Mysi model tętniaka aorty brzusznej za pomocą okołoprzybytkowego nacieku chlorku wapnia i elastazy
August 2nd, 2024
Ten manuskrypt przedstawia protokół tworzenia mysiego modelu tętniaka aorty brzusznej myszy przy użyciu chlorku wapnia i elastazy, łącząc zalety poprzednich metod modelowania. Model ten można wykorzystać do badania mechanizmów patofizjologicznych leżących u podstaw tętniaków aorty brzusznej.
W pracy przedstawiono protokół tworzenia mysiego modelu tętniaka aorty brzusznej z wykorzystaniem chlorku wapnia i elastazy, który można wykorzystać do zbadania mechanizmu patofizjologicznego tętniaka aorty brzusznej. Nasz protokół łączy w sobie zalety okołoprzybytkowego ŚOI i infiltracji chlorkiem wapnia, który jest bezpiecznym, stabilnym i powtarzalnym mysim modelem potrójnego A, wykazującym wysoką częstość występowania potrójnego A, znaczącego aorty brzusznej i zmian patofizjologicznych przypominających te obserwowane u człowieka w A.In przyszłości, nasz zespół badawczy jest zaangażowany w dedykowane zaangażowanie w badania kliniczne i podstawowe dotyczące choroby tętnic obwodowych, ze szczególnym naciskiem na patogenezę tych podstaw i rozwoju podejść terapeutycznych. Na początek umieść znieczuloną mysz w pozycji leżącej na poduszce grzewczej.
Po goleniu i dezynfekcji umieść mysz pod mikroskopem stereoskopowym. Za pomocą nożyczek wykonaj podłużne nacięcie o długości około dwóch do 2,5 centymetra wzdłuż linii środkowej brzucha. Wprowadzić do jamy otrzewnej przez kreskę białą z dostępu przezbrzusznego.
Umieść retraktor, aby odsłonić jamę otrzewnej. Umieść jelita i okrężnicę w prawej połowie brzucha za pomocą zwykłej gazy nasączonej solą fizjologiczną. Wykonaj oddzielenie tkanki łącznej i tłuszczowej przylegającej do aorty podnerkowej jamy brzusznej i żyły głównej dolnej za pomocą kleszczy i wacików.
Delikatnie rozetnij aortę brzuszną i odsłoń szczelinę między aortą brzuszną a leżącą nad nią częścią mięśnia lędźwiowego większego. Włóż wysterylizowane paski wacika do szczeliny, nie uszkadzając tętnicy lędźwiowej ani żyły. Umieść waciki nasączone 0,9 molowym chlorkiem wapnia na przydance aorty brzusznej.
Po 15 minutach wyjmij wacik. Rozcieńczyć elastazę do dwóch miligramów na mililitr wodą podwójnie destylowaną. Za pomocą strzykawki insulinowej nanieść 50 mikrolitrów rozcieńczonej elastazy na podnerkowy odcinek aorty brzusznej.
Owiń paski wacika, aby zakryć aortę brzuszną i żyłę główną dolną. Przykryj jamę brzuszną podczas procesu infiltracji wysterylizowaną gazą. Po 15 minutach ostrożnie usuń paski gazy i wacika, przesuń jelita i okrężnicę z powrotem do ich pierwotnych pozycji.
Przykryj leczoną aortę krezką i zwilż jelita 0,9% solą fizjologiczną, aby zapobiec zrostowe. Za pomocą niewchłanialnego szwu polipropylenowego 6/O zamknij warstwę mięśniową i skórę. Umieść mysz na poduszce grzewczej ultrasonografu gryzoni.
Zastosuj supulę ultradźwiękową do brzucha i zmierz maksymalną średnicę tętniaka oraz średnicę normalnego odcinka aorty brzusznej. W arkuszu Excela oblicz zwiększony procent aorty brzusznej podnerkowej. Po badaniu użyj serwetki, aby zetrzeć pozostałą suplantę ultradźwiękową i umieść mysz na poduszce grzewczej, aż do całkowitego wyzdrowienia.
W PPE plus chlorek wapnia u 91,67% myszy rozwinął się tętniak aorty brzusznej po 21 dniach od operacji, podczas gdy w grupie pozorowanej nie zaobserwowano powstania tętniaka. Średnia maksymalna średnica wewnętrzna aorty brzusznej podnerkowej była istotnie większa w grupie PPE z chlorkiem wapnia w porównaniu z grupą pozorowaną. Średnia maksymalna średnica zewnętrzna aorty brzusznej podnerkowej była istotnie większa w grupie PPE z chlorkiem wapnia w porównaniu z grupą pozorowaną.
W badaniu histologicznym stwierdzono pogrubienie ściany aorty, naciek komórek zapalnych, degradację macierzy zewnątrzkomórkowej, odkładanie się włókien kolagenowych i rozpad włókien elastycznych w grupie PPE plus chlorek wapnia w porównaniu z grupą pozorowaną.
Przegląd
To badanie przedstawia protokół ustanowienia modelu tętniaka tętnicy brzusznej u myszy za pomocą chlorku wapnia i elastazy. Ten model został zaprojektowany w celu zbadania mechanizmów patofizjologicznych leżących u podstaw tętniaków tętnicy brzusznej.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauki
- Biologia naczyń
- Patofizjologia
Tło
- Tętniaki tętnicy brzusznej (AAA) są istotnymi schorzeniami naczyniowymi.
- Istniejące modele mają ograniczenia, które niniejsze badanie ma na celu rozwiązać.
- Proponowany model łączy zalety poprzednich metod.
- Demonstruje wysokie współczynniki występowania oraz zmiany patofizjologiczne podobne do tych obserwowanych u ludzi z AAA.
Cel badania
- Ustanowienie wiarygodnego modelu mysiego do badań nad AAA.
- Ułatwienie badania patogenezy AAA.
- Opracowanie podejść terapeutycznych dla AAA i chorób pokrewnych.
Stosowane metody
- Znieczulenie myszy i umieszczenie jej na podgrzewanym podkładzie.
- Podłużne nacięcie wzdłuż linii środkowej brzucha.
- Dostęp do jamy otrzewnej przez podejście przezbrzuszne.
- Zastosowanie chlorku wapnia i elastazy do wywołania tętniaka.
Główne wyniki
- Model wykazuje wysoki współczynnik występowania AAA.
- Zmiany patofizjologiczne przypominają te obserwowane u ludzi.
- Protokół jest bezpieczny, stabilny i można go powtórzyć.
- Umożliwia szczegółowe badania mechanizmów AAA.
Wnioski
- Ten model jest cennym narzędziem do badań nad AAA.
- Zwiększa rozumienie patofizjologii AAA.
- Przyszłe badania mogą skupić się na rozwoju terapii.
