Name: Badania nad przeciwzapalnym działaniem tabletek Xiaoyao w leczeniu osteoporozy pomenopauzalnej u myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-08-23T14:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 20 s
Description: Poznaj metodę oceny przeciwzapalnego działania tabletek Xiaoyao w leczeniu osteoporozy pomenopauzalnej u myszy. Badanie łączy medycynę chińską z nowoczesną farmakologią.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Program Badań Naukowych i Rozwoju Technologii Miasta Baise (20224128) wspierał tę pracę. Autorzy dziękują dr Dev Sooranna z Imperial College London i YMUN za redakcję manuskryptu. YYX i ZYW wniosły równy wkład w to badanie.

Therapeutic Effects of Xiaoyao Pills on Postmenopausal Osteoporosis in Mice

Autorzy deklarują, że nie ma konfliktu interesów.

Według statystyk osteoporoza powoduje 1,5 miliona złamań każdego roku w Stanach Zjednoczonych, a zdecydowana większość z nich występujeu kobiet po menopauzie. Przewiduje się, że wraz ze wzrostem starzejącej się populacji większość przyszłych złamań szyjki kości udowej na świecie wystąpi w Azji, a do 2050 r. ich całkowita liczba na świecie osiągnie 8,2 miliona. Koszt zapobiegania złamaniom jest prawie równy kosztom ich leczenia, a stosowanie leków nieuchronnie będzie miało pewne skutki uboczne29. W związku z tym istnieje pilna potrzeba znalezienia bardziej opłacalnego sposobu rozwiązania tego problemu w odpowiedzialnym społeczeństwie.
Tabletki Xiaoyao składają się z ośmiu składników. Badania nad wpływem jego składników na osteoporozę są w toku. Poria cocos hamuje osteoklastogenezę i aktywność osteolityczną w mysim modelu wywołanym osteoporozą po owariektomii30. Połączenie dwóch składników, lukrecji i Shu-di-huang, może wywierać działanie przeciwutleniające poprzez hamowanie szlaku sygnałowego NF-κB31. Tradycyjny chiński tonik ziołowy, Danggui buxue tang, może być przydatny w leczeniu osteoporozy dzięki swojej zdolności do hamowania obrotu kostnego i modulowania regulacji osi podwzgórze-przysadka-gonady (HPG), a tym samym zapobiegania utracie masy kostnej u szczurów po owariektomii32. Wszystkie te wyniki sugerują, że tabletki Xiaoyao mogą mieć terapeutyczny wpływ na osteoporozę. Wyniki tego badania sugerują również, że tabletki Xiaoyao mogą wywierać działanie przeciwosteoporozowe poprzez modulowanie aktywności szlaku sygnałowego IL-17 w sposób przeciwzapalny.
W sumie uzyskano 168 istotnych szlaków sygnałowych z sieci regulacyjnej celów leków i genów związanych z osteoporozą skonstruowanych w tym badaniu, a w tym badaniu dalej badano szlak sygnałowy IL-17. Rodzina IL-17 składa się z sześciu członków, w tym IL-17A-F, z których IL-17A była pierwszą i najważniejszą odkrytą33. We wczesnych badaniach uważano, że IL-17 jest związana z chorobami zapalnymi i autoimmunologicznymi u ludzi. Później badania sugerowały, że odgrywa rolę w utrzymaniu integralności bariery, a także stwierdzono, że jest związany z rakiem15. Jednak, chociaż nie odgrywa fizjologicznej roli w przebudowie kości, zachowuje się inaczej podczas nieprawidłowych warunków kostnych. Ponadto IL-17 może działać jako słaby aktywator i działa synergistycznie z innymi cytokinami w celu zwiększenia produkcji energii. Świadczy o tym jego koaktywacja z TNFα15,34.
Eksperymentyin vitro wykazały, że IL-17 może indukować proliferację i różnicowanie osteoblastycznychMSCs 35, a także może hamować indukowane przez BMP-2 różnicowanie pierwotnych osteoblastów szczurów36. IL-17 może stymulować osteoblasty do ekspresji RANKL, co z kolei sprzyja osteoklastogenezie, ale efekt ten wydaje się być zależny od obecności osteoblastów37,38. W tym badaniu różne stężenia tabletek Xiaoyao przyniosły efekty terapeutyczne na myszach modelowych PMOM, zwłaszcza gdy były stosowane w wyższych stężeniach. IL-17, Act1 i IL-6, które są skorelowane ze szlakiem sygnałowym IL-17, były znacznie zmniejszone u tych myszy w porównaniu z grupą kontrolną. Kiedy oceniono wyniki analizy wzbogacenia, sugerowały one udział szlaku IL-17, gdy zwierzęta były leczone tabletkami Xiaoyao.
W tym badaniu przetestowano również niektóre markery konwersji kostnej. ALP jest tetramerycznym enzymem związanym z błoną, który może być wydzielany przez osteoblasty i odgrywa ważną rolę w tworzeniu i mineralizacji kości poprzez degradację inhibitora mineralizacji, pirofosforanu39. Około 90% frakcji organicznej w macierzy zewnątrzkomórkowej tkanek kostnych składa się z COL-1, a podczas mineralizacji kości kolagen odgrywa w tym procesie kluczową rolę40. W wyniku tego badania poziomy ekspresji białek ALP i COL-1, obserwowane przez immunohistochemię myszy w grupie leku, były wyższe niż w grupie modelowej, co sugeruje, że wpływ tabletek Xiaoyao na złagodzenie osteoporozy można osiągnąć poprzez zwiększenie wskaźników genów osteogennych. Niektórzy uczeni wykazali, że ekspresja i aktywność transkrypcyjna receptora estrogenowego hepatocytów (ERα) może być regulowana w górę przez Xiaoyao san41. Wykazano, że ekstrakty z arcydzięgla chińskiego, białej Paeonii lactiflora i lukrecji w Xiaoyao san mają aktywność podobną do estrogenu. Te same składniki są również obecne w tabletkach Xiaoyao użytych w tym badaniu, które są wytwarzane na receptę Xiaoyao san przy użyciu nowoczesnych metod przygotowania. Dlatego można postawić hipotezę, że tabletki Xiaoyao mogą również zwiększać ekspresję genów osteogennych, takich jak ALP i COL-1 , wywierając działanie podobne do estrogenu na osteoblasty w celu zwiększenia ich aktywności i poprawy jakości kości.
