Name: Moksowanie z podziałem ziół na pępek w szczurzym modelu pierwotnego bolesnego miesiączkowania z zimną krzepnięciem i zastojem krwi (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-10-04T12:50:00.000+00:00
Duration: 5 min 36 s
Description: Poznaj metodę moksybustji z podziałem ziół na pępek w leczeniu pierwotnego bolesnego miesiączkowania u szczurów. Technika ta łagodzi ból związany z zimną krzepnięcią i zastojem krwi, oferując wgląd w mechanizmy tradycyjnej medycyny chińskiej.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Fundację Nauk Przyrodniczych Prowincji Zhejiang, Program Eksploracyjny Q (LQ20H270012), Plan Technologii Tradycyjnej Medycyny Chińskiej Zhejiang (NO.2020ZB124), Projekt Badawczy Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (NO.2021JKZKTS056B) oraz Projekt na poziomie szpitala Trzeciego Szpitala Stowarzyszonego Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang (NO. ZS22ZA01). Jesteśmy wdzięczni Centrum Zwierząt Doświadczalnych Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang oraz Kluczowemu Laboratorium Akupunktury i Neurologii prowincji Zhejiang za zapewnienie nam warunków eksperymentalnych.

Ten eksperymentalny protokół został zatwierdzony przez Komitet ds. Zarządzania Zwierzętami Eksperymentalnymi i Oceny Etyki Uniwersytetu Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Zhejiang. Wszystkie operacje doświadczalne na zwierzętach są zgodne z etyką dobrostanu zwierząt doświadczalnych i przepisami dotyczącymi bezpieczeństwa doświadczalnego doświadczenia na zwierzętach. W badaniu wykorzystano dorosłe samice szczurów rasy Wistar w wieku 8-10 tygodni z Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Zhejiang. Przed eksperymentem szczury były karmione dietą adaptacyjną przez 1 tydzień w kontrolowanym środowisku (temperatura: 23-25 °C, wilgotność: 40%-60%). Szczury były utrzymywane w 12-godzinnym cyklu światło-ciemność, ze światłami włączanymi od 8:00 do 20:00 i miały nieograniczony dostęp do jedzenia i wody. Poniższy protokół opisuje PDM z ustanowieniem modelu zimnej koagulacji i zastoju krwi oraz HPM w procedurze terapii pępka. Reprezentacja procedury jest pokazana w Rysunek 1.
1. Ustanowienie PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi
<ol>
	<li>Zbadaj cykle rujowe szczurów za pomocą płukania pochwy.
	<ol>
		<li>Włóż pistolet do pipet z 60 μl 0,9% soli fizjologicznej do otworu pochwy szczura, pipetuj w górę i w dół 3-4 razy, a następnie odessaj płyn i upuść go na szklane szkiełko. 
		UWAGA: Owinięcie szczura w ręcznik, który można wyprać lub wyrzucić, byłoby odpowiednie.</li>
		<li>Utrwal wysuszoną zawartość, dodając 60 μl 95% etanolu przez 8 minut, a następnie spłucz i wysusz zawartość. Dodać 0,1% roztwór barwiący błękit metylenowy i inkubować z dala od światła przez 10 minut. Następnie spłucz i wysusz zawartość.</li>
		<li>Obserwuj i uzyskuj obrazy pod mikroskopem. 
		UWAGA: Jeśli zaobserwuje się dużą liczbę białych krwinek i niewiele komórek nabłonka jądrowego, potwierdza się stadium diestrus (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1B). Szczury te zostały losowo podzielone na grupę kontrolną, grupę modelową i grupę moksowania (n = 6).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ustanowienie modeli zwierzęcych PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi
	<ol>
		<li>Benzoesan estradiolu należy wstrzykiwać podskórnie w udo przez 10 dni (0,5 mg na szczura w 1. i 10. dniu oraz 0,2 mg od 2. do 9. dnia) w celu wywołania skurczu macicy.</li>
		Umieść samice szczurów w lodówce w temperaturze -20 ° C na 4 godziny od 1 do 5 dnia modelowania="xref">26.<li> Podczas 4 godzinnego okresu inkubacji otwórz drzwi lodówki do połowy, aby wymienić powietrze przez 30 minut, a następnie zamknij je.</li>
		<li>Wstrzyknąć oksytocynę (2 j. na szczura) we wstrzyknięciu dootrzewnowym 24 godziny po ostatnim podaniu w celu wywołania bolesnego miesiączkowania. 
		UWAGA: To badanie opiera się na wcześniej opublikowanej pracy, która koncentrowała się na przygotowaniu modelu szczura do zimnego krzepnięcia i zastoju krwi z bolesnym miesiączkowaniem27. Grupie kontrolnej wstrzyknięto tę samą objętość soli fizjologicznej, a procedura zamrażania była taka sama jak w grupie modelowej.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Terapia pępka HPM na modelowym modelu PDM samice szczurów z zimną krzepnięciem i zastojem krwi
UWAGA: Przygotuj cztery najważniejsze materiały do terapii pępka HPM (zobacz Tabelę materiałów).
<ol>
	<li>Przygotuj rożki moksy. Rozetrzyj nić moksy w dłoni w kształt wrzeciona (średnica 0,8 cm, wysokość 0,8 cm) (<silna klasa="xfig">Rysunek 2A).</li>
	<li>Zrób miskę na ciasto z otworem (średnica 1 cm, głębokość 0,8 cm) w środku (<silna klasa="xfig">Rysunek 2B).</li>
	<li>Zważ 0,3 g proszku TCM (<klasa silna = "xfig" >Rysunek 2C). 
	UWAGA: Według Du Dongqing28, proszek TCM zawiera Corydalis yanhusuo, Evodia fructus, Olibanum, Baishao (Paeoniae Radix Alba), Mirra, Borneol i Wulingzhi (Trogopterus Xanthipes).</li>
	<li>Przygotuj woreczek na szczura, aby naprawić szczura. Dzięki temu szczur będzie stabilny podczas zabiegu.
	<ol>
		<li>Wytnij materiał (długość x szerokość: 20 cm x 20 cm) i zszyj po przekątnej. Wytnij mały otwór u góry do oddychania i otwór (o średnicy około 5 cm) po jednej stronie woreczka do moksybulacji.</li>
		<li>Zszyj parę płóciennych lin o długości około 10 cm i szerokości 1 cm odpowiednio na górnym i dolnym końcu torby do wiązania (<silna klasa="xfig">Rysunek 2D). 
		UWAGA: Eksperymentator może wykonać odpowiedni rozmiar torby dla szczurów w zależności od wielkości badanego zwierzęcia.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Znajdź dokładną lokalizację punktu akupunkturowego Shenque (CV8).
	<ol>
		<li>Odwołując się do literatury29,30, zlokalizuj Shenque (CV8) na linii środkowej odwłoka szczura, na przecięciu górnych 2/3 i dolnych 1/3 linii łączącej wyrostek mieczykowaty i górną krawędź kości łonowej (Ryc. 1D).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Usuń włosy wokół punktu akupunkturowego Shenque.</li>
	<li>Umieść szczura w torbie na szczury. Trzymaj brzuch szczura do góry i odsłoń dolne kończyny i ogon. Przymocuj górną i dolną część ciała szczura oraz ogon na stole operacyjnym za pomocą taśmy. 
	UWAGA: Podczas wiązania szczurów operator musi być delikatny i niezbyt twardy, upewniając się, że nie powoduje to paniki u szczurów i nie wpływa na wyniki eksperymentu. Upewnij się, że mocowanie jest luźne i nie wywiera nacisku na serce, co może prowadzić do śmiertelności szczurów.</li>
	<li>Zdezynfekuj Shenque i otaczającą go skórę za pomocą 75% etanolu.</li>
	<li>Umieść miskę na brzuchu, skieruj jej otwór na punkt akupunkturowy Shenque i umieść proszek TCM na akupunkcie Shenque.</li>
	<li>Połóż stożek moksy na proszku TCM.</li>
	<li>Zapal stożek moksy i umieść nowy po wypaleniu poprzedniego. Traktuj szczura przez 30 minut (<silna klasa="xfig">Rysunek 1E). 
	UWAGA: Nie należy stosować znieczulenia podczas zabiegu. Bądź cicho. Uważnie obserwuj szczura, aby zapobiec poparzeniom spowodowanym nadmierną temperaturą podczas moksowania.</li>
</ol>
3. Przeprowadzanie testu behawioralnego
<ol>
	<li>Przetrzyj pudełko eksperymentalne 75% etanolem przed każdą próbą. 
	UWAGA: Otwarte pole to sześcian o wymiarach 40 cm x 40 cm x 40 cm bez drewnianej pokrywy skrzynki.</li>
	<li>Umieścić szczura w klatce po dootrzewnowym wstrzyknięciu oksytocyny (2 j.) lub 0,9% soli fizjologicznej.</li>
	<li>Nagrywaj wicie się przez 30 minut za pomocą kamery wideo.</li>
	<li>Obliczanie opóźnień wicia (WL) i wyniku wicia (WS).
	<ol>
		<li>Zgodnie z metodą Schmauss31, podziel zachowanie skręcania na 4 poziomy od 0 do 3. Oceń zwierzęta w oparciu o metodę Schmauss. 
		UWAGA: Poziom 0: normalna postawa (ręce i pazury płasko na dnie klatki lub normalne zachowanie eksploracyjne); Poziom 1: ciało pochylone w lewo lub w prawo; Poziom 2: tylne nogi wyprostowane, tył tylnych łap zgięty i częsta rotacja miednicy; Poziom 3: skurcz mięśni brzucha, tylne nogi wyciągnięte do tyłu. Szczury wykazywały reakcje wijące się (skurcz brzucha, wklęsłość, wyprost tułowia i kończyn tylnych, obrót jednej kończyny, skurcz macicy), co wskazuje na udane przygotowanie PDM z zimną zakrzepłą krwią. Okres inkubacji wicia się to czas od wstrzyknięcia oksytocyny do wystąpienia reakcji wicia. Jeżeli okres inkubacji przekracza 30 minut, oblicza się go jako 30 minut. Twist score = (0 [razy] × 0) + (1 [razy] × 1) + (2 [razy] × 2) + (3 [razy] × 3).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Pobieranie próbki po teście behawioralnym
<ol>
	<li>Trzymaj szczura ręką i wstrzyknij 3% pentobarbital sodu (1 ml/kg) dootrzewnowo w celu głębokiego znieczulenia.</li>
	<li>Zważ szczury, aby uzyskać masę ciała.</li>
	<li>Naciąć skórę i mięśnie od środka brzucha, aby odsłonić serce.</li>
	<li>Włóż serce od pozycji wierzchołka za pomocą igły perfuzyjnej, przymocuj igłę perfuzyjną za pomocą kleszczy hemostatycznych i wykonaj małe nacięcie w prawej małżowinie usznej.</li>
	<li>Przelej 0,9% soli fizjologicznej przez lewą komorę i aortę wstępującą, aż wątroba i oczy szczura staną się jaśniejsze i bielsze.</li>
	<li>Użyj nożyczek, aby wyciąć macicę i zważyć ją.</li>
	<li>Uzyskaj indeks macicy, obliczając stosunek masy macicy do masy ciała.</li>
</ol>

