Name: Przewlekły stres związany z porażką społeczną u myszy we wczesnym okresie dorastania (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T13:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 6 s
Description: Poznaj model przewlekłego stresu związanego z porażką społeczną u młodych myszy samców. Ta metoda pozwala badać długotrwałe skutki traumy z dzieciństwa na funkcjonowanie mózgu dorosłych osobników.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ta praca jest wspierana przez National Institutes of Health (NIH) (Grant nr T32-MH125786 [dla EH], Grant nr P50-MH115874 i R01-MH108665 [dla KJR]), Eric Dorris Memorial Research Award (dla EH) oraz McLean Frazier Fund (dla KJR).

Wszystkie eksperymenty zostały zatwierdzone i przeprowadzone zgodnie z wytycznymi Instytucjonalnego Komitetu ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt (Institutional Animal Care and Use Committee) w McLean Hospital lub Instytucjonalnego Komitetu ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt w VA Boston. Wszystkie myszy przebywały w 12-godzinnym cyklu światło/ciemność i miały dostęp do pożywienia oraz wody ad libitum. Schematyczny przegląd protokołu przedstawiono na Rysunku 1, natomiast szczegółowe informacje na temat wszystkich zwierząt, materiałów i sprzętu użytych w tym protokole znajdują się w Tabeli materiałów.
<img alt="Schemat i oś czasu eksperymentu nad zachowaniem zwierząt; fazy eaCSDS i OFSI; przebieg testów agresji." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67113/67113fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Schemat projektu eksperymentalnego dla eaCSDS. (A) Oś czasu dla zwierząt kontrolnych oraz zwierząt poddanych klęsce (defeated) szczepu C57. (B) Etapy eaCSDS przedstawione w kolejności chronologicznej, rozpoczynając od przesiewania agresorów, a następnie powtarzalnego stresu społecznego dla grupy eksperymentalnej, kwaterowania obu grup (kontrolnej i eksperymentalnej), a na koniec testów behawioralnych. Skróty: eaCSDS = wczesnonastoletni przewlekły stres wynikający z klęski społecznej; OFSI = interakcja społeczna w otwartym polu. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67113/67113fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
1. Przesiew agresywnych samców CFW
<ol>
	<li>Zamów samce myszy szczepu C57 w taki sposób, aby dotarły z zewnętrznego laboratorium w wieku 3 tygodni; zapewni to odpowiednią ilość czasu na przesiewienie agresorów i przygotowanie ich do wywoływania porażek, zanim osobniki młodociane osiągną wiek 4 tygodni. Utrzymuj myszy C57 w grupach przez tydzień od momentu ich przybycia. 
	UWAGA: Alternatywnie zwierzęta mogą być hodowane wewnątrz jednostki. Nie zaobserwowano różnic w podatności na przegraną w zależności od tego, czy myszy były hodowane wewnątrz jednostki, czy sprowadzono je z zewnętrznego laboratorium.</li>
	<li>Zamów dorosłe samce (8–12 tygodni, bez doświadczenia w rozkodzie) CFW oraz dorosłe (&gt;8 tygodni) poddane owariektomii (OVX) samice szczurów linii CFW. Zamów taką samą liczbę samców CFW, co samic C57, do przeprowadzenia procedury defeat (poddań)., oraz co najmniej 50% zapasu na wypadek, gdyby agresja zmalała w wyniku przegranej. Na przykład, w celu pokonania 10 osobników C57 w wieku dojrzewania, należy zamówić 15 samców CFW i 15 samic CFW po owariektomii (OVX). Co najmniej 10 samców CFW stanie się agresywnych, zatem w razie potrzeby pozostałe 5 samców nieagresywnych można wykorzystać później jako myszy bodźcowe podczas testu OFSI. 
	UWAGA: Niemal 80% tych samców CFW wykazuje agresję po umieszczeniu w klatkach z partnerem.</li>
	<li>Jeden dzień po przyjeździe samce CFW umieścić w klatkach z samicami CFW OVX (1 samiec CFW i 1 samica CFW OVX na klatkę) na co najmniej 1 tydzień, aby umożliwić doświadczenie seksualne i zwiększyć agresję terytorialną u samca. 
	UWAGA: *CFW mogą być trzymane w parach aż do momentu rozpoczęcia procesu wykluczania.</li>
	<li>Po 1 tygodniu przeprowadzić testy agresji:
	<ol>
		<li>Przenieś klatki z parami myszy CFW do pomieszczenia badawczego.</li>
		<li>Wyjmij samicę CFW OVX z klatki i umieść ją w czystej, pustej klatce.</li>
		<li>Wprowadzić samca szczepa C57 pełniącego rolę bodźca do klatki z samcem szczepa CFW na 1 minutę.</li>
		<li>Zarejestruj czas latencji ataku. Jeśli dojdzie do ataku, pozwól mu trwać do momentu upływu 1 min od wprowadzenia bodźca C57.</li>
		<li>Usuń bodziec C57, umieść samicę CFW OVX z powrotem w klatce z samcem CFW i przenieś je z powrotem do pomieszczenia hodowlanego.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Powtórz ten protokół przez kolejne 2 dni. Wykorzystaj myszy wykazujące latencję ataku wynoszącą &lt;Przez co najmniej 2 dni przeprowadzać screening w kierunku agresywności u dorosłych osobników w czasie 30 s. Kontynuować utrzymywanie agresywnych samców CFW z samicami CFW po owariektomii (OVX) aż do pierwszego dnia procedury defeat. 
	UWAGA: Chociaż nie odnotowano trudności w wywoływaniu agresji u samców szczurów linii CFW po umieszczeniu ich w jednej klatce z samicami CFW po owariektomii (OVX), usunięcie jajników zatrzymuje cykl rujowy i może potencjalnie wpływać na zachowanie seksualne, co mogłoby skutkować brakiem doświadczenia seksualnego u samców CFW parowanych z samicami CFW OVX.11,12Wykorzystanie samic poddanych ligacji jajników zamiast owariektomii jest opcją, którą można zastosować w przypadku trudności ze zwiększeniem agresji samców CFW.</li>
	<li>Grupuj samce CFW, które albo nie atakują, albo wykazują latencję ataku wynoszącą &gt;30 s przez 2 lub więcej dni. Użyj tych nieagresywnych samców CFW jako zwierząt stymulujących podczas OFSI.</li>
</ol>
2. Obsługa kontrolnych adolescentycznych samców szczurów C57
<ol>
	<li>Gdy młodociane myszy C57 osiągną wiek 4 tygodni, zważ każde zwierzę i zapisz jego masę.</li>
	<li>Podziel zwierzęta na dwie równoliczne kohorty (kontrolną i pokonaną), upewniając się, że masy ciała w obu kohortach nie różnią się znacząco.</li>