W badaniu tym z powodzeniem ustanowiono model PMOM u myszy poprzez usunięcie obu jajników za pomocą jajnikomii grzbietowej. Model zwierzęcy jest podstawą dla wszystkich kolejnych eksperymentów w tym badaniu. Podczas chirurgicznego usuwania jajników myszy ważne było, aby upewnić się, że jajniki myszy w grupach OVX i leków zostały całkowicie usunięte, podczas gdy w grupie pozorowanej usunięto tylko tłuszcz w pobliżu jajników, a także ważne było, aby uniknąć infekcji ran.
Liczba beleczków kostnych i gęstość połączeń myszy uległy poprawie po leczeniu owariektomii tabletkami Xiaoyao, co sugerowało, że lek ten ma terapeutyczny wpływ na osteoporozę. Immunohistochemia i immunocytochemia zostały wykorzystane do oceny skuteczności leczenia w tym badaniu; Czas działania różnych odczynników nie jest bezwzględny, zwłaszcza w procesie opracowywania koloru, który wymaga obserwacji w czasie rzeczywistym i szybkiej reakcji, aby zapewnić najlepsze wyniki. Podczas inkubacji przeciwciał najpierw ustawia się gradient stężenia przeciwciał, a po obserwacji i porównaniu wybiera się najbardziej odpowiednie stężenie do kolejnych eksperymentów.
W tym badaniu wystąpiły jednak pewne ograniczenia. Dane z farmakologii internetowej miały tylko jedno źródło danych, a analiza składu leku pochodziła tylko z jednej bazy danych. Ponadto skuteczność tabletek Xiaoyao nie została porównana z pozytywnymi lekami w tym badaniu i nie było możliwe oszacowanie konkretnych różnic między tabletkami Xiaoyao a obecnymi metodami leczenia.
W przypadku PMOM dostępną opcją leczenia pierwszego rzutu są bisfosfoniany. Jednak stosowanie tych leków może prowadzić do przeciwwskazań żołądkowo-jelitowych, a nawet poważniejszych nietypowych złamań kości udowej i martwicy kości szczęk42,43. Opcje leczenia drugiego rzutu obejmują stosowanie denosumabu i terapii hormonalnej. Wykazano, że denosumab zmniejsza liczbę złamań szyjki kości udowej, kręgów i innych kręgów. Jednak po odstawieniu leku może dojść do nawrotu, a im dłuższy czas trwania odstawienia, tym większa utrata gęstości kości 42,44,45. Hormonalna terapia menopauzalna zmniejsza ryzyko złamań osteoporotycznych kręgosłupa, ale jej skutki są ograniczone do wieku, a długoterminowe ryzyko wydaje się przeważaćnad korzyściami. Terapia sekwencyjna jest długoterminową opcją leczenia PMOM, w której stosowanie leków tworzących kości, a następnie leków przeciwresorpcyjnych może osiągnąć największy wzrost masy kostnej. Konkretne leki są zwykle ustalane indywidualnie dla każdego pacjenta42.
W związku z tym można założyć, że tradycyjne zioła chińskie mogą mieć korzystny potencjał w leczeniu osteoporozy. Sposób działania ziołolecznictwa jest wielościeżkowy i wielokierunkowy, a nie działa za pośrednictwem jednego mechanizmu47. Niektórzy uczeni ocenili skuteczność i bezpieczeństwo niektórych chińskich leków ziołowych i wykazali, że liczba złamań podczas stosowania kombinacji leków chińskich i zachodnich w porównaniu z podawaniem tylko medycyny chińskiej była niższa niż w grupie48 osób stosujących samą medycynę zachodnią. W porównaniu z lekami chemicznymi, chińskie leki ziołowe mają mniej skutków ubocznych, są stosunkowo niedrogie i nadają się do długotrwałego stosowania. Chińskie leki ziołowe nie tylko naprawiają mikrostrukturę kości i zwiększają objętość kości, ale mogą również zmniejszać lub eliminować objawy osłabienia kręgosłupa lędźwiowego i bólu pleców49. Obecne badanie może pomóc w określeniu możliwego podejścia do odkrywania nowych leków i metod leczenia.
Zastosowanie tabletek Xiaoyao w leczeniu PMOM wydaje się być obiecujące. W niniejszym badaniu tabletki mogą poprawić masę kostną i jakość kości w mysim modelu PMOM poprzez tłumienie stanu zapalnego. Niektórzy uczeni sugerowali nawet, że połączenie medycyny chińskiej i akupunktury może być skuteczne w leczeniu PMOM50. Jednocześnie udowodniono, że połączenie medycyny chińskiej i zachodniej jest skuteczne51. Oba te możliwe środki zaradcze są ważne, chociaż każde zalecane leczenie przy użyciu tabletek Xiaoyao w połączeniu z akupunkturą i medycyną zachodnią powinno zostać potwierdzone przez badania kliniczne. Kliniczne znaczenie osteoporozy polega na złamaniach kości, a przyszłe badania powinny również koncentrować się na ich zapobieganiu.
Podsumowując, badanie to wykazało poprzez farmakologię sieciową i eksperymenty na zwierzętach, że myszy PMOM wykazały znaczną poprawę metabolizmu kości i zwiększoną masę kostną po leczeniu tabletkami Xiaoyao. Mechanizm działania tego zjawiska może być związany z hamowaniem szlaku sygnałowego IL-17 i wzmocnieniem czynników osteogennych, ALP i aktywności COL-1. Badanie to stanowi teoretyczne podstawy i eksperymentalne podstawy do klinicznego zastosowania tabletek Xiaoyao w leczeniu chorób związanych z osteoporozą.