Herbal Moxibustion on Shenque Acupoint for Alleviating Primary Dysmenorrhea

<ol><li>Wang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quality+marker+discovery+of+danggui+jianzhong+decoction+for+treating+primary+dysmenorrhoea+based+on+chinmedomics+strategy%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Quality marker discovery of danggui jianzhong decoction for treating primary dysmenorrhoea based on chinmedomics strategy.</a> Phytomedicine. 115, 154724(2023).</li>
<li>Wu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unraveling+the+anti-primary+dysmenorrhea+mechanism+of+ainsliaea+fragrans+champ.+Extract+by+the+integrative+approach+of+network+pharmacology+and+experimental+verification%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Unraveling the anti-primary dysmenorrhea mechanism of ainsliaea fragrans champ. Extract by the integrative approach of network pharmacology and experimental verification.</a> Phytomedicine. 123, 155213(2024).</li>
<li>Proctor, M., Farquhar, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+management+of+dysmenorrhoea%5BTitle%5D)+AND+%22BMJ%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and management of dysmenorrhoea.</a> BMJ. 332 (7550), 1134-1138 (2006).</li>
<li>Unsal, A., Ayranci, U., Tozun, M., Arslan, G., Calik, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+of+dysmenorrhea+and+its+effect+on+quality+of+life+among+a+group+of+female+university+students%5BTitle%5D)+AND+%22Ups+J+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Prevalence of dysmenorrhea and its effect on quality of life among a group of female university students.</a> Ups J Med Sci. 115 (2), 138-145 (2010).</li>
<li>Jamieson, D. J., Steege, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+dysmenorrhea%2C+dyspareunia%2C+pelvic+pain%2C+and+irritable+bowel+syndrome+in+primary+care+practices%5BTitle%5D)+AND+%22Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">The prevalence of dysmenorrhea, dyspareunia, pelvic pain, and irritable bowel syndrome in primary care practices.</a> Obstet Gynecol. 87 (1), 55-58 (1996).</li>
<li>Andersch, B., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+epidemiologic+study+of+young+women+with+dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Obstet+Gynecol%22%5BJournal%5D)">An epidemiologic study of young women with dysmenorrhea.</a> Am J Obstet Gynecol. 144 (6), 655-660 (1982).</li>
<li>Watanabe, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preconception+dysmenorrhea+as+a+risk+factor+for+psychological+distress+in+pregnancy%3A+The+japan+environment+and+children%27s+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Affect+Disord%22%5BJournal%5D)">Preconception dysmenorrhea as a risk factor for psychological distress in pregnancy: The japan environment and children's study.</a> J Affect Disord. 245, 475-483 (2019).</li>
<li>Bajalan, Z., Moafi, F., Moradibaglooei, M., Alimoradi, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mental+health+and+primary+dysmenorrhea%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychosom+Obstet+Gynaecol%22%5BJournal%5D)">Mental health and primary dysmenorrhea: A systematic review.</a> J Psychosom Obstet Gynaecol. 40 (3), 185-194 (2019).</li>
<li>Dong, Y., Li, M. J., Hong, Y. Z., Li, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Insight+into+dysmenorrhea+research+from+1992+to+2022%3A+A+bibliometric+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pain+Res%22%5BJournal%5D)">Insight into dysmenorrhea research from 1992 to 2022: A bibliometric analysis.</a> J Pain Res. 16, 3591-3611 (2023).</li>
<li>Iacovides, S., Avidon, I., Bentley, A., Baker, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduced+quality+of+life+when+experiencing+menstrual+pain+in+women+with+primary+dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Obstet+Gynecol+Scand%22%5BJournal%5D)">Reduced quality of life when experiencing menstrual pain in women with primary dysmenorrhea.</a> Acta Obstet Gynecol Scand. 93 (2), 213-217 (2014).</li>
<li>Wang, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+repeated+menstrual+pain+on+empathic+neural+responses+in+women+with+primary+dysmenorrhea+across+the+menstrual+cycle%5BTitle%5D)+AND+%22Hum+Brain+Mapp%22%5BJournal%5D)">Effects of repeated menstrual pain on empathic neural responses in women with primary dysmenorrhea across the menstrual cycle.</a> Hum Brain Mapp. 42 (2), 345-356 (2021).</li>
<li>Harel, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cyclooxygenase-2+specific+inhibitors+in+the+treatment+of+dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pediatr+Adolesc+Gynecol%22%5BJournal%5D)">Cyclooxygenase-2 specific inhibitors in the treatment of dysmenorrhea.</a> J Pediatr Adolesc Gynecol. 17 (2), 75-79 (2004).</li>
<li>Zahradnik, H. P., Hanjalic-Beck, A., Groth, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsteroidal+anti-inflammatory+drugs+and+hormonal+contraceptives+for+pain+relief+from+dysmenorrhea%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22Contraception%22%5BJournal%5D)">Nonsteroidal anti-inflammatory drugs and hormonal contraceptives for pain relief from dysmenorrhea: A review.</a> Contraception. 81 (3), 185-196 (2010).</li>
<li>Strowitzki, T., Kirsch, B., Elliesen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Efficacy+of+ethinylestradiol+20+%C2%B5g%2Fdrospirenone+3+mg+in+a+flexible+extended+regimen+in+women+with+moderate-to-severe+primary+dysmenorrhoea%3A+An+open-label%2C+multicentre%2C+randomised%2C+controlled+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Fam+Plann+Reprod+Health+Care%22%5BJournal%5D)">Efficacy of ethinylestradiol 20 µg/drospirenone 3 mg in a flexible extended regimen in women with moderate-to-severe primary dysmenorrhoea: An open-label, multicentre, randomised, controlled study.</a> J Fam Plann Reprod Health Care. 38 (2), 94-101 (2012).</li>
<li>Liu, Y., Sun, J., Wang, X., Shi, L., Yan, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+herb-partitioned+moxibustion+for+primary+dysmenorrhea%3A+A+randomized+clinical+trial%5BTitle%5D)+AND+%22J+Tradit+Chin+Med%22%5BJournal%5D)">Effect of herb-partitioned moxibustion for primary dysmenorrhea: A randomized clinical trial.</a> J Tradit Chin Med. 39 (2), 237-245 (2019).</li>
<li>Li, S. -J., Pan, Y. -H., Zhao, Q. T., Gao, S. -Z., Ma, Y. -X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+mast+cell+function+on+umbilical+therapy+for+uterine+transient+receptor+potential+vanillin+pathway+in+rats+with+dysmenorrhea+of+cold+congelation+and+blood+stasis+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22China+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine+and+Pharmacy%22%5BJournal%5D)">Effects of mast cell function on umbilical therapy for uterine transient receptor potential vanillin pathway in rats with dysmenorrhea of cold congelation and blood stasis syndrome.</a> China Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy. 33 (10), 4646-4649 (2018).</li>
<li>Ma, Y. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+of+herb-partitioned+moxibustion+for+primary+dysmenorrhea+patients+based+on+the+lc-ms+metabonomics%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Research of herb-partitioned moxibustion for primary dysmenorrhea patients based on the lc-ms metabonomics.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2015, 621490(2015).</li>
