Name: Oznaczanie 45 pestycydów w odmianach awokado metodą QuEChERS i chromatografią gazową ze spektrometrią mas w tandemie (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-12-08T13:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 20 s
Description: Naucz się oznaczać pestycydy w awokado metodą QuEChERS i chromatografią gazową ze spektrometrią mas w tandemie. Protokół zapewnia niezawodną analizę pozostałości chemicznych w żywności.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Chcielibyśmy podziękować Uniwersytetowi EAN i Uniwersytetowi La Laguna.

1. Przygotowanie zapasów i roztworów roboczych
UWAGA: Ze względów bezpieczeństwa, zaleca się noszenie rękawic nitrylowych, fartucha laboratoryjnego i okularów ochronnych przez cały czas trwania protokołu.
<ol>
	<li>Przygotować indywidualne roztwory podstawowe każdego z 45 dostępnych na rynku wzorców pestycydów (patrz tabela materiałów) o stężeniu około 1000 mg/l w acetonitrylu w kolbach miarowych o pojemności 10 ml.</li>
	<li>Połączyć powyższe roztwory podstawowe, aby przygotować roztwór podstawowy o stężeniu 400 mg/l w acetonitrylu w kolbie miarowej o pojemności 25 ml. 
	UWAGA: Ten zmieszany roztwór zostanie wykorzystany do przygotowania roztworów roboczych do eksperymentów odzyskiwania i kalibracji.</li>
	<li>Przygotować roztwory podstawowe atrazyny-d5 i fosforanu trifenylu (TPP) w stężeniach odpowiednio 750 mg/l i 1050 mg/l w acetonitrylu w kolbach miarowych o pojemności 10 ml. Wykorzystaj atrazynę-d5 jako proceduralny wzorzec wewnętrzny (P-IS) i TPP jako wewnętrzny wzorzec iniekcji (I-IS). 
	UWAGA: Idealny scenariusz obejmowałby wykorzystanie izotopowo znakowanego wzorca wewnętrznego dla każdego konkretnego analitu docelowego.</li>
	<li>Przygotować roztwory odzysku w acetonitrylu zawierające 0,05% (v/v) kwasu mrówkowego (w celu zapobieżenia degradacji) w kolbach miarowych o pojemności 10 ml, aby uzyskać oddzielnie 10, 100 i 400 μg/kg ekwiwalentu próbki dla pestycydów i 200 μg/kg dla P-IS. Roztwory te należy przechowywać w fiolkach ze szkła bursztynowego w ciemności w temperaturze -20 °C.</li>
	<li>Przygotować roztwory kalibracyjne pestycydów i P-IS razem w acetonitrylu z 0,05% (v/v) kwasu mrówkowego w kolbach miarowych o pojemności 10 ml, aby uzyskać odpowiednio 5, 10, 25, 75, 200, 400 i 600 μg/kg i 200 ng/ng, a następnie przechowywać je w fiolkach ze szkła bursztynowego w ciemności w temperaturze -20 °C. 
	UWAGA: Te same roztwory mogą być używane przez cały czas trwania prac eksperymentalnych, ale niezbędne jest przechowywanie ich w określonych warunkach bezpośrednio po każdym użyciu.</li>
	<li>Przygotować mieszaninę analitowych środków ochronnych zawierającą 100 g/l 3-etoksy-1,2-propanodiolu, 10 g/l kwasu L-gulonowego γ-laktonu, 10 g/l D-sorbitolu i 5 g/l kwasu szikimowego w stosunku 4/1 (v/v) acetonitrylu do wody z 0,5% (v/v) kwasu mrówkowego. 
	UWAGA: Ta mieszanina analitowych środków ochronnych należy dodać tuż przed wstrzyknięciem w celu złagodzenia ME.</li>
</ol>
2. Pobieranie próbek
<ol>
	<li>Zbierz próbki z trzech gatunków awokado (np. Criollo, Hass i Lorena) dostępnych w supermarketach. Upewnij się, że każda próbka waży około 1 kg, co jest wystarczające do przeprowadzenia wszystkich kolejnych badań i jest zgodne z dyrektywą 2002/63/CE21. 
	UWAGA: Próbki organiczne zostały preferencyjnie wyselekcjonowane, aby zminimalizować prawdopodobieństwo obecności pozostałości pestycydów.</li>
	<li>Pobrane próbki awokado należy przetransportować do laboratorium i poddać je indywidualnej homogenizacji bez rurki za pomocą rozdrabniacza (patrz Tabela materiałów). Homogenizowane próbki należy przechowywać w pojemnikach ze szkła oranżowego w temperaturze 4 °C do czasu analizy. 
	UWAGA: Te same próbki awokado będą wykorzystywane przez cały czas trwania badania. Dlatego tak ważne jest, aby przechowywać je w określonych warunkach bezpośrednio po każdym użyciu.</li>
</ol>
3. Przygotowanie próbki metodą QuEChERS z mrówczanem amonu
UWAGA: Rysunek 1 ilustruje schematyczne przedstawienie metody QuEChERS z mrówczanem amonu.
<ol>
	<li>Odważyć 5 g każdej próbki awokado w probówce wirówkowej o pojemności 50 ml (patrz tabela materiałów).</li>
	<li>Dodać 50 μl roztworu P-IS do uzyskania stężenia 200 μg/kg. W celu oceny odzysku należy również dodać roztwory pestycydów przygotowane w kroku 1.4, aby uzyskać stężenia 10, 100 i 400 μg/kg (n = 5 każdy).</li>
	<li>Wirować probówkę przez 30 sekund, aby zapewnić dokładne zintegrowanie kolca z próbką.</li>
	<li>Dodać 10 ml acetonitrylu do probówki wirówkowej. Potrząsaj probówką z prędkością 70 obr./min przez 5 minut.</li>
	<li>Dodać 2,5 g mrówczanu amonu, ponownie wstrząsnąć probówką z prędkością 70 obr./min przez 5 minut, a następnie odwirować ją przy 1 800 × g przez 5 min.</li>
	<li>Do probówki wirówkowej o pojemności 2 ml zawierającej 150 mg bezwodnegoMgSO4, 50 mg pierwszorzędowo-drugorzędowej aminy (PSA), 50 mg oktadecylosilanu (C18), 10 mg grafityzowanej sadzy (GCB) i 60 mg sorbentu Z-Sep+ na bazie tlenku cyrkonu dodać 1 ml ekstraktu do oczyszczania za pomocą ekstrakcji do dyspersyjnej fazy stałej (d-SPE). Wirować probówkę przez 30 s i odwirowywać ją przy 1 800 × g przez 5 minut.</li>
	<li>Przenieść 200 μl ekstraktu do fiolki z automatycznym samplerem, dodać 20 μl roztworu środka ochronnego analitu przygotowanego w kroku 1.6 i dodać 50 μl roztworu TPP.</li>
	<li>Przeprowadzić analizę instrumentalną przy użyciu systemu GC-MS/MS (patrz rozdział 4).</li>