	<li>Umieść jedną młodocianą mysz C57 z grupy kontrolnej po jednej stronie przegrody z pleksiglasu, a drugą młodocianą mysz C57 z grupy kontrolnej po przeciwnej stronie przegrody (tj. dwie młodociane myszy kontrolne w jednej klatce).</li>
	<li>Klatki kontrolne przechowuj w osobnym pomieszczeniu, w którym nie będą odbywać się procedury pokonania.</li>
	<li>W dniach 1–10 każdego dnia waż myszy kontrolne i zamieniaj je stronami w klatce przez łącznie 10 dni.</li>
	<li>Jedenastego dnia umieść każdą młodocianą mysz kontrolną obok innej młodocianej myszy kontrolnej, z przegrodą z pleksiglasu pomiędzy nimi, na pozostały czas trwania eksperymentu. 
	UWAGA: Ma to na celu zapewnienie, aby zarówno zwierzęta z grupy pokonanej, jak i kontrolnej, były przetrzymywane obok nieznanego zwierzęcia z tej samej grupy zabiegowej w fazie po pokonaniu.</li>
</ol>
3. Euthanazja eksperymentalnych samców myszy C57 w wieku młodzieńczym
<ol>
	<li>Zważ i zapisz masę osobników C57 w wieku dojrzewania przeznaczonych do procedury defeaty.</li>
	<li>Przed rozpoczęciem defeaty zwróć szczególną uwagę na poniższe kwestie, aby zachować zdrowie osobników w wieku dojrzewania podczas całego procesu:
	<ol>
		<li>Każdy „gryz złożony” (compound bite), czyli ugryzienie, podczas którego rezydent gryzie i nie puszcza, a następnie kopie w brzuch osobnika w wieku dojrzewania, licz jako dwa oddzielne ugryzienia – tego typu ugryzienia charakteryzują się większą siłą nacisku i mogą łatwiej przerwać ciągłość skóry. Natychmiast przerwij defeatę, jeśli osobnik w wieku dojrzewania otrzyma więcej niż dwa kolejne gryzy złożone.</li>
		<li>Natychmiast przerwij defeatę, jeśli pojawi się krew lub widoczne będą otwarte rany. Jeśli rany zostaną zauważone po zakończeniu defeaty, nałóż maść z antybiotykiem w miejscu rany. W przypadku wystąpienia ran o średnicy większej niż 4 mm natychmiast poddaj mysz eutanazji.</li>
		<li>W przypadku osobników w wieku dojrzewania z otwartymi ranami, ogranicz kolejne defaty do maksymalnie pięciu ugryzień, aż do czasu, gdy rana przestanie być widoczna. Po wygojeniu rany wróć do pierwotnych wytycznych dotyczących defeaty: 30 ugryzień lub 5 min na jedną sesję.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Usuń samicę CFW OVX z klatki z rezydentem, samcem CFW, i umieść ją z innymi samicami OVX.</li>
	<li>Wprowadź osobnika C57 w wieku dojrzewania do klatki rezydenta, samca CFW, i uruchom stoper.</li>
	<li>Zapisz tożsamość agresora, latencję ataku, liczbę ugryzień (za pomocą licznika klikowego) oraz czas, w jakim osobnik w wieku dojrzewania otrzymał 30 ugryzień.</li>
	<li>Usuń osobnika w wieku dojrzewania z klatki po 30 ugryzieniach lub po upływie 5 min, w zależności od tego, co nastąpi wcześniej.</li>
	<li>Umieść pleksiglasową przegrodę na środku klatki rezydenta CFW, tak aby rezydent CFW znajdował się po jednej stronie, a pokonany osobnik w wieku dojrzewania po drugiej. Upewnij się, że przegroda jest stabilnie zamocowana i nie może zostać przesunięta przez rezydenta.</li>
	<li>Po 24 h powtórz defeatę (kroki 3.1-3.7) z innym agresorem, samcem CFW.</li>
	<li>Powtarzaj defeatę co 24 h przez łącznie 10 dni, każdego dnia z innym agresorem.</li>
	<li>Jedenastego dnia umieść pokonane osobniki w wieku dojrzewania obok siebie, z pleksiglasową przegrodą między nimi przez cały czas trwania eksperymentu. Umieść pokonane osobniki w tym samym pomieszczeniu co grupa kontrolna, ale na oddzielnej półce.</li>
	<li>Umieść samce CFW w parach z dowolnymi samicami CFW OVX do czasu kolejnej serii defat. 
	UWAGA: Wykorzystane samice CFW OVX nie muszą być tymi samymi osobnikami, które były wcześniej parowane z samcami CFW.</li>
</ol>
4. Badanie unikania społecznego po porażce za pomocą testu interakcji społecznych w otwartym polu (OFSI)
<ol>
	<li>Poddać zwierzęta kontrolne i pokonane aklimatyzacji w pomieszczeniu testowym przez 1 h.</li>
	<li>Rejestrować wszystkie sesje za pomocą oprogramowania do śledzenia zwierząt. Umieścić drucianą miseczkę przy lewej ścianie akrylowej areny o wymiarach 44 x 44 x 44 cm w połowie długości ściany i wyznaczyć wokół miseczki okrągłą strefę interakcji o promieniu 2 cm. 
	UWAGA: Należy upewnić się, że miseczka jest umieszczana zawsze w tej samej pozycji, aby zapobiec zmianom stref pomiędzy kolejnymi próbami.</li>
	<li>Umieścić mysz C57 w narożniku areny z pustą drucianą miseczką na 150 s.</li>
	<li>Usunąć mysz C57 z areny i umieścić ją w czystej, pustej klatce. Umieścić nieagresywnego, nieznajomego dorosłego samca CFW w drucianej miseczce, a następnie wstawić miseczkę do areny.</li>
	<li>Ponownie wprowadzić mysz C57 do areny z drucianą miseczką zawierającą samca CFW na 150 s.</li>
	<li>Zwrócić oba zwierzęta do ich odpowiednich klatek.</li>
	<li>Umyć arenę wodą, czyszcząc miejsca zabrudzone moczem lub kałem 70% etanolem, przed testowaniem kolejnej myszy C57.</li>
	<li>Obliczyć czas, w którym jakikolwiek punkt ciała znajdował się w strefie interakcji podczas sesji z pustą miseczką oraz sesji z miseczką zawierającą samca CFW. Podzielić czas spędzony w strefie interakcji z miseczką zawierającą CFW przez czas spędzony w strefie interakcji z pustą miseczką, aby uzyskać wskaźnik interakcji społecznych.</li>
	<li>Przeprowadzić test OFSI w dowolnym czasie po 10-dniowym okresie pokonywania, w zależności od badanego okna rozwojowego. W przypadku eaCSDS przeprowadzić OFSI 1 dzień, 2 tygodnie i 5 tygodni po dacie ostatniego pokonania myszy C57.
	<ol>
		<li>Wskaźnik interakcji społecznych &gt; 1 uznaje się za typowy dla zwierząt kontrolnych. Chociaż większość zwierząt kontrolnych osiągnie wskaźnik powyżej jedynki, niewielka podgrupa może mieć wskaźniki &lt; 1. W przypadku zwierząt pokonanych, za podatne uważa się te o wskaźniku interakcji społecznych &lt; 1, a za odporne te o wskaźniku ≥ 1.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Modeling Early Life Trauma in Mice to Study PTSD and Social Avoidance Behavior