<li>Tian, T., Li, L., Hong, H., Ying, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+understanding+and+treatment+experience+of+dysmenorrhea+by+doctors+in+different+dynasties%5BTitle%5D)+AND+%22Henan+Journal+of+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">The understanding and treatment experience of dysmenorrhea by doctors in different dynasties.</a> Henan Journal of Traditional Chinese Medicine. 37 (1), 50-52 (2017).</li>
<li>Jiaqi, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((TCM+pattern+distribution+characteristics+of+primary+dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Shenzhen+Journal+of+Integrated+Traditional+Chinese+and+and+Western+Medicine%22%5BJournal%5D)">TCM pattern distribution characteristics of primary dysmenorrhea.</a> Shenzhen Journal of Integrated Traditional Chinese and and Western Medicine. 30 (13), 47-49 (2020).</li>
<li>Fang, C., Junhong, C., Wei, D., Namei, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exploration+of+TCM+Syndrome+Distribution+Characteristics+of+Primary+Dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Exploration of TCM Syndrome Distribution Characteristics of Primary Dysmenorrhea.</a> Acta Chinese Medicine. 23 (08), 1194-1196 (2013).</li>
<li>Tian, T., Li, L., Hong, H., Ying, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recognition+of+dysmenorrhea+by+medical+practitioners+through+the+ages+and+their+experience+in+diagnosis+and+treatment+of+dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Henan+Traditional+Chinese+Medicine%22%5BJournal%5D)">Recognition of dysmenorrhea by medical practitioners through the ages and their experience in diagnosis and treatment of dysmenorrhea.</a> Henan Traditional Chinese Medicine. 37 (01), 50-52 (2017).</li>
<li>Ren Qing, W. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progress+in+treatment+of+primary+dysmenorrhea+with+traditional+Chinese+and+Western+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Practical+Traditional+Chinese+Internal+Medicine%22%5BJournal%5D)">Progress in treatment of primary dysmenorrhea with traditional Chinese and Western medicine.</a> Journal of Practical Traditional Chinese Internal Medicine. 34 (07), 4-7 (2020).</li>
<li>Siyi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+acupoints+selection+of+moxibustion+for+primary+dysmenorrhea+based+on+data+mining+technology%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Zhen+Jiu%22%5BJournal%5D)">Characteristics of acupoints selection of moxibustion for primary dysmenorrhea based on data mining technology.</a> Zhongguo Zhen Jiu. 35 (08), 845-849 (2015).</li>
<li>Yang, Y. E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Argyi+research+and+application+in+ancient+and+modern+plague%5BTitle%5D)+AND+%22Lishizhen+Medicine+and+Materia+Medica+Research%22%5BJournal%5D)">Argyi research and application in ancient and modern plague.</a> Lishizhen Medicine and Materia Medica Research. 31 (02), 438-441 (2020).</li>
<li>Yan, Z. Effect and mechanism of warm moxibustion at shenque acupoint in treating primary dysmenorrhea in college students. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aYan%2C+Z+%22Modernization+of+Traditional+Chinese+Medicine+and+Materia+Medica-World+Science+and+Technology%22">Modernization of Traditional Chinese Medicine and Materia Medica-World Science and Technology</a>. , https://kns.cnki.net/kcms/detail/11.5699.R.20240422.2017.007.html (2024).</li>
<li>Yang, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Effect+of+Acupuncture+to+SP6+on+Skin+Temperature+Changes+of+SP6+and+SP10%3A+An+Observation+of+%E2%80%9CDeqi%E2%80%9D%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">The Effect of Acupuncture to SP6 on Skin Temperature Changes of SP6 and SP10: An Observation of “Deqi”.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2014 (1), 1741-4288 (2014).</li>
<li>Al, X. Y. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+and+assessment+method+of+blood+stasis+due+to+cold+coagulation+dysmenorrhea+rat+model+research%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Chinese+Medicine+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Preparation and assessment method of blood stasis due to cold coagulation dysmenorrhea rat model research.</a> Acta Chinese Medicine and Pharmacology. 41 (04), 25-30 (2013).</li>
<li>Du Dongqing, Y. C., Ma, Y., Liu, X., Gao, S., Wang, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clinical+study+of+herb-partitioned+moxibustion+on+navel+for+primary+dysmenorrhea%5BTitle%5D)+AND+%22Shanghai+Journal+of+Acupuncture+and+Moxibustion%22%5BJournal%5D)">Clinical study of herb-partitioned moxibustion on navel for primary dysmenorrhea.</a> Shanghai Journal of Acupuncture and Moxibustion. 30 (08), 514-516 (2011).</li>
<li>Wang Haijun, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Location+of+shenque+acupoint+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Acupuncture+Research%22%5BJournal%5D)">Location of shenque acupoint in rats.</a> Acupuncture Research. 5, 1(2007).</li>
<li>Wei, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+moxibustion+at+%26%2334%3Boppositely-located+points%26%2334%3B+on+neurogenic+bladder+afterspinal+cord+injury+and+endoplasmic+reticulum+stress+pathway+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Zhongguo+Zhen+Jiu%22%5BJournal%5D)">Effect of moxibustion at &#34;oppositely-located points&#34; on neurogenic bladder afterspinal cord injury and endoplasmic reticulum stress pathway in rats.</a> Zhongguo Zhen Jiu. 42 (04), 413-418 (2022).</li>
<li>Schmauss, C., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+studies+on+spinal+opiate+receptor+systems+mediating+antinociception.+II.+Pharmacological+profiles+suggesting+a+differential+association+of+mu%2C+delta+and+kappa+receptors+with+visceral+chemical+and+cutaneous+thermal+stimuli+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">In vivo studies on spinal opiate receptor systems mediating antinociception. II. Pharmacological profiles suggesting a differential association of mu, delta and kappa receptors with visceral chemical and cutaneous thermal stimuli in the rat.</a> J Pharmacol Exp Ther. 228 (1), 1-12 (1984).</li>
<li>Zhao, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Herb-partitioned+moxibustion+improves+crohn%27s+disease-associated+intestinal+fibrosis+by+suppressing+the+RhoA%2FROCK1%2FMLC+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Evid+Based+Complement+Alternat+Med%22%5BJournal%5D)">Herb-partitioned moxibustion improves crohn's disease-associated intestinal fibrosis by suppressing the RhoA/ROCK1/MLC pathway.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 2247953(2021).</li>
<li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+herb-partitioned+moxibustion+for+ulcerative+colitis%3A+A+protocol+for+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Medicine+%28Baltimore%29%22%5BJournal%5D)">Effects of herb-partitioned moxibustion for ulcerative colitis: A protocol for systematic review and meta-analysis.</a> Medicine (Baltimore). 99 (31), e21319(2020).</li>
<li>Dai, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Moxibustion+strategies+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Moxibustion strategies for mice.</a> J Vis Exp. 179, 63119(2022).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów.