	<li>Przeprowadzić kalibrację dopasowaną do matrycy, postępując zgodnie z tą samą procedurą, jak opisano powyżej, przy użyciu ekstraktów ślepej próby, z wyjątkiem etapu d-SPE (krok 3.6), oczyszczenia 5 ml supernatantu w probówkach o pojemności 15 ml. Dodaj roztwory kolca i P-IS w kroku 3.7. Dodać roztwory wzorcowe do kalibracji do fiolki z automatycznym samplerem, aby uzyskać 5, 10, 25, 50, 100, 200, 400 i 600 μg/kg wraz z TPP, co daje końcową objętość 270 μl. 
	UWAGA: Ogólnie rzecz biorąc, należy skonstruować krzywe kalibracyjne dopasowane do matrycy dla każdej odmiany awokado oraz kalibracje tylko acetonitrylu.</li>
</ol>
4. Analiza instrumentalna z użyciem GC-MS/MS
<ol>
	<li>Analizy należy przeprowadzać przy użyciu systemu GC-MS/MS z potrójnym kwadrupolem (TQ) wyposażonym w interfejs jonizacji elektronów (−70 eV) i automatyczny podajnik próbek (patrz tabela materiałów).</li>
	<li>Zastosuj kolumnę MS GC (spoiwo krzemionkowe o długości 30 m, średnicy wewnętrznej 0,25 mm, grubości warstwy 0,25 μm) wraz z helem o ultrawysokiej czystości jako gazem nośnym przy stałym natężeniu przepływu 1,2 ml / min.</li>
	<li>Przed przystąpieniem do pracy urządzenia sprawdź następujące parametry:
	<ol>
		<li>Upewnij się, że ciśnienie gazu jest prawidłowe: hel przy 140 psi i argon przy 65 psi.</li>
		<li>Sprawdź stan oleju w pompie rotacyjnej, aby upewnić się, że jest czysty i na odpowiednim poziomie.</li>
		<li>Upewnić się, że strzykawka do wstrzykiwań nie ma żadnych przeszkód powstałych w wyniku poprzednich wstrzyknięć.</li>
		<li>Upewnić się, że fiolki do płukania zawierają wystarczającą ilość każdego rozpuszczalnika.</li>
		<li>Sprawdź, czy licznik materiałów eksploatacyjnych (przegroda, wkładka) nie osiągnął swojego limitu.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Włącz główny przełącznik GC znajdujący się na panelu przednim i włącz przełącznik MS znajdujący się z tyłu.</li>
	<li>Otwórz oprogramowanie GCMS Real Time Analysis, które steruje wszystkimi parametrami systemu GC-MS/MS. 
	UWAGA: System instrumentów domyślnie zawiera oprogramowanie GCMS Real Time Analysis.</li>
	<li>Kliknij Kontrola podciśnienia | Zaawansowany | Pompa rotacyjna 1 do inicjowania systemu próżniowego. 
	UWAGA: W tym oknie monitoruj ciśnienie, aby określić optymalne wartości podciśnienia, które powinny być niższe niż 9.0 Pa. Zajmie to około 12 godzin.</li>
	<li>Kliknij Start, aby włączyć turbo pompę molekularną 1 i turbo pompę molekularną 2.</li>
	<li>Kliknij Start, aby wyświetlić opcję nagrzewnicy jonowej. 
	UWAGA: Po zalecanym czasie 1 godziny sprawdź podciśnienie w systemie, aby upewnić się, że zalecana wartość jest niższa niż 1.6e-3 Pa.</li>
	<li>Ustaw temperaturę interfejsu MS na 250 °C, a temperaturę źródła jonów na 300 °C.</li>
	<li>Utrzymuj piec GC w temperaturze początkowej 50 °C przez 1 minutę, a następnie zwiększ ją do 180 °C z szybkością 25 °C/min. Następnie zwiększyć temperaturę do 230 °C przy 5 °C/min, a następnie do 290 °C przy 25 °C/min. Na koniec utrzymuj stałą temperaturę 290 °C przez 6 minut. Całkowity czas analizy to 24,6 min.</li>
	<li>Kliknij Zamknij, gdy wszystkie te systemy zostaną włączone.</li>
	<li>Kliknij opcję Strojenie w oprogramowaniu do analizy i kliknij Peak Monitor View, aby przeprowadzić wstępną weryfikację warunków spektrometru mas. 
	UWAGA: W razie potrzeby wykonaj automatyczne dostrajanie.</li>
	<li>Kliknij Przejęcie, a następnie w wyświetlonym oknie kliknij Pobierz parametry początkowe. Sprawdź, czy sprzęt jest gotowy GC i gotowy MS.</li>
</ol>
5. Akwizycja danych
<ol>
	<li>Kliknij Nowy plik wsadowy w oprogramowaniu i utwórz sekwencję zawierającą informacje, takie jak nazwa próbki, identyfikator próbki, plik metody, plik danych, objętość wtrysku i plik strojenia. W razie potrzeby dodaj wiersze i kliknij Zapisz.</li>
	<li>Kliknij Batch Start i poczekaj, aby rozpoczął się proces wstrzykiwania.</li>
	<li>Wykonać iniekcję w temperaturze 250 °C w trybie bez podziału, utrzymując objętość wstrzyknięcia wynoszącą 1 μl. Po upływie 1 minuty od wstrzyknięcia należy otworzyć szczepionkę split. 
	UWAGA: Pomiędzy wstrzyknięciami należy oczyścić strzykawkę o pojemności 10 μl metanolem, octanem etylu i acetonitrylem, używając jednego płukania każdym rozpuszczalnikiem. Wszystkie wstrzyknięcia wykonuje się w trzech egzemplarzach.</li>
	<li>Analizuj anality w trybie monitorowania reakcji wielokrotnych (MRM), który jest standardowym trybem stosowanym w systemach MS/MS z TQ. 
	UWAGA: Tabela 1 przedstawia czasy retencji (w min) oraz przejścia kwantyfikatora i kwalifikatora dla pestycydów wieloklasowych, P-IS i I-IS. Analiza ilościowa opiera się na stosunku powierzchni piku jonu oznaczającego ilościowo do jonu P-IS. I-IS służy do kontroli jakości podczas iniekcji. Plik uzupełniający 1 zawiera chromatogramy dla wszystkich 45 analizowanych pestycydów.</li>
	<li>Otwórz oprogramowanie do analizy postrun w celu analizy danych. 
	UWAGA: System przyrządów domyślnie zawiera oprogramowanie GCMS Postrun Analysis.</li>
	<li>Kliknij na wstrzyknięcie, które chcesz przeanalizować, przejdź przez tabelę zawierającą anality i wybierz interesujący nas pik.</li>
	<li>Kliknij pik lub obszar zainteresowania, aby wyświetlić chromatogram. Przejrzyj szczytowe integracje i w razie potrzeby przeprowadź integrację ręczną. Zweryfikuj obszary wszystkich analitów, aby wykonać niezbędne obliczenia i ocenę metody.</li>
</ol>