<ol><li>Colich, N. L., Rosen, M. L., Williams, E. S., McLaughlin, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biological+aging+in+childhood+and+adolescence+following+experiences+of+threat+and+deprivation%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Psychol+Bull%22%5BJournal%5D)">Biological aging in childhood and adolescence following experiences of threat and deprivation: A systematic review and meta-analysis.</a> Psychol Bull. 146 (9), 721-764 (2020).</li>
<li>Lange, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurobehavioural+mechanisms+of+threat+generalization+moderate+the+link+between+childhood+maltreatment+and+psychopathology+in+emerging+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22J+Psychiatry+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neurobehavioural mechanisms of threat generalization moderate the link between childhood maltreatment and psychopathology in emerging adulthood.</a> J Psychiatry Neurosci. 44 (3), 185-194 (2019).</li>
<li>McLaughlin, K. A., Sheridan, M. A., Lambert, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Childhood+adversity+and+neural+development%3A+Deprivation+and+threat+as+distinct+dimensions+of+early+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">Childhood adversity and neural development: Deprivation and threat as distinct dimensions of early experience.</a> Neurosci Biobehav Rev. 47, 578-591 (2014).</li>
<li>Keding, T. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+patterns+of+delayed+emotion+circuit+maturation+in+abused+girls+with+and+without+internalizing+psychopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Differential patterns of delayed emotion circuit maturation in abused girls with and without internalizing psychopathology.</a> Am J Psychiatry. 178 (11), 1026-1036 (2021).</li>
<li>Tractenberg, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+maternal+separation+effects+on+behavioural+outcomes+in+mice%3A+Evidence+from+a+four-stage+methodological+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Biobehav+Rev%22%5BJournal%5D)">An overview of maternal separation effects on behavioural outcomes in mice: Evidence from a four-stage methodological systematic review.</a> Neurosci Biobehav Rev. 68, 489-503 (2016).</li>
<li>Gallo, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limited+bedding+and+nesting+induces+maternal+behavior+resembling+both+hypervigilance+and+abuse%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Limited bedding and nesting induces maternal behavior resembling both hypervigilance and abuse.</a> Front Behav Neurosci. 13, 167(2019).</li>
<li>Stevens, J. S., van Rooij, S. J. H., Jovanovic, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Developmental+contributors+to+trauma+response%3A+the+importance+of+sensitive+periods%2C+early+environment%2C+and+sex+differences%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Top+Behav+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Developmental contributors to trauma response: the importance of sensitive periods, early environment, and sex differences.</a> Curr Top Behav Neurosci. 38, 1-22 (2016).</li>
<li>Berton, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Essential+role+of+BDNF+in+the+mesolimbic+dopamine+pathway+in+social+defeat+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Science+%281979%29%22%5BJournal%5D)">Essential role of BDNF in the mesolimbic dopamine pathway in social defeat stress.</a> Science (1979). 311 (5762), 864-868 (2006).</li>
<li>Golden, S. A., Covington, H. E., Berton, O., Russo, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+standardized+protocol+for+repeated+social+defeat+stress+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Protoc%22%5BJournal%5D)">A standardized protocol for repeated social defeat stress in mice.</a> Nat Protoc. 6 (8), 1183-1191 (2011).</li>
<li>Kudryavtseva, N. N., Bakshtanovskaya, I. V., Koryakina, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+model+of+depression+in+mice+of+C57BL%2F6J+strain%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">Social model of depression in mice of C57BL/6J strain.</a> Pharmacol Biochem Behav. 38 (2), 315-320 (1991).</li>
<li>Huijgens, P. T., Guarraci, F. A., Olivier, J. D. A., Snoeren, E. M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Male+rat+sexual+behavior%3A+Insights+from+inter-copulatory+intervals%5BTitle%5D)+AND+%22Behav+Processes%22%5BJournal%5D)">Male rat sexual behavior: Insights from inter-copulatory intervals.</a> Behav Processes. 190, 104458(2021).</li>
<li>Zucon Bacelar, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aged+and+induced-premature+ovarian+failure+mouse+models+affect+diestrus+profile+and+ovarian+features%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Aged and induced-premature ovarian failure mouse models affect diestrus profile and ovarian features.</a> PLoS One. 18 (12), e0284887(2023).</li>
<li>Mouri, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+adolescent+social+defeat+stress+exposure+persistently+impairs+social+behaviors+and+neurogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacology%22%5BJournal%5D)">Early adolescent social defeat stress exposure persistently impairs social behaviors and neurogenesis.</a> Neuropharmacology. 133, 23-37 (2018).</li>
<li>Hasegawa, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dysfunction+of+serotonergic+and+dopaminergic+neuronal+systems+in+the+antidepressant-resistant+impairment+of+social+behaviors+induced+by+social+defeat+stress+exposure+as+early+adolescents%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Dysfunction of serotonergic and dopaminergic neuronal systems in the antidepressant-resistant impairment of social behaviors induced by social defeat stress exposure as early adolescents.</a> Int J Neuropsychopharmacol. 21 (9), 837-846 (2018).</li>
<li>Pantoja-Urbán, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Gains+and+losses%3A+resilience+to+social+defeat+stress+in+adolescent+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Gains and losses: resilience to social defeat stress in adolescent female mice.</a> Biol Psychiatry. 95 (1), 37-47 (2023).</li>
<li>Demaestri, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Resource+scarcity+but+not+maternal+separation+provokes+unpredictable+maternal+care+sequences+in+mice+and+both+upregulate+Crh-associated+gene+expression+in+the+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiol+Stress%22%5BJournal%5D)">Resource scarcity but not maternal separation provokes unpredictable maternal care sequences in mice and both upregulate Crh-associated gene expression in the amygdala.</a> Neurobiol Stress. 20, 100484(2022).</li>
<li>Walker, C. -D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronic+early+life+stress+induced+by+limited+bedding+and+nesting+%28LBN%29+material+in+rodents%3A+critical+considerations+of+methodology%2C+outcomes+and+translational+potential%5BTitle%5D)+AND+%22Stress%22%5BJournal%5D)">Chronic early life stress induced by limited bedding and nesting (LBN) material in rodents: critical considerations of methodology, outcomes and translational potential.</a> Stress. 20 (5), 421-448 (2017).</li>
<li>Pardo, G. V. E., Alfaro Saca, E. E., Becerra Flores, C. T., Delgado Casós, W. F., Pacheco-Otalora, L. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Limited+bedding+nesting+paradigm+alters+maternal+behavior+and+pup%E2%80%99s+early+developmental+milestones+but+did+not+induce+anxiety-+or+depressive-like+behavior+in+two+different+inbred+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Dev+Psychobiol%22%5BJournal%5D)">Limited bedding nesting paradigm alters maternal behavior and pup’s early developmental milestones but did not induce anxiety- or depressive-like behavior in two different inbred mice.</a> Dev Psychobiol. 65 (1), e22357(2023).</li>
<li>Raineki, C., Cortés, M. R., Belnoue, L., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+early-life+abuse+differ+across+development%3A+infant+social+behavior+deficits+are+followed+by+adolescent+depressive-like+behaviors+mediated+by+the+amygdala%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Effects of early-life abuse differ across development: infant social behavior deficits are followed by adolescent depressive-like behaviors mediated by the amygdala.</a> J Neurosci. 32 (22), 7758-7765 (2012).</li>
<li>Rincón-Cortés, M., Sullivan, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Emergence+of+social+behavior+deficit%2C+blunted+corticolimbic+activity+and+adult+depression-like+behavior+in+a+rodent+model+of+maternal+maltreatment%5BTitle%5D)+AND+%22Transl+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Emergence of social behavior deficit, blunted corticolimbic activity and adult depression-like behavior in a rodent model of maternal maltreatment.</a> Transl Psychiatry. 6 (10), e930(2016).</li>
<li>Raineki, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Paradoxical+neurobehavioral+rescue+by+memories+of+early-life+abuse%3A+the+safety+signal+value+of+odors+learned+during+abusive+attachment%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropsychopharmacology%22%5BJournal%5D)">Paradoxical neurobehavioral rescue by memories of early-life abuse: the safety signal value of odors learned during abusive attachment.</a> Neuropsychopharmacology. 40 (4), 906-914 (2015).</li>
<li>Niwa, M., Matsumoto, Y., Mouri, A., Ozaki, N., Nabeshima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vulnerability+in+early+life+to+changes+in+the+rearing+environment+plays+a+crucial+role+in+the+aetiopathology+of+psychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neuropsychopharmacol%22%5BJournal%5D)">Vulnerability in early life to changes in the rearing environment plays a crucial role in the aetiopathology of psychiatric disorders.</a> Int J Neuropsychopharmacol. 14 (4), 459-477 (2011).</li>
<li>Franklin, T. B., Linder, N., Russig, H., Thöny, B., Mansuy, I. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+early+stress+on+social+abilities+and+serotonergic+functions+across+generations+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Influence of early stress on social abilities and serotonergic functions across generations in mice.</a> PLoS One. 6 (7), e21842(2011).</li>
<li>Ronquillo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nature+and+nurture%3A+Comparing+mouse+behavior+in+classic+versus+revised+anxiety-like+and+social+behavioral+assays+in+genetically+or+environmentally+defined+groups%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Brain+Behav%22%5BJournal%5D)">Nature and nurture: Comparing mouse behavior in classic versus revised anxiety-like and social behavioral assays in genetically or environmentally defined groups.</a> Genes Brain Behav. 22 (6), e12869(2023).</li>
</ol>