Obecnie istnieją różne metody modelowania PDM z zimną krzepnięciem i typem zastoju krwi, ale główną metodą jest benzoesan estradiolu w połączeniu z oksytocyną do modelowania bolesnego miesiączkowania, które na tej podstawie będzie inne. W tym badaniu do modelowania wykorzystano metodę zamrażania całego ciała w połączeniu z benzoesanem estradiolu i oksytocyną. Temperatura metody zamrażania całego ciała wynosiła -20 °C. W poprzednim eksperymencie wstępnym stwierdzono, że gdy temperatura wynosiła -25 °C, szczury miałyby poważne odmrożenia, a nawet amputację ogona, więc temperaturę dostosowano do -20 °C, co mogło zapewnić, że cel zimnej koagulacji nie spowoduje zbyt dużych uszkodzeń fizycznych u szczurów. O sukces naszego modelowania zadbaliśmy poprzez wicie się punktacji i barwienie HE macicy, co wskazuje, że może być ona wykorzystana do późniejszych badań i ma znaczenie referencyjne.
Terapia HPM jest skuteczna w przypadku różnych chorób, takich jak choroba Leśniowskiego-Crohna, wrzodziejące zapalenie jelita grubego i bolesne miesiączkowanie 15,32,33. Jednak oprócz skuteczności klinicznej naukowcy muszą również zwrócić uwagę na mechanizm, który za tym stoi. Dlatego zastosowanie HPM u zwierząt jest niezbędnym środkiem do badania mechanizmu molekularnego HPM. Aby przeanalizować skuteczność i mechanizm HPM, jednym z największych wyzwań, przed którymi stoją naukowcy, jest ustawienie zwierząt w odpowiedniej pozycji, aby utrzymać je stabilnie bez dyskomfortu i umożliwić naukowcom leczenie ich przez pewien czas. We wczesnej fazie eksploracji przyjęliśmy metodę mocowania górnej części ciała i dolnych kończyn szczurów obiema rękami; Stwierdzono, że skuteczność eksperymentalna była bardzo niska, co łatwo było wywołać panikę u szczurów, a efekt leczenia nie był dobry. Nawet jeśli nie jest łatwo utrzymać zwierzę w spokoju, nie znieczuliliśmy szczurów, a następnie przeprowadziliśmy leczenie operacyjne, ponieważ zbyt małe znieczulenie może nie osiągnąć celu uspokojenia, a zbyt duże znieczulenie zakłóci przekaźnictwo nerwowe34. Ponadto, niezależnie od tego, czy jest to znieczulenie wziewne, czy wstrzyknięcie środków znieczulających, niewłaściwa operacja lub nadmierne dawkowanie może łatwo doprowadzić do śmierci zwierząt doświadczalnych. Dlatego później przyjęliśmy tak zwaną odzież dla szczurów, aby przymocować szczury do leczenia. Ta metoda mocowania jest prosta i łatwa w obsłudze, a koszt jest niezwykle niski. Zapewniając wydajność, poprawia również dobrostan zwierząt. Jeśli okaże się, że szczury nadal nie są dobrze ustabilizowane, przed eksperymentem można przeprowadzić 3-dniowy trening zdolności adaptacyjnych, aby zmniejszyć ich oporność. Dodatkowo szczury można umieścić na termostacie o temperaturze 38 °C podczas leczenia, ponieważ w eksperymentach stwierdzono, że temperatura ta jest cichsza niż temperatura pokojowa. Projekt tej odzieży może być modyfikowany i rozszerzany dla różnych typów zwierząt doświadczalnych i miejsc leczenia, takich jak myszy i króliki.
Należy zwrócić uwagę na kilka ograniczeń związanych z procedurą HPM opisaną w tym badaniu. Po pierwsze, temperatura odgrywa ważną rolę w leczeniu HPM, ale nie ma kroku w celu wykrycia temperatury w naszej procedurze operacyjnej, która musi być jeszcze bardziej zoptymalizowana w przyszłym leczeniu. Po drugie, jeśli leczone szczury wykazują reakcje stresowe i nie można ich naprawić, leczenie należy przerwać. Jako zewnętrzna metoda leczenia, HPM na pępku ma wiele zalet dla osób fizycznych i świata opieki zdrowotnej. Jest tani, nie uzależnia i nie powoduje działań niepożądanych w wątrobie, nerkach lub układzie pokarmowym. Nie powoduje również progresji chorób wątroby, nerek ani przewodu pokarmowego. Jest stosowany nie tylko w leczeniu bolesnego miesiączkowania, ale może być również lepiej promowany i stosowany w leczeniu innych chorób.

