Name: Mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego przeciążeniem ciśnieniowym i niewydolności przez opaski pnia płucnego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-06-14T14:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 49 s
Description: Poznaj mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego opaskowaniem pnia płucnego. Metoda obejmuje intubację, chirurgię i echokardiografię, umożliwiając badanie wczesnych zmian molekularnych oraz testowanie nowych terapii niewydolności prawej komory.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Snedkermester Sophus Jacobsen og Hustru Astrid Jacobsens Fond, Helge Peetz og Verner Peetz og hustru Vilma Peetz Legat, Grosserer A.V. Lykfeldt og Hustrus Legat. Ponadto autorzy pragną podziękować personelowi ośrodków dla zwierząt na Wydziale Medycyny Klinicznej Uniwersytetu w Aarhus za wsparcie podczas realizacji prac eksperymentalnych.

Creating a Murine Model of RV Hypertrophy and Failure by Pulmonary Trunk Banding

<ol><li>Voelkel, N. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+function+and+failure%3A+Report+of+a+national+heart%2C+lung%2C+and+blood+institute+working+group+on+cellular+and+molecular+mechanisms+of+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Right ventricular function and failure: Report of a national heart, lung, and blood institute working group on cellular and molecular mechanisms of right heart failure.</a> Circulation. 114 (17), 1883-1891 (2006).</li>
<li>Haddad, F., Doyle, R., Murphy, D. J., Hunt, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+function+in+cardiovascular+disease%2C+part+ii%3A+Pathophysiology%2C+clinical+importance%2C+and+management+of+right+ventricular+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Right ventricular function in cardiovascular disease, part ii: Pathophysiology, clinical importance, and management of right ventricular failure.</a> Circulation. 117 (13), 1717-1731 (2008).</li>
<li>Van De Veerdonk, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Progressive+right+ventricular+dysfunction+in+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension+responding+to+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Coll+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Progressive right ventricular dysfunction in patients with pulmonary arterial hypertension responding to therapy.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (24), 2511-2519 (2011).</li>
<li>Gomez-Arroyo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+brief+overview+of+mouse+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+Problems+and+prospects%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">A brief overview of mouse models of pulmonary arterial hypertension: Problems and prospects.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302 (10), L977-L991 (2012).</li>
<li>Maarman, G., Lecour, S., Butrous, G., Thienemann, F., Sliwa, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comprehensive+review%3A+The+evolution+of+animal+models+in+pulmonary+hypertension+research%3B+are+we+there+yet%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">A comprehensive review: The evolution of animal models in pulmonary hypertension research; are we there yet.</a> Pulm Circ. 3 (4), 739-756 (2013).</li>
<li>Andersen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Diagn+Ther%22%5BJournal%5D)">Animal models of right heart failure.</a> Cardiovasc Diagn Ther. 10 (5), 1561-1579 (2020).</li>
<li>Voelkel, N. F., Tuder, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hypoxia-induced+pulmonary+vascular+remodeling%3A+A+model+for+what+human+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Hypoxia-induced pulmonary vascular remodeling: A model for what human disease.</a> J Clin Invest. 106 (6), 733-738 (2000).</li>
<li>Rabinovitch, M., Gamble, W., Nadas, A. S., Miettinen, O. S., Reid, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+pulmonary+circulation+after+chronic+hypoxia%3A+Hemodynamic+and+structural+features%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol%22%5BJournal%5D)">Rat pulmonary circulation after chronic hypoxia: Hemodynamic and structural features.</a> Am J Physiol. 236 (6), H818-H827 (1979).</li>
<li>Taraseviciene-Stewart, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+the+VEGF+receptor+2+combined+with+chronic+hypoxia+causes+cell+death-dependent+pulmonary+endothelial+cell+proliferation+and+severe+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Faseb+j%22%5BJournal%5D)">Inhibition of the VEGF receptor 2 combined with chronic hypoxia causes cell death-dependent pulmonary endothelial cell proliferation and severe pulmonary hypertension.</a> Faseb j. 15 (2), 427-438 (2001).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> Am J Respir Crit Care Med. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Nicolls, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+models+of+pulmonary+hypertension+based+on+VEGF+receptor+blockade-induced+endothelial+cell+apoptosis%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">New models of pulmonary hypertension based on VEGF receptor blockade-induced endothelial cell apoptosis.</a> Pulm Circ. 2 (4), 434-442 (2012).</li>
<li>Hessel, M. H., Steendijk, P., Den Adel, B., Schutte, C. I., Van Der Laarse, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+right+ventricular+function+after+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension+in+the+intact+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Heart+Circ+Physiol%22%5BJournal%5D)">Characterization of right ventricular function after monocrotaline-induced pulmonary hypertension in the intact rat.</a> Am J Physiol Heart Circ Physiol. 291 (5), H2424-H2430 (2006).</li>
<li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302 (4), L363-L369 (2012).</li>
<li>Janssen, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((5-ht2b+receptor+antagonists+inhibit+fibrosis+and+protect+from+RV+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">5-ht2b receptor antagonists inhibit fibrosis and protect from RV heart failure.</a> Biomed Res Int. 2015, 438403(2015).</li>
<li>Andersen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pulmonary+trunk+banding+model+of+pressure+overload+induced+right+ventricular+hypertrophy+and+failure%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">A pulmonary trunk banding model of pressure overload induced right ventricular hypertrophy and failure.</a> J Vis Exp. (141), e58050(2018).</li>
<li>Axelsen, J. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+6-mercaptopurine+in+pressure+overload+induced+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Effects of 6-mercaptopurine in pressure overload induced right heart failure.</a> PLoS One. 14 (11), e0225122(2019).</li>
<li>Egemnazarov, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure+overload+creates+right+ventricular+diastolic+dysfunction+in+a+mouse+model%3A+Assessment+by+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Pressure overload creates right ventricular diastolic dysfunction in a mouse model: Assessment by echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 28 (7), 828-843 (2015).</li>
<li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+right+ventricular+failure+by+pulmonary+artery+constriction+and+evaluation+of+right+ventricular+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Induction of right ventricular failure by pulmonary artery constriction and evaluation of right ventricular function in mice.</a> J Vis Exp. (147), e59431(2019).</li>
<li>Kojonazarov, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+peroxisome+proliferator-activated+receptor+%CE%B2%2F%CE%B4+agonist+gw0742+has+direct+protective+effects+on+right+heart+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">The peroxisome proliferator-activated receptor β/δ agonist gw0742 has direct protective effects on right heart hypertrophy.</a> Pulm Circ. 3 (4), 926-935 (2013).</li>
<li>Kojonazarov, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((P38+MAPK+inhibition+improves+heart+function+in+pressure-loaded+right+ventricular+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">P38 MAPK inhibition improves heart function in pressure-loaded right ventricular hypertrophy.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 57 (5), 603-614 (2017).</li>
<li>Rai, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+Riociguat+and+Sildenafil+on+right+heart+remodeling+and+function+in+pressure+overload+induced+model+of+pulmonary+arterial+banding%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Effect of Riociguat and Sildenafil on right heart remodeling and function in pressure overload induced model of pulmonary arterial banding.</a> Biomed Res Int. 2018, 3293584(2018).</li>
<li>Sydykov, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+deficiency+and+pharmacological+stabilization+of+mast+cells+ameliorate+pressure+overload-induced+maladaptive+right+ventricular+remodeling+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Genetic deficiency and pharmacological stabilization of mast cells ameliorate pressure overload-induced maladaptive right ventricular remodeling in mice.</a> Int J Mol Sci. 21 (23), 9099(2020).</li>
<li>Andersen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+combined+angiotensin+ii+receptor+antagonism+and+neprilysin+inhibition+in+experimental+pulmonary+hypertension+and+right+ventricular+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Effects of combined angiotensin ii receptor antagonism and neprilysin inhibition in experimental pulmonary hypertension and right ventricular failure.</a> Int J Cardiol. 293, 203-210 (2019).</li>
<li>Andersen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure+overload+induced+right+ventricular+remodeling+is+not+attenuated+by+the+anti-fibrotic+agent+pirfenidone%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Pressure overload induced right ventricular remodeling is not attenuated by the anti-fibrotic agent pirfenidone.</a> Pulm Circ. 9 (2), 2045894019848659(2019).</li>
<li>Labazi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sex-dependent+changes+in+right+ventricular+gene+expression+in+response+to+pressure+overload+in+a+rat+model+of+pulmonary+trunk+banding%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicines%22%5BJournal%5D)">Sex-dependent changes in right ventricular gene expression in response to pressure overload in a rat model of pulmonary trunk banding.</a> Biomedicines. 8 (10), 430(2020).</li>
<li>Sun, X. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+mao-a+activity+promotes+progression+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Respir+Cell+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Increased mao-a activity promotes progression of pulmonary arterial hypertension.</a> Am J Respir Cell Mol Biol. 64 (3), 331-343 (2021).</li>
<li>Axelsen, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+Empagliflozin+on+right+ventricular+adaptation+to+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cardiovasc+Med%22%5BJournal%5D)">Effects of Empagliflozin on right ventricular adaptation to pressure overload.</a> Front Cardiovasc Med. 10, 1302265(2023).</li>