Analyzing Pesticides in Avocado Using the QuEChERS Method and CG-MS/MS

<ol><li>Raposo, F., Barceló, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Challenges+and+strategies+of+matrix+effects+using+chromatography-mass+spectrometry%3A+An+overview+from+research+versus+regulatory+viewpoints%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Analyt+Chem%22%5BJournal%5D)">Challenges and strategies of matrix effects using chromatography-mass spectrometry: An overview from research versus regulatory viewpoints.</a> Trends Analyt Chem. 134, 116068(2021).</li>
<li>Rahman, M. M., Abd El-Aty, A. M., Shim, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix+enhancement+effect%3A+a+blessing+or+a+curse+for+gas+chromatography%3F-A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">Matrix enhancement effect: a blessing or a curse for gas chromatography?-A review.</a> Anal Chim Acta. 801, 14-21 (2013).</li>
<li>Poole, C. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Matrix-induced+response+enhancement+in+pesticide+residue+analysis+by+gas+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Matrix-induced response enhancement in pesticide residue analysis by gas chromatography.</a> J Chromatogr A. 1158 (1-2), 241-250 (2007).</li>
<li>Anastassiades, M., Maštovská, K., Lehotay, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+analyte+protectants+to+improve+gas+chromatographic+analysis+of+pesticides%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Evaluation of analyte protectants to improve gas chromatographic analysis of pesticides.</a> J Chromatogr A. 1015 (1-2), 163-184 (2003).</li>
<li>Trufelli, H., Palma, P., Famiglini, G., Cappiello, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+matrix+effects+in+liquid+chromatography-mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Mass+Spectrom+Reviews%22%5BJournal%5D)">An overview of matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry.</a> Mass Spectrom Reviews. 30 (3), 491-509 (2011).</li>
<li>European Commission SANTE/11312/2021. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidance+document+on+analytical+quality+control+and+method+validation+procedures+for+pesticide+residues+analysis+in+food+and+feed%5BTitle%5D)+AND+%22European+Commission%22%5BJournal%5D)">Guidance document on analytical quality control and method validation procedures for pesticide residues analysis in food and feed.</a> European Commission. , (2021).</li>
<li>Kwon, H., Lehotay, S. J., Geis-Asteggiante, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Variability+of+matrix+effects+in+liquid+and+gas+chromatography-mass+spectrometry+analysis+of+pesticide+residues+after+QuEChERS+sample+preparation+of+different+food+crops%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Variability of matrix effects in liquid and gas chromatography-mass spectrometry analysis of pesticide residues after QuEChERS sample preparation of different food crops.</a> J Chromatogr A. 1270, 235-245 (2012).</li>
<li>Lehotay, S. J., Maštovská, K., Yun, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+two+fast+and+easy+methods+for+pesticide+residue+analysis+in+fatty+food+matrixes%5BTitle%5D)+AND+%22J+AOAC+Int%22%5BJournal%5D)">Evaluation of two fast and easy methods for pesticide residue analysis in fatty food matrixes.</a> J AOAC Int. 88 (2), 630-638 (2005).</li>
<li>González-Curbelo, M. Á, González-Sálamo, J., Varela-Martínez, D. A., Hernández-Borges, J. Analysis of pesticide residues in pollen and dairy products. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGonz%C3%A1lez-Curbelo%2C+M%C3%81+%22Sustainable+Agriculture+Reviews+47%22">Sustainable Agriculture Reviews 47</a>. 47, Cham: Springer International Publishing. 47-89 (2020).</li>
<li>Madej, K., Kalenik, T. K., Piekoszewski, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sample+preparation+and+determination+of+pesticides+in+fat-containing+foods%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Sample preparation and determination of pesticides in fat-containing foods.</a> Food Chem. 269, 527-541 (2018).</li>
<li>Yanty, N. A. M., Marikkar, J. M. N., Long, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+varietal+differences+on+composition+and+thermal+characteristics+of+avocado+oil%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Oil+Chem+Soc%22%5BJournal%5D)">Effect of varietal differences on composition and thermal characteristics of avocado oil.</a> J Am Oil Chem Soc. 88, 1997-2003 (2011).</li>
<li>Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Muniz-Valencia, R., Gonzalez, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+and+assessment+of+matrix+effect+and+uncertainty+of+a+gas+chromatography+coupled+to+mass+spectrometry+method+for+pesticides+in+papaya+and+avocado+samples%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Drug+Anal%22%5BJournal%5D)">Validation and assessment of matrix effect and uncertainty of a gas chromatography coupled to mass spectrometry method for pesticides in papaya and avocado samples.</a> J Food Drug Anal. 25 (3), 501-509 (2017).</li>
<li>Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Jurado, J. M., Aguayo-Villarreal, I. A., Muñiz-Valencia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analytical+method+for+pesticides+in+avocado+and+papaya+by+means+of+ultra-high+performance+liquid+chromatography+coupled+to+a+triple+quadrupole+mass+detector%3A+Validation+and+uncertainty+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22J+Food+Sci%22%5BJournal%5D)">Analytical method for pesticides in avocado and papaya by means of ultra-high performance liquid chromatography coupled to a triple quadrupole mass detector: Validation and uncertainty assessment.</a> J Food Sci. 83 (8), 2265-2272 (2018).</li>
<li>Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Gonzalez, J., Jurado, J. M., Muñiz-Valencia, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Supercritical+fluid+chromatography+with+photodiode+array+detection+for+pesticide+analysis+in+papaya+and+avocado+samples%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sep+Sci%22%5BJournal%5D)">Supercritical fluid chromatography with photodiode array detection for pesticide analysis in papaya and avocado samples.</a> J Sep Sci. 38 (7), 1240-1247 (2015).</li>
<li>Lozano, A., Rajski, Ł, Uclés, S., Belmonte-Valles, N., Mezcua, M., Fernández-Alba, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+zirconium+dioxide-based+sorbents+to+decrease+the+matrix+effect+in+avocado+and+almond+multiresidue+pesticide+analysis+followed+by+gas+chromatography+tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Talanta%22%5BJournal%5D)">Evaluation of zirconium dioxide-based sorbents to decrease the matrix effect in avocado and almond multiresidue pesticide analysis followed by gas chromatography tandem mass spectrometry.</a> Talanta. 118, 68-83 (2014).</li>
<li>Han, L., Matarrita, J., Sapozhnikova, Y., Lehotay, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+a+recent+product+to+remove+lipids+and+other+matrix+co-extractives+in+the+analysis+of+pesticide+residues+and+environmental+contaminants+in+foods%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Evaluation of a recent product to remove lipids and other matrix co-extractives in the analysis of pesticide residues and environmental contaminants in foods.</a> J Chromatogr A. 1449, 17-29 (2016).</li>