Firma KJR prowadziła konsultacje naukowe dla firm Bioxcel, Bionomics, Acer, Takeda i Jazz Pharma; zasiada w naukowych radach doradczych firm Sage i Brain Research Foundation; otrzymał sponsorowane wsparcie badawcze od Takeda, Brainsway i Alto Neuroscience; i otrzymuje fundusze na badania z NIH. Wszyscy pozostali autorzy nie zgłaszają żadnych biomedycznych interesów finansowych ani potencjalnych konfliktów interesów.

Przewlekły stres związany z porażką społeczną (eaCSDS) we wczesnym okresie dojrzewania skutkuje silnym unikaniem społecznym, co zostało przetestowane w testach interakcji społecznych w otwartym terenie (OFSI), przez całe życie. Protokół ten został oparty na tradycyjnym 10-dniowym modelu przewlekłej porażki społecznej u dorosłych9 z kilkoma małymi, ale kluczowymi modyfikacjami, które odróżniają go od tradycyjnej porażki dorosłego i innych protokołów porażki wczesnej młodzieży 13,14,15. Pierwszym z nich jest wykorzystanie młodszych samców CFW, które nie mają doświadczenia hodowlanego i są trzymane z samicami przed porażką w celu zwiększenia agresji terytorialnej. Jednym z możliwych wyjaśnień trudności w wytwarzaniu agresji wobec nastolatków w innych protokołach może być wykorzystanie emerytowanych hodowców, którzy są zazwyczaj znacznie starsi i wykazują niższy poziom agresji niż młodsze samce. Drugą modyfikacją jest zastosowanie mniejszych klatek, w których myszy są pokonywane i trzymane, co zapewnia mniejsze środowisko, z którego intruz może uniknąć mieszkańca zarówno podczas porażki, jak i podczas trzymania po porażce. Na koniec określa się liczbę ugryzień, aby zapewnić, że wszystkie myszy otrzymują spójne doświadczenie porażki.
Model ten jest ograniczony do późno młodocianych i wczesnych młodzieńczych samców myszy. W swojej obecnej formie protokół ten testował tylko porażki, zaczynając od P26 w najmłodszym. W przyszłości interesujące będzie zbadanie wpływu tego protokołu na myszy natychmiast po odsadzeniu, chociaż czas trwania i liczba ugryzień podczas ataków może wymagać ograniczenia, biorąc pod uwagę mniejszy rozmiar myszy. Warto zauważyć, że protokół ten jest przeznaczony do stosowania u mężczyzn, chociaż wstępne dowody wskazują, że może on również okazać się niezawodny w przypadku porażek kobiet we wczesnym okresie dojrzewania z modyfikacją polegającą na użyciu żeńskich CFW jako agresorów.
Inne modele stresu we wczesnym okresie życia zazwyczaj koncentrują się na oknach przed odsadzeniem. Dwa z tych modeli, separacja matki (MS) oraz ograniczone posłanie i gniazdowanie (LBN), są powszechnie stosowane do wywoływania stresu we wczesnym okresie życia przed P10. Zarówno stwardnienie rozsiane, jak i LBN wpływają na poziom kortyzolu i ekspresję genów związanych z hormonem uwalniającym kortykotropinę (Crh) u szczeniąt16, ale ich wpływ na zachowanie podobne do lęku jest mieszany 17,18, a pomiary interakcji społecznych dorosłych u szczeniąt narażonych na którykolwiek z paradygmatów są ograniczone. Wykazano, że LBN zmniejsza interakcje społeczne w okresie dojrzewania19,20 i dorosłości21 u szczurów, ale według naszej wiedzy jego wpływ na interakcje społeczne u myszy nie został zgłoszony. Stwardnienie rozsiane u myszy C57 / B6 ma mieszany wpływ na interakcje społeczne, przy czym niektóre grupy zgłaszają zmniejszoną interakcję społeczną22,23, podczas gdy nowsze badanie donosi o wzroście interakcji społecznej24. W przeciwieństwie do LBN i MS, ten model porażki we wczesnym okresie dojrzewania koncentruje się na interakcji społecznej jako podstawowym odczycie behawioralnym i kieruje stres do późniejszego okresu rozwoju, co może odpowiadać za różnice w interakcjach społecznych w tym modelu oraz modelach SM i LBN.
Przemoc fizyczna we wczesnym okresie życia jest niezwykle powszechna w naszym społeczeństwie i często prowadzi do wyniszczających zaburzeń psychicznych w wieku dorosłym. Pomimo jego rozpowszechnienia, wpływ znęcania się we wczesnym okresie życia na obwody nerwowe dorosłych nie jest dobrze poznany, częściowo z powodu braku modeli przemocy fizycznej we wczesnym okresie dorastania. Intencją stojącą za stworzeniem protokołu, który ułatwia konsekwentną i solidną porażkę społeczną u dorastających mężczyzn, jest ułatwienie kontynuowania badań nad zmianami neuronalnymi, które wynikają z traumy we wczesnym okresie życia.