Światowa Organizacja Zdrowia (WHO) definiuje osteoporozę (OP) jako chorobę charakteryzującą się spadkiem masy kostnej i pogorszeniem mikroarchitektury tkanki kostnej, co prowadzi do wzrostu kruchości kości, a tym samym do zwiększonego ryzyka złamań1. Kliniczne znaczenie osteoporozy polega na tym, że może ona prowadzić do złamań, które wiążą się z wysoką śmiertelnością, zachorowalnością i kosztami ekonomicznymi2. Osteoporoza pomenopauzalna (PMOP) jest spowodowana spadkiem poziomu estrogenów u kobiet po menopauzie, co prowadzi do wzrostu aktywności osteoklastów, co skutkuje utratą masy kostnej i zniszczeniem mikrostruktury kości. To często powoduje osteoporozę, która ma poważny wpływ na zdrowie3. Obecne terapie PMOP obejmują estrogenową terapię zastępczą, bisfosfoniany i parathormon, ale mogą one mieć różny stopień działań niepożądanych, niewystarczające długoterminowe przestrzeganie zaleceń i wysokie koszty4. Dlatego niedrogie ziołolecznictwo jest realną alternatywą dla dużej części populacji.
Tabletki Xiaoyao są zawarte w chińskiej farmakopei5, a te zawierają osiem składników ziołowych, w tym Chai Hu, Angelica sinensis, White paeonia lactiflora, Atractylodes macrocephala, Poria cocos, Menthae Herba, lukrecja i świeży imbir. Wszystkie te zioła są znane z tego, że są skuteczne w detoksykacji wątroby i wzmacnianiu śledziony, odżywianiu krwi i regulowaniu cyklu miesiączkowego, a mieszanka była również stosowana w leczeniu depresji6. Jednak rola tabletek Xiaoyao w osteoporozie jest niejasna.
Wczesne badania sugerują, że stan zapalny może prowadzić do utraty masy kostnej7, oraz że spadek gęstości kości związany z tym procesem może być przyspieszony przez menopauzę. Ponadto istnieje silny związek między rozwojem osteoporozy a stanem zapalnym. Czynnik zapalny, interleukina-17 (IL-17), jest czynnikiem prozapalnym wydzielanym przez komórki Th17, podzbiór limfocytów T CD4 +. Komórki te są związane z kilkoma przewlekłymi stanami zapalnymi i odgrywają ważną rolę w rozwoju niszczenia kości w reumatoidalnym zapaleniu stawów8. Dodatkowo IL-17 stymuluje aktywator receptora liganda czynnika jądrowego κ B (RANKL), który reguluje osteoklastogenezę, prowadząc do większej resorpcji kości niż tworzenie kości9. IL-17 stymuluje ekspresję innych cytokin osteoklastogennych, takich jak TNFα, IL-1, IL-6 i IL-8. Ma zdolność do synergii z innymi czynnikami zapalnymi, co czyni go ważnym efektorem zapalnym10.
Badania wykazały również związek między tabletkami Xiaoyao a stanem zapalnym. Shi et al.11 oraz Fang et al.12 niedawno potwierdzili, że tabletki Xiaoyao mogą obniżać poziom IL-6 i TNF-α, odpowiednio. W innym badaniu stłuszczeniowego zapalenia wątroby związanego z metabolizmem doniesiono, że tabletki Xiaoyao mogą zwiększać ekspresję kwasu propionowego, który z kolei hamuje ekspresję TNF-α i wywiera działanie przeciwzapalne13. Jednak obecnie nie wiadomo, czy tabletki Xiaoyao mogą regulować rozwój PMOM poprzez pośredniczenie w odpowiedzi zapalnej poprzez IL-17, co było celem tego badania.
To badanie przewidziało przecięcie celów tabletek Xiaoyao i genów związanych z osteoporozą poprzez farmakologię sieciową i analizę bioinformatyczną oraz przeanalizowało przecinające się geny pod kątem interakcji białek, GO i KEGG. Na podstawie przewidywanych wyników można zaobserwować ekspresję Act1 i IL-6, które są kluczowymi białkami w szlaku sygnałowym IL-1714,15, a także markery obrotu kostnego fosfatazę alkaliczną (ALP) i kolagen typu I (COL-1), aby zaobserwować skuteczność terapeutyczną tabletek Xiaoyao w modelu myszy PMOM.