<li>Mamazhakypov, A., Veith, C., Schermuly, R. T., Sydykov, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Surgical+protocol+for+pulmonary+artery+banding+in+mice+to+generate+a+model+of+pressure-overload-induced+right+ventricular+failure%5BTitle%5D)+AND+%22STAR+Protoc%22%5BJournal%5D)">Surgical protocol for pulmonary artery banding in mice to generate a model of pressure-overload-induced right ventricular failure.</a> STAR Protoc. 4 (4), 102660(2023).</li>
<li>Boehm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delineating+the+molecular+and+histological+events+that+govern+right+ventricular+recovery+using+a+novel+mouse+model+of+pulmonary+artery+de-banding%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovasc+Res%22%5BJournal%5D)">Delineating the molecular and histological events that govern right ventricular recovery using a novel mouse model of pulmonary artery de-banding.</a> Cardiovasc Res. 116 (10), 1700-1709 (2020).</li>
<li>Andersen, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+bisoprolol+and+losartan+treatment+in+the+hypertrophic+and+failing+right+heart%5BTitle%5D)+AND+%22J+Card+Fail%22%5BJournal%5D)">Effects of bisoprolol and losartan treatment in the hypertrophic and failing right heart.</a> J Card Fail. 20 (11), 864-873 (2014).</li>
<li>Hirata, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+model+of+pulmonary+artery+banding+leading+to+right+heart+failure+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Novel model of pulmonary artery banding leading to right heart failure in rats.</a> Biomed Res Int. 2015, 753210(2015).</li>
<li>Vildbrad, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limitations+and+pitfalls+in+measurements+of+right+ventricular+stroke+volume+in+an+animal+model+of+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Meas%22%5BJournal%5D)">Limitations and pitfalls in measurements of right ventricular stroke volume in an animal model of right heart failure.</a> Physiol Meas. 36 (5), 925-937 (2015).</li>
<li>Boehm, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Maintained+right+ventricular+pressure+overload+induces+ventricular-arterial+decoupling+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Maintained right ventricular pressure overload induces ventricular-arterial decoupling in mice.</a> Exp Physiol. 102 (2), 180-189 (2017).</li>
<li>Cheng, H. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+right+ventricular+structure+and+function+in+mouse+model+of+pulmonary+artery+constriction+by+transthoracic+echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Assessment of right ventricular structure and function in mouse model of pulmonary artery constriction by transthoracic echocardiography.</a> J Vis Exp. (84), e51041(2014).</li>
<li>Luitel, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pressure+overload+leads+to+an+increased+accumulation+and+activity+of+mast+cells+in+the+right+ventricle%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rep%22%5BJournal%5D)">Pressure overload leads to an increased accumulation and activity of mast cells in the right ventricle.</a> Physiol Rep. 5 (6), e13146(2017).</li>
<li>Mamazhakypov, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Novel+therapeutic+targets+for+the+treatment+of+right+ventricular+remodeling%3A+Insights+from+the+pulmonary+artery+banding+model%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Environ+Res+Public+Health%22%5BJournal%5D)">Novel therapeutic targets for the treatment of right ventricular remodeling: Insights from the pulmonary artery banding model.</a> Int J Environ Res Public Health. 18 (16), 8297(2021).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W niniejszej pracy przedstawiono mysi model hipertrofii i awarii RV wywołanej przeciążeniem ciśnieniowym. Wykazujemy, że: (i) PTB u młodych myszy może wywoływać różne stopnie patologii RV, od łagodnego przerostu RV do niewydolności RV z pozasercowymi objawami dekompensacji i histologicznie potwierdzonym zwłóknieniem RV. (ii) Oznaki dysfunkcji RV można zaobserwować i określić ilościowo za pomocą echokardiografii po 1 i 3 tygodniach od operacji PTB. (iii) Stopień przerostu RV jest proporcjonalny do nasilenia PTB i wynikającego z niego wzrostu ciśnienia RV. Model ten może pomóc w wyjaśnieniu patogenezy awarii RV wtórnej do przeciążenia ciśnieniem RV, ponieważ pokazujemy, że model PTB nadaje się do badania różnych etapów patologii RV.
Aby zapewnić sukces i powtarzalność mysiego modelu PTB, należy zwrócić dużą uwagę na następujące kroki. (i) Wybór odpowiedniej średnicy klipsa do podwiązywania. Właściwa średnica klipsa zależy od kilku czynników, takich jak pożądany stopień przeciążenia ciśnienia w układzie hydraulicznym i czas kontynuacji. Wiek i masa ciała myszy są również ważnymi czynnikami, które należy wziąć pod uwagę. W związku z tym protokół może być dostosowywany w zależności od aktualnego pytania naukowego. Z tego powodu zalecamy wykonanie operacji pilotażowych i echokardiografii w odpowiednich punktach czasowych po operacji, aby ocenić przydatność wybranych średnic klipsów. (ii) Precyzyjna regulacja aplikatora klipsów jest niezbędna do zapewnienia powtarzalnej patologii. Zalecamy użycie metalowego drutu lub kaniul o dobrze zdefiniowanej średnicy zewnętrznej jako wskazówki do regulacji aplikatora klipsa ligującego. (iii) Utrata krwi była najczęstszym ciężkim powikłaniem podczas operacji PTB i najczęstszą przyczyną śmiertelności około- i pooperacyjnej. Aby ograniczyć utratę krwi, w miarę możliwości należy używać narzędzi mikrochirurgicznych i sekcji. Używaj nożyczek chirurgicznych tylko wtedy, gdy jest to wskazane w protokole. (iv) Inną przyczyną śmiertelności okołooperacyjnej są arytmie serca. Krótkie epizody bradykardii mogą wystąpić podczas rozwarstwienia pnia płucnego i nałożenia klipsa podwiązującego. Aby zmniejszyć ryzyko zatrzymania krążenia, należy ograniczyć czas manipulacji pniem płucnym. W przypadku zaobserwowania bradykardii wstrzymaj manipulację pniem płucnym, aż tętno się unormuje. (v) Odtwarzalna ocena echokardiograficzna może być trudna i wymaga szkolenia przed uzyskaniem powtarzalnych wyników. Ze względu na mały rozmiar RV szczególnie trudne jest uzyskanie dobrej wizualizacji RV u myszy sterowanych pozorem w widoku PLAX i A4CH. (vi) Tętno może się znacznie różnić podczas oceny echokardiograficznej. Aby zmniejszyć zmienność, należy uważnie monitorować tętno i stosować niskie dawki znieczulenia, zapewniając jednocześnie wystarczające znieczulenie.
Ograniczeniem mysiego modelu PTB jest konieczność posiadania sprzętu chirurgicznego i szkolenia. Operacje pilotażowe powinny być zawsze wykonywane w celach szkoleniowych, a metody powinny być dostosowane do lokalnie dostępnego sprzętu. Użyliśmy tytanowych klipsów ligaturujących, które okazały się wysoce powtarzalną metodą indukcji przeciążenia ciśnieniowego RV15. Ponadto wykazano, że stosowanie klipsów podwiązujących skutkuje niższą śmiertelnością okołochirurgiczną i lepszą rekonwalescencją pooperacyjną w porównaniu z ligaturami chirurgicznymi31.
Echokardiografia do oceny funkcji RV ma pewne ograniczenia, ponieważ jest zależna od operatora, a zmienność między- i wewnątrzoperatorska może wpływać na wyniki echokardiografii. W niniejszej pracy echokardiografię wykonali dwaj operatorzy. Aby uniknąć błędu systematycznego wynikającego ze zmienności między obserwatorami, obaj operatorzy przeprowadzili echokardiografię na równej liczbie myszy ze wszystkich grup. Co więcej, echokardiografia u myszy wiąże się z pewnymi wyzwaniami. Jest to szczególnie prawdziwe u małych i stosunkowo zdrowych myszy, o czym świadczy większa zmienność pomiarów CO i TAPSE po 1 tygodniu (Figura 5) w porównaniu z 3 tygodniami (Figura 6). Aby uzyskać dokładniejszy pomiar CO, VTI w pniu płucnym mierzono w trzech cyklach pracy serca w trzech różnych lokalizacjach (w środku pnia płucnego i w pobliżu ścian naczynia). Ponadto wykazano, że echokardiografia zawyża CO w porównaniu z MRI u szczurów poddanych PTB32. MRI jest złotym standardem pomiaru CO u myszy i dlatego może być brany pod uwagę przy użyciu obecnego modelu32. Innym wyzwaniem u myszy z niewielkim lub zerowym wzrostem ciśnienia RV jest mały rozmiar RV, co komplikuje dobry widok A4CH do pomiaru, np. TAPSE. Może to prowadzić do niedoszacowania TAPSE u niektórych myszy w grupach pozorowanych i mPTB. Pomimo tych wyzwań uzyskano statystycznie istotne wyniki dla CO i TAPSE w sPTB w porównaniu z pozorowanym i mPTB. Pokazuje to, że CO i TAPSE są użytecznymi markerami funkcji RV w obecnym modelu, ale także podkreśla potrzebę intensywnego szkolenia badaczy przed oceną echokardiograficzną myszy.
Nieodłącznym ograniczeniem wszystkich modeli zwierzęcych jest to, że wyników nie można bezpośrednio ekstrapolować na ludzi ze względu na różnice genetyczne i fizjologiczne.
Według naszej wiedzy jest to jedyny model PTB u młodych myszy. Podejście to zostało zastosowane u szczurów, u których wraz ze wzrostem szczurów rozwija się stopniowy i powolny wzrost obciążenia następczego. Ta wolniejsza indukcja choroby lepiej naśladuje rozwój przewlekłej niewydolności RV15.
Obecny protokół obejmuje dwie odrębne grupy myszy o różnym stopniu dysfunkcji RV. Według naszej wiedzy, żadne inne opublikowane mysie modele PTB nie obejmują grupy z tylko łagodnym przerostem RV bez objawów dysfunkcji RV, upośledzenia hemodynamicznego lub zwłóknienia. Ten wczesny etap choroby jest więc w dużej mierze pomijany. Badanie tego wczesnego etapu rozwoju choroby może poszerzyć naszą wiedzę na temat stopniowego postępu od przerostu RV do niewydolności RV obserwowanego u pacjentów z przewlekłym TNP17.
W tym modelu patologia przewlekłej niewydolności RV rozwija się w ciągu 3 tygodni po operacji, co czyni go jednym z najbardziej efektywnych czasowo modeli przewlekłej niewydolności RV6. Inne mysie modele PTB podają czas trwania badania od 1 do 8 tygodni 17,18,33,34,35. Objawy dysfunkcji RV zaobserwowaliśmy już 1 tydzień po operacji w sPTB. To efektywne czasowo podejście z 3-tygodniową obserwacją wiąże się jednak z ograniczeniami. Myszy nie są w pełni dorosłe w wieku 8 tygodni, a dłuższa obserwacja może skutkować coraz poważniejszym zwężeniem pnia płucnego i jeszcze poważniejszą niewydolnością RV.
Genetycznie zmodyfikowane myszy są łatwo dostępne, a nowe genetycznie zmodyfikowane szczepy mogą być produkowane u myszy stosunkowo szybko iefektywnie czasowo. Stanowi to dużą zaletę mysich modeli PTB w przeciwieństwie do modeli wykorzystujących szczury lub większe ssaki.
Podsumowując, przedstawiamy odtwarzalny mysi model hipertrofii i niepowodzenia RV wywołanego przeciążeniem ciśnieniem u młodych myszy. Szczegółowe protokoły intubacji, chirurgii i fenotypowania za pomocą echokardiografii znajdują się w artykule. Do intubacji i chirurgii wykorzystywane są instrumenty wykonane na zamówienie, co pozwala na szybkie i niedrogie odtworzenie modelu. Model może być wykorzystany do identyfikacji mechanizmów, które rządzą adaptacją RV do przeciążenia ciśnieniowego, a także procesów leżących u podstaw patologii RV, które ostatecznie prowadzą do awarii RV. Wreszcie, model może być wykorzystany do testowania nowych celów terapeutycznych w leczeniu niewydolności RV.