Pierwotne bolesne miesiączkowanie (PDM), zwane również funkcjonalnym bolesnym miesiączkowaniem, jest jedną z najbardziej rozpowszechnionych chorób ginekologicznych dotykających dorastające dziewczęta i miesiączkujące młode kobiety1. Charakteryzuje się skutkami ubocznymi, takimi jak udręka i uciski (skurcze) macicy, wraz z problemami zapalnymi w jamie brzusznej przed i po miesiączce bez żadnych dowodów patologii miednicy2. Skurcze dolnej części brzucha, które zaczynają się 8-72 h po rozpoczęciu miesiączki, osiągają szczyt w pierwszych dniach zwiększonego krwawienia miesiączkowego3,4, a czasami rozprzestrzeniające się na plecy i uda, są charakterystycznymi objawami policystycznego PDM. Ze względu na różne definicje tego schorzenia i brak ustandaryzowanych sposobów oceny intensywności bólu menstruacyjnego, szacowana częstość występowania bolesnego miesiączkowania u kobiet waha się od 45%-95%3,4,5. Uważa się, że około 10%-25% kobiet w wieku rozrodczym cierpi na naprawdę ciężką chorobę PDM6. Częstość występowania PDM jest najwyższa w grupie wiekowej od 20 do 24 lat i stopniowo maleje2. PDM charakteryzuje się okresowym bólem podbrzusza, któremu często towarzyszą inne objawy ogólnoustrojowe, takie jak ból krzyża, nudności, wymioty, bóle głowy, anoreksja, biegunka7, a nawet objawy psychiczne, takie jak depresja i lęk8,9. Podczas menstruacji kobiety z bolesnym miesiączkowaniem doświadczają spadku ogólnej jakości życia4,8,10.
Ponadto, badania wykazały, że powtarzające się bóle menstruacyjne mogą wpływać na funkcjonowanie ośrodkowego układu nerwowego, prowadząc do zmiany percepcji bólu zarówno w fazie bolesnej, jak i bezbolesnej11. Ze względu na etiologię PDM opartą na prostaglandynach (PG), najczęstszym leczeniem farmakologicznym PDM są niesteroidowe leki przeciwzapalne (NLPZ)12,13, a następnie doustne środki antykoncepcyjne14. Oprócz skutków ubocznych leków, 10%-20% osób nie reaguje na NLPZ i środki antykoncepcyjne3. Większość obecnych badań dotyczy wpływu bolesnego miesiączkowania na anatomię i fizjologię mózgu, niewiele uwagi poświęca się podejściam terapeutycznym. W związku z tym istnieje pilna potrzeba znalezienia strategii leczenia, która mogłaby być szeroko stosowana w praktyce klinicznej, o ustalonej skuteczności i łatwo akceptowana przez pacjentów.
Moxibustion z podziałem na zioła (HPM) jest charakterystyczną terapią zewnętrzną w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM), która jest szeroko stosowana w leczeniu chorób w Chinach. Jego zalety to minimalny koszt, brak skutków ubocznych, dobre efekty długoterminowe, łatwa obsługa i łatwa akceptacja przez pacjentów. Stwierdzono, że wpływ HPM na pępek na PDM jest znaczący15, co może być ściśle związane z regulacją niedoboru i nadmiaru zimna i ciepła macicy, a także komórek tucznych i powiązanych receptorów16. Zespół badawczy udowodnił, że HPM może natychmiast złagodzić ból menstruacyjny17.
Zhang Zhong-jing początkowo opisał koncepcję bolesnego miesiączkowania w Women's Miscellaneous Diseases and Treatment of the Golden Chamber, pisząc, że krwawienie miesiączkowe jest niekorzystne poniżej pasa, a brzuch jest pełen bólu18. Zgodnie z głównymi objawami, bolesne miesiączkowanie można przypisać do kategorii bólu menstruacyjnego i menstruacyjnego bólu brzucha w tradycyjnej medycynie chińskiej. Zespoły bolesnego miesiączkowania można podzielić na pięć: qi i niedobór krwi; zimna krzepliwość i zastój krwi; akumulacja wilgotnego ciepła; stagnacja qi i zastój krwi; oraz niewydolność wątroby i nerek<klasa SUP="xref">16. Według odpowiednich badań, zespół zimnej krzepnięcia i zastoju krwi jest najczęstszym zespołem PDM19,20. TCM utrzymuje, że PDM i patogeny przeziębienia są ze sobą ściśle powiązane21. Podczas menstruacji lub w jej okolicach w Xuehai dochodzi do nadmiernego przepływu krwi, co prowadzi do szybkiego wyczerpania krwi qi ze względu na jej energetyczną naturę. W związku z tym kobiety są podatne na przyczyny chorobotwórcze z powodu braku wystarczającej ilości zdrowej energii oraz gwałtownych wahań qi i krwi w macicy oraz meridianach Chong i Ren22. Kobiety, które mają dobrze rozwiniętą sylwetkę, powinny podjąć środki ostrożności, aby unikać spożywania surowych lub zimnych pokarmów oraz zapobiec przeziębieniu się podczas menstruacji. Niezastosowanie się do tego może spowodować wtargnięcie patogenów przeziębienia do macicy, prowadząc do krzepnięcia i stagnacji krwi w macicy oraz meridianach Chong i Ren. W związku z tym osoby odczuwają ból w wyniku zastoju w przepływie krwi. Zarówno wtargnięcie patogenów zimna z zewnątrz, jak i obecność zimna yin wewnątrz organizmu mogą powodować zablokowanie i zakrzepnięcie meridianów.
Bolesne miesiączkowanie występuje w meridianach Chong i Ren, a początek jest związany ze zmianami w qi i krwi. W teorii TCM moksowanie działa poprzez stymulację Yang Qi, ogrzewanie meridianów, rozpraszanie zimna i zwiększanie przepływu krwi w celu złagodzenia bólu. Według Jinfu z Lingshu23, jeśli puls i skrzep krwi znajdują się pośrodku, a krew jest zakrzepła i zimna krew, to jest to odpowiednie do moksowania; Jest to typowe leczenie zewnętrznego bolesnego miesiączkowania. W wcześniej opublikowanym worku24 liście artemisia argyi są opisane jako gorzkie i ostre, zdolne do przywrócenia prawie wyczerpanego pierwotnego Yang, łącząc dwanaście meridianów, biegnąc przez trzy meridiany Yin, regulując Qi i krew, rozpraszając zimno i wilgoć oraz ogrzewając macicę, moxibustion, za pomocą odpowiednich punktów akupunkturowych, może wydalić czynniki chorobotwórcze na zewnątrz, Regulują wewnętrznie Qi i krew, a tym samym odgrywają rolę w regulacji meridianów, aktywacji krążenia krwi i zatrzymywaniu bólu. Pępek, znany również jako Shenque (CV8), należy do południka Ren, łączącego meridiany Du, Chong i Dai. Zgodnie z teorią TCM, uważa się, że Shenque jest spokrewniony z pięcioma zang i sześcioma fu25. Jest uważany za wrodzoną podstawę i oś równowagi yin-yang. Anatomicznie PDM znajduje się w bliskiej odległości od miednicy i jest ściśle połączony z macicą. Choroba PDM dotyka w szczególności macicy, a jej patogeneza obejmuje brak równowagi qi i krwi, a także brak równowagi wnętrzności. Poprzez stymulację punktu Shenque'a można bezpośrednio wpływać na qi i stan krwi macicy oraz skutecznie leczyć skurcze menstruacyjne. Opierając się na powyższej teorii, wybraliśmy stymulację punktu akupunkturowego Shenque zlokalizowanego w okolicy brzucha do terapii HPM, w celu złagodzenia objawów bolesnego miesiączkowania i złagodzenia bólu.
Aby jak najwierniej naśladować interwencję TCM na PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi, powtórzyliśmy technikę HPM na pępku u samic szczurów. Odkryto, że HPM na pępku ma wyraźne działanie przeciwbólowe i może zmniejszyć reakcję wicia się szczurów z bolesnym miesiączkowaniem. W celu zbadania mechanizmu HPM na pępku w celu poprawy PDM i promowania go, zbadaliśmy technikę mocowania szczurów i wykonywania HPM w akupunkcie Shenque w brzuchu.