<table><tbody><tr><td>Próbnik 1 ml</td><td>Guangxi Beilunhe Medical Industrial Group Co.</td><td>JYQ001</td><td>Do znieczulenia u myszy</td></tr><tr><td>4% poliformaldehyd</td><td>Beijing Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>P1110</td><td>Do mocowania tkanek</td></tr><tr><td>6-0 wchłanialny szew (igła kątowa)</td> <td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co.</td><td>HZX-06</td><td>Do szycia pooperacyjnego</td></tr><tr><td>Chłonny wacik</td><td>Zwycięzca</td><td>MIANQIU-500g</td><td>Do sterylizacji i hemostazy</td></tr><tr><td>Szkiełka samoprzylepne</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co.</td><td>188105</td><td>Do cięcia tkanek</td></tr><tr><td>Amobarbital</td><td>Sigma Aldrich (Shanghai) Trading Co.</td><td>A-020-1ML</td><td>Do znieczulenia u myszy</td></tr><tr><td>Roztwór do niebieszczenia</td><td>Beijing Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>G1866</td><td>Niebieskie zabarwienie jąder komórek po działaniu roztworu różnicowania hematoksyliny</td></tr><tr><td>C57BL / 6 myszy</td><td>Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co., Ltd.</td><td>(SCXK 2033-0063)</td><td>Do stosowania w eksperymentach na zwierzętach</td></tr><tr><td>Ostrza chirurgiczne ze stali węglowej</td><td>Premier Medical Equipment Co.</td><td>SP239</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>CIKS/TRAF3IP2 Królicze przeciwciała biosowe pAb</td><td></td><td>bs-6202R</td><td>Wiąże się z Act1 w tkankach</td></tr><tr><td>Roztwór hematoksyliny Cole'a (do barwienia konwencjonalnego)</td><td>Beijing Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>G1140</td><td>Do barwienia skrawków parafiny</td></tr><tr><td>Kolagen typu I Przeciwciało poliklonalne</td><td>proteintech</td><td>14695-1-AP</td><td>Wiąże się z COL-1 w tkankach</td></tr><tr><td>Zestaw substratów DAB, 20x</td><td>Beijing Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>DA1010</td><td>Do opracowywania koloru tkanek</td></tr><tr><td>Jednorazowy arkusz chirurgiczny 50 * 60 CM</td><td>Nanchang Xuhui Medical Equipment Co.</td><td>SP4529777</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>Roztwór odwapniający EDTA (pH 7,2)</td><td>Beijing Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>E1171-500ml</td><td>Do odwapniania tkanek</td></tr><tr><td>Wzmocniony endogenny bufor do pęcherzyków peroksydazy</td><td>Beyotime Biotechnology</td><td>P0100B</td><td>Sekwestracja tkanek lub komórkowych endogennych peroksydaz</td></tr><tr><td>Przyjazny dla środowiska przezroczysty płyn do odparafinowania</td><td>Servicebio</td><td>G1128-1L</td><td>Do odparafinowania skrawków parafiny</td></tr><tr><td>Alkohol etylowy</td><td>CHRON CHEMICALS</td><td>64-17-5 (CAS)</td><td>Do odwadniania skrawki parafiny</td></tr><tr><td>Rozcieńczalnik przeciwciał ogólnego przeznaczenia</td><td>Epizyme Biotech</td><td>PS119L</td><td>Do rozcieńczania przeciwciał</td></tr><tr><td>Roztwór do różnicowania Hematoksyliny</td><td>Servicebio</td><td>G1039-500ML</td><td>Do różnicowania po barwieniu hematoksyliną i usuwania nadmiernie związanego i niespecyficznie zaadsorbowanego barwnika z tkanek</td></tr><tr><td>Zestaw do barwienia Hematoksyliny Eozyny (HE) Pekin</td><td>Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>G1120-3 * 100 ml</td><td>Do barwienia tkanek</td></tr><tr><td>Wysokiej jakości rękojeść noża chirurgicznego ze stali nierdzewnej</td><td>Premier Medical Equipment Co.