Niewydolność prawej komory (RV) to zespół kliniczny z objawami niewydolności serca i oznakami ogólnoustrojowego przekrwienia wynikającego z dysfunkcji RV1. Dysfunkcja RV jest silnie związana z zachorowalnością i śmiertelnością w wielu chorobach układu krążenia i płuc2. Etiologia dysfunkcji RV jest złożona, a leżące u jej podstaw szlaki sygnałowe i regulacja pozostają niewystarczająco wyjaśnione.
Obserwacje z obecnych terapii pokazują, że poprawa funkcji RV ściśle koreluje z redukcją obciążenia następczego, co sugeruje, że głównym celem leczenia jest unaczynienie płuc3. Oznacza to, że obecne terapie mają tylko minimalny bezpośredni wpływ na funkcję RV, która może ulec pogorszeniu nawet po poprawie oporu naczyniowego płuc3. W związku z tym bardzo potrzebne są dalsze badania nad poprawą funkcji RV niezależnie od redukcji obciążenia następczego.
Solidne i powtarzalne modele zwierzęce są niezbędne w poszukiwaniu nowych środków terapeutycznych. W większości modeli przewlekłej niewydolności RV podstawową przyczyną jest nadciśnienie płucne wywołane zmianami strukturalnymi w unaczynieniu płuc4,5,6. Dobrze scharakteryzowane modele obejmują model przewlekłego niedotlenienia7,8, model niedotlenienia Sugena9,10,11, oraz model monocrotaline12,13. Ponieważ niewydolność RV jest wtórna do nadciśnienia płucnego w tych modelach, niemożliwe jest odróżnienie wpływu interwencji na układ naczyniowy płuc od bezpośredniego wpływu na RV6.
Aby badać RV niezależnie od układu naczyniowego płuc, model pasmowania tułowia płucnego (PTB) zyskał popularność i został opisany u kilku gatunków zwierząt, w tym myszy, szczurów, królików, psów, owiec i świń6,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24,25,26,27. W modelach PTB zwężenie tułowia płucnego uzyskuje się chirurgicznie, powodując wzrost ciśnienia RV6. Istnieją różne podejścia do stosowania PTB, w tym zwężenie naczynia za pomocą podwiązki lub metalowego klipsa do podwiązywania18,28. W modelach wykorzystujących ligatury pień płucny jest przywiązany do igły, a igła jest cofana, pozostawiając ligaturę na miejscu. Powoduje to zwężenie naczynia, które zależy od rozmiaru igły i naprężenia węzła18,29. W modelach wykorzystujących metalowe klipsy podwiązujące stopień zwężenia pnia płucnego może być bardziej powtarzalny. Zmodyfikowane aplikatory klipsów podwiązujących służą do zamykania klipsów podwiązujących do wstępnie zdefiniowanej i stałej średnicy. To sprawia, że metoda jest niezależna od operatora i zmniejsza zmienność związaną z PTB w fenotypie choroby15,27,28.
Wykazano, że modele Mysie modele PTB wywołują hipertrofię i niepowodzenie RV18,28. Jednym z głównych wyzwań podczas korzystania z modelu PTB jest wybór odpowiedniej średnicy PTB, aby osiągnąć pożądany stopień patologii RV. Jest to szczególnie trudne przy próbie modelowania zdekompensowanej awarii RV. W tym celu zwężenie musi być wystarczająco ścisłe, aby wywołać przewlekłą niewydolność RV bez prowadzenia do ostrej niewydolności RV i śmierci wkrótce po operacji6. Jednym ze sposobów rozwiązania tego problemu jest użycie warchlaków lub młodych zwierząt6,15. Model PTB został z powodzeniem wykorzystany do badania różnych etapów awarii RV przy użyciu szczurów odsadzonych od szczura Wistar15,30. Aby to osiągnąć, młode szczury z pozostałym potencjałem wzrostu przeszły operację PTB z zastosowaniem tytanowych klipsów podwiązujących. Kiedy szczury rosły, zwężenie płuc stopniowo stawało się coraz bardziej dotkliwe i powodowało przerost RV lub przewlekłą niewydolność RV, w zależności od ciężkości PTB15,30. Zainspirowani tym modelem, postawiliśmy hipotezę, że różne etapy patologii RV mogą być wytwarzane w mysim modelu PTB przy użyciu młodych myszy. Badanie szerokiego spektrum patologii RV od łagodnej do ciężkiej choroby może pomóc w wyjaśnieniu naszego zrozumienia postępu choroby i przejścia od hipertrofii RV do niewydolności RV.
Tutaj prezentujemy mysi model przeciążenia RV wywołanego przez PTB u młodych myszy. Dzięki temu modelowi można wytworzyć różne stopnie patologii RV, od hipertrofii RV do nieskompensowanej awarii RV. Badanie to obejmuje szczegółowe protokoły intubacji, chirurgii PTB i fenotypowania za pomocą echokardiografii.