<li>Chamkasem, N., Ollis, L. W., Harmon, T., Lee, S., Mercer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+136+pesticides+in+avocado+using+a+modified+QuEChERS+method+with+LC-MS%2FMS+and+GC-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22J+Agric+Food+Chem%22%5BJournal%5D)">Analysis of 136 pesticides in avocado using a modified QuEChERS method with LC-MS/MS and GC-MS/MS.</a> J Agric Food Chem. 61 (10), 2315-2329 (2013).</li>
<li>Rajski, Ł, Lozano, A., Uclés, A., Ferrer, C., Fernández-Alba, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Determination+of+pesticide+residues+in+high+oil+vegetal+commodities+by+using+various+multi-residue+methods+and+clean-ups+followed+by+liquid+chromatography+tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Determination of pesticide residues in high oil vegetal commodities by using various multi-residue methods and clean-ups followed by liquid chromatography tandem mass spectrometry.</a> J Chromatogr A. 1304, 109-120 (2013).</li>
<li>Hernández-Borges, J., Ravelo-Pérez, L. M., Hernández-Suárez, E. M., Carnero, A., Rodríguez-Delgado, M. Á <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+abamectin+residues+in+avocados+by+high-performance+liquid+chromatography+with+fluorescence+detection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Analysis of abamectin residues in avocados by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection.</a> J Chromatogr A. 1165 (1-2), 52-57 (2007).</li>
<li>Moreno, J. F., Liébanas, F. A., Frenich, A. G., Vidal, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+different+sample+treatments+for+determining+pesticide+residues+in+fat+vegetable+matrices+like+avocado+by+low-pressure+gas+chromatography-tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Evaluation of different sample treatments for determining pesticide residues in fat vegetable matrices like avocado by low-pressure gas chromatography-tandem mass spectrometry.</a> J Chromatogr A. 1111 (1), 97-105 (2006).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Commission+Directive+2002%2F63%2FEC+of+11+July+2002+establishing+Community+methods+of+sampling+for+the+official+control+of+pesticide+residues+in+and+on+products+of+plant+and+animal+origin+and+repealing+Directive+79%2F700%2FEEC%5BTitle%5D)+AND+%22Official+Journal+of+the+European+Union%22%5BJournal%5D)">Commission Directive 2002/63/EC of 11 July 2002 establishing Community methods of sampling for the official control of pesticide residues in and on products of plant and animal origin and repealing Directive 79/700/EEC.</a> Official Journal of the European Union. L187, 30-43 (2002).</li>
<li><a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((European+Regulation%2C+396%2F2005%2C+Regulation+%28EC%29+NO+396%2F2005+of+the+European+Parliament+and+of+the+Council+of+23+February+2005+on+maximum+residue+levels+of+pesticides+in+or+on+food+and+feed+of+plant+and+animal+origin+and+amending+Council+Directive+91%2F414%2FEEC%5BTitle%5D)+AND+%22Official+Journal+of+the+European+Union%22%5BJournal%5D)">European Regulation, 396/2005, Regulation (EC) NO 396/2005 of the European Parliament and of the Council of 23 February 2005 on maximum residue levels of pesticides in or on food and feed of plant and animal origin and amending Council Directive 91/414/EEC.</a> Official Journal of the European Union. L70, 1-16 (2005).</li>
<li>González-Curbelo, M. Á, Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J. Validation of a modified QuEChERS version for high-throughput analysis of a wide range of pesticides in foods. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGonz%C3%A1lez-Curbelo%2C+M%C3%81+%22Abstracts+of+Papers+of+the+American+Chemical+Society%22">Abstracts of Papers of the American Chemical Society</a>. 246, American Chemical Society. Washington D.C., USA. (2013).</li>
<li>González-Curbelo, M. Á, Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J., Rodríguez Delgado, J. Ammonium formate buffer in QuEChERS for high throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure GC-MS/MS and LC-MS/MS. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aGonz%C3%A1lez-Curbelo%2C+M%C3%81+%22Abstracts+of+Papers+of+the+American+Chemical+Society%22">Abstracts of Papers of the American Chemical Society</a>. 248, American Chemical Society. Washington D.C., USA. (2014).</li>
<li>González-Curbelo, M. Á, Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J., Rodríguez-Delgado, M. Á <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Use+of+ammonium+formate+in+QuEChERS+for+high-throughput+analysis+of+pesticides+in+food+by+fast%2C+low-pressure+gas+chromatography+and+liquid+chromatography+tandem+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Use of ammonium formate in QuEChERS for high-throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure gas chromatography and liquid chromatography tandem mass spectrometry.</a> J Chromatogr A. 1358, 75-84 (2014).</li>
<li>Varela-Martínez, D. A., González-Sálamo, J., González-Curbelo, M. Á, Quick Hernández-Borges, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quick%2C+easy%2C+cheap%2C+effective%2C+rugged%2C+and+safe+%28QuEChERS%29+extraction%5BTitle%5D)+AND+%22Handbooks+in+Separation+Science%22%5BJournal%5D)">Quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe (QuEChERS) extraction.</a> Handbooks in Separation Science. , Elsevier. Amsterdam, the Netherlands. 399-437 (2020).</li>
<li>González-Curbelo, M. Á <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+organochlorine+pesticides+in+a+soil+sample+by+a+modified+QuEChERS+approach+using+ammonium+formate%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Analysis of organochlorine pesticides in a soil sample by a modified QuEChERS approach using ammonium formate.</a> J Vis Exp. 191, e64901(2023).</li>
<li>González-Curbelo, M. Á, Dionis-Delgado, S., Asensio-Ramos, M., Hernández-Borges, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pesticide+analysis+in+toasted+barley+and+chickpea+flours%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sep+Sci%22%5BJournal%5D)">Pesticide analysis in toasted barley and chickpea flours.</a> J Sep Sci. 35 (2), 299-307 (2012).</li>
<li>Varela-Martínez, D. A., González-Curbelo, M. Á, González-Sálamo, J., Hernández-Borges, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High-throughput+analysis+of+pesticides+in+minor+tropical+fruits+from+Colombia%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Chem%22%5BJournal%5D)">High-throughput analysis of pesticides in minor tropical fruits from Colombia.</a> Food Chem. 280, 221-230 (2019).</li>
<li>Li, L., Li, W., Qin, D. M., Jiang, S. R., Liu, F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+graphitized+carbon+black+to+the+QuEChERS+method+for+pesticide+multiresidue+analysis+in+spinach%5BTitle%5D)+AND+%22J+AOAC+Int%22%5BJournal%5D)">Application of graphitized carbon black to the QuEChERS method for pesticide multiresidue analysis in spinach.</a> J AOAC Int. 92 (2), 538-547 (2009).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Podstawowe ograniczenie związane z kalibracją dopasowaną do matrycy wynika z zastosowania ślepych próbek jako wzorców kalibracji. Prowadzi to do zwiększenia liczby próbek do przetworzenia do analizy i zwiększonego wstrzykiwania składników matrycy w każdej sekwencji analitycznej, co potencjalnie prowadzi do wyższych wymagań w zakresie konserwacji urządzeń. Niemniej jednak strategia ta jest bardziej odpowiednia niż dodawanie wzorca, które wygenerowałoby znacznie większą liczbę próbek do wstrzyknięcia ze względu na konieczn...