Aż 1 na 7 dzieci doświadcza przemocy w dzieciństwie. Oprócz znacznego zwiększenia ryzyka rozwoju chorób psychicznych, takich jak PTSD i inne zaburzenia związane ze strachem w wieku dorosłym, to wczesne doświadczenie życiowe ma głęboki wpływ na anatomię mózgu i łączność1,2. Ostatnio odkryto, że fizyczne znęcanie się we wczesnym okresie życia opóźnia dojrzewanie obwodu, podczas gdy zaniedbanie we wczesnym okresie życia go przyspiesza3,4, co wymaga opracowania modeli urazów fizycznych we wczesnym okresie życia oprócz tych zaniedbań, takich jak separacja matki (MS)5 oraz ograniczone posłanie i zagnieżdżanie (LBN)6. Dodatkowo modele MS i LBN są przeprowadzane u niemowląt przed odsadzeniem. Ponieważ trauma w średnim dzieciństwie (w wieku 10-12 lat) jest szczególnie związana z podatnością na PTSD i zaburzenia psychiczne w późniejszym życiu7, zdolność do modelowania stresu we wczesnym okresie życia na etapach rozwoju poza niemowlęctwem jest kluczowa.
Aby opracować model wczesnej traumy życiowej z efektami behawioralnymi, które utrzymują się do dorosłości, ten 10-dniowy protokół chronicznego stresu społecznego dla nastolatków (eaCSDS) został zaprojektowany z modyfikacjami tradycyjnego modelu stresu chronicznej porażki społecznej dla dorosłych8,9,10. Tradycyjny protokół okazał się nieskuteczny w utrzymaniu długotrwałej agresji wobec nastolatków, która jest potrzebna do pomyślnego przeżycia 10 kolejnych dni porażki. W tym protokole wczesnonastoletnie samce C57/B6J (4 tygodnie, ~P30) są wielokrotnie pokonywane przez młodego (8-10 tygodni) dorosłego samca CFW, który nie ma doświadczenia hodowlanego, co jest modyfikacją tradycyjnego stosowania emerytowanych samców CFW. Inną kluczową modyfikacją tradycyjnego protokołu jest to, że agresja samców CFW zwiększa się po 1 tygodniu wspólnego przebywania z samicą po owariektomii. Po tym trzymaniu samce CFW szybko i konsekwentnie atakują dorastające samce, negując potrzebę stymulacji dorosłych myszy C57 / B6J w celu zwiększenia agresji przed pokonaniem dorastających samców. Kolejną modyfikacją tradycyjnego modelu dorosłego osobnika jest stosowanie mniejszych klatek (29 cm x 19 cm x 13 cm) podczas porażek i nocnego przetrzymywania.
Testowanie podatności na porażkę jest wykonywane za pomocą testu interakcji społecznej w otwartym polu (OFSI). Myszy, które są podatne na porażkę, są klasyfikowane jako zwierzęta, które spędzają więcej czasu na interakcji z pustym kubkiem niż z kubkiem z samcem CFW w środku. Opisany poniżej protokół zapewnia ponad 60% podatność podczas testów w okresie dojrzewania i dorosłości.

<table><tbody><tr><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td>&nbsp; &nbsp;</td><td><silny>Ilość </silny><silny>(dla kohorty 10 zwierząt pokonanych i 10 kontrolnych)</silny></td></tr><tr><td>Arena, nieprzezroczysta</td><td>ogólna</td><td>---</td><td>1 <silna>Rozmiar</mocna>: 44 x 44 x 44 cm</td></tr><tr><td>CFW samiec (8-10 tygodni)</td><td>Charles River</td><td>24</td><td>15</td></tr><tr><td>CFW OVX suczka (8+ tygodni)</td><td>Charles River</td><td>24</td><td>15</td></tr><tr><td>C57/B6J samiec (3 tygodnie)</td><td>Jackson Laboratories</td><td>664</td><td>20</td></tr><tr><td>C57/B6J samiec (6-7 tygodni, myszy bodźce)</td><td>Jackson Laboratories</td><td>664</td><td>5</td></tr><tr><td>Licznik klikerów</td><td>ogólny</td><td></td><td>---1</td></tr><tr><td>Klatki domowe do trzymania podczas porażek</td><td>ogólny</td><td>---</td><td>15 (10 dla pokonanych zwierząt, 5 dla zwierząt kontrolnych) <silny>Rozmiar</mocny>: 29 x 19 x 13 cm</td></tr><tr><td>Przegrody z pleksi</td><td>ogólne</td><td>---</td><td>15 <mocny>Rozmiar</mocny>: Pasuje do klatki na mysz o wymiarach 29 x 19 x 13 cm</td></tr><tr><td>Stoper</td><td>ogólny</td><td>---</td><td>1</td></tr><tr><td>Kamera wideo</td><td>ogólny</td><td>---</td><td>1 <silny>Rozmiar</mocny>: >15 klatek na sekundę Kubek</td></tr><tr><td>druciany</td><td>ogólny</td><td>---</td><td>1 <mocny>Rozmiar</mocny>: średnica 10 cm, wysokość 15 cm</td></tr></tbody></table>

przewlekły stres związany z porażką społeczną u myszy we wczesnym okresie dorastania

