6 października 2023
Tutaj prezentujemy skuteczne protokoły konserwacji i ekstrakcji jadu dla hodowli Tityus serrulatus Lutz i Mello, 1922 (brazylijski żółty skorpion) na dużą skalę, w celu dostarczenia jadu do późniejszej produkcji jadu skorpiona, aby sprostać wymaganiom brazylijskiego systemu opieki zdrowotnej.
Protokół ten opisuje metodę utrzymywania skorpionów w celu ekstrakcji dużych ilości jadu, który jest stosowany do produkcji neutralizujących immunoglobulin pochodnych koni lub antyjadów. W krajach tropikalnych istnieje duże zapotrzebowanie na środki przeciw jadowi skorpionów, które są podstawą leczenia przypadków ludzi i jadu. Zabiegi pielęgnacyjne odtwarzają optymalne warunki naturalne, utrzymując skorpiony w niewoli.
W związku z tym bierzemy pod uwagę dobrostan zwierząt i dobrą praktykę laboratoryjną. Równolegle ekstrakcja jadu opiera się na stymulacji elektrycznej ogonów skorpionów, przy minimalnym szkodliwym wpływie na zwierzęta. Protokół ten umożliwił nam wykładnicze zwiększenie liczby zwierząt trzymanych w niewoli, z 4 000 do 20 000 osobników w ciągu 10 lat.
W tym samym czasie jad został wyekstrahowany w wystarczającym stopniu, aby uodpornić konie. Aby uzyskać osocze ze specyficznymi przeciwciałami, które są materiałem wyjściowym w procesie produkcyjnym, w wyniku którego powstaje około stu tysięcy fiolek antyjadu rocznie. Procedura dojenia jadu różni się od innych opisanych w literaturze, w której usuwa się telson, co ogranicza liczbę ekstrakcji na zwierzę.
Zgromadzone doświadczenie techników naszej placówki pozwala nam na ekstrakcję jadu od 200 do 300 zwierząt w ciągu około jednej do półtorej godziny bez znieczulania zwierząt lub wykonywania innych inwazyjnych zabiegów. Zacznij od przygotowania pomieszczeń do trzymania skorpionów. Aby wygładzić ścianki pojemnika polipropylenowego pełniącego funkcję obudowy, należy umieścić 10 centymetrów samoprzylepnej taśmy plastikowej na jego wewnętrznej powierzchni, a także w górnych rogach pojemnika.
Następnie wyłóż podłogę pojemnika polipropylenowego papierem rzemieślniczym, przymocowanym taśmą maskującą na krawędziach ze wszystkich stron. Ułóż cztery tace kartonowe jako pionowe podłoża po jednej stronie pojemnika, z sztywnym arkuszem tektury między każdą tacą. Umieść płytką tacę polipropylenową zawierającą nasączoną bawełnę jako źródło wody po przeciwnej stronie obudowy.
Umieść skorpiony w przygotowanych wybiegach, a pojemniki umieść w pomieszczeniu utrzymywanym w temperaturze 24 stopni Celsjusza. Aby zapewnić pełną konserwację, najpierw wyjmij skorpiony z tacki na wodę. Następnie za pomocą długich kleszczy wyjmij tackę na wodę z obudowy.
Umieść skorpiony w czystej obudowie. Usuń wszystkie skorpiony pozostawione na podłodze obudowy i umieść je w czystej obudowie. Następnie usuń pozostałą żywą zdobycz z pomieszczenia.
Usuń wszystkie jednorazowe podłoża z obudowy i odpowiednio je wyrzuć przed odkażeniem przedmiotów wielokrotnego użytku, takich jak tacki na wodę i pojemniki, 0,5% roztworem podchlorynu. Na początek umieść skorpiony we wspólnych pojemnikach polipropylenowych jako obudowach. Oblicz ilość paszy w zależności od spożycia energii przez skorpiony.
Następnie policz liczbę karaluchów jako zdobycz. Następnie nałóż węglan wapnia z alkoholem wokół górnej części obudowy, aby zapobiec wydostawaniu się karaluchów z obudowy. Umieść karaluchy w zagrodzie na dwa dni.
W dniu ekstrakcji jadu policz żywe skorpiony w pomieszczeniu i za pomocą długich kleszczy przenieś je do szklanego pojemnika. Następnie należy rozmieścić cały niezbędny sprzęt potrzebny do ekstrakcji jadu na powierzchni komory przepływu powietrza. Podłącz przewód zasilający elektrostymulatora do gniazdka.
Następnie włącz szafkę nawiewu i elektrostymulator. Ustaw wyświetlane parametry na elektrostymulatorze do ekstrakcji jadu. Za pomocą kleszczy przytrzymaj metasomę skorpiona, a następnie unieruchamij telson zakrzywionymi kleszczami, a następnie przytrzymuj go ręką.
Po unieruchomieniu umieść telson w bezpośrednim kontakcie z przewodnikiem elektrostymulatora i zbierz krople jadu do plastikowej mikrorurki. Przenieś telson z dłoni na zakrzywione kleszcze i delikatnie umieść skorpiona na dnie szklanego pojemnika. Po wydojeniu wszystkich skorpionów umieść je z powrotem w zagrodzie.
Przechowuj jad w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza do liofilizacji. Produkcja jadu Tityus serrulatus przekracza 80 gramów płynnego jadu rocznie, co odpowiada ponad 13 gramom jadu liofilizowanego. Wskaźniki produkcji, takie jak średni jad wydojony na zwierzę, jad wyekstrahowany miesięcznie i skorpiony ekstrahowane miesięcznie, wykazały pozytywną linię trendu wskazującą na solidną produkcję.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejsze badanie szczegółowo opisuje protokoły utrzymania i pozyskiwania jadu z Tityus serrulatus, brazylijskiego żółtego skorpiona, mające na celu wsparcie produkcji antytoksyn dla brazylijskiego systemu zdrowia. Usprawnione procedury pozwalają na zwiększenie wydajności ekstrakcji jadu, przy jednoczesnym uwzględnieniu dobrostanu zwierząt.
Ustandaryzowana hodowla w niewoli i ekstrakcja jadu Tityus serrulatus stanowią podstawę niezawodnej produkcji antytoksyn na potrzeby zdrowia publicznego w dużej skali. Solidne protokoły chowu i ekstrakcji zapewniają stałe dostawy jadu, wspierając późniejszą produkcję immunoglobulin oraz ciągłość portfolio produktów. Praktyki te mają bezpośredni wpływ na skalowalność i powtarzalność procesów biologicznych w badaniach i rozwoju farmaceutyki biologicznej.
Opisane protokoły pozycjonują ekstrakcję jadu jako kluczowy etap stanowiący pomost między pozyskiwaniem materiału biologicznego a produkcją immunoglobulin w procesie wytwarzania antytoksyn.