<table><tbody><tr><td>0,9% sól fizjologiczna</td><td>Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd.</td><td>SLYSZ1A</td><td>Do wstrzykiwania grupy kontrolnej&nbsp;</td></tr><tr><td>1 ml jednorazowa sterylna strzykawka</td><td>Changzhou Yuekang Medical Equipment Co., Ltd.</td><td>3000-0515-14</td><td>Do wstrzykiwania leku</td></tr><tr><td>3 ml (przedłużona) pipeta Pasteura</td><td>Beijing Lanjieke Technology Co., Ltd.</td><td>YCKJ-HC-007245</td><td>Do montażu</td></tr><tr><td>75% alkoholu do dezynfekcji</td><td>Hangzhou OUTOP Biotechnology Co., Ltd.</td><td>Nie dotyczy Do</td><td>sterylizacji miejsca leczenia</td></tr><tr><td>Szkiełko szklane powlekane klejem</td><td>Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd.</td><td>188105W</td><td>Do barwienia HE</td></tr><tr><td>Inkubator biochemiczny</td><td>Shanghai Boxun Industrial Co., Ltd. Fabryka sprzętu medycznego</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do odparafinowania tkanek w barwieniu HE</td></tr><tr><td>Materiał tkaninowy</td><td>Przygotowanie własne</td><td>Nie dotyczy</td><td>Pokrowiec na szczura</td></tr><tr><td>Cyfrowy menedżer systemu skanowania plastrów</td><td>Hamamatsu</td><td>C13210-01</td><td>Do skanowania plastrów HE</td></tr><tr><td>Jednorazowe rękawiczki</td> <td>lateksoweGuangzhou Lige Technology Co., Ltd.</td><td>LG10-102-1I</td><td>Do stosowania podczas pracy</td></tr><tr><td>Benzoesan estradiolu</td><td>Hefei Xinkexin Animal Pharmaceutical Co., Ltd.</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do ustalenia modelu bolesnego miesiączkowania</td></tr><tr><td>Excelsior AS W pełni automatyczny odwadniacz</td><td>Thermo Scientific</td><td>Excelsior AS</td><td>Do odwodnienia tkanek barwiących HE</td></tr><tr><td>Samice szczurów Wistar</td><td>Centrum Zwierząt Laboratoryjnych Uniwersytetu Medycyny Chińskiej Zhejiang</td><td>Nie dotyczy</td><td>220&ndash; 250 g</td></tr><tr><td>mąki</td><td>Preparat własny Nie</td><td>dotyczy Do</td><td>leczenia moksybusją z podziałem na zioła</td></tr><tr><td>Kleszcz</td><td>Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd.</td><td>lsnz</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Formaldehyd&nbsp;</td><td>Szanghaj Lingfeng Odczynnik chemiczny Co., Ltd.</td><td>441244-1KG</td><td>Do utrwalania tkanek</td></tr><tr><td>Barwnik szkiełkowy Gemini AS</td><td>Thermo Scientific</td><td>Gemini AS&nbsp;</td><td>Maszyna do barwienia</td></tr><tr><td>Hemostat</td><td>Zhejiang Tuzhi Technologia farmaceutyczna Co., Ltd.</td><td>lsnz</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>HistoCore</td><td>Leica (Arcadia H)</td><td>14039357258</td><td>Do zatapiania tkanek barwiących HE</td></tr><tr><td>Sterylny wacik medyczny</td><td>Trzeci szpital stowarzyszony Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang</td><td>Nie dotyczy</td> Do <td>sterylizacji miejsca naprawy</td></tr><tr><td>Roztwór do barwienia błękitem metylenowym (0,1%)</td><td>Beijing Honghu United Chemical Products Co., Ltd.</td><td>G1300</td><td>Do badań przesiewowych cyklu rujowego</td></tr><tr><td>Nożyce do mikrodysekcji</td><td>Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd.</td><td>XWJ12A</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Szklana osłona mikroskopu (24 mm x 50 mm)</td><td>Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd.</td><td>10212450C</td><td>Do barwienia HE</td></tr><tr><td>Mikrotom</td><td>Leica Microsystems</td><td>RM2255</td><td>Do cięcia tkanek</td></tr><tr><td>Zamrażarka Midea</td><td>Hefei Midea Fridge Co., Ltd.</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do ustalenia modelu bolesnego miesiączkowania z zimną koagulacją i zastojem krwi</td></tr><tr><td>Kleszcze trzonowe</td><td>Hangzhou Zhengbo Biotechnology Co., Ltd.</td><td>YGJD-11</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Medium montażowe</td><td>Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd.</td><td>CS9603-100mL</td><td>Do montażu tkanek</td></tr><tr><td>Moxa w sztyfcie</td><td>Trzeci szpital stowarzyszony Chińskiego Uniwersytetu Medycznego Zhejiang</td><td>N/A Do</td><td>leczenia moksybusją z podziałem na zioła</td></tr><tr><td>Pentobarbital sodowy</td><td>Hangzhou Dawen Biological Co., Ltd.</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS)</td> <td>Hangzhou Gaosheng Biotechnology Co., Ltd.</td><td>P1010-2L</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Nożyczki&nbsp;</td><td>Zhejiang Tuzhi Technologia farmaceutyczna Co., Ltd.</td><td>lsnz</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Ostrze do cięcia</td><td>Shanghai Saihan Technology Co., Ltd.</td><td>LEICA-819-box</td><td>Do barwienia HE Przygotowanie sekcji parafiny</td></tr><tr><td>Golarka</td><td>Shenzhen Cordes Electrical Appliance Co., Ltd.</td><td>Nie dotyczy Do</td><td>golenia sierści szczura</td></tr><tr><td>Chlorek sodu</td><td>Chemical Reagent Co., Ltd.</td><td>A501218-0001</td><td>Do pobierania próbek</td></tr><tr><td>Sacharozy</td><td>Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd.</td><td>S11055-500g</td><td>Do odwadniania gradientowego</td></tr><tr><td>Pojemnik izolacyjny</td><td>Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd.</td><td>lsbwx8l</td><td>Do odparafinowania sekcji parafiny</td></tr><tr><td>Kasety do zatapiania tkanek, w kształcie prostokąta, z łamaną pokrywą.</td><td>Zhejiang Tuzhi Technologia farmaceutyczna Co., Ltd.</td><td>31050102W</td><td>Do zatapiania tkanek barwiących HE</td></tr><tr><td>Szeroka taśma samoprzylepna</td><td>Zhejiang Tuzhi Pharmaceutical Technology Co., Ltd.</td><td>Nie dotyczy Do</td><td>stabilizacji szczura podczas zabiegu</td></tr></tbody></table>

moksowanie z podziałem ziół na pępek w szczurzym modelu pierwotnego bolesnego miesiączkowania z zimną krzepnięciem i zastojem krwi

Herbs-Partitioned Moxibustion on the Navel in a Rat Model of Primary Dysmenorrhea with Cold Coagulation and Blood Stasis

Pierwotne bolesne miesiączkowanie (PDM) odnosi się do występowania skurczowego bólu kolkowego w dolnej części brzucha bez żadnej oczywistej patologii miednicy, często towarzyszy mu inne objawy ogólnoustrojowe, co znacznie obniża jakość życia kobiet z PDM, 45%-95% kobiet miesiączkujących jest nim dotkniętych. Pomimo wysokiej częstości występowania PDM, często nie jest ona dobrze leczona i jest ignorowana przez odpowiednich badaczy i same kobiety. Moksowanie z podziałem na zioła (HPM) jest charakterystyczną terapią zewnętrzną w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM), która jest szeroko stosowana w leczeniu chorób w Chinach; leczy choroby poprzez nałożenie chińskiej formuły ziołowej na punkty akupunkturowe pacjenta, a następnie zapalanie pałeczek moksy na ziołową formułę do terapii moksyksowej. Podstawową skutecznością ziół wykorzystanych w tym badaniu jest aktywacja meridianów i ciepło, które pobudza krążenie qi w celu złagodzenia bólu. Stymulacja cieplna Moxibustion może przyspieszyć napar z ziół do ludzkiego ciała. W związku z tym HPM, który łączy w sobie stymulację akupunkturową, ziołową i cieplną, jest odpowiedni do leczenia zaburzeń ginekologicznych, w szczególności chorób funkcjonalnych, takich jak PDM. Niniejszy artykuł zawiera szczegółowy opis procedur i środków ostrożności dotyczących HPM w punkcie akupunkturowym Shenque (CV8) u samic szczurów doświadczalnych, co stanowi eksperymentalną podstawę do lepszego promowania stosowania i rozwoju HPM na pępku w PDM.