W analizie chemicznej, efekt matrycy (ME) może być definiowany na różne sposoby, ale powszechnie akceptowana ogólna definicja jest następująca: odnosi się do zmiany sygnału, szczególnie zmiany nachylenia krzywej kalibracyjnej, gdy matryca próbki lub jej część jest obecna podczas analizy określonego analitu. Jako krytyczny aspekt, ME wymaga dokładnego zbadania podczas procesu walidacji dowolnej metody analitycznej, ponieważ bezpośrednio wpływa na dokładność pomiaru ilościowego dla docelowych analitów1. Idealnie byłoby, gdyby procedura wstępnej obróbki próbki była na tyle selektywna, aby uniknąć ekstrakcji jakichkolwiek składników z matrycy próbki. Jednak pomimo znacznych wysiłków, wiele z tych składników matrycy nadal w większości przypadków trafia do ostatecznych systemów oznaczania. W związku z tym takie komponenty macierzy często pogarszają wartości odzysku i precyzji, wprowadzają dodatkowy szum oraz zwiększają ogólne koszty i nakład pracy związany z metodą.
W chromatografii gazowej (GC), ME powstaje z powodu obecności aktywnych miejsc w systemie GC, które oddziałują z docelowymi analitami poprzez różne mechanizmy. Z jednej strony, składniki matrycy blokują lub maskują te aktywne miejsca, które w przeciwnym razie oddziaływałyby z docelowymi analitami, co skutkuje częstym wzmocnieniem sygnału2. Z drugiej strony, miejsca aktywne, które pozostają niezakłócone, mogą powodować ogonowanie pików lub rozkład analitu z powodu silnych oddziaływań, co prowadzi do ujemnego ME. Jednak w niektórych przypadkach może to przynieść potencjalne korzyści2. Należy podkreślić, że osiągnięcie całkowitej bezwładności w systemie GC jest niezwykle trudne, pomimo stosowania wysoce obojętnych komponentów i właściwej konserwacji. Przy ciągłym użytkowaniu akumulacja składników matrycy w systemie GC staje się bardziej wyraźna, powodując wzrost ME. Obecnie powszechnie uznaje się, że anality zawierające tlen, azot, fosfor, siarkę i podobne pierwiastki wykazują większe ME, ponieważ łatwo oddziałują z tymi miejscami aktywnymi. I odwrotnie, wysoce stabilne związki, takie jak węglowodory lub chlorowce organiczne, nie ulegają takim interakcjom i nie wykazują obserwowalnego ME podczas analizy2,3.
Ogólnie rzecz biorąc, ME nie może być całkowicie wyeliminowane, co prowadzi do opracowania kilku strategii kompensacji lub korekty, gdy całkowite usunięcie składników matrycy nie jest możliwe. Wśród tych strategii, wykorzystanie deuterowanych wzorców wewnętrznych (IS), środków ochronnych analitu, kalibracja dopasowana do matrycy, metoda dodawania wzorca lub modyfikacja technik wtrysku zostały udokumentowane w literaturze naukowej1,2,4,5. Wytyczne SANTE/11312/2021 również zalecają następujące strategie6.
Jeśli chodzi o zastosowanie kalibracji dopasowanej matrycowo do kompensacji MEs, sekwencje próbek w praktycznych sytuacjach obejmują różne rodzaje żywności lub różne próbki z tego samego towaru. W tym przypadku zakłada się, że użycie dowolnej próbki z tego samego towaru skutecznie skompensuje ME we wszystkich próbkach. Jednak w istniejącej literaturze brakuje wystarczających badań, które konkretnie badałyby ten problem7.
Oznaczanie wielu pozostałości pestycydów w matrycach zawierających znaczny procent tłuszczu i pigmentów stanowi wyzwanie dla zadania. Znaczna ilość współekstrahowanego materiału może znacząco wpłynąć na wydajność ekstrakcji i zakłócić późniejsze oznaczenie chromatograficzne, potencjalnie uszkadzając kolumnę, źródło i detektor, a także powodując znaczne MEs8,9,10. W związku z tym analiza pestycydów na śladowych poziomach w takich matrycach wymaga znacznego zmniejszenia składników matrycy przed analizą, zapewniając jednocześnie wysokie wartości odzysku7. Uzyskanie wysokich wartości odzysku ma kluczowe znaczenie dla zapewnienia, że analizy pestycydów pozostaną wiarygodne, dokładne i zgodne z normami regulacyjnymi. Ma to zasadnicze znaczenie dla zapewnienia bezpieczeństwa żywności, ochrony środowiska i świadomego podejmowania decyzji w rolnictwie i dziedzinach pokrewnych.
Awokado to owoc o wysokiej wartości handlowej, uprawiany w klimacie tropikalnym i śródziemnomorskim na całym świecie i powszechnie spożywany zarówno w regionach pochodzenia, jak i na licznych rynkach eksportowych. Z analitycznego punktu widzenia awokado jest złożoną matrycą zawierającą znaczną liczbę kwasów tłuszczowych (tj. oleinowego, palmitynowego i linolowego), podobnie jak orzechy, znaczną zawartość pigmentu, jak w zielonych liściach, a także cukry i kwasy organiczne, podobne do tych znajdujących się w innych owocach11. Ze względu na jego tłusty charakter należy zwrócić szczególną uwagę przy stosowaniu jakiejkolwiek metody analitycznej do analizy. Podczas gdy analiza pozostałości pestycydów została przeprowadzona na awokado przy użyciu GC-MS w niektórych przypadkach8,12,13,14,15,16,17,18,19,20, występuje stosunkowo rzadziej w porównaniu z innymi matrycami. W większości przypadków zastosowano wersję metody Qu ick-E asy-Cheap-E effective-R ugged-S afe (QuEChERS)8,12,13,14,15,16,17,18. Żadne z tych badań nie badało konsystencji ME wśród różnych odmian awokado.
Dlatego celem tej pracy było zbadanie spójności ME i wartości odzysku dla 45 reprezentatywnych pestycydów w różnych odmianach awokado (tj. Criollo, Hass i Lorena) przy użyciu metody QuEChERS z mrówczanem amonu i GC-MS/MS. Zgodnie z naszą najlepszą wiedzą, jest to pierwszy raz, kiedy tego typu badanie zostało przeprowadzone na takich próbkach matrycy tłuszczowej.

