracja kolokalizowanej elektroencefalografii i lokalnego potencjału pola u gryzoni

To badanie wprowadza metodę jednoczesnego rejestrowania lokalnych potencjałów pola w mózgu, elektrokardiogramów, elektromiogramów i sygnałów oddechowych swobodnie poruszającego się szczura. Technika ta, która obniża koszty eksperymentów i upraszcza analizę danych, przyczyni się do zrozumienia interakcji między mózgiem a narządami obwodowymi.

Jednoczesne zapisy lokalnych potencjałów pola korowego, elektrokardiogram, elektromiogram i rytm oddychania swobodnie poruszającego się szczura

Tutaj opisujemy metodę mikrodializy in vivo do analizy uwalniania asparaginianu i glutaminianu w brzusznym hipokampie u szczurów z padaczką i bez padaczki, w połączeniu z zapisami EEG. Zewnątrzkomórkowe stężenia asparaginianu i glutaminianu mogą być skorelowane z różnymi fazami choroby.

Mikrodializa aminokwasów pobudzających podczas zapisów EEG u swobodnie poruszających się szczurów

Protokół tutaj zapewnia szczegółowe, dynamiczne pobieranie próbek płynu zewnątrzkomórkowego w czasie rzeczywistym z hipokampa obudzonych szczurów za pomocą systemu mikrodializy.

Dynamiczne pobieranie w czasie rzeczywistym płynu zewnątrzkomórkowego hipokampa od przytomnych szczurów za pomocą systemu mikrodializy

Metoda izolacji nerwowych komórek macierzystych i komórek progenitorowych oligodendrocytów z mózgów żywych szczurów jest tutaj przedstawiona w szczegółach eksperymentalnych. Pozwala to na wielokrotne pobieranie tych komórek od tych samych zwierząt bez uszczerbku dla ich dobrostanu.

Metoda "dojenia mózgu" do izolacji nerwowych komórek macierzystych i komórek progenitorowych oligodendrocytów od żywych szczurów

W niniejszym artykule opisano procedurę chirurgiczną oraz wskazówki dotyczące obsługi związane z implantacją ultrasciennej macierzy mikroelektrod na bazie poliimidu (PBM-array) na czaszkę myszy w celu rejestracji wysokiej gęstości encefalografii (EEG) w modelu mysim.

Rejestracja EEG o wysokiej gęstości u swobodnie poruszających się myszy z wykorzystaniem mikroelektrod na bazie poliamidu

Poznaj metodę pobierania płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej u szczurów podczas zapisów EEG. Technika ta umożliwia identyfikację biomarkerów epilepsji bez wywoływania stresu u zwierząt.

Pobieranie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej bocznej u szczurów podczas zapisów EEG

Przeglądaj więcej filmów