</td><td>SP0088</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>Affinipure Anti-Rabbit Anti-Rabbit IgG(H+L)proteintech SA00001-2 Do chirurgii myszy sprzężone z HRP Affinipure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L)</td><td>proteintech</td><td>-2</td><td>Wiąże się z przeciwciałem pierwotnym i wzmacnia sygnał</td></tr><tr><td>IL-17A Przeciwciało poliklonalne</td><td>proteintech</td><td>13082-1-AP</td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td>Wiąże się z IL-6 w tkankach</td></tr><tr><td>Długopis immunohistochemiczny</td><td>Pekin Zhongshan Jinqiao Biotechnology Co.</td><td>ZLI-9305 (YA0310)</td><td>Do rysowania okręgów w immunohistochemii</td></tr><tr><td>Medyczny szew chirurgiczny Niechłonny (kulka) 5-0 3,5 m</td><td>Yangzhou Yuanlikang Medical Equipment Co.</td><td>FHX-5-2</td><td>Do pooperacyjnego szycia</td></tr><tr><td>Igły do szwów medycznych Igły kątowe 4 * 10 3/8</td><td>Chaohu Binxiong Medical Equipment Co.</td><td>FHZ612-4</td><td>Do pooperacyjnego szycia</td></tr><tr><td>neutralnego balsamu</td><td>Beijing Solarbio Science & Technologia Co., Sp. z o.o.</td><td>G8590</td><td>Jako zgrzewarka do plastrów</td></tr><tr><td>PBS(1X)</td><td>Shenzhen Mohong Technology Co., Ltd</td><td>B0015</td><td>Bufor do mycia szkiełek i częściowego rozcieńczania roztworu</td></tr><tr><td>Bezbiałkowy bufor szybkiego blokowania (1X)</td><td>Epizyme Biotech</td><td>PS108P</td><td>Unikanie niespecyficznego wiązania białek</td></tr><tr><td>Przeciwciało przeciw fosfatazie alkalicznej przeciwkostnej królika</td><td>PRZECIWCIAŁA BIOSS</td><td>BS-6292R</td><td>Wiąże się z fosfatazą alkaliczną w tkankach</td></tr><tr>Szpital <td>stowarzyszony z solą</td><td>Youjiang Uniwersytet Medyczny dla narodowości</td><td>LHN500</td><td>Dla zwierząt przez zgłębnik</td></tr><tr><td>Golenie/maszynki do strzyżenia</td><td>elektrycznego HANGZHOU HUAYUAN PET PRODUCTS CO., LTD.</td><td>DTJ-002</td><td>Do golenia myszy</td></tr><tr><td>Uchwyt na igłę medyczną ze stali nierdzewnej 14 cm Gruba igła</td><td>Premier Medical Equipment Co.</td><td>SP784</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>Kleszcze okulistyczne ze stali nierdzewnej 10,5 cm zakrzywione (bez haczyka)</td> <td>Zhuoyouyue</td><td>YKNWW-10,5</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>Nożyczki okulistyczne ze stali nierdzewnej / nożyczki chirurgiczne 10 CM Prosta końcówka</td><td>Premier Medical Equipment Co.</td><td>ZYJD-10-ZJ</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>Końcówka ze stali nierdzewnej Igła żołądkowa 12 Gauge 55mm Kolanko</td><td></td><td>GWJ-12-55W</td><td>Do stosowania u myszy przez zgłębnik</td></tr><tr><td>Tris-EDTA Antigen Repair Fluid (50x)</td> <td>proteintech</td><td>PR30002</td><td>Do antygenowej naprawy skrawków parafiny</td></tr><tr><td>Drewniana deska sekcyjna 25 * 16 cm</td><td></td><td>JP16 * 24</td><td>Do chirurgii myszy</td></tr><tr><td>Xiaoyao tabletki</td><td>Jiuzhitang Co., Ltd.</td><td>YPG-041</td><td>Do dostarczania leków dla zwierząt</td></tr><tr><td>Others</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>R 4.3.1</td><td></td><td></td><td>Przetwarzanie danych</td></tr><tr><td>Cytoscape3.9.1</td><td>National Resource for Network Biology</td><td></td><td>Budowa sieci sieci</td></tr><tr><td>ImageJ 1.54f</td><td>National Institutes of Health</td><td></td><td>Przetwarzanie obrazów dla wyniki immunohistochemii</td></tr><tr><td>Adobe Photoshop 24.0.0</td><td>Adobe</td><td></td><td>Do kombinacji obrazów</td></tr><tr><td>GraphpadPrism 9.5</td><td>Oprogramowanie GraphPad</td><td></td><td>Analiza statystyczna</td></tr><tr><td>komórek danych Wymiar</td><td>OLYMPUS</td><td></td><td>Do krojenia i fotografowania</td></tr><tr><td>OLYMPUS BX53</td><td>OLYMPUS</td><td></td><td>Do barwienia HE i fotografii przekroju immunohistochemicznego</td></tr></tbody></table>