<table><tbody><tr><td>Biosyn 6-0, monofilament, szew wchłanialny</td><td>Covidien</td><td>UM-986</td><td></td></tr><tr><td>kaniula, 27G 0,4x0,25,&nbsp;</td><td>Sterican</td><td>292832</td><td></td></tr><tr><td>Bupaq Multidose vet 0,3 mg/ml (Buprenorphinum)</td><td>Salfarm Danmark</td><td>VNR 472318</td><td></td></tr><tr><td>myszy C57BL/6NTac</td><td>Taconic Biosciences</td><td>C57BL/6NTac</td><td></td></tr><tr><td>Dagrofil 1, pleciony, niewchłanialny szew</td><td>B Braun</td><td>C0842273</td><td></td></tr><tr><td>Krem do depilacji&nbsp;</td><td>Veet&nbsp;</td><td>3132000</td><td></td></tr><tr><td>Waciki do dezynfekcji (82% etanol + 0,5% chlorheksydyna)</td><td>Mediq</td><td>3340122</td><td></td></tr><tr><td>Skalpele jednorazowe, rozmiar 11</td><td>Swann-Morton</td><td>11708353</td><td></td></tr><tr><td>Dr&auml; ger Vapor 2000 Sevoflurane</td><td>Dr&auml; ger</td><td>M35054</td><td></td></tr><tr><td>Maść do oczu neutralna, "Ophta"</td><td>Actavis</td><td>MTnr.: 07586 Vnr: 53 96 68</td><td></td></tr><tr><td>Klipsy podwiązywalne Horizon</td><td>Teleflex Medical</td><td>5200 (IPN914931)</td><td></td></tr><tr><td>Horizon Open Zaciski podwiązywalne, zakrzywione, 6" (15 cm)</td><td>Teleflex Medical</td><td>537061</td><td></td></tr><tr><td>Uchwyt na ręcznik kuchenny</td>, <td>gdzie indziej niesklasyfikowany.Drut</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>metalowy różnej grubości</td><td>n.a.n.a.Zestaw</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>narzędzi mikrochirurgicznych</td><td>Thompson</td><td>n.a.MiniVent</td><td></td></tr> <tr><td>Wentylator</td><td>Przetwornik Hugo Sachs</td><td>Type 845</td><td></td></tr><tr><td>MS505S&nbsp;</td><td>Dźwięki wizualne</td><td>n.a.Rimadyl</td><td></td></tr> <tr><td>Bovis weterynarz 50 mg/ml (Carprofen)</td><td>Zoetis</td><td>MTnr: 34547, Vnr: 10 27 99,Sevoflurane</td><td></td></tr> <tr><td>Baxter 100 %</td><td>Baxter Medical</td><td>MTnr: 35015</td><td></td></tr><tr><td>Rurka silikonowa</td><td>b.a.n.a.Miękki</td><td></td><td></td></tr> <tr><td>plastikowy arkusz</td><td>n.a.n.a.Stereoskop</td><td></td><td></td></tr><tr><td>, "Opmi Pico"</td><td>Carl Zeiss Surgicals GmbH</td><td>n.a.Uchwyt</td><td></td></tr> <tr><td>sondy ultradźwiękowej/szyna</td><td>Visual Sonics</td><td>11277</td><td></td></tr><tr><td>Płyta varming&nbsp;</td><td>Dźwięki wizualne</td><td>11437</td><td></td></tr><tr><td>Venflon ProSafety, 22G, 0,9 x 25mm</td><td>Becton Dickinson</td><td>393222</td><td></td></tr></tbody></table>

mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego przeciążeniem ciśnieniowym i niewydolności przez opaski pnia płucnego

A Murine Model of Pressure Overload-Induced Right Ventricular Hypertrophy and Failure by Pulmonary Trunk Banding

Niewydolność prawej komory (RV) spowodowana przeciążeniem ciśnieniowym jest silnie związana z zachorowalnością i śmiertelnością w wielu chorobach sercowo-naczyniowych i płucnych. Patogeneza niewydolności RV jest złożona i pozostaje niedostatecznie poznana. Aby zidentyfikować nowe strategie terapeutyczne w leczeniu niewydolności RV, niezbędne są solidne i powtarzalne modele zwierzęce. Modele opaśników pnia płucnego (PTB) zyskały na popularności, ponieważ funkcję RV można ocenić niezależnie od zmian w unaczynieniu płuc.
W tym artykule prezentujemy mysi model przeciążenia ciśnieniem RV wywołanego przez PTB u 5-tygodniowych myszy. Model może być używany do wywoływania różnych stopni patologii RV, od łagodnego przerostu RV do nieskompensowanej niewydolności RV. W artykule zamieszczono szczegółowe protokoły intubacji, operacji PTB i fenotypowania za pomocą echokardiografii. Ponadto podano instrukcje dotyczące dostosowywania narzędzi do intubacji i chirurgii PTB, co umożliwia szybkie i niedrogie odtworzenie modelu PTB.
Tytanowe klipsy podwiązujące zostały użyte do zwężenia pnia płucnego, zapewniając wysoce powtarzalny i niezależny od operatora stopień zwężenia pnia płucnego. Nasilenie PTB zostało ocenione przy użyciu różnych średnic wewnętrznego klipsa ligaturującego (łagodne: 450 μm i ciężkie: 250 μm). Spowodowało to patologię RV, od hipertrofii z zachowaną funkcją RV do niewyrównanej niewydolności RV ze zmniejszoną pojemnością minutową serca i objawami pozasercowymi. Czynność RV oceniano za pomocą echokardiografii po 1 tygodniu i 3 tygodniach po zabiegu. Przykłady obrazów echokardiograficznych i ich wyników przedstawiono tutaj. Ponadto przedstawiono wyniki cewnikowania prawego serca oraz analizy histologiczne tkanki serca.