<table><tbody><tr><td>3-Ethoxy-1,2-propanodiol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>260428-1G</td><td></td></tr><tr><td>Acetonitryl</td><td>Merk</td><td>1006652500</td><td></td></tr><tr><td>Mrówczan amonu</td><td>Sigma Aldrich</td><td>156264-1KG</td><td></td></tr><tr><td>AOAC 20i/s Automatyczny podajnik</td> próbek <td>Shimadzu</td><td>221-723115-58</td><td></td></tr><tr><td>MX-T6-PRO</td><td>SCILOGEX</td><td>8.23222E+11</td><td></td></tr><tr><td>Balance</td><td>OHAUS</td><td>PA224</td><td></td></tr><tr><td>Probówki wirówkowe, 15 ml</td><td>Nest</td><td>601002</td><td></td></tr><tr><td>Probówki wirówkowe, 2 ml</td><td>Eppendorf</td><td>4610-1815</td><td></td></tr><tr><td>Probówki wirówkowe, 50 mL</td><td>Gniazdo</td><td>602002</td><td></td></tr><tr><td>Wirówka Z206A</td><td>MERMLE</td><td>6019500118</td><td></td></tr><tr><td>Choper 2L</td><td>Oster</td><td>2114111</td><td></td></tr><tr><td>Kolumna SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0,25 mm, 0,25 i mikro; m</td><td>Shimadzu</td><td>221-75954-30</td><td>Kolumna MS GC&nbsp;</td></tr><tr><td>Dozownik 5-50 mL</td><td>BRAND</td><td>4600361</td><td></td></tr><tr><td>DSC-18</td><td>Sigma Aldrich</td><td>52600-U</td><td></td></tr><tr><td>D-Sorbitol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>240850-5G</td><td></td></tr><tr><td>Octan etylu</td><td>Merk</td><td>1313181212</td><td></td></tr><tr><td>GCMS-TQ8040&nbsp;</td><td>Shimadzu</td><td>211552</td><td></td></tr><tr><td>Grafitowana sadza</td><td>Sigma Aldrich</td><td>57210-U</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka iniekcyjna</td><td>Shimadzu</td><td>LC2213461800</td><td></td></tr><tr><td>Kwas L-Gulonowy &gamma;-lakton</td><td>Sigma Aldrich</td><td>310301-5G</td><td></td></tr><tr><td>Linner splitless</td><td>Shimadzu</td><td>221-4887-02</td><td></td></tr><tr><td>Siarczan magnezu anhydrus</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M7506-2KG</td><td></td></tr><tr><td>Metanol</td><td>Panreac</td><td>131091.12.12</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q ultraczysta (typ 1) woda</td><td>Milipore</td><td>F4H4783518</td><td></td></tr><tr><td>Końcówki do pipet 10 - 100 i mikro; L</td><td>Biologix</td><td>200010</td><td></td></tr><tr><td>Końcówki do pipet 100 - 1000 &mikro; L</td><td>Marka</td><td>541287</td><td></td></tr><tr><td>Końcówki do pipet 20 - 200 i mikro; L</td><td>Marka</td><td>732028</td><td></td></tr><tr><td>Pipety Pasteur</td><td>NORMAX</td><td>5426023</td><td></td></tr><tr><td>Pippette Transferpette S variabel 10 - 100 &micro; L</td><td>BRAND</td><td>704774</td><td></td></tr><tr><td>Pippette Transferpette S variabel 100 - 1000 &micro; L</td><td>BRAND</td><td>704780</td><td></td></tr><tr><td>Pippette Transferpette S variabel 20 - 200 &micro; L</td><td>SCILOGEX</td><td>7.12111E+11</td><td></td></tr><tr><td>Amina pierwszorzędowo-drugorzędowa</td><td>Sigma Aldrich</td><td>52738-U</td><td></td></tr><tr><td>Kwas szikimowy</td><td>Sigma Aldrich</td><td>S5375-1G</td><td></td></tr><tr><td>Filtr strzykawkowy PTFE/L 25 mm, 0,45 &mikro; m</td><td>NORMAX</td><td>FE2545I</td><td></td></tr><tr><td>Fosforan trifenylu (QC)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>241288-50G</td><td></td></tr><tr><td>Fiolki z wtopioną wkładką</td><td>Sigma Aldrich</td><td>29398-U</td><td></td></tr><tr><td>Z-SEP+</td><td>Sigma Aldrich</td><td>55299-U</td><td>sorbent na bazie tlenku cyrkonu</td></tr><tr><td><silny>Pestycydy</td><td></td><td></td><td>numer w rejestrze CAS</td></tr><tr><td>4,4&acute;-DDD</td><td>Sigma Aldrich</td><td>35486-250MG</td><td>72-54-8</td></tr><tr><td>4,4&acute;-DDE</td><td>Sigma Aldrich</td><td>35487-100MG</td><td>72-55-9</td></tr><tr><td>4,4&acute;-DDT</td><td>Sigma Aldrich</td><td>31041-100MG</td><td>50-29-3</td></tr><tr><td>Alachlor</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45316-250MG</td><td>15972-60-8</td></tr><tr><td>Aldrin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36666-25MG</td><td>309-00-2</td></tr><tr><td>Atrazyna</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45330-250MG-R</td><td>1912-24-9</td></tr><tr><td>Atrazyna-D5 (IS)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>34053-10MG-R</td><td>163165-75-1</td></tr><tr><td>Buprofezin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>37886-100MG</td><td>69327-76-0</td></tr><tr><td>Karbofuran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32056-250-MG</td><td>1563-66-2</td></tr><tr><td>Chloroprofam</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45393-250MG</td><td>101-21-3</td></tr><tr><td>Chloropiryfos</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45395-100MG</td><td>2921-88-2</td></tr><tr><td>Chloropiryfos metylowy</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45396-250MG</td><td>5598-13-0</td></tr><tr><td>Deltametryna</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45423-250MG</td><td>52918-63-5</td></tr><tr><td>Dichloran</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45435-250MG</td><td>99-30-9</td></tr><tr><td>Dichlorfos</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45441-250MG</td><td>62-73-7</td></tr><tr><td>Dieldrin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>33491-100MG-R</td><td>60-57-1</td></tr><tr><td>Difenyloamina</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45456-250MG</td><td>122-39--4</td></tr><tr><td>Endosulfan A</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32015-250MG</td><td>115-29-7</td></tr><tr><td>Endrin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32014-250MG</td><td>72-20-8</td></tr><tr><td>EPN</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36503-100MG</td><td>2104-64-5</td></tr><tr><td>Esfenvalerat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>46277-100MG</td><td>66230-04-4</td></tr><tr><td>Ethion</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45477-250MG</td><td>563-12-2</td></tr><tr><td>Fenamifos</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45483-250MG</td><td>22224-92-6</td></tr><tr><td>Fenitrothion</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45487-250MG</td><td>122-14-5</td></tr><tr><td>Fenthion</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36552-250MG</td><td>55-38-9</td></tr><tr><td>Fenwalerat</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45495-250MG</td><td>51630-58-1</td></tr><tr><td>HCB</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45522-250MG</td><td>118-74-1</td></tr><tr><td>Iprodione</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36132-100MG</td><td>36734-19-7</td></tr><tr><td>Lindan</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45548-250MG</td><td>58-89-9</td></tr><tr><td>Malation</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36143-100MG</td><td>121-75-5</td></tr><tr><td>Metalaxyl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32012-100MG</td><td>57837-19-1</td></tr><tr><td>Methidation</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36158-100MG</td><td>950-37-8</td></tr><tr><td>Myclobutanil</td><td>Sigma Aldrich</td><td>34360-100MG</td><td>88671-89-0</td></tr><tr><td>Oxyfluorfen</td><td>Sigma Aldrich</td><td>35031-100MG</td><td>42874-03-3</td></tr><tr><td>Paration metylowy</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36187-100MG</td><td>298-00-0</td></tr><tr><td>Penconazol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>36189-100MG</td><td>66246-88-6</td></tr><tr><td>Pirimifos-metyl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32058-250MG</td><td>29232-93-7</td></tr><tr><td>Propikonazol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45642-250MG</td><td>60207-90-1</td></tr><tr><td>Propoxur</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45644-250MG</td><td>114-26-1</td></tr><tr><td>Propyzamid</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45645-250MG</td><td>23850-58-5</td></tr><tr><td>Piryproksyfen</td><td>Sigma Aldrich</td><td>34174-100MG</td><td>95737-68-1</td></tr><tr><td>Tolchlofos-metyl</td><td>Sigma Aldrich</td><td>31209-250MG</td><td>5701804-9</td></tr><tr><td>Triadimefon</td><td>Sigma Aldrich</td><td>45693-250MG</td><td>43121-43-3</td></tr><tr><td>Triflumizol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32611-100MG</td><td>68694-11-1</td></tr><tr><td>&alpha;-HCH</td><td>Sigma Aldrich</td><td>33377-50MG</td><td>319-86-8</td></tr><tr><td>&beta;-HCH</td><td>Sigma Aldrich</td><td>33376-100MG</td><td>Nr kat. 319-85-7</td></tr></tbody></table>

