Opracowanie mysiego modelu ksenoprzeszczepu pochodzącego od pacjenta z tkankami ludzkiego kostniakomięsaka
March 22nd, 2024
Obecny protokół opisuje metodę tworzenia mysiego modelu ksenoprzeszczepu pochodzącego od pacjenta (PDX) przy użyciu ludzkiej tkanki kostniakomięsaka.
Badanie to skrupulatnie zastępuje boczną progresję wzrostu tkanki kostniakomięsaka u myszy z niedoborem odporności, zapewniając platformę do badania wzrostu, nawrotu oporności na leki i przerzutów kostniakomięsaka. Realizujemy kroki proceduralne związane z ustanowieniem modelu ksenoprzeszczepu pochodzącego od pacjenta przy użyciu ludzkiej tkanki kostniakomięsaka, doradzając w ten sposób w badaniach przedklinicznych nad kostniakomięsakiem. Ta techniczna dokładność naśladuje ludzkiego raka i imituje podobieństwo do guza pierwotnego, ułatwiając eksplorację biologii kostniakomięsaka i skuteczność leczenia.
Na początek weź świeżo wycięte tkanki kostniakomięsaka przechowywane w roztworze ochronnym dla tkanek. Dwukrotnie spłukać tkanki kostniakomięsaka wstępnie schłodzoną sterylną solą fizjologiczną w sterylnym kapturze. Następnie usuń obszary tkanki kostniakomięsaka z krwawieniem i martwicą.
Za pomocą skalpela przeciąć oczyszczoną tkankę kostniakomięsaka w naczyniu do hodowli tkanek zawierającym wstępnie schłodzoną sterylną sól fizjologiczną. Trzymaj chusteczkę na lodzie. Teraz umieść nagie myszy na sterylnych serwetach chirurgicznych.
Ściśnij palce u nóg myszy, aby upewnić się, że są całkowicie znieczulone. Następnie zabezpiecz mysz w bocznej pozycji odleżynowej. Markerem zaznacz miejsce nacięcia chirurgicznego na skórze.
Za pomocą skalpela wykonaj pięciomilimetrowe nacięcie od skóry do tkanek podskórnych. Teraz trzymaj pęsetę okulistyczną w lewej ręce i unieś górny margines nacięcia. Jednocześnie prawą ręką użyj prostego uchwytu na igłę, aby wykonać rozwarstwienie w górę pod skórą właściwą myszy.
Za pomocą pęsety okulistycznej przytrzymaj górną stronę skóry nacięcia. Następnie przeszczep tkankę kostniakomięsaka pod skórę pięć milimetrów powyżej brzegu nacięcia. Zszyj nacięcie za pomocą linii chirurgicznych z dwoma lub trzema szwami, aby uzyskać pięciomilimetrowe nacięcie.
Przeszczepienie tkanki kostniakomięsaka kości udowej od 15-letniego pacjenta do myszy P0, P1, P2 i P3 zaowocowało pomyślnym stworzeniem ksenoprzeszczepu pochodzącego od pacjenta.
Przegląd
Ten protokół opisuje utworzenie modelu mysiego ksenotransplantatu pochodzenia pacjenta (PDX) z użyciem ludzkiego tkanki osteosarcoma. Model ten umożliwia badanie wzrostu osteosarcoma, odporności na leki i przerzutów.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Onkologia
- Badania translacyjne
- Modele przedkliniczne
Tło
- Osteosarcoma jest powszechnym rakiem kości u dzieci i młodzieży.
- Zrozumienie jego biologii i reakcji na leczenie jest kluczowe dla poprawy wyników pacjentów.
- Modele ksenotransplantatów pochodzenia pacjenta bardzo dobrze naśladują ludzkie guzy.
- To badanie koncentruje się na procedurach ustanawiania takich modeli.
Cel badania
- Stworzenie wiarygodnego modelu PDX do badań nad osteosarcoma.
- Ułatwienie badania biologii guza i skuteczności leczenia.
- Ulepszenie metodologii badań przedklinicznych.
Zastosowane metody
- Świeżo usunięte tkanki osteosarcoma są pobierane.
- Tkanki są spłukiwane sterylnym fizjologicznym roztworem soli.
- Usuwa się obszary krwawiące i martwicy.
- Model jest ustanawiany u myszy immunodeficytarnych.
Główne wyniki
- Model PDX z powodzeniem naśladuje wzrost ludzkiego osteosarcoma.
- Dostarcza informacji o odporności na leki i przerzutach.
- Model pokazuje podobieństwa pierwotnego guza.
- Służy jako platforma dla przyszłych badań nad osteosarcoma.
Wnioski
- Ustanowieny model PDX jest cennym narzędziem do badań nad osteosarcoma.
- Pomaga w zrozumieniu złożoności zachowania guza.
- Ten model może znacząco przyczynić się do opracowywania nowych terapii.