badania nad przeciwzapalnym działaniem tabletek xiaoyao w leczeniu osteoporozy pomenopauzalnej u myszy

Studies on the Anti-Inflammatory Effect of Xiaoyao Pills in The Treatment of Postmenopausal Osteoporosis in Mice

Osteoporoza jest powszechną chorobą metaboliczną kobiet starszych i po menopauzie, bez widocznych objawów we wczesnych stadiach. W późniejszych stadiach tego stanu pacjenci są podatni na złamania, co może poważnie wpłynąć na ich zdrowie i jakość życia. Wzrost średniej długości życia na całym świecie sprawił, że osteoporoza stała się problemem globalnym. Tabletki Xiaoyao były wcześniej 
stosowany w leczeniu depresji. Ponadto lek wydawał się mieć aktywność podobną do estrogenu, co wpływało na ekspresję ALP, wczesnego markera specyficznego dla osteoblastów, i COL-1, głównego składnika macierzy zewnątrzkomórkowej kości. Tabletki Xiaoyao oceniano pod kątem ich wpływu na osteoporozę pomenopauzalną (PMOM) u myszy. Dostęp do informacji docelowych każdego ziołowego składnika tabletek Xiaoyao uzyskano za pośrednictwem bazy danych Tradycyjnej Farmakologii Systemów Medycyny Chińskiej (TCMSP). Informacje z GeneCards, OMIM, PharmGkb, TTD, DrugBank i innych stron internetowych wykorzystano do skonstruowania sieci regulacyjnej kompleksu ziołowego za pomocą sieci Cytoscape i String w celu oceny interakcji białek. Myszy poddano owariektomii i leczono wysokimi i niskimi dawkami tabletek Xiaoyao, które porównano z grupą kontrolną. Ich objawy oceniano za pomocą immunocytochemii tkanek kostnych. Wyniki sugerowały, że tabletki Xiaoyao miały zdolność łagodzenia objawów PMOM u myszy poddanych owariektomii poprzez szlak sygnałowy IL-17. Lek ten ma potencjał, aby stać się nowym środkiem terapeutycznym w leczeniu osteoporozy.

Osteoporoza pomenopauzalna stała się globalnym problemem zdrowia publicznego. Celem tego badania jest zbadanie efektów terapeutycznych i powiązanych mechanizmów tradycyjnej medycyny chińskiej tabletek Xiaoyao na ten stan.

Badania nad przeciwzapalnym działaniem tabletek Xiaoyao w leczeniu osteoporozy pomenopauzalnej u myszy

Osteoporosis is a common metabolic disease of elderly and postmenopausal women, with no obvious symptoms during its early stages. In the latter stages of ...