Chronic Social Defeat Stress in Early Adolescent Male Mice

Przemoc fizyczna i trauma w dzieciństwie występują u 1 na 7 dzieci i stanowią główny czynnik ryzyka rozwoju chorób psychicznych, takich jak zespół stresu pourazowego (PTSD), w okresie dojrzewania i dorosłości. Charakterystyczne objawy behawioralne PTSD obejmują unikanie wskazówek i kontekstów związanych z traumą. Zdolność do modelowania długotrwałych zmian w mózgu spowodowanych traumą we wczesnym okresie życia ma kluczowe znaczenie dla określenia potencjalnych obwodów i celów molekularnych dla modulacji wynikających z nich objawów. Manuskrypt ten opisuje protokół modelowania fizycznej i psychicznej traumy we wczesnym okresie życia u dorastających samców myszy, która wywołuje zachowania unikające społecznie. Dorastające samce myszy są narażone na powtarzające się agresywne spotkania, po których następuje nocne trzymanie, co zapewnia dodatkowy wymiar stresu psychicznego, z dorosłym agresorem płci męskiej codziennie przez 10 dni. Powtarzające się porażki społeczne w połączeniu z nocnym zakwaterowaniem przez agresora we wczesnym okresie dojrzewania wytwarzają silne zachowania unikania społecznego, które utrzymują się przez całe dorosłe życie. Unikanie społeczne można łatwo określić ilościowo u wczesnej młodzieży, młodzieży i dorosłych za pomocą testów interakcji społecznych w otwartym terenie. Porażka społeczna we wczesnej młodości sprawia, że ponad 60% podatnych zwierząt jest w wieku dorosłym.

eaCSDS powoduje wyraźne zmniejszenie interakcji społecznych w teście OFSI u dużej liczby zwierząt (n = 50 zwierząt) (Rysunek 2A-C); zwierzęta poddane stresowi wykazują obniżone wartości zarówno dla współczynnika interakcji społecznych, jak i całkowitego czasu interakcji społecznych w porównaniu z grupą kontrolną we wszystkich badanych punktach czasowych. W badaniu przeprowadzonym 1 dzień po stresie, u adolescentów (~P40) obserwowano istotny spadek współczynnika interakcji społecznych oraz całkowitego czasu interakcji społecznych w stosunku do grupy kontrolnej, jednak nie stwierdzono istotnej różnicy w całkowitym czasie spędzonym z pustym kubkiem (kontrola: 65,48 ± 4,99 s, grupa stresowana: 67,75 ± 3,86 s; dwustronny nieparzysty test t, p = 0,72). To zmniejszenie interakcji społecznych i całkowitego czasu interakcji społecznych jest największe, gdy zwierzęta są badane 2 tygodnie po stresie w późnej adolescencji (~P54). Co ciekawe, w tym punkcie czasowym myszy poddane stresowi wykazują istotny wzrost całkowitego czasu spędzonego z pustym kubkiem, oprócz istotnego spadku wyniku interakcji społecznych i całkowitego czasu interakcji społecznych (kontrola: 51,58 ± 3,53 s, grupa stresowana: 68,62 ± 2,86 s; dwustronny nieparzysty test t, p = 0,0003).
Spadek interakcji społecznych i całkowitego czasu interakcji społecznych w badaniu przeprowadzonym 5 tygodni po porażce pozostaje wyraźny nawet w wieku dorosłym (~P70), jednak jak widać 24 h po porażce, nie ma istotnej różnicy w całkowitym czasie spędzonym z pustym kubkiem (52.83 ± 10.13, 53.15 ± 3.48; dwustronny nieparzysty test t, p = 0.97). W obrębie jednej kohorty może występować zmienność w proporcji podatności. Niemniej jednak, kohorty badane zgodnie z tym protokołem konsekwentnie wykazywały podatność w wieku dorosłym u 60% lub więcej zwierząt poddanych porażce. Dla odniesienia przedstawiono kohortę z wyższym odsetkiem zwierząt podatnych (90%) w wieku dorosłym (Rycina 2D-F) w porównaniu z kohortą z niższym odsetkiem zwierząt podatnych (71%) (Rycina 2G-I) w wieku dorosłym. Sumaryczne mapy ciepła z części interakcji społecznych testu OFSI przedstawiono dla 10 zwierząt kontrolnych i 10 zwierząt poddanych porażce po 24 h, 2 tygodniach i 5 tygodniach od porażki (Rycina 3), aby dostarczyć wizualnych przykładów tego, jak myszy poddane porażce konsekwentnie spędzają więcej czasu w narożnikach areny i mniej czasu w strefie interakcji.
<img alt="Wskaźniki i czasy interakcji społecznych dla grupy kontrolnej i grupy poddanej stresowi w różnych punktach czasowych po badaniu; wykresy analizy." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67113/67113fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rysunek 2: eaCSDS wywołuje silne unikanie społeczne w teście OFSI. (A-C) Wyniki SI (lewo) i surowe czasy interakcji społecznych (prawo) dla 46 samców z grupy kontrolnej i 50 samców z grupy poddanej stresowi (A) 1 dzień (~P40), (B) 2 tygodnie (~P54) i (C) 5 tygodni (~P70) po stresie. (D-F) Wyniki SI i surowe czasy interakcji społecznych dla przykładowej kohorty z wysokim odsetkiem (90%) zwierząt podatnych w wieku dorosłym (ustalonym na podstawie średniego wyniku SI dorosłych osobników poddanych stresowi) (n = 10 samców kontrolnych i 10 samców poddanych stresowi) (D) 1 dzień, (E) 2 tygodnie i (F) 5 tygodni po stresie. (G-I) Wyniki SI i surowe czasy interakcji społecznych dla przykładowej kohorty z niższym odsetkiem (71%) zwierząt podatnych w wieku dorosłym (ustalonym na podstawie średniego wyniku SI dorosłych osobników poddanych stresowi) (n = 10 samców kontrolnych i 14 samców poddanych stresowi) (G) 1 dzień, (H) 2 tygodnie i (I) 5 tygodni po stresie. Wszystkie porównania wykonano za pomocą nieparzystych obustronnych testów t. **, p &lt; 0.01; ***, p &lt; 0.001; ****, p &lt; 0.0001. Skróty: eaCSDS = wczesny adolescentalny przewlekły stres społeczny (early adolescent chronic social defeat stress); OFSI = interakcja społeczna w otwartym polu (open field social interaction); SI = interakcja społeczna (social interaction). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67113/67113fig02large.jpg" target="_blank">Aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku, kliknij tutaj.</a>
<img alt="Schemat mapy ciepła aktywności neuronalnej; warunki kontrolne i po klęsce w czasie; analiza behawioralna." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/67113/67113fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 3"> 
Rysunek 3: Mapy ciepła OFSI podczas interakcji społecznych u zwierząt z grupy kontrolnej i grupy po klęsce.Mapy ciepła z etapu interakcji społecznych testu OFSI (tj. gdy w kubku znajduje się nieagresywny samiec CFW) 24 h, 2 tygodnie i 5 tygodni po klęsce. Należy zauważyć, że każda mapa ciepła jest sumą dla 10 zwierząt (kontrola: n = 10 zwierząt, kolor szary; po klęsce: n = 10 zwierząt, kolor fioletowy). Niebieski symbol samca wskazuje położenie kubka z nieagresywnym samcem CFW wewnątrz. Białe koło wskazuje położenie strefy interakcji. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/67113/67113fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>