Myszy C57BL/6N (samce, 5-tygodniowe, 17-20 g) zostały losowo przydzielone do grup: ciężkiego PTB (sPTB, 250 µm, n = 12), łagodnego PTB (mPTB, 450 µm, n = 9) lub operacji pozorowanej (sham, n = 15). Ocenę funkcji serca przeprowadzono za pomocą echokardiografii 1 tydzień i 3 tygodnie po operacji. W 3. tygodniu po operacji wykonano cewnikowanie prawej komory serca, a następnie uśmiercono zwierzęta. Zważono organy, a tkankę serca przygotowano do analiz histologicznych.
Echokardiografia wykonana 1 tydzień po operacji wykazała oznaki podwyższonego ciśnienia w prawej komorze (RV) oraz dysfunkcję RV w grupie sPTB w porównaniu z grupami mPTB i sham. Dysfunkcja RV była ewidentna ze względu na zmniejszoną rzut serca (CO) oraz TAPSE (Rycina 6A,B). Zmniejszony indeks ekscentryczności lewej komory (LVEI) wskazywał na zwiększone ciśnienie w RV (Rycina 6C). W związku z tym interwencje odwracające procesy chorobowe mogą być badane już po 1 tygodniu w ciężkich modelach PTB. Grupa mPTB wykazała echokardiograficzne oznaki podwyższonego ciśnienia w RV w porównaniu z grupą sham (zmniejszony LVEI) po 1 tygodniu, jednak nie stwierdzono oznak dysfunkcji RV w ocenie echokardiograficznej (Rycina 6).
<img alt="Analiza danych funkcji serca; CO, TAPSE, LVEI; wykres punktowy; porównanie statystyczne; zastosowanie badawcze." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66851/66851fig06.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 6"> 
Rycina 6: Pomiary echokardiograficzne 1 tydzień po operacji. (A) Rzut serca (CO). (B) Systoliczna ekskursja pierścienia zastawki trójdzielnej (TAPSE). (C) Wskaźnik ekscentryczności lewej komory (LVEI). Skróty: mPTB: łagodna opaska pnia płucnego (PTB); sPTB: ciężka PTB. Dane przedstawiono na wykresach punktowych jako średnie ± SD. *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66851/66851fig06large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
Po 3 tygodniach efekty operacji PTB uległy nasileniu w grupie sPTB, co objawiło się dalszym spadkiem rzutu serca oraz stałym obniżeniem wartości TAPSE w porównaniu z grupą sham (Rysunek 7A,B). Po 3 tygodniach nie zaobserwowano różnic w parametrach echokardiograficznych między grupami mPTB i sham (Rysunek 7A,B).
Cewnikowanie prawej komory ujawniło zwiększone ciśnienie skurczowe prawej komory (RVSP) w obu grupach PTB w porównaniu z grupą sham 3 tygodnie po operacji (Rysunek 7C). Funkcja rozkurczowa prawej komory była zaburzona w grupie sPTB, co wskazywał wzrost końcoworozkurczowej elastancji prawej komory (Eed), będącej niezależną od obciążenia miarą sztywności prawej komory (Rysunek 7D). Kurczliwość prawej komory, oceniana na podstawie elastancji końcowo-skurczowej (Ees), była również zwiększona w grupie sPTB w porównaniu z grupą sham, podczas gdy w grupie mPTB zaobserwowano wzrost nieistotny statystycznie (Rysunek 7E).
Pomiary anatomiczne wykazały narastający przerost prawej komory (RV) wraz ze zwiększaniem się ciężkości PTB, co objawiało się stopniowym wzrostem stosunku masy RV do masy ciała (RV/BW) (Rysunek 7F). RVSP było liniowo proporcjonalne do stopnia przerostu RV (Rysunek 7G). Pole przekroju poprzecznego (CSA) kardiomiocytów RV potwierdziło 40% wzrost przerostu RV w grupie sPTB w porównaniu z grupą sham, podczas gdy w grupie mPTB w porównaniu z grupą sham zaobserwowano wzrost nieistotny statystycznie (Rysunek 8A-D). Stopień włóknienia w RV i prawym przedsionku (RA) był siedmiokrotnie wyższy w grupie sPTB w porównaniu z grupą sham. W grupie mPTB nie zaobserwowano wzrostu włóknienia RV (Rysunek 8E-H).
Niedomykalność zastawki trójdzielnej (TR) zaobserwowano u 64% osobników w grupie sPTB po 1 tygodniu i u 91% w 3. tygodniu, podczas gdy w grupach sham i mPTB nie stwierdzono TR (dane nie zostały przedstawione). W grupie sPTB odnotowano różny stopień odbarwienia wątroby, będący objawem pozasercowej dekompensacji (Rycina 9). W grupach mPTB i sham nie zaobserwowano odbarwień.
Podsumowując, wykazujemy korelację między średnicą prążków a stopniem zaawansowania choroby. Grupa mPTB odzwierciedla wczesne stadium choroby z łagodnym przerostem RV bez dysfunkcji RV, natomiast grupa sPTB wykazuje oznaki dysfunkcji i niewydolności RV.
<img alt="Analiza funkcji serca, wiele wykresów pudełkowych; CO, TAPSE, RVSP; sham, mPTB, sPTB; dane porównawcze." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66851/66851fig07.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 7"> 
Rysunek 7: Pomiary echokardiograficzne, inwazyjne pomiary objętości i ciśnienia oraz pomiary anatomiczne 3 tygodnie po operacji. (A) Rzut serca (CO). (B) Systoliczna ekskursja pierścienia zastawki trójdzielnej (TAPSE). (C) Ciśnienie skurczowe prawej komory (RVSP). (D) Elastancja koniec-rozkurczowa (Eed). (E) Elastancja koniec-skurczowa (Ees). (F) Stosunek masy prawej komory do masy ciała (RV/BW). (G) Korelacja między ciśnieniem skurczowym prawej komory (RVSP) a stosunkiem RV/BW w 3 tygodniu po operacji. Na wykresie przedstawiono analizę regresji liniowej. Skorygowane R2 = 0.75, p &lt; 0.001. Skróty: mPTB: łagodne zwężenie pnia tętnicy płucnej (PTB); sPTB: ciężkie PTB. Dane o rozkładzie normalnym przedstawiono za pomocą wykresów punktowych z wartościami średnimi ± SD. Dane o rozkładzie nienormalnym przedstawiono za pomocą wykresów pudełkowych z medianami i IQR oraz wąsami reprezentującymi wartości w zakresie 1,5 x IQR od Q1 i Q3, odpowiednio *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66851/66851fig07large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Histologia tkanki serca i wykresy pudełkowe; analiza włóknienia, przekrój poprzeczny RV, mikrografie, wyniki badań." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66851/66851fig08.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 8"> 
Rycina 8: Analizy histologiczne tkanki RV. (A) Pole przekroju poprzecznego RV. (B-D) Tkanka RV barwiona H&amp;E z grup (B) sham, (C) mPTB oraz (D) sPTB. (E) Procent włóknienia śródmiąższowego w stosunku do zdrowej tkanki w RV. (F-H) Tkanka RV barwiona picrosirius red z grup (F) sham, (G) mPTB oraz (H) sPTB. Paski skali: (B-D) = 50 µm, (F-H) = 250 µm. Dane przedstawiono na wykresach pudełkowych z medianami, IQR oraz wąsami reprezentującymi wartości w zakresie 1.5 x IQR od Q1 i Q3. *p &lt; 0.05, **p &lt; 0.001. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66851/66851fig08large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Porównanie patologii wątroby, oznaczone A-D, badające progresję choroby w celu analizy histologicznej." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/66851/66851fig09.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 9"> 
Rycina 9: Różne stopnie odbarwienia wątroby. Odbarwienie oceniano w skali 0-3. Ocena opierała się na stopniu nakrapiania oraz kolorze tkanki wątroby. Zdjęcia wykonano pod mikroskopem, przez co tkanka wydaje się jaśniejsza niż w oświetleniu otoczenia. (A) 0: wątroba prawidłowa. (B) 1: lekkie nakrapianie bez odbarwienia. (C) 2: umiarkowane nakrapianie i lekkie odbarwienie. (D) 3: silne nakrapianie i odbarwienie (wątroba muszkatołowa). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/66851/66851fig09large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>

