5 kwietnia 2024
Jednoczesny zapis aktywności autonomicznej i szczegółowego zachowania matki myszy od ciąży do laktacji został osiągnięty za pomocą systemu telemetrycznego. Metoda ta pomaga zrozumieć dynamikę cech fizjologicznych i behawioralnych u matek od ciąży do odsadzenia.
Nasze badania koncentrują się na zmianach fizjologicznych u matek od ciąży do laktacji oraz na ich wpływie na zachowanie matki i rozwój jej młodych. Staramy się ustalić, w jaki sposób fizjologia matki dostosowuje się, aby wspierać zdrowy wzrost i rozwój jej potomstwa. Implementacja terytoriów u ciężarnych myszy umożliwia ciągłe śledzenie EKG od ciąży do laktacji, zapewniając wgląd w automatyczną aktywność podczas zdarzenia rozrodczego. Metoda ta skutkuje bardziej naturalnymi obserwacjami zachowań, a jednoczesne zapisy EKG dają jasne zrozumienie zmieniającej się fizjologii matki.
Nasze badania udoskonaliły metody chirurgiczne i metody obserwacji myszy, dzięki czemu możliwe jest monitorowanie myszy przez długi czas.
Nasze badania pomagają nam zrozumieć, w jaki sposób fizyczna reakcja matki podczas ciąży i laktacji wpływa na automatyczną aktywność. Nasze badania mogą przyczynić się do poprawy opieki nad matką i wsparcia dla rozwoju szczeniąt, a także mogą zainspirować nowe podejścia do badań nad rozrodem, nie tylko u zwierząt, ale także u ludzi.
W przyszłości planujemy zbadać, gdzie matki, które dopuściły się dzieciobójstwa lub zaniedbania w środowisku naturalnym, różnią się w aktywności autonomicznej i zachowaniu matki od ciąży do laktacji w porównaniu z normalnymi matkami. Wierzymy, że ten protokół będzie również pomocny w zrozumieniu czynników stojących za zaniedbaniem i dzieciobójstwem.
[Instruktor] Na początek umieść znieczuloną mysz w pozycji leżącej na grzejniku panelowym. Za pomocą nożyczek wykonaj nacięcie skóry między uszami, a następnie włóż kleszcze do nacięcia, aby oddzielić skórę i mięśnie wokół szyi i strony brzusznej, tworząc miejsce na umieszczenie telemetru. Teraz włóż telemetr przez nacięcie między uszami i umieść go w utworzonej przestrzeni po stronie brzusznej. Użyj kleszczy, aby zwinąć i związać dodatnie i ujemne przewody telemetru i umieść te przewody w przestrzeni szyi. Aby zamknąć nacięcie, użyj 13-milimetrowej igły i 20-centymetrowego szwu. Następnie umieść mysz w pozycji leżącej. Za pomocą nożyczek wykonaj małe nacięcie wokół skóry obojczyka i oddziel mięśnie od skóry szyi. Za pomocą kleszczy wyciągnij dodatnie i ujemne przewody z tyłu szyi. Następnie delikatnie oddziel gruczoły ślinowe, aby odsłonić wygląd mięśnia mostkowo-obojczykowo-sutkowego w kształcie litery V. Następnie dostosuj długość ujemnego przewodu, aby dotrzeć do mięśnia mostkowo-obojczykowo-sutkowego w pobliżu obojczyka i ostrożnie wyjmij rurkę ołowianą z ujemnego przewodu. Teraz przełóż igłę do szycia z 10-centymetrowym szwem przez zgięcie w kształcie litery V mięśnia mostkowo-obojczykowo-sutkowego, aby utworzyć pętlę. Przeciągnij elektrodę ze stali nierdzewnej od przewodu ujemnego przez tę pętlę i umieść ją pod mięśniem w pobliżu obojczyka. Lekko zawiąż pętlę, aby zabezpieczyć elektrodę ze stali nierdzewnej, nie uszkadzając mięśnia mostkowo-obojczykowo-sutkowego. Ponadto umieść drugi szew po stronie czaszki mięśnia i zawiąż go