Ten protokół szczegółowo opisuje, jak przeprowadzić 10-dniowy przewlekły stres społeczny u wcześnie dorastających samców myszy, aby doprowadzić do długotrwałego unikania społecznego w wieku dorosłym u ponad 60% myszy.

Przewlekły stres związany z porażką społeczną u myszy we wczesnym okresie dorastania

Physical abuse and trauma in childhood is reported in as many as 1 in 7 children and is a major risk factor for the development of psychiatric diseases, ...

Nasze badania mają na celu zidentyfikowanie nieprawidłowości na poziomie obwodów wynikających z ekspozycji na traumę na różnych etapach rozwoju neurologicznego, opracowaliśmy model urazu fizycznego wczesnej młodości, aby lepiej zrozumieć wpływ traumy z dzieciństwa na funkcjonowanie mózgu osoby dorosłej. Specjaliści zajmujący się zdrowiem behawioralnym obserwują wzrost liczby pacjentów cierpiących z powodu trwałych skutków znęcania się w dzieciństwie. Jednak większość obecnych badań nad gryzoniami koncentruje się na narażeniu na traumę w wieku dorosłym lub wpływie zaniedbania przez niemowlęta.Żadna z tych rzeczy nie odnosi się bezpośrednio do wyjątkowych wyzwań obserwowanych u dorosłych, którzy w przeszłości byli maltretowani. Nasz protokół tworzy spójny fenotyp unikający u ponad dwóch trzecich pokonanych zwierząt w wieku dorosłym. Dodatkowo, wykorzystując młodsze samce bez doświadczenia hodowlanego trzymane z samicami, nasz protokół jest w stanie wyprodukować silnie agresywne samce CFW bez użycia dodatkowych dorosłych myszy B6 do podżegania do agresji, zwiększając łatwość i dokładne wdrożenie protokołu.Nasze badania przyczynią się do lepszego zrozumienia, w jaki sposób narażenie na traumę na różnych etapach rozwoju ma unikalny biologiczny, behawioralny i anatomiczny wpływ na mózg i, miejmy nadzieję, pomogą w rozwoju nowych technologii leczenia osób, które doświadczyły przemocy w dzieciństwie. Na początek połącz samce CFW z samicami CFW OVX na jeden tydzień, aby umożliwić doznania seksualne i zwiększyć agresję terytorialną u samca. Po tygodniu wyjmij samicę CFW OVX z klatki i umieść ją w czystej, pustej klatce.Następnie wprowadź bodziec samca C57 do klatki z samcem CFW na jedną minutę i zapisz opóźnienie ataku. Następnie usuń bodziec C 57 samca i umieść samicę CFW OVX z powrotem w klatce z samcem CFW przed powrotem do pomieszczenia socjalnego Grupuj samce CFW, które albo nie atakują, albo wykazują opóźnienie ataku większe niż 30 sekund przez dwa lub więcej dni. Użyj tych nieagresywnych samców CFW jako zwierząt bodźcowych podczas testów interakcji społecznych w otwartym polu.Kiedy dorastające samce C57 mają cztery tygodnie, zważ każde zwierzę i zapisz wagę. Podziel zwierzęta na dwie równe kohorty, kontroluj i pokonaj, upewniając się, że wagi między dwiema kohortami nie różnią się znacząco. Umieść jednego młodocianego C57 z grupy kontrolnej po jednej stronie przegrody z pleksiglasu, a drugiego nastolatka z grupy kontrolnej C57 po drugiej stronie przegrody.W domu 11 dnia, każdy nastolatek z grupy kontrolnej obok innego nastolatka z grupy kontrolnej z przegrodą z pleksiglasu między nimi do końca eksperymentu. Zważ i zapisz wagę młodocianego C57, który ma zostać pokonany. Rany o średnicy większej niż cztery milimetry, pokazane tutaj w skali, wymagają natychmiastowej eutanazji badanego zwierzęcia.Następnie wyjmij samicę CFW OVX z klatki z rezydującym samcem CFW i trzymaj ją z innymi samicami OVX. Następnie wprowadź dorastającego C 57 do klatki rezydenta samca CFW i uruchom stoper. Wyjmij nastolatka z klatki po 30 ugryzieniach lub pięciu minutach, w zależności od tego, co nastąpi wcześniej, i zapisz dane dotyczące ataku.Następnie umieść przegrodę z pleksiglasu na środku klatki męskiego rezydenta CFW, upewniając się, że mieszkaniec CFW jest po jednej stronie, a pokonany nastolatek po drugiej. Jedenastego dnia umieść pokonanych nastolatków obok innych pokonanych nastolatków z przegrodą z pleksiglasu między nimi na czas trwania eksperymentu. Przyzwyczaj się do kontrolnych i pokonanych zwierząt do pomieszczenia testowego na jedną godzinę.Nagrywaj wszystkie sesje za pomocą oprogramowania do śledzenia zwierząt. Umieść drucianą miseczkę przy lewej ścianie akrylowej areny o wymiarach 44 na 44 na 44 centymetry w środku ściany. Narysuj dwucentymetrową okrągłą strefę interakcji wokół kubka.Teraz umieść C 57 w rogu areny z pustym drucianym kubkiem na 150 sekund. Następnie usuń C 57 z areny i umieść go w czystej, pustej klatce. Umieść nieagresywnego, nieznanego dorosłego samca CFW w drucianym kubku i umieść drucianą miseczkę wewnątrz areny.Ponownie wprowadź C 57 na arenę z CFW zawierającym druciany kubek na 150 sekund. Po powrocie obu zwierząt do odpowiednich klatek, wyczyść arenę wodą i 70% etanolem, aby oczyścić wszelkie obszary z moczem lub kałem przed testem następnego C 57. Oblicz czas, w którym dowolny punkt ciała znajduje się w strefie interakcji zarówno dla sesji z pustym kubkiem, jak i sesji z kubkiem zawierającym CFW.Podziel czas spędzony w strefie interakcji z kubkiem zawierającym CFW przez czas spędzony w strefie interakcji z pustym kubkiem, aby uzyskać współczynnik interakcji społecznej. Wykonuj interakcję społeczną na otwartym polu w dowolnym momencie po 10-dniowym okresie porażki, w zależności od interesującego Cię okna rozwojowego. Pokonane zwierzęta wykazały znaczne zmniejszenie zarówno współczynnika interakcji społecznych, jak i surowego czasu interakcji społecznej w porównaniu z grupą kontrolną we wszystkich badanych punktach czasowych.Najbardziej wyraźne zmniejszenie współczynnika i czasu interakcji społecznych nastąpiło dwa tygodnie po porażce, przy czym pokonane zwierzęta wykazywały dłuższy czas spędzany z pustym kubkiem. Mapy cieplne potwierdziły, że pokonane myszy spędzały więcej czasu w rogach, a mniej w strefie interakcji we wszystkich punktach czasowych.