Opisujemy mysi model przeciążenia ciśnienia w prawej komorze wywołanego przez opaski na pniu płucnym. Szczegółowe protokoły intubacji, chirurgii i fenotypowania za pomocą echokardiografii znajdują się w artykule. Do intubacji i chirurgii wykorzystywane są instrumenty wykonane na zamówienie, co pozwala na szybkie i niedrogie odtworzenie modelu.

Mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego przeciążeniem ciśnieniowym i niewydolności przez opaski pnia płucnego

Right ventricular (RV) failure caused by pressure overload is strongly associated with morbidity and mortality in a number of cardiovascular and pulmonary ...

Metoda ta może być wykorzystana do badania mechanizmów leżących u podstaw niewydolności prawej komory, identyfikacji nowych celów leków oraz badania wpływu potencjalnych środków terapeutycznych w leczeniu niewydolności prawej komory. Głównym wyzwaniem w modelach zgięcia tułowia płucnego jest wywołanie różnych etapów patologii prawej komory, zwłaszcza wczesne etapy przebudowy prawej komory z łagodnym przerostem zostały pominięte w opublikowanych protokołach. Mechanizmy leżące u podstaw niewydolności prawej komory w nadciśnieniu płucnym pozostają niedostatecznie poznane.Badamy początkowe zmiany molekularne w łagodnej patologii prawej komory, które mogą oferować większą odwracalność niż późniejsze etapy. Metoda ta pozwala na ocenę funkcji prawej komory serca niezależnie od układu naczyniowego płuc, dzięki czemu możemy badać bezpośrednie działanie nowych związków terapeutycznych na prawą komorę. Może to poszerzyć naszą wiedzę na temat szlaków molekularnych leżących u podstaw rozwoju niewydolności prawej komory, a tym samym doprowadzić do odkrycia nowych strategii terapeutycznych w leczeniu niewydolności RV u pacjentów z nadciśnieniem płucnym.Zacznij od zaintubowania znieczulonej myszy za pomocą cewnika dożylnego o rozmiarze 22. Wykonaj intubację pod nadzorem wizualnym przy użyciu mikroskopu chirurgicznego i stanowiska do intubacji, co pozwala na prawidłowe ustawienie w celu wizualizacji strun głosowych. Zapewnić ciągłe dostarczanie wziewnych środków znieczulających do rurki donosowej, aż do podłączenia rurki dotchawiczej.Przewietrz mysz z prędkością 175 uderzeń na minutę i objętością oddechową 300 mikrolitrów na pociągnięcie. Przed przystąpieniem do zabiegu należy podać podskórnie leki przeciwbólowe na znieczulenie okołooperacyjne i pooperacyjne oraz sól fizjologiczną, aby zrekompensować okołooperacyjną utratę płynów. Potwierdź prawidłowe umieszczenie rurki dotchawiczej, obserwując symetryczny ruch klatki piersiowej.Aby wykonać operację, za pomocą skalpela należy wykonać 10-milimetrowe nacięcie w skórze nad drugą przestrzenią międzyżebrową od kąta mostka do lewej przedniej linii pachowej. Następnie za pomocą kleszczy tępo wypreparuj główne i mniejsze mięśnie piersiowe i zidentyfikuj drugą i trzecią kostkę. Umieść wykonany na zamówienie retraktor klatki piersiowej pod mięśniami piersiowymi.Przetnij mięśnie międzyżebrowe w drugiej przestrzeni międzyżebrowej. Przenieś zwijacz klatki piersiowej do przestrzeni międzyżebrowej, aby zapewnić dostęp do pola operacyjnego. Obróć dolną część ciała myszy, aby poprawić odsłonięcie pnia płucnego.Tępo wypreparuj grasicę, aby odsłonić serce, pień płucny i aortę. Za pomocą mikroskopijnych kleszczy ostrożnie usuń tkankę łączną między naczyniami, aby oddzielić pień płucny od aorty wstępującej. Przeprowadź kaniulę prowadzącą przez poprzeczną zatokę osierdziową z tyłu pnia płucnego.Użyj kleszczy, aby chwycić węzeł na końcu kaniuli prowadzącej i przeciągnij szew przez kaniulę. Ostrożnie wyjmij kaniulę prowadzącą, podczas gdy szew pozostaje na swoim miejscu wokół pnia płucnego. Załaduj aplikator klipsa do podwiązywania.Użyj szwu, aby wprowadzić tułów płucny do szczęk klipsa podwiązującego i ścisnąć klips. Natychmiast po założeniu klipsa należy zwolnić szew i obserwować wypełnienie tułowia płucnego. Upewnij się, że klips jest prawidłowo umieszczony.Umieść wchłanialny szew monofilamentowy 6-0 wokół drugiej i trzeciej kosty i zamknij przestrzeń międzyżebrową. Usuń jak najwięcej powietrza z jamy klatki piersiowej, delikatnie uciskając klatkę piersiową, jednocześnie zaciskając szew. Na koniec zszyj mięśnie piersiowe i skórę wchłanialnym szwem z monofilamentu 6-0.Aby zapewnić odpowiednią analgezję pooperacyjną, należy dodać środek przeciwbólowy do wody pitnej, a także podawać go w postaci zastrzyków podskórnych przez pierwsze trzy dni po zabiegu.