wokół rurki ujemnego przewodu, aby go zabezpieczyć. Następnie przekrój wokół wyrostka mieczykowatego i ostrożnie oddziel skórę od mięśnia między wyrostkiem mieczykowatym a obojczykiem. Następnie przedłuż dodatni przewód, aby dotrzeć do wyrostka mieczykowatego. Wyjmij rurkę ołowianą z przewodu dodatniego, upewniając się, że zwinięta elektroda ze stali nierdzewnej wewnątrz jest rozciągnięta za pomocą cienkiej pęsety. Następnie użyj igły o rozmiarze 18, aby utworzyć tunel pod mięśniem wokół wyrostka mieczykowatego. Następnie umieść elektrodę ze stali nierdzewnej w igle i przepuść ją przez mięsień wokół wyrostka mieczykowatego. Po wyjęciu igły użyj igły do szycia z 10-centymetrowym szwem, aby delikatnie przymocować zwiniętą elektrodę ze stali nierdzewnej do mięśnia wokół wyrostka mieczykowatego. Aby dodatkowo zabezpieczyć dodatni przewód, umieść drugi szew po stronie czaszki wyrostka mieczykowatego i zawiąż go wokół rurki dodatniego przewodu. Za pomocą igły do szycia z 20-centymetrowym szwem zamknij wszystkie nacięcia. Po implantacji umieść mysz w czystej klatce. Aby rozpocząć, umieść mysz z telemetrem w klatce i umieść klatkę na T-Base, która działa jako odbiornik telemetrii myszy. Włącz komputer z możliwością nagrywania i użyj zainstalowanej aplikacji do analizy danych, aby zebrać dane elektrokardiogramu z myszy. Następnie, korzystając z aplikacji do tworzenia wykresów laboratoryjnych na komputerze z możliwością nagrywania, zapisz elektrokardiogram. Aby przeanalizować dane z elektrokardiogramu, uruchom LabChart i otwórz plik danych dla okresu nagrywania. Kliknij przycisk HRV i odpowiednio dostosuj ustawienia wykrywania dudnienia, aby przeanalizować zmienność tętna. Następnie kliknij przycisk HRV i wybierz widok Klasyfikator uderzeń. Wybierz wszystkie dudnienia w widoku Klasyfikator uderzeń i wybierz Widok raportu za pomocą przycisku HRV. Skopiuj dane z widoku raportu i wklej je do programu Excel w celu dalszej analizy. Analiza elektrokardiogramu wykazała, że częstość akcji serca zmniejszała się stopniowo, podczas gdy interwał częstości oddechów stopniowo wzrastał od GD 17 do PD 21. Analiza HRV wykazała, że stosunek niskich do wysokich częstotliwości gwałtownie wzrósł od PD 0 do PD 21.
Niniejsze badanie analizuje zmiany fizjologiczne u myszy w okresie od ciąży do laktacji oraz ich wpływ na zachowania macierzyńskie i rozwój potomstwa. Dzięki wykorzystaniu systemu telemetrii do ciągłego monitorowania EKG, badanie dostarcza wiedzy na temat dynamiki fizjologii macierzyńskiej w tym krytycznym okresie.
Ciągłe monitorowanie EKG i zachowania myszy od okresu ciąży aż po laktację umożliwia precyzyjne mapowanie adaptacji autonomicznych i fizjologicznych podczas przejść macierzyńskich. Podejście to wspiera ograniczanie ryzyka mechanistycznego oraz zwiększa pewność prognostyczną w przedklinicznych modelach zachowań macierzyńskich i neurofizjologii. Metoda ta zwiększa ciągłość translacyjną w badaniach ukierunkowanych na szlaki neurorozwojowe i autonomiczne, istotne dla zdrowia matki i potomstwa.
Ten oparty na telemetrii schemat pracy integruje się z kontinuum badawczym, począwszy od wczesnych studiów mechanistycznych, aż po przedkliniczną walidację celów związanych z macierzyństwem i rozwojem neurologicznym.