chronic-social-defeat-stress-in-early-adolescent-male-mice

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Tutaj opisano metody rozwoju mysiego modelu podchronicznego i łagodnego stresu związanego z porażką społeczną i wykorzystano je do zbadania patogennych cech depresji, w tym objawów podobnych do hiperfagii i polidypsji po wzroście masy ciała.

Mysi model podchronicznego i łagodnego stresu porażki społecznej w celu zrozumienia deficytów behawioralnych i fizjologicznych wywołanych stresem

Zadanie bariery labiryntu Y to test zachowania, który bada motywację do wydatkowania wysiłku na nagrodę. W tym miejscu omawiamy testowanie wielu dobrze zweryfikowanych przewlekłych stresorów, w tym przewlekłego kortykosteronu i stresu porażki społecznej z tym zachowaniem, a także nowego przewlekłego niedyskryminującego stresu porażki społecznej (CNSDS), który jest skuteczny u kobiet.

Przewlekły stres zmienia zachowania związane z wysiłkiem w zadaniu bariery Y-Maze u myszy

Test bezpieczeństwa społecznego pozwala na jednoczesną ocenę rozwoju unikania społecznego jako miary awersyjnego uczenia się warunkowego i zdolności do dyskryminacji w zakresie bezpieczeństwa społecznego, oba wykorzystywane do identyfikacji osób podatnych na stres i odpornych na stres w jednej grupie chronicznie społecznie pokonanych samców myszy.

Test bezpieczeństwa zagrożeń społecznych odkrywa fenotypy związane ze stresem psychospołecznym

Opracowaliśmy model przyspieszonego stresu związanego z porażką społeczną dla dorastających myszy C57BL/6, który działa zarówno u samców, jak i samic i umożliwia ekspozycję podczas dyskretnych okresów dojrzewania. Ekspozycja na ten model indukuje unikanie społeczne, ale tylko w podgrupie pokonanych samców i samic myszy.

Model stresu porażki społecznej dla dorastających samców i samic myszy C57BL/6

Ten artykuł opisuje wykorzystanie chronicznego stresu społecznego intruza jako etologicznie istotnego paradygmatu do modelowania depresji poporodowej i lęku u gryzoni w okresie laktacji.

Wykorzystanie przewlekłego stresu społecznego do modelowania depresji poporodowej u gryzoni w okresie laktacji

Ten protokół opisuje zmodyfikowaną tablicę do dołków, która jest zestawem testów behawioralnych, który zawiera cechy otwartego pola i tradycyjnej tablicy do dołków. Układ ten umożliwia analizę różnicową nieuwarunkowanych zachowań małych ssaków laboratoryjnych, a także analizę zdolności poznawczych.

Zmodyfikowana tablica z otworami - pomiar zachowania, funkcji poznawczych i interakcji społecznych u myszy i szczurów

Ten artykuł opisuje nowy protokół ilościowego pomiaru motywacji społecznej u myszy za pomocą warunkowania instrumentalnego dla nagrody społecznej. Protokół jest przydatny do pomiaru motywacji społecznej w mysich modelach autyzmu i innych zaburzeń zachowań społecznych.

Kwantyfikacja motywacji społecznej u myszy za pomocą warunkowania instrumentalnego

Poprzednie badania nad społecznym wymiarem stresu koncentrowały się na dwóch ważnych zmiennych: tożsamości społecznej i wsparciu społecznym. Protokół ten wprowadza skuteczną eksperymentalną manipulację tymi dwoma zmiennymi społecznymi i opisuje ich implementację w standardowym paradygmacie indukcji stresu (Trier Social Stress Test).

Społeczny wymiar stresu: eksperymentalne manipulacje wsparciem społecznym i tożsamością społeczną w teście stresu społecznego w Trewirze

Procedura imitacji wywołanej została ustanowiona w celu zbadania rozwoju pamięci pamięciowej w niemowlęctwie i wczesnym dzieciństwie. Procedura ta jest szeroko stosowana w celu ustanowienia solidnych podstaw natury pamięci przywoławczej w niemowlęctwie i wczesnym dzieciństwie.

Badanie pamięci przywoławczej w niemowlęctwie i wczesnym dzieciństwie przy użyciu paradygmatu wywołanego naśladownictwa

Tutaj prezentujemy nieprzewidywalny protokół chronicznego łagodnego stresu u myszy. Protokół ten indukuje długoterminowy fenotyp podobny do depresji i umożliwia ocenę skuteczności przypuszczalnych leków przeciwdepresyjnych w odwracaniu behawioralnych i neuromolekularnych deficytów depresyjnych.

Nieprzewidywalny protokół przewlekłego łagodnego stresu do wywoływania anhedonii u myszy

Poznaj model przewlekłego stresu związanego z porażką społeczną u młodych myszy samców. Ta metoda pozwala badać długotrwałe skutki traumy z dzieciństwa na funkcjonowanie mózgu dorosłych osobników.

Przewlekły stres związany z porażką społeczną u myszy we wczesnym okresie dorastania

Przeglądaj więcej filmów