a-murine-model-pressure-overload-induced-right-ventricular

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Opisujemy stopniową procedurę tworzenia przeciążenia ciśnieniowego i przerostu lewej komory u szczurów Wistar poprzez zwężenie aorty wstępującej za pomocą małego metalowego klipsa. Model ten jest szeroko stosowany do badania zmian przebudowy podczas przerostu mięśnia sercowego oraz do identyfikacji i oceny strategii regresji takich zmian.

Zwężenie aorty wstępującej u szczurów w celu stworzenia modelu przerostu mięśnia sercowego spowodowanego przeciążeniem ciśnieniem

Dysfunkcja prawej komory (RV) jest kluczowa dla patogenezy chorób sercowo-naczyniowych, jednak dostępne są ograniczone metodologie jej oceny. Ostatnie postępy w obrazowaniu ultrasonograficznym zapewniają nieinwazyjną i dokładną opcję podłużnego badania RV. W tym artykule szczegółowo opisujemy krok po kroku metodę echokardiograficzną wykorzystującą mysi model przeciążenia ciśnienia RV.

Ocena struktury i funkcji prawej komory serca w mysim modelu zwężenia tętnicy płucnej za pomocą echokardiografii przezklatkowej

Przedstawiamy chirurgiczną metodę wywoływania przerostu i niewydolności prawej komory u szczurów.

Model pasma pnia płucnego przeciążenia ciśnieniem wywołanego przerostem i niewydolnością prawej komory

Tutaj oferujemy użyteczne podejście do badania mechanizmu niewydolności prawej komory. Wygodniejsze i skuteczniejsze podejście do zwężenia tętnicy płucnej ustala się za pomocą narzędzi chirurgicznych wykonanych we własnym zakresie. Ponadto przedstawiono metody oceny jakości tego podejścia za pomocą echokardiografii i cewnikowania.

Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

Tutaj opisujemy krok po kroku protokół chirurgicznego usuwania aorty w dobrze znanym mysim modelu zwężenia aorty. Procedura ta pozwala nie tylko na zbadanie mechanizmów leżących u podstaw odwrotnej przebudowy lewej komory i regresji przerostu, ale także na przetestowanie nowych opcji terapeutycznych, które mogą przyspieszyć powrót do zdrowia mięśnia sercowego.

Badanie odwrotnej przebudowy lewej komory przez odpasowanie aorty u gryzoni

Opisujemy tworzenie szczurzego modelu umiarkowanego przemodelowania wywołanego przeciążeniem ciśnieniem i wczesnej dysfunkcji skurczowej, gdzie aktywowane są szlaki transdukcji sygnału zaangażowane w inicjację procesu przebudowy. Ten model zwierzęcy pomoże w identyfikacji celów molekularnych do zastosowania wczesnych strategii terapeutycznych zapobiegających przebudowie niewydolności serca.

Szczurzy model przeciążenia ciśnieniem wywołał umiarkowaną przebudowę i dysfunkcję skurczową, w przeciwieństwie do jawnej skurczowej niewydolności serca

Ten manuskrypt opisuje technikę chirurgiczną i eksperymentalne podejście do rozwoju ciężkiego przeciążenia ciśnienia w prawej komorze w celu modelowania ich adaptacyjnych i nieadaptacyjnych fenotypów.

Duży model zwierzęcy nadciśnienia płucnego i niewydolności prawej komory: podwiązanie lewej tętnicy płucnej i postępujące prążki głównej tętnicy płucnej u owiec

Obecny protokół opisuje nową technikę opaski aortalnej u myszy w celu wywołania przeciążenia ciśnieniem przerostu mięśnia sercowego. Do banderolowania stosuje się gumowy pierścień o stałej średnicy wewnętrznej. Ta nowa technika obiecuje mniejszą wariancję i bardziej powtarzalne dane dla przyszłych eksperymentów.

O-ring aorty w porównaniu z tradycyjnym poprzecznym zwężeniem aorty w celu modelowania przerostu serca wywołanego przeciążeniem ciśnienia

Niewydolność prawej komory i funkcjonalna niedomykalność zastawki trójdzielnej są związane z lewostronną chorobą serca i nadciśnieniem płucnym, które znacząco przyczyniają się do zachorowalności i śmiertelności pacjentów. Ustanowienie modelu przewlekłej owcy w celu zbadania niewydolności prawej komory i czynnościowej niedomykalności zastawki trójdzielnej pomoże w zrozumieniu ich mechanizmów, progresji i możliwych metod leczenia.

Przewlekły owczy model niewydolności prawej komory serca i czynnościowej niedomykalności zastawki trójdzielnej

Niewydolność prawego serca (RHF) charakteryzuje się prawostronnym rozszerzeniem i przerostem serca, co prowadzi do nieprawidłowego funkcjonowania komór i przedsionków. Chorobom krążeniowo-oddechowym związanym z RHF towarzyszy zwiększone ryzyko zaburzeń rytmu serca. W artykule opisano standaryzowany model RHF indukowanego pasmami tętnic płucnych związanego ze zwiększoną arytmogenezą komorową i przedsionkową.

Szczurzy model prawostronnej przebudowy serca i arytmii z wykorzystaniem pasma tętnicy płucnej

Poznaj mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego opaskowaniem pnia płucnego. Metoda obejmuje intubację, chirurgię i echokardiografię, umożliwiając badanie wczesnych zmian molekularnych oraz testowanie nowych terapii niewydolności prawej komory.

Mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego przeciążeniem ciśnieniowym i niewydolności przez opaski pnia płucnego

Przeglądaj więcej filmów