Przedmiotem tego badania było terapeutyczne działanie tabletek xiaoyao medycyny chińskiej na myszy z osteoporozą pomenopauzalną. W tym badaniu chcieliśmy potwierdzić, czy tabletki xiaoyao mogą wywierać efekt terapeutyczny i jaki jest specyficzny mechanizm. W tym badaniu łączymy tradycyjną medycynę chińską z nowoczesną farmakologią i normalnym rodzajem oraz upoważniamy do wyszukiwania i analizy medycznej dawki białka, która pokaże Twoje lekarstwo.Również proces w porównaniu z pojedynczą farmakologią, nasz genom po prostu analizuje nasz schemat jest bardziej wszechstronny i może dostarczyć nowego pomysłu na leczenie osteoporozy. Idea ta będzie promować rozwój dziedziny tradycyjnej medycyny chińskiej w leczeniu osteoporozy, promować i pogłębiać zrozumienie mechanizmu i rewolucji tradycyjnej medycyny chińskiej, jej podstawowej idei badawczej oraz kierunku praktycznego wskazówek dostawcy i skutecznej wizyty oceniającej naszą aplikację kliniczną. Aby rozpocząć scalanie genów związanych z chorobą, umieść wcześniej zapisane pliki tekstowe z pięciu baz danych zawierających nazwę zioła, identyfikator składnika, identyfikator genu i kropkę R choroby skryptu w tym samym folderze.Otwórz kod języka R. Skopiuj i wklej ścieżkę, w której przechowywany jest plik tekstowy, do wiersza, w którym znajduje się ustawiony WD w kodzie języka R. Otwórz oprogramowanie języka R.Uruchom zmodyfikowany kod języka R i zapisz. Ustaw gen i nazwij plik disease dot text. Otwórz witrynę internetową diagramu Venna.W sekcji wprowadzania skopiuj i wklej już zapisaną zawartość tekstową do listy. Nazwij zawartość odpowiednią bazą danych i kliknij przycisk Prześlij. Kliknij Zapisz obrazy PNG poniżej obrazu i zapisz wynik tekstowy w tym samym folderze.Umieść plik tekstowy z kropką ze wszystkimi celami i plik tekstowy z kropką choroby w tym samym folderze. Otwórz kod języka R. Skopiuj i wklej ścieżkę, w której przechowywany jest plik tekstowy, do wiersza, w którym znajduje się ustawiony WD w kodzie języka R.Otwórz oprogramowanie języka R, uruchom zmodyfikowany kod języka R i zapisz. Ustaw gen i nazwij plik lek choroba kropka tekst. Otwórz witrynę internetową diagramu Venna.W sekcji danych wejściowych skopiuj i wklej wszystkie elementy docelowe, symbol kropki, kropkę, tekst i tekst kropki choroby, a następnie nazwij pliki. Kliknij Zapisz obraz jako PNG pod obrazem i zapisz wyniki tekstowe w tym samym folderze. Otwórz witrynę String i kliknij wiele białek.Kliknij przycisk Przeglądaj i prześlij plik tekstowy kropkowy z lekiem i chorobą. Następnie wybierz Homo sapiens w organizmach. Kliknij przycisk Szukaj, a następnie kontynuuj.Teraz kliknij ustawienia i ustaw minimalny wymagany wynik interakcji na najwyższy poziom ufności. W opcji wyświetlania sieci zaznacz opcję ukryj odłączone węzły w sieci. Następnie kliknij przycisk aktualizuj.Dostosuj węzły na diagramie sieci tak, aby nie nakładały się na siebie ani nie zasłaniały. Kliknij eksport, a następnie pobierz jako mapę bitową o wysokiej rozdzielczości, aby uzyskać mapę sieci współpracującej z białkami w formacie PNG. Pobierz plik TSV jako krótkie dane wyjściowe w postaci tekstu tabelarycznego.Zapisywanie plików PNG i TSV w ujednoliconym folderze. Na początek przygotuj bloki wosku od uśpionych myszy, którym wstrzyknięto tabletki xiaoyao. Pokrój bloki wosku na ciągłe sekcje o grubości sześciu mikrometrów i piecz plastry w temperaturze od 70 do 72 stopni Celsjusza przez 30 do 60 minut.Przenieś plastry do roztworu do odparafinowania na osiem minut, a następnie odwodnij dwukrotnie w 75% bezwodnym etanolu przez pięć minut każdy, a następnie spłucz w PBS przez pięć minut. Teraz wykonaj naprawę wysokociśnieniową EDTA przez 15 minut. Po spłukaniu PBS, kroplami, dodaj 3% nadtlenku wodoru do tkanki i inkubuj przez 10 minut.Umyj chusteczkę trzy razy PBS przez pięć minut każdy. Za pomocą pisaka immunohistochemicznego narysuj okrąg wokół tkanki. Po umyciu tkanki PBS wybarwić przez noc w roztworze przeciwciała pierwotnego.Następnego dnia przepłucz tkankę trzy razy przez pięć minut w PBS. Kroplami dodaj przeciwciało drugorzędowe i inkubuj przez 60 minut. Po spłukaniu PBS inkubować tkankę w gotowym do użycia roztworze DAB przez trzy do pięciu minut.Teraz zabarwij tkankę w hematoksylinie przez trzy minuty. Ponownie przepłucz tkankę PBS przed umieszczeniem jej w roztworze różnicującym na 10 sekund. Po wypłukaniu PBS dodaj roztwór powrotny przez 10 sekund.Na koniec wykonaj obróbkę 75% bezwodnym etanolem przez pięć minut i uszczelnij szkiełko neutralną żywicą. Barwienie eozyną hematoksyliny wykazało ciasno ułożone beleczki u myszy pozorowanych, podczas gdy myszy OVX wykazywały typowe zmiany osteoporotyczne, z rzadkimi beleczkami i powiększonymi jamami szpiku. Porównanie mikro-CT wykazało niepełną siatkę beleczkową i ścieńczenie kory kostnej u myszy OVX w porównaniu z myszami pozorowanymi.Po interwencji farmakologicznej barwienie eozyną hematoksyliny wykazało przywróconą strukturę beleczków i zmniejszenie jamy szpiku w porównaniu z grupą OVX. Wskaźniki obrazowania wykazały mniej złamanych beleczków i przywróconą siateczkę w grupie tabletek xiaoyao w dużej dawce w porównaniu z grupą OVX. Wyniki immunohistochemiczne wykazały zwiększenie fosfatazy alkalicznej i kolagenu typu pierwszego oraz zmniejszenie interleukiny-17, ACT one i interleukiny-6 w grupie leku.

studies-on-anti-inflammatory-effect-xiaoyao-pills-treatment

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Tutaj prezentujemy protokół do stworzenia modelu depresyjnego myszy, obserwacji zmian w zachowaniu związanych z przewlekłym nieprzewidywalnym łagodnym stresem (CUMS) i oceny działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan.