W niniejszym badaniu zastosowano benzoesan estradiolu w połączeniu z oksytocyną w celu wywołania modelu PDM (dysmenorrhoea pierwotna) typu zimnej koagulacji i zastoju krwi, aby zaobserwować efekt terapii pępka HPM. Najpierw, poprzez obserwację zachowania w postaci wiercenia się szczurów, określono, czy pomyślnie stworzono model szczura z PDM typu zimnej koagulacji i zastoju krwi, a następnie oceniono zachowanie bólowe szczurów, modelowanie oraz leczenie macicy za pomocą wskaźników WS, WLs oraz indeksu macicy. Od 6.th do 10th w dniu modelowania wykonano zabieg HPM w punkcie CV8 (Shenque) raz dziennie, przez 30 min za każdym razem. W 11.th w dniu modelowania szczury uśmiercono pod narkozą, a następnie wycięto macicę i poddano ją barwieniu hematoksyliną i eozyną (HE) w celu oceny stanu patologicznego macicy oraz wpływu HPM na tkankę macicy. Schemat przebiegu eksperymentu znajduje się w Rycina 1A.
Wpływ terapii HPM punktu pępka na zachowanie w postaci wykręcania się szczurów z PDM z zastojem krwi i zimną koagulacją 
Aby ocenić stopień PDM u szczurów z zastojem krwi i zimną koagulacją, przeanalizowano wynik wykręcania (WS) oraz latencję wykręcania (WL) (Tabela 1). Po stworzeniu modelu, jednoczynnikowa analiza wariancji (ANOVA) wykazała, że w porównaniu z grupą kontrolną, grupa modelowa PDM z zastojem krwi i zimną koagulacją (n = 6) wykazała znaczący wzrost częstotliwości wykręcania się oraz wyraźnie wyższy WS (****p &lt; 0,0001, jak pokazano na Ryc. 3A). Analiza statystyczna WL wykazała, że w porównaniu z grupą kontrolną, grupa modelowa miała istotnie zredukowaną latencję (****p &lt; 0,0001, jak pokazano na Ryc. 3B), co wskazuje na zachowanie bólowe u szczurów w grupie modelowej i pomyślne stworzenie modelu PDM u szczurów z zastojem krwi i zimną koagulacją. Po zastosowaniu terapii HPM w punkcie akupunktu Shenque po stworzeniu modelu, analiza ANOVA wykazała znaczący spadek WS w grupie leczonej (**p &lt; 0,01, Ryc. 3A). Podobnie stwierdzono różnicę statystyczną w WL między grupą leczoną a grupą modelową, z obniżeniem WL w grupie leczonej (*p &lt; 0,05, Ryc. 3B). Dodatkowo oceniono indeks macicy szczurów i stwierdzono, że w porównaniu z grupą kontrolną, grupa modelowa charakteryzowała się zwiększoną objętością macicy i powiększoną jamą macicy. Analiza ANOVA wykazała wzrost indeksu macicy w grupie modelowej (***p &lt; 0,001), podczas gdy indeks macicy spadł w grupie leczonej (*p &lt; 0,05, jak pokazano na Ryc. 3C). Wyniki te wskazują, że HPM jest skuteczne w łagodzeniu bólu u szczurów z PDM z zastojem krwi i zimną koagulacją.
Barwienie HE w celu obserwacji wpływu terapii HPM navel na tkankę macicy szczurów z PDM z zimną koagulacją i zastojem krwi. 
W grupie kontrolnej jama macicy wydaje się gładka, bez oznak obrzęku lub martwicy. Jednak w grupie modelowej stwierdzono zaburzenia strukturalne, naciek komórek zapalnych w gruczołach, pogrubienie błony śluzowej endometrium oraz rozpowszechniony obrzęk i martwicę komórek nabłonka endometrium. W połączeniu z oceną wyniku skręcenia i czasu utajenia skręcenia udowodniono, że model PDM u szczurów z zimną koagulacją i zastojem krwi został pomyślnie ustanowiony. W porównaniu z grupą modelową, w grupie leczonej odnotowano zmniejszenie obrzęku i martwicy komórek nabłonka endometrium oraz znaczną poprawę w zakresie hiperplazji endometrium (Rysunek 4)
<img alt="Schemat osi czasu eksperymentu, test zachowania szczura, obraz komórek pod mikroskopem, miejsce operacyjne na szczurze." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66622/66622fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1: PDM z koagulacją na zimno i model zastoju krwi oraz leczenie HPM w okolicy pępka. (A) Schemat przebiegu eksperymentu. (B) W fazie proestry występuje zwiększona liczba leukocytów, które są stosunkowo małe, oraz mniejsza liczba jądrzastych komórek nabłonka i zrogowaciałych komórek nabłonka. (C) Zdjęcie przedstawiające reakcję wiotczenia u szczura. (D) Schemat punktu akupunktury Shenque. (E) Zdjęcie przedstawiające leczenie HPM pępka. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66622/66622fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Układ eksperymentalny medycyny tradycyjnej z stożkami z moksy, kręgiem z ciasta, proszkiem TCM i woreczkiem." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66622/66622fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2: Materiały potrzebne do HPM w obrębie pępka. (A) Formowanie stożków z moksy z laski moksy. (B) Schematyczny rysunek kręgu z ciasta o średnicy 1 cm i wysokości 0,8 cm z pustą przestrzenią w środku. (C) Proszek TCM. (D) Schematyczny rysunek woreczka używanego do unieruchomienia szczura. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66622/66622fig02large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Wykres porównujący wynik wićnięcia, latencję i indeks macicy w grupach CG, MG i TG w badaniu eksperymentalnym." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66622/66622fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3: WS, WLs i indeks macicy szczurzyc w grupie kontrolnej (CG), grupie modelowej (MG) oraz grupie leczonej (TG) w 11. dniu. (A) Wartości WS szczurów w trzech grupach; dane przedstawiono jako średnie + błąd standardowy, ****P &lt; 0,0001 MG w porównaniu z CG; **P &lt; 0,01 TG w porównaniu z MG. (B) Wartości WLs szczurów w trzech grupach. ****P &lt; 0,0001 MG w porównaniu z CG; *P &lt; 0,05 TG w porównaniu z MG. (C) Wartości indeksu macicy szczurów w trzech grupach. ***P &lt; 0,001 MG w porównaniu z CG; *P &lt; 0,05 TG w porównaniu z MG. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66622/66622fig03large.jpg" target="_blank">Proszę kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Analiza histologiczna, obrazy mikroskopowe, porównanie tkanek kontrolnych, modelu oraz tkanek leczonych moksabusturą." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66622/66622fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 4"> 
Rycina 4: Barwienie HE tkanki macicy. (A) W grupie kontrolnej jamy macicy wyglądają gładko, bez oznak obrzęku lub nekrozy. (B) W grupie modelu stwierdzono zaburzenia strukturalne, naciek komórek zapalnych gruczołów, pogrubienie błony śluzowej endometrium oraz rozległą obecność obrzęku i nekrozy w komórkach nabłonkowych endometrium. (C) W grupie leczonej stwierdzono zmniejszenie obrzęku i nekrozy komórek nabłonkowych endometrium wraz ze znaczną poprawą w zakresie hiperplazji endometrium. Paski skali = 100 µm. Skrót: HE = hematoksylina i eozyna. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66622/66622fig04large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
Tabela 1: Dane z testów behawioralnych. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66622/Table%201.xlsx" target="_blank">Kliknij tutaj, aby pobrać tę tabelę.</a>

Tutaj szczegółowo opisujemy procedury operacyjne i środki ostrożności, które należy podjąć podczas moksyterapii pępka z podziałem ziół w leczeniu pierwotnego bolesnego miesiączkowania u szczurów z zimną krzepliwością i zastojem krwi, co może znacznie poprawić reakcję wicia się u szczurów z bolesnym miesiączkowaniem i złagodzić ból.

Moksowanie z podziałem ziół na pępek w szczurzym modelu pierwotnego bolesnego miesiączkowania z zimną krzepnięciem i zastojem krwi

Primary dysmenorrhea (PDM) refers to the occurrence of spasmodic colicky pain in the lower abdomen without any obvious pelvic pathology, often accompanied ...

Badania nad tradycyjną metodą znieczulenia pierwotnego bolesnego miesiączkowania przez tradycyjną medycynę chińską. Chcemy sprawdzić, czy moksoterapia na pępek z podziałem na zioła może złagodzić ból szczurów z bolesnym miesiączkowaniem. Utrzymywanie szczurów w ciszy podczas eksperymentu jest eksperymentalnym wyzwaniem, z którym się zetknęliśmy.Zamierzamy zbadać przyczyny przewlekłego bólu w bolesnym miesiączkowaniu i chcielibyśmy zbadać znieczulający mechanizm akupunktury i moksybulacji. Na początek uzyskaj adaptacyjną samicę szczura karmioną dietą, która była utrzymywana w 12-godzinnym cyklu światło-ciemność. Włóż pistolet do pipet z 60 mikrolitrami 0,9% soli fizjologicznej do otworu pochwy szczura.Pipetować w górę i w dół trzy do czterech razy. Odessać płyn i upuść go na szklane szkiełko. Aby utrwalić wysuszoną zawartość, dodaj 60 mikrolitrów 95% etanolu.Po ośmiu minutach spłucz i wysusz zawartość. Dodaj 0,1% roztwór barwiący błękit metylenowy i inkubuj z dala od światła przez 10 minut. Następnie spłucz i wysusz zawartość.Obserwuj szkiełko pod mikroskopem i uzyskaj obrazy, aby przebadać cykl rujowy szczura. Aby ustalić pierwotne bolesne miesiączkowanie, wstrzyknij szczurowi benzoesan estradiolu podskórnie w udo przez 10 dni. Umieść samicę szczura w lodówce w temperaturze 20 stopni Celsjusza na cztery godziny od pierwszego do piątego dnia modelowania.Na początek ustal pierwotny model szczura z bolesnym miesiączkowaniem za pomocą zastrzyków benzoesanu estradiolu. Zaopatrz się w stożki moksy do moksyterapii z podziałem na zioła lub terapii pępka HPM i wetrzyj nić moksy w dłoń w kształt wrzeciona. Przygotuj miskę na ciasto z otworem w środku.Aby przygotować woreczek na szczura, zszyj przeciętą szmatkę po przekątnej. Wytnij mały otwór u góry do oddychania i otwór po jednej stronie woreczka do moksybulacji. Następnie zszyj parę płóciennych lin o długości około 10 centymetrów i szerokości 1 centymetra odpowiednio na górnym i dolnym końcu torby do wiązania.Następnie zlokalizuj punkt akupunkturowy shenque na linii środkowej brzucha szczura. Usuń włosy wokół shenque acupoint. Umieść szczura w torbie na szczury, trzymając brzuch szczura do góry i odsłoń dolne kończyny i ogon.Przymocuj górną i dolną część ciała szczura oraz ogon na stole operacyjnym za pomocą taśmy. Zdezynfekuj shenque i otaczającą go skórę za pomocą 75% etanolu. Umieść miskę na brzuchu, celując jej otworem w akupunkt shenque i nałóż 0,3 grama proszku tradycyjnej medycyny chińskiej na akupunkt.Następnie połóż stożek moksy na proszku tradycyjnej medycyny chińskiej. Zapal stożek moksy i traktuj szczura przez 30 minut. Na początek zaoferuj terapię pępka moksowaniem z podziałem na zioła szczurowi z pierwotnym bolesnym miesiączkowaniem.Przetrzyj pudełko eksperymentalne 75% etanolem przed każdą próbą. Umieść szczura w klatce po dootrzewnowym wstrzyknięciu oksytocyny lub 0,9% soli fizjologicznej. Nagraj wijące się zachowanie szczura przez 30 minut za pomocą kamery wideo.Po znieczuleniu określ wagę leczonego szczura. Naciąć skórę i mięśnie od środka brzucha, aby odsłonić serce. Włóż igłę do obfitości do serca od pozycji wierzchołka, przymocuj igłę do obfitości za pomocą kleszczy hemostatycznych i wykonaj małe nacięcie w prawej małżowinie usznej.Przelej 0,9% soli fizjologicznej przez lewą komorę i aortę zstępującą, aż wątroba i oczy szczura staną się jaśniejsze i białe. Na koniec za pomocą nożyczek wytnij macicę i dokładnie ją zważ, aby obliczyć wskaźnik macicy. Grupa modelowa PDM, z zimną krzepnięciem i zastojem krwi, miała znaczny wzrost wyniku wicia się w porównaniu z grupą kontrolną, a grupa leczona wykazała znaczny spadek wyniku wicia się.Grupa modelowa miała znacznie zmniejszone opóźnienie wicia się w porównaniu z grupą kontrolną, a grupa leczona wykazała wzrost opóźnienia wicia w porównaniu z grupą modelową. Wskaźnik macicy zwiększył się w grupie modelowej w porównaniu z grupą kontrolną i zmniejszył się w grupie leczonej w porównaniu z grupą modelową.

