Pobieranie próbek krwi z żyły podobojczykowej u przytomnych szczurów
November 3rd, 2023
Tutaj prezentujemy kombinację skutecznych metod ograniczania szczurów i nakłuwania żył podobojczykowych, które umożliwiają szybkie, bezpieczne i wielokrotne pobieranie krwi u szczurów bez znieczulenia.
Zakres naszych badań koncentruje się na opracowaniu metod pobierania próbek krwi od szczurów w celu ich wywołania. Naszym celem jest zapewnienie szybkich i bezpiecznych procedur, które są zgodne z zasadą radaru, przy minimalnym zaangażowaniu siły roboczej i zasobów. Jednym z obecnych wyzwań eksperymentalnych jest skuteczne unieruchomienie szczura w taki sposób, aby jednocześnie żyła podobojczykowa znajdowała się blisko powierzchni skóry w celu optymalnego pobrania krwi.
Zaletą naszego protokołu jest to, że wysokiej jakości próbki krwi mogą być szybko uzyskane przez osobę bez znieczulania szczurów. W dniu pobrania próbki krwi umieścić szczura w klatce o godzinie 8:00. Zważ jedzenie i wodę i umieść je w klatce. Zdefiniuj pomyślne pobranie krwi na podstawie następujących kryteriów.
Niech zaślepiony badacz zapisuje wagę szczura, spożycie pokarmu i spożycie wody codziennie o 8:00 rano. Następnie delikatnie pogłaszcz skórę grzbietu szczura i kilkakrotnie szczyp go w szyję, aby pomóc szczurowi się zrelaksować. Używając niedominujących rąk, kciuka i palca wskazującego, chwyć i unieś skórę szyi szczura. Używając pozostałych trzech palców i dłoni ręki niedominującej, zabezpiecz skórę grzbietu szczura i przy pomocy ręki dominującej unieruchamij jego przednie kończyny.
Używając palca wskazującego ręki niedominującej, delikatnie dociśnij skórę głowy szczura. Obróć staw barkowy na zewnątrz, a pozostałe palce wzdłuż dłoni, podczas gdy dominująca ręka całkowicie wyprostuje staw barkowy. Chwyć mocno szczura ręką niedominującą, aby ustawić jego głowę i ciało w linii prostej.
Zlokalizuj obojczyk ręką dominującą i potwierdź miejsce wstrzyknięcia. Zdezynfekować miejsce alkoholem, a następnie przepłukać strzykawkę heparyną sodową. Trzymaj strzykawkę równolegle do ciała szczura i dominującej ręki z końcówką igły skierowaną do góry, a wagą strzykawki skierowaną w stronę eksperymentatora.
Włóż igłę 0,5 centymetra poniżej wcięcia obojczyka. Delikatnie wyjąć strzykawkę, aby wytworzyć podciśnienie, zbierając od 0,1 do jednego mililitra krwi ze stałą prędkością. Zastosuj bawełniany wacik do hemostazy i włóż szczura z powrotem do klatki.
Średni czas pobierania krwi dla grup A i B był podobny w ciągu 96 godzin. Wskaźniki powodzenia pobierania krwi wyniosły 93,8% dla grupy A i 95,8% dla grupy B bez istotnej różnicy. Grupa A miała krótszy średni czas pobierania krwi w drugim dniu w porównaniu z czwartym dniem.
Liczba prób udanego pobrania krwi wynosiła średnio 1,21 dla grupy A i 1,17 dla grupy B. Więcej prób i dłuższe czasy nakłucia wskazywały na wyższy odsetek niepowodzeń. Obie grupy wykazywały stały przyrost masy ciała w ciągu czterech dni. Spożycie wody i pokarmu pozostało względnie stałe wśród szczurów tej samej płci.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Przegląd
Niniejsza praca prezentuje protokół skutecznego pobierania krwi od szczurów z wykorzystaniem kombinacji technik unieruchamiania i nakłucia żyły podobojczykowej. Metoda umożliwia szybkie i bezpieczne pobieranie próbek krwi bez konieczności znieczulenia.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neurobiologia
- Badania na zwierzętach
- Techniki pobierania krwi
Tło
- Pobieranie próbek krwi od szczurów jest niezbędne w wielu zastosowaniach badawczych.