Ocena działania przeciwdepresyjnego Xiaoyaosan na przewlekle zestresowane myszy

Prezentowany tutaj jest protokół pokazujący, że kapsułka Bazi Bushen (BZBS) może regulować szlak sygnałowy RANKL/OPG w modelu gryzoni po owariektomii poprzez efekt podobny do estrogenu.

Estrogenopodobny efekt kapsułki Bazi Bushen u szczurów po owariektomii

Tutaj prezentujemy protokół zastosowania terapii ognistą igłą Lingnan w interwencji szczurów modelowych z osteoporozą.

Procedura operacyjna i środki ostrożności związane z terapią ognistą Lingnan u szczurów modelowych z osteoporozą

MamA jest unikalnym białkiem powiązanym z magnetosomami, o którym wykazano, że bierze udział w ich aktywacji. W niniejszej pracy przedstawiamy protokół oczyszczania mutanta z delecją MamA (MamAΔ41) z M. magneticum AMB-1.

Oczyszczanie białka MamAΔ41 związanego z magnetosomami szczepu AMB-1 M. magneticum

Opisano metodę obrazowania funkcjonalnego brunatnej tkanki tłuszczowej (BAT) u myszy, w której pobór 18F-fluorodeoksygukozy (FDG) przez BAT stymulowany zimnem jest oceniany nieinwazyjnie przy użyciu standaryzowanego protokołu micro-PET/CT. Metoda ta jest wiarygodna i czuła w wykrywaniu różnic w aktywności BAT w modelach mysich.

Obrazowanie funkcjonalne brunatnej tkanki tłuszczowej u myszy z wykorzystaniem micro-PET/CT z 18F-FDG

Tutaj opisujemy skuteczną metodę badania dynamiki apoptotycznego oczyszczania komórek in vivo. Metoda ta wykorzystuje żywe zarodki Drosophila jako potężny model do monitorowania fagocytozy komórek apoptotycznych przy użyciu specyficznego znakowania komórek apoptotycznych i fagocytów.

Obrazowanie na żywo apoptotycznego usuwania komórek podczas embriogenezy Drosophila

Aby zbadać związek między homeostazą białek, stresem i starzeniem się, monitorowaliśmy zmiany w fałdowaniu białek, śledząc dysfunkcję białek, lokalizację białek w komórce i stabilność białek na poziomie organizmu, komórkowym i białkowym, używając genetycznie wykonalnego metazoanu Caenorhabditis elegans jako systemu modelowego.

Wykorzystanie Caenorhabditis elegans jako systemu modelowego do badania homeostazy białek w organizmie wielokomórkowym

Mysi mięsień brodawkowaty lewej komory może być użyty do zbadania kurczliwości serca in vitro. W tym artykule szczegółowo opisano izolację i protokoły eksperymentalne do badania charakterystyki kurczliwości serca.

Pomiary kurczliwości izolowanych mięśni brodawkowatych w celu zbadania inotropii serca u myszy

Szczegółowo opisano protokoły hodowli ludzkich komórek śródbłonka żyły pępowinowej (HUVEC), przejściowej transfekcji znakowanych fluorescencyjnie markerów wzrostu mikrotubul, obrazowania żywych komórek i automatycznej analizy dynamiki wzrostu mikrotubul międzyfazowych.

Obrazowanie poklatkowe w wysokiej rozdzielczości i automatyczna analiza dynamiki mikrotubul w żywych ludzkich komórkach śródbłonka żyły pępowinowej

Wiele białek w sensie komórkowym i indukuje krzywiznę błony. Opisujemy metodę wyciągania nanorurek błonowych z pęcherzyków lipidowych w celu zbadania interakcji białek lub dowolnej cząsteczki aktywnej pod kątem krzywizny z zakrzywionymi błonami in vitro.

Wyciąganie nanorurek membranowych z gigantycznych pęcherzyków jednowarstwowych

Poznaj metodę oceny przeciwzapalnego działania tabletek Xiaoyao w leczeniu osteoporozy pomenopauzalnej u myszy. Badanie łączy medycynę chińską z nowoczesną farmakologią.

Badania nad przeciwzapalnym działaniem tabletek Xiaoyao w leczeniu osteoporozy pomenopauzalnej u myszy

Przeglądaj więcej filmów