oznaczanie 45 pestycydów w odmianach awokado metodą quechers i chromatografią gazową ze spektrometrią mas w tandemie

Determination of 45 Pesticides in Avocado Varieties by the QuEChERS Method and Gas Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

Chromatografia gazowa (GC) tandemowa spektrometria mas (MS/MS) jest najważniejszym instrumentem analitycznym, szeroko stosowanym do nadzoru pozostałości pestycydów w żywności. Niemniej jednak metody te są podatne na efekty matrycy (ME), które mogą potencjalnie wpływać na dokładną kwantyfikację w zależności od konkretnej kombinacji analitu i matrycy. Wśród różnych strategii łagodzenia ME, kalibracja dopasowana do matrycy stanowi dominujące podejście w zastosowaniach pozostałości pestycydów ze względu na jej opłacalność i proste wdrożenie. W tym badaniu przeanalizowano łącznie 45 reprezentatywnych pestycydów w trzech różnych odmianach awokado (tj. Criollo, Hass i Lorena) przy użyciu metody Qu ick-E asy-Cheap-E effective-R ugged-S afe (QuEChERS) z mrówczanem amonu i GC-MS/MS. 
W tym celu, 5 g próbki awokado zostało wyekstrahowane z 10 ml acetonitrylu, a następnie dodano 2,5 g mrówczanu amonu w celu wywołania separacji faz. Następnie supernatant poddano procesowi oczyszczania poprzez dyspersyjną ekstrakcję do fazy stałej z użyciem 150 mg bezwodnegoMgSO4, 50 mg aminy pierwszorzędowo-drugorzędowej, 50 mg oktadecylosililanu, 10 mg grafityzowanej sadzy i 60 mg sorbentu na bazie tlenku cyrkonu (Z-Sep+). Analiza GC-MS/MS została pomyślnie przeprowadzona w czasie krótszym niż 25 minut. Przeprowadzono rygorystyczne eksperymenty walidacyjne w celu oceny skuteczności metody. Badanie krzywej kalibracyjnej dopasowanej do matrycy dla każdej odmiany awokado wykazało, że ME pozostała stosunkowo stała i wynosiła mniej niż 20% (uważana za miękką ME) dla większości kombinacji pestycydów i odmian. Ponadto limity oznaczalności metody były niższe niż 5 μg/kg dla wszystkich trzech odmian. Wreszcie, wartości odzysku dla większości pestycydów mieściły się w dopuszczalnym zakresie 70-120%, przy względnych wartościach odchylenia standardowego poniżej 20%.

Przeprowadzono kompleksową walidację metody analitycznej zgodnie z wytycznymi SANTE/11312/20216, obejmującą oceny liniowości, ME, odzysku oraz powtarzalności.
W celu oceny liniowości sporządzono krzywe kalibracyjne dopasowane do matrycy, wykorzystując wzbogacone próbki blankieci o wielu poziomach stężeń (w zakresie od 5 do 600 µg/kg). Współczynniki determinacji (R2) dla większości wybranych pestycydów okazały się wynosić 0,99 lub więcej, co wskazuje na wysoce...

Niniejszy protokół opisuje analizę wieloklasowych pozostałości pestycydów w odmianach awokado przy użyciu metody Qu ick-Easy-Ch eap-E effective-R ugged-S afe (QuEChERS) z mrówczanem amonu, a następnie chromatografii gazowej i tandemowej spektrometrii mas.

Oznaczanie 45 pestycydów w odmianach awokado metodą QuEChERS i chromatografią gazową ze spektrometrią mas w tandemie

Gas chromatography (GC) tandem mass spectrometry (MS/MS) stands as a preeminent analytical instrument extensively employed for the surveillance of ...

Aby rozpocząć przygotowanie próbki metodą QuEChERS, należy zważyć pięć gramów próbki awokado w 50-mililitrowej probówce wirówkowej. Dodać 50 mikrolitrów proceduralnego wzorca wewnętrznego lub roztworu P-IS do probówki. Dodaj 10 mililitrów acetonu nitrylu do probówki wirówkowej i potrząsaj probówką z prędkością 70 obr./min przez pięć minut.Następnie dodaj do niego 2,5 grama mrówczanu amonu i ponownie potrząsaj probówką z prędkością 70 obr./min przez pięć minut. Następnie odwirować probówkę o stężeniu 1 800 G przez pięć minut. Następnie do dwumililitrowej probówki wirówkowej należy pobrać odpowiednie ilości odczynników wyświetlanych na ekranie.Następnie dodaj jeden mililitr ekstraktu do probówki w celu oczyszczenia za pomocą dyspersyjnej ekstrakcji do fazy stałej. Wirować probówkę przez 30 sekund, a następnie odwirować ją do 1,800 G przez pięć minut. Przenieść 200 mikrolitrów oczyszczonego ekstraktu do fiolki z automatycznym samplerem i dodać 20 mikrolitrów roztworu środka ochronnego analitu, a następnie dodać 50 mikrolitrów wstępnie przygotowanego roztworu fosforanu trifenylu.Na koniec wykonaj analizę instrumentalną za pomocą systemu GC-MS/MS. Analizy należy przeprowadzać za pomocą systemu GC-MS/MS z potrójnym kwadrupolem wyposażonym w interfejs jonizacji elektronów o napięciu 70 elektronowoltów w autosamplerze. Upewnij się, że ciśnienie gazu jest prawidłowe, hel na poziomie 140 PSI, a argon na poziomie 65 PSI.Włącz główny przełącznik GC znajdujący się na panelu przednim i włącz przełącznik MS znajdujący się z tyłu. Otwórz oprogramowanie do analizy w czasie rzeczywistym GC-MS, które steruje wszystkimi parametrami systemu GC-MS/MS. Kliknij Kontrola podciśnienia, następnie Zaawansowane, a następnie Pompa rotacyjna 1, aby zainicjować system próżniowy.Kliknij Start, aby włączyć pierwszą i drugą pompę turbomolekularną. Następnie kliknij opcję Start dla podgrzewacza źródła jonów. Ustaw temperaturę interfejsu MS na 250 stopni Celsjusza, a temperaturę źródła jonów na 300 stopni Celsjusza.Utrzymuj piekarnik GC w początkowej temperaturze 50 stopni Celsjusza przez jedną minutę, a następnie zwiększ go do 180 stopni Celsjusza z szybkością 25 stopni Celsjusza na minutę. Następnie zwiększ temperaturę do 230 stopni Celsjusza przy pięciu stopniach Celsjusza na minutę, a następnie do 290 stopni Celsjusza przy 25 stopniach Celsjusza na minutę. Następnie utrzymuj stałą temperaturę na poziomie 290 stopni Celsjusza przez sześć minut.Całkowity czas analizy to 24,6 minuty. Po włączeniu wszystkich tych systemów kliknij Zamknij. Następnie kliknij opcję Strojenie w oprogramowaniu do analizy i wybierz Widok monitora pików, aby przeprowadzić wstępną weryfikację warunków spektrometru mas.Kliknij Przejęcie, a następnie w wyświetlonym oknie kliknij Pobierz parametry początkowe. Sprawdź, czy sprzęt jest gotowy GC i gotowy MS. Aby uzyskać dane, kliknij Nowy plik wsadowy w oprogramowaniu i utwórz sekwencję zawierającą informacje, takie jak nazwa próbki, identyfikator próbki, plik metody, plik danych, wolumin iniekcji i plik strojenia. W razie potrzeby dodaj wiersze i kliknij Zapisz.Kliknij Batch Start i poczekaj, aby rozpoczął się proces wstrzykiwania. Wykonaj iniekcję w temperaturze 250 stopni Celsjusza w trybie podzielonej listy, utrzymując objętość wstrzyknięcia wynoszącą jeden mikrolitr. Po upływie jednej minuty od wstrzyknięcia należy otworzyć szczelinę.Analizuj anality przy użyciu trybu monitorowania reakcji wielokrotnych lub MRM, który jest standardowym trybem stosowanym w systemach MS/MS z potrójnym kwadrupolem. Otwórz oprogramowanie do analizy po uruchomieniu w celu analizy danych. Kliknij na wstrzyknięcie, które chcesz przeanalizować, przejdź przez tabelę zawierającą anality i wybierz interesujący nas pik.Kliknij pik lub obszar zainteresowania, aby zobrazować chromatogram, przejrzeć integracje pików i, jeśli to konieczne, przeprowadzić integrację ręczną. Zweryfikuj obszary wszystkich analitów, aby wykonać niezbędne obliczenia i ocenę metody. Generowanie krzywych kalibracyjnych dopasowanych do matrycy wykazało stosunkowo spójny efekt matrycy wynoszący mniej niż 20%, sklasyfikowany jako miękki ME dla większości kombinacji pestycydów.Wyniki przedstawione na rysunku wykazały liczbę pestycydów, których średni procent odzysku mieścił się w dopuszczalnym zakresie od 70 do 120% dla każdego rodzaju awokado. Znaczna część badanych pestycydów wykazywała procentowy odzysk mieszczący się w określonym zakresie, przy względnych wartościach odchylenia standardowego poniżej 20%