- Tradycyjne metody często wymagają znieczulenia, co może skomplikować procedurę.
- Skuteczne unieruchomienie jest kluczowe dla dostępu do żyły podobojczykowej.
- Minimalizacja stresu i zasobów podczas procesu jest priorytetem.
Cel badania
- Opracowanie bezpiecznej i efektywnej metody pobierania krwi u szczurów.
- Zmniejszenie potrzeby znieczulenia podczas pobierania próbek krwi.
- Zapewnienie, że można uzyskać wysokiej jakości próbki krwi szybko.
Wykorzystane metody
- Kombinacja technik unieruchamiania szczurów.
- Nakłucie żyły podobojczykowej w celu pobrania krwi.
- Ocena kryteriów sukcesu pobierania krwi.
- Monitorowanie dobrostanu szczurów podczas procedury.
Główne wyniki
- Z powodzeniem uzyskano wysokiej jakości próbki krwi.
- Metoda okazała się szybka i wydajna.
- Pobieranie krwi odbyło się bez znieczulenia.
- Kryteria udanego pobrania zostały jasno zdefiniowane.
Wnioski
- Opracowany protokół zwiększa efektywność pobierania krwi u szczurów.
- Minimalizuje stres związany ze znieczuleniem.
- Ta metoda może być korzystna w różnych zastosowaniach badawczych wymagających próbek krwi.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Efficient, reproducible blood sampling in conscious rats is critical for high-throughput pharmacokinetic and toxicology studies in drug discovery. The subclavian vein technique enables rapid, high-quality sample collection by a single operator, reducing resource demands and minimizing animal stress. This approach supports scalable study designs and enhances data reliability across preclinical pipelines.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables frequent, minimally invasive sampling for pharmacokinetic and biomarker studies.
- Supports robust data collection for target engagement and exposure-response relationships.
- Reduces confounding variables associated with anesthesia, improving biological signal clarity.
Screening & Assay Development
- Facilitates standardized sample acquisition for downstream bioanalytical assays.
- Improves reproducibility and throughput in compound screening workflows.
- Enables consistent sample quality for assay validation and method development.
Translational & Preclinical Research
- Aligns with translational study designs requiring serial sampling without anesthesia-induced artifacts.
- Supports continuity from discovery through preclinical validation by enabling repeated measures in the same animal.
- Reduces procedural variability, enhancing predictive value for human translation.
Pipeline & Workflow Integration
This subclavian vein sampling method integrates into the preclinical workflow from early discovery through lead optimization and translational studies.
- Discovery Biology: Provides reliable access to blood for pharmacokinetic and biomarker analysis.
- Screening: Ensures sample consistency for high-throughput screening and assay development.
- Analytics: Delivers quantitative, high-quality samples for robust statistical comparison across study arms.
- Translational Research: Supports longitudinal studies and repeated measures in disease models.
- Enterprise Reuse: Offers a scalable, standardized protocol adaptable across research teams and study types.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces biological variability in preclinical studies.
- Operational Value: Streamlines workflows by enabling single-operator, anesthesia-free sampling.
- Strategic Value: Improves study scalability and resource efficiency for large pharmacokinetic programs.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted decision-making with higher quality, reproducible data.
Implementation Considerations
- Requires operator proficiency in rat handling and subclavian vein access.
- Minimal instrumentation needed beyond standard syringes and heparinization supplies.
- Standardization of restraint and sampling technique is essential for reproducibility.
- Adaptable to various rat strains and study designs with appropriate training.
- Sample volume and frequency must align with animal welfare guidelines and study endpoints.