herbs-partitioned-moxibustion-on-navel-rat-model-primary-dysmenorrhea

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Ten artykuł demonstruje ustandaryzowany proces działania moksowania linii medycznej Zhuang u zwierząt doświadczalnych. Aby osiągnąć powtarzalność i dokładność moksoterapii linii medycznej Zhuang, opracowaliśmy symulator do utrzymania siły, ciepła i częstotliwości. Skonstruowaliśmy model bolesnego miesiączkowania do eksperymentalnej weryfikacji u szczurów z zespołem zimnego krzepnięcia.

Lecznicza terapia moksybustion nici medycyny Zhuang i jej zastosowanie w szczurzym modelu zespołu zimno-krzepnięcia pierwotnego bolesnego miesiączkowania

Myszie kompletne model stazy w zakrzepicy żyły głównej dolnej pozwala na uzyskanie mierzalnych ilości tkanki ściany żyły oraz zakrzepu. Model ten okazał się użyteczny w ocenie oddziaływań między ścianą żyły a zakrzepem zamykającym światło naczynia oraz w analizie przejścia od stanu ostrego do chronicznego stanu zapalnego.

Myszy w całkowitym modelu zastoju zakrzepicy żyły głównej dolnej

Wywoływanie przerwania bariery krew-mózg (BBB) za pomocą skupionego ultradźwięku z wykorzystaniem mikropęcherzyków jest obiecującą techniką nieinwazyjnego, celowanego dostarczania leków do mózgu1-3. Niniejszy protokół opisuje procedurę eksperymentalną dla transkranialnego przerwania BBB pod kontrolą MRI w modelu szczura.

Przełamywanie bariery krew-mózg pod kontrolą MRI z użyciem przezczaszkowego ultradźwiękowego ogniskowania w modelu szczura

Opisujemy metodę obrazowania odpowiedzi na leczenie przeciwnowotworowe in vivo i w rozdzielczości pojedynczej komórki.

Obrazowanie na żywo odpowiedzi na leki w mikrośrodowisku guza w mysich modelach raka piersi

Celem niniejszego badania było sprawdzenie odtwarzalności modelu BBB in vitro z udziałem syngenicznej kohodowli komórek śródbłonka i astrocytów na szczurach. Monowarstwa komórek śródbłonka charakteryzowała się wysoką przepuszczalnością TEER i niską przepuszczalnością LY. Oceniano ekspresję specyficznych białek TJ, funkcjonalne odpowiedzi na stan zapalny oraz funkcjonalność transporterów i receptorów.

Tworzenie modelu in vitro bariery krew-mózg szczura (BBB): skupienie się na nieprzepuszczalności bariery krew-mózg i transporcie za pośrednictwem receptorów

Przedstawiono generowanie ortotopowego szczurzego modelu międzybłoniaka opłucnej przez wszczepienie komórek międzybłoniaka II-45 do jamy opłucnej szczurów o usposobieniu immunologicznym. Opisano również metodę cytometrii przepływowej do analizy siedmiu podzbiorów komórek odpornościowych u tych zwierząt z próbki krwi o objętości 25 μl.

Implantacja ortotopowa i monitorowanie obwodowych komórek odpornościowych w modelu międzybłoniaka syngenicznego szczura II-45

Opisany poniżej model uszkodzenia balonu szyjnego u szczura pozwala badaczom ocenić leki lub terapie, które negują przerost tętnic wywołany urazem. Opisano szczegółowe przygotowanie przedoperacyjne, zabieg chirurgiczny i opiekę pooperacyjną nad zwierzęciem.

Model uszkodzenia balonu szyjnego szczura do testowania terapii przeciwnaczyniowej

Prezentowany tutaj jest protokół pobierania próbek ludzkiej tkanki kosmków łożyskowych, a następnie izolacji cytotrofoblastów do pierwotnej hodowli komórek. Leczenie trofoblastów TNFα podsumowuje stan zapalny w środowisku wewnątrzmacicznym otyłości i ułatwia odkrycie celów molekularnych regulowanych przez stan zapalny w łożyskach z otyłością matczyną.

Podstawowy model ludzkiego trofoblastu do badania wpływu stanu zapalnego związanego z otyłością matki na regulację autofagii w łożysku

Tutaj prezentujemy protokół eksperymentalnej oceny krzepnięcia osocza w tkance wątroby in vivo. W modelu świńskim mikrokrążenie jest badane za pomocą laserowego Dopplera, głębokość krzepnięcia jest mierzona histologicznie, temperatura w miejscu krzepnięcia za pomocą termometru na podczerwień i kamery termograficznej, a efekt uszczelnienia kanałów jest dokumentowany za pomocą eksperymentów z ciśnieniem rozrywającym.

Ocena krzepnięcia osocza na tkance wątroby w dużym modelu zwierzęcym in vivo

Technika wirekowego miografu jest używana do badania funkcji mięśni gładkich naczyń krwionośnych i badania przesiewowego nowych leków. Przedstawiamy szczegółowy protokół pomiaru izometrycznej kurczliwości tętnicy krezkowej myszy oraz badań przesiewowych nowych środków zwiotczających mięśnie gładkie naczyń krwionośnych.

Izometryczny pomiar kurczliwości tętnicy krezkowej myszy za pomocą miografii drutowej

Poznaj metodę moksybustji z podziałem ziół na pępek w leczeniu pierwotnego bolesnego miesiączkowania u szczurów. Technika ta łagodzi ból związany z zimną krzepnięcią i zastojem krwi, oferując wgląd w mechanizmy tradycyjnej medycyny chińskiej.

Moksowanie z podziałem ziół na pępek w szczurzym modelu pierwotnego bolesnego miesiączkowania z zimną krzepnięciem i zastojem krwi (Wideo) | JoVE Journal

Moksowanie z podziałem ziół na pępek w szczurzym modelu pierwotnego bolesnego miesiączkowania z zimną krzepnięciem i zastojem krwi

Przeglądaj więcej filmów