determination-45-pesticides-avocado-varieties-quechers-method-gas

Research

JoVE Journal

Chemistry

Chemia

Platforma mikroekstrakcji gazowej w fazie stałej jest tutaj opisana do szybkiej, niezawodnej i półautomatycznej identyfikacji i kwantyfikacji substancji lotnych w dojrzałych owocach czarnej porzeczki. Technika ta może być wykorzystana do poszerzenia wiedzy na temat aromatu owoców oraz do selekcji odmian o wzmocnionym smaku do celów hodowlanych.

Profilowanie związków lotnych w owocach czarnej porzeczki przy użyciu mikroekstrakcji w fazie stałej w przestrzeni nad powierzchnią sprzężoną z chromatografią gazową i spektrometrią mas

Prezentowany tutaj jest protokół do określania absorpcji, translokacji i dystrybucji imidakloprydu w pszenicy w warunkach hydroponicznych przy użyciu chromatografii cieczowej z tandemową spektrometrią mas (LC-MS-MS). Wyniki pokazały, że imidaklopryd może być wchłaniany przez pszenicę, a imidaklopryd wykryto zarówno w korzeniach, jak i liściach pszenicy.

Oznaczanie absorpcji, translokacji i dystrybucji imidakloprydu w pszenicy

Obecny protokół opisuje wykorzystanie mrówczanu amonu do podziału faz w QuEChERS, wraz z chromatografią gazową i spektrometrią mas, do skutecznego określania pozostałości pestycydów chloroorganicznych w próbce gleby.

Analiza pestycydów chloroorganicznych w próbce gleby za pomocą zmodyfikowanego podejścia QuEChERS z wykorzystaniem mrówczanu amonu

Demonstrujemy średnioprzepustową metodę ilościowego oznaczania aflatoksyn i fitoaleksyn stilbenoidowych w pojedynczych nasionach orzeszków ziemnych przy użyciu ultra wydajnej chromatografii cieczowej. Metoda ta została opracowana specjalnie do analiz dzikich gatunków pajęczaków zagrożonych przez aflatoksynogenne gatunki Aspergillus.

Nieniszcząca kwantyfikacja aflatoksyn i fitoaleksyn stilbenoidowych w pojedynczych orzechach ziemnych (Arachis spp.) Nasiona

Niniejsze badanie opracowało metodę chromatografii cieczowej wysokiej rozdzielczości połączoną ze spektrometrią mas z potrójnym kwarcykiem (HPLC-QQQ-MS) w celu identyfikacji i ilościowego określania alkaloidów tropanowych (hioscyjamina, anizodamina, skopolamina) w Anisodus tanguticus. Metoda ta okazała się szybką, dokładną i niezawodną dla analizy wysokowydajnej roślin leczniczych.

Skuteczną i szybką metodę HPLC-QQQ-MS do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w roślinach leczniczych

Opisano metodę oznaczenia kwasowości w fazie gazowej oligopeptydów zawierających cysteinę. Eksperymenty przeprowadzono przy użyciu potrójnego spektrometru mas kwadrupolowego. Względną kwasowość peptydów zmierzono za pomocą eksperymentów dysocjacji indukowanej zderzeniowo, natomiast kwasowość ilościową wyznaczono z zastosowaniem rozszerzonej kinetycznej metody Cooksa.

Oznaczanie kwasowości w fazie gazowej oligopeptydów

Powłoka ssaków zawiera lipidy ekstrahowane rozpuszczalnikiem, które mogą dostarczyć składu chemicznego charakterystycznego dla poszczególnych gatunków.  W pracy przedstawiono rutynową metodę rozdzielania szerokich klas lipidów izolowanych z tkanek powłokowych za pomocą chromatografii cienkowarstwowej i oznaczania profilu triacyloglicerydów za pomocą spektrometrii mas czasu przelotu desorpcji/jonizacji laserowej wspomaganej matrycą.

Profilowanie zawartości triacyloglicerydów w lipidach powłokowych nietoperzy za pomocą preparatywnej chromatografii cienkowarstwowej i spektrometrii mas MALDI-TOF

Przedstawiono charakterystykę kompleksów powstałych w różnych względnych proporcjach tetrapeptydów rtęci(II) do tetrapeptydów dicysteinylu za pomocą spektrometrii mas orbitrap z jonizacją elektrorozpylającą.

Badanie kompleksacji rtęci(II) z tetrapeptydami dicysteinylowymi za pomocą spektrometrii mas z jonizacją elektrorozpylania

Tutaj prezentujemy technikę miareczkowania potencjometrycznego do dokładnego ilościowego oznaczania związków karbonylowych w bio-olejach pirolitycznych.

Oznaczanie karbonylowych grup funkcyjnych w bioolejach metodą miareczkowania potencjometrycznego: metoda Faixa

Pokazano protokół charakteryzujący skład chemiczny wydychanego powietrza w czasie rzeczywistym za pomocą wtórnej jonizacji nanoelectrospray sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości.

Analiza oddechu w czasie rzeczywistym przy użyciu wtórnej jonizacji nanoelektronizacyjnej sprzężonej ze spektrometrią mas o wysokiej rozdzielczości

Naucz się oznaczać pestycydy w awokado metodą QuEChERS i chromatografią gazową ze spektrometrią mas w tandemie. Protokół zapewnia niezawodną analizę pozostałości chemicznych w żywności.

Oznaczanie 45 pestycydów w odmianach awokado metodą QuEChERS i chromatografią gazową ze spektrometrią mas w tandemie

Przeglądaj więcej filmów